GUÍA DE SOLUCIÓN DE PROBLEMAS EN CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA

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GUÍA DE SOLUCIÓN

DE PROBLEMAS EN

CROMATOGRAFÍA

LÍQUIDA

(2)

COMUNÍQUESE CON PHENOMENEX SI NECESITA:

n Columnas para HPLC (desde capilares hasta preparativas)

n Columnas de exclusión por tamaño (SEC): acuosa (GFC) o no acuosa (GPC)

n Análisis de aminoácidos

n Columnas especializadas para el análisis de:

n Drogas farmacéuticas básicas, ácidas o anfotéricas n Separaciones de pH alto/bajo (pH 1-12)

n Proteínas/Péptidos por fase reversa

n Biopolímeros-proteínas y ácidos nucléicos por métodos

de GFC/SEC

n Polímeros sintéticos

n Alimentos y bebidas

n Muestras ambientales

n Drogas en fluidos biológicos

n Fase estacionaria de HPLC a granel

n Accesorios para HPLC tales como: n Filtros para muestras y solventes

n Protección de columnas SecurityGuard

n Filtros para jeringa n Jeringas y viales

n Calentador de columnas/Enfriador-Calentador de columnas

n Válvulas de inyección para HPLC

n Tubos y conectores

n Desgasificadores de solventes

n Selectores de columnas

n Procesadores de fluidos

n Columnas para gases

n Tubos de SPE (extracción por fase sólida), Platos de 96 pocillos

n Soporte para aplicaciones, desarrollo y validación

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ÍNDICE

I. Introducción ... 1

II. Presión anormal ... 2

III. Fugas ... 4

IV. Problemas con el cromatograma ... 6

V. Problemas con el inyector ... 14

VI. Problemas detectados por medio del olfato, vista u oído ... 15

VII. Areas de problemas clave y mantenimiento preventivo ... 17

Filtros para jeringa Phenex™_{... 20}

SecurityGuard Sistema de Cartuchos de Protección Universal para HPLC...19

Este manual no puede ser copiado ni reproducido total o parcialmente sin la autorización por escrito de Phenomenex, Inc. USA.

Aún cuando se hecho todo lo posible para asegurar la confiabilidad de la información contenida en esta guía, Phenomenex no asume responsabilidad por el uso que se dé a la misma. Es bienvenida cualquier adición o corrección para ser incorporadas en futuras ediciones.

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I. INTRODUCCIÓN

LOCALIZANDO Y CORRIGIENDO EL PROBLEMA

La correcta identificación del problema es la mejor forma de acercarse a la solución del mismo. Esta guía se divide en cinco categorías principales de síntomas para ayudarle en una forma efectiva a identificar el origen del problema que usted esta confrontando:

• presión anormal

• fugas

• problemas con el cromatograma • problemas con el inyector

• otros problemas detectados por los sentidos del olfato, vista u oído Cuando haya corregido el problema, regístrelo en un libro de incidentes que será muy valioso en el futuro para la identificación de los problemas.

PREVENCIÓN

Muchos problemas en cromatografía líquida pueden evitarse con el mantenimiento preventivo rutinario, por ejemplo el reemplazo de los sellos (juntas) de la bomba a intervalos regulares, puede eliminar las fallas asociadas a esas juntas (sellos). La sección VII lista las áreas de problemas más comunes para cada módulo y las prác-ticas de mantenimiento preventivo que reducen su frecuencia. Estas sugerencias pueden ser modificadas para ajustarse al modelo de su cromatógrafo y para ser implementadas como una rutina en su laboratorio.

DONDE CONSEGUIR AYUDA ADICIONAL

• Deben consultarse los manuales del operador así como de servicio. Estos manuales contienen diagramas, y procedimientos a seguir para resolver pro-blemas en algún modelo específico, así como números de parte para ordenar repuestos.

• El conocimiento de otras personas en el laboratorio que hayan experimentado un problema similar y lo hayan resuelto, es un valioso recurso.

• El fabricante del instrumento puede ayudarle también. La mayoría de ellos ofre-cen soporte técnico sin costo a sus clientes.

• Phenomenex, tiene un equipo de consultores técnicos experimentados que pueden asistirle en casi cualquier problema de cromatografía. Llámenos, envíe-nos un fax o email.

• Phenomenex ofrece seminarios para HPLC.

• Hay un numero de fuentes de referencia que pueden guiarle en la solución del problema:

J.W. Dolan and L.R. Snyder, Troubleshooting LC Systems, Humana Press, NJ (1989).

L.R. Snyder and J.J. Kirkland, Introduction to Modern Liquid Chromatography, 2nd ed., Wiley, NY (1979).

D.J. Runser, Maintaining and Troubleshooting HPLC Systems - A User’s Guide, Wiley, NY (1981).

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II. PRESIÓN ANORMAL

Un cambio en la presión de operación es un signo de que puede haber un pro-blema. Seleccione abajo cual categoría se parece más a los síntomas que presenta su instrumento de HPLC. Entonces siga las sugerencias para corregir el problema.

1. Está apagado 1. Enciéndalo

2. Fusible quemado 2. Reemplace el fusible

3. Fallas o ajuste del controlador 3. a. Verifique que la programación es

la correcta

b. Repare o cambie el controlador

4. Pistón roto 4. Cambie el pistón

5. Aire atrapado en el cabezal de 5. Desgasifique los solventes, elimine el

la bomba aire de la bomba principal

6. Fase móvil insuficiente 6. a. Rellene el recipiente de la fase

móvil

b. Limpie el frit de entrada si

está tapado

7. Válvula check fallando 7. Cambie la válvula check

8. Fuga mayor 8. Apriete o cambie los conectores

A. No hay flujo ni lectura de presión

B. No hay lectura de presión y el flujo es normal

CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

1. Medidor fallando 1. Cambie el medidor

2. Transductor de presión fallando 2. Cambie el transductor

1. El ajuste del flujo es demasiado alto 1. Ajústelo adecuadamente

2. Frit de la columna tapado 2. a. Monte la columna al revés y pase flujo

b. Reemplace frit* c. Reemplace la columna

3. Fase móvil incorrecta, precipitación 3. a. Use la fase móvil correcta de la solución reguladora (búfer) b. “Lave” la columna

4. Columna incorrecta 4. Use la columna adecuada

5. Inyector tapado 5. Limpie o cambie el inyector

6. Temperatura de la columna 6. Aumente la temperatura

demasiado baja

7. Mal funcionamiento del controlador 7. Repare o cambie el controlador 8. Guarda columna (pre-columna) tapada 8. Cambie el guarda columna 9. Filtro en línea bloqueado 9. Remueva o cambie el filtro en línea

C. La presión se mantiene alta

(6)

1. Vea la sección C 1. Vea la sección C

II. PRESIÓN ANORMAL

(continúa)

D. La presión se mantiene baja

1. El ajuste del flujo es demasiado bajo 1. Ajuste el flujo correctamente

2. Fuga en el sistema 2. Localícela y corríjala

3. Columna incorrecta 3. Use la columna apropiada

4. Temperatura de la columna 4. Disminuya la temperatura

demasiado alta

5. Mal funcionamiento del controlador 5. Repare o cambie el controlador

E. Presión en aumento

F. Presión llegando a cero

G. Presión disminuyendo pero no en cero

H. La presión sube y baja

1. Aire atrapado en la bomba 1. a. Desgasifique el solvente

b. Saque el aire la bomba

2. Válvula check fallando 2. Cambie la válvula

3. Sello (junta) de la bomba fallando 3. Cambie el sello de la bomba 4. Desgasificado insuficiente 4 a. Desgasifique el solvente

b. Cambie el método de desgasificar,

use Degassex (desgasificador en línea)

5. Fuga en el sistema 5. Localícela y repárela

6. Uso de elución con gradiente 6. Las variaciones de presión son normales cuando se usa gradiente debido a cambios en la viscosidad

1. Vea las secciones A y B 1. Vea las secciones A y B

(7)

III. FUGAS

Las fugas se resuelven casi siempre apretando o cambiando un conector. De cualquier forma debe tomar en cuenta que apretando de más los conectores de metal pueden dañarse y causar fuga. Así mismo los conectores de plástico pueden desgastarse apretándolos demasiado. Cuando un conector sigue con fuga después de apretarlo un poco más, es mejor quitarlo y examinario para comprobar que no esta dañado debido a un ferrul deformado o a partículas de los sellos (juntas). Los conectores que presenten algún daño deben desecharse.

A. Conectores con fugas

1. Conector flojo 1. Apriételo

2. Conector trasroscado 2. Cámbielo

3. Conectores demasiado apretados* 3. a. Aflójelo y vuelva a apretarlo

b. Cámbielo

4. Conector sucio 4. a. Desmonte y límpie el conector

b. Cámbielo

5. Partes que no ajustan 5. Use partes de una misma marca

B. Fugas en la bomba

1. Válvula check mal apretada 1. a. Apriete la válvula check (no se exceda)

b. Cámbiela

2. Conectores flojos 2. Apriete los conectores, sin

excederse

3. Falla en los sellos del mezclador 3. a. Cambie las sellos

b. Cambie el mezclador

4. Fallas en los sellos de la bomba 4. Repare o cambie los sellos 5. Falla en la presión del transductor 5. Repárelo o cámbielo 6. Falla en el apagador del regulador 6. Cámbielo

7. Falla en la válvula proporcionadora 7. a. Observe los diafragmas,

cámbielos si fugan

b. Verifique si hay daño en los

conectores, cámbielos

8. Válvula de purga 8. a. Apriete la válvula

b. Cambie la válvula

(8)

III. FUGAS

(continúa)

C. Fugas en el inyector

1. Falla en el sello del rotor 1. Reconstruya o cambie el inyector 2. Serpentín (loop) bloqueado 2. Cambie el serpertín (loop) 3. Sello del puerto de inyección flojo 3. Ajústelo

4. Diámetro de la aguja de la 4. Use la jeringa correcta jeringa incorrecto

5. Línea de drenaje succionando 5. Mantenga la línea de drenaje arriba de la superficie de drenaje

6. Línea de drenaje bloqueada 6. Cambie la línea de drenaje

D. Fuga en la columna

1. Conector flojo 1. Apriete el conector

2. Material de empaque de la columna 2. Desmonte, enjuague el ferrul y

en el ferrul móntelo de nuevo

3. Frit con espesor incorrecto 3. Use el frit apropiado (vea la tabla de abajo)

E. Fugas en el detector

1. Falla en el sello de la celda 1. a. Evite una presión excesiva

b. Cambie el sello

2. Ventanas de la celda rotas 2. Cambie las ventanas

3. Conectores goteando 3. Apriételos o cámbielos

4. Línea de drenaje bloqueada 4. Cambie la línea de drenaje

5. Flujo de la celda bloqueado 5. Reconstruya o cámbiela

GUÍA PARA LA SELECCIÓN DE LOS FRITS

El tamaño de poro del frit debe ser: Cuando el tamaño de partícula es:

2 - 4 µm

5 - 20 µm

0.5 µm

2 µm

(9)

A. Pico con coleo (Tailing)

1. Frit tapado 1. a. Montar al revés la columna (de ser

posible) y lavar para limpiar el frit*

b. Reemplace la columna

2. Columna con vacío 2. llene el vacío*

3. Pico interfiriendo 3. a. Use una columna más larga

b. Cambie la fase móvil y/o la

selectividad de la columna

4. pH de la fase móvil, incorrecto 4. Ajuste el pH. Para compuestos básicos, pH más bajo da

picos más simétricos.

5. Muestras reaccionando con los 5. a. Agregue un reactivo de pareo

sitios activos iónico o un modificador

básico volátil

b. Cambie la columna

B. Pico con fronteo (fronting)

1. Temperatura baja 1. Aumente la temperatura de la

columna

2. Solvente de la muestra incorrecto 2. Use fase móvil como solvente de inyección

3. Muestra saturada 3. Disminuya la concentración de la

muestra

4. Columna dañada 4. Vea A.1 y A.2

IV. PROBLEMAS CON EL CROMATOGRAMA

Muchos de los problemas en el sistema de LC producen cambios en el cromato-grama. Algunos de esos problemas pueden solucionarse haciendo ajustes en el equipo, mientras otros pueden requerir modificación en los procedimientos de ensayo. La selección correcta del tipo de columna y de fase móvil son la clave para una “buena cromatografía.”

*Vea la garantía de la columna con el fabricante. Remover los conectores puede anular la garantía de la columna, verifique con el fabricante antes de hacerlo. PICO CON COLEO

(10)

C. Picos divididos

1. Contaminación del guarda 1. Remueva el guarda columna y

columna o de la columna analítica haga una corrida, cámbielo de ser necesario. Si la columna analítica se obstruye, móntela al revés y púrguela. Si el problema persiste la columna podría tener contaminantes fuertemente retenidos. Use el procedimiento correcto de

restauración. Si el problema persiste podría ser que la entrada esté tapada.

Cambie la columna.

2. Solvente de la muestra 2. Cambie el solvente. Cada vez

incompatible con la fase móvil que sea posible inyecte las

muestras con fase móvil.

D. Distorsión más grande de los picos

1. Saturación con la muestra 1. Disminuya el tamaño de la muestra

E. Distorsión de los primeros picos

1. Inyección con solvente equivocado 1. a. Reduzca el volumen

de inyección

b. Use un solvente más

débil para la inyección

F. Más coleo (tailing) en los primeros picos que en los últimos

1. Efecto extra columna 1. a. Cambie el tubo del sistema

por uno más corto y de menor

diámetro interno

b. Use una celda del detector

de menor volumen

IV. PROBLEMAS CON EL CROMATOGRAMA (continúa)

PICOS DIVIDIDOS

(11)

G. Aumento de coleo (tailing) al aumentar k’

1. Efectos secundarios de 1. a. Agregue trietilamina

retención en fase reversa (muestras básicas)

b. Agregue acetato

(muestras ácidas)

c. Agregue sal o búfer

(muestras iónicas)

d. Pruebe con una

columna diferente

2. Efectos secundarios de 2. a. Agregue trietilamina

retención en fase normal (compuestos ácidos)

b. Agregue ácido acético

(compuestos ácidos)

c. Agregue agua

(polifuncionales). Solamente

en métodos de fase normal

que usan solventes miscibles

con agua.

d. Pruebe un método de

HPLC distinto

3. Efectos de retención 3. Agregue trietilamina

secundaria, par iónico (muestras básicas)

H. Picos ácidos o básicos con coleo (tailing)

1. Solución reguladora 1. a. Use búfer con concentración

(búfer) incorrecta 50-100 mM

b. Use búfer con pKa igual a la fase móvil

I. Picos extra

1. Otros componentes en la muestra 1. Normal

2. Pico de una inyección previa 2. a. Aumente el tiempo de análisis

eluyendo tardíamente o la curva del gradiente

b. Aumente el flujo

3. Picos fantasma o vacantes 3. a. Verifique la pureza de

la fase móvil

b. Use fase móvil como

solvente de inyección

c. Reduzca el tamaño de la inyección

4. Contaminación 4. Filtre la muestra

(12)

L. Elevación de la línea base

1. Fluctuación en la temperatura. 1. Controle la temperatura de la fase

(Aún los cambios mínimos causan móvil y de la columna, use

que la línea base se mueva arriba intercambiador de calor antes o hacia abajo. Afecta más a detectores del detector

de índice de refracción, de conductividad y de UV, a alta sensibilidad o en modo fotométrico directo.)

2. Fase móvil no homogénea. (Se eleva 2. Use solventes grado HPLC, sales y generalmente a absorbancias altas, aditivos de alta pureza. Desgasifique más que con fluctuaciones la fase móvil antes de usarla, haga

cíclicas de temperatura.) burbujear helio durante su uso.

3. Contaminación o burbuja de 3. Lave la celda con metanol, u otro aire en la celda del detector solvente fuerte. De ser necesario limpie la celda con HNO₃ 1N (jamás use HCl).

4. Salida de línea tapada después del 4. Desconecte o cambie la línea. Vea el

detector. (La alta presión fractura manual del detector para

la ventana de la celda produciendo cambiar la ventana. una línea base con ruido.)

5. Problema en el mezclado de la fase 5. Corregir la composición y/o el flujo. móvil o cambio en la velocidad flujo Para evitar esto, observe

rutinariamente la composición

IV. PROBLEMAS CON EL CROMATOGRAMA (continúa)

J. Movimiento en los tiempos de retención

1. Pobre control de la temperatura 1. Use termostato con la columna

2. Fase móvil cambiante 2. Evite el cambio

(evaporación, reacción, etc.)

3. Acondicionamiento de 3. De más tiempo de acondicionamiento

la columna insuficiente a la columna entre un análisis y otro

K. Cambio abrupto en los tiempos de retención

1. Cambio en el flujo 1. Restablezca el flujo

2. Aire atrapado en la bomba 2. Purgue la bomba para eliminar

el aire

3. Fase móvil incorrecta 3. a. Cambie la fase móvil

por la correcta

b. Ajuste la mezcla apropiada de

fase móvil en el controlador

ELEVACIÓN DE LA LÍNEA BASE Normal Problema

(13)

M. Ruido en la línea base (regular)

1. Aire en la fase móvil, celda del 1. Desgasifique la fase móvil. Purgue

detector o en la bomba el sistema para eliminar el aire del

detector, la celda o la bomba.

2. Fugas 2. Vea la sección III. Verifique que el

sistema no tenga conectores flojos. Vea que la bomba no tenga fugas, incrustaciones de sales o haga ruidos poco comunes. De ser necesario cambie los sellos de la bomba. 3. Mezclado incompleto de la fase móvil 3. Mezcle la fase móvil manualmente

o use un solvente menos viscoso 4. Efecto de temperatura (columna a 4. Reduzca la diferencia de alta temperatura, detector sin calentar) temperaturas o use un

intercambiador de calor

5. Otro equipo electrónico en 5. Ponga aparte del cromatógrafo de

la misma línea líquidos, para determinar si el

problema es externo. Corríjalo de ser necesario.

6. Pulsaciones en la bomba 6. Incorpore un regulador de

pulsaciones en el sistema

IV. PROBLEMAS CON EL CROMATOGRAMA (continúa)

Normal Problema RUIDO DE LA LÍNEA BASE

L. Elevación de la línea base

(continúa) CAUSA PROBABLE SOLUCIÓN

6. Acondicionamiento lento de la 6. Purgue con un solvente

columna especialmente cuando se medianamente fuerte, corra con 10 a

cambia la fase móvil 20 volúmenes de columna con fase

móvil nueva, antes de iniciar el análisis

7. Fase móvil contaminada, deteriorada, 7. Verifique como se prepara la fase o preparada con materiales de móvil. Use solventes de la más alta

baja calidad pureza grado HPLC.

8. Materiales fuertemente retenidos en 8. Use guarda-columna. De ser la muestra (k’ alta) pueden eluir dando necesario purgue la columna con un picos muy gruesos y aparecer una solvente fuerte entre inyecciones o línea base elevada. (Los análisis con periódicamente entre análisis. gradiente pueden agravar este problema.)

9. Fase móvil reciclada, aunque 9. Ajuste la línea base. Use fase móvil el detector no ha sido ajustado nueva cuando los límites dinámicos

del detector son excedidos.

10. Detector (UV) no ajustado al máximo 10. Cambie la longitud de onda de UV

de absorbancia sino a la al máximo de absorbancia

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IV. PROBLEMAS CON EL CROMATOGRAMA (continúa)

N. Ruido en la línea base (irregular)

1. Fugas 1. Vea la sección III. Verifique si hay

conectores flojos. Vea si la bomba gotea, tiene incrustaciones de sales, cambie los sellos de ser necesario. Vea si la celda del detector no tiene fugas.

2. Fase móvil contaminada, deteriorada 2. Verifique como se prepara

o preparada con materiales la fase móvil

de baja calidad

3. Fase móvil con solventes 3. Seleccione y use solo

no miscibles solventes miscibles

4. Detector y registrador electrónicos 4. Aísle electrónicamente ambos.

Vea las instrucciones para

corregir el problema. 5. Aire atrapado en el sistema 5. Purgue el sistema con

un solvente fuerte

6. Burbujas de aire en el detector 6. Purgue el detector. Instale un componente para presión

después del detector.

7. Celda del detector contaminada 7. Limpie la celda con HNO₃ 1N

(Aún las más pequeñas cantidades (nunca use HCl)

de contaminantes producen ruido.)

8. Lámpara del detector muy débil 8. Cambie la lámpara

9. Columna fugando sílica o 9. Cambie la columna

material de empaque

10. Mezclador de fase móvil dañado 10. Repare o cambie el mezclador

o funcionando mal o mezcle fuera de línea si

es isocrático

O. Picos muy anchos

1. Cambio en la composición 1. Prepare fase móvil nueva

de la fase móvil

2. Flujo de la fase móvil demasiado bajo 2. Ajuste el flujo

3. Fugas (especialmente entre 3. Vea la sección III. Verifique que no

la columna y el detector) hayan conectores flojos. Vea que

la bomba no tenga fugas,

Normal Problema

(15)

O. Picos muy anchos (continúe)

4. Ajuste incorrecto del detector 4. Ajúste bien

5. Efectos extra columna 5. a. Inyecte un volumen menor

a. Columna saturada (10 μl vs. 100 µl) o diluya

la muestra a 1:10 y 1:100

b. Tiempo de respuesta del detector b. Reduzca el tiempo de respuesta

largo o volumen de la celda o use una celda más pequeña

demasiado grande

c. La tubería entre la columna y el c. Use una pieza más corta de

detector es demasiado larga tubo con un diámetro interno

de entre 0.005” y 0.007”

d. El tiempo de respuesta del d. Reduzca el tiempo de respuesta

registrador es demasiado largo

6. Concentración de la solución 6. Aumente la concentración reguladora demasiado baja

7. Guarda columna contaminada 7. Cambie el guarda columna

o desgastada

8. Columna contaminada/desgastada. 8. Cambie la columna por una

Conteo de platos muy bajo. nueva del mismo tipo

9. Vacío a la entrada de la columna 9. Cambie la columna por otra nueva 10. Un pico representando dos o más 10. Cambie el tipo de columna para

compuestos pobremente resuelto mejorar la separación

11. Temperatura de la columna muy baja 11. Aumente la temperatura. No exceda los 60 ˚C a menos que el fabricante de la columna indique lo contrario. 12. Constante del tiempo del detector 12. Use una constante más pequeña

demasiado larga

IV. PROBLEMAS CON EL CROMATOGRAMA (continúa)

PICOS MUY ANCHOS

Problema Normal

(16)

IV. PROBLEMAS CON EL CROMATOGRAMA (continúa)

Q. Todos los picos demasiado pequeños

1. La atenuación del detector 1. Reduzca la atenuación es demasiado alta

2. La constante de tiempo del 2. Use una constante menor

detector es demasiado grande

3. La inyección es demasiado pequeña 3. a. Aumente la concentración

de la muestra

b. Aumente el volumen de inyección

4. Conexión del registrador incorrecta 4. Corrija la conexión

R. Todos los picos demasiado grandes

1. La atenuación del detector 1. Aumente la atenuación es muy baja

2. Inyección demasiado grande 2. a. Reduzca la concentración de la

muestra

b. Disminuya el volumen de inyección. Use un serpentín más corto o use un serpentín

parcialmente rellenado. 3. Mala conexión del registrador 3. Corrija la conexión

P. Pérdida de resolución

1. Fase móvil contaminada /deteriorada, 1. Prepare fase móvil fresca

causando cambios en los

tiempos de retención

2. Guarda columna o 2. Quite el guarda columna y haga un

columna tapadas análisis. Cambie el guarda de ser

necesario. Si la columna analítica esta tapada, póngala al revés y púrguela. Si el problema persiste la columna pudiera estar fallando debido a que tiene retenidos contaminantes muy fuertes. Use el procedimiento de regeneración apropiado. Si el problema persiste, probablemente este tapada la entrada. Limpie el frit o cambie la columna. Problema

Normal

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V. PROBLEMAS CON EL INYECTOR

Estos problemas se detectan generalmente cuando se usan válvulas de inyec-ción. Las fugas en las válvulas de inyección se discuten en la Sección III (Fugas).

A. Inyector manual difícil de operar

1. Sello del rotor, dañado 1. Reconstruya o cambie la válvula

2. Rotor demasiado apretado 2. Ajuste la tensión del rotor

B. Inyector manual difícil de cargar

1. Válvula mal alineada 1. Ajuste la alineación

2. Serpentín (loop) bloqueado 2. Cambie el serpentín (loop)

3. Jeringa sucia 3. Limpie o cámbiela

4. Líneas bloqueadas (tapadas) 4. Límpielas o cámbielas

C. El autoinyector no funciona

1. No hay presión de aire (o corriente) 1. Ajuste la presión al punto correcto

2. El rotor esta muy apretado 2. Ajuste

3. Válvula mal alineada 3. Ajuste la alineación

D. Otros problemas con el autoinyector

1. Obstrucción 1. Destápelo o cambie la porción

obstruida

2. Mecanismo atorado 2. Vea el manual de servicio

(18)

VI. PROBLEMAS DETECTADOS POR MEDIO DEL

OLFATO, EL OÍDO O LA VISTA

Para identificar los problemas de LC se necesita hacer uso de todos los senti-dos. Seria una buena idea dedicar unos minutos cada día para usar todos los sentidos (a excepción del gusto), para determinar las condiciones del equipo de LC y asegurarse que esta funcionado correctamente. Esta práctica le puede ayudar muchas veces a localizar rápidamente algún problema ya que en mu-chas ocasiones se puede percibir el olor de una fuga antes de encontrar donde se encuentra. La mayoría de los problemas se identifican con la vista, y muchos de ellos se incluyen en la sección anterior.

A. Olor a solvente

1. Fugas 1. Vea la sección III

2. Derrame 2. a. Verifique que el recipiente

de drenado no esté rebosando

b. Localice el derrame y límpielo

B. Olor a sobrecalentamiento

1. Sobrecalentamiento del módulo 1. a. Verifique que hay ventilación

adecuada, ajústela

b. Vea que la temperatura sea la

correcta, ajuste de ser necesario

c. Apague el módulo y vea el manual de servicio

C. Lecturas del medidor fuera de lo normal

1. Anomalía en la presión 1. Vea la sección II

2. Problema con el horno 2. a. Vea los ajustes y corrija

de la columna b. Consulte el manual de servicio

3. Lámpara del detector fallando 3. Cambie la lámpara

D. Luz de aviso de anomalía

1. Límite de presión excedido 1. a. Vea si hay algún bloqueo

b. Verifique los limites de

operación, ajústelos

(19)

E. Timbre de aviso de anomalía

1. Fuga o derrame de solvente 1. Localice y corrija

2. Otros timbres de aviso sonando 2. Consulte el manual de servicio

F. Chillidos y chirridos

1. Falla en los cojinetes (baleros) 1. Consulte el manual de servicio

2. Mala lubricación 2. Lubrique tanto como sea necesario

3. Desgaste mecánico 3. Consulte el manual de servicio

VI. PROBLEMAS DETECTADOS POR MEDIO DEL

OLFATO, EL OÍDO O LA VISTA

(continúa)

(20)

VII. PROBLEMAS CLAVE Y MANTENIMIENTO

PREVENTIVO

La tabla de abajo presenta los problemas más comunes que ocurren en cualquier equipo de HPLC. En la columna de la derecha están las prácticas de manteni-miento preventivo que pueden evitar a la incidencia de fallas. Entre paréntesis se presenta la frecuencia sugerida para el mantenimiento. Los manuales de servicio y del operador de su equipo pueden tener sugerencias adicionales para el mejor mantenimiento preventivo de su modelo de LC.

Deposito (tanque)

PROBLEMA MANTENIMIENTO PREVENTIVO

1. Frit de entrada tapado 1. a. Lave la columna montándola al

revés

b. Filtre la fase móvil con filtro

de 0.5 μm

2. Burbujas de gas 2. Desgasifique la fase móvil

Bomba

1. Burbujas de aire 1. Desgasifique la fase móvil

2. Falla en el sello de la bomba 2. Cámbielo cada 3 meses

3. Falla en la válvula check 3. Filtre la fase móvil, use un frit en la

entrada de la línea. Tenga una

válvula de repuesto.

Inyector

1. Sello del rotor desgastado 1. a. No apriete de más

b. Filtre las muestras

Columna

1. Frit tapado 1. a. Filtre la fase móvil

b. Filtre las muestras

c. Use un filtro en línea y/o

guarda columnas

2. Vacío en la cabeza de la columna 2. a. Evite fase móvil con pH > 8

(para la mayoría de columnas a

base de sílica)

b. Use guarda columna

c. Use pre-columna (columna

(21)

Detector

1. Fallas en la lámpara, respuesta del 1. Cambie cada 6 meses.

dectector disminuida, aumento Tenga uno de repuesto.

en el ruido del detector

2. Burbujas en la celda 2. a. Mantenga limpia la celda

b. Use restrictor después

de la celda

c. Desgasifique la fase móvil

General

1. Daño corrosivo/abrasivo 1. Elimine los residuos de sales en el sistema y límpielo cuando no lo use

VII. PROBLEMAS CLAVE Y MANTENIMIENTO

PREVENTIVO

(continúa)

(22)

AVISO: LOS CONTAMINANTES PUEDEN CAUSAR

• ALTA PRESIÓN

• PICOS DIVIDIDOS

• PICOS DEMASIADO ANCHOS

• RUIDO EN LA LÍNEA BASE

• ELEVACIÓN DE LA LÍNEA BASE

• PERDIDA DE RESOLUCIÓN

• DAÑO IRREVERSIBLE EN LA COLUMNA

• DAÑO AL SISTEMA

PROTEJA SU COLUMNA DE HPLC Y SUS RESULTADOS

Un sistema universal de guarda cartuchos para HPLC diseñado para proteger en forma efectiva tanto a sus valiosas columnas analíticas como sus resultados del daño que producen los contaminantes. Atrapa los contaminantes sin afectar la cromatografía.

ASÍ ES COMO TRABAJA SECURITYGUARD*:

AJUSTE UNIVERSAL*:

Con su diseño patentado SecurityGuard™ se ajusta a todos los conectores sean macho o hembra, prácticamente de cualquier fabricante.

Si usted no queda totalmente satisfecho con el comportamiento de SecurityGuard simplemente contacte a Phenomenex dentro los 45 días de su compra para un ¡REEMBOLSO TOTAL DE SU DINERO!

Para información adicional consulte www.phenomenex.com/info/securityguard

Del inyector

Columna de HPLC Los cartuchos pueden ser

inspeccionados fácilmente para ver

los contaminantes Conexión Universal de apretar con los dedospara columnas de HPLC -no se necesitan herramientas

contaminantes compuestos de interés Guarda Cartucho (Holder)

garantía

Diseño Patentado

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Tip: Pruebe una muestra

La major forma de determiner si una membrana Phenex específica es la más recomendable para su aplicación. Solicite su muestra por teléfono o visite

www.phenomenex.com/sample

Los filtros para jeringa anteriores no son estériles. La cubierta está hecha de polipropileno (PP) grado médico.

Si Phenex no fuciona igual o mejor que los filtros para jeringa que está usando actualmente con membrana, diámetro y tamaño de poro similares, regrese el producto con datos comparativos dentro los 45 días de su compra para un ¡REEMBOLSO TOTAL DE SU DINERO!

Favor de contactar a su consultor técnico o distribuidor local para disponibilidad y asistencia. La compra de grandes cantidades podría ahorrarle aún más.

Marcas comerciales

SecurityGuard y Phenex son marcas comerciales de Phenomenex. PTFE y Teflon son marcas comerciales registradas de E.I. du Pont de Nemours and Co.

Tipos de membrana RC Regenerated Cellulose NY (Nylon) PTFE®_Teflon® (Polytetrafluoroethylene) CA (Cellulose Acetate) PES

(Polyethersulfone) GF(Glass Fiber)

garantía

Baja absorción de proteínas » Máxima compatibilidad » química Mínimo de extraíbles » Excelente flujo »

Alto rendimiento total » Bajo volumen » Calidad certificada » Integridad probada al 100% » Uso bidireccional »

Filtros para jeringa Phenex

™

Para filtración de muestras y solventes antes de la cromatografía

Menos tiempo de paro •

Resultados más consistentes y reproducibles •

Mayor tiempo de vida de la columna •

Rápida filtración de muestras para HPLC y GC antes •

del análisis

Particulado, PVC, y filtros libres de extraíbles •

Menos paros en el sistema •

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www.phenomenex.com

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