UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA
”LA MOLINA”
MANUAL PARA EL ANÁLISIS
QUÍMICO DE
Rubén Bazan Tapia
[email protected]
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 1
P R E S E N T A C I Ó N
El Manual de Análisis de Suelos, Aguas y Plantas recopila una vasta información dispersa y
acumulada a través de la experiencia adquirida en el Laboratorio Análisis del Departamento de
Suelos y Fertilizantes, Facultad de Agronomía de la Universidad Nacional Agraria "la Molina". La
presentación del contenido esta dividido en cuatro capítulos correspondientes al Análisis de
Suelos Normales, Análisis de Suelos Salinos - Sódicos, Aguas y Plantas. En general en contenido
sencillo, dinámico y académico para el entendimiento de los lectores conocedores del tema.
Los procedimientos han sido propuestos desde un punto de vista agronómico y descritos pé1ra
seguirlos paso a paso.
El Capítulo I contiene la guía para el análisis de suelos normales e incluye los procedimientos
necesarios para la preparación de las muestras, las determinaciones de carbonatos, materia
orgánica, y la determinación de macros (N, P y K) y análisis de un suelo salino-sódico. El
Capitulo II del Manual orienta en los procedimientos para el análisis de cationes y aniones
solubles, cloro extractable y en la determinación de yeso soluble. El Capítulo III muestra los
procedimientos para los análisis de aguas, donde las determinaciones están relacionadas a la
reacción (pH) del agua, alcalinidad, conductividad eléctrica, cationes y aniones. EI Capítulo IV y
ultimo capítulo. referente al análisis de plantas o foliar, comienza con los principio básicos y las
determinaciones del contenido de humedad, nitrógeno total por el método de Kjeldahl,
continua con los procedimientos para la digestión por la vía humedad o seca para determinar P,
K, Ca, Mg, S, B, Cu, Fe. Mn y Zn y termina con las determinaciones de B y Cl.
El manual incluye una serie de métodos de análisis alternativos a los tradicionales usados, pero
que necesariamente deben ser aprobados antes de su aplicación a los diferentes suelos, aguas
y plantas. En la descripción de un método de análisis no solo esta indicado el procedimiento de
análisis, sino también el principio químico del método, que sirve de información básica para
que el usuario tome en cuenta las diferentes reacciones que ocurren en el proceso. Por otro
lado, ante la existencia de diferentes instrumentos de análisis, como producto del avance de la
ciencia y tecnología, ha sido necesario recomendar el uso de las técnicas de emisión y absorción
en las determinaciones analíticas.
El autor espera que este Manual de Análisis sirva de Ayuda a todos aquellos interesados en el
análisis de suelos, aguas y plantas. El autor también espera que los lectores sean los más
severos críticos para ir mejorando el Manual de Análisis, en el cual puedan converger los
actuales avances en el desarrollo de nuevas técnicas o métodos de análisis.
I N D I C E
I.
ANALISIS DE SUELOS
1. PREPARACIÓN DE MUESTRAS DE SUELOS EN EL LABORATORIO ... 8
1.1. Equipos 1.2. Identificación 1.3. Secado
1.4. Molienda y tamizado
2. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE HUMEDAD ... 9
2.1. Principio 2.2. Equipos 2.3. Procedimiento 2.4. Cálculos
3. ANÁLISIS DEL TAMAÑO DE PARTÍCULA ... 10
3.1. Principio 3.2. Reactivos 3.3. Materiales
3.4. Procedimientos en estudios edafológicos 3.4.1. Oxidación de la Materia Orgánica 3.4.2. Remoción de carbonatos
3.4.3. Dispersión
3.4.4. Separación de fracciones
3.4.5. Determinación de la fracción arena 3.4.6. Determinación de limo y arcilla
3.4.6.1. Calibración de la pipeta 3.4.6.2. Determinación del blanco
3.4.7. Determinación de las fracciones menores a 0.05 mm de diámetro 3.4.8. Determinación de las fracciones menores a 0.02 mm de diámetro 3.4.9. Determinación de las fracciones menores a 0.002 mm de diámetro 3.4.10. Cálculos
3.5. Método del hidrómetro 3.5.1. Principio
3.5.2. Reactivos y materiales 3.5.3. Procedimiento
3.5.4. Cálculos
4. DETERMINACIÓN DEL pH DE LOS SUELOS ... 15
4.1. Principio 4.2. Reactivos 4.3. Procedimiento
4.3.1. pH de la pasta saturada 4.3.2. pH del suelo en relación 1:1 v/v 4.3.3. pH del suelo en relación 1:2 p/v
5. CONDUCTIVIDAD ELÉCTRICA (CE – Sales Solubles) ... 17
5.1. Principio
5.2. Equipo y materiales 5.3. Reactivos
5.4. Procedimiento
5.4.1. Preparación de la pasta de suelo saturada
5.4.2. Preparación de una suspensión suelo-agua en relación 1:2 o 1:5 5.5. Lectura de la conductividad eléctrica
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 3
6 DETERMINACIÓN DE CARBONATOS: CALCITA – DOLOMITA ... 20
6.1. Principio
6.2. Equipos y materiales 6.3. Reactivos
6.4. Procedimientos
6.4.1. Determinación de carbonatos mediante el calcímetro 6.4.2. Determinación de carbonatos mediante neutralización ácida 6.4.3. Cálculos
7. DETERMINACION DEL CARBONO ORGANICO: MATERIA ORGANICA ... 22
7.1. Principio
7.2. Determinación de la materia orgánica por calentamiento 7.2.1. Materiales
7.2.2. Procedimientos 7.2.3. Cálculos
7.3. Determinación de la materia orgánica: Método de Walkley y Black 7.3.1. Principios
7.3.2. Materiales 7.3.3. Reactivos 7.3.4. Procedimiento 7.3.5. Cálculos
7.4. Determinación de la materia orgánica por colorimetría 7.4.1. Materiales
7.4.2. Reactivos 7.4.3. Procedimiento
8. DETERMINACION DEL NITROGENO TOTAL EN LOS SUELOS ... 26
8.1. Principio 8.2. Materiales 8.3. Reactivos
8.4. Procedimiento por el método de Kjeldahl 8.5. Cálculos
9. DETERMINACION DEL FOSFORO DISPONIBLE ... 28
9.1. Principio 9.2. Reactivos
9.2.1. Soluciones extractantes
9.2.2. Soluciones para el desarrollo del color
3.2.2.1. Para extracciones con Bray y doblemente ácida 3.2.2.2. Para extracción con Olsen
9.2.3. Solución estándar 9.3. Procedimiento 9.3.1. Bray I y Bray II 9.3.2. Doble ácido 9.3.3. Olsen 9.4. Cálculos
10. CAPACIDAD DE INTERCAMBIO CATIONICO: CIC ... 32
10.1. Principio
10.2. Determinación de la CIC – Saturación con Acetato de amonio (NH4OAc)
10.2.1. Reactivos
10.2.2. Procedimiento usando destilación Kjeldahl 10.2.3. Procedimiento usando destilación micro Kjeldahl 10.2.4. Procedimiento ASI
10.3. Procedimiento mediante saturación con Acetato de sodio (NaOAc), pH 8.2 10.3.1. Reactivos
11. DETERMINACION DE CATIONES CAMBIABLES ... 35
11.1. Principio
11.2. Determinación de Ca++ y Mg++ por titulación 11.2.1. Principio
11.2.2. Reactivos 11.2.3. Procedimiento
11.2.3.1. Calcio más magnesio 11.2.3.2. Calcio
11.3. Determinación de Ca++ y Mg++ por fotometría de absorción 11.4. Determinación de Na+ y K+ por fotometría de absorción 11.5. Determinación de Al+++ e H+ (acidez intercambiable)
11.5.1. Principio 11.5.2. Reactivos 11.5.3. Procedimiento 11.5.4. Cálculos 12. DETERMINACION DE MICRONUTIUENTES: Fe - Cu - Zn - Mn. ... 39 12.1. Principio
12.2. Metodología ASI para Cu – Fe – Zn – Mn 12.2.1. Reactivos
12.2.2. Procedimientos 12.2.3. Determinación
12.3. Metodología de Lindsay y Norvell DTPA 12.3.1. Reactivos
12.3.2. Procedimiento 12.3.3. Determinación
13. DETERMINACIÓN DEL AZUFRE DISPONIBLE EN SUELOS ... 41
13.1. Principio
13.2. Extracción del azufre del suelo 13.2.1. Reactivos
13.2.2. Procedimiento
13.2.2.1. Extracción del azufre del suelo 13.2.2.2. Desarrollo de la turbidimetría 13.2.2.3. Cálculos
13.3. Extracción con NH4OAc - CH3 - COOH
13.3.1. Reactivos 13.3.2. Procedimiento
13.3.2.1. Extracción del azufre del suelo 13.3.2.2. Desarrollo de turbidimetría 13.3.2.3. Cálculos
14. DETERMINACION DEL BORO DISPONIBLE EN LOS SUELOS. ... 42
14.1. Principio
14.2. Extracción con fosfato de calcio y determinación del Boro con curcumina 14.2.1. Reactivos
14.2.2. Procedimiento
14.2.2.1. Extracción del boro
14.2.2.2. Determinación del boro extraído
14.3. Extracción con agua caliente y determinación del Boro con curcumina 14.3.1. Reactivos
14.3.2. Procedimiento
14.3.2.1. Extracción del boro
14.3.2.2. Determinación del boro extraído
14.4. Extracción con agua caliente y determinación del Boro con carmín 14.4.1. Reactivos
14.4.2. Procedimiento
14.4.2.1. Extracción del boro
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 5
II. ANALISIS DE SUELOS SALINOS Y SODICOS
15. ANALISIS DE SUELOS SALINOS Y SODICOS ... 46
15.1. Determinación del porcentaje de saturación, extracto de saturación y conductividad eléctrica 15.2. Determinación de cationes solubles
15.3. Determinación de aniones solubles
15.3.1. Carbonato CO-3 y bicarbonatos HCO3 -15.3.1.1. Principio 15.3.1.2. Reactivos 15.3.1.3. Procedimiento 15.3.1.4. Cálculos 15.3.2. Determinación de cloruros 15.3.2.1. Principio
15.3.2.2. Método del nitrato de plata
15.3.2.3. Método del nitrato de mercurio (Método de Clark y posteriores modificaciones)
15.4. Determinación del cloro extractable 15.4.1. Reactivos
15.4.2. Procedimiento
16. DETERMINACION DEL YESO SOLUBLE ... 50
16.1. Principio 16.2. Reactivos 16.3. Procedimiento 16.4. Cálculos
III. ANALISIS DE AGUAS CON FINES DE RIEGO
17. DETERMINACION DEL pH ... 51 17.1. Principio 17.2. Reactivos 17.3. Procedimiento 18. DETERMINACION DE LA ALCALINIDAD ... 52 18.1. Principio 18.2. Reactivos 18.3. Procedimiento 18.3.1. Alcalinidad en fenolftaleina
18.3.2. Alcalinidad total por el método del methyl orange 18.3.3. Cálculos
19. CONDUCTIVIDAD ELECTRICA ... 53
19.1. Principio 19.2. Equipo 19.3. Procedimiento
20. DETERMINACION DE CATIONES Y ANIONES ... 53
20.1. Principio 20.2. Determinación de cationes 20.2.1. Equipo 20.2.2. Reactivos 20.2.3. Procedimiento 20.3. Determinación de aniones
20.3.1. Determinación de carbonatos y bicarbonatos 20.3.1.1. Principio 20.3.1.2. Reactivos 20.3.1.3. Procedimiento 20.3.1.4. Cálculos 20.3.2. Determinación de cloruros 20.3.2.1. Principio 20.3.2.2. Reactivos 20.3.2.3. Procedimiento 20.3.2.4. Cálculos
20.3.3. Determinación de sulfatos y boro 20.3.4. Determinación de Nitratos
20.3.4.1. Principio 20.3.4.2. Reactivos 20.3.4.3. Procedimiento 20.3.4.4. Cálculos
IV. ANALISIS DE PLANTAS
21. PRINCIPIOS BASICOS DE ANALISIS FOLIAR ... 57
21.1. Muestreo 21.2. Lavado 21.3. Secado 21.4. Molido
22. DETERMINACION DEL CONTENIDO DE HUMEDAD ... 58
22.1. Principio 22.2. Equipos 22.3. Procedimiento 22.4. Cálculos
23. DETERMINACION DEL NITROGENO TOTAL: METODO KJELDAHL ... 60
23.1. Principio 23.2. Reactivos
23.2.1. Mezcla sulfúrica – ácido salicílico 23.2.2. Mezcla digestora compuesta 23.3. Procedimiento
23.3.1. Usando mezcla sulfúrica – ácido salicílico 23.3.2. Usando mezcla digestora compuesta
24. DIGESTION HUMEDA PARA DETERMINAR: P – K – Ca – Mg – S – B – Cu – Fe – Mn – Zn ... 62
24.1. Principio 24.2. Reactivos
24.3. Procedimiento: Obtención del extracto 24.3.1. Determinación de fósforo 24.3.1.1. Reactivos 24.3.1.2. Procedimiento 24.3.1.3. Cálculos 24.3.2. Determinación de Ca – Mg – K – Na 24.3.2.1. Equipos y reactivos 24.3.2.2. Procedimiento 24.3.2.3. Cálculos 24.3.3. Determinación de Azufre 24.3.3.1. Reactivos 24.3.3.2. Procedimiento 24.3.3.3. Cálculos 24.3.4. Determinación de boro
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 7 24.3.4.1. Reactivos 24.3.4.2. Procedimiento 24.3.4.3. Cálculos 24.3.5. Determinación de Cu – Fe – Mn – Zn 24.3.5.1. Equipo 24.3.5.2. Procedimiento
25. DIGESTION VIA SECA PARA DETERMINAR: P – K – Ca – Mg – S – B – Cu– Fe – Mn – Zn.... 64
25.1. Principio 25.2. Equipos
25.3. Procedimiento: Obtención del extracto 25.3.1. Determinación de fósforo 25.3.1.1. Reactivos 25.3.1.2. Procedimiento 25.3.1.3. Cálculos 25.3.2. Determinación de potasio 25.3.2.1. Equipo 25.3.2.2. Procedimiento 25.3.2.3. Cálculos
25.3.3. Determinación de Calcio y Magnesio 25.3.3.1. Por absorción atómica 25.3.3.2. Por titulación con EDTA
25.3.4. Determinación de Magnesio por colorimetría 25.3.5. Determinación de Cobre
25.3.6. Determinación de Fierro 25.3.7. Determinación de Manganeso 25.3.8. Determinación de zinc
26. DETERMINACION DE BORO EN PLANTAS CON ALTO CONTENIDO EN ESTE ELEMENTO. 71 27. DETERMINACION DEL CLORO EN PLANTAS ... 71
27.1. Principio
27.2. Extracción del cloro 27.3. Determinación del cloro
27.3.1. Reactivos 27.3.2. Procedimiento 27.3.3. Cálculos
I.- ANÁLISIS DE SUELOS
1. PREPARACIÓN DE MUESTRAS DE SUELOS EN EL LABORATORIO
Se asume que en el campo, se han tomado muestras de suelos verdaderamente representativas. Por consiguiente, es necesario poner sumo cuidado en el manejo de las muestras cuando llegan al laboratorio. Las operaciones que implican son: identificación, secado, molienda y tamizado.
1.1. Equipos
• Molino para muestras de suelo (de preferencia de martillo). • Estufa para secado, con circulación de aire.
• Tamiz de 2 mm de diámetro.
• Mortero de ágata para casos especiales • Bolsas de polietileno o de papel kraft • Marcadores indelebles o etiquetas.
• Cuaderno para registro.
1.2. Identificación
En el cuaderno de registro se deben anotar todas las muestras que llegan al laboratorio para su análisis. En este se anotarán el número de laboratorio y de campo que le corresponda a la muestra de suelo, datos sobre la procedencia así como el tipo de análisis que requiere la muestra. Cualquier otro dato que permita su identificación debe ser anotado.
1.3. Secado
Tan pronto como las muestras llegan al laboratorio (en una cantidad aproximada de 1 Kg.), son puestas a secar al aire en un lugar seco y protegido de posibles contaminaciones. En algunos casos puede secar en una estufa con circulación de aire y a una temperatura de 25º C.
Debido a rápidos cambios que se producen en el estado de algunas especies iónicas por efecto del secado, muchos análisis deben realizarse sobre muestras húmedas. Ejemplo: determinación de nitratos. En este caso, es necesario determinar el % de humedad para luego hacer las correcciones en la expresión del contenido.
Una vez seca la muestra, una porción puede ser guardada en frascos para el museo edafológico.
1.4. Molienda y tamizado
En el análisis de suelos con fines agrícolas, se emplea el concepto tierra fina secada al aire (TFSA). TFSA es aquella que ha pasado por el tamiz de 2.0 mm de diámetro. En consecuencia los agregados de suelo deben ser rotos mediante molienda.
Se debe evitar moler partículas de grava o cascajo. Durante el proceso de secado de la muestra se debe remover restos de hojas o raíces, así como agregados muy duros.
Terminado este proceso, la muestra esta preparada para ser trabajada en el laboratorio y los análisis pueden ser realizados.
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 9
2. DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE HUMEDAD
2.1. Principio
El contenido de humedad es determinado por el peso de una muestra de suelo con contenido de humedad original, seguido por el secado del suelo en una estufa de aire forzado y luego pesada. La perdida en peso (agua) es expresada en porcentaje sobre la base de peso seco. En algunos suelos la materia orgánica puede ser descompuesta a 105º C. Para la mayoría de los suelos, esto no es un problema serio de error, pero si lo es para suelos que contienen cantidades significativas de compuestos volátiles.
2.2. Equipos
• Estufa
• Balanza con aproximación de 0.01 g. • Desecador
• Cajas de aluminio con tapa (preferentemente de peso conocido)
2.3. Procedimiento
a. Pesar la caja de aluminio W1
b. Transferir un peso de suelo húmedo; 20 g. Es una cantidad suficiente para suelos
minerales. Peso de caja más muestra de suelo húmedo es W2.
c. Colocar la caja más muestra de suelo en la estufa a 105° C hasta peso constante. Esto se logra en más o menos 24 horas.
d. Enfriar en un desecador durante 30 minutos. Pesar con una aproximación de 0.01 g. Peso
de caja más muestra seca es W3
2.4. Cálculos
Peso de suelo seco es = W3 - W1
Humedad en g. es = W2 - W3
% de Humedad = humedad en gramos x 100 Peso suelo seco
Nota:
1.
Contenido de humedad de un suelo secado al aire es denominado: humedad higroscópica2. Los resultados analíticos de N-P-K, etc. en muchos casos son expresados sobre la base de peso seco a la estufa. Si el análisis es hecho en muestras secadas al aire o sobre muestras húmedas, los resultados pueden ser convertidos a la base de peso seco a la estufa por determinación de la humedad en una submuestra del suelo. Los resultados analíticos hechos en muestras húmedas se multiplican por el factor de humedad.
Donde:
Factor de Humedad = 100 + % de humedad 100
3. ANÁLISIS DEL TAMAÑO DE PARTÍCULA
3.1. Principio
Se refiere a la separación de la parte mineral del suelo en fracciones de diferentes tamaño y la preparación de cada una de ellas. El análisis comprende a todos los materiales minerales del suelo, incluyendo gravas o materiales más gruesos. En este caso, el procedimiento que se da es aplicable a la fracción fina del suelo (< 2 mm de diámetro).
Una parte importante en este análisis es el tratamiento de la muestra para una completa dispersión de las partículas primarias. En consecuencia, los materiales cementantes generalmente de origen secundario, tales como la materia orgánica, carbonato de calcio y óxidos; tienen que ser removidos. Para propósitos de análisis con fines agrícolas, esta remoción no es de vital importancia. Sin embargo, para fines de estudios edafológicos si se debe considerar todos estos pre tratamientos que consisten básicamente en la remoción de la
materia orgánica mediante la adición de ácido peróxido de hidrógeno (H2O2); la del carbonato
de calcio mediante la adición de ácido acético al 10% (CH3COOH) o de ácido clorhídrico (HCl)
diluido. Luego de una agitación con el agente dispersante, la fracción arena, limo y arcilla cuantificada por el método de la pipeta, del hidrómetro o alternativamente mediante el uso de tamices (> a 0.050 mm), en el cual la fracción arena es separada del limo y de la arcilla.
Para la aplicación del método del hidrómetro o de la pipeta se utiliza el principio de la velocidad de caída de los cuerpos en un medio líquido y que se puede calcular mediante la formula de Stokes.
3.2. Reactivos
• Peróxido de hidrógeno, agua oxigenada al 30%
• Ácido acético al 10% v/v. Adicionar 100 ml de ácido acético Q.P. a 800 ml de agua destilada. Agitar y llevar a volumen de 1000 ml.
• Agente dispersante: hexametafosfato de sodio (NaPO3)6 al 4% y solución de carbonato de
sodio (Na2CO3) al 1%. Disolver 40 g de hexametafosfato de sodio y 10 g de carbonato de
sodio en agua, llevar a volumen de 1000 ml. Ambos reactivos antes de ser usados deben ser secados a la estufa a 105º C por 24 horas.
• Solución saturada de cloruro de sodio (NaCl). Disolver 37.5 g de cloruro de sodio en agua a temperatura de 70 80º C; luego enfriar. Llevar a volumen de 1000 ml.
3.3. Materiales
• Baño maría
• Plancha de calentamiento • Agitador horizontal o vertical
• Juego de tamices: 2.0; 1.0; 0.5; 0.25; 0.125; 0.050 mm de diámetro • Cilindros de sedimentación: probeta de Bouyoucos
• Hidrómetro de 67º F o 68º F de calibración • Termómetro en grados Celsius.
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 11
3.4. Procedimiento en estudios edafológicos. 3.4.1. Oxidación de la materia orgánica
1. Pesar aproximadamente 20 g de tierra fina seca al aire (TFSA), y colocar dentro de un vaso. Si el suelo presenta contenido de carbonato mayor al 10% pesar proporcionalmente más suelo.
2. Adicionar 15 ml de agua y 15 ml de peróxido de hidrógeno al 30%. Cubrir el vaso con luna de reloj. En caso de presentarse fuerte efervescencia adicionar algunas gotas de etanol 3. Dejar en reposo toda la noche
4. Al siguiente día poner el vaso en baño maría a 80º C; adicionar 5 – 10 ml de agua oxigenada al 30% hasta la total descomposición de la materia orgánica. El sobrenadante debe ser de color claro.
5. Adicionar agua destilada hasta un volumen de más o menos 300 ml.
6. Poner en la plancha de calentamiento y cuidadosamente calentar por 1 hora para remover algún remanente de peróxido de hidrógeno. Remover el vaso de la plancha y dejar enfriar.
7. Centrifugar y decantar alternativamente para eliminar el líquido
Nota: En este momento se debe hacer la distinción si el suelo es calcáreo o no:
Suelo calcáreo = generalmente pH > 6.5,
Suelo no calcáreo = generalmente pH < 6.5.
8. Si el suelo es no calcáreo, adicione 300 ml de agua destilada y disperse
9. Si el suelo es calcáreo, proceda con la remoción de carbonatos
3.4.2. Remoción de carbonatos
1. La muestra libre de materia orgánica recibe aproximadamente 100 ml de ácido acético al 10%. Calentar en baño maría (100° C). Cubrir el vaso con una luna de reloj. Después que la efervescencia ha cesado, adicione incrementos de 25 ml de ácido acético hasta que no se presente efervescencia.
2. Centrifugar y decantar la solución sobrenadante
3. Adicionar 300 ml de agua destilada. Agitar el sedimento. Centrifugar y decantar. Repetir 4 o 5 veces.
4. Adicionar algunos ml de solución saturada de cloruro de sodio para promover peptización.
3.4.3. Dispersión
1. Transferir la suspensión hacia una botella de agitación.
2. Adicionar 20 ml del agente dispersante. Llevar a volumen de 300 ml con agua destilada. 3. Agitar toda una noche, 16 horas, en un agitador horizontal.
3.4.4. Separación de fracciones
1. Pasar la suspensión dispersada a través de un tamiz de 0.05 mm de diámetro y que está colocado encima de un embudo soportado por el cilindro de sedimentación
2. Llevar a volumen de 1000 ml con agua destilada.
3.4.5. Determinación de la fracción arena
1. Pasar la fracción arena retenida en el tamiz de 0.05 mm de diámetro a una cápsula de porcelana. Aquí se puede tomar las siguientes alternativas.
a. Tamizar la arena en húmedo para separar en fracciones b. Secar la arena y luego tamizar para separar las fracciones.
2. Con los datos obtenidos en a ó b calcular la cantidad d arena.
3.4.6. Determinación de limo y arcilla 3.4.6.1. Calibración de la pipeta
El método que se describe, está basado en la toma de un volumen de 20 ml a partir de una solución de 1000 ml. El factor de cálculo será 1000/20 = 50. Sí se usa una pipeta de otro volumen el factor cambiara.
3.4.6.2. Determinación del blanco
Aunque el agente de dispersión está preparado para este fin, es necesario llevar un blanco. Cualquier error será multiplicado por 50. El procedimiento es tomar una alícuota de 20 ml y evaporar a sequedad. Pesar aproximadamente de 0.001 g. Este peso es Z de blanco.
3.4.7. Determinación de las fracciones menores de 0.05 mm de diámetro
1. El cilindro con las fracciones menores a 0.05 mm es tapado con un tapón de jebe y luego agitado.
2. Colocar el cilindro sobre una mesa, remover el tapón e inmediatamente tomar con la pipeta 20 ml de suspensión en el centro del cilindro.
3. Transferir la alícuota a una cápsula de porcelana y evaporar a 105º C por 24 horas.
4. Pesar la cantidad de fracción con aproximación de 0.001 g. Este es el peso F de fracción
<0.05 mm
3.4.8. Determinación de las fracciones menores a 0.02 mm de diámetro
1. Tapar el cilindro y luego agitar.
2. Colocar el cilindro sobre una mesa libre de vibraciones y ensamblar la pipeta
3. Después de 5 minutos medir la temperatura y tomar una alícuota de 20 ml a la profundidad indicada en la tabla 3.1.
4. Transferir la alícuota a una cápsula y secar a 105º C por 24 horas.
5. Pesar la cantidad de fracción con aproximación de 0.001 g. Este es el peso G de fracción < 0.02 mm
Tabla 3.1 Profundidades en cm. al cual las fracciones menores a 0.02 mm y menores a 0.2 mm de
diámetro deben ser tomadas en función de la temperatura y el tiempo de sedimentación.
Temperatura ºC < 0.02 mm 5 min. 5 y 1/2 horas < 0.002 mm Temperatura ºC < 0.02 mm 5 min. 5 y 1/2 horas < 0.002 mm
19 10.5 6.9 23 11.6 7.6
20 10.8 7.1 24 11.9 7.8
21 11.0 7.2 25 12.1 8.0
22 11.3 7.4 26 12.4 8.2
3.4.9. Determinación de las fracciones menores a 0.002 mm de diámetro
1. Después de 5 y ½ horas de sedimentación medir la temperatura y tomar una alícuota de 20 ml a la profundidad indicada en la tabla.
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 13 3. Pesar con aproximación de 0.001 g. Este es el peso H de las fracciones menores a 0.002
mm
3.4.10. Cálculos
Los cálculos se hacen sobre la base de muestra secada a la estufa.
Arcilla : < 0.002 mm = (H x 50) – (Z x 50) = peso K
Limo : 2 – 0.02 mm = (G x 50) – (Z x 50) – K = peso L
Limo : 0.02 – 0.05 mm = (F x 50) – (Z x 50) – K – L = peso M
Arena : > 0.05 mm = A + B + C + D + E = peso N
Peso de muestra = K + L + M + N (todos los pesos en gramos). Donde:
A hasta E = pesos individuales de las fracciones de arena
F = pesos de la alícuota de 20 ml de la fracción < 0.05 mm
G = pesos de la alícuota de 20 ml de la fracción < 0.02 mm
H = pesos de la alícuota de 20 ml de la fracción < 0.002 mm
Z = pesos de la alícuota de 20 ml del blanco.
Las cantidades proporcionales de las fracciones pueden ser calculadas por:
% arcilla < 0.002 mm = K / peso de muestra x 100
% limo 0.002 – 0.02 mm = L / peso de muestra x 100
% limo 0.02 – 0.05 mm = M / peso de muestra x 100
% arena 2 – 1 mm = A / peso de muestra x 100
% arena 1 – 0.5 mm = B / peso de muestra x 100
% arena 0.25 – 0.50 mm = C / peso de muestra x 100
% arena 0.10 – 0.25 mm = D / peso de muestra x 100
% arena 0.05 – 0.10 mm = E / peso de muestra x 100
3.5. Método del hidrómetro. 3.5.1. Principio
Las fracciones de arena, limo y arcilla puedan ser determinadas con un hidrómetro en reemplazo de la pipeta, en un procedimiento bastante simple y rápido.
Básicamente consiste en la medida de la densidad de la suspensión la cual es función de la concentración y del tipo de partícula presente, después de un tiempo de sedimentación. Si se desea un pre tratamiento del suelo este es el mismo tal como ha sido descrito para el método de la pipeta, Después de un tiempo de agitación con el agente dispersante la suspensión es transferida a un cilindro de sedimentación, donde se estimará la concentración de las fracciones: arena, limo y arcilla.
3.5.2. Reactivo y Materiales
• Agente dispersante: solución de hexametafosfato de sodio (NaPO3)6 y carbonato de sodio
sodio; agitar y llevar a volumen de 1000 mI.
• Hidrómetro estándar, ASTM Nº 152 con escala Bouyoucos en g/l.
• Cilindros para suspensión con dos marcas: una para una muestra de 50 g y la segunda para 100 g.
• Equipo para dispersión vertical o de agitación horizontal
3.5.3. Procedimiento
1. Pesar 50 g. de TFSA para muestras de textura fina; 100 g. para suelos arenosos.
2. Pasar la muestra al deposito de dispersión, adicionar agua destilada hasta 1/3 por debajo del volumen final; adicionar 50 ml del agente dispersante y dejar unos minutos para que la muestra se embeba o puede dejarse durante toda la noche. Si usa el dispersador agite por 5 a 6 minutos para suelos arenosos y para los suelos medios a finos agitar por 10 minutos. Si usa el agitador recíprocante, agite por dos horas.
3. Verter el contenido de muestra dispersada al cilindro de sedimentación. Con el hidrómetro dentro de la suspensión llevar el nivel del líquido hasta la marca inferior si utilizó 50 g, o hasta la superior si utilizó 100 g.
4. Agitar la suspensión. Tan pronto termine la agitación dejar en reposo el cilindro y anote el tiempo; sumerja el hidrómetro en la suspensión y de acuerdo a la clasificación de partículas según el Sistema Americano, haga dos lecturas: una a los 40 segundos y la segunda a las 2 horas.
5. A cada tiempo de lectura del hidrómetro tome la temperatura de la suspensión. Por cada grado de temperatura por encima o por debajo de la temperatura de calibración del hidrómetro (67° F ó 68° F) corrija en 0.2 unidades la que se suma o se resta a la lectura del hidrómetro según la tabla 3.2
Tabla 3.2 Factores de corrección a la lectura del hidrómetro por efecto de temperatura
Temperatura ºC
Factor de Corrección Temperatura ºC Factor de Corrección 67º F 68º F 67º F 68º F 14 - 1.96 - 2.36 22 + 0.92 + 0.72 16 - 1.24 - 1.44 24 + 1.64 + 1.44 18 - 0.52 - 0.72 26 + 2.36 + 2.16 20 + 0.20 0.00 28 + 3.08 + 2.88
La efectividad del método depende en gran parte de una buena dispersión, para lo cual es necesario que el equipo se encuentre en buenas condiciones, especialmente las paletas de agitación y las varillas de la copa del dispersador.
3.5.4. Cálculos
% de arena = 100 – (lectura a 40 seg. x 100 / peso de muestra) % de arcilla = lectura corregida a las 2 horas x 100 / peso de muestra % de limos = 100 – (% de arena + % de limo)
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 15
4. DETERMINACIÓN DEL pH DE LOS SUELOS
4.1. Principio
El pH es medido potencialmente en una pasta saturada o en el liquido sobrenadante que está en equilibrio en una suspensión suelo-líquido en una relación 1:1; 1:2 ó 1:5 en peso: peso ó peso: volumen ó volumen: volumen. El líquido es agua o un electrólito: 0.01 M de cloruro de
calcio (CaCI2) ó 1 N de cloruro de potasio (KCI).
4.2. Reactivos
• Solución de cloruro de calcio 0.01 M. Disolver 1.47 g de la sal (CaCI2 .2H2O) en 1000 ml. de
agua destilada. Controlar el pH de la solución, este debe ser entre 5.0 y 6.5. Si requiere
ajuste se hace con Ca(OH)2 ó HCI. La conductividad eléctrica debe ser 2.32 mmhos/cm a
25°C.
• Solución de cloruro de potasio. Disolver 74.5 g. de la sal (KCI) en 1000 ml. de agua destilada • Soluciones buffer de pHs : 4.0 ; 7.0 ; 10.0
Solución buffer de pH 4.0: pesar 5.105 g de biftalato de potasio seco a 105º C y disolver en agua destilada previamente hervida y enfriada; llevar a volumen de 500 mI. Agregue un cristal de timol ó 1 ml de cloroformo para preservar.
Solución buffer de pH 7.0; solución de Sorensen. La solución A es fosfato de sodio
secundario M/15: disolver 11.8660 g de la sal (Na2HPO4 . 2H2O) en agua destilada y luego
llevar a volumen de 1000 mI. La solución B es fosfato de potasio primario M/5: disolver
9.0.063 g de la sal (K2HPO4) en agua destilada y llevar a volumen de 1000 ml. Con las
soluciones prepare la mezcla de fosfatos. Para 500 ml de solución de pH 7.0 medir 302.5 ml de la solución A y completar a 500 mi con la solución B. Agregue un cristal de timol ó 1 ml de cloroformo para preservar. Solución buffer de pH 10.0: disolver 3.81 g. de borato de
sodio (Na2B407 . 10H20) en 1000 mI de agua destilada.
• Agua destilada. En el análisis se usa agua destilada o desionizada. Al estar en contacto con
el C02 del medio ambiente, el pH es de 5.8 a 6.0; su conductividad eléctrica es de 3 - 5
micromhos/cm. En algunos casos se requiere agua destilada libre de CO2; esta puede ser
preparada, hirviendo esta agua tendrá un pH de 6.8 a 7.2 y muy probable que tenga una conductividad eléctrica menor a 3 micromhos/cm.
4.3. Procedimiento
4.3.1. pH de la pasta saturada
1. En un vaso plástico de 400 ml adicionar suelo hasta más o menos la mitad del volumen.
2. Adicionar suficiente cantidad de agua destilada hasta que todo el suelo se encuentre
húmedo (estado de humedad cercano a la capacidad de campo).
3. Con la ayuda de una espátula mezclar el suelo. Adicionar algunos mililitros de agua y
mezclar. De esta forma llegar a una pasta saturada caracterizada porque fluye lentamente por las paredes del vaso cuando se inclina pero no cae o derrama del vaso cuando el vaso esta vertical. En la superficie de la masa se observa una película de agua que refleja la luz.
4. Cubrir el vaso y dejar por una hora para obtener el equilibrio. Si se mide el volumen de
suelo y la cantidad de agua adicionada, se puede calcular el porcentaje de saturación (ml de agua/100 ml de suelo).
5. Introducir los electrodos del potenciómetro dentro de la masa hasta encontrar la lectura
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 17 Nota: El potenciómetro debe ser previamente calibrado con buffer 7.0 y luego con un buffer ácido o alcalino de acuerdo a las características del suelo.
4.3.2. pH del suelo en relación 1:1 v/v
1. Medir 20 ml de suelo en un vaso de 50 o 100 ml.
2. Adicionar 20 ml de agua destilada o solución de 1N de KCI ó solución de 0.01M de CaCI2.
3. Agitar intermitentemente durante 30 minutos. Dejar en reposo por 30 minutos.
4. Leer el pH en el potenciómetro sumergiendo el ó los electrodos. El potenciómetro debe
previamente ser calibrado con los buffer.
Nota: Si usa electrodo de combinación o electrodos de vidrio y de referencia, estos deben estar sumergidos en el líquido sobrenadante. Siempre debe existir buen contacto electrolítico.
4.3.3. pH del suelo en relación 1:2 v/v
1. Pesar 10 g de suelo en un vaso de 100 ml.
2. Adicionar 20 ml de agua destilada o solución 1N de KCI ó 0.01M de CaCl2.
3. Proceder en la misma forma como en el caso anterior.
Nota: la medida del pH en 0.01M de CaCl2 ofrece las siguientes ventajas:
- El pH es casi independiente de la dilución.
- Provee una buena aproximación del pH de la solución suelo bajo condiciones de campo.
- Los resultados son más reproductibles que el pH medido en agua.
- La solución de CaCl2 0.01M enmascara la variabilidad por efecto del contenido de sales en
5. CONDUCTIVIDAD ELÉCTRICA (CE – Sales Solubles)
5.1. Principio
Las sales solubles en el suelo son estimadas a partir de la conductividad eléctrica (CE) en un extracto acuoso. Este extracto sirve, también, para determinar los aniones y cationes solubles. El extracto es obtenido a partir de una pasta saturada o de la filtración de una relación suelo-agua 1:2 ó 1:5. El extracto de una pasta saturada da mejor representación de las condiciones de la salinidad del suelo con relación a las plantas.
5.2. Equipos y Materiales
• Bomba de tipo eléctrica o de agua para producir vacío. • Celda de conductividad y conductímetro.
• Vasos plásticos. • Embudos Buchner.
• Embudos de vidrio o de plástico.
5.3. Reactivos
• Solución de cloruro de potasio (KCI) 0.01 M. Disolver 0.7456 g de la sal (KCI) en agua destilada y llevar a volumen de 1000 ml. Esta solución tiene una conductividad eléctrica
(CE) de 1.412 mmhos/cm 1.
5.4. Procedimiento
5.4.1. Preparación de la pasta de suelo saturada.
1. Preparar una pasta de suelo saturada tal como se ha descrito en la determinación del pH
saturado.
2. Cubrir con una luna de reloj el vaso y dejar en reposo por toda lo noche. Al día siguiente
controlar si la pasta presenta las condiciones de saturación, en caso necesario adicionar agua o suelo. En estas condiciones se puede determinar el contenido de humedad por gravimetría. Este valor es el porcentaje de saturación.
3. Filtrar usando embudo Buchner y bomba de vacío. Recibir el filtrado o extracto acuoso
en un frasco.
Nota: En este extracto se puede medir la concentración de iones solubles (aniones y cationes); para lo cual en muchos casos será necesario hacer diluciones con agua destilada. En las diluciones, adicione 1 gota de una solución 0.1% de hexametafosfato de
sodio (NaPO3)6 para prevenir precipitación del CaCO3.
1
Unidad anterior Unidad actual
1 mmhos/cm = 1 mS.cm-1 (mili Simens por centímetro) 1 mmhos/cm = 1 dS.m-1 (deci Simens por metro)
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 19
5.4.2. Preparación de una suspensión suelo-agua en una relación 1:2 ó 1:5
1. Pesar 20 g ó medir 20 ml de suelo. Transferir a un vaso de 100 ml ó 200 ml. Adicionar 40
ml de agua destilada cuando se trata de una relación 1:2 ó 100 ml de agua cuando se trata de una relación 1:5
2. Agitar intermitentemente por 30 minutos en agitador reciprocante.
3. Filtrar usando papel filtro y embudos. Recibir el filtrado en frascos.
5.5. Lectura de la conductividad eléctrica (CE)
1. Colocar 10 a 15 ml de la solución de KCl 0.01 M en un vaso. Tomar la temperatura.
2. Llenar la pipeta de la celda de conductividad con la solución de KCl 0.01 M. Si se trata de una celda de inmersión, sumergir esta en la solución de KCl 0.01 M
3. Fijar la temperatura en el equipo. Realizar la lectura de la solución de KCl y que debe ser de 1.412 mmhos/cm. En caso contrario fijar este valor en el dial de lectura del equipo. Este procedimiento permite la calibración del equipo o de la celda.
4. Lavar la pipeta de la celda y luego proceder a tomar la lectura de los extractos acuosos de las muestras para poder conocer el valor de la conductividad eléctrica.
6 DETERMINACIÓN DE CARBONATOS: CALCITA – DOLOMITA
6.1 Principio
Los carbonatos son minerales que están presentes en muchos suelos. Son de formula: CaCO3
(calcita) y CaMg(CO3)2 (dolomita).
Ambos reaccionan con el ácido clorhídrico (HCI). EI CO2 generado puede ser medido en un
calcímetro a temperatura y presión atmosférica. También puede ser calculado en base a la cantidad de HCI gastado, de acuerdo a la siguiente reacción:
CaCO3 + HCI CaCl2 + H2CO3 + HCl
H2CO3 H2O + CO2
El exceso de HCl adicionado es titulado con NaOH, ajustándose a la siguiente reacción:
HCl + NaOH NaCI + H2O
6.2 Equipos y Materiales
• Calcímetro de Collins con graduación • Erlenmeyer (matraces) de 150 ml y 250 ml • Buretas para titulación.
• Pipetas graduadas
6.3 Reactivos
• Acido clorhídrico al 1/3
• Acido clorhídrico 0.5 N. Diluir 42.5 mI. de HCl Q. P. y llevar a volumen de 1000 ml. Controlar la normalidad con una base estándar
• Hidróxido de sodio (NaOH) 0.5 N. Disolver 20 g de NaOH Q. P. y llevar a volumen de 1000 ml con agua destilada. Controlar la normalidad con un ácido estándar
• Indicador. Es preparado por la mezcla de :
- 100 ml de fenolftaleina: 1 g de fenolftaleina en 100 ml de alcohol - 60 ml de rojo de metilo: 0.1 g de rojo de metilo en 100 ml de alcohol
- 40 ml de verde de bromocresol: 0.04 g de verde de bromocresol en 80 ml de agua (5.7 ml de 0.01 N de NaOH)
6.4 Procedimiento
6.4.1 Determinación de carbonatos mediante el calcímetro
1. En un erlenmeyer de 150 ml colocar 5 g de suelo
2. Conectar el erlenmeyer al calcímetro. Equilibrar presiones 3. Adicionar 10 ml de HCl al 1/3
4. Agitar. Si en la muestra hay calcáreo la columna de agua saturada se desplaza. Cuando no hay más cambio en altura de la columna, leer los ml desplazados. Registrar esta lectura Cálculos:
1 mol de CO2 ocupa 22.4 litros
1 mMol de CO2 ocupa 0.0224 litros
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 21
K = peso de mg de CaCO3 para desplazar 100 ml de columna
V = volumen de CO2 en ml producidos por la muestra de suelo
% de CaCO3 = K V
100 W
6.4.2 Determinación de carbonatos mediante neutralización ácida
1. En un erlenmeyer de 250 ml poner 1 g de suelo ó 1 ml de suelo si se va trabajar en volumen
2. Adicionar 25 ml de HCl 0.5 N. Agitar. Adicionar agua destilada (25 - 50 ml). 3. Calentar en forma lenta hasta cerca a ebullición.
4. Enfriar. Adicionar 0.5 ml del indicador'.
5. Titular con NaOH 0.5 N hasta el cambio de color. 6. Llevar en forma paralela un blanco.
Cálculos:
T = normalidad de NaOH
A = mI. de NaOH adicionado al blanco
B = mI. de NaOH adicionado a la muestra de suelo
1 me* de CaCO3 = 50 mg de CaCO3
(A - B) T x 50 = mg. de CaCO3 presente en 1 g de suelo o 1 ml. de suelo.
% de CaCO3 = (A – B) T x 5
7. DETERMINACIÓN DEL CARBONO ORGÁNICO: MATERIA ORGÁNICA
7.1 Principio
El carbono orgánico, materia orgánica, puede ser determinado por el proceso de oxidación del
C a CO2
Dos procedimientos son, generalmente, utilizados: a. Oxidación de la materia orgánica por calentamiento
b. Oxidación usando un agente fuertemente oxidante (K2Cr2O7) en una solución ácida de
H2SO4
Este segundo procedimiento, presenta dos modificaciones: la primera es midiendo el exceso del agente oxidante en la reacción y la segunda es la medida de la tramitancia de la solución coloreada de la reacción carbono-dicromato de potasio.
7.2 Determinación de la materia orgánica por calentamiento
Es una combustión de la materia orgánica del suelo a CO2. Este CO2 puede ser medido, de acuerdo a su volumen generado, por fijación de éste en una solución alcalina o por diferencia de peso.
7.2.1. Materiales
• Mufla hasta 500 ºC
• Crisoles o cápsulas de porcelana • Balanza de precisión
• Desecador
7.2.2. Procedimiento
1. Pesar con exactitud el crisol o la cápsula de porcelana
2. Adicionar 5 g de suelo al crisol o cápsula
3. Calentar en la mufla hasta la temperatura de 375 ºC por 12 horas
4. Enfriar el crisol o cápsula en el desecador
5. Pesar con aproximación de 0.001 g.
7.2.3. Cálculos
% de M. O. (estimado) = peso de muestra antes de calentar - peso de muestra después de calentar Peso de muestra después de calentar
7.3 Determinación de la materia orgánica. Método de Walkley y Black 7.3.1. Principio
La materia orgánica del suelo es oxidada por una mezcla de K2Cr2O7 más H2SO4. El exceso de
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 23 La primera reacción de oxidación – reducción es:
8H2SO4 + 3C + 2K2Cr2O7 2K2SO4 + 2Cr2 (SO4)3 + 3CO2 + 8H2O
4 ( Cr6+ + 3e- Cr3+) Reducción
3 ( C - 4e- C4+) Oxidación
4 Cr 6+ + 3C 4 Cr 3+ + 3C4+
La segunda reacción de titulación es:
K2Cr2O7 + 6FeSO4 + 7H2SO4 K2SO4 + Cr2 (SO4)3 + 3Fe2 (SO4)3 + 7 H2O
El punto de equivalencia es esta reacción es dada por el indicador redox: difenil amina sulfúrica.
La materia orgánica es estimada asumiendo que ésta contiene 58 % de carbono (factor de Van Bemmelen)
7.3.2. Materiales
• Erlenmeyer de 250 ml
• Pipetas graduadas y volumétricas • Agitador magnético con barra de teflón • Buretas para titulación.
7.3.3. Reactivos
• Dicromato de Potasio N (0.167M), Disolver en agua 49.04 g del reactivo K2Cr2O7 y luego
llevar a volumen de 1000 ml
• Sulfato ferroso 0.5 N (0.5 M). Disolver, exactamente, 140 g del reactivo FeSO4 . 7H2O en
800 ml de agua destilada; adicionar 40 ml de H2SO4 Q.P. Enfriar y llevar a volumen de
1000 ml.
• indicador, se puede usar:
a. Difenil amina sulfúrica. Disolver 5 g del indicador [(C6H5)2NH2] en 20 ml de agua y luego
adicionar 100 ml. de H2SO4
b. Ortrofenantrolina – sulfato ferroso 0.025 M. Este indicador se conoce comercialmente
con el nombre de Ferroin. Disolver 1.495 g del indicador (C12H8N2.2H2O) y 0.696 g de
FeSO4 . 7H2O en agua destilada y completar a volumen de 100 ml
• Ácido sulfúrico Q.P. 96%; densidad = 1.84 g/cc
7.3.4. Procedimiento
1. En un Erlenmeyer de 250 ml poner 1.0 g de suelo ó 1 ml. de suelo si se va trabajar en volumen. Si los suelos son muy oscuros, pesar 0.5 g ó medir 0.5 ml de suelo
2. Adicionar 10 ml de K2Cr2O7
3. Adicionar 10 ml de H2SO4 (manejar con cuidado)
5. Dejar en reacción por 1 hora o más
6. Adicionar aproximadamente 30 ml de agua destilada
7. Adicionar 5 ml de H3PO4 y 0.5 mI del indicador difenilamina sulfúrica ó 3-4 gotas de ferroin
8. Titular en forma lenta hasta el cambio de color. En el cambio, detener la titulación.
Nota: Llevar un blanco (sin muestra) para conocer la normalidad del FeSO4
7.3.5. Cálculos
% de C en el suelo = N x (V1 – V2) x 0.39
Peso de suelo en g
Donde: N = Normalidad del FeSO4
0.39 = 3 x 10-3 x 100 x 1.3
3 x 10-3 = peso equivalente del carbono
1.3 = factor de asunción de 77% de recuperación
V1 = volumen de FeSO4 requerido para el blanco
V2 = volumen de Fe SO4 requerido por la muestra
% de M.O. = % de C x 1.724
7.4 Determinación de la materia orgánica por colorimetría
Durante el proceso de oxidación de la materia orgánica; el dicromato sufre variación en su capacidad de absorber la luz 7.4.1. Materiales • Erlenmeyer de 150 ml. • Tubos de prueba • Pipetas, buretas 7.4.2. Reactivos • Dicromato de potasio 2N • Ácido sulfúrico • Almidón • Agua destilada
• Solución de superfloc. Disolver mediante agitación 0.5 g de superfloc* en 10 litros de agua destilada
* Superfloc = polímetro de alto peso molecular
7.4.3. Procedimiento
1. En un erlenmeyer de 150 ml. colocar 1 g ó 1 ml de suelo. Use 0.5 g ó 0.5 ml en suelos con altos contenido de materia orgánica.
2. Adicionar 10 ml de dicromato de potasio 2N 3. Adicionar I10 ml de Ácido sulfúrico Q. P.
4. Calentar a temperatura de + - 150 ºC por 1 hora
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 25 6. Tomar alícuota de 2 ml del sobrenadante; verter en un tubo de ensayo y luego adicionar
10 ml de agua destilada.
7. Leer absorbancia o tramitancia en la longitud de onda de 650 nm (1 nanómetro = 10–9 m)
8. En forma paralela correr una curva de calibración de acuerdo a lo siguiente:
Peso de Almidón % de T % de M. O. 0.000 g 100 0.0 0.025 g … 1.3 0.050 g … 2.6 0.075 g … 3.9 0.100 g … 5.2
9. Con los datos del % de T (tramitancia) y el % de M. O. de la curva construir una línea de regresión. Para esta línea hallar el valor r (coeficiente). El valor de r debe ser lo más cerca de 1. Si se intercepta el calor del % de T de la muestra en la curva, se puede encontrar el valor del % de M.O. de la muestra.
8. DETERMINACIÓN DEL NITRÓGENO TOTAL EN LOS SUELOS
8.1 Principio.
Un número bastante grande de compuestos nitrogenados son encontrados en los suelos, El método clásico para el análisis de N en los suelos es el procedimiento Kjeldahl. En el correr de los años, diferentes intentos para mejorar o reemplazar el procedimiento Kjeldahl han sido realizados. Sin embargo, el procedimiento clásico se mantiene como estándar.
La muestra sufre un proceso de digestión con una mezcla catalizadora que contiene H2SO4 y K2SO4.
La digestión se realiza en presencia de calor y se usa un balón de cuello alargado.
La presencia del H2SO4 cumple con la finalidad de destruir el material carbonaceo, liberando el N en
la forma de NH3 y a la vez captura el NH3 y forma un compuesto del tipo (NH4)2SO4. La reacción
química es:
H2SO4 + compuesto carbonaceo + calor CO2 + H2O + SO3 + NH3 (g) (1)
NH3 (g) + H2SO4 (NH4)2SO4 (2)
El K2SO4 sirve para elevar el punto de ebullición del H2SO4; acelerar la reacción y prevenir las
perdidas de N por volatilización. La mezcla catalizadora acelera la reacción del H2SO4 con los
compuestos orgánicos
El cuello alargado del balón Kjeldahl sirve como un condensador para prevenir las pérdidas del
H2SO4. Una pérdida excesiva del líquido en el balón, de tal forma que el contenido interno da la
apariencia de estar seco, puede producir pérdidas del N, de acuerdo a la siguiente ecuación:
(NH4)2SO4 + calor 2 NH3 + H2SO4 (3)
Cuando el proceso de la digestión se inicial la mezcla de muestra y solución de ataque se vuelve oscura (negra). Esto es causado por la formación de compuestos de carbón. Pero como el proceso
continúa, el material oscuro desaparece a medida que el carbono es oxidado a CO2 con la
consiguiente reducción del H2SO4 a H2O y formación de gases sulfurosos. Por lo tanto, un sistema
de escape es necesario para la remoción de estos gases. Una coloración clara de toda la mezcla es un indicador de que todos los compuestos nitrogenados han sido destruidos.
Un sistema de destilación es usado para realizar la determinación cuantitativa del (NH4)2SO4 (o
nitrógeno) en la solución que ha sufrido la digestión. Una cantidad de NaOH es adicionada en el
proceso de destilación y que tiene la finalidad de neutralizar el H2SO4 no usado durante la digestión
y a la vez dar un carácter alcalino a la solución. El N es así liberado en la forma de NH3 de este
sistema alcalino y cuya ecuación de reacciones es:
NaOH + H2SO4 Na2SO4 + H2O (4)
(NH4)2SO4 + calor + pH alcalino 2NH3 + H2SO4 (5)
H2SO4 + NaOH Na2SO4 + H2O (6)
El condensador usado en el sistema de destilación sirve para enfriar el flujo gaseoso, el cual reacciona con el NH3 para formar NH4OH, de acuerdo a la siguiente reacción:
NH3 + H2O NH4(OH) (7)
El NH4(OH) destilado es recolectado en una solución ácida (ácido bórico), de tal forma que se
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 27
NH4 + H3BO3 H2O + (NH3)H2BO3 (8)
El pH del ácido débil, bórico, es menor que 5.0; pero como el NH4(OH) es destilado dentro de la
solución de ácido bórico, el pH de la solución tiende a incrementarse. La presencia de un indicador disuelto en el ácido bórico cambiará de color a medida que la solución se hace más alcalina.
EI ácido bórico más la mezcla de la solución destilada, es titulada con un ácido, HCI o H2SO4, de
normalidad conocida, hasta que el indicador muestre un cambio a su coloración inicial. La reacción es:
HCl + NH4H2BO3 NH4Cl + H3BO3 (9)
Los mili equivalentes (me) de ácido usado en esta titulación, son iguales a los me de N en la muestra de suelo.
8.2 Materiales
• Balones de destilación tipo micro Kjeldahl de 100 ml capacidad • Unidad de digestión micro Kjeldahl
• Unidad de destilación micro Kjeldahl
• Frascos erlenmeyers y buretas para titulación
8.3 Reactivos
• Sulfato de potasio – mezcla catalizadora:
Preparar una mezcla de 150 g de K2SO4; 10 g de CuSO4 . 5H2O y 10 g de selenio. Pulverizar
los reactivos en forma separada antes de mezclar y moler la mezcla en un mortero • Ácido sulfúrico Q. P.
• Hidróxido de sodio (NaOH) 10N. Disolver 400 g de NaOH en 700 ml de agua destilada. Enfriar, llevar a volumen de 1000 ml. Disolver 10 g de fenolftaleina.
• Ácido bórico (H3BO3) al 2 %. Disolver 20 g de H3BO3 en 900 ml de agua destilada. Adicionar 20 ml del indicador, que es una solución que contiene: 0.059 g de verde de bromocresol y 0.066 g de rojo de metilo disueltos en 100 ml de etano al 95 %, Llevar a volumen de 1000 ml. Ajustar a un color violeta mediante la adición de 0.1 N de NaOH o HCl de acuerdo a la necesidad.
• Ácido clorhídrico (HCl) 0.02 N ó Acido sulfúrico (H2SO4) 0.02 N. (estandarizado)
8.4 Procedimiento para el método micro Kjeldahl.
1. En un balón micro Kjeldahl de 100 mI colocar 1 g de muestra de suelo (TFSA) 2. Adicionar 1.0 g de. muestra catalizadora
3. Adicionar 3 ml de H2SO4 concentrado.
4. Calentar en la unidad de digestión hasta que el color de la solución sea claro 5. Dejar enfriar, adicionar agua destilada para dar volumen (+/- 15 ml).
6. Llevar a la unidad de destilación. Adicionar por el tubo de seguridad NaOH que contiene fenolftaleina hasta que la solución cambie a color rojo (indicación de la neutralización de la acidez). Iniciar el proceso de destilación, recibiendo en 10 ml de H3BO3. El tiempo de destilación es de 3 - 5 minutos.
7. Titular el destilado con HCI ó H2SO4 estandarizado.
8.5 Cálculos
mili equivalente de N en la muestra = ml de ácido gastados x normalidad del ácido
9. DETERMINACIÓN DEL FÓSFORO DISPONIBLE
9.1 Principio.
A través de los años una gran cantidad de investigaciones se han realizado paro poder estimar el fósforo disponible en los suelos como una base para hacer las recomendaciones de fertilización. En suelos ácidos los compuestos dominantes de fósforo son los de aluminio, fierro y manganeso; mientras que en suelos alcalinos lo son los fosfatos de calcio y magnesio. Esta química del fósforo ha hecho que se desarrollen diferentes extractantes en el análisis del fósforo disponible. Una vez que el fósforo ha sido extractado, la determinación en la solución es un procedimiento de tipo analítico.
El Dr. Bray ha desarrollado diferentes investigaciones sobre extractantes en suelos ácidos. Los más
ampliamente conocidos son extractantes ácidos a base de NH4F y HCI en diferentes
concentraciones. De acuerdo a esto, las reacciones con estos extractantes pueden ser resumidas:
Ca(H2PO4)2 + HCI Ca2+ + Cl- + H+ + 2H2PO4-
Ca(H2PO4)2 + 2NH4F CaF2 + 2NH4+ + H2PO4
-AlPO4 + 3NH4F + 2 HCl AlF3 + 2Cl- + H2PO4- + 3 NH4+
Además de estos extractantes, se ha trabajado con extractantes doblemente ácidos del tipo H2S04 y
HCI que son utilizados para suelos de baja capacidad de intercambio catiónico, con presencia de caolinitas y fosfatos de aluminio y fierro.
Para suelos alcalinos, el Dr. Olsen trabajo con el extractante bicarbonato de sodio (NaHCO3) en el
cual el ión bicarbonato tiende a capturar al calcio, manteniendo el fosfato en solución. La ecuación es:
Ca3(PO4)2 + 3 NaHCO3 3 CaCO3 + 3 Na+ + HPO4= + H2PO4
-Para remover la coloración orgánica en los extractos, se recomienda el uso de carbón activado. Para cuantificar la cantidad de fósforo en el extracto, hay diferentes métodos disponibles, se indican sólo los más comunes.
9.2 Reactivos
9.2.1 Soluciones extractantes
• Bray I. (0.03N NH4F en 0.025N HCl). Disolver 1.11 g de fluoruro de amonio en 900 mI de
agua destilada pura. Adicionar 2.16 mI de HCl (sp. g. 1.19, 37.5 %). Diluir a 1000 ml. Almacenar en frascos de polietileno.
• Bray II. (0.03 N NH4F en 0.1N HCl). Disolver 1.11 g de fluoruro de amonio en 900 mI de
agua destilada pura. Adicionar 8.3 mI de HCl (sp. g. 1.19, 37.5 %). Diluir a 1000 ml. Almacenar en frascos de polietileno.
• Extractantes doblemente ácidos (0.025N H2SO4 en 0.05N HCl). 4 ml de HCl concentrado y
0.7 ml de H2SO4 concentrado. Diluir a 1000 ml con agua destilada.
• Olsen (0.5M NaHCO3 pH 8.5). Disolver 42.0 g de bicarbonato de sodio en 1000 ml de agua
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 29
9.2.2 Soluciones para el desarrollo del color
9.2.2.1 Para extracciones con Bray y doblemente ácida
• Stock de molibdato de amonio (SMA). Disolver 60 g de molibdato de amonio
[(NH4)6Mo7O24 . 4H2O] en 200 ml de agua destilada calentada (60º C), dejar enfriar.
Disolver 1.455 g de tartrato doble de antimonio y potasio en la solución de molibdato.
Lentamente adicionar 700 ml de H2SO4 Q. P. Enfriar y diluir con agua a 1000 ml.
Almacenar en frasco oscuro y en refrigeración.
• Stock de ácido ascórbico (SAA). Disolver 132 g de ácido ascórbico en agua destilada y diluir a 1000 ml. Almacenar en frasco oscuro bajo refrigeración.
• Solución de trabajo para desarrollo de color. Se prepara la cantidad necesaria y justo antes de trabajar. Para 1000 ml: adicionar 25 mI de la solución SMA a +/- 800 ml de agua pura, mezclar y luego adicionar 10 ml de la solución SAA. Llevar a volumen de 1000 ml.
9.2.2.2 Para extracción con Olsen
• Stock Sulfo molibdica (SSM). Disolver 1.0 g de Molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24 . 4H2O]
en +/- 800 ml de agua pura. Disolver 0.024 g de tartrato doble de antimonio y potasio.
Mezclar ambos. Adicionar 16 ml de H2SO4 concentrado. Enfriar y llevar a volumen de 1000
ml. Almacenar en frasco oscuro y bajo refrigeración.
• Solución de trabajo para desarrollo de color. Se preparar la cantidad necesaria y justo antes de trabajar. Para 1000 ml a 1000 ml de la SSM adicionar 10 g de ácido ascórbico.
9.2.2.3 Solución estándar
• Solución stock de 1000 mg de P por litro (1000 ppm P). Disolver 4.3936 g del reactivo
KH2PO4 secado en una cantidad mínima de agua. Llevar a volumen de 1000 mI con el
extractante respectivo.
• Solución estándar de trabajo. A partir de la solución stock de 1000 mg de P/l, preparar por dilución la solución estándar de trabajo de 10 mg de P/l (10 ppm P) con la solución extractante respectiva.
9.3 Procedimiento
9.3.1 Bray I y Bray II
1. Pesar 2 g. de suelo y colocarlo en frascos de extracción 2. Adicionar 20 ml del extractante correspondiente
3. Agitar por 5 minutos. Filtrar a través de papel Whatman No. 2. 4. Si el filtrado no es claro, refiltrar.
5. Colocar 2 ml de alícuota del filtrado en tubo limpio
6. Adicionar 8 mI de la solución de trabajo para desarrollo de color. Homogenizar.
7. Después de 10 minutos de desarrollo de color leer % de tramitancia a 660 nanómetros (nm) de longitud de onda. El color es estable por dos horas.
8. En forma paralela se prepara una serie de patrones de acuerdo a lo siguiente: Solución de 10 ppm de P ml Solución de color ml Volumen final ml Concentración final mg de P/ l Tramitancia % ppm 0 8 100 0 100 0 5 8 100 0.50 . . . . 0.5 10 8 100 1.00 . . . . 1.0 25 8 100 2.50 . . . . 2.5 50 8 100 5.00 . . . . 5.0 75 8 100 7.50 . . . . 7.5 9.3.2 Doble ácido
1. Colocar 2 g de suelo en frasco de extracción. Adicionar 100 mg de carbón activado libre de fósforo.
2. Adicionar 20 ml de la solución extractora. 3. Agitar por 5 minutos. Filtrar.
4. En un tubo colocar alícuota de 2 ml del extracto. Adicionar 8 ml de la solución de trabajo para desarrollo de color. Homogenizar.
5. Después de 10 minutos leer tramitancia en el espectrofotómetro a 660 nm. de longitud de onda.
6. En forma paralela preparar serie de patrones tal como se indicó para Bray.
9.3.3 Olsen
1. En frasco de agitación colocar 2 g. de suelo. Adicionar 100 mg de carbón activado
2. Adicionar 20 ml de extractante (NaHCO3: 0.5M, pH 8.5).
3. Agitar por 30 minutos. Filtrar.
4. En un tubo colocar alícuota de 3 mI del extracto. Adicionar 10ml. de la solución de trabajo de desarrollo de color. Homogenizar.
5. Después de 10 minutos leer tramitancia en el espectrofotómetro a 660 nm de longitud de onda.
6. En forma paralela preparar serie de patrones de acuerdo a lo siguiente:
Solución de 10 ppm de P ml Solución de color ml Volumen final ml Concentración final ppm de P Tramitancia % 0.0 10 13 0.0 100 0.5 10 13 0.38 . . . . 1.0 10 13 0.76 . . . . 1.5 10 13 1.15 . . . . 2.0 10 13 1.53 . . . . 9.4 Cálculos
La concentración de fósforo en la solución se calcula en relación a su tramitancia y al valor de concentración en la serie de patrones; luego referirse al peso de suelo, volumen de extractante y alícuota usada
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 31
FD = vol. Extractante x vol de reacción de color Peso suelo vol. alícuota o
ppm = Absorbancia x Factor de corrección X FD FD = 20 x 13 = 43.33
2 3
Factor de corrección = x = Promedio de concentración de P de los estándares y Promedio de lectura de Absorbancia de los estándares
10. CAPACIDAD DE INTERCAMBIO CATIÓNICO: CIC
10.1 Principio
Una de las propiedades más importantes de los suelos es su capacidad de intercambio catiónico (CIC). La CIC se puede definir como la capacidad del suelo para retener iones cargados positivamente (cationes). Esta retención se debe a que en el suelo, el complejo coloidal presenta cargas negativas originadas por procesos de sustitución isomórfica en las láminas tetraédricas u octaédricas; por procesos de rotura en los bordes de las arcillas o por hidrólisis de los grupos – COOH y OH en los coloides orgánicos.
Diferentes procedimientos son usados, actualmente, para determinar la CIC. Todos ellos están basados en el principio del lavaje del suelo, con una solución que contiene un catión que no está presente en el suelo.
El método más ampliamente usado para suelos, es el del acetato de amonio (NH4OAc). El complejo
es saturado con el catión amonio (NH4+), luego el exceso de este catión es lavado con alcohol
etílico. El NH4+ adsorbido es determinado cuantitativamente por destilación, por titulación o por
colorimetría.
10.2 Determinación de la CIC. Saturación con amonio (NH4OAc)
10.2.1 Reactivos
• Acetato de amonio (NH4OAc) N pH 7.0
• 58 ml de ácido acético (CH3COOH) es adicionado a 850 ml de agua destilada. Adicionar 70
ml de hidróxido de amonio (NH4OH). Homogenizar. Enfriar. Ajustar a pH 7.0 Llevar a
volumen de 1000 mI. • Alcohol etílico 95%
• Magnesia calcinada ligera (MgO). Puede ser remplazado por NaOH 10 N. • Ácido clorhídrico 0.1 N.
• Hidróxido de sodio 0.1 N.
• Indicador rojo de metilo al 0.1 % en alcohol etílico • Reactivo de Nessler.
• Fenolftaleina al 0.1% en alcohol etílico al 70 %.
• Indicador mixto. Es una mezcla de volúmenes iguales de rojo de metilo al 0.66 '% y verde de bromocresol al 0.99 % en etanol.
• Ácido bórico al 2 % en agua destilada y que contiene 10 ml del indicador mixto por litro.
10.2.2 Procedimiento usando (destilación) Kjeldahl
1. Pesar 5 g de suelo y colocar en un embudo que contenga papel filtro Whatman No. 2 ó su equivalente.
2. Lavar el suelo con agua destilada para eliminar los iones solubles
3. Lavar el suelo con 100 ml de NH4OAc. Recibir el lavado para determinar los cationes
cambiables: Ca ; Mg ; K ; Na.
4. Lavar el suelo con alcohol etílico para remover el exceso de amonio. EI lavado termina cuando se obtiene reacción negativa con el reactivo de Nessler
Nota: No se puede lavar con agua destilada debido a la reacción:
NH4-suelo-NH4 + 2H2O H-suelo-H + 2 NH4OH
5. Colocar el filtro que contiene la muestra de suelo dentro del balón Kjeldahl. Adicionar magnesia calcinada ligera o 10 mI de soda 10N. Destilar. Recibir el destilado en un
Manual para el Análisis Químico de Suelos, Plantas y Aguas 33 erlenmeyer que contiene HCl 0.1N en exceso, más indicador rojo de melito, o ácido bórico al 2 %
6. Titular el exceso de HCI con NaOH 0.1 N o con un ácido valorado cuando se usó ácido bórico.
Cálculos
(ml de HCI 0.1N) - (ml de NaOH) = ml de HCI usado por la base NH3
(ml de HCI usado por la base NH3) = me de NH4 en 5 g de suelo
CIC me/100 g = me de NH4 x 100
5 g de suelo
10.2.3 Procedimiento usando (destilación) micro Kjeldahl
1. Seguir los procedimientos indicados del 1 al 4 en el sistema (destilación) Kjeldahl.
2. Después del lavado con alcohol, lavar el suelo con 100 ml de KCl N con la finalidad de
desplazar el NH4 adsorbido. Colectar el filtrado y llevar a volumen de 100 mI con KCl N.
3. Tomar alícuota de 10 ml del filtrado y colocar en un balón micro Kjeldahl. Adicionar 2 gotas de fenolftaleina y 1 g de MgO. El MgO puede ser reemplazado por NaOH 10N. Destilar y recibir en ácido bórico al 2 % más indicador mixto.
4. Titular la solución de borato con HCI 0.01N.
Cálculos.
Sí la determinación fue hecha con 5 g de suelo y el volumen final fue 100 ml en KCl N. Entonces: 10 ml de la última solución, corresponde con:
10 ml x 5 g = 50 = 0.5 g 100 ml 100
Los 0.5 g de suelo retiene: V x 0.01 me de NH4+
(V = mI de HCl usados en titulación)
CIC me/100 g = V x 0.01 x 100 0.5 g de suelo
10.2.4 Procedimiento ASI (Arvel H Hunter)
1. Pesar 2.5 g de suelo y colocar en vasos de agitación
2. Adicionar 25 ml de NH4OAc N pH 7.0
3. Agitar por 10 minutos. Filtrar usando papel filtro Whatman Nº 1 o su equivalente. Pasar todo el suelo remanente del vaso de agitación usando alcohol etílico.
4. Lavar el suelo con el alcohol hasta llenar el vaso de agitación (100 mI.) 5. Dejar que el suelo y filtro seque
6. Pasar suelo y filtro a otro vaso de agitación 7. Adicionar 25 ml de KCl N
8. Agitar por 10 minutos. Filtrar
9. Determinar la cantidad de amonio (NH4). Puede usarse dos alternativas en la
a. Destilación micro Kjeldahl b. Por colorimetría
COLORIMETRÍA.
Reactivos.
• Reactivo de NaOH-fenol. Disolver 27 g de NaOH, 3 g de EDTA-Na y 5 g de NH4OAc en agua
destilada. Llevar a volumen de 1000 ml.
• Solución básica de fenol. Esta solución se prepara justo antes de usar. Adicionar 45 ml de fenol líquido a 1000 ml del reactivo de NaOH
• Solución de NaClO (solución de clorox). Mezclar una parte de 5.25% de NaClO (lejía) con 4 partes de agua.
• Preparar soluciones estándares de NH4+ de 0 ; 10 ; 20 microgramos de N/ml, a partir de la
sal de NH4Cl
Procedimiento
1. A partir del filtrado (punto 8 del procedimiento ASI) preparar una dilución de 20 veces (20x)
2. Tomar una alícuota de 3 mI de la dilución 20x 3. Adicionar 4 ml de la solución básica de fenol 4. Adicionar 10 ml de In solución de clorox. 5. Dejar en reposo por 30 minutos
6. Leer la tramitancia o absorbancia a longitud de onda 630 nm
7. En forma paralela correr curva de calibración de 3 ml de los estándares de 0 ; 10 ; 20
microgramos de NH4-N por ml.
Nota: En el extracto amónico de cualquiera de las formas usadas para la determinación de la CIC se puede medir la cantidad de los cationes: Ca ; Mg ; K ; Na.
10.3 Procedimiento mediante saturación con acetato de sodio (NaOAc), 1N pH 8.2 10.3.1 Reactivos
• Acetato de sodio (NaOAc) N pH 8.2. Diluir 40 g de NaOH en unos 500 ml de agua destilada
y mezclar con 57 mI de ácido acético (CH3COOH) del 99.5%. Ajustar a pH 8.2 con NaOH ó
con CH3COOH. Llevar a volumen de 1000 ml. Se puede preparar también, disolviendo
82.04 g de acetato de sodio anhidro (CH3COONa); ajustar a pH 8.2 y luego llevar a
volumen de 1000 ml. • Acetato de amonio N pH 7.0 • Alcohol etílico
10.3.2 Procedimiento
1. Pesar 5 g de suelo en un frasco o erlenmeyer de 100 ó 125 ml. 2. Adicionar 30 ml de NaOAc y agitar por 10 minutos.
3. Filtrar la suspensión en embudos Buchner, aplicando succión 4. Lavar el suelo con 5 porciones de NaOAc N de 20 mI c/u.
5. Descartar los filtrados de NaOAc. Lavar el suelo con 10 porciones de 5 ml de alcohol etílico. Evitar que el suelo se seque completamente.
6. Reemplace los erlenmeyers y lave con 5 porciones de 20 ml de NH3OAc N pH 7.0. Llevar a
volumen de 100 ml con NH4OAc y luego determinar por fotometría el contenido de sodio,
previa calibración del equipo con patrones de Na en NH4OAc.