Métodos analíticos para la determinación de bisfenol A en los alimentos Métodos analíticos para la determinación de bisfenol A en los alimentos Ana Ballesteros Gómez, Soledad Rubio
Ana Ballesteros Gómez, Soledad Rubio∗∗, Dolores Pérez-Bendito, Dolores Pérez-Bendito Departamento de química analítica, Facultad
Departamento de química analítica, Facultad de Ciencias, Campus de Rabanales, Edificio Anexode Ciencias, Campus de Rabanales, Edificio Anexo Marie Curie, 14171 Córdoba, España
Marie Curie, 14171 Córdoba, España
abtracto abtracto
Alimentos constituyen la ruta principal para la exposición humana a bisfenol A (BPA), uno de Alimentos constituyen la ruta principal para la exposición humana a bisfenol A (BPA), uno de mayor volumen productos químicos producen
mayor volumen productos químicos producen en todo el mundo. Las en todo el mundo. Las propiedades estrogénicaspropiedades estrogénicas de BPA, su utilización amplia dispersión y el reciente extensa literatura que describe los de BPA, su utilización amplia dispersión y el reciente extensa literatura que describe los efectos BPA de dosis bajas en animales, han expresado su preocupación acerca de su posibles efectos BPA de dosis bajas en animales, han expresado su preocupación acerca de su posibles efectos adversos sobre la salud humana. Una evaluación de riesgo de salud confiable de BPA efectos adversos sobre la salud humana. Una evaluación de riesgo de salud confiable de BPA se basa fundamentalmente en su identificación inequívoca y cuantificación precisa en los se basa fundamentalmente en su identificación inequívoca y cuantificación precisa en los alimentos y el objetivo de la presente revisión esdan una descripción de los métodos analíticos alimentos y el objetivo de la presente revisión esdan una descripción de los métodos analíticos divulgado hasta ahora para la determinación de BPA en estas matrices.Se pone énfasis en las divulgado hasta ahora para la determinación de BPA en estas matrices.Se pone énfasis en las estrategias principales para el tratamiento de la muestra, que consiste en generalmente de estrategias principales para el tratamiento de la muestra, que consiste en generalmente de varios pasos laboriosos y lentos para alcanzar la necesaria sensibilidad y selectividad. varios pasos laboriosos y lentos para alcanzar la necesaria sensibilidad y selectividad. Separación, identificación y cuantificación de BPA es hoy confiablemente hecha con masa Separación, identificación y cuantificación de BPA es hoy confiablemente hecha con masa espectrometría métodos, es decir, líquido chromatography
espectrometría métodos, es decir, líquido chromatography – –mass espectrometría (LCmass espectrometría (LC – –MS) yMS) y chromatography
chromatography – –mass de gas espectrometría (GCmass de gas espectrometría (GC – –MS) y, por tanto, la atención principal seMS) y, por tanto, la atención principal se dedica a estas técnicas, pero otros métodos LC juntada a la fluorescencia o detección dedica a estas técnicas, pero otros métodos LC juntada a la fluorescencia o detección electroquímica, métodos
electroquímica, métodos así como inmunoquímiasí como inmunoquímicos son también cos son también cubierto. Se discuten cubierto. Se discuten loslos desarrollos futuros esperados y recientes
desarrollos futuros esperados y recientes © 2008 Elsevier B.
© 2008 Elsevier B. V. Todos los derechos reservados.V. Todos los derechos reservados.
Introducción Introducción
Bisfenol A (BPA), propano 2,2-bis(4-hydroxyphenyl), es uno de Bisfenol A (BPA), propano 2,2-bis(4-hydroxyphenyl), es uno de
los químicos de volumen más altos en el mundo [1,2]. Demanda global de los químicos de volumen más altos en el mundo [1,2]. Demanda global de BPA se prevé un crecimiento de 3,9 millones de toneladas en 2006 a sobre BPA se prevé un crecimiento de 3,9 millones de toneladas en 2006 a sobre 5 millones de toneladas en 2010 [3].Muchos países en todo el mundo 5 millones de toneladas en 2010 [3].Muchos países en todo el mundo
tienen una capacidad de producción grande de BPA, especialmente Alemania, la tienen una capacidad de producción grande de BPA, especialmente Alemania, la Países Bajos, Estados Unidos y Japón. Capacidad BPA
Países Bajos, Estados Unidos y Japón. Capacidad BPA en Europa occidental fueen Europa occidental fue Estimado en 830 millones de toneladas en el año 2000 [4], grewby 4%/year de Estimado en 830 millones de toneladas en el año 2000 [4], grewby 4%/year de 2000-2006 y se ha previsto crecer por 2%/year en el
2000-2006 y se ha previsto crecer por 2%/year en el período 2006
período 2006 – –2010 [3]. El principal mercado de BPA es la producción2010 [3]. El principal mercado de BPA es la producción de policarbonato con la segunda salida ser resinas epoxi.
de policarbonato con la segunda salida ser resinas epoxi. Otros usos incluyen ignífugos, resinas de
Otros usos incluyen ignífugos, resinas de poliéster insaturadopoliéster insaturado y resinas de poliacrilato, polieterimida y polisulfona [5,6]. A y resinas de poliacrilato, polieterimida y polisulfona [5,6]. A gran variedad de alimentos en contac
gran variedad de alimentos en contacto con materiales destacan entre sus usos,to con materiales destacan entre sus usos, deriva principalmente de policarbonatos (bebé biberones, vajilla,
fuentes de horno de microondas, contenedores, agua retornable fuentes de horno de microondas, contenedores, agua retornable
y tubos de agua y botellas de leche) y resinas (protección interna epoxi y tubos de agua y botellas de leche) y resinas (protección interna epoxi forro para las latas de alimentos y bebidas, capa en las tapas de metales forro para las latas de alimentos y bebidas, capa en las tapas de metales para frascos de vidrio y botellas y revestimiento de agua potable
para frascos de vidrio y botellas y revestimiento de agua potable depósitos y cubas de vinos) [7]. La estructura química y algunos depósitos y cubas de vinos) [7]. La estructura química y algunos propiedades fisicoquímicas de BPA se muestran en la tabla 1. propiedades fisicoquímicas de BPA se muestran en la tabla 1. El amplio uso de BPA de polímeros, con ester bonos
El amplio uso de BPA de polímeros, con ester bonos
Sin perjuicio de la hidrólisis y no de monómero pilimizado residuos, Sin perjuicio de la hidrólisis y no de monómero pilimizado residuos, Ha llevado a una amplia contaminación ambiental. BPA concentraciones Ha llevado a una amplia contaminación ambiental. BPA concentraciones En el rango 5-320 ng L-1, en las aguas
En el rango 5-320 ng L-1, en las aguas del río [ 8- 10],del río [ 8- 10],
20-700 ng L-1, en las aguas residuales [ 9- 11], 2-208 ngm-3 en el aire 20-700 ng L-1, en las aguas residuales [ 9- 11], 2-208 ngm-3 en el aire
[ 12- 14], 0,2 -199 ng g-1 en polvo [ 12- 14] y 0,1 -384 ng g-1, en los productos alimenticios [ 12- 14], 0,2 -199 ng g-1 en polvo [ 12- 14] y 0,1 -384 ng g-1, en los productos alimenticios [ 15- 17] han sido reportados. Su presencia en los alimentos es de especial
[ 15- 17] han sido reportados. Su presencia en los alimentos es de especial Preocupación, ya que constituye la principal vía de exposición humana Preocupación, ya que constituye la principal vía de exposición humana
[6,7,14]. El grupo científico sobre aditivos alimentarios, aromas, transformación [6,7,14]. El grupo científico sobre aditivos alimentarios, aromas, transformación Sida y materiales en contacto con los alimentos de la Unión Europea
Sida y materiales en contacto con los alimentos de la Unión Europea
(UE) ha informado estimaciones del potencial exposición en la dieta de 13, (UE) ha informado estimaciones del potencial exposición en la dieta de 13, 5,3 Y 1,5 g/kg de peso corporal/día en 6 a 12 meses de edad amamantados 5,3 Y 1,5 g/kg de peso corporal/día en 6 a 12 meses de edad amamantados Los bebés, niños pequeños y adultos, respectivamente [ 7].
Los bebés, niños pequeños y adultos, respectivamente [ 7]. La generalizadaLa generalizada La exposición al BPA se ha puesto de relieve por las mediciones
La exposición al BPA se ha puesto de relieve por las mediciones
En los fluidos y tejidos humanos (revisado en [ 18] ). Las concentraciones En los fluidos y tejidos humanos (revisado en [ 18] ). Las concentraciones En la sangre y la orina fueron en promedio en los 0,3 -4,4 gL-1 y
En la sangre y la orina fueron en promedio en los 0,3 -4,4 gL-1 y
0.47-9.5 gl 1 oscila con una tasa de detección por encima del 90% en la mayoría de 0.47-9.5 gl 1 oscila con una tasa de detección por encima del 90% en la mayoría de Los estudios.
Los estudios.
La actividad antiestrogénica de BPA se reportó por primera vez en 1993 [ 19]. La actividad antiestrogénica de BPA se reportó por primera vez en 1993 [ 19]. La afinidad de BPA en los receptores de estrógeno es de 10.000 - a 100
La afinidad de BPA en los receptores de estrógeno es de 10.000 - a 100 .000 -.000 -Veces más débil que la de estradiol, por lo que se ha considerado un muy Veces más débil que la de estradiol, por lo que se ha considerado un muy Débil ambiental estrógenos. Sin embargo, un
Débil ambiental estrógenos. Sin embargo, un gran número de recientesgran número de recientes
Los estudios in vitro han demostrado que los efectos de BPA son mediadas por Los estudios in vitro han demostrado que los efectos de BPA son mediadas por Tanto la genómica y
Tanto la genómica y la no-genómico de estrã³geno mecanismos de respuesta,la no-genómico de estrã³geno mecanismos de respuesta, Con la interrupción de la función de la célula que ocurren con dosis tan bajas Con la interrupción de la función de la célula que ocurren con dosis tan bajas
Como 1 pm (0,23 ng L- 1) (revisado en [ 20] ). Los informes recientes también indican Como 1 pm (0,23 ng L- 1) (revisado en [ 20] ). Los informes recientes también indican El potencial de BPA para trastornar hormona tiroidea acción [ 21], a
El potencial de BPA para trastornar hormona tiroidea acción [ 21], a
Provocan la proliferación de las células del cáncer de la próstata humana [ 22] y para bloquear Provocan la proliferación de las células del cáncer de la próstata humana [ 22] y para bloquear Síntesis de la testosterona [ 23] a muy baja parte por billón de dosis. Este
Síntesis de la testosterona [ 23] a muy baja parte por billón de dosis. Este Una amplia literatura sobre nuevos efectos a
Una amplia literatura sobre nuevos efectos a bajas dosis de BPA habajas dosis de BPA ha
Dado lugar a una controversia acerca de la BPA los valores límite establecidos por la Dado lugar a una controversia acerca de la BPA los valores límite establecidos por la reglamentación
reglamentación
Los organismos de protección de la salud de los consumidores y un nuevo riesgo Los organismos de protección de la salud de los consumidores y un nuevo riesgo Evaluación ha sido muy
Evaluación ha sido muy recomendable [ 20]. Actualmente, elrecomendable [ 20]. Actualmente, el
Ingesta diaria tolerable (IDT) establecido por la Comisión de la UE [ 7] y el Ingesta diaria tolerable (IDT) establecido por la Comisión de la UE [ 7] y el Dosis de referencia (RfD) establecido por la EPA [ 24] BPA es de 0,05 mg/kg Dosis de referencia (RfD) establecido por la EPA [ 24] BPA es de 0,05 mg/kg Peso corporal/día. Este valor se obtuvo aplicando un 100 veces
Peso corporal/día. Este valor se obtuvo aplicando un 100 veces Factor de incertidumbre a la que se acepta en general Versión Factor de incertidumbre a la que se acepta en general Versión
-fuentes de horno de microondas, contenedores, agua retornable fuentes de horno de microondas, contenedores, agua retornable
y tubos de agua y botellas de leche) y resinas (protección interna epoxi y tubos de agua y botellas de leche) y resinas (protección interna epoxi forro para las latas de alimentos y bebidas, capa en las tapas de metales forro para las latas de alimentos y bebidas, capa en las tapas de metales para frascos de vidrio y botellas y revestimiento de agua potable
para frascos de vidrio y botellas y revestimiento de agua potable depósitos y cubas de vinos) [7]. La estructura química y algunos depósitos y cubas de vinos) [7]. La estructura química y algunos propiedades fisicoquímicas de BPA se muestran en la tabla 1. propiedades fisicoquímicas de BPA se muestran en la tabla 1. El amplio uso de BPA de polímeros, con ester bonos
El amplio uso de BPA de polímeros, con ester bonos
Sin perjuicio de la hidrólisis y no de monómero pilimizado residuos, Sin perjuicio de la hidrólisis y no de monómero pilimizado residuos, Ha llevado a una amplia contaminación ambiental. BPA concentraciones Ha llevado a una amplia contaminación ambiental. BPA concentraciones En el rango 5-320 ng L-1, en las aguas
En el rango 5-320 ng L-1, en las aguas del río [ 8- 10],del río [ 8- 10],
20-700 ng L-1, en las aguas residuales [ 9- 11], 2-208 ngm-3 en el aire 20-700 ng L-1, en las aguas residuales [ 9- 11], 2-208 ngm-3 en el aire
[ 12- 14], 0,2 -199 ng g-1 en polvo [ 12- 14] y 0,1 -384 ng g-1, en los productos alimenticios [ 12- 14], 0,2 -199 ng g-1 en polvo [ 12- 14] y 0,1 -384 ng g-1, en los productos alimenticios [ 15- 17] han sido reportados. Su presencia en los alimentos es de especial
[ 15- 17] han sido reportados. Su presencia en los alimentos es de especial Preocupación, ya que constituye la principal vía de exposición humana Preocupación, ya que constituye la principal vía de exposición humana
[6,7,14]. El grupo científico sobre aditivos alimentarios, aromas, transformación [6,7,14]. El grupo científico sobre aditivos alimentarios, aromas, transformación Sida y materiales en contacto con los alimentos de la Unión Europea
Sida y materiales en contacto con los alimentos de la Unión Europea
(UE) ha informado estimaciones del potencial exposición en la dieta de 13, (UE) ha informado estimaciones del potencial exposición en la dieta de 13, 5,3 Y 1,5 g/kg de peso corporal/día en 6 a 12 meses de edad amamantados 5,3 Y 1,5 g/kg de peso corporal/día en 6 a 12 meses de edad amamantados Los bebés, niños pequeños y adultos, respectivamente [ 7].
Los bebés, niños pequeños y adultos, respectivamente [ 7]. La generalizadaLa generalizada La exposición al BPA se ha puesto de relieve por las mediciones
La exposición al BPA se ha puesto de relieve por las mediciones
En los fluidos y tejidos humanos (revisado en [ 18] ). Las concentraciones En los fluidos y tejidos humanos (revisado en [ 18] ). Las concentraciones En la sangre y la orina fueron en promedio en los 0,3 -4,4 gL-1 y
En la sangre y la orina fueron en promedio en los 0,3 -4,4 gL-1 y
0.47-9.5 gl 1 oscila con una tasa de detección por encima del 90% en la mayoría de 0.47-9.5 gl 1 oscila con una tasa de detección por encima del 90% en la mayoría de Los estudios.
Los estudios.
La actividad antiestrogénica de BPA se reportó por primera vez en 1993 [ 19]. La actividad antiestrogénica de BPA se reportó por primera vez en 1993 [ 19]. La afinidad de BPA en los receptores de estrógeno es de 10.000 - a 100
La afinidad de BPA en los receptores de estrógeno es de 10.000 - a 100 .000 -.000 -Veces más débil que la de estradiol, por lo que se ha considerado un muy Veces más débil que la de estradiol, por lo que se ha considerado un muy Débil ambiental estrógenos. Sin embargo, un
Débil ambiental estrógenos. Sin embargo, un gran número de recientesgran número de recientes
Los estudios in vitro han demostrado que los efectos de BPA son mediadas por Los estudios in vitro han demostrado que los efectos de BPA son mediadas por Tanto la genómica y
Tanto la genómica y la no-genómico de estrã³geno mecanismos de respuesta,la no-genómico de estrã³geno mecanismos de respuesta, Con la interrupción de la función de la célula que ocurren con dosis tan bajas Con la interrupción de la función de la célula que ocurren con dosis tan bajas
Como 1 pm (0,23 ng L- 1) (revisado en [ 20] ). Los informes recientes también indican Como 1 pm (0,23 ng L- 1) (revisado en [ 20] ). Los informes recientes también indican El potencial de BPA para trastornar hormona tiroidea acción [ 21], a
El potencial de BPA para trastornar hormona tiroidea acción [ 21], a
Provocan la proliferación de las células del cáncer de la próstata humana [ 22] y para bloquear Provocan la proliferación de las células del cáncer de la próstata humana [ 22] y para bloquear Síntesis de la testosterona [ 23] a muy baja parte por billón de dosis. Este
Síntesis de la testosterona [ 23] a muy baja parte por billón de dosis. Este Una amplia literatura sobre nuevos efectos a
Una amplia literatura sobre nuevos efectos a bajas dosis de BPA habajas dosis de BPA ha
Dado lugar a una controversia acerca de la BPA los valores límite establecidos por la Dado lugar a una controversia acerca de la BPA los valores límite establecidos por la reglamentación
reglamentación
Los organismos de protección de la salud de los consumidores y un nuevo riesgo Los organismos de protección de la salud de los consumidores y un nuevo riesgo Evaluación ha sido muy
Evaluación ha sido muy recomendable [ 20]. Actualmente, elrecomendable [ 20]. Actualmente, el
Ingesta diaria tolerable (IDT) establecido por la Comisión de la UE [ 7] y el Ingesta diaria tolerable (IDT) establecido por la Comisión de la UE [ 7] y el Dosis de referencia (RfD) establecido por la EPA [ 24] BPA es de 0,05 mg/kg Dosis de referencia (RfD) establecido por la EPA [ 24] BPA es de 0,05 mg/kg Peso corporal/día. Este valor se obtuvo aplicando un 100 veces
Peso corporal/día. Este valor se obtuvo aplicando un 100 veces Factor de incertidumbre a la que se acepta en general Versión Factor de incertidumbre a la que se acepta en general Versión
-Fija determinando (NOAEL) de 5mg/kg. Por otro lado, un Fija determinando (NOAEL) de 5mg/kg. Por otro lado, un
Límite de migración específica (LME) de BPA de plástico contacto con alimentos Límite de migración específica (LME) de BPA de plástico contacto con alimentos Materiales de 600 ng g de 1 fue establecido por la Comisión de la UE en 2004 Materiales de 600 ng g de 1 fue establecido por la Comisión de la UE en 2004 [ 25].
[ 25].
Debido al alto volumen, amplia dispersión utilice y endocrino Debido al alto volumen, amplia dispersión utilice y endocrino
Interrumpiendo y propiedades tóxicas de BPA, es un claro candidato a ser Interrumpiendo y propiedades tóxicas de BPA, es un claro candidato a ser Incluido en la lista de sustancias que están sujetas a autorización en el Incluido en la lista de sustancias que están sujetas a autorización en el
Nueva política de productos químicos autorizados por la Unión Europea, REACH (Registro, Nueva política de productos químicos autorizados por la Unión Europea, REACH (Registro, Evaluación, Autorización y Restricción de Sustancias Químicas, que figura en el Anexo XIV) Evaluación, Autorización y Restricción de Sustancias Químicas, que figura en el Anexo XIV) [ 26]. Por lo tanto, hay necesidad de investigación(newmethods) y de la revisión
[ 26]. Por lo tanto, hay necesidad de investigación(newmethods) y de la revisión 2. Fuentes y la eliminación de contaminación de fondo
2. Fuentes y la eliminación de contaminación de fondo BPA es inherentemente ubicuo en el medio
BPA es inherentemente ubicuo en el medio ambiente. Fondoambiente. Fondo contaminación de BPA se produce a niveles de L−1
contaminación de BPA se produce a niveles de L−1ng y surge principalmente deng y surge principalmente de solventes, columnas SPE, cristalería, artículos de plástico y otros reactivos
solventes, columnas SPE, cristalería, artículos de plástico y otros reactivos
y herramientas de laboratorio. En general, tratados térmicamente cristalería (4 h en y herramientas de laboratorio. En general, tratados térmicamente cristalería (4 h en 400
400◦◦C) y se utilizan materiales de lavado con solvente como una precauciónC) y se utilizan materiales de lavado con solvente como una precaución
medida para evitar la contaminación de fondo [28]. medida para evitar la contaminación de fondo [28].
Se han encontrado concentraciones de BPA en 0.02gL−1 en Se han encontrado concentraciones de BPA en 0.02gL−1 en
Agua Milli-Q usando métodos altamente sensibles (cuantificación
Agua Milli-Q usando métodos altamente sensibles (cuantificación instrumentalinstrumental límite de 5 pg) [29]. La contaminación se presentó desde el
límite de 5 pg) [29]. La contaminación se presentó desde el plásticos usados en el sistema de purificació
plásticos usados en el sistema de purificación y fue quitado por filtradon y fue quitado por filtrado el agua a través de una membrana hidrofóbica (disco Empore).
el agua a través de una membrana hidrofóbica (disco Empore).
Otros autores, sin embargo, no encontró contaminación BPA cuando se Otros autores, sin embargo, no encontró contaminación BPA cuando se analizados calidad ultra-alta diferente aguas, como agua Pestanal
analizados calidad ultra-alta diferente aguas, como agua Pestanal de Riedel de Haën o los obtenidos de un Elgastast
de Riedel de Haën o los obtenidos de un Elgastast y un sistema de Millipore Milli
y un sistema de Millipore Milli-Q, aunque en estos experimentos los-Q, aunque en estos experimentos los límite de cuantificación instrumental fue de alrededor de 10 ng [32]. límite de cuantificación instrumental fue de alrededor de 10 ng [32]. Cartuchos SPE (e.g. Oasis HLB de aguas y Bond Elut certificar
Cartuchos SPE (e.g. Oasis HLB de aguas y Bond Elut certificar de Varian) se ha sabido para causar contaminación de BPA en de Varian) se ha sabido para causar contaminación de BPA en
concentraciones de alrededor de 0.04gL−1 *31+. La contaminación fue concentraciones de alrededor de 0.04gL−1 *31+. La contaminación fue efectivamente removido por prelavado los cartuchos que por
efectivamente removido por prelavado los cartuchos que por lo menoslo menos 15mL de metanol y probablemente se deriva no de la absorbente 15mL de metanol y probablemente se deriva no de la absorbente material, sino al proceso de fabricación. Carga de la muestra material, sino al proceso de fabricación. Carga de la muestra
SPE puede introducir la fuerte contaminación de BPA cuando jeringas de vidrio SPE puede introducir la fuerte contaminación de BPA cuando jeringas de vidrio se utilizan, causada principalmente por el adhesivo utilizado para fijar la aguja se utilizan, causada principalmente por el adhesivo utilizado para fijar la aguja
[30,32]. Utilizando una bomba peristáltica con tubos de vinilo, la contaminación de BPA [30,32]. Utilizando una bomba peristáltica con tubos de vinilo, la contaminación de BPA llegó a ser insignificante aunque la contaminación fue
llegó a ser insignificante aunque la contaminación fue
importante para los dos derivados BPA (es decir, 4-terc-butylbenzoic ácido, importante para los dos derivados BPA (es decir, 4-terc-butylbenzoic ácido, BBA y 4-tert-butilfenol, t-BP). Contaminación de la muestra de la SPE
BBA y 4-tert-butilfenol, t-BP). Contaminación de la muestra de la SPE carga puede eliminarse casi totalmente mediante la
carga puede eliminarse casi totalmente mediante la sustitución de lasustitución de la tubos de vinilo con Viton de DuPont [32].
tubos de vinilo con Viton de DuPont [32]. 3. Tratamiento de muestra
3. Tratamiento de muestra Hay una amplia variedad de
Hay una amplia variedad de alimentos que contienen BPA incluyendo frescoalimentos que contienen BPA incluyendo fresco y conservas muestras sólidas y líquidas (Fig. 1). Determinación de
BPA en estas matrices a menudo requiere la preparación de la muestra amplia BPA en estas matrices a menudo requiere la preparación de la muestra amplia antes del análisis instrumental. Los pasos
antes del análisis instrumental. Los pasos habituales en alimentoshabituales en alimentos preparación de la muestra incluyen
preparación de la muestra incluyen pretratamiento, extracción, clean-up,pretratamiento, extracción, clean-up, concentración y a veces derivatización y constituyen el
concentración y a veces derivatización y constituyen el
cuello de botella en el actual análisis de alimentos (Fig. 1). Las muestras sólidas cuello de botella en el actual análisis de alimentos (Fig. 1). Las muestras sólidas son generalmente primero homogeneizada mientras que los líquidos que
son generalmente primero homogeneizada mientras que los líquidos que se filtranse filtran o centrifugado. Tratamientos especiales pueden ser requeridos dependiendo de o centrifugado. Tratamientos especiales pueden ser requeridos dependiendo de
sobre la composición de la matriz; por ejemplo las bebidas carbonatadas son desgasificada sobre la composición de la matriz; por ejemplo las bebidas carbonatadas son desgasificada [16,33], muestras con alto contenido
[16,33], muestras con alto contenido en proteínas pueden requeriren proteínas pueden requerir su eliminación por los tejidos de peces y precipitación son triturados y su eliminación por los tejidos de peces y precipitación son triturados y liofilizado antes de homogeneización. Conservas que contienen ambos liofilizado antes de homogeneización. Conservas que contienen ambos porciones de líquidos y sólidas
porciones de líquidos y sólidas son generalmente filtradas y tratadas por son generalmente filtradas y tratadas por separado.separado. Extracción por solventes y SPE son las técnicas más usadas
Extracción por solventes y SPE son las técnicas más usadas para el aislamiento de BPA
para el aislamiento de BPA de sólidos y líquidos muestras, respectivamente,de sólidos y líquidos muestras, respectivamente, principalmente debido a su simplicidad y amplia aplicabilidad. Otros
principalmente debido a su simplicidad y amplia aplicabilidad. Otros técnicas (p. ej., MAE, PLE, MSPDE, SPME, SBSE, CF. Fig. 1), aunque técnicas (p. ej., MAE, PLE, MSPDE, SPME, SBSE, CF. Fig. 1), aunque apenas usados hasta ahora, puede mejorar la
apenas usados hasta ahora, puede mejorar la extracción de BPA en extracción de BPA en términostérminos de tamaños de muestra, automatización y co
de tamaños de muestra, automatización y consumo de disolventes. Los extractosnsumo de disolventes. Los extractos que contienen BPA suelen ser sometidos a extensa
que contienen BPA suelen ser sometidos a extensa clean-up y enclean-up y en Esta extracción líquido-líquido de
Esta extracción líquido-líquido de respeto y SPE son preferidas. Concentraciónrespeto y SPE son preferidas. Concentración de BPA por evaporación del solvente del extracto final es
de BPA por evaporación del solvente del extracto final es
un paso inevitable debido a su baja concentración en alimentos (cf. un paso inevitable debido a su baja concentración en alimentos (cf. Tabla 2). En general, suele ser la combinación de diferentes técnicas Tabla 2). En general, suele ser la combinación de diferentes técnicas inevitable y métodos se convierten en dependientes de frequentlymatrix. inevitable y métodos se convierten en dependientes de frequentlymatrix. Sólo los métodos para estudiar la migración de BPA de
Sólo los métodos para estudiar la migración de BPA de
unusedcommercial latas por extracción con simulación de alimentos líquidos unusedcommercial latas por extracción con simulación de alimentos líquidos son más simples [37]. Cuadro 3
son más simples [37]. Cuadro 3 da algunos ejemplos representativosda algunos ejemplos representativos de los procedimientos de tratamiento de muestra para
de los procedimientos de tratamiento de muestra para el análisis de que contienen BPAel análisis de que contienen BPA alimentos. A continuación, las principales técnicas utilizadas para la extracción y limpieza alimentos. A continuación, las principales técnicas utilizadas para la extracción y limpieza se discuten detalladamente.
se discuten detalladamente.
generalmente preferido para la extracción de alimentos sólidos [16,17,39,40,42,44,46] generalmente preferido para la extracción de alimentos sólidos [16,17,39,40,42,44,46] Aunque otros como acetona [41], [39,47] de metanol y etanol
Aunque otros como acetona [41], [39,47] de metanol y etanol
[43] también puede extraer BPAefficiently. Alimentos líquidos son extraídos c [43] también puede extraer BPAefficiently. Alimentos líquidos son extraídos c onon acetato de etilo [45], [48] de cloroformo o diclorometano [33]. Como un
acetato de etilo [45], [48] de cloroformo o diclorometano [33]. Como un la regla general, extracc
la regla general, extracciones repetidas son generalmente necesarias paraiones repetidas son generalmente necesarias para el aislamiento total de BPA. Típico consumo de disolventes en general, el aislamiento total de BPA. Típico consumo de disolventes en general, incluyendo extracciones repetidas y lavado, es entre 40
incluyendo extracciones repetidas y lavado, es entre 40
y 300mL. Extracción veces oscilan de 10min a 120min utilizando y 300mL. Extracción veces oscilan de 10min a 120min utilizando
agitación o sonicación para favorecer la partición de equilibrio. Sodio anhidro agitación o sonicación para favorecer la partición de equilibrio. Sodio anhidro sulfato con frecuencia se agrega a la muestra antes de [40,41] o
sulfato con frecuencia se agrega a la muestra antes de [40,41] o después de la extracción [16,17] para separar trazas de agua después de la extracción [16,17] para separar trazas de agua en la capa orgánica. La importancia de controlar la enzimática en la capa orgánica. La importancia de controlar la enzimática
degradación de BPA durante la extracción de muestras como fruta fresca degradación de BPA durante la extracción de muestras como fruta fresca y verduras se ha destacado puesto que
[41]. Degradación puede prevenirse mediante la adición de 0.1N ácido clorhídrico para el solvente de extracción solvente [41].
Debido a la selectividad limitada de extracciones de base solvente hay una necesidad de limpiar extensa antes de análisis instrumental. Eliminación de lípidos del extracto es esencial para las muestras de
origen animal (pescado, carne, etc.) dado que pueden reducir significativamente el rendimiento analítico de LC y GC. Afecta material lipídico
la superficie activa de la inmóvil fase en LC y degrada el
poder de resolución de la columna. En GC/MS, los lípidos se acumulan en el fuente de puerto, la columna y el ion de inyección. Eliminación de grasa se hace principalmente
por extracción líquido-líquido con n-heptano [16], 2,2,4-trimetilpentano [17] y [39,40,46] n-hexano o congelando los lípidos en el extracto
en −24◦C durante 40 minutos, seguido de filtración [38]. El uso de SPE para
Clean-up de los extractos que contienen BPA es inevitable en la mayoría
procedimientos de tratamiento de ofsample [38, 40 –44, 46].Después de eso, la evaporación de elutes, reconstitución con disolvente orgánico y filtración
(0.20 –0.5 m) completa el tratamiento de la muestra. Aunque general
las recuperaciones de estos procedimientos son generalmente muy por encima de 75%, bajo recuperaciones ((<50%)debido a interactionswere de matrix –analyte registrado
por Thomson et para una variedad de alimentos [17]. Kuo et al también obtuvo bajas recuperaciones (18%) y alta desviación estándar relativa (RSD)
(24%) en un tipo específico de polvos de fórmulas infantiles, es decir, hipoalergénicos marca, este hecho se relaciona con la presencia de hidrolizado
enzymesinfluencing el SPE [49]. Table3compares solvente varios
métodos de extracción en términos de consumo de disolventes en general, factores de concentración y recuperaciones, entre otras características.
3.1.2. Extracción asistida por microondas (MAE)
Aplicación de basedonthe de MAEis de energía de microondas para la muestra durante la extracción, que en consecuencia se agitó y se calienta
rápidamente. Constituye una buena alternativa a la extracción por solventes de
muestras de alimentos sólidos y semisólidos porque las eficiencias de extracción buena puede lograrse utilizando menos veces extracción solvente y más cortos.
La aplicación de MAE a la extracción de alimentos que contienen BPA ha sido un pez bastante limitado y restringido a [50,51]. Muestra baja tamaños (normalmente entre 0,2 y 1 g de tejido descongelado y triturado) fueron tema toMAEwith 20mLof dichloromethane:methanol (2:1,
v/v) [50] o 10 mL (20% de humedad) de Tetrametilamonio
hidróxido (TMOH) y 1mL n-Nonano [51] durante 15-20 minutos SPE (Sep-Pak NH2) [49] y Oasis-HLB [50] fueron utilizados para la limpieza de la extractos con la consiguiente evaporación de disolventes y reconstitución
47 –49% y 78 –79% para el tejido del hígado o músculo con picos de trucha arco iris (RSD 4.1 –4.7% [50]) y el 92 –111% (RSD 3 a 8 %
[51]) para una variedad de pescados y mariscos como gambas, cangrejos, conchas, blanco almejas, calamares y peces.
3.1.3. A presión extracción líquida (PLE)
PLE, también producción acelerada de extracción por solvente (ASE), implica el uso de disolventes líquidos a temperaturas elevadas (40 –200◦C) y
presiones (1000 –2500 psi). En estas condiciones, los solventes tienen mayor poder de solvatación y han aumentado las tasas de extracción.
La aplicación de PLE en análisis de alimentos ha sido recientemente revisada [52,53]. Aunque apenas se utiliza para la extracción de contener BPA
alimentos, la conveniencia de PLE para la extracción de muestras de animales [28,54] y origen vegetal [32] antes de LC/MS ha sido demostrado. Los solventes
utilizados han sido formeat de diclorometano (carne de cerdo, carne, conejo, pato y pollo) [28], acetone –n-hexano (1:1, v/v) de hígado de pescado [54] y
metanol para cereales [32]. Sulfato de sodio [54] y diatomeas
[32] de la tierra se han utilizado como agentes dispersantes. La optimización de la extracción de las condiciones de PLE incluye el estudio de la
tipo solvente, temperatura, presión, tiempo de extracción y número de ciclos y esto puede realizarse mediante estadística experimental
procedimientos de diseño para minimizar el número de experimentos [32].
Frommeat de eliminación de lípidos se lleva a cabo mediante la mezcla de las muestras con Celite y poner activaron alúmina neutra en la parte inferior de la
Células PLE [28], mientras que su eliminación fromfish hígado ismade por extracción con n-hexano después PLE [54]. Para limpiar de extractos de PLE por
SPE (Oasis HLB [32], Florisil 60 [54] y aminopropil sorbentes [28])
siempre es necesaria para lograr selectividad. Las recuperaciones obtenidas en el applicationswere anterior del 81% al 104% (RSD 9%) de los c ereales
[32], 53% (RSD 20%) de hígado de pescado [54] y del 91% al 100% para carne [28].
3.2. Extracción en fase sólida (SPE)
Son en gran medida la técnica más utilizada para la extracción de ambos de alimentos líquidos que contienen BPA y la limpieza de los extractos crudos después de la extracción solvente. La base de SPE [55] y su aplicación
en análisis de alimentos [56 –58] han sido revisados exhaustivamente. La selección de un adecuado absorbente para BPA principalmente se regirá por sus propiedades (carácter moderado polar y presencia
de grupos de donantes/aceptador de hidrógeno, véase tabla 1) y el tipo de matriz de alimentos. Sorbentes tanto, no selectivos y selectivos han demostrado excelente rendimiento para aislamiento y limpiar de BPA fromfood
(véase tabla 3).
3.2.1. No selectivo sorbentes
El copolímero de divinilbenceno/N-vinilpirrolidona (OASIS HLB
El polímero hidrofílico de N-vinilpirrolidona ofrece buena mojabilidad de los sorbentes y actúa como un aceptor de hidrógeno, mientras que el polímero hidrofóbico divinilbenceno proporciona fase inversa retención de BPA. Ofrece ventajas sobre la clásica silicona Sorbentes, es decir, alta área específica (800m 2/g), la posibilidad de secar durante el procedimiento de extracción sin reducir su capacidad para retener el BPA y como otras resinas poliméricas, estabilidad en el rango de pH todo [59]. Entre otros alimentos líquidos, OASIS HLB se ha aplicado para el aislamiento de BPA de la porción acuosa de conservas de frutas y verduras
[40], el lixiviado es originario el tratamiento de vacío alimentos para mascotas latas con agua destilada a 121◦C por 30 min [44], el agua potable
y bebidas de soda [60], [61] el calostro humano y altamente viscoso muestras, como la miel [62]. La extracción de proteínas y lípidos fue necesaria para las muestras de calostro humano antes de SPE. Para ello, las muestras se diluyeron con agua destilada, tratada con
acetonitrilo o 2-propanol, centrifugado y filtrado [61]. El tamaño de las muestras fue en las gamas 1 –50mL [40,44,61] y 10 g [62] Aunque el volumen de la brecha aumentó hasta 2 L para beber agua [60].
Por otra parte, como OASIS HLB elimina eficientemente hidrofílico y lipofílicos interferencias [63] y se ha aplicado a la
Clean-up de una variedad de alimentos después de la extracción solvente, es decir, pescado (para eliminar los lípidos polares co-extracted) [38], frutas y hortalizas
(porción total de contenido o sólido) [40,41] y una variedad de Conservas [46]. Un segundo paso de limpiar con una fase normal
SPE absorbente (Florisil, un silicato de magnesio sintético) era necesario en algunas aplicaciones, es decir, en el tratamiento de pescado, fruta y muestras vegetales [38,40,41]. Retención de Florisil ocurre principalmente a través de la adsorción, y limpieza debe ser realizada de muestra
extractos previamente se evaporaron y se redisuelve en un no-polar
disolventes orgánicos como el n-hexano. Recuperaciones generales en todo el citado aplicaciones eran superiores al 80%.
Se ha propuesto químicamente servidumbre de fase inversa de sílice (C18) como una absorbente para el aislamiento de BPA de mineral de la SPE agua y vinos [64] y lata de leche condensada y en polvo
[65]. Las muestras de leche se diluyeron con water –methanol (8:1, v/v) con el fin de obtener extractos tan limpio como sea posible. La adición de agua reduce la viscosidad de la muestra, lo que resulta en un mejor
caudal durante SPE, mientras que la adición de metanol encaminadas
la desestabilización de la emulsión de la leche. Se argumentó que eso si leche las membranas del glóbulo de grasa no se interrumpen, BPA podría no ser eficaz y reproducible extraído. Muestras de leche con un contenido de grasa
por encima del 3,5% previamente diluido con agua. Recuperaciones de la SPE para BPA oscilado entre 57 y 85% y el estándar interno [2H 16]
bisfenol A, BPA-d16 fue utilizado para la cuantificación [65]. El uso de poliestireno-divinilbenceno (PS-DVB, Isolute y PSDVB hidroxilado, Sorbentes Isolute ENV) en esta aplicación no mejoró
las recuperaciones a pesar de ofrecen hidrofóbico y –interacciones para
retención de BPA. Por el contrario, fueron superiores al 85% de las recuperaciones obtenidos por el PS-DVB adsorbentes para el aislamiento de BPA deagua
miel diluida y acidificado [62], diluido, centrifugado y filtrado de agua infantil fórmula y conservado vegetales y zumos de fruta [15,66]
y bebidas enlatadas no tratadas [67]. Recuperaciones siempre fueron más altas del 85%.
Por último, multimodo fases (Isolute multimodos cartuchos)
también se han propuesto para el aislamiento de BPA de café instantáneo [68].Phaseswere multimodo para explotar de modo múltiple
interacciones andwere originalmente diseñado para la detección de drogas y metabolitos [69,70]. Además de explotar las interacciones múltiples para conservar las mezclas de analitos con diferentes propiedades,
Estos sorbentes han utilizado últimamente para obtener extractos limpios para un compuesto que puede ser retenido por múltiples interacciones. Isolute cartuchos multimodos combinan catiónicos, aniónicos y no polar
funcionalidades. Recuperaciones en café entre 85% y 89% (RSD: 4-7%).
En general, el uso de SPE para aislamiento de BPA de líquido
alimentos ofrece dos ventajas en comparación con LLE, es decir, mayor
selectividad y menor consumo de disolventes. Por otra parte, las concentraciones factores, enhancedby evaporación de disolventes, son similares para
SPE y LLE. El SPE de alimentos líquidos generalmente requiere más limpieza y debe tener mucho cuidado con respecto a las pequeñas partículas
presentes en los extractos de muestra que pueden producir lowrecoveries y irreproducible por adsorción de analitos o estorbar. Un detallado
comparación entre diferente SPE y métodos de extracción por solvente se da en la tabla 3.
3.2.2. Selectivo sorbentes
Una variedad de materiales absorbentes de SPE altamente selectivos han sido desarrollados que son especialmente adecuados para la determinación de trazas contaminantes en tales muestras complejas como alimentos, por lo tanto realizar extracción y limpiar en un solo paso. Por otro lado, la
desarrollo de estos smartmaterials es largo, complejo
y caro, como es el caso de immunosorbents y molecularmente
polímeros impresos. Su aplicación en el análisis de alimentos y específicamente a la determinación de BPA, está surgiendo pero un bien escaso
hasta el momento.
3.2.2.1. Acceso materiales (RAMs). El término "restringido
acceder a materiales"(RAMs) fue introducido por Desilets et en 1991 [71]. Estos sorbentes fueron desarrollados especialmente para el on-line Clean-up/extracción de muestras biológicas (como plasma y
suero) con el fin de realizar un análisis de alto rendimiento. Cosechadora de carneros tamaño de la exclusión de las proteínas y otras macromoléculas con la
simultáneo enriquecimiento de analitos de masivos moleculares bajos en el superficie interior del poro, que son retenidos por conventionalmechanisms (hidrofóbico, iónico o interacciones de afinidad) [72]. La exclusión de tamaño es alcanzada por una barrera de difusión física (diámetro de poro) o por un barrera química creada por un polímero en la superficie externa de la partículas.
Se ha utilizado un RAM (LiChrosphere RP-18 anuncios de Merck) para el análisis simultáneo de la SPE-LC –MS/MS on-line de BPA, otros
compuestos fenólicos y triclocarban en la leche materna [73]. La memoria RAM consta de una fase inversa servidumbre cubriendo el poro interno (C4,
C8 o C18) y una superficie modifiedwith grupos hidrofílicos (glycerylpropyl, es decir, diol moieties), que actúa como una barrera física (tamaño de los poros 6 nm) que excluye las macromoléculas. El método consiste en la
Además del estándar interno (100 L, 13 C 12-BPA) a la muestra, la hidrólisis enzimática de la BPA conjugado, proteína y
extracción de lípidos mediante la adición de 2-propanol y centrifugación a Extraiga el sobrenadante limpio (200L), que está sujeta a on-line
SPE-LC –MS/MS. También puede ser usado medida la libre de BPA omitiendo el tratamiento enzimático. Recuperaciones de BPA fueron entre 94
y 106% y la precisión del método en el rango 5 –19%.
3.2.2.2. Immunosorbents (ISs). Columnas de inmunoafinidad (IAC) o los immunosorbents supuestos (ISs) son hechos por unión covalente anticuerpos en un soporte adecuado. Ofrecen única
selectividad sobre la base de reconocimiento molecular, que es particularmente adecuado a las matrices de alimentos complejos. ISs pueden diseñarse
para apuntar un único analito o explotando reactividad cruzada a
Extracto de toda una clase de compuestos estructuralmente relacionados. Aunque mayoría de las aplicaciones es para muestras biológicas y ambientales
(revisado en [74]), ISs también han sido explotados para la extracción de alimentos y son comercialmente disponible para el análisis de natural toxinas [75,76]. Los principales inconvenientes de esta técnica es el costo de producen los anticuerpos y la corta vida de columnas.
Se han reportado varios métodos que utilizan sol –gel
cromatografía de inmunoafinidad para limpiar alimentos líquidos o extractos crudos previo a la determinación de BPAby LC –fluorescence
detección. Precolumns de sol –gel que contiene el anticuerpo no estaban en línea junto con las columnas de inmunoafinidad para prevenir
desde la obstrucción causada por las pequeñas partículas presentes en Extracto de la muestra. El enfoque es aplicable a una variedad de
Conservas de alimentos incluyendo bebidas, frutas, verduras [77.78], fatcontaining los productos alimenticios (por ejemplo sopa de patata de atún, crema,) [78] y vino [79]. El ISs producida por la inmovilización de los anticuerpos en
los poros de una matriz de sílice generado sol –gel son más simples, más barato y más versátil que los preparados por el acoplamiento covalente
de anticuerpos policlonales de CNBr activado Sepharose 4B [80]. El
capacidad máxima de las columnas IAC de encuadernado para BPA era 280 ng y bien reproducibilitywas lotes encontrados, siendo reutilizable por lo menos 1 5
veces. Sustancias que muestran alta reactividad cruzada (> 1%) no afectó la determinación de BPA desde eficientemente fueron separados por el sistema LC.
En general, las muestras de alimentos deben tratarse en cierta medida con el fin de hacerlos compatibles con cromatografía de inmunoafinidad. Withwater de dilución es esencial desde solventes orgánicos
Fig.2. Cromatogramas obtenidos para solución a BPA (10 ngmL−1), (b)
vino muestra sujeta a limpiar por extracción en fase sólida (C18 cartucho) y (c)
la misma muestra de vino limpiado-para arriba por cromatografía de inmunoafinidad [79]. causar desnaturalización irreversible de anticuerpos. Alimentos líquidos como
bebidas y vinos son desgasificados y diluyeron 1:1 con phosphatebuffered salino (PBS) (pH 7) para permitir la Unión de BPA
immunosorbent. Alimentos sólidos como frutas, verduras, estofado, sopa y pescado se extrae con acetonitrilo, extraido hacia atrás con n-hexano para eliminar los lípidos en matrices grasos, filtrado y diluido (1:10) withwater antes de limpiar con ISs.Compared C18-basado
SPE, IAC fue superior en la eliminación de interferencias de matriz de alimentos que se muestra en la figura 2 para muestras de vino limpiado-para arriba con C18 y IAC. Recuperaciones de BPA con IAC fuertemente dependen de la matriz alimentaria. Así, algunos de los valores obtainedwere: 53% en guisantes, 75% en duraznos [77], 27% en goulash, 103% en un refresco de limón [78] y de 74%
al 81% en vinos [79]. Valores RSD para estas muestras fueron entre
1 y el 21%. Las recuperaciones de variables y bajas obtenidas para IAC fueron explicó sobre la base de la naturaleza dependiente de la matriz de la anterior disolventes de extracción de BPA y la influencia de coextraen
componentes de la matriz de las interacciones BPA –antibody.
3.2.2.3. Molecularmente impresos polímeros (MIPs). Molecularmente polímeros impresos (MIPs) son polímeros sintéticos que molecular
capacidad de reconocimiento para un parámetro de destino [81]. MIPs ofrecen algunos ventajas sobre la ISs como estabilidad frente a los solventes orgánicos,
ácidos fuertes y bases y calefacción. Además, permiten
mayores volúmenes de muestra y reutilización y su síntesis es más fácil
puesto que no son dependientes en la producción de anticuerpos. En la actualidad un número de enfoques se han utilizado para preparar BPA impreso
polímeros, que han sido aplicados a la determinación [82 –85]
y eliminación [86] de BPA y otros contaminantes de estrógeno fenólicos en aguas ambientales. Nuevas arquitecturas para desarrollar BPA-MIPs,
como híbrido molecularmente impresos membranas [86], molecularmente impreso de microesferas Poliétersulfona (PES) [87] o un
híbrido RAM-MIP [88] se han descrito en la literatura.
En menor medida se han propuesto aplicaciones alimentarias de MIPs (revisado en [89]) aunque es una zona emergente con prometedor desarrollos. A lo mejor de nuestro conocimiento, sólo una aplicación ha sido desarrollado para la extracción basadas en MIP de BPA de
alimentos [90]. Un acercamiento combinatorio fue utilizado para simplificar la optimización procedimiento. Ácido metacrílico (MAA) y 4-vinylpyridine
(4-VP) fueron evaluados como monómeros funcionales, glicol de etileno Dimetacrilato (EDMA) y trimethylolpropane trimethacrylate
(TRIM) como cross-linkers y metanol, acetonitrilo y tolueno
como solventes. El iniciador utilizado fue 2,2-azobis methylbutyronitrile (AIMN) y la plantilla era de BPA. Isótopos estables etiquetados
compuestos como el BPA-d16 [88] y análogos de la estructura como p-tertbutylphenol [84], también han sido utilizados como plantillas en otro
enfoques para evitar indeseables plantilla salida fromMIP y la
consiguiente llevar sobre efectos. Los componentes óptimos seleccionados fueron 4-VP (4 mmol) y recorte (12 mmol), que proporcionan una mayor grado de reticulación, AIMN (0.88 mmol) y tolueno (150 mL),
que proporciona menor fijación no específica. La limpieza basadas en MIP / método de extracción/concentración permitida la determinación
de BPA (recuperación del 78%; RSD 10%, n = 3), libre de co-extractives, en el fase acuosa filtrada de conservas.
3.3. Menos comunes técnicas de extracción
Técnicas de extracción por sorción sobre miniaturizada como fase sólida
Microextracción en (SPME) y revuelva la barra extracción por sorción sobre (SBSE) han la capacidad de mejorar el aislamiento y la limpieza de contaminantes
de los alimentos en términos de consumo de disolventes, automatización y muestra manejo reducción, sin embargo su aplicación a la
extracción de BPA fromfood es todavía limitada hasta la fecha. Asimismo, la matriz dispersión de la fase sólida (MSPD), que tiene el potencial de simplificar
la extracción de muestras sólidas, se ha aplicado también apenas
comentó destacando sus principales ventajas e inconvenientes. 3.3.1. Microextracción en fase sólida (SPME)
El dispositivo SPME consiste en una fibra de sílice fundido recubierta con un fase estacionaria apropiada conectada a una microjeringa modificado. La extracción puede realizarse mediante la suspensión de la fibra en la la fase de vapor sobre la muestra líquida (headspace (HS)-SPME) o por dirigir la inmersión en la muestra, (DI)-SPME, siendo la desorción
llevado a cabo térmicamente, exponiendo la fibra en el puerto de inyección de un cromatógrafo de gases, o químicamente, cuando acompañada de LC [91]. HS-SPME seguido por GC –MS es ideal para la extracción
de compuestos volátiles de los alimentos (revisados en [92]) desde el analito
las determinaciones son prácticamente libres de interferencias, pero ninguna aplicación relaciona con BPA en los alimentos se han desarrollado hasta ahora. DI-SPME
seguido por GC –MS se ha aplicado a la determinación de BPA
en simulantes de alimentos acuosa [93] y agua de los envases plásticos y vajilla [94]. DI-SPME también se ha propuesto antes
LC –FL para la investigación rápida de BPA en conservas, sólo analizar la fase acuosa de la can [95]. Diferentes fases estacionarias
con la capacidad para soportar temperaturas altas del inyector (polidimetilsiloxano, PDMS; carboxen/PDMS; PDMS/divinilbenceno,
DVB; Carbowax CW/DVB y polyacrylate, PA) evaluaron la la extracción de BPA por DI-SPME –GC [93,94]. La capa PA dio
las mejores recuperaciones en base a su polaridad similar al BPA. Entre
los materiales de revestimiento probados para extracción de BPA por DI-SPME –LC, las fibras más polares dieron los mejores resultados. Recuperaciones fueron 6% para PDMS-DVB, 7% para PA, 58% de PDMS y 90% para CW, así que el último
fue seleccionado como óptima. El efecto de la fuerza iónica en
Las recuperaciones BPA fue significativa y los tres métodos incluyen el adición de sal, es decir, 7,5% (w/w) [93,95] y 15,4% (w/w) [94].
Absorción máxima se produjo en pH neutro [93,95] y la absorción
proceso se llevó a cabo a temperatura ambiente [95] o en SSP.schintzii ◦C
[93,94].
Los tres métodos fueron lo suficientemente sensibles para la detección o evaluación de la migración de BPA (límites de cuantificación fueron 3.8mgL−1 [95] y 0.01 –0.02mgL−1 *93,94+), pero también presentaron graves
inconvenientes. Así, la automatización de SPME con LC –FL a través de la interfaz de Supelcowas no da resultado, siendo el off-line
modo más eficiente que el uno automatizado en términos de sensibilidad y resolución de pico [95]. Este hecho fue explicado sobre la base
el mayor factor de concentración en el modo off-line (∼67) y
la introducción más lenta de los analitos en el sistema de la LC en el modo dinámico, resultando en picos más amplios [95]. De hecho, Eisert y Pawliszyn [96] más tarde desarrolló la técnica SPME en tubo,
y es más conveniente para la automatización de la LC. Tubo SPE ha sido con éxito aplicado a la extracción de BPA y otros estrógenos de
aguas ambientales [97,98], pero no en alimentos muestras todavía. Otros el punto débil del método SPME –LC –FL fue la reproducibilidad
(RSD fue 22% para 100mgL−1 de BPA). Con respecto a la determinación de BPA por SPME –GC –MS, la variabilidad fue alta entre
serie (promedio RSD∼10 –13%) y en consecuencia una calibración para cada uno serie de análisis se recomienda [93,94]. Por otro lado
a pesar de sólo simulantes acuosos o agua potable fueron analizados,
las recuperaciones bajas resultante del efecto de los componentes de la matriz (7 –65%) [94,95], hizo aconsejable el uso de la adición estándar
método para la cuantificación de BPA. Se relacionaron con las recuperaciones bajas competitividad entre BPAand el matrixcomponents para el enlace
a la limitada cantidad de fase estacionaria, que condujo al analito
desplazamiento [94]. A nuestro conocimiento ningún estudio relacionado con el uso de SPME para extracción de BPA de matrices más complejas de alimentos ha
se ha divulgado hasta ahora. De hecho, el uso de DI-SPME en matrices de alimentos Si necesita limpiar exhaustiva para garantizar la reproducibilidad y
la robustez de las fibras, que pueden ser afectados por adsorción de
proteínas u obstruida por las partículas, del mismo modo que puede ocurrir en el Análisis de BPA en otras matrices complejas como plasma humano
3.3.2. Extracción absorbentes (SBSE) barra agitadora
SBSE utiliza una barra de agitación en un tubo de vidrio sellado que está cubierto con polidimetilsiloxano (PDMS) para extraer solutos [100]. En comparación
para SPME, una mayor cantidad de fase estacionaria (50 –250 veces
superior) es usadas y por lo tanto mejores recuperaciones, sensibilidades andsample capacidad se consiguen. Como en SPME, puede estar inmerso la barra agitadora en el líquido de la muestra o puede realizarse en el espacio anterior el
líquido o el sólido muestra para determinar volátiles y semi-volatiles
(extracción por sorción sobre headspace, HSSE). Extracción de los analitos de la barra se logra mediante desorción térmica de GC o elución con una
Solvente de la LC. La técnica se desarrolló inicialmente para la extracción de compuestos orgánicos de muestras acuosas, pero hoy una variedad de aplicaciones en el medio ambiente, alimentación y áreas biomédicas han se ha divulgado (ha comentado el en [101]).
PDMS es disponible en el mercado único de la capa, la
aplicación de SBSE para compuestos polares y semipolar requiere Derivatización. Por lo tanto, la extracción de BPA de agua [102 –104] se ha llevado a por derivatización de BPA con anhídrido acético, inmersión de la barra en la desorción de solución y termal-Análisis GC –MS. De esta manera, las LODs para BPA fueron en la
gama 0.6 –2 ng L−1. A pesar de SBSE nuevo recubrimientos son necesarios para ampliar el alcance de SBSE, sólo unos cuantos se han divulgado
hasta el momento. Cabe destacar los twisters de la doble fase (corto Tubos PDMS cerrados en ambos extremos con imanes, con un interior cavidad que está repleto de adsorbente de carbón activado), que
se propusieron mejorar las recuperaciones de compuestos polares [105 ] y dos materiales selectivos, es decir, un polímero molecularmente impreso (MIP) para la extracción de monocrotofos [106] y una restringida
acceso a medios (RAM) para la extracción de cafeína y relacionadas con metabolitos [107]. En este sentido, basada en una novela capa SBSE en polidimetilsiloxano ha sido /-ciclodextrina (PDMS /-CD)
recientemente desarrollado y aplicado a la extracción de BPA (y otros compuestos estrogénicos) de agua ambiental, agua potable
y lixiviados de vajilla de una sola vez, antes de la determinación por LC –FL [108]. La capa de PDMS/CD fue preparada por un sol –gel técnica, whichprovideddirect químico de la papelería
fase al substrato de cristal y dio lugar a una mayor estabilidad en comparación con a la técnica de deposición física empleada con frecuencia para
capa. La introducción de la ciclodextrina permitió aumentar
la recuperación de compuestos polares debido al alto número de funcional grupos hidroxilo de la molécula -CD y la selectividad
proporcionados por su capacidad de reconocimiento molecular. La extracción fue realizado por inmersión de la barra de agitación en la muestra (5 mL)
40 min (condiciones de no equilibrio) a temperatura ambiente. Desorción de BPA se realizó con 100 litros de metanol durante 2 min bajo
agitación ultrasónica (cociente del volumen de la muestra sobre el volumen del extracto de 50). PDMS /-CD revestido revolver bar proporcionada mejor selectividad
y sensibilidad para compuestos polares que una barra de agitación recubiertas de PDMS y un CD de PDMS –recubierto de fibra. El menor rendimiento de método
para SPME fue atribuida al menor volumen de fase estacionaria y la introducción de una etapa tercero competitiva en la agitación paso, es decir, el teflón recubierto barra magnética. El LDD de BPA fue 8ngL−1, con recuperaciones entre 86 y 116% y RSD en la
gama 0.7 –10.7%.
3.3.3. Dispersión de fase sólida matriz (MSPD)
MSPDwas reportada por primera vez en 1989 [109] y iswell adecuado para el extracción de alimentos sólidas, semisólidas o altamente viscosos y biológicas matrices (revisados en [110.111]). La muestra se mezcla con
un absorbente como C18 enlazada sílice, sulfato de sodio o diatomeas tierra, seguida de lavado con un pequeño volumen de disolvente
o embalaje el dispersante material absorbente en una mini-column SPE antes de elución. MSPD es simple y versátil y ofrece la posibilidad de de realizar la extracción y la limpieza en un solo paso [112.113]
esta dando como resultado un acortamiento drástico de tiempos de análisis y solvente consumo.
de BPA, nonilfenol y Octilfenol de huevos y la leche [114]
antes de la determinación de la LC/MS/MS. Se mezclaron las muestras (1 g) con 1 g de polvo de C18 sólo durante 5 minutos, embalado y eluido con 10mL de etanol. Este agente dispersante dio mejores recuperaciones de BPA
que el negro de carbón grafito (GCB) debido a la fuerte adsorción de BPA GCB. El eluyente se evaporó a sequedad y la
residuewas se redisuelve en diclorometano/hexano y sujeto a
Tabla 4
Análisis basado en la LC para la determinación de BPA en los alimentos
mues tra Otros analitos que BPA ls prepara ción de la muestr a (pasos principa les) Columna de LC LCparámetr os Detector parámetr os gama lineal, método LOD o LOQ recupera ciones (R) Refere ncia Cerea les 4-n-Nonylph enol - –PLE – SPE XTerraMS C18, 100 mm × 2. 1mm, 3,5 m (Sistema de aguas). Fase móvil: Amonio de 0,0025 M tampón de formiato (pH 3.1, ajustado con fórmico ácido) / metanol con gradiente elución, 0.2mLmi n−1, Inj: 50 L (-) De ESI-MS: capilar Voltaje: 3.0 kV, cono Voltaje: 40 V, fuente temperat ura: 120 ◦C, desolvati on temperat ura: 250 ◦C, desolvati on de gas (N2): 410Lh−1, gas de cono (N2): 50 L h−1 LR: 0.08 – 0.8gg−1 (adición estándar ), LOD: 43 ng g−1; R: 81 – 104% (PLE recupera ciones) Carabi as-Martín ez et al [32]
4-tert-butilfenol ademáspostcolu
mna de una base fuerte [1, 8
-2, 4-Diclorofe nol 2,4,5 Triclorof enol Pentaclo rofenol ácido 4- terc-Butylben zoic Diazabici clo -(5,4,0) undec-7-es], 10Lmin− 1
Fruta
s y
verdu
ras
- - SE –SPE simetríaescudo RP18, 150 mm × 4. 6mm I.D., 3,5 m con un protector columna, 10 mm × 2. 1mm Identifica ción, 3,5 m (Millipore ) Fase móvil: agua/ace tonitrilo (60: 40, v/v); 1.2mLmi n−1; INJ: 50L. FL: 275/300 nm LR: 10 – 1000 ngmL−1; LOD: 1.3ngg−1 ; R: 82 –101 % Kang et al [41] Cons ervas para masc otas - - E –SPE (total conteni do) Simetría escudo RP18 150 mm × 4. 6mm I.D., 3,5 m (Millipore Corporac ión, Milford, MA, ESTADO S UNIDOS) . Fase móvil: agua/ace tonitrilo (60: 40, v/v), 40 ◦C, 1mLmin− 1, Inj: 50L. FL: 275/300 nm LR: 50 – 1000 ngmL−1; LOD: 2ngmL−1 (agua), 3 ng g−1 (pet alimento s); R: 95 % Kang y Kondo Cons ervas de grasa, acuos a de medio s ácido s. Señal - SPE (lixiviaci ón de latas vacías) SE – SPE Nucleosi l C18, 250 mm x 4 mm de diámetro interior, 5m (Hichrom Limited, Fase móvil: agua/ace tonitrilo con gradiente elución, 25 ◦C, 0.4mLmi n−1, Inj: FL: 235/317n m LR: 200 – 2000 ngmL−1; LOD: 4.5 –7.9 ng g−1; R: 87 – 105% (alimento Sol et al [46]
BADGE-H2O BADGE-2H2O BADGE-H2 O-HCl BADGE-HCl BADGE-2HCl Berkshire , Reino Unido). 10L. s simulado r) Agua miner al p-Butylphe nol - LLE Inertsil ODS-2, 150 mm × 4. 6mm I.D., 5m (GL Ciencias, Tokio). Fase móvil: agua/ace tonitrilo (40: 60) que contiene 0.2 % H3PO4; 40◦C; 1mLmin− 1; INJ: 10L. ED, culombio métrico detecció n con una doble célula analítica de electrodo LOD: 5.7gL−1; R(Mean): 63 % Toko'o ya et al. p-tert-butilfenol p-Hexylph enol p-tert-Octilfeno l p-Nonylph enol p-Heptylph enol Nonilfen ol E1: 400mV (vs Pd) E2: 650mV (vs Pd) protector celular: 700mV (vs PD)) Pesca do 4-Terc-Octilfeno l BPA-d16 MAE-SPE 150Mm ×2,1 mm D. I. Fase móvil: agua/met anol con gradiente elución, 0.4mLmi n−1, Inj: no especific ado. APCI (-)-MS: capilar voltaje 3 kV, corona corriente: 40A, voltaje de fragment or: 100V, secado de flujo de gas 5Lmin−1, nebulizac ión 60 psi, presión ORY 20.7 – 10044 ngmL−1, LOD: 0.1 ngmL−1 (agua), 50 ng g−1 (pez); R: 49 –79 % (recuper ación absoluta, pescado) Peder sen y Lindho lst [50]
de gas vapourisi ng temperat ura 280 ◦C Carne Octilfeno l 4-n-Nonylp henol PLE-SPE C18 desimetría, 150 mm × 2. 1mm de diámetro interno 3, 5. m Fase móvil: agua (0.1 % amoníac o) / metanol con gradiente elución, 0.2mLmi n−1, Inj: 10 L. -) De ESI-MS/MS: capilar Voltaje: 3.5 kV, cono Voltaje: 70 V, fuente temperat ura: 100 ◦C LR: 1 – 500 ngmL−1; LOD: 0.3 ng g−1; R: 92 –97 % Shao et al [28] Agua y soda bebid as Nonilfen ol Octilfeno l Nonilfen ol 4-n-Nonylp henol SPE simetría C18, 150 mm × 2. 1mm de diámetro interno 3, 5 μ m. Fase móvil: agua (0.1 % amoníac o) / metanol con gradiente elución, 40 ◦C, 0.2mLmi n−1, Inj: 10 μ L. (-) De ESI-MS/MS capilar Voltaje: 3.5 kV; desolvati on temperat ura: 350 ◦C LR: 1 – 500 ngmL−1; LOD: 0,01 ng L−1 (agua potable), 0,6 ng L−1 (soda bebida); R: 82 –97 % Shao et al [60] Miel Bisfeno F l – cuantificación de SPE: CAPCE LL PAK C18, 150 mm × 4.6 diámetr o interno 5 m) (Tokio Shiseid o Co., Japón). Fase móvil: agua/ace tonitrilo (70: 30, v/v); 1.2mLmi n−1; INJ: 10L. FL: 275/300 nm LR: 25 –500; LOD: 2ngg−1; R: 93.9 – 116.4 % Inoue et al [62] Confirma ción: CAPCEL L PAK MG C18 (-) De ESI-MS: capilar Voltaje: 3.5 kV; voltaje de fragment or: 140V, 220 V; FL: 275/300 nm LR: 25 – 500; LOD: 2ngg−1; R: 93.9 – 116.4 % noue et al [62]
(250 mm × 2 m m, 5m (Shiseido Co. Tokio, Japón) Fase móvil: agua (0.01 acético ácido) / acetonitril o con gradiente elución; 0.3mLmi n−1; INJ: 5μL. Leche -
BPA-d16 SPE SPELiChrosp
her 100 RP-18, 250 mm x 4 mm de diámetro interior, 5μm Fase móvil: agua/met anol (30: 70, v/v) 0.9mLmi n−1, Inj: 10μ L (-) De ESI-MS: capilar Voltaje: 3.5 kV, cono Voltaje: 70 V, fuente temperat ura: 500 ◦C LR: 5 – 700 ngmL−1; LOD: 0,7 ngmL−1; R: 52% (absoluta recupera ción), 101% (recuper ación relativa) Marag ou et al [65] Porci ón acuos a de conse rvas alime ntos
Abreviaturas: PLE, extracción con líquido a presión; SPE, extracción en fase sólida; Inyección, volumen de inyección, ESI, extracción por solvente SE, de ionización electrospray; FL,
detección de fluorescencia; DIVISA, bisfenol A diglicidil éter; LLE,
extracción líquido-líquido; ED, detección electroquímica; MAE, extracción asistida por
microondas; APCI, presión atmosférica ionización química; BFDGE, bisfenol F diglicidil éter; SPME, solid-phase microextracción en, RAM,
materia de acceso restringido
Inicio
SPE con aminopropil para eliminar la fracción lipídica de las muestras.
Significa recuperaciones de BPA se extendieron de 8 2% a 91% y el RSD media los valores de los huevos y la leche fueron 6% y 4%, respectivamente.
4. Separación y detección
técnicas sensibles y selectivas debido a los niveles de seguimiento en el cual
es frecuentemente encontrado (véase tabla 2) y la complejidad de matrices de alimentos. Aunque el SML establecidas por la Comisión Europea es relativamente alta
(600ngg−1), los efectos informados de dosis bajas de BPA ha dado lugar
para el desarrollo de métodos analíticos con LODs bajo bastante para evaluar la exposición humana a estos niveles. La determinación
de BPA en los alimentos es principalmente realizado por LC/FL, LC/MS y GC/MS. Cromatografía líquida ofrece la ventaja de la simplicidad sobre GC
para que derivatización paso es necesario, mientras que proporciona el último resolución máxima más alta. Otras técnicas como LC –electrochemical
detección (LC –ED) e inmunoensayos han sido utilizados en menor
medida. Información detallada sobre cromatografía y detección
condiciones para la determinación de BPA se resume en los cuadros 4 y 5. 4.1. Liquid chromatography
LC de BPA se realiza generalmente en columnas de fase inversa C18. Fases móviles varían según el detector juntado a LC.Agua
y acetonitrilo son los solventes más comunes del binarios cuando fluorescencia la detección es whilewater usado y metanol se prefieren para
ESI-MS y APCI-Sra. elución condiciones dependen altamente de los analitos determinar junto con matrices de BPA y de alimentos. Por lo tanto, es
frecuentes para determinar BPA con otros fenoles, disruptores endocrinos y empaquetado de fromfood de los migrantes (véase tabla 4) y en este caso gradiente elución se realiza siempre. Tiempos de funcionamiento oscilan entre 15 (por ejemplo [32]) y 40 minutos (e.g. [60]) dependiendo del número de determinado de contaminantes y la composición de la matriz. Suele ser LC realizado atemperatura ambiente pero temperaturas hasta 40 ◦C son
a veces se recomienda [por ejemplo, 32 y 60] para reducir el tiempo de análisis y aumentar la reproducibilidad.
4.1.1. Detección de fluorescencia
BPA muestra fluorescencia nativa con emisión y excitación
longitudes de onda en 275 y 305 nm, respectivamente, que mantener constante en los solventes utilizados con más frecuencia en fases móviles de LC,
es decir, agua, acetonitrilo y metanol. La intensidad de fluorescencia
de BPA es, sin embargo, mucho mayor en los medios orgánicos (véase Fig. 3) y así la sensibilidad en LC será dependiente de la fase móvil
composición. Límites de cuantificación instrumental típica para BPA por Detección de LC –Fluorescence están en la gama 5 –50 ngmL−1.
La técnica es adecuada para la determinación de BPA en
matrices de muy diferentes alimentos como bebidas, vinos, alimentos para mascotas, miel, frutas, verduras, goulash y pescado. Preparación de muestras normalmente incluye limpiar usando SPE basadas en solvente no selectivo
[41,44,46,62], columnas de inmunoafinidad [77 –79] o extracción de SPME
[95] seguido de evaporación de solvente. Límites de detección típico
de BPA en los alimentos usando la detección de fluorescencia están en la gama 0.1 –2 g−1 ng ngmL−1 y 1-5.
La identificación de BPA en la muestra se basa sólo en retención veces, así que la posibilidad de interferencias de otros fluorescentes
migrantes de alimentos de recubrimientos puede, por ejemplo bisfenol A diglicidil éter (Insignia), bisfenol F diglicidil éter (BFDGE) o novolacs Glicidil
éteres (NOGE) [115.116], se debe considerar siempre puesto que
a veces ha sido la cuantificación por la detección de LC –fluorescence
empleado [62].
Figura 3. Espectros de fluorescencia (nm de longitud de onda 275 de excitación, paso de banda espectral de Raja
20 nm) de bisfenol A (1) agua, acetonitrilo (2) y metanol (3). Concentraciones de BPA:
(1) 25mgL−1 y (2 y 3) (1mgL−1).
4.1.2. Detección electroquímica
Detección electroquímica (ED) de BPA se basa en el pozo conocido electroactivity de los grupos fenólicos presentes en el
molécula (véase tabla 1). LC –ED se ha utilizado para la determinación
de BPA en fluidos biológicos [31, 116 –119] y agua [29, 45]. Inoue
et al [31] en comparación con los límites de detección instrumental obtenidos para BPA con LC acoplados a electroquímicos, FL, detectores de UV
[31]. El detector electroquímico (Coul matriz modelo 6210, ESA,
USA) consistió en cuatro células, trabajando en los siguientes potenciales; 350, 430, 570 y 650mV y proporciona un método LOD de 0,5 pg,
quefue 3000 y 200 veces más bajos que los obtenidos withUV
y detectores de FL utilizando el mismo volumen de inyección (50L). Similares
sensibilidad de masa (por ejemplo LOD de 57 g para un volumen de muestra inyectado de 10 L [45]) ha sido obtenido por diferentes autores [29,30]. El pH
y contenido de electrolito de la fase móvil influyen en la electrontransfer constantes de velocidad, por lo que deben optimizarse para
sensibilidad getMaximum. Elución isocrática recomienda [31,45],
de lo contrario veces equilibrio bastante grande será requeridos para las mediciones, Esto es una desventaja principal de la disfunción eréctil.
LC –ed también se ha utilizado para el análisis de BPA en los alimentos
simuladores (agua, agua acidulada y agua: etanol) usando un detector electroquímico caseros [36]. Un químicamente modificado
electrodo (CME) fue preparado por un electrodo de carbón vidrioso de la capa con una película de éster dimetílico Ni protoporfirina IX según la
procedurepreviously describedby thesameauthors [120]. TheCME fue diseñado especialmente para evitar el aumento en el fondo corriente causada por el alto potencial requerido para la oxidación
de los compuestos fenólicos en carbón vidrioso, que en el caso de BPA conduce a una sensibilidad disminuida. La f ase móvil consistió en de metanol: agua (60: 40) que contiene 10 KNO3 y 0,25 mM
H2SO4 como electrolitos y el método LOD era pg 4
después de un paso de la concentración. A pesar de la probada idoneidad de ED para la determinación de BPA en agua potable y alimentos a base de agua
simuladores, LC –ED no ha sido aplicado a los alimentos comunes de complejo
matrices todavía. 4.1.3. LC –MS
El uso de espectrometría de masas puede reducir el tratamiento de la muestra y incluso puede permitir la "extracción" de un analito en la detección
etapa de un método de selección de iones específicos o transiciones. Sin embargo, preparación de la muestra buena sigue siendo necesario en los métodos de LC –MS
(véase el cuadro 4) puesto que determina la presencia de componentes de la matriz
Tabla 5
Análisis de GC para la determinación de BPA en los alimentos
Muestra Otros analitos que BPA I.S. Prepa ración de la muest ra (paso s princi pales) Derivatiza tion Columna GC temperatura progra ma y inyecci ón Parámet ros de MS Rango lineal, LOD o LOQ, recuperaci ones (R) Referen cia Verduras frutas, pescado sopas y salsas, Conservas de carnes, espagueti y al horno habas, alimentos infantiles, bebidas --- BP A-d 14 SE o LLE Anhídrido acético DB-5MS,30m×0.25m m Destina dos a 120 ◦C 2min, rampa en 10 ◦C minuto− 1 a 280 ◦C. INJ: splitless BPA diacetyl: m/z 228,m/z 213. LOQ: 10 ng g−1 (muestras 1% de materia grasa); R: 42 –112%. Thomson et al. [17 pescado 4-tercbutilf enol 4-n-butilfenol 4-Pentylph enol 4-n-hexilfeno l 4-terc-octilfenol 4-n-heptilfen ol nonilfeno l 4-octilfenol BP A-d 16 SE – SPE MTBSTFA, 100 L a el eluyente SPE seco (75 ◦C, 30min) I.D., 0.25 _ m (J&W, Folsom, CA, USA). DB-5MS, 30m×0.25m m I.D., 0.25 _ m (J&W, Folsom, CA, USA) Destina dos a 100 ◦C 1min, rampa en ◦C 3 minuto− 1 a 200 ◦C, durante 1 minuto, rampa en ◦Cmin− 1 20 a 280 ◦C, destina dos a 5 minutos I.S.:m/z 224 TBDMS derivate BPA:m/z 441,m/z 470 I.S.:m/z 452,m/z 470 LR: 0.5 – 50 ng g−1; LOD: 0.41 ng g−1;R : 105 – 120%. Gyong et al. [38]
