REVISTA CUBANA DE PLANTAS MEDICINALES DIRECTOR SECRETARIA COMITE DE REDACCION ASESORES

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REVISTA CUBANA DE PLANTAS MEDICINALES

DIRECTOR

Dr. Francisco Morón Rodríguez

SECRETARIA

Lic. Iraida Rodríguez Luis

COMITE DE REDACCION

Dr. Mario González-Quevedo Rodríguez Dra. Migdalia Miranda Martínez

Dr. Víctor Fuentes Fiallo

Dra. Irma Castro Méndez Dr. Juan A. Furones Mourelle Dra. Juana Trillán Capó

ASESORES

Dra. Teresa Guerrero Rodríguez Dra. Teresita Zambrana

Ing. Nilo Domínguez Lic. Aida Corral Salvadó Lic. Rosa Menéndez Castillo Lic. Benito Soler Cardoso Lic. Gladys Menéndez Jorrín

Lic. Humberto López Pellón Lic. Alicia Alvarez Avalos Lic. Alexis Vidal Novoa Dra. Gloria Raidorodsky Dr. Alfredo Céspedes Varcálcel Lic. Marlene Porto

La Revista Cubana de Plantas Medicinales es una publicación cuatrimestral con artículos e información científicos actualizados acerca del Plan de Desarrollo Nacional de Investigaciones de Plantas Medicinales y el uso que la población hace de éstas. Es el órgano oficial de la Comisión Nacional Asesora en Investigaciones de Plantas Medicinales del MINSAP. Forma to electrónico: Portable Document

Format (PDF) procesado en Adobe Acrobat 2.1.

Admitimos contribuciones de profesionales cubanos y extranjeros. Los originales deben se r remitidos según las Instrucciones al autor. Los trabajos serán inéditos. Solicitamos y agradecemos el canje con publicaciones simila res y otras.

EDICION: Nancy Cheping Sánchez. PROCESAMIENTO INFORMATICO: Elia Abreu Hernández y Soledad Díaz del Campo. TRADUCCION: Edgardo Fundora Lima. DISEÑO: Luciano O. Sánchez Núñez. PROCESAMIENTO ELECTRONICO: Juana María Pérez Mariño.

Toda la información debe dirigirse a: ECIMED

Editorial Ciencias Médicas

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Email:cnicm@infomed.sld.cu y cusy@infomed.sld.cu Fax: (537) 33 3063. Télex: 0511202

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CONTENIDO EDITORIAL / 2

ARTICULOS ORIGINALES

Ausencia de efectos antiinflamatorio y analgésico del extracto fluido de Cymbopogon citratus al 30 % por vía oral / 3

Francisco Morón Rodríguez, Juan Antonio Furones Mourelle y Zulima Pinedo Gutiérrez

Actividad anticonvulsivante (antiepiléptica) del extracto fluido de Indigofera suffruticosa (añil cimarrón) / 7

José L. Pérez de Alejo, Roberto Miranda y Gilda Rodríguez

Sobre la germinación de Stephania rotunda Lour. / 11 Víctor R. Fuentes Fiallo, Narciso N. Rodríguez Medina y Carlos A. Rodríguez Ferradá

Acción analgésica de un extracto acuoso liofilizado de Aloe vera L. en ratones / 15

Juan Antonio Furones Mourelle, Francisco Morón Rodríguez y Zulima Pinedo Gutiérrez

Evaluación genotóxica de un extracto acuoso de Aloe vera L. / 18

Alberto Ramos Ruiz, Aymee Edreira Armenteros, Aida Villaescusa González, Angel Vizoso Parra y María Julia Martínez

Toxicología subcrónica bucal del extracto fluido de Plantago lanceolata L. / 24

Talía Romay Penabad, María del Carmen Sotolongo Baró, Caridad Sebazco Pernas y María E. Perdomo Paiba

Efecto antioxidante de los extractos fluido y de flavonoides del Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng. (orégano francés) / 27

Jorge Daniel García Salmán, Teidy Eloisa García Jiménez, Rosa Menéndez Castillo y María Teresa Buznego Rodríguez

La germinación del culantro Eryngium foetidium L. / 31 Víctor R. Fuentes Fiallo, Narciso N. Rodríguez Medina y Carlos A. Rodríguez Ferradá

Ausencia de actividad antiinflamatoria del extracto acuoso liofilizado de Petiveria alliacea (anamu) en ratas / 34 Juan Antonio Furones Mourelle, Francisco Morón Rodríguez y Zulima Pinedo Gutiérrez

Ausencia de genotoxicidad en extractos fluidos de Ortosiphon aristatus Blume (té de riñón) y Lepidium virginicum L. (mastuerzo) / 38

Alberto Ramos Ruiz, Aida Villaescusa González y Angel Vizoso Parra

CONTENT EDITORIAL / 2

ORIGINALS ARTICLES

Lack of anti-inflamatory and analgesic efects of fluid extract (30 %) from Cymbopogon citratus per os / 3

Francisco Morón Rodríguez, Juan Antonio Furones Mourelle y Zulima Pinedo Gutiérrez

Anticonvulsant activity (antiepileptic) of fluid extract from Indigofera suffruticosa / 7

José L. Pérez de Alejo, Roberto Miranda y Gilda Rodríguez

About germination of Stephania rotunda Lour. / 11 Víctor R. Fuentes Fiallo, Narciso N. Rodríguez Medina y Carlos A. Rodríguez Ferradá

Analgesic action of lyophilized aqueous extract from Aloe vera L. in mice / 15

Juan Antonio Furones Mourelle, Francisco Morón Rodríguez y Zulima Pinedo Gutiérrez

Genotoxic assessment of an aqueous extract from Aloe vera L. / 18

Alberto Ramos Ruiz, Aymee Edreira Armenteros, Aida Villaescusa González, Angel Vizoso Parra y María Julia Martínez

Bucal subchronic toxicology of extract fluid from Plantago lanceolata L. / 24

Talía Romay Penabad, María del Carmen Sotolongo Baró, Caridad Sebazco Pernas y María E. Perdomo Paiba

Antioxidative effect of fluid extracts and flavonoids from Plectranthus amboinicus (Lour.) Spreng. / 27

Jorge Daniel García Salmán, Teidy Eloisa García Jiménez, Rosa Menéndez Castillo y María Teresa Buznego Rodríguez

Germination of coriander (Eryngium foetidum L.) / 31 Víctor R. Fuentes Fiallo, Narciso N. Rodríguez Medina y Carlos A. Rodríguez Ferradá

Lack of anti-inflamatory activity of lyophilized aqueous extract from Petiveria alliacea (anamu) in rats / 34

Juan Antonio Furones Mourelle, Francisco Morón Rodríguez y Zulima Pinedo Gutiérrez

Lack of genotoxity in fluid extracts from Ortosiphon aristatus Blume (té de riñón) and Lepidium virginicum L. (mastuerzo) / 38

Alberto Ramos Ruiz, Aida Villaescusa González y Angel Vizoso Parra

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EDITORIAL

LA MEDICINA TRADICIONAL NATURAL EN EL SISTEMA NACIONAL DE SALUD

Muchas son las razones que fundamentan la necesidad de impulsar la incorporación y desarrollo acelerado

de la Medicina Tradicional y Natural en nuestro Sistema Nacional de Salud. Ellas se pueden organizar en

tres grupos:

-- Filosóficas. La Medicina Tradicional y Natural, como ciencia y práctica médica, está muy relacionada

con la filosofía del Socialismo, debido a su integridad para tratar los procesos de salud-enfermedad y su

campaña de promoción de salud, prevención de las enfermedades y rehabilitación de los pacientes, así

como potencializa una mayor y mejor relación médico-paciente; por ello ofrece ventajas sobre la clásica

medicina occidental (más relacionada con la filosofía capitalista).

-- Científicas. La aplicación de esta medicina, con el elevado nivel científico de sus técnicas y

procedimien-tos, puede representar la solución de problemas de salud y aportar elementos enriquecedores al trabajo de

nuestros profesionales y técnicos.

-- Económicas. Esta no es una alternativa para la pobreza, que enfrenta los desabastecimientos y limitaciones

derivados de la difícil situación económica por la que transitamos, sino que constituye una opción de

riqueza, vinculada a la necesidad de perfeccionar la Salud Pública cubana.

En 1991, la dirección del Gobierno orientó iniciar en el país el desarrollo de un programa que incluyera el

uso científico de las plantas medicinales conocidas y la elaboración de productos farmacéuticos a partir de

ellas; se tomó como experiencia el retorno al empleo de la medicina natural en los países más desarrollados.

Esta orientación incluía la búsqueda de los principios activos de las plantas, su ensayo clínico y la

generalización consecuente de sus resultados, así como la incorporación progresivas de las técnicas y

procedimientos de la medicina tradicional asiática.

El proceso de instrumentación práctica que en los últimos 4 años ha tenido esta directiva de Gobierno, el

control y la evaluación sistemática de la Comisión Nacional para el desarrollo de esta medicina, y el trabajo

de las comisiones homólogas en los municipios y provincias han despertado el interés de científicos y

especialistas que ya incorporan elementos de la medicina tradicional y natural a sus clásicos esquemas de

tratamiento.

Los resultados alcanzados hasta hoy, entre los que se destacan la siembra del Ministerio de la Agricultura de

más de 500 hectáreas, la entrega al MINSAP de 650 toneladas de masa vegetal, la ampliación de una red

local de medicamentos naturales, la atención a 1,5 millones de pacientes y más de 800 intervenciones

quirúrgicas mediante la analgesia acupuntural han contribuido a consolidar los principios sobre los cuales se

apoya todo el trabajo del Sistema Nacional de Salud.

Durante 1995 se crearon las bases organizativas para realizar un plan de mayor alcance en este año, cuyos

logros ya se observan. A ello contribuye significativamente el esfuerzo de miles de investigadores que tienen

la oportunidad de publicar el resultado de sus trabajos en la Revista Cubana de Plantas Medicinales.

Dr. Leoncio Padrón Cáceres

Director de Medicina Tradicional y Natural

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Artículos originales

FACULTAD DE MEDICINA "DR. SALVADOR ALLENDE". LABORATORIO CENTRAL DE FARMACOLOGIA

AUSENCIA DE EFECTOS ANTIINFLAMATORIO

Y ANALGESICO DEL EXTRACTO FLUIDO

DE Cymbopogon citratus AL 30 % POR VIA ORAL

Dr. Francisco Morón Rodríguez,

1

Dr. Juan Antonio Furones Mourelle

2

y

Téc. Zulima Pinedo Gutiérrez

3

RESUMEN

INTRODUCCION

E l Cymbopogon citratus (DC) Staf. también conocido por Andropogon citratus y Andropogon ceriforus, pertenece a la familia Graminaceae y en Cuba se le denomina popularmente como caña santa y cañita de limón (figura).1

Sus hojas contienen aceite esencial2,3 cuyo rendimiento es del 0,2 a 0,5 % y excepcionalmente puede alcanzar el 5 % del material fresco, el cual está constituido por geranial y neral que son los componentes mayoritarios, además geraniol, fur-fural, citronelal, metilheptona y mirceno. Se han

ais-lado otros compuestos de la planta como cariofileno, linalilacetato, limoneno, quercetina y rutina,2 los que junto con el mirceno se le atribuyen propiedades antiespasmódicas.3

La caña santa tiene un amplio uso en la medicina tradicional, se destaca como hipotensor, contra el catarro y la fiebre,1 antiséptico y antiasmático,5-6 estomáquico,1 antiulceroso7 y antiespasmódi-co,5,6,8 entre otros.

Se ha comprobado que el C. citratus por vía tópica en animales y el hombre posee acción anal-gésica,9,10 mientras que la decocción de las hojas

1

Doctor en Ciencias Médicas. Especialista de II Grado en Farmacología. Profesor Auxiliar.

2 Especialista de II Grado en Farmacolog ía. Profesor Auxiliar. 3

Técnica en Farmacología.

El Cymbopogon citratus (DC) Staf. (caña santa) es una especie utilizada ampliamente en la medicina tradicional de Cuba y de muchos países de nuestra región. Entre sus propiedades atribuidas popularmente hay algunas que pueden relacionarse con acciones analgésicas y antiinflamatorias. Nues-tro objetivo fue validar los efectos farmacológicos antes mencionados de un extracto fluido de C. citratus preparado con etanol-agua al 30 %. Para estudiar el efecto antiinflamatorio se empleó el modelo de granuloma inducido por algodón en ratas y se utilizó el plato caliente en ratones para la actividad analgésica. El extracto se administró, por vía oral, en dosis de 160, 320 y 480 mg/kg/día y la indometacina, 10 mg/kg/día como control positivo. El extracto de C. citratus no mostró efecto en ninguno de los dos modelos estudiados, por lo que no se validaron las supuestas acciones antiinflamato-ria ni analgésica.

Palabras clave: Cymbopogon citratus (DC) Staf; Plantas medicinales; Agentes antiinflamatorios; Actividad analgésica; Graminaceae.

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mostró una débil acción antiinflamatoria.11 Ello nos motivó a evaluar si un extracto de C. citratus al 30 % por vía oral posee acción analgésica y/o antiinfla-matoria.

MATERIAL Y METODO

Actividad antiinflamatoria

Se utilizaron ratas machos no isogénicas de la raza Sprague-Dawley (250-300 g). En cada experi-mento, los animales fueron seleccionados aleatoria-mente para formar los diferentes grupos, se desecharon las ratas muertas durante el estudio y aquellas que presentaron sepsis en las heridas quirúrgicas.

El extracto fluido de C. citratus fue elaborado por el Instituto de Farmacia y Alimentos, con un menstruo de etanol-agua al 30 % y un rendimiento de 4,0 g/100 mL.

Modelo de granuloma por algodón

Realizamos una incisión a ambos lados de la parte dorsal del tórax de cada animal para introducir un pellet de algodón de 50 mg, previo decolamiento de la piel, quedando situado aproximadamente a 4 cm de la herida. Se suturó con agrafes Mitchel y se aplicó antibiótico (penicilina G) sobre la herida para evitar las infecciones.12

Se instituyeron cinco grupos de animales: 1. control (agua destilada); 2. control positivo (indometacina 10 mg/kg/día) y los tres tratados (160, 320 ó 480 mg/kg/día) por vía oral diariamente por cuatro días. Al quinto día se procedió al sacrificio de los animales y a la exéresis de los granulomas, éstos se llevaron a peso seco constante en un horno a 200 oC durante dos horas aproximada-mente para determinar el contenido acuoso del granuloma (peso húmedo - peso seco = contenido acuoso) y el fibro granuloso (peso seco - peso del pellet de algodón) en gramos.

Actividad analgésica

Se emplearon ratones machos no isogénicos Balb/c (20-24 g), los cuales se mantuvieron sin alimento por 12 horas antes del estudio.

Los animales fueron seleccionados aleatoria-mente para formar seis grupos de 10 ratones cada uno, constituidos de la siguiente forma: 1. control negativo (agua destilada); 2. control negativo (etanol 30 %); 3. control positivo (indometacina 10 mg/kg) y tres tratados (160, 320 ó 480 mg/kg),

todos administrados isovolumétricamente por vía oral.

Modelo del plato caliente

Dos horas después de administradas las solu-ciones por vía oral, se colocó cada animal dentro de un cilindro de cristal de una altura de 30 cm, el cual descansaba sobre una bandeja metálica a 55 oC de temperatura constante.

Una vez colocado el animal sobre el plato calien-te se midió el tiempo, expresado en segundos, que demora en saltar buscando el borde superior del cilindro.13

Análisis estadístico

Evaluamos previamente la distribución normal de las variables estudiadas en cada grupo experi-mental, y se procedió a emplear las pruebas de ANOVA y "t" de Student para la comparación entre las medias. Se consideró como significativo una p < 0,05.

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RESULTADOS

En ambos modelos no encontramos diferencia significativa entre los grupos controles y las dosis de 160, 320 y 480 mg/kg del extracto fluido de C. citratus al 30 %, mientras que sí hubo diferencia significativa para los grupos tratados con indometa-cina (control positivo) (tablas 1 y 2).

DISCUSION

En la medicina tradicional se refiere que las hojas de C. citratus tienen utilidad en los procesos artríti-cos11 empleadas en decocción. Además, se dice que aplicadas tópicamente las hojas maceradas alivian el dolor de cabeza y de los ojos.9,10

Se reportó que la decocción al 20 % de las hojas de C. citratus tiene un débil efecto antiinflamatorio en el edema plantar inducido por carragenina en ratas y sólo disminuía el 18,6 % de la respuesta inflamatoria inducida experimentalmente.11

Tabla 1. Actividad antiinflamatoria del extracto fluido de C. citratus al 30 % en ratas (n = 8) Grupos Contenido acuoso (gramos) Contenido fibrogranuloso (gramos) Control 4,06 ± 1,12 0,578 ± 0,066 Indometacina (10 mg/kg po) 1,80 ± 0,61* 0,294 ± 0,109* C. citratus (160 mg/kg po) 3,19 ± 1,73 0,525 ± 0,289 C. citratus (320 mg/kg po) 3,37 ± 1,19 0,491± 0,167 C. citratus (480 mg/kg po) 4,09 ±1,67 0,594 ± 0,128 * p < 0,05.

Tabla 2. Actividad analgésica del extracto fluido de C. citratus al 30 % en ratones (n = 10)

Grupos Tiempo en saltar (segundos) Control 129,30 ± 54,66 Etanol 30 % 136,00 ±42,79 Indometacina (10 mg/kg po) 202,50 ± 64,52* C. citratus (160 mg/kg po) 153,00 ± 67,62 C. citratus (320 mg/kg po) 108,90 ± 65,31 C. citratus (480 mg/kg po) 117,10 ± 54,28 * p < 0,05.

En nuestro trabajo no encontramos actividad antiinflamatoria signifinicativa en el modelo de granuloma inducido por algodón, así como tampoco se demostró efecto analgésico en el modelo de plato caliente para el extracto fluido al 30 % de hojas de C. citratus en las dosis estudiadas.

En relación con esta aparente discrepancia en la acción antiinflamatoria, consideramos que el modelo de granuloma inducido por algodón em-pleado en nuestro estudio, tiene mayor relevancia al estar más correlacionado con las drogas que mues-tran efectividad clínica en el tratamiento de la artritis reumatoidea que el edema plantar, representativo de la fase aguda de la respuesta inflamatoria.14 Por consiguiente, opinamos que tanto los extractos acuosos como los hidroalcohólicos (30 %), elabora-dos con las hojas de esta planta, tendrían poco valor como antiinflamatorio de utilidad para el tratamiento de enfermedades articulares degenerativas en el hombre.

En nuestro trabajo tampoco encontramos la ac-tividad analgésica referida en la medicina tradi-cional. Como ésta se reporta de manera tópica, consideramos que puede ser debida a un efecto local como el rubesfaciente que requeriría ser evaluado, pero esto es de limitado valor terapéutico. También podría deberse a la vía de administración que empleamos porque el mirceno tiene reportada su actividad analgésica por las vías intraperitoneal y subcutánea.3 Además, hay que considerar el tipo de extracto que utilizamos, según la concentración de mirceno, factor que no fue cuantificado.

Las hojas de C. citratus contienen quercetina, rutina y cariofileno que son sustancias con de-mostrada actividad antiinflamatoria. Además poseen mirceno, el cual se reporta con efectos antiinflamatorio y analgésico.3 Esto permite plantear la hipótesis de que otros extractos, como por ejem-plo etanólico o hidroalcohólicos superiores al 30 %, sí pudieran tener las acciones antes mencionadas y en consecuencia deben ser evaluados.

CONCLUSIONES

El extracto fluido al 30 % de C. citratus por vía oral carece de actividad antiinflamatoria y analgésica en las dosis de 160, 320 y 480 mg/kg en los modelos estudiados.

SUMMARY

Cymbopogon citratus (DC) Staf is widely used in tradi-tional medicine in Cuba and in many other countries of the Caribbean region. Among its atributable

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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Roig JT. Plantas Medicinales, Aromáticas o Venenosas en Cuba. La Habana: Editorial Científico-Técnica, 1988:139. 2. Duke JA. Handbook of phytochemycal constituents of grass

herbs and other economic plants. Boca Ratn: CRC, 1992:216-17.

3. . Handbook of biologycally active phytochemicals and their activities. Boca Ratn: CRC, 1992.

4. Seoane Gallo J. El folklor médico de Cuba. La Habana: Editorial Ciencias Sociales, 1984:95,110,165, 201,315. 5. Fook WTH. The medicinal plants of Mauritius. Enda

Document, 1980:10.

6. Olaniyi AA, Sofowora EA, Oguntimehin BO. Phytoche-mi-cals investigation of some Nigerian plants used against fever. II Cymbopogon citratus. Planta Med 1975;28:186-9. 7. Ginzbarg S. Plantas medicinales de los indios Bribris y

Cabecas. América Indígena 1977;37(2):367-98.

8. Hirechhorn HH. Botanical remedies of the farmer Dutch East Indies (Indonesia) Part I; eumicetes, pteridophita, gym-nospermae, angiospermae monocotyledones only. Etno-pharmacol 1983;7:123-56.

9. Maluf E, Assolant KRM. Toxicología clínica do Capim cidrao (Cymbopogon citratus Stapf). Programa de pesquisas en plantas medicinales 1985;46-51.

10. Robineau L. Hacia una farmacopea caribeña. Seminario TRAMIL V y VI. Santo Domingo: Enda Caribe, 1992:139--42.

11. Carbajal D. et al.: Pharmacological study of Cymbopogon citratus leaves. J Ethnopharmacol 1989;25:103-7. 12. Winter CA, Porter CC. Effect of alteration in side chain

uppon antiinflamatory and liver glycogens activities of hy-drocortisone sters. J Am Pharmac Assoc 1957;46:516-9. 13. Woolfe G, MacDonald AD. The evaluetion of the analgesic

action of penthidine hydrochloride (Demerol). J Pharmacol Exp Ther 1944;80:300.

14. O’Brian W. Pharmacology of nonsteroidal antiinflamatory drugs. Am J Med 1983;(10):32-9.

Dr. Francisco Morón Rodríguez. Facultad de Medicina "Dr.

Salvador Allende". Laboratorio Central de Farmacología. Carvajal s/n, entre Agua Dulce y A, Ciudad de La Habana, CP: 12 000, Cuba.

popular properties are those related to analgesic and anti-inflamatory actions. Main objective of present work was to validate pharmacological effects above mentioned of a fluid extract from C. citratus based on ethanol-water (30 %). To study anti-inflamatory ef-fects, model of cotton induced granuloma in rats was used, as well as hot dishes in mice for analgesic activity. Doses of 160, 320, and 480 mg/kg/day per os were given, and indomethacin (10 mg/kg/day per os), like a positive control. Extract from C. citratus wasn’t effective in any of the studied models. There fore nei-ther supposed anti-inflamatory actions nor analgesic ones were validated.

Key words: Cymbopogon citratus (DC) Staf; Plants, Medicinal; Anti-inflamatory agents; Analgesic ac-tivity; Graminaceae.

CENTRO NACIONAL DE INFORMACION

DE CIENCIAS MEDICAS

El Centro Nacional de Información de Ciencias Médicas (CNICM) es el órgano cabecera del

Sistema Nacional de Información de Ciencias Médicas (SNICM), del Ministerio de Salud Pública

de la República de Cuba. Este sistema lo integran además 13 Centros Provinciales y el Municipio

Especial Isla de la Juventud, así como 508 bibliotecas ubicadas en Institutos de Investigación,

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El CNICM cuenta con tres divisiones:

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ubicada la mayor colección de libros y publicaciones periódicas existentes en el país y se brindan

los servicios clásicos de una biblioteca, así como otros servicios especializados tales como:

Traducciones, Servicios Especiales de Información y Producción de Bases de Datos entre otros.

2. La Editorial Ciencias Médicas (ECIMED) produce 26 títulos de Revistas Médicas Cubanas, así

como libros de medicina de autores cubanos.

3. La Red de Transmisión de Datos (INFOMED) brinda entre otros Servicios de Mensajería

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LABORATORIO DE MEDICINA HERBARIA INSTITUTO SUPERIOR DE MEDICINA MILITAR "DR. LUIS DIAZ SOTO"

ACTIVIDAD ANTICONVULSIVANTE (ANTIEPILEPTICA)

DEL EXTRACTO FLUIDO DE Indigofera suffruticosa

(AÑIL CIMARRON)

(AÑIL CIMARRON)

Lic. José L. Pérez de Alejo,

1

Téc. Roberto Miranda

2

y Téc. Gilda Rodríguez

2

RESUMEN

INTRODUCCION

El término epilepsia ha evolucionado y adquirido mayor precisión con el avance del conocimiento de su fisiopatología. Este término designa a un grupo de enfermedades crónicas del sistema nervioso central (SNC), que se caracterizan por espontáneos y frecuentes ataques (convulsiones), debido a des-cargas excesivas de neuronas encefálicas.1

Generalmente se acepta que la crisis epiléptica es un síntoma de cualquiera de las diversas altera-ciones de base, tales como defectos genéticos, traumatismos cerebrales o concentraciones tóxicas de drogas.2

La epilepsia generalmente se divide en dos cate-gorías principales: sintomática e idiopática, esta última es la más común. Las convulsiones pueden producirse en la mayoría de los pacientes en ausen-cia de una lesión del SNC.3

Desde hace algunos años se viene buscando en el reino vegetal un tratamiento a la cura de las convulsiones.4 Esto no es realmente un problema, particularmente si se considera que los prototipos farmacológicos han sido encontrados en este reino. La historia del tratamiento herbolario para las con-vulsiones es considerada junto a la historia de la medicina, tan antigua como la historia de la civili-zación.5, 6

1

Especialista en Bioquímica Clínica. Investigador Auxiliar.

2

Técnic(a) o en Investigaciones Fisiológicas.

Se prueba la acción anticonvulsivante del extracto fluido de Indigofera suffru-ticosa (añil cimarrón) preparado a partir de hojas, tallos, raíz y frutos. Se utilizaron dos modelos experimentales de epilepsia: el modelo de shock eléctrico máximo (inhibición de la extensión tónica de las extremidades posteriores) y el modelo de inducción de convulsiones tónico-clónicas por picrotoxina. En ambos modelos fue ensayado un grupo control menstruo, un grupo control diazepam y un grupo experimental, con la administración de 0,2 mL en cada caso, por vía oral e intraperitoneal, en las dosis de 1 mg/kg para el diazepam y de 0,06 g/kg para la Indigofera, durante 10 días previos al electroshock en la dosis oral y de una hora antes de la picrotoxina. Se encuentra que el extracto fluido en la dosis señalada y en ambas vías de administración eleva el umbral de crisis en el electroshock pero no en la picrotoxina.

Palabras clave: Extracto fluido; Indigofera suffruticosa; Anticonvulsivante; Modelo experimental; Epilepsia.

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Los anticonvulsivantes son usados para el con-trol de las convulsiones en la epilepsia, tetanus, hemorragias cerebrales y envenenamientos con convulsiones. Las convulsiones tienen un origen focal, la forma del padecimiento dependen del sitio del foco en el cerebro, de la región de acuerdo con las descargas y el efecto de parálisis posictal de esas regiones. Estas drogas anticonvulsivantes se emplean para inhibir las descargas, pero producen hipnosis, que implican limitaciones de trabajo y/o estudio en sus pacientes. Estas drogas actúan alterando la permeabilidad de todas las membranas a los iones, o modificando a los neurotransmisores en el cerebro, o incrementando la concentración de GABA (inhibitorio), o alterando la concentración de serotonina o taurina.7-9

Adesina (1982) realizó un estudio fitoquímico y farmacológico en 50 plantas, las cuales fueron usadas como anticonvulsivantes.1 Chang (1983) re-portó la caracterización biológica de compuestos activos en algunas plantas.10 Gill (1948) reportó que la decocción de algunas plantas de la familia Anno-naceas (corteza y raíces), Loganiacea (completa) y Proteacea (semillas) tienen propiedades anticon-vulsivantes.11 Hepke y Rapke (1972) realizaron con raíz de mugwort, valeriana, pippernit, camomile alemán y betón preparados farmacológicos y los usaron como remedios para la epilepsia.12 Chatur-vedi (1976) aisló triterpenoides en algunas plantas que tienen propiedades anticonvulsivantes.13 En el libro de plantas medicinales de Tomás Roig se señala que a la Indigofera suffruticosa se le han atribuido diferentes propiedades y entre ellas ...un remedio favorito para la epilepsia... La planta, dice el doctor Lucio, ha encontrado útiles aplicaciones en la medicina práctica para diversas enfermedades y entre ellas la epilepsia, que por lo general hace resistencia al tratamiento médico y cuando no se trata, el enfermo se degrada considerablemente. La planta recomendada por algunos médicos extran-jeros fue empleada por el doctor Ladislao de la Pascua en una señora que padecía desde hacía muchos años del gran mal de la epilepsia, y a pesar de muchos tratamientos, la dolencia no cedía, hasta que al cabo de algún tiempo de tomar la planta en la dosis de tres a cuatro g/día, el mal desapareció definitivamente... 14,15

Las pruebas de selección en el laboratorio para drogas antiepilépticas potenciales se han basado principalmente en la capacidad de modificar los efectos del shock eléctrico máximo y para elevar la dosis de picrotoxina requerida para precipitar con-vulsiones tónico-clónicas; persiste hoy después de

más de 40 años de investigaciones.16 Con estas pruebas se puede predecir generalmente la activi-dad contra las convulsiones tónico-clónicas y las crisis de ausencias. Algunos agentes que modifican las convulsiones producidas por electroshock no tienen ningún efecto sobre la dosis umbral de picro-toxina (Ptx).

MATERIALES Y METODOS

Para la realización de este estudio fue preparado por el Departamento de Fitoquímica de nuestro labo-ratorio un extracto fluido de Indigofera suffruticosa, por percolación a tres vueltas a partir de hojas, tallos, raíz y frutos, utilizando como menstruo etanol al 75 % y con los siguientes parámetros: volu-men = 500 mL; sólidos totales = 198,17 g/mL; densidad = 1,0785 y pH = 7,3.

Para evaluar el efecto anticonvulsivante del extracto fueron seleccionados dos modelos experi-mentales de epilepsia: el modelo del Shock Eléctrico Máximo (SEM) (inhibición de la extensión tónica de las extremidades posteriores) y el modelo de induc-ción de convulsiones tónico-clónicas por Ptx.8 Fueron utilizados ratones Balb/c machos con peso corporal entre 18 y 22 gramos (divididos en grupo de 20 ratones). En ambos modelos fue ensayado un grupo control menstruo (etanol 75 %); un grupo control diazepam y un grupo experimental, a los cuales se les administró un volumen de 0,2 mL por vías oral e intraperitoneal (IP). En las dosis de 1 mg/kg para el diazepam y de 0,06 g/kg para la Indigofera; durante 10 días previos a el electroshock y a la inyección de Ptx en la administración oral e IP respectivamente.

Las convulsiones tónico-clónicas se lograron ad-ministrando Ptx en la dosis de 5 mg/kg por vía IP. A partir de que los animales eran inyectados, se ob-servaban durante 50 minutos; midiendo con un cronómetro el tiempo en que se producía la primera convulsión en minutos. Las convulsiones inducidas por shock eléctrico fueron logradas mediante un estimulador modelo MSE-3R y una unidad aisladora MSE-JM, ambos de la NIHON KOHDEN a través de electrodos conectados en las orejas. Los paráme-tros fueron: voltaje 170 v; frecuencia 10 mseg y una duración del estímulo de 0,6 s. Fue tomado como protección de la convulsión, la abolición de la exten-sión de las patas traseras o una reducción de éstas; medida con un cronómetro en segundos. Los resul-tados fueron analizados estadísticamente mediante la prueba de la "t" de Student con p < 0,05.

(10)

RESULTADOS

Se encuentra un desplazamiento del umbral de crisis en el grupo experimental respecto a los dos grupos controles. El 100 % de los animales del grupo control menstruo convulsionó con media de 16,10 s, sólo el 25 % de los animales (media = = 4,35) y el 20 % (media = 2,55) convulsionan en el grupo control diazepam y grupo experimental respectivamente; con una disminución significativa (p < 0,05) del tiempo cuando se comparan los grupos diazepam y experimental contra el grupo menstruo (tabla 1). Cuando se evalúan los resultados del mismo modelo en el tratamiento por vía IP y con una sola dosis, encontramos resultados semejantes (tabla 2).

En el modelo de inducción de convulsiones por Ptx, mediante la vía oral durante 10 días, no apare-cen diferencias significativas entre el grupo experi-mental y ambos grupos controles. En la vía IP se observan diferencias significativas (p < 0,05) entre el grupo diazepam y el menstruo, pero no con el grupo experimental (tablas 3 y 4).

Tabla 1. Media de los valores y porcentaje de la acción

anticonvulsivante. Modelo electroshock. V í a o r a l , tratamiento 10 días

Menstruo Diazepam Experimental Tiempo de extensión

de las patas posteriores

(media,seg) 16,10 4,35* 2,55* Convulsionan (n/%) 20/100 5/25 4/20 No convulsionan(n/%) 0/0 15/75 16/80 *Significativo p < 0,05.

Tabla 2. Media de los valores y porcentaje de la acción

anticonvulsivante. Modelo electroshock. Vía intraperi-toneal, tratamiento dosis única

Menstruo Diazepam Experimental Tiempo de extensión

de las patas posteriores

(media,seg) 16,75 3,60* 1,20* Convulsionan (n/%) 20/100 5/25 2/10 No convulsionan (n/%) 0/0 15/75 18/90 *Significativo p < 0,05.

Tabla 3. Tiempo de aparición de la primera convulsión con

Ptx (valores medio, min). Vía oral, tratamiento 10 días

Tiempo de aparición de la primera

convulsión (min) Menstruo Diazepam Experimental Media (X) 9,85 11,24 9,03

DE 0,55 1,05 0,77

Tabla 4. Tiempo de aparición de la primera convulsión con

Ptx (valores medio,min). Vía intraperitoneal. Dosis única

Tiempo de aparición de la primera

convulsión (min) Menstruo Diazepam Experimental Media (X) 7,35 13,38 6,54

DE 1,23 0,55 0,78

DISCUSION

Al evaluar los efectos anticonvulsivantes del extracto fluido de Indigofera suffruticosa en el primer modelo experimental del shock eléctrico, con la ad-ministración de la dosis de 0,06 g/kg durante 10 días, aparece un desplazamiento del umbral de crisis en el grupo tratado, con respecto a los dos grupos controles. Esto se interpreta como un efecto protector de este extracto sobre las convulsiones inducidas, con valores más bajos si se comparan con el control diazepam. Condiciones protectoras semejantes se produce cuando se cambia la vía de administración.

La administración oral en el mismo tiempo y en la misma dosis, pero en el modelo de inducción de convulsiones por Ptx, no muestra acción protectora del extracto, ni con un anticonvulsivante conocido como el diazepam. Creemos que en este caso las condiciones experimentales para la inducción de las crisis no fueron las más idóneas; además influye también la vía de administración, ya que al evaluarse la administración IP, el grupo diazepam mostró diferencias significativas con respecto al grupo menstruo.

CONCLUSIONES

Los resultados experimentales muestran que el extracto fluido de Indigofera suffruticosa en la dosis de 0,06 g/kg eleva el umbral de crisis inducida por el shock eléctrico máximo, que puede considerarse como actividad antiepiléptica.

SUMMARY

Anticonvulsant action of fluid extract from Indigofera suffruticosa, prepared from leaves, stalks, roots, and fruits, was tested. Two experimental models of epi-lepsy were used: model of maximum electric shock (inhibition of tonic extension of hind limbs) and model of induction of tonic-clonic convulsions by picrotoxin. In both models, a menstruo control group was as-sayed; a diazepam control group, and an experimental group, by administration of 0,2 mL in each, per os and

(11)

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Gastaut H. Dictionary of epilepsy. Part 1: Definitions. Ginebra: World Heath Organization, 1973:68-75.

2. Emson PC. Biochemical and metabolic in epilepsy. En: Bardeau A, Huxtable RJ, eds. Taurine and neurological disorders. New York : Raven, 1978:319-38.

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Proc 1985;44(10):2627-8.

8. Mac Donald RL, Mac Lean MJ, Sherntt JH. Anticonvulsant mechanism of action. Fed Proc 1985;44(10):2634-9. 9. Theodore W Rall, Leonard S. Sheiter. Drogas efectivas en

el tratamiento de la epilepsia. Las bases farmacológicas de la terapéutica. La Habana: Editorial Científico-Técnica, 1983;449-74.

10. Chang CC. Isolation and structure determination of biologi-cally active compounds from the plant Kingdom. Disser-tation abstract international Section B 1983;43(11):3567. 11. Gill RC. Curariform drug. Brit 1948;619:235.

12. Hepke K, Rapke K. A remedy for epilepsy. Brit 1912;21044:544.

13. Chaturved AK, Parmar SS, Blathagar SC . Convulsant anti-inflamatory activity of natural plant Coumarins and triterpenoids. Res Commun Chem Pathol Phamacol 1974;9(1):11-22.

14. Roig y Mesa JT. Plantas medicinales aromáticas o venenosas de Cuba. La Habana: Editorial Científico-Téc-nica, 1974:163-5.

15. Roig y Mesa JT. Diccionario botánico de nombres bulgares cubanos. La Habana: Editorial Científico-Técnica, 1988;101-2.

16. Krall RL, Penry JK. Antiepileptic drug development. I. History and a program for progress. Epilepsia 1978;19:408--943.

Lic. José Pérez de Alejo. Laboratorio de Medicina Herbaria.

Instituto Superior de Medicina Militar "Dr. Luis Díaz Soto". Avenida Monumental y Carretera de Asilo, Habana del Este, Ciudad de La Habana, Cuba.

intraperitoneal via, in doses of 1 mg/kg for diazepam group and of 0,06 g/kg for Indigofera group, over ten days before electric shock in oral dose and of one hour before Ptx. It is proved that fluid extract in above-men-tioned doses and by the two routes of administration, increases threshold of crisis in electroshock, but no in Ptx.

Key words: Fluid extract; Indigofera suffruticosa; Anti-convulsants; Experimental model; Epilepsy.

IV CONGRESO NACIONAL DE HIGIENE Y EPIDEMIOLOGIA

I CONGRESO NACIONAL DE INFECTOLOGIA

I REUNION CIENTIFICA DE LA ASOCIACION IBEROAMERICANA

DE EPIDEMIOLOGIA

I SIMPOSIO NACIONAL DE VIGILANCIA EN SALUD

18-22 de noviembre de 1996

Desarrollo de la Higiene y la Epidemiología en Cuba: Perspectivas

Para una mayor información comunicarse con:

Complejo Científico Ortopédico Internacional "Frank País"

Ciudad de La Habana, Cuba

(12)

INSTITUTO DE INVESTIGACIONES FUNDAMENTALES EN AGRICULTURA TROPICAL "ALEJANDRO DE HUMBOLDT"

SOBRE LA GERMINACION DE Stephania rotunda Lour

Dr. Víctor R. Fuentes Fiallo,

1

Dr. Narciso N. Rodríguez Medina

2

y Téc. Carlos A. Rodríguez Ferradá

3

RESUMEN

INTRODUCCION

Stephania rotunda Lour. (sinonimia: Stephania gabra [Roxb.] Miers) es una planta trepadora de la familia Menispermáceas, originaria de los trópicos y subtrópicos de Birmania, India, China Meridional y Japón. Fue introducida exitosamente en Cuba, en 1973, con material procedente de los subtrópicos húmedos de Georgia Occidental1 por el contenido de alcaloides isoquinolínicos en sus raíces tu-berosas (la hindarina fue el componente mayoritario con 2 % de rendimiento), que poseen una acción farmacológica de utilidad para el tratamiento de algunas afecciones psíquicas (figura).

A pesar de que el desarrollo de las plantas, los rendimientos de material vegetal y los contenidos de alcaloides2 recomiendan el cultivo de la especie con fines industriales en Cuba, éste se ha visto limitado por dificultades con la reproducción, tanto vegetativa como sexual, por lo que se realizan estudios para encontrar la vía adecuada.3,4

La multiplicación vegetativa es posible a pequeña escala, para ello, es necesario utilizar parte

de las raíces tuberosas de la especie donde se acumulan los alcaloides de interés farmacológico.1

La especie es dioica y puede producir gran can-tidad de semillas, pero se ha referido que poseen gran decrecimiento en el porcentaje de germinación a partir de los diez días de la cosecha de los frutos maduros,1,5 con una germinación muy poco uni-forme y de larga duración,6 lo que dificulta el es-tablecimiento de plantaciones.

Debido a que los métodos ensayados hasta el presente no han podido lograr incrementos en la velocidad y el porcentaje de germinación en esta especie, se realizó un ensayo para encontrar solu-ción a esta limitante en el desarrollo del cultivo de Stephania rotunda en las condiciones de Cuba.

MATERIALES Y METODOS

El experimento se desarrolló en la Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan T. Roig", en San Antonio de los Baños, La Habana.

Las semillas fueron obtenidas a partir de frutos maduros provenientes de plantas cultivadas bajo

1 Investigador Titular. Instituto de Investigaciones Fundamentales en Agricultura Tropic al "Alejandro de Humboldt". MINAGRI. 2

Investigador Auxiliar. Estación Nacional de Frutales. MINAGRI.

3

Técnico Medio en Agronomía. Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan Tomás Ro ig". MINSAP. Se evalúa la germinación de semillas de Stephania rotunda con uno y dos meses de cosechadas en diferentes tratamientos pregerminativos. El com-portamiento de la germinación en Stephania rotunda constituye un proceso muy variable. Aplicaciones exógenas de ácido giberélico entre 750 y 1 000 ppm favorecen el porcentaje final y la homogeneidad del proceso de germinación. Estas aplicaciones se ven más favorecidas con semillas de menor tiempo de cosechadas.

Palabras clave: Stephania rotunda; Germinación; Acido giberélico.

(13)

techo en la citada estación, con uno y dos meses de cosechadas.

Las pruebas de germinación se realizaron a partir del mes de agosto de 1993, a temperatura ambiente en un sustrato de zeolita.

Se evaluaron 10 tratamientos de tres réplicas de 25 semillas cada una. Los tratamientos fueron: semillas frescas (SF), testigo (T), semillas sumergi-das en agua destilada durante 24 horas (SA), semillas lavadas en agua corriente durante 24 horas (LA) y GA-50, GA-100, GA-250, GA-500, GA-750 y GA-1000, correspondientes a semillas sumergidas en solución acuosa de ácido giberélico a 50, 100, 250, 500, 750, y 1 000 ppm respectivamente; también bajo idénti-cas condiciones fueron sembrados frutos maduros. La evaluación se extendió durante seis meses después de la germinación. En cada tratamiento y réplica se evaluaron: días para el inicio, días para el final, duración de la germinación, días para alcanzar la masividad (50 % de semillas germinadas), coefi-ciente de velocidad de germinación y porcentaje final de germinación.

Los valores, previa transformación cuando fue necesario, se evaluaron por un análisis de clasifica-ción doble según un modelo bifactorial, y se tomaron como factores la edad de las semillas y los tratamientos pregerminativos. Las medias fueron comparadas mediante el test de Newman-Kewls.

RESULTADOS

Los resultados mostraron la existencia de inter-acción entre los factores edad de las semillas y tratamientos pregerminativos.

La tabla 1 muestra los resultados del test de Newman-Kewls para los porcentajes finales de ger-minación. Los tratamientos con aplicaciones exógenas de ácido giberélico a 750 y 1 000 ppm resultaron eficaces para obtener mejores porcenta-jes de germinación (entre 48 y 63,55 %), aunque se observa que con semillas de un mes de cosechadas se obtiene también un valor aceptable (54,67 %). Sin embargo, el resto de los tratamientos presentan porcentajes de germinación inferiores a 30,67 % y por lo general no difieren de los testigos considera-dos, ni de las semillas frescas.

Las variables que definen la velocidad del proceso de germinación muestran la alta hetero-geneidad con que se desarrolló.

En la variable inicio (tabla 1), las concentraciones de ácido giberélico de 500 a 1 000 ppm favorecen el inicio de la germinación en semillas de un mes de cosechadas, pero no tanto para las de dos meses. Por lo general en el resto de los tratamientos, el inicio

se comporta muy variable y se puede extender entre los 10,67 y 82 días, lo que se refleja en altos valores del coeficiente de variación.

Debido a bajos valores de porcentaje final de germinación, obtenidos en la mayor parte de los tratamientos, sólo en cinco de ellos se alcanzó la masividad (tabla 2). Con semillas de un mes de cosechadas y aplicaciones de ácido giberélico de 750 y 1 000 ppm, se alcanza la masividad entre 7,33 y 9,33 días. Las semillas de un mes de almace-nadas, al ser tratadas con ácido giberélico de 500 ppm alcanzaron valores que no difieren de los obtenidos por semillas con dos meses de cosechadas y dosis de ácido giberélico de 750 y 1 000 ppm.

Los mayores valores de coeficientes de veloci-dad de germinación (CVG) (tabla 2) resultaron los de las semillas de un mes de almacenadas, que fueron tratadas con dosis de 750 y 1 000 ppm de ácido giberélico. En el resto de los tratamientos el comportamiento del CVG resultó muy variable.

DISCUSION

Los resultados que se ofrecen en la tabla 1 evi-dencian la inefectividad de las aplicaciones exógenas

(14)

de ácido giberélico en concentraciones inferiores a 500 ppm para incrementar la germinación. Resalta la ineficacia de sembrar el fruto completo debido a los bajos porcentajes de germinación que presen-taron sus semillas; posiblemente en condiciones de campo, a pesar de la altísima producción de frutos de las plantas de Stephania rotunda, se obser-van muy escasas plántulas.

Un comportamiento igualmente heterogéneo se presentó en las variables final y duración (tablas 1 y 2). Debido al comportamiento heterogéneo de la germi-nación en las variables inicio, final y duración no resulta posible encontrar una tendencia que indique el aporte de los tratamientos realizados sobre estas variables.

De la misma forma, la masividad y el coeficiente de velocidad de germinación manifestaron un com-portamiento muy heterogéneo. En líneas generales, las semillas de un mes de cosechadas ofrecieron mejores porcentajes de germinación que las de dos meses.

Los resultados obtenidos muestran que el poder germinativo de las semillas de Stephania rotunda es

de corta duración, aunque no tanto como había sido señalado por Granda y Fornet (1979), pero puede extenderse mediante aplicaciones exógenas de ácido giberélico en concentraciones entre 500 y 1 000 ppm.

El comportamiento tan variable de la germi-nación en la especie resulta de difícil explicación y pudiera estar relacionado con mecanismos de su-pervivencia en su habitat natural.

Resulta poco probable, dados los resultados con los tratamientos aplicados, que la baja germinación obtenida esté relacionada con la presencia de inhibi-dores en las cubiertas seminales, o con la imper-meabilidad de la testa a la entrada del agua. La altísima producción de frutos en la especie parece compensar su baja germinación.

CONCLUSIONES

1. El comportamiento de la germinación en Stephania rotunda constituye un proceso muy variable, lo que se manifiesta no sólo en los bajos valores que alcanza el porcentaje final, sino

Tabla 1. Resultados del test de Newman-Kewls para el porcentaje final, inicio y final de la germinación en Stephania rotunda Lour

Mes Tratamiento % final Inicio Final

1 FF 8,00 DEF 82,00 A 107,67 A 2 FF 0,00 F 0,00 F 0,00 F 1 SF 24,00 CDE 44,33 B 79,00 AB 2 SF 4,00 EF 36,67 B 43,00 BC 1 T 30,67 BCD 19,67 BC 75,00 ABC 2 T 25,33 CDE 12,67 BC 53,33 BCD 1 SA 22,67 CDEF 15,67 BC 51,67 BC 2 SA 25,33 CDE 12,00 BC 33,67 BCD 1 LA 17,33 CDEF 39,67 B 71,00 ABC 2 LA 17,33 CDEF 12,00 BC 39,00 BCD 1 AG-50 21,33 CDEF 20,00 BC 51,00 BC 2 AG-50 14,67 CDEF 15,33 BC 36,00 BCD 1 AG-100 27,33 BCD 11,33 BC 51,67 BC 2 AG-100 13,33 CDEF 17,33 BC 28,67 BCD 1 AG-250 36,00 BC 13,67 BC 57,67 BC 2 AG-250 24,00 CDE 15,33 BC 45,33 BCD 1 AG-500 50,67 A 9,00 BC 65,33 BC 2 AG-500 30,67 BCD 13,00 BC 40,67 BCD 1 AG-750 58,67 A 9,33 BC 46,33 BCD 2 AG-750 60,00 A 11,67 BC 32,33 BCD 1 AG-1000 48,00 AB 10,67 BC 22,33 CD 2 AG-1000 63,55 A 10,67 BC 59,00 BC ES 8,49 11,87 17,54 CV 60,20 60,20 36,00

Nota: Letras iguales no difieren para un nivel de significación del 5 %.

(15)

también por las variables que definen la veloci-dad del proceso.

2. Las aplicaciones exógenas de ácido giberélico entre 750 y 1 000 ppm favorecen el porcentaje final y la homogeneidad del proceso de germi-nación. Estas aplicaciones se ven más favorecidas con semillas de menor tiempo de cosechadas.

SUMMARY

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

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(Roxb.) Miers en Cuba. Rev Jard Bot Nac (Cuba) 1980;1(19):209-24.

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3. Velázquez A. Determinación de algunos parámetros agrotéc-nicos en Stephania glabra. Informe anual de investigaciones. Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan T. Roig", San Antonio de los Baños, La Habana, 1980: s/p. 4. Determinación de algunos parámetros agrotécnicos en Stephania glabra. Informe anual de investigaciones. Es-tación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan T. Roig", San Antonio de los Baños, La Habana, 1981: s/p. 5. Granda M, Fornet E. Estudio de introducción de la Stephania glabra (Roxb.) Miers. Informe anual de investi-gación. Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan T. Roig", San Antonio de los Baños, La Habana, 1979: s/p. 6. Acosta J, Fornet E. Determinación de algunos parámetros agrotécnicos en Stephania glabra. Informe anual de investi-gación. Estación Experimental de Plantas Medicinales "Dr. Juan T. Roig", San Antonio de los Baños, La Habana, 1980;87-91.

Dr. Víctor R. Fuentes Fiallo. Instituto de Investigaciones

Fun-damentales en Agricultura Tropical "Alejandro de Humboldt", Calles 1 y 2, Santiago de las Vegas, Ciudad de La Habana, Cuba.

Germination of seeds from Stephania rotunda is as-sessed, with one and two months of harvesting in different pre-germination treatments. Behaviour of germination in Stephania rotunda is a very variable process. Exogenous applications of giberelic acid be-tween 750 and 1 000 ppm, favoured final percent, and homogeneity of germination process. These applica-tion are more benefitted with less harvesting time seeds.

Key words: Stephania rotunda; Germination; Giberelic acid.

Tabla 2. Resultados del test de Newman-Kewls para la duración, masividad y coeficiente de velocidad de germinación

en Stephania rotunda Lour

Mes Tratamiento Duración Masividad CVG (%)

1 FF 8,00 DE 0,00 C 1,06 HI 2 FF 0,00 F 0,00 C 0,00 I 1 SF 24,00 CDE 0,00 C 1,63 GHI 2 SF 6,33 DE 0,00 C 1,19 HI 1 T 30,67 BCD 0,00 C 2,48 FGH 2 T 20,67 CDE 0,00 C 5,19 BCD 1 SA 22,67 CDE 0,00 C 2,00 DEFGH 2 SA 23,67 CDE 0,00 C 5,39 BC 1 LA 17,33 CDE 0,00 C 1,91 FGHI 2 LA 27,00 BCDE 0,00 C 3,97 CDE

1 AG-50 21,33 CDE 0,00 C 2,88 DEFGH

2 AG-50 20,67 CDE 0,00 C 4,70 CDE

1 AG-100 29,33 BCDE 0,00 C 3,57 CDEFGH

2 AG-100 11,33 DE 0,00 C 4,51 CDE

1 AG-250 36,00 ABCD 0,00 C 4,17 CDE

2 AG-250 30,00 BCD 0,00 C 3,90 CDE

1 AG-500 54,67 AB 0,00 C 4,82 CDE

2 AG-500 27,67 BCDE 21,67 A 4,40 CDE

1 AG-750 58,57 A 9,33 B 6,82 AB

2 AG-750 20,67 BCD 24,33 A 5,21 BCD

1 AG-1000 48,00 ABC 7,33 B 7,59 A

2 AG-1000 48,33 ABC 23,33 A 4,61 CDE

ES 10,80 5,47 0,86

CV 40,50 139,90 22,80

(16)

FACULTAD DE MEDICINA "DR. SALVADOR ALLENDE". LABORATORIO CENTRAL DE FARMACOLOGIA

ACCION ANALGESICA DE UN EXTRACTO ACUOSO

LIOFILIZADO DE Aloe vera L. EN RATONES

Dr. Juan Antonio Furones Mourelle,

1

Dr. Francisco Morón Rodríguez

2

y Zulima Pinedo Gutiérrez

RESUMEN

INTRODUCCION

El Aloe vera L. (sábila) pertenece a la familia Liliaceae, nativa del Mediterráneo, en nuestro conti-nente se le encuentra en Las Antillas y América Central. Se le atribuyen tradicionalmente diversas propiedades, principalmente las acciones antidi-sentérica, antihemorroidal, cicatrizante, antibleno-rrágica, anticatarral, laxante, colerética, hepatopro-tectora y antitumoral.1

Entre sus constituyentes químicos se reportan derivados antraquinónicos como la aloína (bar-baloína), diferentes derivados antracénicos, ácidos orgánicos, vitaminas A, C y B, aminoácidos, poli-sacáridos y glicoproteínas con actividades antitu-moral y antiinflamatoria.2

Natow reportó que al aplicar Aloe vera sobre las heridas se producía desaparición del dolor y lo atribuyó a la inhibición de la acción de las bradikini-nas causada por proteasas contenidas en la planta.3 En Cuba la especie más abundante es el A. vera L. (A. barbadensis Mill), por tanto es necesario

evaluar la actividad farmacológica del extracto preparado a partir de esta especie, según la técnica de Filatov, descrita originalmente para el A. arbores-cens,2 por nuestra industria farmacéutica.

Nuestro objetivo fue evaluar si el extracto acuoso liofilizado de hojas de A. vera (figura) antes men-cionado posee efecto analgésico cuando se admi-nistra experimentalmente por vía oral.

MATERIALES Y METODOS

Se utilizaron ratones machos no isogénicos Balb/c (20 + 4 g), los cuales se mantuvieron sin alimento durante 12 horas antes del estudio.

Para cada experimento, los animales fueron se-leccionados aleatoriamente en tres grupos de 10 ra-tones, constituidos de la manera siguiente:

1. Control negativo (agua destilada).

2. Control positivo (indometacina 10 mg/kg). 3. Grupo tratado (extracto acuoso liofilizado de

ho-jas de A. vera 500 mg/kg).

1 Especialista de II Grado en Farmacología. Profesor Auxiliar.

2 Doctor en Ciencias Médicas (Ph.D.). Especialista de II Grado en Farmacología. Profesor Auxi liar. 3

Técnica en Farmacología.

Con el propósito de establecer el efecto analgésico de un extracto acuoso liofilizado de Aloe vera L., se administró una dosis de 500 mg/kg por vía oral en los modelos experimentales de plato caliente y de contorsiones inducidas por ácido acético. Se encontraron diferencias significativas entre los con-troles y los grupos tratados, lo cual sugiere que el extracto de A. vera posee acción analgésica.

Palabras clave: Plantas medicinales; Aloe vera; Acción analgésica, Liliaceae; Liofilización; Ratones.

(17)

Todas las administraciones fueron realizadas isovolumétricamente por vía oral.

El extracto liofilizado de A. vera fue suministrado por el Centro de Investigaciones y Desarrollo de Medicamentos (La Habana, Lote 11-91 E275) y la dosis aplicada se calculó a partir de sólidos totales de liofilizado.

Modelo del plato caliente

Se realizó conforme al método descrito por Woolfe y MacDonald4 con ligeras modificaciones que se describen a continuación.

Dos horas después de administradas las solucio-nes, se colocó cada animal dentro de un cilindro de cristal de una altura de 30 cm, el cual descansa sobre una bandeja metálica a 55 oC de temperatura constante. Se midieron dos variables: tiempo que demora en lamerse las patas posteriores (respuesta 1) y tiempo que demora en saltar buscando el borde superior del cilindro (respuesta 2), las cuales fueron expresadas en segundos.

Modelo de ácido acético

Este estudio fue realizado conforme al método

descrito por Koster et al 5 con algunas modificacio-nes que se describen a continuación.

A las dos horas de haber administrado los tratamientos correspondientes, se suministró ácido acético al 0,75 % (0,1mL/10 g) por vía intraperi-toneal, y se dejó al animal en reposo en su jaula para medir las variables siguientes: tiempo que demora en hacer la primera contorsión abdominal (segun-dos), respuesta-1; y el número total de contorsiones durante 15 minutos, respuesta-2.

Aquellos animales que en un período de 15 mi-nutos no presentaron ninguna contorsión se consi-deraron ausentes para la primera respuesta y para la segunda variable igual a cero.

Procesamiento de los datos

Para el análisis estadístico de los resultados se docimó la hipótesis de distribución normal de las variables estudiadas. Se empleó el ANOVA y en caso de ser significativo se aplicó la prueba "T" para determinar si existen diferencias entre dos medias. El nivel de significación fue de p < 0,05.

RESULTADOS

En el modelo del plato caliente no se encontró diferencias significativas para la primera respuesta, o sea, el tiempo que tarda en lamerse las patas posteriores, entre las medias del grupo control y los tratados; sin embargo fue significativo para la segunda respuesta, tanto para los animales que recibieron indometacina (10 mg/kg po) como el ex-tracto liofilizado (500 mg/kg po) (tabla 1).

Tabla 1. Efecto analgésico del Aloe vera en el modelo del

plato caliente en ratones (n=10)

Tratamiento Respuesta-1(segundos) Respuesta-2(segundos) Control 28,90 ± 7,40 60,20 ± 14,70 Indometacina

(10 mg/kg) 31,70 ± 14,90 129,60 ± 53,00*

Aloe vera

(500 mg/kg) 35,40 ± 17,00 123,30 ± 28,50* * p < 0,05. Los valores se expresan como media + DE.

El extracto acuoso liofilizado de A. vera (500 mg/kg po) no modificó significativamente el tiempo en aparecer la primera contorsión, pero si disminuyó el número de éstas durante 15 minutos en el modelo de ácido acético intraperitoneal (tabla 2).

(18)

Tabla 2. Efecto analgésico del Aloe vera en el modelo de

contorsiones inducidas por ácido acético en ratones (n=10)

Tratamiento Respuesta-1(segundos) (contorsiones/15 min)Respuesta-2 Control 212,40 ± 71,90 26,40 ± 7,30 Indometacina

(10 mg/kg) 265,40 ± 153,30 19,90 ± 8,70*

Aloe vera

(500 mg/kg) 232,40 ± 95,30 17,50 ± 4,90* * p < 0,05. Los valores se expresan como media + DE.

DISCUSION

En nuestras series experimentales encontramos que el extracto acuoso liofilizado de A. vera inhibió significativamente el número de contorsiones dolo-rosas inducidas por un agente químico (ácido acético intraperitoneal) y el tiempo que demoran en saltar los animales ante un estímulo térmico (plato caliente). Estas variables las consideramos más relevantes que las respuestas-1, las cuales repre-sentan el tiempo mínimo que puede causar una reacción dolorosa en cada animal y cuya medición es considerablemente más subjetiva, por lo cual consideramos que la prueba en su conjunto es positiva y concluimos que el extracto evaluado de A. vera posee efecto analgésico.

En la literatura revisada no encontramos reportes sobre la actividad analgésica sistémica de extractos de A. vera y sólo se indica dicho efecto en una aplicación tópica, lo cual se atribuye a la inhibición de bradikininas.3 Además, hay trabajos que de-muestran la presencia de salicilatos en su composi-ción.6 Estos estudios pueden explicar parcialmente

la acción analgésica sistémica encontrada en nues-tro trabajo.

SUMMARY

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Roig JT. Plantas medicinales, aromáticas o venenosas en Cuba. La Habana: Editorial Científico-Técnica, 1988:819--22.

2. Larionova M, Menéndez R, Valiente O. Estudio fitoquímico comparativo de los extractos de Aloe barbadensis Mill y Aloe arborescens Mill. En: Compendio de investigaciones sobre el Aloe barbadensis Mill (Sábila) cultivado en Cuba (I). La Habana: FAR, 1990:7-35.

3. Natow A. Aloe vera, fiction or fact. Cutis 1986;37(2):106-8. 4. Woolfe G, MacDonald AD. The evaluation of the analgesic

action of penthidine hydrochloride (Demerol). J Pharmacol Exp Ther 1944;80:300.

5. Koster R, Anderson M, Beer EJ. Acetis acid for analgesic screening. 1959;18:412.

6. Klein AD, Penneys NS. Aloe vera. J Am Acad Dermatol 1988;18(4 Part 1):714-20.

Dr. Juan A. Furones Mourelle, Laboratorio Central de

Farma-cología. Facultad de Medicina "Dr. Salvador Allende". Carvajal s/n esquina Agua Dulce y A, Cerro, Ciudad de La Habana, CP: 12000, Cuba.

In order to stablish analgesic effect of a lyophilized aqueous extract from Aloe vera L, a dose of 500 mg/kg per os was administered in experimental models of hot dishes and contortions induced by acetic acid. Significant differences were found among controls and treated groups, indicating that extract of A. vera, has an analgesic action.

Key words: Plants, medicinal; Aloe vera; Analge-sic activity; Lilliaceae; Freeze drying; Mice.

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INDUSTRIA MEDICOFARMACEUTICA. CENTRO DE INVESTIGACION Y DESARROLLO DE MEDICAMENTOS. DEPARTAMENTO DE INVESTIGACIONES MICROBIOLOGICAS

EVALUACION GENOTOXICA DE UN EXTRACTO ACUOSO

DE Aloe vera L

Lic. Alberto Ramos Ruiz,

1

Lic. Aymee Edreira Armenteros,

2

Lic. Aida Villaescusa González,

3

Lic. Angel Vizoso Parra

3

y Lic. María Julia Martínez

4

RESUMEN

INTRODUCCION

El Aloe vera L. (figura), conocido comúnmente en Cuba como sábila, es una planta empleada ex-tensamente en la medicina tradicional. Se le atribuyen numerosos efectos, tales como antiul-ceroso, antiinflamatorio, hepatoprotector, cicatri-zante y analgésico,1 muchos de los cuales han sido

comprobados en modelos experimentales y en-sayos clínicos.2,3

En cuanto a estudios toxicológicos, la informa-ción disponible indica una buena tolerancia en en-sayos de toxicidad aguda, con valores de LD50 de 3,6 g/kg por vía subcutánea3 y ausencia de letalidad hasta 12 g/kg (Tillán J., comunica-ción personal). No se han encontrado reportes

1 Licenciado en Bioquímica. Investigador Agregado. CIDEM. 2 Licenciada en Bioquímica. Aspirante a Investigadora. CIDEM. 3

Licenciado(a) en Biología. Investigador(a) Agregado(a). CIDEM.

4

Se realizó la evaluación mutagénica de un extracto acuoso liofilizado de hojas de Aloe vera L., para la cual se emplearon tres ensayos a corto plazo: inducción de mutaciones puntuales (supresores) en el locus methG1 de Aspergillus nidulans, segregación mitótica en un diploide heterocigótico de Aspergillus nidulans y el test de micronúcleos en médula ósea de ratón. Para los ensayos in vitro se evaluaron concentraciones entre 0,05 y 5 mg de extracto de aloe/mL en medio de cultivo (mutaciones puntuales) y de 0,04 a 1 mg/mL (segregación mitótica); se empleó el método de incorporación en placa. No se detectaron aumentos significativos para la frecuencia de mutantes supresores en el primer ensayo, ni de sectores segregantes homocigóticos en el segundo, que son indicadores de genotoxicidad para estas pruebas. En el ensayo in vivo se emplearon ratones de la línea isogénica suizo, a los que se hicieron dos administraciones del extracto por vía intragástrica, en dosis de 0,5, 1,0 y 2,0 g/kg/día, con sacrificio 24 horas después de la última aplicación. En ningún caso se detectó efecto citotóxico sobre la proliferación celular en la médula ósea, ni aumentos significativos en la frecuencia de eritrocitos policromáticos micronucleados 2(mPCE), indicador de mutagenici-dad para este ensayo.

Palabras clave: Aloe vera; Genotoxicidad; Aspergillus nidulans; Test de mi-cronúcleos; In vitro.

(20)

experimentales sobre la toxicidad genética en esta planta.

Con el fin de obtener información al respecto, se evaluó el comportamiento de un extracto acuoso de sábila en tres ensayos de mutagenicidad. De estos, dos fueron pruebas in vitro que emplean el hongo ascomiceto Aspergillus nidulans: inducción de mu-taciones génicas (supresores del locus methG1) y segregación mitótica en un diploide heterocigótico para mutaciones recesivas del color de los conidios, que detecta procesos de crossing-over mitótico, aneuplodía y clastogénesis. Un tercer ensayo, el test de micronúcleos en médula ósea de ratón, permite evaluar la inducción de daño cromosómico in vivo.

La primera de estas pruebas, se basa en la ocurrencia de supresión extragénica en una cepa auxotrófica para metionina, Aspergillus nidulans FGSC 219 (biA1; methG1). Las colonias mutantes, supresores del marcador methG1, se identifican porque han recuperado la capacidad de crecer en ausencia de metionina y en su mayoría exhiben rasgos morfológicos distintivos como pobre coni-diación y pigmentación oscura o coniconi-diación densa y bordes hialinos.4

Por otra parte, en cepas diploides de Aspergillus nidulans convenientemente marcadas se hace posi-ble con relativa facilidad poner de manifiesto la ocurrencia de segregación somática, ocasionada por crossing-over mitótico y/o malasegregación de cromosomas (como procesos primarios o a con-secuencia de mutaciones previas con efectos semi-dominantes sobre la viabilidad). Estas cepas son heterocigóticas para los marcadores recesivos de color de los conidios y al ocurrir alguno de los fenómenos antes mencionados, aparecen en las colonias expuestas sectores, bandas o puntos de conidiación de color diferente al resto.5

El ensayo de inducción de micronúcleos en la médula ósea de ratón es una prueba in vivo amplia-mente validada y permite detectar agentes que causan tanto ruptura cromosómica (y cromatídica) como pérdida de cromosomas completos (al afectar, por ejemplo, la función del huso mitótico). En ambos casos, la migración y distribución de parte del mate-rial genético se ven alterados durante la anafase y telofase, lo cual conduce a la formación de núcleos secundarios o ‘‘micronúcleos’’. Estos pueden identi-ficarse fácilmente en eritrocitos jóvenes de la médula ósea.6

MATERIALES Y METODOS

Material vegetal

Las hojas se recolectaron en la Estación Experi-mental ‘‘Dr. Juan Tomás Roig’’ durante los meses de agosto y noviembre de 1991. Un ejemplar de la planta se encuentra depositado en el herbario de la estación experimental, identificado con el registro 4591. Estas se lavaron con agua corriente y se almacenaron de nueve a quince días en frío (2 a 8 ºC), protegidas de la luz. Transcurrido ese tiempo se molieron, y la mezcla resultante (macerado) se reflujó 30 min, enfrió y filtró al vacío. El filtrado, (1,19 % de sólidos totales) se liofilizó y posterior-mente se almacenó, protegido de la luz en una desecadora con silicagel, hasta su uso.

Ensayo de supresores del locus methG1

en Aspergillus nidulans

Para la prueba de inducción de mutaciones géni-cas (supresores del locus methG1) se empleó la cepa haploide FGSC 219 (biA1; methG1). Se preparó una suspensión de conidios en solución salina con 0,01 % de Tween 80. En erlenmeyers, con 250 mL de medio mínimo (MM) agarizado, mantenido a 50 ºC, se inocularon 2,8 x 107 conidios y se adicionaron distintos volúmenes del extracto de

Figura. Aloe vera L (sábila).

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