Facultad de Ciencias Veterinarias
-UNCPBA-
Diarrea neonatal en terneros de guachera.
Descripción de un caso clínico
Dualde, Felipe; Preisegger, Gustavo; Riccio María Belén
Diciembre, 2018
Tandil
Diarrea neonatal en terneros de guachera. Descripción de un
caso clínico
Tesina de la Orientación Sanidad de Grandes Animales, presentada como parte de los requisitos para optar al grado de Veterinario del estudiante: Dualde Felipe
Tutor: MV. Preisegger, Gustavo
Director: Dra. Riccio, María Belén
Dedicatoria
Agradecimientos
A mi familia, especialmente a mis padres, por darme la posibilidad de estudiar y acompañarme durante todos estos años.
A mis hermanos que cada uno a su manera también hicieron posible que puedan culminar mis estudios.
A todas las personas que me acompañaron y me dieron fuerzas para seguir adelante.
A mis amigos de siempre y a los que la facultad me dejó.
RESUMEN
La diarrea neonatal es una enfermedad multifactorial compleja de los terneros recién nacidos. Clínicamente suele presentarse desde las 12 horas posparto hasta los primeros 35 días de vida. Para su manifestación deben concurrir distintos factores epidemiológicos que dependen, además del agente etiológico (virus, bacterias y protozoos), del huésped, transferencia de inmunidad pasiva y condiciones ecológicas. El objetivo del trabajo fue describir un caso clínico de diarrea neonatal en terneros de un establecimiento lechero, ubicado en el partido de Tandil. A mediados de agosto empezaron a observar terneros con diarrea sanguinolenta y/o moco. La signologia descripta, en su mayoría, comenzaba en animales mayores de 5 días de vida. La mortalidad en la guachera fue del 28,5%. Se realizó la necropsia de 3 bovinos de entre 5 y 22 días de edad. El aislamiento de Escherichia coli a partir de muestras de contenido intestinal, linfonodos mesentérico y de bilis, junto al aislamiento en pureza de Salmonella sp de linfonodo, permitió arribar al diagnóstico de complejo de diarrea neonatal como el diagnóstico más probable, siendo la
Escherichia coli y Salmonella entérica dos de los agentes etiológicos involucrados en éste caso a partir de las muestras remitidas.
PALABRAS CLAVES: diarrea neonatal, terneros, diagnóstico, Escherichia coli,
ÍNDICE
Introducción……….. 1
Importancia económica……… 1
Factores predisponentes y de riesgo para la presentación de DNN en terneros.………..… 2
Calostro y transferencia pasiva de inmunidad en terneros………. 4
Calostro……… 5
Fisiopatología de la diarrea………. 6
Agentes infecciosos ……… .. 7
Agentes bacterianos ……… 7
Escherichia coli……….7
Salmonella spp………..9
Agentes virales………..11
Rotavirus………..11
Coronavirus……….12
Agentes parasitarios………13
Cryptosporidium parvum………...13
Diagnóstico………..…15
Medidas preventivas ………..………..15
Tratamiento………..17
Caso clínico……….18
Antecedentes……….………..18
Motivo de consulta………..19
Muestras remitidas………..19
Lesiones macroscópicas de necropsia………19
Necropsia 1……….19
Necropsia 3………21
Examen histopatológico………22
Necropsia 1………22
Necropsia 2………23
Necropsia 3………24
Resultado de laboratorio………...24
Virología……….24
Bacteriología……….24
Antibiograma………...25
Diagnóstico final……….25
Discusión……… 26
Conclusión………...27
1 Introducción
La diarrea neonatal del ternero es un síndrome multifactorial, principal causa de mortalidad, en el que intervienen factores dependientes del hospedador, ambientales, de manejo y microbiológicos y que afecta a los terneros recién nacidos. Clínicamente suele presentarse desde las 12 horas posparto hasta los primeros 35 días de vida y se caracteriza por excreción de heces acuosas y profusas, deshidratación progresiva, acidosis y, en casos severos, muerte en pocos días. Para su manifestación deben ocurrir distintos factores epidemiológicos que dependen, además del agente etiológico (virus, bacterias y protozoos), del huésped, de la transferencia de inmunidad pasiva y condiciones ambientales(Odeón, 2001).
Importancia económica
Frente a un mercado demandante de lácteos, es necesario aumentar el número de vacas y además hacer una selección genética de los animales productivos; es por ello que para lograr este objetivo se necesita disminuir la mortandad de los animales de reposición. Las principales pérdidas de animales son la consecuencia de la mortandad perinatal, es decir aquellos terneros que llegan hasta la cercanía del término de gestación o mueren durante el parto, la mortalidad neonatal considerada hasta las 48 hs de vida y la mortandad durante la crianza. La mayor mortandad se observa en un período muy corto de su vida, que corresponde a los primeros 40-60 días coincidente con una situación estresante y de susceptibilidad del ternero. Los porcentajes de mortandad en la etapa de crianza pueden variar entre un 1 a 50% y la diarrea neonatal representa entre 40 y 70% de la causa de dichas muertes (NAHMS, 1996; Bilbao, 2006). La mortandad en la Cuenca Mar y Sierras se observa acentuada durante los meses de junio-septiembre, coincidente con la época invernal (Bilbao y Pinto de Almeida Castro, 2010). El 45% de los muertos se registran en los primeros 21 días de vida y la edad más frecuente de tratamientos es entre 9 y 12 días.
2 directas (tratamiento medicamentosos y mortalidad) como indirectas (pérdida de mejora genética por la mortalidad y el retraso en el crecimiento). Sumado a estas pérdidas se debe tener en cuenta el tiempo de dedicación del personal para atender los terneros enfermos. (Bilbao et al., 2013).
Factores predisponentes y de riesgo para la presentación de diarrea neonatal en terneros
El complejo de diarrea neonatal en guachera está asociado a numerosos factores predisponentes como manejo, condiciones ambientales, categoría de las madres y estado inmune de los terneros (Margueritte et al., 2001)
El nacimiento es el momento de mayores cambios y adaptaciones en el animal, el recién nacido es expuesto a un gran número de estímulos externos a los que debe adaptarse y correlacionarse. Generalmente el lugar de nacimiento es el mismo por años y consecuentemente permanece contaminado, favoreciendo el contagio de los agentes causales de diarrea entre otros (Bilbao, 2012)
Las características del ambiente constituyen las condiciones más críticas para la expresión de un agente en una población susceptible. Los componentes físicos como hidrografía, topografía y clima; este fundamentalmente causando estrés cuando las temperaturas están fuera del rango de termo neutralidad (10-20ºC) para el ternero. Los elementos biológicos como la flora y la fauna la cual puede actuar como medio de transporte-contagio de los microrganismos. El componente económico-social entre los cuales podemos citar el manejo, la higiene ambiental, la tecnificación, comercialización y la estructura de producción son elementos que definen la presentación de la diarrea en el ternero neonato (Bilbao, 2012)
3 Otras de las causas importantes, en la presentación de las diarreas nutricionales, son los sustitutos lácteos en mal estado o que no han sido bien preparados, como son la presencia de grumos. Influye también la cantidad exagerada de alimento suministrado al ternero, como temperatura inadecuada de éste (Zurita, 1994).
El agua debe ser microbiológicamente apta, en el estudio realizado por Bilbao (2009) determinaron que el 73,9% (17/23) de los establecimientos no es apto para consumo y las principales causas son en un 59% un elevado recuento de coliformes totales, un 24% presencia de Escherichia coli, 6% Pseudomonas aeruginosa y 12% a combinaciones de las anteriores. En relación a la calidad físico-química observamos pH adecuado 7-7,5 contenido de Na, K, Ca, Mg, cloruros y sulfatos apto para bebida de los bovinos; menos de 1000 mg/l de sales totales y niveles elevados de nitratos en concordancia con la determinación de microorganismos fecales.
La prevalencia y severidad de los cuadros de diarrea son mayores en los terneros hijos de vaquillonas, esta se asocia a:
Las distocias son una de las principales causas de debilidad, morbilidad y mortalidad en terneros de rebaños lecheros (Davis y Drackley, 2002).
Un mayor porcentaje de distocias o partos más largos que determinan
un sufrimiento del ternero lo que hace que aumente el intervalo parto calostrado.
Escaso desarrollo del habito materno (Hansen, 1992).
Terneros y vacas adultas normales pueden servir como reservorio de agentes infecciosos y así éstos pueden persistir en el rebaño por lo que circula a través de los animales de todas las edades. La duración y la cantidad de contagio probablemente dependen del confinamiento, densidad de población, la inmunidad del grupo y las condiciones ambientales (Radostits, et al., 2006).
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Raza de la madre: por ejemplo, la raza Holstein presenta una menor concentración de Igs que la raza Jersey.
Número de lactancia: existe una tendencia al aumento de las inmunoglobulinas en la medida que se incrementa la edad de la vaca y el número de partos.
Duración del período seco de la vaca: la acumulación de Igs comienza a partir del periodo de secado de la vaca y alcanza su máxima concentración al momento del parto, por lo cual si no existe periodo seco o este es menor al recomendado (45 días), no existirá una adecuada acumulación de Igs.
Estado sanitario de la vaca: no es recomendable utilizar calostro de
vacas enfermas (Casas y Canto., 2014).
Calostro y trasferencia pasiva de inmunidad en terneros
5 importante de manejo que determina la salud y sobrevivencia de los terneros (Nocek et al., 1984; Hopkins y Quigley III, 1997). De aquí que una adecuada alimentación y manejo del calostro son el eslabón principal para un buen programa de crecimiento y desarrollo de terneros en cualquier explotación lechera.
Calostro
El calostro es la primera secreción producida por la glándula mamaria después del parto y es especialmente rico en Ig (Nousiainen, et al., 1994). El calostro contiene linfocitos T y B, neutrófilos, macrófagos, factores de crecimiento y hormonas como la insulina y cortisol (Le Jan, 1996). El papel de estos factores de crecimiento y hormonas juegan un papel importante en la estimulación del desarrollo del tracto gastrointestinal y otros sistemas en el recién nacido (Davis y Drackley, 1998). El calostro además contiene casi el doble de los sólidos totales presentes en la leche, el contenido de proteína y grasa es mayor, pero la concentración de lactosa es menor. Vitaminas y minerales se encuentran también en mayores cantidades. Es importante recalcar como la concentración de proteínas y péptidos disminuye rápidamente después del inicio de la lactancia (Hadorn, 1997).
6 Fisiopatología de la diarrea
La diarrea no es una enfermedad en sí misma, sino más bien el resultado de la alteración de la homeostasis intestinal en la cual se ve afectada la digestión y la absorción de nutrientes, electrolitos y agua. Se caracteriza por una descarga frecuente y anormal de heces en cuya fisiopatología están involucrados 4 mecanismos: hipermotilidad, hiperpermeabilidad, hipersecreción y mala absorción (http://www.webveterinaria.com/virbac/news19/diarrea.pdf).
# Hipermotilidad: el incremento de los movimientos intestinales es uno de los principales mecanismos que producen la diarrea, lo que se da por estrés e intoxicación que hacen que la motilidad aumente como respuesta a la estimulación del sistema nervioso entérico y autónomo.
7 sanguíneos, volviéndose más permeables permitiendo la salida excesiva de líquido corporal hacia el lumen intestinal.
# Hipersecreción: las enterotoxinas de los agentes etiológicos activan el metabolismo de las células secretoras, lo que resulta en aumento de las secreciones intestinales.
# Mala absorción: algunos virus (Ej: Rotavitus y Coronavirus) con la finalidad de replicarse invaden y lisan los enterocitos encargados de la absorción a nivel de las vellosidades intestinales, provocando una disminución en la absorción intestinal.
Agentes infecciosos
Entre los agentes infecciosos podemos citar a los de origen bacteriano como por ejemplo Escherichia coli y Salmonella spp, de origen viralcomo Rotavirus y Coronavirus y de origen parasitario como Criptosporidium parvun y Coccidio sp., entre los más importantes.
Agentes bacterianos
Escherichia Coli
Las bacterias coliformes tempranamente arriban entre la flora que coloniza el tracto intestinal de prácticamente todos los animales. Los animales jóvenes tienen un mayor riesgo de diarrea por coliformes, especialmente lechones y terneros (Zachary and McGavin, 2012).
Es un bacilo corto Gram negativo, anaerobio facultativo, móvil (flagelos perítricos), no forma esporas, fermenta la glucosa y lactosa (Sánchez, et al.,
2009).
Serotipos de E. coli
La colibacilosis está asociada con diferentes serotipos patógenos de
8
# Escherichia coli enteritoxigénica (ETEC): puede tener antígenos fimbriales F4 (K88), 5 (K99), 6 (987P), 18 o 41 y también puede producir hasta tres enterotoxinas y shigatoxinas termoestables (STa, STb) y termolábiles (LT). Ocurre más a menudo en animales de 2 días a 3 semanas de edad y produce una diarrea de tipo secretoria. La diarrea es voluminosa, amarillo a blanco, y acuoso a pastoso. En la necropsia, el intestino delgado está dilatado, flácido y lleno de líquido amarillo translúcido y en ocasiones gas. Microscópicamente, el intestino es normal.
# Escherichia coli enteropatógena (EPEC): también denominada de adherencia y barrido (AAEC), afecta conejos, terneros, cerdos, corderos, perros y humanos. Las lesiones se caracterizan por la unión de la Escherichia coli al borde las microvellosidades de los enterocitos y epitelio de la vesícula biliar a través de la Intimina, una proteína de la membrana bacteriana exterior que facilita la unión bacteriana a la célula huésped. No se observan lesiones macroscópicas excepto que el intestino está dilatado y lleno de líquido. La enfermedad se presenta con mayor frecuencia en asociación con otros enteropatógenos como, Rotavirus, Cryptosporidium parvum, ETEC,
coronavirus, virus de la diarrea viral bovina y coccidios. La disrupción de las microvellosidades resulta en la pérdida de enzimas digestivas, provocando mala digestión, malabsorción y diarrea.
# Escherichia coli enteroinvasiva (EIEC): es móvil, no fermenta la lactosa. Invade el epitelio intestinal causando diarrea sanguinolenta en niños y adultos. Es una de las E. coli que causa más daño debido a la invasión que realiza en el epitelio intestinal.
# Escherichia coli verocitotoxigénica (VTEC): producen toxinas llamadas verocitotoxinas (VTs) de las cuales existen dos grupos: VT1 y VT2 (Strockbine et al., 1986). Existe un subgrupo denominado E. coli entrohemorrágico (EHEC) que incluye a todas las cepas que causan enfermedad en el hombre, de las cuales el serotipo O157:H7 fue identificado como uno de los causantes del Síndrome Urémico Hemolítico (SUH).
9 que no han recibid suficiente calostro para desarrollar inmunidad. Aunque las lesiones producidas son generalmente las de septicemia, similares a las causadas por otros organismos, la infección puede localizarse en el intestino, causando enteritis (Zachary and McGavin, 2012).
Salmonella spp
Pertenece a la familia Enterobactereae, son aerobias anaerobias facultativas y no fermentan la lactosa. Bacilo gramnegativo, relativamente grueso, provisto de flagelos perítricos y por lo general no capsulado. No se diferencia morfológicamente de las otras enterobacteriáceas y frecuentemente también portan fimbrias (Nicolet, 1985).
Salmonella spp. son bacterias enteroinvasivas. Todas las especies conocidas son patógenas. La salmonelosis es una importante causa de diarrea aguda y crónica y muerte en numerosos animales y en humanos. La salmonelosis puede ocurrir epizooticamente, enzoóticamente o esporádicamente. El genero Salmonella se divide en mas de dos mil serotipos de acuerdo a la estructura antigénica de los polisacáridos de la pared celular, antígeno O (somáticos), y a los flagelares o antígenos H (Nicole, J. 1985). Los serovares más a menudo aislados de animales enfermos incluyen Salmonella Typhimurium, Salmonella Enterica, Salmonella Dublin, Salmonella Choleraesuis, y Salmonella Typhosa (Zachary and McGavin, 2012).
El contagio es directamente de un animal a otro o a través de un medio contaminado como el suelo, la vegetación, el agua e ingredientes como la harina de pescado, y sobre todo aquellos que contienen constituyentes de la leche, carne y ovoderivados (Birbestein y Zee, 1990)
10 Una vez que ha tenido lugar la adherencia, la bacteria, ingresa dentro de la célula tanto a través de la microvellosidad, como por las uniones estrechas y, pasa a través de los enterocitos hasta la lámina propia, donde estimulan una respuesta inflamatoria y son fagocitadas por macrófagos y neutrófilos. La respuesta inflamatoria se caracteriza por la presencia de un gran número de leucocitos polimorfonucleares en el lumen e intestino, muchos de los cuales quedan con la bacteria englobada. Posteriormente, se remueven las bacterias del lumen y las de adentro de los enterocitos, pero aquellas de la lámina propia persisten y se multiplican dentro de las células fagocíticas. En el inicio pueden verse trombos en la lámina propia y daño en la pared de los vasos. En los terneros el íleon se daña rápidamente y a medida que progresa la enfermedad el yeyuno y el colon se invaden y dañan) (Nicolet, 1985, Gyles and Thoen, 1993).
Salmonella produce una potente endotoxina dentro de su propia célula, la trombosis de los vasos sanguíneos pequeños pueden llevas a necrosis isquémica de las extremidades y punta de orejas.
La falla en contener la infección lleva a septicemia y sus secuelas como la neumonía, meningitis y artritis séptica sanguínea (Gyles y Thoen, 1993). Los convalecientes pueden convertirse en portadores crónicos (Nicolet, 1985).
En casos de Salmonelosis la apariencia general de un ternero puede ser muy similar a la colibacilosis. Sin embargo, generalmente, se observa el agrandamiento de nódulos linfáticos mesentéricos y lesiones entéricas macroscópicas. Estas son más severas en el íleon durante la etapa más temprana de la enfermedad y con el tiempo el yeyuno y colon se ven afectados. La gastroenteritis comúnmente causa exudación de fibrina amarillenta; hay hemorragia de nódulos linfáticos viscerales y petequias en las membranas serosas. (Anderson y Blanchard, 1989).
11 engrosada y hemorrágica, la bilis frecuentemente está espesa y puede formar un coagulo fibrinoso firme (Jubb et al., 2016)
Los riñones frecuentemente tienen petequias a través de la corteza las cuales progresan a micro abscesos blancos si el animal vive por varios días (Jubb et al., 2016)
Lesiones microscópicas
Las lesiones en intestino delgado consisten en una capa fina de exudado fibrinocelular sobre las superficies de las vellosidades, necrosis y ulceraciones de la mucosa con presencia de fibrina y neutrófilos exudando desde el área ulcerada hacia la luz intestinal. En el intestino grueso proximal se produce una erosión similar, ulceración y efusión fibrinosa. Generalmente, en casos de septicemia, se producen cambios característicos en hígado como inflamación fibrinosa de la vesícula biliar (Jubb et al., 2016)
AGENTES VIRALES
Rotavirus
Miembros del género Rotavirus, de la familia Reoviridae, infectan el tracto gastrointestinal de la mayoría de los mamíferos y aves.
La infección rotaviral bovina está implicada principalmente en la diarrea de terneros neonatos tanto en rodeo de cría como lecheros, ambos amamantado y criados artificialmente, aunque hay informes de su asociación con diarrea en ganado adulto. Combinaciones de agentes, incluido el rotavirus, están frecuentemente involucrados en brotes de diarrea neonatal en terneros.
12 El rotavirus puede estar implicado en animales desarrollando signos en cualquier momento durante el período hasta 2-3 semanas de edad, y es más común en animales > 4-5 días de edad. Rotavirus tiene un período prepatente de 1-3 días, y la diarrea dura 2-5 días si no hay complicaciones (Jubb et al.,
2016)
La patogénesis de la diarrea con rotavirus implica 3 mecanismos: malabsorción ocurre secundaria a la destrucción de enterocitos. En segundo lugar, se libera un agente vasoactivo de células epiteliales infectadas y causa isquemia. En tercer lugar, los rotavirus son capaces de producir una proteína no estructural,
NSP4, que actúa como una enterotoxina secretora (Jubb et al., 2016)
Las células epiteliales de los dos tercios superiores de los afectados las vellosidades del intestino delgado proximal se infectan primero en aquellas especies que sufren diarrea severa por infección por rotavirus. El desprendimiento de las células da como resultado un acortamiento y, a veces, fusión de las vellosidades, si las membranas basales son expuesta (Zachary and McGavin, 2012).
Coronavirus
Los coronavirus se clasifican como géneros Alphacoronavirus, Betacoronavirus, Deltacoronavirus y Gammacoronavirus, en subfamilia Coronavirinae, familia Coronaviridae.
La replicación viral en el epitelio intestinal por coronavirus es similar en todas las especies estudiadas. El coronavirus infecta y se replica en el citoplasma apical de los enterocitos en las puntas y los lados de las vellosidades intestinales.
La infección con Coronavirus bovino en terneros neonatales, es una causa
común de diarrea, ya sea solo o en combinación con otros agentes,
particularmente Rotavirus y Cryptosporidium siendo capaces de infectar el
13 grueso. El antígeno viral también se encuentra en los macrófagos en la lámina propia de las vellosidades y en los linfonodos mesentéricos.
En infecciones de campo, las lesiones microscópicas se encuentran más consistentemente en el intestino delgado y el colon. Los terneros infectados generalmente desarrollan depresión leve, pero continúan amamantando a pesar de desarrollar diarrea profusa.
Con deshidratación progresiva, acidosis e hipercalcemia, los animales se vuelven débiles y letárgicos; la muerte puede seguir como resultado de hipovolemia, hipoglucemia. La diarrea en los sobrevivientes se resuelve en 5-6 días.
En la necropsia, los animales afectados tienen lesiones inespecíficas de diarrea neonatal de ternero no diferenciada. Los ganglios linfáticos mesentéricos pueden estar algo agrandados.
La replicación del virus ocurre inicialmente a través de la longitud de las vellosidades en todos los niveles del intestino delgado, finalmente se extiende por todo el intestino grueso hasta el extremo del colon mayor y el recto, causando diarrea por mala absorción
Las células epiteliales infectadas mueren, se desprenden y son reemplazados por células inmaduras.
Las lesiones microscópicas de la infección coronaviral en los terneros varía con la gravedad y la duración de la infección; atrofia de las vellosidades en combinación con colitis leve.
Los terneros vivos en las primeras etapas de la enfermedad clínica son los
mejores sujetos para la confirmación de un diagnóstico etiológico (Jubb et al.,
2016)
AGENTES PARASITARIOS
Cryptosporidium parvum
14 El período prepatente de Cryptosporidium parvum en terneros es de ~ 7 días y las infecciones generalmente persisten durante semanas o, si el animal está inmunocomprometido, tal vez meses.
Los criptosporidios se encuentran en muchas circunstancias, y en algunas especies la infección puede ser asintomática. Los neonatos son particularmente susceptibles a infecciones intestinales, y esto ocurre especialmente entre los rumiantes (terneros, corderos, cabritos, ciervos rojos) infectados con Cryptosporidium parvum generando diarrea y anorexia.
La depresión en los terneros generalmente ocurre entre ~1 y 4 semanas de edad, y en corderos ~5-14 días de edad. Sin embargo, terneros ingenuos hasta 3 meses de edad son susceptibles a la infección y pueden desarrollar diarrea.
La criptosporidiosis intestinal se asocia con atrofia de las vellosidades de gravedad variable, caracterizada por embotamiento y alguna fusión de vellosidades, y por hipertrofia de criptas de Lieberkühn
Los organismos generalmente se encuentran distribuidos en la mitad distal del intestino delgado, especialmente en el íleon, Infiltrados de neutrófilos y células mononucleares mixtas están presentes, probablemente atraído por las citocinas proinflamatorias liberadas del epitelio infectado Un aumento en los linfocitos T intraepiteliales ha sido documentado en el intestino de terneros infectados.
La diarrea en la criptosporidiosis se debe principalmente a la malabsorción asociado con la atrofia de las vellosidades y una población de enterocitos inmaduros; y tal vez a la ocupación de una gran proporción de la superficie de las células de absorción por el organismo. La liberación de mediadores inflamatorios, principalmente prostaglandinas, pueden estimular la secreción de la mucosa y aumentar la permeabilidad de las células epiteliales.
15 Diagnóstico
Las pruebas de laboratorio, para la identificación de cada agente son muy importantes, ya que nos permiten decidir sobre los tratamientos quimioterápicos a establecer, ya que la razón más común de la falla de la antibioticoterapia es el diagnóstico incorrecto.
Para el diagnóstico se puede realizar el cultivo a partir de muestras estériles de intestino (íleon, colon espiral) y linfonódulos mesentéricos para aislamiento e identificación de bacterias y virus; muestras de órganos en formol al 10% para histopatología, para la visualización de lesiones microscópicas caractesticas de cada agente involucrado. También se pueden obtener muestras de materia fecal, para realizar técnicas de identificación parasitaria como conteo de huevos por gramo (HPG), ooquistes por gramo (OPG), entre otras.
El diagnóstico de las infecciones de ETEC requiere la detección de factores de virulencia (adhesinas, enterotoxinas) mediante ensayos in vivo (aglutinación de látex o ELISA) en la mayoría de los casos. Adhesinas fimbriales pueden, sin embargo, ser detectadas mas eficientes in vivo por un método de inmunofluorescencia que utiliza anticuerpos antifimbriales policlonales o monoclonales (Nagy y Fakete, 1999)
En lo que respecta a Salmonella su aislamiento en tejidos y contenido intestinal sugiere la presencia de salmonelosis, pero no tiene por si mismo valor diagnóstico, por lo que es necesario descartar otras enfermedades (Odriozola 2010).
MEDIDAS PREVENTIVAS PARA LA INFECCION EN TERNEROS
En lo que respecta al peripato:
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Minimizar el contacto con el agente infeccioso, evitando que los partos se realicen en un medio ambiente contaminado.
Lograr un adecuado consumo de calostro, de óptima calidad.
Evitar la permanencia del ternero con su madre por periodos prolongados y de esta manera reducir el contagio por microorganismos causales de diarrea (Bilbao, 1993)
En el periodo de cría artificial
Mantener a los terneros en superficies que no hayan sido utilizadas recientemente por bovinos adultos o terneros en crianza, para lo que es aconsejable realizar rotaciones periódicas de las superficies utilizadas en la cría de los terneros.
Realizar la crianza individual en sistemas de alojamientos que brinden el
máximo control del estrés térmico, exceso de humedad, lluvias o vientos.
Suministrar una adecuada calidad y cantidad de alimento, evitando aquellos remplazantes de la leche o concentrados con baja concentración energética e inapropiada fuente proteica o lipídica que ocasionan gastroenteritis o mala digestión. Suministrar agua con aptitud microbiológica y de calidad composicional.
Desinfectar periódicamente los alojamientos así como los utensilios destinados a la alimentación (mamaderas, baldes, tetinas, etc) y los elementos involucrados en el transporte (camiones, carros, jaulas, etc.)
Los animales afectados clínicamente deben separarse del resto del grupo.
Los animales muertos por casos fatales o clínicos deben ser eliminados del establecimiento por medio de incineración o entierro. (Bilbao, et al.,
2012)
17 aunque no protegen contra todos los agentes causales de la diarrea neonatal, reduciendo así la incidencia siempre asociado a medidas de manejo apropiadas. Se aconseja inmunizar con dos dosis de vacuna a los 60 y 15 días previos al inicio de la parición. Cabe destacar que los resultados obtenidos con dicha vacunación son variables debido a que en la ocurrencia de diarrea neonatal intervienen múltiples factores como por ejemplo:
a) La vaca no fue inmunizada correctamente (número de dosis insuficientes y tiempo preparto fuera del periodo indicado)
b) El ternero no tuvo acceso al calostro en tiempo y cantidad
c) El agente que causa la diarrea no está contenido en la vacuna
d) El nivel de desafío supera la protección transferida por el calostro. (Margueritte, et al., 2005)
Tratamiento
La fluidoterapia es la terapéutica ideal en toda diarrea, debido a que la mayoría de las muertes de los terneros ocurre no como resultado directo de la multiplicación de los agentes infecciosos sino por la deshidratación y el desequilibrio electrolítico. Otros agentes terapéuticos utilizados son antibióticos, modificadores de la motilidad intestinal. Protectores y absorbentes gastrointestinales, agentes que regulan la secreción incluyendo las prostaglandinas, astringentes, prebióticos, esteroides, antiadhesivos, antitoxinas y preparaciones de anticuerpos específicos. El éxito del tratamiento esta asociado a la detección temprana de los signos clínicos (Bilbao, et al.,
18 vacunas especialmente diseñadas para prevenir la diarrea neonatal (Davis y Drackley, 1998).
CASO CLÍNICO
Antecedentes
El día 27/08/2017 se recibió en el Servicio de Diagnóstico Veterinario de la UNCPBA dos terneros de guachera y el día 4/09/2017 otro ternero neonato, provenientes de un establecimiento lechero situado en el partido de Tandil. Los animales fueron enviados debido a una mortandad que afecta a la guachera de dicho tambo.
Alimentación del lote problema: sustituto lácteo Booster, alimento
balanceado y agua.
Sanidad de las madres: a las vaquillonas se les aplica dos dosis contra las diarreas neonatales a los 60 y 20 días preparto (Rotatec J5 Biogénesis Bago) y síndrome respiratorio (Biopoligen – Biogénesis Bago). A las vacas les aplican la
primera dosis de vacuna contra diarreas neonatales y síndrome respiratorio al secado y una segunda dosis preparto.
Manejo: los terneros permanecen durante 24 horas con la madre y luego en la guachera reciben dos tomas diarias de sustituto lácteo a las 9 y 15 hs, con una temperatura inicial de 40ºC aproximadamente en los primeros terneros y de 36ºC los últimos. También reciben alimento balanceado y 1 balde de agua luego del sustituto. Los baldes son lavados únicamente con agua y esponjas. Hay tres prepartos, uno compuesto por vaquillonas y dos por vacas, sin embargo en la guachera los terneros están todos juntos.
La guachera tiene una antigüedad de 3 años, está protegida de los vientos del sur mediante un monte natural. Los terneros se encuentran en estaca con correderas y protegidos con un rollo. Durante el mes de julio la guachera se encontraba vacía y fue fumigada con round up.
19 Motivo de consulta
A mediados de agosto empezaron a observar terneros con diarrea sanguinolenta y/o mucosa. No presentaron temperatura corporal elevada. Los terneros manifestaron decaimiento, deshidratación, inestabilidad, pedaleo y muerte. La signología descripta en su mayoría comenzaba en animales de 5 días de vida en adelante.
Al inicio de la parición, la cual comenzó el 1 de agosto, tuvieron una mortandad de 25 terneros y se lo atribuyeron al uso de otro sustituto, ya que al cambiarlo se frenó la mortandad.
A la fecha de la consulta (27/09) en la guachera se encontraban 143 terneros en total, de 200 partos (28.5 % mortandad). No tienen antecedentes de abortos. La temporada anterior tuvieron problemas de leptospirosis.
Enviaron muestras de agua al laboratorio de bacteriología para su estudio bacteriológico. Los resultados indicaron que el agua es apta para consumo animal.
Muestra remitida al Servicio de Diagnóstico – UNCPBA
Tres terneros de guachera, una hembra y un macho (27-09) y otra hembra (04/10).
LESIONES MACROSCÓPICAS DE NECROPSIA
El día 27 de septiembre a las 19.30 horas se realizó la necropsia de dos terneros, un macho y una hembra. La hembra murió de manera súbita.
Necropsia N1
Sexo: hembra. Edad: 5 días. Raza: Jersey. Estado corporal: regular a bueno.
Grado de autolisis: 2 (0 a 3). Id: sin caravana
Observaciones externas. Lengua depredada.
20 expandidos por la presencia de líquido gelatinoso claro. En corazón hemorragias petequiales epicárdicas y sufusiones endocárdicas a nivel del ventrículo izquierdo. Ambos riñones presentaban color rojo oscuro homogéneo y consistencia normal.
Necropsia N2
Sexo: macho. Edad: 22 días. Raza: Jersey. Estado corporal: regular a bueno.
Grado de autolisis: 2 (de 0 a 3). Id: sin caravana
21 corporal elevada. Además junto con el sustituto le administraron sales rehidratantes.
Lesiones macroscópicas: la zona perineal estaba manchada con materia fecal amarillenta pastosa. Las asas del intestino delgado estaban dilatadas con gas. El resto de los órganos presentaban un grado de autolisis moderada.
Durante la necropsia, de cada animal, se obtuvieron muestras de bilis para aislamiento de salmonella, porciones de intestino y ganglios mesentéricos para aislamiento e identificación bacteriológico y antibiograma; intestino delgado para aislamiento virológico. Asimismo se obtuvieron muestras de los distintos órganos para su estudio histopatológico.
El día 4 de octubre a las 13 horas se realizó la necropsia de una hembra. La hembra el día anterior presentó signos nerviosos antes de morir y temperatura elevada (39.4ºC). Fue punzada debido a que se había timpanizado. Le administraron sulfa + penicilina. Murió el 4 de octubre a las 11 hs.
Necropsia N3 (N3)
Sexo: hembra. Edad: 21 días. Raza: Jersey. Estado corporal: regular a bueno.
Horas de muerto: 2 hs. Id: xxxx
22 Al ingresar a cavidad abdominal se observó la presencia de líquido amarillo traslúcido (ascitis moderada) y fibrina libre en la cavidad. Asimismo se observó fibrina adherida a las asas intestinales y sobre la pared interna de la cavidad abdominal (peritonitis moderada). En abomaso y líquido se observó abundante cantidad de líquido amarillo grisáceo. Algunas asas intestinales de manera segmental estaban distendidas con abundante gas y líquido. El resto de los órganos no presentaron lesiones macroscópicas de importancia clínica.
Durante la necropsia, se obtuvieron muestras de bilis para aislamiento de salmonella, porciones de intestino y ganglios mesentéricos, liquido de cavidad y cerebro para aislamiento e identificación bacteriológica y antibiograma. Asimismo se obtuvieron muestras de los distintos órganos para su estudio histopatológico.
EXAMEN HISTOPATOLOGICO
Descripción microscópica
23 mucosa como submucosa se observa congestión severa. En pulmón se observa que los septos interlobulares se encuentran expandidos unas 5 veces lo normal por edema. A nivel del corazón se observan áreas focales de hemorragia a nivel subendocárdico.
Diagnóstico morfológico:
♯ Intestino: congestión severa.
♯ Riñón: congestión cortical y medular difusa severa y hemorragias
multifocales corticales.
♯ Corazón: hemorragia focal subendocárdica.
N2 (Macho): En las secciones examinadas de las muestras de riñón se observa a nivel medular congestión severa de vasos sanguíneos. Debido a la autolisis que presentan las distintas porciones intestinales examinadas (yeyuno, ciego y colon) no se puede apreciar el epitelio de la mucosa intestinal, sin embargo tanto a nivel de vasos sanguíneos de la lámina propia de la mucosa como submucosa se observa congestión leve. En pulmón se observa de manera multifocal que los septos alveolares están engrosados debido a congestión de los vasos sanguíneos. El resto de las secciones examinadas (corteza cerebral, bazo, hígado, linfonodo) no presentaron lesiones microscópicas de importancia clínica.
Diagnóstico histopatológico
♯ Riñón: congestión medular severa.
♯ Intestino: congestión leve.
24 material fibrilar eosinofilico (fibrina). Asimismo se observa proliferación de fibroblastos, fibras colágenas y abundante presencia de neovascularización (tejido de granulación). La mucosa de ambas secciones se encuentra con un grado de autolisis moderada. En las secciones de riñón tanto a nivel cortical como medular se observa una congestión de los vasos de moderada a severa. En el hígado los sinusoides se presentan dilatados y congestivos. Algunas áreas periportales presentan un leve infiltrado linfoplasmocitico. El resto de las secciones examinadas (bazo, corteza cerebral y corazón) no presentaron lesiones de importancia clínica.
Diagnóstico histopatológico
♯ Intestino: serositis y peritonitis fibrinosa subaguda moderada a severa.
♯ Riñón: congestión medular y cortical severa.
RESULTADOS DE LABORATORIO
Resultados laboratorio virología
Muestra: contenido intestinal (N1) y (N2).
Análisis solicitado: inmunocromatografía lateral para detección de: rotavirus bovino (RVB), coronavirus (CoV), criptosporidium (Crypto), Giardia (GD) y E coli K99 (EC).
Resultados bacteriología
Muestras: N1: intestino, linfonódulo, bilis. N2: intestino, linfonódulo, bilis.
-N3: intestino, linfonódulo, bilis, cerebro, contenido intestinal, colecta abdominal.
25 -N1: intestino, linfonódulo y bilis: POSITIVO a E. coli. NEGATIVO a Salmonella
spp.
-N2: intestino, linfonódulo: POSITIVO a E. coli. NEGATIVO a Salmonella spp.
-N3: linfonódulo: POSITIVO a E. coli y Salmonella entérica.
Intestino y contenido intestinal: POSITIVO E. coli y Pseudomonas aeruginosa.
NEGATIVO a Salmonella spp.
Bilis de N2, cerebro y colecta abdominal de N3: NEGATIVOS.
Con respecto a Salmonella entérica se realizaron las aglutinaciones para determinación de antígenos somáticos OSA y OSB, resultado positiva a OSA. Por lo tanto, si bien resta realizar otras determinaciones para caracterizar el serovar, se puede descartar que se trate de las serovares Dublin, Enteritidis o Typhimurium. La cepa será enviada al Instituto Malbran para la determinación final del serovar.
Resultados de antibiogramas de Escherichia coli y Salmonella enterica
26 DIAGNOSTICO FINAL
Complejo de diarrea neonatal (Escherichia coli + Salmonella entérica).
Discusión
Muchos estudios han demostrado que Escherichia coli y Salmonella entérica
son consideradas como los agentes infecciosos bacterianos más importantes en el desarrollo del complejo de diarrea neonatal bovina (Odeón, 2001, Bilbao et al 2013), lo que concuerda con el caso clínico presentado en este trabajo. La categoría afectada, edad, el hacinamiento, la época del año, el clima, además de las manifestaciones clínicas observadas y hallazgos de necropsia coinciden con la bibliografía consultada.
Lo que respecta al tratamiento, la fluidoterapia es la terapéutica ideal en los casos del complejo de diarrea neonatal; y mediante la realización del antibiograma podemos hallar la droga a la cual es sensible el o los agentes infecciosos presentes, aunque sabiendo que la mejor manera de reducir la incidencia es la prevención (Bilbao G. et al 2012).
27 Conclusión
En base a los resultados de laboratorio obtenidos, como el aislamiento en pureza de Escherichia coli a partir de muestras de contenido intestinal, linfonodos mesentérico y bilis, junto al aislamiento en pureza de Salmonella sp
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