Flow Cell. La muestra una vez tratada es dirigida a una celda de flujo (Flow(

(1)

Tecnolog

(2)



Flow

Cell



La muestra una vez tratada es dirigida a una

celda de flujo (

Flow

cell

) en la cual por el

dise

ñ

o hidrodin

á

mico, los leucocitos se alinean

y pasan formados uno a uno y en donde se

realizan las siguientes mediciones

(3)



Volumen



Mediante impedancia de baja frecuencia

se determina el volumen de la c

(4)



Conductividad



La conductividad de alta frecuencia de

Radiofrecuencia (RF) determina la

conductividad interna de la c

(5)



Scatter



La dispersi

ó

n (

scatter

) de luz l

á

ser

indica la estructura y forma de la c

(6)



 De esta manera son De esta manera son realizadas las 3

realizadas las 3

determinaciones de

manera simult

manera simultááneanea



 Las lecturas de estas Las lecturas de estas 3 se

3 seññales anales anáálogas es logas es enviadas al analizador enviadas al analizador para su amplificaci para su amplificacióón y n y proceso, luego el proceso, luego el sistema genera 3 sistema genera 3 gr grááficosficos   DF1: Volumen vs. DF1: Volumen vs. Scatter Scatter   DF2: Volumen vs. DF2: Volumen vs. Conductividad Conductividad   DF3: Volumen vs. DF3: Volumen vs. Conductividad Conductividad extrayendo las se

extrayendo las seññales ales de

de NeutrNeutróófilosfilos y y Eosin

(7)



(8)

DFA

(9)

DF2

El sistema caracteriza cada célula que pasa hasta completar un conteo de 8.132 células o partículas que sobrepasen un cierto volumen o bien hasta que transcurran 20 segundos, cualquiera de las 2 situaciones que ocurra primero.

(10)

Informe del

(11)

Informe del

(12)

Sysmex

(13)

Sysmex

XS

-

1000

i

Caracter

í

sticas

Principales



21 Par

á

metros, Diferencial Leucocitario

metros, Diferencial

Leucocitario

de 5

partes



 Manejo de Datos sobre Windows XPManejo de Datos sobre Windows XP®® Professional Professional



 Registro de 10.000 resultados de pacientes (numRegistro de 10.000 resultados de pacientes (numééricos y ricos y

gr

grááficos)ficos) 

 Control de Calidad Interno y ExternoControl de Calidad Interno y Externo



 AnAnáálisis de WBC por lisis de WBC por CitometrCitometrííaa de Flujo Fluorescentede Flujo Fluorescente



 Enfoque HidrodinEnfoque Hidrodináámico para recuento de RBC y PLTmico para recuento de RBC y PLT



(14)

M

Míínimo Volumen de aspiracinimo Volumen de aspiracióónn



 20 20 ulul en tubos con EDTA * en tubos con EDTA *

M

Míínimo volumen de muestra requeridonimo volumen de muestra requerido



 Volumen muertoVolumen muerto

•

• Modo manual Modo manual –– 500 500 µµLL •

• Modo Modo automuestreadorautomuestreador –– 1ml1ml •

(15)

Sysmex XS

-

1000

i

Beneficios

para

el

Usuario



 Con s_{Con s}ó_ólo un _{lo un}

“

“clicclic”” pueden pueden verse los verse los resultados y resultados y validar validar

(16)

Par

á

_á

metros

_metros



WBC, RBC,

Hgb

,

Hct

, MCV, MCH,

MCHC, PLT



RDW

-

CV, RDW

-

SD, HDW



Neut

%, Lymph%, Mono%,

Eo

%,

Baso

%,

NRBC%



MPV



Retic

%,

Retic

#, IRF



(17)

Linealidad extendida

0 – 400 x 10

3

_{/ µL}

0 – 8,00 x 10

6

_{/ µL}

HGB

HCT

0 – 25,0 g/ dL

0 – 60%

0 – 5.000 x 10

6

_{/ µL}

(18)

Tecnolog

í

a para Gl

ó

bulos rojos y Plaquetas

M

é

todo

de

Electroenfoque

Hidrodin

á

mico

Es el

Es el standardstandard usadousado por por SysmexSysmex en

en loslos instrumentosinstrumentos de la de la serieserie X

X parapara la la determinacideterminacióónn de de conteos

conteos precisosprecisos de de plaquetasplaquetas y

y glglóóbulosbulos rojosrojos

L

Las as ccéélulaslulas son son rodeadasrodeadas porpor unauna capa

capa de de flufluíídodo queque laslas guguííaa unauna por

por unauna a a travtravééss del del centrocentro de de la

la aperturaapertura Cada

Cada ccéélulalula eses contadacontada y y medidamedida individualmente

individualmente

Un

Un segundosegundo flujoflujo de de flufluíídodo en la en la parte

parte posterior de la posterior de la aperturaapertura asegura

asegura queque laslas ccéélulaslulas no no recirculen

(19)

Tecnolog

í

a para Hemoglobina

Reactivo

libre

de

cianuro



 GrupoGrupo hidrofhidrofíílicolico del SLS del SLS queque se se uneune a la a la molmolééculacula de la de la globulinaglobulina



 OcurreOcurre un un cambiocambio de de configuraciconfiguracióónn



 OxidaciOxidacióónn de Fe de Fe 2+2+ ----> Fe > Fe 3+3+



 GruposGrupos HidrofHidrofíílicoslicos de SLS se de SLS se unenunen a Fe a Fe ----> SLS> SLS--HbHb

Fe 2+ Fe 3+ _Fe3+

(20)

Sysmex XS

-

1000

i

Tecnolog

í

_í

a

_a



 El XS utiliza el mismo _{El XS utiliza el mismo}

m

méétodo para la medicitodo para la medicióón n exacta de RBC/HTO que

exacta de RBC/HTO que

los otros analizadores

de la familia X de la familia X   El hematocrito es El hematocrito es medido basado en el medido basado en el volumen de las c

volumen de las céélulas lulas rojas determinado por

rojas determinado por

detecci

(21)

Principios de medici

ó

_ó

n

_n



Citometr

í

a

de flujo

usando un l

á

ser

semiconductor para

medir:



luz dispersa frontal



volumen celular



luz dispersa lateral



estructura interna de

la c

é

lula



fluorescencia lateral



(

Tinci

ó

n de ADN y

ARN

(22)

Side scater

Fluorescencia

(23)

(24)

Sysmex XS

-

1000

i

Tecnolog

í

_í

a

_a



 Citometr_Citometrí_ía_a de Flujo Fluorescente _{de Flujo Fluorescente}



(25)

(26)

Por Citometría de Flujo se obtiene información

acerca de la composición y madurez celular

Dispersión lateral

Información del contenido de RNA y

DNA

Información de la estructura

interna

Tamaño de la célula

Dispersión frontal Fluorescencia

Láser

(27)

Sysmex

XS

-

1000

i

Tecnolog

(28)

(29)

Sysmex XS

-

1000

i

Beneficios

para

el

usuario

Opci

Opcióón de seleccin de seleccióón de ann de anáálisis para maximizar el flujo de anlisis para maximizar el flujo de anáálisis y los lisis y los costos operacionales

costos operacionales

Modo CBC

Análisis de luz desviada frontal

Modo CBC + DIFF

Análisis de luz desviada lateral y de la fluorescencia lateral

(30)

(31)

Desarrollo de nuevos

softwares

Masters

_Masters

La tecnología que se utiliza es muy potente y brinda más y más posibilidades de medición. Las aplicaciones se desarrollan para cuantificar lo que aparece en los gráficos a partir de utilizar fluorescencia.

X PRO Es el soft básico, sobre el que se montan las aplicaciones Informe a medida del usuario

Rangos para Control de Calidad

Medidor para reactivos y seguimiento de trazabilidad

IG Master Para cuantificar gránulos inmaduros RET Master Para cuantificar Hb en Reticulocitos

(32)

Cuantificación de Gránulos Inmaduros

Información útil sobre el diferencial

extendido de leucocitos



IG:

promielocitos

mielocitos

metamielocitos

promielo mielo metamielo

Blastos bandas segmentos

maduración de neutrófilos

(33)

Cuantificaci

ó

n de Gr

á

nulos

Inmaduros

IG Master

Canal del diferencial

IG % , # Normal fl u o re s c e n c ia Dispersión lateral

(34)

(35)

High angle detector (5o _{- 15}o₎

Low angle detector (2o_-3o₎ 670nm Laser Diode

RBC

분석

(36)

RBC

Cytogram

_Cytogram

and Histograms

_{and Histograms}

0 28 41 50 g/dL Hgb Concentration (HC) 0 60 120 200 fL RBC Volume (V) 0 100 pg Hgb Content (CH) R B C V ol u m e ( fL ) Hgb Concentration (g/dL) Micro Hypo Hyper Macro 120fL 60fL 28g/dL 41g/dL

(37)

Medida de los

eritroblastos

(38)

Recuentos de Reticulocitos



M

é

todo de Referencia: Azul de Metileno

Variaci

ó

n entre observadores

Altos coeficientes de variaci

ó

n

Laboriosos



M

é

todos automatizados

Azul de metileno

Fluorescentes

(39)

Canal

reticulocitos

-

Fluorescente

Fl alta Fl baja Fl muy alta Tinción: Polimetino: ARN Oxazina: ADN RET WBC RBC

(40)

Canal de los

(41)

Utilidad Clínica - FIR

.

Confirmación de Anemia Aplástica

.

Permite la clasificación de anemias por su

capacidad eritropoyética

.

Talasemia vs. deficiencia de Hierro

.

Anemia de los procesos crónicos

.

Hipoproducción vs. respuesta eritroide

temprana

.

Detección de implante correcto luego de

transplante

(42)

Utilidad Clínica

.

Monitoreo de tratamientos inmunosupresores

.

Monitoreo terapéutico de:

.

tratamientos con Eritropoyetina

.

Corrección de anemias nutricionales

.

Tratamiento de Mielodisplasias

.

Definición de necesidad de transfusión en

neonatos

Evolución post-tte 0 20 40 60 -10 -4 -2 2 5 8 15 días post-tte GB Reti (%) IRF (%) HPC (%)

(43)

Nuevos par

á

_á

metros

_metros



Recuento automatizado de

granulocitos

inmaduros IG



Recuento de plaquetas inmaduras IPF



(44)

Plaquetas Reticuladas



Son mas densas y

reactivas que las

plq

maduras



El contenido de RNA

est

á

relacionado con

la

megacariopoyesis



Reflejan la actividad

de la

(45)

Determinacion

de las plaquetas

inmaduras

(46)

Contenido de

Hb

de los

reticulocitos

Ret

-

He



Reticulocitos

con contenido

de

Hb

<28pg :

Hipocr

ó

micos



Son identificados con

colorantes fluorescentes por

la posici

ó

n en el

dispersograma

de acuerdo con

la fluorescencia y la luz

dispersada frontalmente

(47)

Contenido de

Hb

de los

reticulocitos

Ret

(48)

Contenido de

Hb

de los

reticulocitos

Ret

-

He Aplicaci

ó

n

clinica



Cantidad real de Fe para la

sintesis

de

Hb



Detecci

ó

n precoz de la deficiencia de Fe

(cuando los marcadores

bioquimicos

pueden

sufrir interferencia)



Monitorea la terapia con

Epo

en pacientes con

anemias cr

(49)

(50)

XE

(51)

Sysmex XS

-

1000

i

Beneficios

para

el

Usuario



 20 archivos para 20 archivos para

CBC + DIFF



 1 archivo para 1 archivo para

Control Interno