27 de Noviembre QFB. María del Rosario Vázquez Larios

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Texto completo

(1)

QFB. María del Rosario Vázquez Larios

1

er

Encuentro de Innovación en el Laboratorio Clínico.

27 de Noviembre 2015

“Fortaleciendo las competencias

del Laboratorio Clínico”

(2)

Baron, E.J. Cumitech 1C Blood

Cultures. IV. ASM Press.

Washington, DC .2005

CLSI. Principles and Procedures

for Blood Cultures; Approved

Guideline. M47-A.Wayne PA.

2007

(3)

Practice of quality assurance in laboratory medicine in developing countries. In Health laboratory services in support of primary health care in developing countries. World Health Organization, New Delhi, 1994:77-137.

OMS

(5 correctos)

PACIENTE

CORRECTO

(MISP1)

MUESTRA

CORRECTA

RESULTADO

CORRECTO

TIEMPO CORRECTO

OPORTUNO

INTERPRETACION

CORRECTA

(4)

ETAPA

ACTIVIDADES

Pre-pre analítica

Selección del examen para diagnóstico

Solicitud del examen DATOS

Pre – analítica

Identificación del paciente (MISP1)

Preparación del paciente

Toma de muestra

Identificación de la muestra

Transporte de la muestra

Analítica

Siembra de la muestra

Selección de medios de cultivo

Condiciones generales de incubación

Pruebas de identificación

Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana

Post- analítica

Transcripción del resultado

Validación del resultado

Post- post analítica

Acciones terapéuticas realizadas

Tiempo de respuesta

(5)

TOMA DE MUESTRA

Realizar higiene de manos.

• Verificar la identificación del paciente. MISP 1

• Cotejar con la solicitud del estudio.

Insumos necesarios

• Jeringas

• Frascos previamente identificados.

• Remover tapas de las botellas.

• Frotar el tapón de goma con alcohol al 70%

• Colocarse los guantes , cubrebocas y goggles .

• Aplicar el torniquete.

• Preparar el sitio de piel a puncionar.

(6)

TOMA DE MUESTRA

Alcohol isopropilico durante 30

segundos

Solución yodada durante 1 minutos *.

Cubrir un área circular de 2-4 cm

(sitio de punción hacia afuera).

Inocular la cantidad establecida en las

botellas y mezclar

**

.

•Pacientes alérgicos realizar dos limpiezas con alcohol

isopropílico.

** No se recomienda el cambio de aguja

(7)

MUESTRA

COLECCIÓN

NÚMERO DE

HEMOCULTIVOS

VOLUMEN

Dilución sangre /

medio de

cultivo.1:10.

Efectuar la toma en

condiciones de asepsia.

En

paciente

febril

tomarlos sin fiebre.

El mejor momento es en

escalofrío.

Niños ( > 10 UFC/ml ) 1 a 5 mL

Adultos ( < 10 UFC/ml ) 10 mL

CLSI. Principles and Procedures for Blood Cultures; Approved Guideline. M47-A.Wayne PA. 2007

 1 set de hemocultivos/24 horas)

 Aerobio, anaerobia.

 Aerobias

 Bacteriemia/catéter (periférica,

catéter)

(8)

MICROORGANISMOS

GRAMNEGATIVO

Escherichia coli

Klebsiella

Enterobacter

Pseudomonas

Salmonella

GRAMPOSITIVO

Staphylococcus

aureus.

E.C.N.

Esptreptococos

grupo viridans.

Enterococos.

Pneumococo

GRAMPOSITIVO

CONTAMINANTE

?

Bacillus

Corynebacterium

Propionabacterium

ECN

FASTIDIOSOS

Brucella.

Campylobacter

Estreptococos

deficientes.

HACEK.

LEVADURAS

HONGOS

(9)

MEDIOS DE CULTIVO.

Caldo de soya

tripticaseína.

Caldo infusión

cerebro corazón.

Caldo de tioglicolato.

Caldo de Brucella

Caldo Columbia

Aditivos:

Anticoagulante (PSS).

Resinas.

Carbón activado

Suplementos:

Extracto de levadura.

Vitaminas.

Aminoácidos.

Amortiguadores.

Coenzimas.

Sacarosa.

(10)

MEDIOS

DE

CULTIVO

pH

ESTERILIDAD

FUNCIONALIDAD

(11)

CULTIVO POSITIVO A LAS 48 (72 HORAS)

5 a 30 UFC/frasco

0.5 ML DE LA SUSPENSIÓN (50 UFC/mL)

DILUCIÓN 1/100, 1/100,1/100 (100 UFC/mL)

SUSPENSIÓN ESCALA 0.5 MC FARLAND

CULTIVO DE 24 HORAS

FUNCIONALIDAD

Baron, E.J. Cumitech 1C Blood Cultures. IV. ASM Press. Washington, DC 2000 Bactec 9000 Seeded Blood .Culture Preparation Bactec 9000 Validation Protocol.

(12)
(13)

CEPAS CONTROL

 MEDIO AEROBIO

• Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 *

• Streptococcus pyogenes ATCC 19615

• Staphylococcus aureus ATCC 25923

• Escherichia coli ATCC 25922

• Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853

• Alcaligenes faecalis ATCC 8750

• Neisseria meningitidis ATCC 13090

• Haemophilus influenzae ATCC 19418

• Candida glabrata ATCC 66032

* CLSI

CLSI. Quality Control for Commercially Prepared Microbiological Cultue Media. M22A3. Wayne PA. 2004 BD Bactec Plus Aerobic/F* Plus Anaerobic/F* Frascos de cultivo.

(14)

MÉTODOS

MANUALES

(15)

ECONÓMICO:

LABORATORIO.

- Disminución de

las horas/hombre, disminución de los costos

del material de resiembra, disminución del

riesgo de cortapunzantes,

HOSPITAL

una

disminución de los días de uso de antibióticos

de amplio espectro (más caros y con mayor

toxicidad) y también una disminución de los

días/cama.

CLÍNICO:

Disminución del tiempo de

respuesta y un aumento de la sensibilidad de

los hemocultivos. Esto permite mejorar la

capacidad diagnóstica en bacteriemias y un

uso

más

racional

de

la

terapia

antimicrobiana

MICROBIOLÓGICO:

Disminución de la carga de

trabajo con posibilidades de procesar grandes

volúmenes de muestras, una disminución de la

contaminación cruzada por técnicas de

detección no invasivas y un aumento del

espectro de microorganismos que se detectan

por estos sistemas.

EPIDEMIOLÓGICO

:

El

soporte

computacional que poseen estos sistemas

permiten obtener listados de positividad

por

pacientes,

por

muestra,

por

microorganismo, conocer el rendimiento (%

de positividad) y la contaminación de los

hemocultivos. lo que constituyen gran

aporte en el control de las bacteriemias

intrahospitalarias.

(16)

SUBCULTIVO CON MÉTODO

CONVENCIONAL

Resembrar a ciegas /12, 18 y 72

horas y 7 días de incubación

INCUBAR

48 HORAS

(17)

HEMOCULTIVOS

POSITIVOS

TINCION GRAM

SUBCULTIVO

ID/SUSCEPTIBILIDAD

PRELIMINAR

ID/ SUSCEPTIBILIDAD FINAL.

POSITIVO

(18)

HEMOCULTIVOS NEGATIVOS

NEGATIVO /

7 ó 14 dias

Subcultivo

INCUBAR

48 HORAS

VERDADERO NEGATIVO

FALSO NEGATIVO

POSITIVO

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• Sin desarrollo por cinco días o por el tiempo de

incubación establecido.

Si las botellas permanecen

negativas

• Una de las muestras positiva con un microorganismo

habitual de la piel o contaminante. Contacte al

laboratorio si requiere más información.

Cuando una de las dos muestras o una muestra única desarrolla ECN,

Bacillus, Corinebacterias,

Micrococcus o Streptococcus.

• Realizar identificación y estudio de sensibilidad de ambos aislamientos.

• Si son la misma especie con idéntico perfil de sensibilidad, se considera bacteriemia real.

La presencia de estos microorganismos en las dos

muestras

• Se reportan como causantes de bacteriemia real estén en una o en las dos muestras extraídas.

• Realizar identificación y estudio de sensibilidad de ambos aislamientos.

La presencia de otros

microorganismos diferentes a los anteriores.

• Si la muestra extraída por el catéter es positiva por lo menos dos horas antes que la muestra extraída por vena periférica.

• Se considera bacteriemia relacionada a catéter.

Hemocultivos diferenciales. (catéter y vena periférica)

REPORTE DE RESULTADOS

Bazet, Seija. Procesamiento de muestras bacteriológicas para diagnóstico de las principales infecciones asociadas a los cuida dos de salud. Infecciones hospitalarias y resistencia antimicrobiana. 2014

(20)

Informar inmediatamente al

médico por vía telefónica al médico

responsable del paciente.

Informar la morfología de los

microorganismos, el resultado de la

tinción de Gram, el número de

hemocultivos

positivos

con

referencia al total de los extraídos y

la fecha de obtención de los

mismos

(referir

catéter

o

periférico)

Registrar el día, hora y el nombre

de la persona que emite y recibe el

informe.

HEMOCULTIVOS POSITIVOS

“VALOR ALERTA”

Meta 2. Estándares del Consejo de Salubridad General. 2012

Meta 2. Comunicación efectiva

(21)

SISTEMAS AUTOMATIZADOS

INSTRUMENTO

MEDIOS CULTIVO

(22)

Sistema Subcultivo/tinción Interpretación

+

+

Verdadero positivo

+

-

Falso positivo

-

+

Falso negativo

-

-

Verdadero negativo

(23)

LEUCOCITOS

GLUCOSA

pCO

2

FALSOS POSITIVOS

<2.0 %

TECNICA

ANTISEPTICOS

(24)

ERRORES

Mayores

(--, --)

Menores

(+, --)

FALSOS NEGATIVOS

< 0.5 %

Pseudomonas

Candida

M. ALFA,1,2* S..Continuous Quality Improvement for Introduction of Autmated Blood Culture Instrument Journal Of Clinical Microbiology, May 1995, p. 1185– 1191 Vol. 33, No. 5 1 10 1 2 3 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 48 Tiempo en horas U F C / m L

(25)

CAUSAS FRECUENTES

DE CONTAMINACIÓN

DE LOS

HEMOCULTIVOS.

3%.

Mala

desinfección de

la piel en el sitio

de toma de

muestra.

Uso de

antisépticos

contaminados.

Uso de medios

de cultivo

contaminados

.

Procesos

invasivos del

subcultivo

inadecuado

.

(26)

• Cumplimiento tiempos de traslado.

• % de contaminación de los hemocultivos de sangre periférica (SP). • % de botellas de hemocultivo con volumen adecuado de sangre. • % de contaminación de los hemocultivos de sangre periférica (SP) • % de número de botellas por paciente.

Etapa

pre-analítica

• % de concordancia del gram del hemocultivo con la identificación

final en el cultivo.

Etapa

analítica

• % cumplimiento de plazos de entrega de resultados de exámenes. • % informes corregidos.

• % de aviso de valores de alerta (VA) almédico tratante antes del tiempo establecido • % Falsos positivos • % Falsos negativos

Etapa

post-

analítica

G.AD. Implementación de 9 indicadores de calidad en un laboratorio hospitalario. Rev Med Chile 2011; 139: 205-214 CLSI. Principles and Procedures for Blood Cultures; Approved Guideline. M47-A.Wayne PA. 2007.

(27)

PORCENTAJE DE

HEMOCULTIVOS

POSITIVOS

Tabular y analizar los

datos de

hemocultivos

positivos.

Tiempo de

detección

.

Microorganismos

aislados.

(28)

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Referencias

  1. nnovación en el
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