Prevalencia serológica de mycoplasma patógenos en aves de reproducción

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(1)PREVALENCIA SEROLÓGICA DE MYCOPLASMAS PATÓGENOS EN AVES DE REPRODUCCIÓN* Rafael Rodríguez Baquero** Myriam Lucía Torres Ruíz Néstor Enrique Peña Beltrán. llisepticum (MG) y Mycoplasma synoviae (MS) por la prueba de seroaglutinación rápida en placa. Dos de las. de cría y, como consecuencia, se obtendrán mejores conversiones alimenticias, pesos corporales y mayores producciones de huevo y carne. De otra parte se redu cirán tanto los costos del tratamiento (drogas, como la morbilidad y mortalidad ocasionadas por el síndro me respiratorio que los mycoplasmas provocan cuan do se asocian especialmente con los virus de New Castle, Bronquitis Infecciosa y con el organismo teriano. granjas examinadas estaban prácticamente libres de. denominado Escherichia coli.. MG, mientras el total de las mismas presentó infec. Al reducir la infección se conseguirá disminuir en varios millones de pesos las grandes pérdidas econó micas que anualmente soporta la industria avícola de Colombia por la mycoplasmosis.. 1. RESUMEN. En un estudio de prevalencia adelantado en siete granjas de reproducción representativas de este tipo de explotaciones aviares en Colombia, se encontró un 41,32% de reactividad serológica para Mycoplasma ga-. ción por MS. 2. INTRODUCCIÓN. Los mycoplasmas se asocian primariamente con. enfermedades respiratorias de las aves caracterizadas por descargas nasales, estornudos, dificultad para res pirar y ocasionalmente producen sinovitis. Actualmente se reconocen tres tipos de mycoplas mas patógenos en avicultura: el Mycoplasma meleagridis que causa aerosaculitis en pavos de cualquier edad; el Mycoplasma gallisepticum, agente etiológico de la enfermedad crónica de los pollos y de sinovitis. en los pavos, y el Mycoplasma synoviae, agente de la sinovitis infecciosa de pollos y pavos (15, 24). Su transmisión se efectúa principalmente en forma vertical y por ello su control básicamente debe ejer cerse en las aves destinadas a reproducción. Teniendo en cuenta lo anterior, se realizó el pre. sente estudio serológico para establecer la prevalencia probable de los dos mycoplasmas patógenos presentes en las aves de reproducción, que luego pasarán a las aves de primera generación destinadas a producción de carne y/o huevos. De esta forma se contará con las bases mínimas. para iniciar el control de la mycoplasmosis en los pies. 3. REVISIÓN DE LITERATURA. Los mycoplasmas son designados como los micro. organismos libres vivientes más pequeños (125-150) um., del Reino Procariota, División Scotobacteria,. Clase Mollicutes; pertenecen al Orden Mycoplasmtaceae; tienen formas cocobaciliformes; se reproducen por división binaria y no poseen pared celular (13). Las células del mycoplasma contienen los elemen tos esenciales para su crecimiento y replicación, a sa ber: una membrana plasmática triple que separa el citoplasma del exterior, unos ribosomas que son los responsables de la síntesis de proteínas y una banda doble de ácido desoxiribonucléico (DNA) portador del material genético (16). En el género mycoplasma hay cerca de 50 espe cies, de las cuales 20 serotipos corresponden a la espe cie aviar (8). La clasificación de los mycoplasmas en los diferen tes serotipos se debe inicialmente a los estudios reali zados por Adler y colaboradores en 1957 (1); este mismo investigador y Yamamoto caracterizaron cinco. Contribución del Programa de Enfermedades Infecciosas y Epidemiología, y del Programa de Patología-Toxicología (División de Ciencias Veterinarias). Instituto Colombiano Agropecuario ICA. Bogotá, D.E.. Respectivamente: Médico Veterinario, Ph.D., Bacterióloga M.S. y Médico Veterinario M.S. Laboratorio de Investigaciones Médicas Veterinarias (LIMV). Apartado Aéreo No. 29743, Bogotá, D.E. - Colombia.. Revista ICA. Bogotá, D.E. (Colombia) vol. 18 no. 3, p. 209-213. Septiembre 1983. CK-ISSN-0018-8794. 209.

(2) serotipos en 1958 (22); luego Kleckner, en 1969 (11), describió ocho serotipos a los cuales designó con le tras desde la A hasta la H e incluyó los cinco anterio res; posteriormente Yoder y Hofstad (23) caracteri zaron 12 serotipos asignándoles desde la letra A has ta la L y finalmente Dierks y colaboradores, en 1967. (6), describieron 19 serotipos que cubren la casi tota lidad de mycoplasmas existentes en avicultura. Aycardi y otros investigadores, en 1971 (2), realizaron un trabajo para clasificar los mycoplasmas usando las pruebas de inmunodifusión en agar e inhibición del. La prueba de inhibición (cuantitativa) de la hemoaglutinación es recomendada para evaluar la calidad de los antígenos que se emplearán en las pruebas sero lógicas, o para medir el efecto de la vacuna contra diferentes enfermedades.. Con relación al proceso de inmunización se ha ve. nido trabajando con la cepa F de MG como posible fuente comercial (19), al tiempo que se ha estudiado la patogenicidad de esta cepa F y de la cepa R de MG en pollos de engorde (17).. crecimiento.. Edward y Kanarek, en 1960 (7), propusieron el nombre de Mycoplasma gallisepticum (MG) para el organismo patógeno causante de la enfermedad respi ratoria crónica de los pollos la cual fue descrita por primera vez por Delaplane y Stuart en 1943 (5). Pos teriormente Olson y colaboradores, en 1964 (14), es tablecieron que el Mycoplasma synoviae era respon sable de ocasionar la sinovitis infecciosa de pollos. El mecanismo por el cual los mycoplasmas afectan o lesionan a las células epiteliales no está muy claro; sin embargo, se cree que algunos productos tóxicos del metabolismo celular, como el peróxido de hidró geno y el amoníaco, son elementos que estarían in volucrados en la patogenicidad (17). El primer aislamiento de un micoplasma fue reali zado por Nelson en 1936 en los Estados Unidos de América (13), y en Colombia Hincapié y Yates, en 1966 (10), practicaron 2 aislamientos de estos orga nismos, de un total de 55 muestras de tráquea y pul món trabajados. Posteriormente Higuera, en 1980 (9), consiguió ocho aislamientos de MG en muestras de tráquea y sacos aéreos de aves comerciales provenien tes de la Sabana de Bogotá. La prueba de aglutinación en placa (cualitativa) es recomendada para estudios epidemiológicos por el Departamento de Agricultura de los Estados Unidos (21). En algunas oportunidades puede esta prueba presentar falsos positivos o negativos como resultado del suministro de antibióticos a las aves antes de to. mar las muestras, por la contaminación y congelación o descongelación permanente de los sueros.. 4. MATERIALES Y MÉTODOS. Para la realización del trabajo se seleccionaron sie te planteles de reproducción localizados en los cuatro. departamentos más representativos de este tipo de ex plotaciones en el país, los cuales en el momento del estudio tenían una población total (N) de 422.686 re productoras (Tabla 1). El tamaño "n" de la muestra se obtuvo mediante. la aplicación de un modelo simple al azar (4). Se asu mió una prevalencia crítica para la enfermedad del 10%, un grado de confianza del 95%(^ 0,05) y un margen de error con relación a la prevalencia estima da equivalente al 20%. Lo anterior significa que el número mínimo de re productoras por muestrear fue de 864. Posteriormen te, se obtuvo la fracción muestral o relación entre el. tamaño de la muestra y la población total la cual arro jó el siguiente dato: (f = n/N = 0,00204); finalmente se procedió a determinar el número de aves que se de berían muestrear en cada incubadora (Tabla 1). La selección de las muestras correspondientes a ca da incubadora se realizó al azar, de acuerdo con el nú mero de lotes existentes en cada granja y tomándose las muestras de sangre vía alar o por punción cardía ca.. Los sueros fueron analizados mediante el empleo de la prueba rápida de placa (12), para la cual se utili zó el antígeno producido comercialmente por los la boratorios Salsbury, a partir de las cepas A5969 y WVU 1853 para MG y MS respectivamente (20).. TABLA 1. Población total de reproductoras y número total de muestras por analizar en cada plantel de reproducción para el estudio de prevalencia serológica de mycoplasmas.. Incubadora. Departamento. No.. Reproductoras. Total de Muestras. No.. No.. 1. Cundinamarca. 160.000. 326. 2. Cundinamarca. 30.000. 62. 3. Cundinamarca. 18.000. 37. 4. Antioquia. 70.000. 143. 5. Tolima. 12.500. 26. 6. Santander. 112.186. 229. 7. Santander. 20.000. 41. 442.686. 864. TOTAL:. 210.

(3) Para el presente trabajo se utilizó la prueba de aglutinación en placa, ya que los resultados obtenidos. 5. RESULTADOS Y DISCUSIÓN. Al analizar las pruebas serológicas se obtuvo un to. tal de 357 reactores positivos a M. gallisepticum y a M. synoviae, lo cual equivale a una prevalencia sero lógica (P), para los dos organismos bajo estudio, de. son comparables a los de la prueba de HI.. En la literatura citada se registran estudios seme jantes en otros países para poder establecer alguna co rrelación al respecto.. 41,32% (Tabla 2).. Lo anterior significa que la población total (N), tiene la misma prevalencia para los dos micoplasmas y por lo tanto una relación directa de reactores posi. 6. CONCLUSIONES. tivos.. Entonces:. X = NP. X = 422.686 x 0,4132 = 174.654. En la población total estudiada se asume que ha bría 174.654 reactores positivos independientemente para M. gallisepticum y M. synoviae.. Para valorar la prevalencia (P), debido al margen de error del 20% que se tomó con relación a esta esti mación, se construyó un intervalo de confianza de. De los resultados obtenidos se concluye que cinco de los planteles de reproducción estudiados presentan infección por MG y siete por MS, infección que para ambos casos tiene una prevalencia de 41,32%, y que de acuerdo con el intervalo de confianza otorgado di cha prevalencia no es mayor de 44,66% o a lo sumo se encontraría entre 37,98 y 41,32%(P ( 0,05). De otro lado, se encontró que la infección por am bos mycoplasmas se presenta en los cuatro departa mentos estudiados, y considerando que la transmisión. donde resultó que la prevalencia serológica para los dos mycoplasmas en los siete planteles de reproduc. vertical es la principal forma de infección, se asume. ción, respectivamente, no es mayor de 44,66 o bien que tal prevalencia estaría entre 37,98 y 41 3"'%. que en general hay altas tasas de prevalencia en la pro genie de los diferentes planteles de reproducción del. (P^0,05).. La situación anterior es indicativa de la presencia de infección por estos organismos, en cinco de los planteles de reproducción estudiados para el caso de. país. Como medidas de control se recomienda establecer. programas en las aves de reproducción con base en la. por anticuerpos maternos en estas aves, pues los anti. eliminación de reactores positivos, al tiempo que en los planteles libres de la infección deben ejercerse es trictas normas de sanidad y aislamiento. Experimentalmente, para aves comerciales se podría pensar en el establecimiento de planes de inmunización en pe. cuerpos desaparecen durante las tres o cuatro semanas. queña escala, mediante el uso de vacunas convenien. de vida (16), como tampoco se pueden correlacionar con anticuerpos humorales (IgM) e (IgG). adquiridos a través de vacunaciones, si se considera que hasta el presente las vacunas se hallan en la fase experimental y no se dispone de ellas comercialmente (18). Se realizó recientemente en el país un trabajo en. temente atenuadas o inactivadas que demuestren su eficacia en la prevención de la infección. También se sugiere adelantar en el país otros estudios de aisla. aves comerciales con el cual se obtuvieron ocho aisla mientos de MG; también se adelantó un estudio sero. vacunales, respiratorios fuertes de New Castle y espe. MG y en la totalidad para el de MS, ya que no es po sible pensar en la presencia de una enfermedad pasiva. lógico que arrojó un 54,6% y un 26,1" de positividad para MG y MS respectivamente, por la prueba de aglu tinación en placa sobre un total de 12.00 sueros pro cesados (9).. miento, caracterización y evaluación de la patogeni cidad de las cepas existentes. Finalmente, se recomienda no administrar virus. cialmente Bronquitis Infecciosa, a fin de evitar el sín drome respiratorio que se observa frecuentemente co mo consecuencia de la asociación entre virus, los my coplasmas y el Echericha coli en aves comerciales principalmente.. TABLA 2. Reactores positivos a la prueba de aglutinación rápida en placa para Mycoplasma gallisepticum (MG) y Mycoplasma synoviae (MS).. Incubadora No.. Total de Muestras. (MG). (MS). 326. 233. 160. 62. 55. 58. 1 2. 3. 37. 4. 143. 5. 26. 6. 229. 7. 41. TOTAL:. Reactores Serológico: (No.). No.. 864. 19. —. 53. 48. 14. 22 17. _. 2. 357 (41,32% ). 33. 357. (41,32%). 211.

(4) 7. SUMMARY. bia. 41,32% of the serum samples tested were positi ve for Mycoplasma gallisepticum (MG) and Mycoplas. Serological survey of avian mycoplasmas in poultry. ma synoviae (MS) by the rapid serum píate test (STP). breeders flocks.. two of these breeders farms showed to be MG clea-. In seven poultry breeder farms a serological survey for mycoplasma infection was conducted in Colom. MS.. ned, and all of the breeder farms were positive for. 8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1. ADLER, H.E., R. YAMAMOTO and BERG, J. Strain differences of pleuroneumonia like organisms of avian origin. Avian diseases, 1:19-27. 1957.. 2. AYCARDI, E.R.; D.P. ANDERSON and R.P., HANSON. Classification of Avian Mycoplasma by Gel. Diffusion and Growth inhibition tests. Avian Diseases. 15:434-447. 1971.. 3. BUREAU OF ANIMAL INDUSTRY. Pensylvania Department of Agriculture. Newsletter Vol. IX No. 9 september. 1979. 4. CENTRO PANAMERICANO DE ZOONOSIS. Bioestadística. Procedimientos para estudios de prevalencia. Organización Pa namericana de la Salud. Buenos Aires. Nota Técnica No. 18, p. 9-17. 1973.. 5. DELAPLANE, J.P. and H.O. STUART. The propagation of virus in embrionated chicken eggs causing a chronic respiratory disease of chikens. Amer. J. Vet. Res. 4:325-332. 1943.. 6. DIERKS, R.E.; J.A. NEWMAN and B.S. POMEROY. Characterization of Avian Mycoplasma. Ann. N.Y. Acad. Sci., 143-:170-179. 1967.. 7. EDWARD, D.G., and A.D. KANAREK. Organisms of the Pleuroneumonia group of Avian Origin. Their classification into. speciés. Ann. N.Y. Acad. Sci. 70:696-702. 1960. 8. FABRICANT, J. AVIAN MYCOPLASMAS, IN HAYFLICK (ed.). The Mycoplasmatales and the L. phaseof Bacteria. North Holland Publishing Co. New York. pp. 621 -642.1969.. 9. HIGUERA, L. de P. Diagnóstico e Identificación de las cepas Mycoplasma Aviar de mayor incidencia en la Sabana de Bogotá. Tesis M.S. Universidad Nacional, ICA. 1980.. 10. HINCAPIÉ, O.; YATES, V. Aislamiento del agente causal de la enfermedad respiratoria crónica de las aves. Revista ICA. (Co. lombia), vol. 1 no. 2. pp. 117-121. 1966. 11. KLECKNER, A.L. Serotypes of Avian pleuroneumonia like organisms. Am. J. Vet. Res. 21. 274-280. 1960.. 12. METHODS FOR EXAMINING POULTRY BIOLOGIS AND FOR IDENTIFYING AND QUANTIFYING AVIAN PATHOGENS. National Academy of Sciences, Washington D.C. 226. 1971.. 13. NELSON, J.B. Coccobacilliform bodies in birds infected with the Coryza of slow onset. J. Exp. Med. 63:512-522. 1936. 14. OLSON, N.O.; K.M., KERR and A. CAMPBELL. Control of Infectious Synovitis. Avian Dis. 8:209-14. 1964. 15. PETER, D. Controlling P.P. L.O. Manual of Avian Pathology p. 66. 1973.. 16. RAZIN, S. Structure andfunction in mycoplasma. Ann. Rev. Microbiol 23:317-356. 1969. 17. RAZIN, S. The Mycoplasmas Microbiological Rev. pp. 414-470. 1978.. 18. RODRÍGUEZ, B.R. and KLEVEN,S.H. Pathogenicity of two strains of Mycoplasma gallisepticum in broilers. Avian Diseases vol. 24 no. 4, p. 800-807. 1980.. 19.. . Evaluation of vaccine against Mycoplasma gallisepticum in commercial broilers. Avian Diseases vol. 24, no. 4. p.879-889. 1980.. 212.

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