WWW.CLONGENE.COM
COVID-19 IgG/I
g
M
Rapid Test Cassette
(WB/S/P)
Código del producto: ICOV4212-100511INFORMACI
Ó
N DEL PRODUCTO (FICHA T
É
CNICA)
Para uso exclusivo en el diagnóstico profesional e in vitro
PANORAMA
La enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19) es causada por un coronavirus. Los coronavirus son una gran familia de virus que pueden causar enfermedades en animales o humanos. En raras ocasiones, los coronavirus animales pueden infectar a las personas y luego propagarse entre personas, como en el caso de MERS-CoV, SARS-CoV y ahora también con este nuevo virus (llamado SARS-CoV-2).
El virus que causa COVID-19 se transmite principalmente a través de gotitas que se generan cuando una persona infectada tose, estornuda o habla. Actualmente se piensa que una persona infectada puede pasar hasta 14 días antes de notar algún síntoma. Según la OMS, el período de incubación es, en promedio, de cinco a seis días. Los síntomas más comunes de COVID-19 son fiebre, cansancio y tos seca. Ha habido informes de personas que fueron infectadas por individuos que sólo habían mostrado síntomas leves o no específicos de la enfermedad. En algunos pacientes el virus puede provocar una enfermedad grave, que incluye dificultad para respirar y neumonía. Las muertes se han producido principalmente entre pacientes de edad avanzada y/o con enfermedades crónicas subyacentes previas. Cuando el virus SARS-CoV-2 infecta a un organismo, el ARN, el material genético del virus, es el primer marcador que se puede detectar. El perfil de carga viral del SARS-CoV-2 es similar al de las influenzas, que alcanza su punto máximo alrededor del momento de la aparición de los síntomas y luego comienza a disminuir. Con el desarrollo del curso de la enfermedad después de la infección, el sistema inmunológico humano producirá anticuerpos, entre los cuales la IgM es el anticuerpo temprano producido por el cuerpo después de la infección, lo que indica la fase aguda de la infección. Los anticuerpos IgG contra el SARS-CoV-2 se vuelven detectables más tarde después de la infección. Los resultados positivos tanto para IgG como para IgM pueden ocurrir después de la infección y pueden ser indicativos de una infección aguda o reciente. El IgG indica la fase de convalecencia de la infección o antecedentes de infecciones pasadas.
Sin embargo, tanto la IgM como la IgG tienen un período de ventana desde la infección por el virus hasta la producción de anticuerpos, la IgM casi aparece después del inicio de la enfermedad varios días, por lo que su detección a menudo va por detrás de la detección de ácido nucleico y es menos sensible que la detección de ácido nucleico. En los casos en que las pruebas de amplificación de ácido nucleico
WWW.CLONGENE.COM son negativas y existe un fuerte vínculo epidemiológico con la infección por COVID-19, las muestras de suero pareadas (en la fase aguda y convaleciente) podrían respaldar el diagnóstico.
USO PREVISTO
El casete de prueba rápida COVID-19 IgG/IgM es un inmunoensayo de flujo lateral diseñado para la detección cualitativa de anticuerpos IgG e IgM contra el virus SARS-CoV-2 en muestras de sangre total, suero o plasma de individuos sospechosos de infección por COVID-19 por su proveedor de atención médica.
La prueba rápida COVID-19 IgG/IgM es una ayuda en el diagnóstico de pacientes con sospecha de infección por SARS-CoV-2 junto con la presentación clínica y los resultados de otras pruebas de laboratorio. Se sugiere usarlo como un indicador de prueba complementario para casos sospechosos con prueba de ácido nucleico negativa del nuevo coronavirus o usarse junto con la prueba de ácido nucleico en casos sospechosos. Los resultados de las pruebas de anticuerpos no deben usarse como la única base para diagnosticar o excluir la infección por SARS-CoV-2 o para informar el estado de la infección.
Los resultados negativos no descartan la infección por SARS-CoV-2, particularmente en aquellos que han estado en contacto con personas infectadas conocidas o en áreas con alta prevalencia de infección activa. Se deben considerar las pruebas de seguimiento con un diagnóstico molecular para descartar infección en estos individuos.
Los resultados positivos pueden deberse a una infección pasada o presente con cepas de coronavirus que no sean de SARS-CoV-2.
La prueba está diseñada para ser utilizada en laboratorios clínicos o por trabajadores de la salud en el punto de atención, no para uso doméstico. La prueba no debe usarse para la detección de sangre donada.
MÉTODO
El casete de prueba rápida COVID-19 IgG/IgM consiste en:
1) una almohadilla de conjugado de color borgoña que contiene antígenos recombinantes del SARS-CoV-2 conjugados con oro coloide (conjugados del SARS-SARS-CoV-2).
2) una tira de membrana de nitrocelulosa que contiene dos líneas de prueba (líneas IgG e IgM) y una línea de control (línea C).
La línea IgM está cubierta con el anticuerpo IgM anti-humano ratón, la línea IgG está cubierta con anticuerpo IgG anti-humano ratón. Cuando se dispensa un volumen adecuado de muestra de prueba en el pocillo de muestra del casete de prueba, la muestra migra por acción capilar a través del casete. Los anticuerpos IgM contra el SARS-CoV-2, si están presentes en la muestra, se unirán a los conjugados del SARS-CoV-2. El inmunocomplejo es luego capturado por el reactivo cubierto en la banda de IgM, formando una línea de IgM de color borgoña, lo que indica un resultado positivo de la prueba de IgM anti-SARS-CoV-2. Los anticuerpos IgG contra el SARS-CoV-2, si están presentes en la muestra, se unirán
WWW.CLONGENE.COM a los conjugados de SARS-CoV-2. El inmunocomplejo es luego capturado por el reactivo que recubre la línea de IgG, formando una línea de IgG de color borgoña, lo que indica un resultado positivo de la prueba anti-SARS-CoV-2 IgG.
La ausencia de líneas T (IgG e IgM) sugiere un resultado negativo. Sirviendo como un control del procedimiento, siempre aparecerá una línea de color en la región de la línea de control que indica que se ha agregado el volumen adecuado de muestra y que se ha producido la absorción de la membrana.
CONTENIDO
La prueba contiene una tira de membrana recubierta con anticuerpo IgM anti-humano ratón y anticuerpo IgG anti-humano ratón en la línea de prueba, y una almohadilla de tinte que contiene oro coloidal junto con antígeno recombinante del virus SARS-CoV-2. La cantidad de pruebas está impresa en la etiqueta.
Materiales Incluidos
• Casete de prueba • Gotero
• Buffer (PBS, ProClin300) • Folleto adjunto
Materiales requeridos pero NO incluidos
• Reloj o temporizador
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Almacénese tal como está empaquetado en la bolsa sellada a la temperatura (4-30 ℃ o 40-86 ℉). El kit es estable dentro de la fecha de vencimiento impresa en la etiqueta. Una vez abierta la bolsa, la prueba debe usarse dentro de una hora. La exposición prolongada a un ambiente cálido y húmedo provocará el deterioro del producto. El LOTE y la fecha de vencimiento están impresos en la etiqueta.
MUESTRA
• La prueba se puede utilizar para analizar muestras de sangre completa (sangre de venopunción y sangre de punción capilar en el dedo)/suero/plasma (EDTA, heparina, citrato). Para recolectar muestras de sangre total, suero o plasma siguiendo los procedimientos habituales de laboratorio clínico.
• Separe el suero o el plasma de la sangre lo antes posible para evitar la hemólisis. Utilice únicamente muestras claras no hemolizadas.
• Almacene las muestras a 2-8 ℃ (36-46 ℉) si no se analizan inmediatamente. Almacene las muestras de sangre entera de suero/plasma/venopunción anticoagulada a 2-8 ℃ durante un máximo de 3 días. Las muestras de suero/plasma deben congelarse a -20 ℃ (-4℉) para un almacenamiento más prolongado. No congele muestras de sangre entera.
• Las muestras de sangre fresca por punción digital deben recolectarse y analizarse inmediatamente.
WWW.CLONGENE.COM
• Evite múltiples ciclos de congelación-descongelación. Antes de la prueba, mantenga las muestras congeladas a temperatura ambiente lentamente y mezcle suavemente. Las muestras que contienen partículas visibles deben aclararse mediante centrifugación antes de la prueba.
• No utilice muestras que demuestren lipemia, hemólisis o turbidez importantes para evitar interferencias en la interpretación de los resultados.
PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA
Previo a usar la prueba, deje que la prueba y las muestras se adapten a la temperatura (15-30℃ o 59-86℉).
1. Retire el casete de prueba de la bolsa sellada.
2. Sostenga el gotero verticalmente y transfiera 1 gota (aproximadamente 10 μl) de la muestra al frente
del pocillo de la muestra (S) asegurándose de que no haya burbujas de aire. Para mayor precisión, transfiera la muestra con una pipeta capaz de suministrar 10 μl de volumen. Vea la siguiente ilustración.
3. Agregue 2 gotas (aproximadamente 70 μl) del buffer inmediatamente en el pocillo de la muestra (S).
4. Inicie el temporizador. Espere a que aparezcan las líneas de colores. Interprete los resultados de la prueba a los 15 minutos. No lea los resultados después de 20 minutos.
CONTROL DE CALIDAD
Se incluye un control para el procedimiento en la prueba. Una línea de color que aparece en la región de control (C) se considera un control de procedimiento interno. Confirma que hay un volumen de muestra suficiente, una absorción adecuada de la membrana y una técnica de procedimiento correcta.
Los estándares de control no se suministran con este kit. Sin embargo, se recomienda que los controles positivos y negativos se prueben como una buena práctica de laboratorio para confirmar el procedimiento de la prueba y verificar el desempeño adecuado de la prueba.
1 gota de muestra 2 gotas del buffer
Área de la muestra
WWW.CLONGENE.COM
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Positivo: La línea de control y al menos una línea más de prueba aparecen en la membrana.
La aparición de la línea de prueba IgG indica la presencia de anticuerpos IgG contra el virus CoV-2. La aparición de la línea de prueba IgM indica la presencia de anticuerpos IgM contra el virus SARS-CoV-2. Y si aparecen las líneas IgG e IgM, indica la presencia de anticuerpos IgG e IgM contra el virus SARS-CoV-2. Independientemente de lo oscura o clara que pueda parecer la línea.
Negativo: Aparece una línea de color en la región de control (C). No aparece ninguna línea de color aparente en la región de la línea de prueba.
Inválida: La línea de control no aparece. Las razones más probables de la falla de la línea de control es un volumen de la muestra insuficiente o que las técnicas de procedimiento sean incorrectas. Revise el procedimiento y repita la prueba con un nuevo casete de prueba. Si el problema persiste, deje de usar el kit de prueba inmediatamente y comuníquese con su distribuidor local.
Los resultados de las pruebas de anticuerpos no deben utilizarse como única base para diagnosticar o descartar la infección por SARS-CoV-2.
Los resultados negativos no descartan la infección por SARS-CoV-2, particularmente para pacientes que han estado en contacto con personas identificadas como infectadas o en áreas con alta prevalencia de infección activa. Es necesario realizar pruebas de seguimiento con una prueba de diagnóstico molecular para descartar una infección en estos individuos.
Las muestras con resultados positivos deben confirmarse con métodos de diagnóstico alternativos y hallazgos clínicos antes de realizar una determinación de diagnóstico.
Positivo Positivo Positivo
WWW.CLONGENE.COM
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
• Sólo para uso diagnóstico in vitro.
• Para profesionales de la salud y profesionales en centros de atención.
• No se use después de la fecha de vencimiento.
• Lea toda la información de este folleto antes de realizar la prueba.
• El casete de prueba debe permanecer en la bolsa sellada hasta su uso.
• Todas las muestras deben considerarse potencialmente peligrosas y manipularse de la misma manera que un agente infeccioso.
• El casete de prueba usado debe desecharse de acuerdo con las regulaciones federales, estatales y locales.
LIMITACIONES
• El casete de prueba rápida COVID-19 IgG/IgM está limitado a proporcionar una detección cualitativa. La intensidad de la línea de prueba no se correlaciona necesariamente con la concentración del anticuerpo en la sangre.
• Cada médico debe interpretar los resultados junto con el historial del paciente, los hallazgos físicos, y otros procedimientos de diagnóstico.
• Si los síntomas persisten y el resultado del casete de prueba rápida COVID-19 IgG/IgM es negativo, se recomienda volver a tomar muestras del paciente unos días después o realizar la prueba con un dispositivo de prueba alternativo.
• Un resultado negativo puede presentarse si la cantidad de anticuerpos para el virus del SARS-CoV-2 presentes en la muestra está por debajo del límite de detección de la prueba, o si el virus ha sufrido mutaciones de aminoácidos en el epítopo reconocido por el anticuerpo utilizado en la prueba.
• La recolección adecuada de muestras es fundamental, y no seguir el procedimiento puede dar resultados imprecisos. La recolección inadecuada, el almacenamiento inadecuado de la muestra o la congelación y descongelación de las muestras pueden llevar a resultados imprecisos.
WWW.CLONGENE.COM
CARACTERÍSTICAS DE DESEMPEÑO:
PRECISIÓN
Resumen de la información de la Prueba Rápida COVID-19 IgG/IgM como se muestra a continuación: Con respecto a la prueba de IgM, se realizó el ensayo en 167 muestras clínicas de individuos sospechosos de infección por COVID-19 en comparación con RT-PCR.
COVID-19 IgM:
COVID-19 IgM
RT-PCR
Total
Positivo
Negativo
CLUNGENE
®
Positivo
67
1
68
Negativo
10
89
99
Total
77
90
167
Se realizó una comparación estadística entre los resultados que arrojó una sensibilidad del 87,01%, una especificidad del 98,89% y una precisión del 93,41%.
En cuanto a la prueba de IgG, hemos contado la tasa positiva de los 77 pacientes durante el período de convalecencia.
COVID-19 IgG:
COVID-19 IgG
Número de pacientes durante
el periodo de convalecencia
Total
CLUNGENE
®
Positivo
75
75
Negativo
2
2
Total
77
77
WWW.CLONGENE.COM
REACTIVIDAD CRUZADA E INTERFERENCIA
1. Se evaluó la reactividad cruzada con la prueba de otros agentes causales comunes de enfermedades infecciosas. Algunas muestras positivas de otras enfermedades infecciosas comunes se agregaron a las muestras positivas y negativas del nuevo coronavirus y se analizaron por separado. No se observó reactividad cruzada con muestras de pacientes infectados con VIH, VHA, HBsAg, VHC, TP, HTLV, CMV, FLUA, FLUB, RSV, MP, CP, VPH.
2. Se agregaron sustancias endógenas potencialmente reactivas cruzadas, incluidos componentes séricos comunes, como lípidos, hemoglobina, bilirrubina, en altas concentraciones en las muestras positivas y negativas del nuevo coronavirus y se analizaron por separado. No se observó reactividad cruzada o interferencia en el dispositivo.
Analitos Conc. Muestras
Positiva Negativa Albúmina 20mg/ml + - Bilirrubina 20mg/ml + - Hemoglobina 15mg/ml + - Glucosa 20mg/ml + - Ácido Úrico 200µg/ml + - Lípidos 20mg/ml + -
WWW.CLONGENE.COM
3. Se agregaron otros analitos biológicos comunes a las muestras positivas y negativas del nuevo coronavirus y se analizaron por separado. No se observaron interferencias significativas en los niveles enumerados en la siguiente tabla.
Analitos Conc. (µg/ml) Muestras Positiva Negativa Acetaminofén 200 + - Ácido Acetoacético 200 + - Ácido Acetilsalicílico 200 + - Benzoilecgonina 100 + - Cafeína 200 + - EDTA 800 + - Etanol 1.00% + - Ácido Gentísico 200 + - β - Hidroxibutirato 20,000 + - Metanol 10.00% + - Fenotiazina 200 + - Fenilpropanolamina 200 + - Ácido Salicílico 200 + -
REPRODUCIBILIDAD
Se realizaron estudios de reproducibilidad para la prueba rápida IgG/IgM del nuevo coronavirus en tres laboratorios de consultorios médicos (POL). En este estudio se utilizaron sesenta (60) muestras de suero clínico, 20 negativas, 20 positivas al límite y 20 positivas. Cada muestra se analizó por triplicado durante tres días en cada POL. Los acuerdos intraensayo fueron del 100%. El acuerdo entre sitios fue del 100%.