DETERMINACIÓN DE HIDROCARBUROS ALIFÁTICOS SATURADOS EN ALIMENTOS

CENTRO NACIONAL DE ALIMENTACIÓN

Jornadas de Referencia sobre Micotoxinas e Hidrocarburos

Aromáticos Policíclicos

(6 de Junio de 2013)

DETERMINACIÓN DE HIDROCARBUROS

ALIFÁTICOS SATURADOS EN ALIMENTOS

(ACEITES COMESTIBLES DE ORIGEN VEGETAL)

María José Nogueiras

UNIDAD DE TOXINAS Y HAPS

Centro Nacional de Alimentación

Agencia Española de Seguridad Alimentaria y Nutrición

Majadahonda, Madrid

ÍNDICE

INTRODUCCIÓN

ANTECEDENTES HISTÓRICOS

ESTIMACIÓN DEL RIESGO → MEDIDAS ADOPTADAS

EJERCICIOS COLABORATIVOS

METODO MODIFICADO

VENTAJAS

VALIDACIÓN

HIDROCARBUROS ALIFATICOS SATURADOS DE ORIGEN NATURAL

ANTECEDENTES HISTÓRICOS

23 Abril 2008

Elevados niveles de aceite

mineral en aceite de girasol

importado de Ucrania

Hasta 7000 mg/kg en aceite

crudo y 1200 mg/kg en

aceite refinado de girasol

EFECTOS SOBRE:

- SISTEMA HEMATOLÓGICO

- SISTEMA HEPÁTICO

- SISTEMA CARDIACO

INGESTA DIARIA

ADMISIBLE (IDA)

20 mg/kg peso y día

ANTECEDENTES HISTÓRICOS

Aceites minerales de alta viscosidad

10 junio de 2008

Comisión europea

DECISIÓN 2008/433/EC

20 junio de 2008

Comité permanente para la

Cadena Alimentaria y la

Salud Animal

NIVELES MAXIMOS

NORMAS TOMA MUESTRAS

REQUISITOS MÉTODOS ANALÍTICOS

-

Etapa fraccionamiento (columnas óxido de aluminio ó

silicagel

)

%Rc≥ 80%

-

CG/FID ó CG/EM

-

Lc < 25 mg/kg (siempre > 50 mg/kg!)

2º ESTUDIO DE INTERCOMPARACIÓN

PARA LA DETERMINACIÓN DE

HIDROCARBUROS ALIFÁTICOS

EXÓGENOS EN ACEITES DE GIRASOL

POR CROMATOGRAFÍA DE GASES CON

DETECTOR DE IONIZACIÓN DE LLAMA

INFORME DE RESULTADOS (Provisional)

26 de Septiembre de 2008

LABORATORIOS PARTICIPANTES



Instituto de la Grasa de Sevilla (CSIC)



Laboratorio Arbitral Agroalimentario



Centro de Investigación y Control de la Calidad



Laboratorio Central del SOIVRE



Laboratorio del SOIVRE en Sevilla



Laboratorio Central de Aduanas

MUESTRAS

• Aceite refinado de girasol comercial

• Aceite refinado de girasol comercial adicionado con 300 ppm de parafina

(nivel A)

• Aceite refinado de girasol comercial adicionado con 50 ppm de parafina

(nivel B)

• Aceite refinado de girasol contaminado

Muestra “Blanca”

Muestra

adicionada a

nivel bajo

Muestra

adicionada a

nivel medio

Muestra

contaminada a

nivel alto

Fecha del estudio

Agosto –

Septiembre, 2008

Agosto –

Septiembre,

2008

Agosto –

Septiembre,

2008

Agosto –

Septiembre, 2008

Laboratorios

participantes

8

8

8

8

Nº de resultados

aceptables

8

8

8

8

Valor medio, mg/kg

19,7

264,8

60,7

2535,6

HORRATr

0,91

0,29

0,77

0,44

Reproducibilidad

(Dev. Std. rel.), %

38,1

9,1

16,1

16,1

Nivel de adición,

mg/kg

---

300

50

---

Recuperación

---

81,7

82,0

---HORRAT

_R

3,69

1,32

1,86

3,28

RESUMEN

– CARACTERÍSTICAS DEL PROTOCOLO ANALÍTICO

CON Ag NO

₃

(

MÉTODO 2)

INCLUYENDO LABORATORIOS CON

PROFICIENCY TEST ON THE DETERMINATION OF MINERAL OIL IN

SUNFLOWER OIL

Directorate General Health and

Consumers (DG SANCO)

Institute for Reference Materials

and Mesurements (IRMM)

Escrutinio sobre la capacidad de los

laboratorios oficiales y de control de

industrias de determinar aceite mineral en

aceite de girasol

PROFICIENCY TEST ON THE DETERMINATION OF MINERAL OIL IN

SUNFLOWER OIL

CONTENIDO DEL EJERCICIO

3 MUESTRAS:

-

Aceite de girasol crudo naturalmente contaminado

-

Aceite de girasol refinado naturalmente contaminado

-

Aceite de girasol adicionado con aceite mineral

62 LABORATORIOS DE LA EU, SUIZA Y

UCRANIA

PROFICIENCY TEST ON THE DETERMINATION OF MINERAL OIL IN

SUNFLOWER OIL

RESULTADOS -

Aceite crudo de girasol naturalmente contaminado

PROFICIENCY TEST ON THE DETERMINATION OF MINERAL OIL IN

SUNFLOWER OIL

RESULTADOS -

Aceite refinado de girasol naturalmente contaminado

PROFICIENCY TEST ON THE DETERMINATION OF MINERAL OIL IN

SUNFLOWER OIL

RESULTADOS –

Aceite de girasol adicionado con aceite mineral

ESTUDIO DE PROSPECCIÓN ACEITE DE GIRASOL COMUNIDADES AUTÓNOMAS

158 MUESTRAS ACEITE DE GIRASOL

RESULTADOS CUANTIFICANDO CON CURVA DE N-EICOSANO

22 MUESTRAS UCM > 50 mg/kg (13,9%)

PROCEDIMIENTO ANALÍTICO

Preparación gel de sílice

argentada

Preparación columnas

Fraccionamiento

aceite

Evaporación

_sequedad

Redisolución

Inyección CG/EM

Cuantificación y

VENTAJAS FRENTE A PROTOCOLO CONVENCIONAL

1.- MENOR VOLUMEN DE DISOLVENTES

PROCEDIMIENTO ANALÍTICO

~ 20 mL

~ 150 mL

PROCEDIMIENTO ANALÍTICO

VENTAJAS FRENTE A PROTOCOLO CONVENCIONAL

2.- MENOR TIEMPO DE ANÁLISIS

Fraccionamiento simultáneo de hasta 12

muestras

PROCEDIMIENTO ANALÍTICO

VENTAJAS FRENTE A PROTOCOLO CONVENCIONAL

2.- MENOR TIEMPO DE ANÁLISIS

Evaporación simultánea de todos los

extractos

Integración entre t

_R

C10 y C54

1. N-DECANO (C10)

IDENTIFICACIÓN DE LOS PICOS CROMATOGRÁFICOS:

TETRAPENTACONTANO (C54)

0

1000

2000

3000

4000

5000

0

5

10

15

20

25

30

Ára

e

Tiempo (min)

Patrón n-Decano

1.581 min

0

100

200

300

400

500

0

5

10

15

20

25

30

Á

re

a

Tiempo (min)

Patrón n-Tetrapentacontano

25.576 min

2.- N-EICOSANO (C20)

_{Patrón interno}

Curvas calibración

Control % Rc



80%

IDENTIFICACIÓN DE LOS PICOS CROMATOGRÁFICOS:

0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

1000

0

5

10

15

20

25

30

Área

Tiempo (min)

Patrón n-Eicosano

10.0 min

IDENTIFICACIÓN DE LOS PICOS CROMATOGRÁFICOS:

3.PICO ANCHO

DE15 min

UCM

(Unresolved Complex Mixture)

mezcla compleja de hidrocarburos de

origen mineral

0

100

200

300

400

500

600

700

800

900

1000

0

5

10

15

20

25

30

Área

Tiempo (min)

CUANTIFICACIÓN

1.- Area de los hidrocarburos totales Ht + C20

2.- Area de los hidrocarburos normales N + C20

PROCEDIMIENTO ANALÍTICO

VALIDACIÓN INTERNA ACEITE DE GIRASOL

EXACTITUD/ RECUPERACIÓN

Nivel 26 mg/kg :96,0% (cv

_R

= 7,5 %, n= 6) = Límite de cuantificación

Nivel 52 mg/kg :96,0% (cv

_R

= 6,1%, n= 6)

Nivel 747 mg/kg :81,0% (cv

_R

= 1,2 %, n= 6)

REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD INTERNA

cv <10% en todos los niveles

CURVAS CALIBRACIÓN C20:

Intervalo: 20,0 mg/kg-900 mg/kg

Coeficiente de correlación (r

2

_):0,9999

VALIDACIÓN INTERNA ACEITE DE OLIVA

EXACTITUD/ RECUPERACIÓN

Nivel 26,0 mg/kg :95,90% (cv

_R

= 3,79 %, n= 6) = Límite de cuantificación

Nivel 53,95 mg/kg :85,75% (cv

_R

= 4,17 %, n= 6)

Nivel 429,48 mg/kg :86,05 % (cv

_R

= 5,67%, n= 6)

REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD INTERNA

cv <10% en todos los niveles

CURVAS CALIBRACIÓN C20:

Intervalo: 20,0 mg/kg-900 mg/kg

Coeficiente de correlación (r

2

_):0,9999

VALIDACIÓN INTERNA ACEITE DE OLIVA

EXACTITUD/ RECUPERACIÓN

Nivel 60,0 mg/kg :90,2% (cv

_R

= 6,1%, n=5)

Nivel 440,6 mg/kg :93,4% (cv

_R

= 6,1%, n=6)

Nivel 771,0 mg/kg :80,6% (cv

_R

= 1,2%, n=5)

REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD INTERNA

cv <10% en todos los niveles

CURVAS CALIBRACIÓN C20:

Intervalo: 20,0 mg/kg-900 mg/kg

Coeficiente de correlación (r

2

_):0,9990

Linealidad 90-110%

ESTUDIO PROSPECCIÓN- Aceite de oliva

0

25

50

75

100

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 23 25 27 29 31 33 35 37 39 41 43 45 47 49

m

g

/K

g

Limite cuantificación

29 muestras < Lc (25,5 mg/kg)

2 muestras < Ld (1,48 mg/kg)

5 muestras > 50 mg/kg)

50 muestras analizadas

ESTUDIO PROSPECCIÓN- Aceite de cobertura de girasol

0

25

50

75

100

125

150

175

200

225

250

1

2

3

4

5

6

7

8

m

g

/K

g

Lc

Conservas en aceite de girasol:

Atún

Pulpo

Sardinillas

Caballa

MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIÓN

mlopeze@msssi.es

pburdaspal@msssi.es

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mnogueiras@msssi.es