Universidad Nacional Autónoma de México
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Facultad de Química
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Analítica experimental 2
Analítica experimental 2
Práctica 8
Práctica 8
ANÁLISIS DE CAFEÍNA Y ÁCIDO ACETILSALICÍLICO EN CAFIASPIRINA POR
ANÁLISIS DE CAFEÍNA Y ÁCIDO ACETILSALICÍLICO EN CAFIASPIRINA POR
HPLC
HPLC
Alumnos:
Alumnos:
Hernández Díaz Diana Belén
Hernández Díaz Diana Belén
Legorreta Díaz Verónica
Legorreta Díaz Verónica
Olvera González Estefanía
Olvera González Estefanía
Vázquez González Christian
Vázquez González Christian
Grupo 18
Grupo 18
27 de septiembre de 2018 27 de septiembre de 2018
Práctica 6
ANÁLISIS DE CAFEÍNA Y ÁCIDO ACETILSALICÍLICO EN CAFIASPIRINA.
OBJETIVOS
Determinar cuantitativamente (por el método de estándar externo) el contenido de
cafeína y ácido acetilsalicílico en un analgésico mediante cromatografía líquida de alta eficiencia.
Demostrar las ventajas de la técnica en el análisis para el control de calidad.
CUESTIONARIO PREVIO
1.- Calcula las cantidades de cafeína y ácido acetilsalicílico necesarias para preparar las disoluciones estándar a una concentración de:
Cafeína = 0.030 mg/mL.
Ácido acetilsalicílico = 0.50 mg/mL.
Toma en cuenta para el cálculo, el material volumétrico que se indica en la parte de material y equipo.
2.- ¿Cuál es el sistema de introducción de muestra que se utiliza en los cromatógrafos de líquidos de alta eficiencia?
3.- ¿Cómo funciona el inyector de un cromatógrafo de líquidos para introducir la muestra al sistema?
4.- ¿Qué ventajas y desventajas presenta este tipo de inyector? MATERIAL
4 vasos de precipitados de 100 mL 2 pipeta volumétrica de 2.0 mL 3 matraces volumétricos de 25 mL 2 naves para pesar
1 espátula 1 Jeringa 1 Pipeta beral
1 Embudo de vidrio de tallo largo 1 Mortero con pistilo
1 Jeringa de 100 µl para cromatografía de líquidos. 1 Papel filtro de filtración rápida
REACTIVOS
Metanol (Grado R.A)
Estándar de ácido acetilsalicílico
Fase móvil 1) 65% Ácido Acético al 1% en agua: 35% Metanol. (Para el HPLC 04)
2) 55% Ácido Acético al 1% en agua: 45% Metanol. (Para el HPLC 05) EQUIPOS
HPLC 04 Marca: LS-Class Modelo: s/m
HPLC 05 Marca: Agilent Technologies Modelo: 1220 Infiniti II LC
TÉCNICA ANALÍTICA
Cromatografía de líquidos en fase reversa
METODOLOGÍA EMPLEADA
1. Ajustar el cromatógrafo en condiciones adecuadas para llevar a cabo la separación de la muestra.
2.- Preparar una disolución con el estándar de cafeína (0.030 mg/mL) y ácido acetilsalicílico (0.50 mg/mL) en metanol. Pesar aproximadamente 10 mg del estándar de cafeína y 150 mg de ácido acetilsalicílico, depositar en un matraz de 25.0 mL y agregar metanol cbp 25 mL, agitar. Tomar 2.0 mL de esta solución y llevar a matraz de 25.0 mL y agregar metanol hasta marca de aforo.
3.- Calcula el peso promedio de 5 tabletas de Cafiaspirina pesando tableta por tableta del medicamento a analizar.
4.- Moler 5 tabletas en un mortero, tomar el peso aproximado de 205 mg del polvo de Cafiaspirina y agregar a matraz de 25.0 mL.
5.- Extraer los principios activos con metanol en un matraz volumétrico de 25.0 mL durante 10 minutos (realiza esto en la campana), tomar 2.0 mL de la solución y depositar matraz volumétrico de 25.0 mL. Lleva la disolución a su marca de aforo con metanol. Filtrar
5.- Inyecta cada una de las disoluciones estándar así como la disolución problema que se preparó. DIAGRAMA DE FLUJO
RESULTADOS
Condiciones cromatográficas
Columna: C-18, Marca: Thermofisher, diámetro: 4.6mm, largo 15 cm. Tiempo de corrida: 7 minutos
Flujo: 0.5 mL/min
Volumen de inyección: 20 µL
λ= 254 nm
Peso promedio tabletas de Cafiaspirina Número de tableta Peso (g)
1 0.6430 2 0.6590 3 0.6589 4 0.6601 5 0.6476 Peso promedio: 0.6537 g
Muestra Área Tiempo de retención (min) W (ancho) Tiempo muerto --- 2.213 ---Estándar de Cafeína 1466028.250 4.237 0.577 Estándar de AAS 2971886.000 6.158 1.022 Cafeína 1746100.756 4.237 0.605 AAS 3501952.250 6.158 1.297 Tiempo muerto Cafeína Ácido acetilsalicílico
CALCULOS
Indica los valores del Factor de respuesta (Fr) que obtuviste para la cafeína y el ácido acetilsalicílico.
Concentración del estándar de Cafeína:
0.0105 í 25 × 2 25 × 1000 1 = . í FRcafeína= . . /= . í
Concentración del estándar de Cafeína:
0.1595 25 × 2 25 × 99 100 × 1000 1 = . FRAAS=. . /= . / AAS
3.- ¿Cuál es la concentración de cafeína por mg/tableta?
0.0336 í × 1746100.756 1466028.250= 0.0400 í 0.0400 í × 25 2 × 25 0.2074 × 0.6537 1 = . í/
4.- ¿Cuál es la concentración del ácido acetilsalicílico por mg/tableta?
0.5053 × 3501952.250 2971886.000= 0.0400 0.5904 × 25 2 × 25 0.2074 × 0.6537 1 = . /
5.- ¿Qué ventajas y desventajas se observó durante la realización de esta práctica por el método de estándar externo, y el no realizarlo por estándar interno?
Parámetros cromatográficos Platos teóricos (N)
N=16 (Tr/W)2 =
Factor de retención (k) K= (Tr-TM)/Tm
Factor de simetría (As)2
As= W0.05/2f
Resolución (Rs)
Eficiencia de la comuna (H) H=L/N
DISCUSION DE RESULTADOS
CONCLUSION
BIBLIOGRAFIA
- Fundamentos de química analítica. Skoog, West, Holler, Crouch. Thomson. 8va edición. - Análisis instrumental. Kenneth, Judith Rubinson. Prentice Hall. Madrid 2001
