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Wirkung von Antiaminosauren auf Trichomonas vaginalis

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Academic year: 2020

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(1)Rev. Biol. Trop.,. 21(2):. 187·19�,. 1974. Wirkung von Antiaminosauren auf Trichomonas vaginalis .. YOn. Chr. P. Christow· (eingegangen arn i. Marz, 1973). ABsTRAer: f3. indolilacrylic .cid in concentrations above 0.15 rng/rnl .nd styrylacetic acid above O 20 rng/ml inhibit reproduction of T,jehomon... �}ilginaliJ. The inconsistent appearance of the round forms of trichomonads may indicate that they are p rimi tive fonns Ihat have. lost their biological. significan« in phylogenetic development.. In der Metabolitenforsehung ist auf die Bedeutung der Aminosauren ai3 Bestandteile von Wuehsstoffen oder als deren Antagonisten hingewiesen worden. Diesen Ausf.ührungen konnte bereits entnornmen werden, dass verschiedene Eiwcissbausteine zu den lebensnotwendigen Elementen der Mikroorganismen gehóren. Eingeleitet wurde dieses Teilgebiet der Metabolitenforsehung dureh die Beobaehtung von ORLA·JENSEN und KUHN (5), dass Mikroorganismen zum optimalen Waehstum keine hochmolekularen E iw ei sskórper fordeen, sondeen dass sie sieh' bei Anwesenheit eines Aminosauregemisches aben so gut entwickeln, sofeen geeignete Katalysatoren in G estalt von 'Wuehsstoffen vitaminartiger NatuI sugegeben sind. ORLA·JENSEN und KUHN (5), die ibre Versuche mit den anspruchsv�llen Milc hsa ur ebak te rien durehführten, konnten ferner zeigen, dass das Bedürfnis naeh Aminosauren bei den einzelnen Arten recht grosse Sehwan· kungen únterworfen ist und dass es M;ikroorganismen gibt, die in dieser Beziehung sehr anspruehsvoll sind. Andererseits konnten FILDES und KNIGHT (4) sehon recht früh den Beweis crbringen, dass sieh gewisse aerobiotisehe Kulturen von Staphylokokken züehten lassen, die ihren ursprüngliehen Aminosaurebedarf naeh ' und naeh einsehranken, sieh zur Synthese dec Eiweissbausteine "erziehen" lassen und sehliesslich mit Ammoniak als alleiniger Stickstoffquelle wachsen. •. .. Bézirk,iiautklinik Pieven, Bulgarie�.. Gegenwartige Adres,e:. Fachhochschule. . heim, 32' Hildesheirri.Ochtersum; Konrad Adenauer Str. 9. 1lerlin.. Hildes­.

(2) RI·.VI�·"A. IH:.. IIH)I.V<,III. 11(111'1<...111.. Von hesonderCIll Intcrcssc ist dt:r Antagonismus. J('r sich zwist'hen na· tiirlichcll Aminos�men. zeigt, und. Antil11ct:tboliten an,ecschen. die. werdeo. als stnll,t11r:ihnlich('. So. k6nncll.. 1St l.B.. Metabotiten ,. cinc. b,w.. konkurricrendc. \Virkuo,!.! zwischcn G!)'zin u!1d Alanin , L)'sin und Arginin, Serin und Threonin 1)(:kanlll. sehen. In weiteren hat FILDt;S (3) cinc sokhc konkurr.icrendc \Y/i rkung ¿wi­. Tryptoph:t n. ,�cfundcn.. lIild. ( struktudihnliehc. f3-Indolilacrylsaure. V{'rbindung). Als typischc Antagonisten des Tryptophan s sind ausscrdclll die ¡sote fe. p-Napht}'lacrj'ls;\ure und die Styrylessigsaure anzusehcn. In der \"orlíegenden Arbeit habeo wir versucnt die BeziehungclI zwischen p. 1 ndlllil acrylsau rc.. '1' ryptophan.Anta¡;onistcn. Styrylessigsa urc 1I11d. '['/"it-bommlrlJ. /IJgill.¡/is ll:tchzl1weisen. Zm Anal)'sicrun,!.! Jer Bü iehungen zwischen den Tr}'ptophan.Antagonis·. unserer. ten und Triehomnnadc:n haben wir cinc: Mc:thodc an,gewtndet, die nach Erfahru ng cine :lusreichcnde Aussagekraft fiihrliche Uesehrcibung der Methodik).. besitzt (CI-IRISTOW.. wurden. 100 mi. füe. Antimetaboliten·Konzcntration. 100 mI. Medium. abgenommen und. stel l ten. (et\\'a. :';0. min ) .. der. mit. \'crteilten wir die Losung auf Rohrchen, die. C). (37. alIS­. Vom gesamten vorbereiteten Niihr­. Kontrolleohrchen. stanzqllantit�t (van 0,0 l bis 6,0 mg/m l ) veesc-1len. schung. j uch. Verwendct \Vurdc cin flüssiger Niihr·. JIlcdium n;lCh Fcinberg und Whittiogton. medium. 1 dort. Danaeh. für. jede. entsprcchendea. Sub­. Nach gründlicher Durchmi·. ", ir. dann in den Brutschrank. ",urden. CID. Kontroll-. SQWIC. Vcrsucl!srührehtn wr gltichcn Zeit mit ciller gut \'crll1chrl<:n T richom()n�skult u[ jcdes St:lnll\le� bcimpt't llnd ",ie d er bei Rohrchcn wurde sehon nach 2·1. ,uründlieher leichte Fi xierull ,l!. nach im. HeI[(cld. wurd<:n ;l "¡l". bei. bei. Durcbmisehun,g. 37 e b eb r l'¡le t (2-1 Std). Von aUen. 1 Trapf en. entnommen. (0,01. mI). des Bodensat2es. rnikroskopisch. und. ( Deckgla s,. falls Doti;.:, bei starker Vermeh run,g L..ahlkamrncc naeh stark. ab,�ebJendetcn. 2')0 f:tchcr. lfU¡;: (100----);. Std. die. Konclensor. Verwosserullg. durchsehnittliehe. untcrsucht.. :lllsgezahlt. (von. 20. ,. a bhiingij.:. ist.. Protozoen. pro. Gcsirhtsftldcrn). (d/:n�7:" wurde mil cinclll Umn:ehnungsfaktor multipliziat,. des Gesiehtsfeldes "J". Die. Zellcnzahl. Metz) Cln:¡. =. Zellzahl. der vom Durehmcsser. Zur Kontrolte des mikroskopisehen Ablcse·. ergcbnisscs \\'ufckn bei H ell1 l1l wirk ung vom letztt'n positiven L1nd <:rstcn negativen Ud und cinc: Subkultur angclegt.. Die Ablc.mngen erlolgtw einm:l!. t:iglich bis. :r.urn Absterb cn Jer VcrslIchskultuf.. ERGEBNISSE Die mit ¡J-Indolilacr)'lsaure clurchgdlihrten Expt.rimenre Illcnde \\firkullp. als Funktion etc Konzentrationsreihe.. ('rgaben. eint hem­. In Konzentrationen von. U,O 1 bis 0,1 () mg/ml b ewegt sieh die Vennehrung oooh Un Rahmcn dec Kontcoll­ kulturen.. 1m. Bereich von 0,15 bis 6,0 mgJml recluziert sieh. die. Trichomona,..

(3) (I-IRISTorfl:. \XIIRKUN(; VON ANTIAMINOSAUREN AUF TRICHOMONAS VAGINALI$. I R9. Sehan bei Konzentrationen von 4,0 und 5,0 rngjml wurden 1), die sieh von den absterbenden Zcllen wcsentlich unterscheiden (Abb. 2). Die rnit ciner Mem·. Population stark.. besonderc morphologisehc Abrundungcn bemerkbar (Abb. bran umhiilltcn Gebildc erschiencn unregelmassig. gut gewaehsen (Abb.. 3).. Die. Die Kontrollkullturen waren. Bewertung der Záhlwerte sind an der Tabelle. 1. anJ.;cbmcht. Die Ergebnisse mit Styrylessigsaure sind in der Tabelle 2 llnd Abb. 5 dargestellt .. Ab Konzentcation 0,20 rngjrnI wurde cine Abschwachung dce Tri·. chomonadenvecmehrung cinclcutlg. In den Trichomonadenkulturen unter 5,0 rng jmI Zusatz von Styeylcssig. siiure wurden einzelnen Rundgebilden beobachtet, die sich ebenfal1s von. den. abstcrbenden Trichomonaszellcn unterscheiden (Abb. 4).. TABELLE 1 nra(hSlllm. "on. Trichomonas vaginalis (Slamm To/lsdor'·) Zusalz von {3-lndolila(,ylIallr,. IInle,. Tage. Konzenteation. 2. mg/rnl. ± 1. -J. 4. ). 6. 7. 8. 9 10 11 12 13 I4 15 16 17. 0,01. ) 13 62 48 41 27 17 1) 12 11. 9. 6. ). ). 0,10. 4 12 61 47 40 25 1) ,4 10. 9. 7. ). ,. 2. 0.15. 3 10 14 47 41 20 12 ID. 9. 7. ). 4. 3. 0,30. 2. R 46 39 30 16 10. 7. 4. 3. 2. 2. 0.80. 2. 6 12. 8. 6. 3. 2. 3. 2. 2.00. J. 8. 4. 4,00. 2. 4. 2. 6.00 Konlrollc-. 3. 1. 2. 1 1. --. -. ,. ----. --. ----. -. 1----------. -------------_.. ) 1 J 6, )0 42 27 17 16 13 10. 8. 6. 6. ·1. ,. 2. Die 7...dhlcn geben die Du!(hschnittswerte Jee in den mikroskopischcn Ge;;i<:htsfeldern ausgeziihltcn Trichomonaden in c:incr Mcngeneinheit an,. Die Zahlen der Versuchsserien. bringcn cincn quantitati\'en Vt:rglcidl zu der zahlenm¡¡ssig ausg<."wcrtct6'll iK:ontrolle.. Die. andercn St¡immcn \'cehicltcn sich sehe ahnlich wle Stamm ToIksdorf, deswegeo haben ""ir die An�aben nur für den Stamm Tolksdorf g{-bracht. ± 1-3 variations-statistist:he Strcubrcitc. :lUS. ± 3, 4. und 5 Tag ± 2. 6·10 T:lg ± 1).. 20. Feldern. (1. und 2. Tag ± 1, 3. Tag.

(4) REV]"TA. 190. DE. HfOLUGIA TROPICAL. TABELLE 2 cffJjiuJJ. ¡ 01l. SIJf')l'eJJigsaure dUj. Tri(homonas 'Vaginal!.'!. (Stamm Bergit * ). Konzcntration. Tage. mg/rnl. 2. 4. �. 6. 7. ,. 9 1 0 I I 1 2 13 14 D 16 1 7. ±. 0,01. � 1 2 62 45 39 26 1 6 1 � 1 2. 9. 8. 6. 4. 1 . l. 0.20. 4 1 0 �5 39 37 24 14 I l 10. 9. �. 3. 2. 0,60. 4. 9 50 36 2 1. 6. 3. 2. 0,80. 4. 7 46 32 1 7 1 4 l a. 8. 4. 2. 2. 1,00. 3. 7 39 28 1 2 I I. 8. 8. 5. 4. 2. J,OO. 3. 6 30 20. 8. 6. 4. 4. 2. 2. 6. 4. 3. 2. -too. J. Kont ro l1e. 9. 1 7 1 2 10. 7. 4. 3. - - - - - - - -. - - - - - - - - -. - - - - - - - - - - -. 2. (,.00. •. 3. � 12 64 47 4 1 30 1 9 16 1 3 10. 8. 7. �. 4. 3. 2. Die Zahk-n beJt:'uten die AnzJ.hl von Trichomonas7.t·llen in einer Mengcneinheit.. Stamme Nussbaum,. A lexandcr. sich st"hr ihnlich wjc:: Stamm. Starnm Bergi! gcbracht.. Tolksdorf,. $chusster. Wenzel. lInd Re,gina. Di�. verhielten. Bergit, deswegen habeo wir die Angaben nur für den. DISKUSSION In. unsercn. Trichomonaden im. (rüheren. Untersuchungen mit Tryptophan. wuchsen. die. Bercich der Kontrollkulturcn; erst bei hohen Konzentrationen. \Var cine schwachhemmendc: Bccinflussung bemerkbar ( 1 ) ; cine weitgehend gün­ stigerc \X1irkung auf die Poplllation van. Trie!Jomo"tfJ "¡Iaginalis zcigte die Glu­. taminsaure. In utlsercn Untersllchllngen hat sich der biologische. ell1er bestimmten Form manifestiert.. Antagonismus. in. D i e Tryptophan-Antagonisten erschienen. als ungünstige Faktoren fLir die Trichomol1adencntwicklung; ' cine 11ernmwirkung allf die Trichomonaden war c indelltig nachgcw icscn.. Die Moglichkeit, dass. timmte Aminos:ülre-Antagonisten flir manche Mikroorganismen bzw. als Hemmfaktor wirken,. ware von besonclerem Interesse.. bes­. Protozoen. Die Dialektik von. Metabolitcn und Antimctaboliten konnte in den widerspruchlichen Beziehungen von Makro- und Mikroorganismus eine entscheidende Rolle. erhalten.. Uosere bisherigen Ergebnisse mit Trichomonaden spornen den Fortgang dieser UntcrslldlUngen :111ch mit anderen Antagoni6tan. :tll.. llll$. bekannten Aminos;iuren und ihre.

(5) CflR1STOJP:. 1. 9 1. VAG'!NAL1S. \,iIRKUt\.'G VO� AKTl¡\ MINOSAUREN Aur TRICI-rQi\IOKAS. ZUSAMMENFASSUNG ¡3.JndolilacryIsaure hat in unseren Experimenten einen hemmenden Ein­. 0,l5. fluss (ab. tJttgif)t¡/ú.. mg/ml) al/f die Vermehrung von T¡-j(/.¡omOJidJ. Styryle�"'SigsaLlre. hcmmtc ¡lb. 0,20. mg/ml. das. TrichomonadenW;lchstum.. Da die Tricholl1onasruncifurmen in Ullsercn Experimenten unrcgdmi¡ssig crschie­ nen, handelt es sich viellcicht um Rudimente f rüherer biologisdlcn Stadien, die in dee phylogenetisch<"n Entwicklung ihren biologischen Sinn verloren. haben.. RESUMEN El ácido ¡3 indolilacríJico en concentraciones superiores a 0. 1 5 ejerce una acción inhibidora sobre la reproducción de 'f'r;r!JomoJ/(1J estirilacético a partir de una cOllcentración de Dado. (lue. en nuestras experiencias. 0.20. mg/ml. 1/(lgillaliJ;. el. mg/m!.. las formas reJondas de tricomonas. aparecen inconstantemente, es posible (lue se trate de formas primitivas que hall perdido su sentido biológico en el Jesarrollo filogenético.. LITERAruR 1.. CHRIS1'O\\;" P. C.. Experimente übef den Einfluss \'00 j'\{etahoJiten und Antimet¡\ho!iten am Modcll TrichollJol/.lJ /'.tgifl.diJ. 1. Miuc:ilung. Zbl. JJ:!l,I .. 1 Ah/. Or<l!.. 2 1 7 :. 1972.. 381-402. 2.. CHIUS1'OW, 1972.. P. C.. X. Mitteilllng .. Vcrsuch mit ¡\mino�¡iurCl1.. Zbl. lJ.lkt.,. 1. Ab/., Or:,., 2 1 9 :. 390-393. 3.. FILDES, P. 1941.. 4.. Tryptophan anlagoni=-ts.. /3ril.. f. E:\:/,. P{(/hol., · 22:. 293-30 1 .. FII.DeS, P., & ]. KNIGlIT. National approach lo rtscarrh in chernolberapy.. 1936.. Brit. f. Ex!,. P,rthol.,. 17:. 481-490. 5.. ORL..... JENSEN, ]., & H . KUI-li': •. 1936.. MilchsiiU!c-bakterien.. ,lIb.,. 6: 9- 1 9 .. KOlIgel. D(/IIi!u Vidn:Jk.. S�hk.. ¡\I,l/lln'Ífelllk. AI(//h..

(6) Abb.. ,B-IndoliJacryl­. 1.. Tl·icbomonauundgebilde. in KultUf von. 2.. Absterbende Trichomonaszelle, Stamm Regina,. 3.. KontroUkultur van TrichomOlldJ v(lgú¡alis, Stamm Re­. sauce, Stamm Regina, nati"'e Mikroskopie, Vergr. 600 fach.. Abb. Abb. abb.. 4.. n;\tivc. Mikroskopie. Vergr . �OO bch.. gina, native Mikroskopic, Yergo 350 fach.. Besondere Rundformen in Kultur mÍt Styrylessigsaure, Stamm \Venzel, Yergo 600 furh, native Mikroskopie..

(7) 4.

(8) Abb.. 5.. Wickung von Stycylessigsaucc auf Trühomonas lIa¡:i­ "aJú..

(9) •. Anzahl. 0 0 , 20 mg/ml. 70. 0. 50. •. .. _. ". 30. .. •. /. / -" 0. """". \. \ O"'". "" " 0, _ ::::: 0 '-. -4:�-�/ "" 1. 2. 0. " ........ •. 3. .-. 4. 4 , 00 mg/ml. .. 0_. 40. 10. " 1 , 00 mg/ml. \,,-. 60. 20. Kontrolle. .. 5. ". - .-. 6. 7. 5. _. 0_. 0- 0 OO_O 0 -0 -O. � ,, _ 0_0 AA _ .6. __ _A 0 0_. 8 Tage. 9. °-. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16.

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Abb.  1 .   Tl·icbomonauundgebilde.  in  KultUf  von  ,B -IndoliJacryl­

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