Algunas aplicaciones de la citología en el diagnóstico de neoplasias en la clínica canina

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(1)%, .63gzz. UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y DE ZOOTECNIA. ALGUNAS APLICACIONES DE LA CITOLOGIA EN EL DIAGNOSTICO DE NEOPLASIAS EN LA CLINICA CANINA. Trabajo dirigido presentado como requisito parcial para optar al título de Médico Veterinario. VICTORIA MARGARITA SANCHEZ RICO. RI1LIOTECA. r. AGPCrJ4RM r25 ENE 199. Bogotá, O. E., abril de 1983.

(2) Rector. FERNANDO SANCHEZ TORRES. Vice-Rector General. RODRIGO BONILLA ESCOBAR. Vice-Rector Académico. ANTONIO RAMIREZ SOTO. Secretario General. ALBERTO AMARIS MORA. Decano de la Facultad. AURELIANO HERNANDEZ VASQUEZ. y ¡ ce-Decano. ORLANDO OSUNA SUAREZ. Secretario. NHORA MARTINEZ RUEDA. Director del Trabajo. JOSE D. MOGOLLON GALVIS. Jurado. ELENA JARAMILLO URIBE AURELIANO HERNANDEZ VASQUEZ FERNANDO VILLAFAÑE AREVALO. 2.

(3) "El Presidente de Tesisy el Consejo Examinador de Grado, no serán responsables de las ideas emitidas por el candidato".. (Artículo 104 de los estatutos de, la Universidad Nacional). la.

(4) A mis Padres y Hermanos. A José Andrés. Victoria Margarita. i.

(5) AGRADECIMIENTOS. Con especial gratitud y aprecio se destaca la labor del doctor Carlos Iregul como director de esta investigación, hasta el momento en que debió ausentarse de] país.. Al doctor José Darío Mogollón G., por su interés y acertada dirección.. A los doctores Rafael Neira R. y Germán Rodríguez M.. A la bacterióloga Blanca Cécilia Gaviria y por su ínter medio a Laboratorios Merck.. A doña Isabel de Fajardo, el señor Jorge Bustos y demás colaboradores del Laboratorio de Histopatología de la Fa cultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia de la Uníversidad Nacional.. A los directivos y trabajadores del Centro de Zoonosis y Control de Rabia. (Engativá).. y.

(6) A Yolanda Plazas.. Al doctor Alfonso Nuñez B.. Al personal de la sección de histotecnia del LIMV.. A Elvinia y a ' todas las personas que en algún aspecto hi cieron posible la realización de este trabajo.. -. Por su donación de materiales, orientación, estímulo y apo yo real, aportes fundamentales para llevar a feliz término el presente estudio.. vi.

(7) CONTENIDO. Página. 1. 1.. tNTRODUCCION. 2.. REVISIÓN DE LITERATURA. 2.1. DEFINICION E HISTORIA. 2.2. ASPECTOS GENERALES DE LAS. 4. 8. NEOPLASIAS. 2.3. CITOLOGIA GENERAL. 14. 2.4. CITOLOGIA ESPECIAL. 18. 2.. 14.. 1. Aparato Respiratorio. 18. 2.4.2. Aparato Urinario. 24. 2.4.3. Aparato Digestivo. 26. 2.4.4. Tejido Linfoide y. 2.4.5. Glandular. 27. Piel. 29. Vii.

(8) Pgina. 2.5. DIAGNOSTICO CITOLOGICO 31. DIFERENCIAL. 35. 3.. MATERIALES Y METODOS. 14 •. RESULTADOS. 5.. DISCUSION. 6.. CONCLUSIONES. 103. 7. .. RESUMEN. 1 o6. 8.. REFERENCIAS. 109,. 9.. APENDICE. 11.6. 92. viii.

(9) LISTA DE TABLAS. Página. Ni. 1. Patología canina Bogotá.. 2. Relación grupos de edad-neoplasias en caninos hembras.. 3. 53. 54. Relación grupos de edad-neoplasias en caninos machos.. 55. Porcentaje de ganglios afectados signos secundarios y presen cia de cápsula.. 5. Distribución hemisférica de las neoplasias en porcentaje.. 6. 56. 58. Distribución porcentual de las neoplasias por razas.. 60.

(10) Página. TABLA No.. 7. Citología canina Bogotá.. 62. Caracteres citol6gicos de a1gunasneop1asias.. x. 63.

(11) LISTA DE FIGURAS. Página. No.. Distribución de frecuencias del total de caninos hallados con 44. neoplas ¡as.. 2. Distribución de frecuencias en caninos machos con neoplasias.. 3. 45. Distribución de frecuencias de caninos hembras con neoplasias.. LI. Comparación porcentual de neopias ¡as.. ¿+8. 5. Lesiones neoplásicas benignas.. 50. 6. Lesiones neopiásicas malignas.. 51. x.

(12) Figura No.. - 7. Página. Prevalencia de neoplasias en caninos según distribuci6n topográfica.. 8. 57. Tumor Venéreo Transmisible de un canino hembra.. 9. 65. Tumor Venéreo Transmisible de un canino macho.. 67. 10. Histiocitoma canino.. 6.. 11. Tumor Mixto Mamario de un cani70. no hembra.. 12. 13-. Tumor Mixto Mamario de un canino de la figura 11.. 71. Fibrosarcoma canino.. 76. xii.

(13) Figura No.. Página. 1'4. Astrocitoma canino.. 15. Mayor detalle de la neoplasia de. 80. lafigur 'a 14.. 81. 16. Papiloma canino.. 83. 17. Hiperplasia de la glándula sublingual de un canino joven.. 85. 18. Linfosarcoma canino.. 87. 19. Tumor de células basales canino. 89. 20. Hiperplasia de glándulas sebáceas de un canino. 91. xiii.

(14) LISTA DE APENDICE. Página. 1. Historia clínica.. 117. 2. Coloración de Papanicolau.. 118. 3. Coloración con Sed¡-Stain.. 119. Diseño experimental de la investigación datos globales promediados caninos hembras.. 5. 121. Diseño experimental de la investigaci6n datos globales promediados caninos machos.. xlv. 122.

(15) 1. INTRODUCCION. Las neoplasias afectan con relativa frecuencia a los caninos ocasionándoles variados trastornos fisioló gicos dependiendo del tiempo, sitio y tamaño de la lesión, así como del conjunto de efectos sistmicos que pueden inducir la muerte del paciente o el estado de portadores que se crea en ciertos casos, como en el Tumor Venéreo Transmisible. Los estudios de las neoplasias se basaban en el pasado casi que exclusivamente en los hallazgos de necropsia y los diagnósticos se confirmaban por histopatologta. Actualmente los avances en la inves tigación del cáncer en humanos, han dado a la Oncología comparada una posición privilegiada en el campo investí gativo. Uno de los métodos utilizados ha sido el anli-.

(16) sis de las células que se descaman de los neoplasmas por medio de impresiones, raspados o aspirados para caracteri zarlos como malignos o benignos, clasificarlos según la célula primordial que los conforma y diferenciarlos de otras condiciones patológicas tales como inflamaciones, hiperpiasia, tejido de granulación, etc.. En los últimos años numerosos investigadores han realizado ensayos en el campo de la Citología Exfol iativa (2, 7, 10, 28, 31),. recopilando información de animales. enfermos. Sin embargo, el diagnóstico citológico ha tenido uso limitado en Medicina Veterinaria.. En nuestro país hasta el momento no se ha realizado ningún trabajo al respecto, aunque los problemas en la clínica canina son numerosos, pero no se han hecho estu dios profundos sobre la importancia de los neoplasmas como causa del deterioro de la salud de los perros. También puede influir el hecho de que el diagnóstico por citología requiere un conocimiento completo de las células normales que se originan de una fuente dada, lo que obliga a verdaderas especializaciones en la citología de cada órgano. A.

(17) pesar de todo, modernamente, la exitosa utilización - de la citología en Medicina Humana ha estimulado el interés en el uso de estas técnicas como ayuda diagnóstica, dado que la obtención de muestras es sencilla,- no ofrece ningún riesgo para el paciente y el resultado se obtiene con rapidez, es confiable y económico.. Los objetivos de la presente investígación fueron: 1) Clasificar los neoplasmas de ocurrencia común en caninos teniendo en cuenta, la raza, edad, y sexo, estable ciendo la prevalencia instantánea. 2) Determinar las características citológicas de las neoplasias encontradas, clasificándolas bajo criterios de malignidad o benignidad y confrontar los diagnósticos con el estudio histopatológi co. 3) Establecer la aplicabilidad de la citología exfoliativa como método paraclínico en el diagnóstico rápido de neoplasias en caninos..

(18) 2.. 2.1. REVISION DE LITERATURA. DEFIFIICIOW E HISTORIA. El continuo crecimiento de los epitel los favorece la descamación de células. El estudio microscópico de éstas se define como Citología Exfoliativa; y para efectos de diagnóstico se pueden obtener células de casi todos los órganos y sistemas del cuerpo, de los líquidos fisiológicos, de las superficies de lesiones externas como ulceraciones y neoplasias, así como de los fluídos que se acumulan en diferentes cavidades. Las cé lulas factibles de ser estudiadas no son solo las que se descaman normalmente sino las que se pueden obtener mediante técnicas especiales..

(19) 5. .. -. La identiticación de figuras malignas en las células exfoliadas de los neoplasmas es la aplicación más importante de la citología. (2,. 11,. 16, 21).. Esta rama de. la Biología data de 18 1+3, cuando Walshe (citado por Robertis, 28) en sus investigaciones sobre el diagnóstico de las enfermedades pulmonares observó células y fragmentos de te] idoen los, esputos. Años más tarde, Beale (citado por Smith y Donald, 28) mediante el estudio del esputo de un paciente humano, diagnosticó cáncer faríngeo. Varios autores publicaron trabajos similares de muestras de esputos (23, 28). Posteriormente Sanders, Lucke, Klebs, Dickinson y Quinche (Rebar, 23; Smith y Donald, 28) durante los años 1864 a 1882 utilizaron frotis citológicos de orina y líquido ascítico para el diagnóstico de condiciones malignas.. Hubo en realidad numerosas contribuciones de otros investigadores, pero en general el diagnóstico cito lógico fue abandonado durante cerca de sesenta años. En 1928, Papanicolaou anunció su descubrimiento en la Terce ra Conferencia para el Mejoramiento de las Razas, pero so lo 13 años más tarde fueron aceptados sus trabajos y luego de sus publicaciones en 1941, adquirió importancia es ta disciplina. (citado por Raphael,. 22)..

(20) 6. De la misma manera, en la década del 50 se publicaron varios trabajos donde se utilizaba la citología diagnóstica para el examen del líquido cefalorraquídeo y en el hallazgo de corpúsculos de Negri en casos sospecho sos de rabia. (11, 19, 21).. En 1966, G»lmore (7) realizó el diagnóstico de lesiones intratorcicas e intraabdominales por medio del estudio citológicode los líquidos hallados en estas cavidades ya] año siguiente, Naib, Cleppery El liot (cita do por Graham, 9) describieron los resultado del examen citopatológico de lesiones oculares en el hombre. La citología exfol iativa ha sido ampliamente usada enmedicinaco mo ayuda en el diagnóstico del cáncer y principalmente en el estudio de lesiones epitel i ales. En 1977 Spinak y Friedman (citados por Smith Y Donald, 28) demostraron su utilidad en el reconocimie n to y la conducta a seguir en el caso de lesiones mali(J naS 'n la conjuntiva. Por esta misma época un número ¡u1P0rt;i nte de investigadores la usaron en ensayos de. inmJflOtrapia. importancia en la identific ya que este medio moderno ". Cir1 t -9. y demostraron su. de tumores sin biopsia, innecesario estímulo. antigénico del huésped (14. 16, 19, 28)..

(21) 7. La citología ha experimentado en los ultimos años un progreso acelerado y se ha convertido en la base fundamental del estudio de la estructura y función de los seres vivos, tanto en el estado normal como patológico. Aunque en Medicina Veterinaria ha sido limitada su utili zación, existe un buen número de investigadores que han realizado trabajos en este campo. Entre ellos se pueden mencionar a Rossel, Perman, Beech, Bach, Wilkins y otros (citados por Rebar). (23), quienes recopilaron datos co-. rrespondientes a la citología de animales enfermos.. Los trabajos mas recientes se refieren a la inducción de tumores en animales como perro y ratón, para observar lentamente las etapas de crecimiento de los mismos y las variaciones celulares.. Igualmente se encuen-. tran numerosos reportes de casos de diferentes neoplasias diagnosticadas por medio de citología como: un astrocito ma en un Boxer, por Zymet y colaboradores (34). Es nota ble el número de invest-igaciones en carcinomas, tumores mamarios y en nuevas técnicas de fijación de muestras, as pecto que es definitivo en el éxito del diagnóstico por citología. (5, 27, 34)..

(22) 8. 2.2. ASPECTOS GENERALES DE LAS NEOPLASIAS. Sabiendo que la principal aplicación de la cito logía, tanto en Medicina humana como en Medicina Veterina ria, es en e] diagnóstico de neoplasias, se hace necesario defin-ir algunos criterios básicos sobre el origen celular de los tumores y su clasificación. Las neoplasias son formaciones anormales que se originan en las células del propio organismo, crecen en forma espontánea, influyen en la constitución y función de las diferentes partes del cuerpo y su etiología en muchos casos es incierta (18, 20, 29). Se diferencian de otras proliferaciones re generativas, hipertróficas, hiperp1sicas e inflamatorias del tejido, esencialmente en tres aspectos: 1) Su estructura tisular difiere en cierto grado de los tejidos. que se encuentran en todo el organismo. 2) Poseen sus propias leyes de crecimiento, siendo esto independiente del desarrollo de órganos y tejidos normales. 3) Poseen un metabolismo especial, independiente del metabolismo general. (9, 11).. El hecho de que su crecimiento sea progresivo las diferencLE. de las malformaciones tisulares (lo)..

(23) 9. Se considera que la apariencia macrosc6pica aporta elementos para la determinación de la malignidad o benignidad de una neoplasia (29). Es probablemente maligna si: -. Su rata de crecimiento es rápida. Su crecimiento es sésil, en forma expansiva o infiltrativa.. -. Muestra cierto grado de disgregación super ficial y ulcerosa.. -. Presenta metástasis con relativa frecuencia.. -. Se encuentran lesiones recurrentes, después de su remoción.. -. Sus límites de crecimiento son indefinidos (12, 29).. De otro lado, una neoplasia es posiblemente be nigna si: -. Su rata de crecimiento es lenta.. -. Presenta una cápsula fibrosa bien definida y es fácilmente enucleada, dejando la cápsula con su superficie interior lisa.. -. No produce metástasis, ni recurrencia después de su remoción..

(24) 10. -. Su crecimiento es limitado y circunscrito (25, 29).. Cuando se encuentran neoplasias en algun órgano interno, se debe investigar si son primarias o metastásicas. Si más de un órgano está afectado, la malignidad es concluyente (12, 18, 20, 29).. Desde el punto de vista histopatológico, Smith y Janes (29), mencionan varios criterios para estimar el grado de malignidad de los neoplasmas:. i) El modo de crecimiento. Este aspecto es útil de manera particular en los estados primarios de las neoplasias epiteliales. Si, se puede de mostrar que las células neoplásicas se han infiltrado por debajo de la membrana basa], el neoplasma es maligno.. 2) El grado de anaplasia. Es decir, el grado en que el tejido neoplásico diverge del patrón histológico normal..

(25) 11. 3) La celularidad. Es importante sobre todo en neoplasias fibrosas en este caso, si los núcleos están muy juntos, indicando la presencia de gran número de células por unidad de superficie, se sospecha malignidad.. L). La hipercromasia. Significa que los núcleos tienden a captar el colorante de manera más. fuerte que lo normal.. 5). El hallazgo de figuras mit6ticas es indicativo de crecimiento rápido; en este caso. el tumor es probablemente maligno. Este criterio' no es generalizado, pues se encuentran neoplasias malignas que no presentan mitosis o viceversa.. 6). La presencia de figuras mit6ticas anormales significa neoplasia de malignidad inob. -'. jetable; se pueden encontrar husos triples o quintuples y núcleos que se dividen en tres hijos en vez de dos.. 7). El estroma. Usualmente es escaso en las lesiones malignas.. -.

(26) 12. Dado que la velocidad de crecimiento de un tumor depende de varios factores cinéticos: 1) la longitud del ciclo celular, es decir, el intervalo entre una mitosis y la terminación de las mitosis subsiguientes en las células hijas; 2). la cantidad de células que parti-. cipan en el proceso de crecimiento y 3) el número de células perdidas por muerte, exfoliación y metástasis. La longitud del ciclo celular de los tumores es con frecuencia mas corta que la de sus equivalentes celulares normales. (3, 29).. Se hace necesario definir el ciclo fisiológico celular, este es el período que transcurre desde una mitosis hasta que tiene lugar la siguiente. Durante cada ciclo, los componentes estructurales del citoplasma y del núcleo celulares se duplican. Sin embargo, todas las actividades están ligadas al ciclo nuclear de replicación y segregación cromosómica que define los cuatro períodos: GI, S, G2 y M..

(27) 13 rx. OPECUANJ. El control, la regulación y la inhibición de la reproducción celular se consiguen interrumpiendo el ciclo nuclear. Los tres fenómenos cromosómicos más importantes de la división celular, es decir, reproducción, movimiento y división, ocurren todos con estricta continuidad durante el ciclo,. Si uno de ellos se bloquea, los otros no se producen.. Gi es la fase de descanso, durante la cual es necesaria la síntesis de RNA y de proteínas para que la célula progrese. La fase S es iniciada por una nueva proteína que estimula la reacción del DNA y de la DNA duplicasa, que a su vez inicia la síntesis de DNA. El curso posterior del ciclo está gobernado por una secuencia temporal de transcripciones genéticas que se mantienen de manera consecutivamente ordenada por la dependencia de una respecto a la siguiente (3)..

(28) 11. 2.3. CITOLOGIA GENERAL. El examen citológico consta de las observaciones de las alteraciones de los carácteres morfológicos de las células, vistas cada una como un caso particular, pudiéndose emitir un diagnóstico solo al concatenar diversos aspectos, teniendo en cuenta desde los datos de la historia. En contraste, la histopatología presta considerable atención para el diagnóstico de malignidad, a las alteraciones de los elementos estructurales asociados, tanto co mo alas alteraciones de las células individuales. (8, 10,. 15, 19, 24, 28).. Papanicolaou (citado por Smith y Donaid, 28) afirma que el reconocimiento de la malignidad en las células exfoliadas se basa principalmente en criterios generales, pero es preciso considerar también los tipos de células característicos. Los criterios generales son de tres clases: 1) Modifi.

(29) 15. caciones estructurales de las células y de sus núcleos. 2) Alteraciones de las relaciones entre las células, analizadas en conjunto. 3) Algunos conceptos susceptibles de variación.. En cuanto a las modificaciones de la estructura celular y de sus núcleos se enfatiza qn que se debe tener un amplio conocimiento de las células en estado normal ya que presentan variedad de características que en un momento dado pueden llevar a diagnósticos errados. Uno de los criterios de mal ignidad más importantes es la alteración de la relación núcleo/citoplasma debida al incremento-de] tamaño del núcleo, aunque puede ser un hallazgo en ciertos casos benignos como en células endocer vicales y de la pelvis renal. (28). Un aspecto de eva-. luación subjetivo es la hipercromasia, la cual puede ser causada por un exceso de colorante o por picnosis, siendo una característica frecuente en células malignas (28).. A menudo se observa en ciertas malignidades un núcleo poliploidico, anormalidad que puede estar presente en casos benignos, como por ejemplo en hiperactivÍdad.

(30) 16. de los islotes de Langerhans, o en preñez normal (10, 22). Así mismo se observan células multinucleadas como una connotación de malignidad, pero se debe tener en cuenta que se encuentran igualmente en-otras situaciones como en cateterización uretérica y en infecciones por virus Herpes Simplex (23). Es frecuente encontrar incremento de la actividad mitótica en neoplasias malignas, pero esta característica por sí sola no es concluyente ya que es común en tejidos de reparación, en células mesotel iales pleurales y peritoneales, en histiocitos y en algunos crecimientos benignos como colonias de pólipos o trichoepitelioma (22, 23, 28). Al contrario, el encuen tro de mitosis atípicas es altamente sospechoso y es un importante signo de malignidad (29).. Es común en células malignas encontrar una con siderable variación en e] tamaño y forma del núcleo. A esta anormalidad se le denomina anisokaryosis y es otra de las propiedades que definen la malignidad de una célu la. (9, 11, 22). Otra faceta importante aunque no definitiva pa ra catalogar una neoplasia como mal igna es el incremento.

(31) 17. de la actividad celular; esto lógicamente produce cambios morfológicos en el núcleo, tales como agrandamiento y aumento en el tamaño y número de los nucleolos.. Estas figuras aberrantes se pueden presentar en casos diferentes a neoplasias y para diferenciarlas es necesario observar las células en conjunto y valorar el .grado de heterogeneidad. Mientras menos uniformes son las células, aumenta el riesgo de malignidad (22, 23). Para concluir cualquier diagnóstico se debe - tener en cuen ta además, la forma de presentación de la cromatina, que produce en el núcleo un aspecto unas veces granulado y en otras deja áreas traslúcidas.. La cromatina se presen. ta en grumos, bandas puntos o £ngulos. De la misma manera, las membranas nucleares sufren variaciones a instancias de la malignidad de una célula y es así como pueden ser extremadamente delgadas o gruesas, produciendo la in diferenciación de los límites celulares; dichos límites igualmente se pierden por cambios en el citoplasma, el cual puede hallarse aumentado de tamaño, denso, reducido considerablemente como causa del aumento del núcleo o mostrar una superficie abrupta (semejante a la superficie lunar); en su interior se pueden encontrar vacuolas.

(32) 18. de variados tamaños, casi siempre múltiples, lo mismo que gránulos de . pigmento, leucocitos o detritus celulares. Estos, como casi todos los parámetros, tampoco son exclusivos de lesiones neoplásicas, benignas o malignas (8, 22, 23, 28).. Se ha enfatizado en el poco conocimiento y por ende en la poca utilización del citodiagnóstico en la clínica de péqueños animales. Siendo la filosofía de la presente investigación el demostrar la importancia de es te moderno y práctico medio diagnóstico, se presentan a continuación detalles sobre las muestras apropiadas y los hallazgos citológicos normales de los órganos y aparatos que aparecen más frecuentemente afectados a nivel clínico. Del mismo modo, se describen las figuras a observar en algunos estados patológicos.. 2.4. CITOLOGIA ESPECIAL. 2i+.1. Aparato Respiratorio. En Medicina Veterinaria los materiales de las vías respiratorias utilizables con fin diagnóstico y que -.

(33) 19. se pueden obtener antemortem son los exudados nasal y sinusal, la secreción obtenida en el examen de los bronquios en la aspiración transtraqueal y los fluídos que se acumulan por causas sistémicas o a consecuencia de le siones localizadas tales como: pleuritis, falla cardíaca congestiva, neóplasiasy traumas :(2, 28).. Normalmente los exudados y lavados antrales (23) constan de moco y células ciliadas; las secrecio nes bronquiales pueden contener células epitel ¡ales de los bronquios, fagocitos, neutrófilos, linfocitos, mono citos y células plasmáticas. (23).. Del epitelio respi-. ratorio se descaman células caliciformes y células co lumnares ciliadas, las cuales tienen un denso borde cuticular, núcleo redondeado u ovalado y citoplasma vacuo lado. En un raspado de tráquea se observan solamente células cuyas cilias son bien características. Estas células columnares ciliadas, con coloración de Wright, muestran su área perinuclear pl ida y núcleos basales relativamente ovalados. Junto con estas células se pue den encontrar células caliciformes que no poseen cilias.

(34) 20. y su citoplasma esté distendido por una secreción clara; en algunas células la distensión puede deberse a formas aberrantes del núcleo. Existen algunos hallazgos frecuentes, anormales, entre los cuales tenemos las células de indole inflamatoria, fagocitos mononucleares que contienen partículas de polvo, células epiteliales ciliadas multinucleadas y linfocitos en las secreciones pulmonares que a pesar de estar relacionadas con infecciones o neoplasias malignas aún no esté clarificado su significado (23, 28).. Es importante diferenciar las infecciones bacteriales de las reacciones alérgicas, ya que son cuadro similares. En las primeras se encuentran numerosos neutrófilos, mientras que en las segundas el número de eosi nófilos es sensiblemente mayor. En el caso de la acción de irritantes suaves se produce proliferación y desprendimiento de células mesotel iales, las cuales son modera- damente basofílicas, de forma esférica, individualizadas en su mayoría, pero muchas aparecen formando estratos de dos o más células; éstas pueden continuar su multiplica ción en el fluído y ser similares a las células neoplési cas,, pero se diferencian por la poca varia-ción en támañQ.

(35) 21. forma y manera de colocarse. Existe también la posibilidad de confusión con los numerosos macrófagos descamados en una inflamación granulomatosa, pero en este caso las células siempre aparecen independientes, son más abundantes, su citoplasma a menudo contiene vacuolas o detritus celulares fagocitados y las figuras mitóticas son eventua les. (22, 23, 28).. Las células que llevan a más confusión son las de neoplasmas intratorécicas o intraabdominales con las producidas por inflamación de tipo no infeccioso. La des cripción morfológica de una reacción inflamatoria depende del tipo de células que estén presentes en mayor cantidad. Se caracterizan por la presencia de gran número de neutró filos. (PMNs),. linfocitos, células plasmáticas, eosinófi. los, monocitos o macrófagos diferenciados. En una inflamación aguda predominan los neutrófilos, los que pueden estar en un 70?; pueden estar intactos o degenerados, ¡n cluyendo cambios como: hipersegmentación del núcleo, pic nosis, cariolisis, cariorrexis, basofiliayvacuolización del citoplasma. (23).. -.

(36) 22. Estas variaciones no tienen valor cuando se pre sentan sin otros signos. Así, la cariolisis y cariorrexis implican muerte aguda de los neutrófilos y la presencia de una toxina; reacciones degenerativas de este tipo se originan por lo general en una infección bacteria] (23).. La inflamación crónica activa es una reacción en la cual predominan los neutrófilos, pero las células plasrnticas y los monocitos se presentan en número signi ficativo. Es causada generalmente por irritantes suaves y los cambios degenerativos de los neutr6filos se observan con menor frecuencia. Se determina como crónica, si el 50 de las células inflamatorias presentes son de la línea mononuclear o macrófagos, además del componente fibroblstico.. Si hay células epitelloides o células infla. matorias gigantes, el proceso se determina como granuloma toso (22, 23). Las células epitel ¡oides son un tipo de macrófagos maduros, con citoplasma abundante y pálido. Las células inflamatorias gigantes son bastante grandes y multinucleadas; citológicamente son similares a células epitel ioides muy pequeñas; estas dos clases de célu -. las asumen funciones fagocíticas (28)..

(37) 23. Entre las neoplasias malignas que afectan e] aparato respiratorio de los animales se registran las si guientes: Adenocarcinomas productores de moco, localiza dos en los senos paranasales. En consecuencia, se obser van irregularidades en el núcleo y en el citoplasma, notándose una marcada variación en la forma del núcleo y una alteración de la relación núcleo-citoplasma causada por el aumento en el tamaño del núcleo (23, 28).. E] carcinoma epidermoide caracterizado por la presencia de células grandes de núcleo hipercromético. La neoplasia consta de trabéculas sólidas de células que presentan diversos grados de diferenciación a epitelio estratificado escamoso o a células aplanadas. La presen cia de puentes intercelulares y/o queratinización es esencial para el diagnóstico. (22, 23).. El adenocarcinoma broncogénico productor de células de carácter glandular, citoplasma vacuolado, agrupadas en típicos racimos. La infiltración de las cé lulas neoplésicas dentro del alvéolo es moderada (23)..

(38) 2. 2»4.2. Aparato Urinario. Desde el punto de vista clínico patológico las alteraciones del aparato urinario revisten especial impor tancia, sobre todo en caninos adultos.. La muestra indicada es la orina, la cual debe ser recién recolectada y mezclarse con éter para que las células exfoliadas muestren buen detalle cítológico (20, 23). Las células descamadas que aparecen en la orina proceden de la pelvis renal, uréteres, uretra y en menor proporción del parénquima renal. Normalmente se puede obseravar células pequeñas, redondas o notablemente alargadas, los bordes pueden ser irregulares, el núcleo liso o granular, la relación citoplasma/núcleo está siempre dentro de los límites normales. La orina de la hembra contiene células de Va vagina y del vestíbulo que no pueden causar confusión con las del aparato urinario. Las mues tras de orina del macho contienen células de los órganos reproductores accesorios. En las muestras obtenidas con.

(39) 25. catéter suelen verse células multinucleadas, pero esto no es índice de malignidad, sino que se debe a que la introducción de la sonda causa una leve erosión del epitelio. Además,. la disposición de la cromatina causa la. impresión de actividad proliferante, pero no se observan figuras mitóticas. (23, 28).. En lo concerniente a figuras anormales, se tie nen los tumores vesicales de células de trancisión, los cuales liberan células que muestran configuraciones atípicas del núcleo y del citoplasma. La mayoría de las cé lulas del tumor son indiferenciadas, con citoplasma y nú cleo confusos y marcada aglomeración de la cromatina. Las células dentro de un grupo varían mucho en tamaño; algunas células tienen núcleo muy grande, de aspecto punteado debido a la distribución anormal de la cromatina. (23, 33). En cuanto al carcinoma "in situ" de la pelvis renal, de] uréter y de la vejiga, Melamed y colaboradores (citados por Rebar, 28),. halló células de citoplas. ma abundante, núcleos hipércromticos y células bien diferenciadas.. Umiker. (citado por Smith y Dona], 28).

(40) 26. observó que en el carcinoma vesical la exfoliación es muy abundante.. 2.1.3. Aparato Digestivo. A continuación se realiza una breve descripción de las observaciones citol6gicas del aparato digestivo. La mucosa oral es fácilmente evaluable; una muestra normal contiene gran número de células escamosas y una mezcla de población bacteria]. Estas células exhiben varios grados de maduración y cornificación;. las células. jóvenes son redondeadas u ovales, de núcleo central. Las maduras son grandes, romboidales, con abundante citoplasma y núcleo oval central. Se observan células en vía de queratinización, las que presentan núcleo central picnóti co (22). El esófago presenta una citología similar a la de la cavidad oral; de manera diferente, el estómago posee una amplia variedad de células que citológicamente se identifican de la siguiente forma: a). Superficiales,. semejantes a las escamosas del aparato respiratorio pero.

(41) OM. .IWiOTECA AGIA. r. 27. carecen de cHías, secretan moco, son redondeadas, de núcleo central bas6filo, ¡gua] que el citoplasma. b) Principales: son las más importantes productoras de en zimas para la digestión. Tienen formas variables que van desde cuboidales hasta columnares; su núcleo es me tacromtico y su citoplasma granuloso característico. c) Parietales: son células mucho más grandes que las principales, poseen núcleos basales y basófilos, citoplasma eosinofrlico. Estas son las células encargadas de la producción -de ácido clorhídrico. No se encuentran en la porción cardial, ni pilórica del estómago (25, 28).. 2i+J4. Tejido Linfoide y Glandular. De los órganos del cuerpo los más estudiados citológicamente son los ganglios linfáticos, debido a que son de fácil acceso. De ellos se pueden obtener aspirados, impresiones o raspados. En un frotis de ganglio se encuentra una población mixta de linfocitos entre los que sobresalen linfocitos maduros pequeños, con núcleo condensado y citoplasma escaso. Los linfoblastos son.

(42) 28. los más escasos en un ganglio linfático normalmente esti mulado; y nucleolo. estas son células grandes, con núcleo vesicular múltiple; citoplasma abundante y basófilo. con coloración de Wright. Ocasionalmente pueden observarse células plasmáticas, macrófagos y células de Mast. Las tonsilas al igual que los ganglios son accesibles al examen citológ ' ico y las figuras halladas son muy semejan tes a las de un ganglio linfático, con la diferencia de que la tonsila posee un epitelio escamoso y la proporción de células exfoliadas es mayor (23).. -. En este orden de ideas encontramos los órganos glandulares de los cuales se pueden obtener muestras para un diagnóstico satisfactorio, por impresión, raspado o en el caso de las glándulas salivares, por medio de as piración.. La apariencia de todos los tejidos glandula-. res es similar y las células se organizan en forma de cordonesoa manera de patrones acinares.. Individualmen-. te las células son ovoides o cúbicas, los núcleos son uniformes en forma y tamaño; en los grupos de acinos los núcleos son basales. (13, 22, 23, 28)..

(43) 29. El citoplasma de las células glandulares coloreadas intensamente con Wright y Diff Wuik; una excepción es el de algunas células secretoras de moco de las glándulas salivares, el cual es espumoso (23).. 2.4.5. Piel. La piel es el órgano mas grande del cuerpo, el cual presenta problemas para el patólogo, no solamente por la complejidad de sus componentes en varias partes del cuerpo, sino porque presenta diferencias entre especies.. Sus principales funciones guardan relación con la sensibilidad, protección, regulación de la temperatura y de la excreción de agua. Está formada por tres capas principales: epidermis, dermis y tejido sub cutáneo, cada una con estructura y funciones definidas..

(44) 30. El estrato córneo es el mas superficial y está formado de células que han perdido su nuEleo y se han queratinizado;. éstas se transforman en escamas perdién-. dose del todo los límites celulares. En una impresión citológica de piel normal se observan células espinosas organizadas en varias ' capas así como una capa de células altas y cilindroides dispuestas en empalizada.. Entre. las células basales se pueden encontrar algunos melanocitos. La dermis consiste en un estroma de tejido conectivo que contiene vasos sanguíneos, nervios, diversos órganos terminales nerviosos, linfáticos, músculos erectores del pelo y apéndices dérmicos;. el tejido conectivo es-. tá constituído principalmente de fibras colágenas y elásticas. El tejido subcutáneo almacena grasa y sostiene los vasos y nervios que pasan de los tejidos subyacentes al conan. Algunas glándulas sudoríparas y folículos pi losas se extienden hacia esta capa (29)..

(45) 31. 2.5. DIAGNOSTICO CITOLOGICO DIFERENCIAL. Las formaciones neQplSica5 son especialmente analizadas por medios citológicos y el hallazgo de figu ras malignas es la aplicación práctica primordial en el aspecto diagnóstico. Los criterios de malignidad están muy bien definidos y se basan en los estudios realizados por Papanicolaou (22, 23, 28). Se deben diferenciar las neoplasias de las formaciones hiperpisicas de los tejidos, pues las imágenes son semejantes. Las células hiperplsicas exhiben actividad citoplasmética, son inma duras, los núcleos tienen la cromatica un poco irregular mente agrupada y nucleóios prominentes. Los núcleos son de mayor tamaño que los de células normales de la misma línea. Algunos citoplasmas se encuentran aumentados y basófilos lo que demuestra cierto grado de actividad. En la hiperplasia la relación citoplasma núcleo permanece.

(46) 32. constante, siendo esta la principal característica .dife rencial con una neoplasia. (231... El criterio de malignidad más importante se-re fiere a los cambios a nivel del núcleo. Las células malignas muestran variaciones notables en el tamaño de éste, siendo gigantes en unas neoplasias y muy pequeñas en otras; consecuencialmente la relación núcleo/citoplasma sufre severas alteraciones (22).. La membrana nuclear de las células malignas es irregular; los nucleolos son de forma y tamaño variable. Los patrones de cromatina también están alterados presen tndose en ocasiones muy agrupada y en otras, dejando es pacios. Los citoplasmas se observan vacuolados, basofílicos y su forma varía dentro de la misma neoplasia (22, 28).. En segunda instancia se evalúa la presencia de, figuras mitóticas, y sobre todo si hay mitosis anormales lo cual es un hallazgo más significativo (22, 23, 28, 33)..

(47) 33. El tercer criterio de malignidad es estructural. Los neoplasmas se clasifican desde este punto de referencia citológico, en tres clases: Carcinomas, Sarcomas, Neoplasias de células diferentes o misceláneos (23).. Los carcinomas son neoplasias de origen epitelial. Las células exfoliadas pueden encontrarse en gruposo individualmente; su forma es indefinida, predominando las células ovales y redondeadas. En-algunos casos las células se organizan dando la apariencia de conductos, entonces la neoplasia se caracteriza como un ade nocarcinoma. (22, 28, 33).. Los sarcomas son neoplasmas del tejido conecti yo. Divergen de los carcinomas en que no exfolian células con facilidad; la mejor muestra se obtiene por medio de raspado. En este caso las células no se agrupan y son elongadas o en forma de huso (23).. Los neoplasmas "miscelneos' incluyen varios de importancia en Medicina Veterinaria: mastocitoma, tu-.

(48) 34. mor venéreo transmisible, linfoma, tumor mixto mamario. La morfología celular es semejante a la observada en los carcinomas, con la diferencia de que las células no están íntimamente asociadas con la clase de tumor, ni se presentan constantemente de una manera espécial. La for ma de éstas es la divergencia clave con los sarcomas. Pa ra la clasificación, especialmente de esta tercera clase de neoplasias, se debe necesariamente recurrir a la historia clínica, teniendo en cuenta que ningún diagn6stico puede ser confiable si no se han relacionado el mayor nú mero de parámetros (23)..

(49) 3.. MATERIALES Y MET000S. La presente investigación se realizó en el Laboratorio de Histopatología de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia de la Universidad Nacional de Colombia, seccional de Bogotá.. Se practic6 el examen clínico a un número aproximado de 2.000 caninos, desde febrero hasta septiembre de 1982, obteniendo muestras al azar, de las lesiones neoplsicas; ya por resección quirúrgica biopsia o necropsia. En dicho lapso de tiempo se logró reunir un total de 100 muestras.. Las neoplasias fueron coleccionadas en las clínicas que seguidamente se enumeran, discriminando la cia-.

(50) pl. 36. se de muestra obtenida:. -. Clínica de pequeños animales de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia de. la Universidad Nacional de Colombia (Bogotá). Neoplásias obtenidas por resecci6n quirúrgica —. 17. Muestras obtenidas por biopsias. 2. Neoplasias obtenidas por necrop sia. Total. lo. 29. Durante 7 meses -. Centro Nacional de Zoonosis y Control de Rabia (Engativá). Neoplasias obtenidas por necrop sia. 56. Durante 3 meses. -. -. Varios; que incluye: Cirugías a domicilio, muestras proporcionadas por el Labo-. ratorio de Investigaciones Médicas Veterinarias (LIMV),.

(51) 37. Consultorio Clínico Veterinario y Zooclínica. Neoplasias obtenidas por resección quirúrgica. 12. Neoplasias obten-idas por necrop 5 i. Total. 3. 15. Durante 7 meses Para cada uno de los pacientes estudiados se elaboró una historia clínica de la cual se presenta un modelo en el Apéndice 1.. De cada neoplasia se prepararon 4 o 5 láminas porta-objeto, para diagnóstico citol6gico, según técnica descrita por Papanicolau (17) en la modalidad de es tudio de células en bloque, utilizando la preparación de tejidos por contacto. Dicho material se obtuvo de neoplasias y/o de órganos sólidos tales como el hígado, bazo, ganglio linfático, pulmón y pene.. Con cada muestra se realizaron frotis apoyando suavemente la superficie de corte sobre un porta-objeto.

(52) 38. (previamente lavado y desengrasado. Después de tres contactos, se seccionó de nuevo el tejido, para obtener una superficie fresca, con la cual se realizaron tres nuevas impresiones, tomando preferentemente la región central o en su defecto la mas representativa de la neoplasia. (22, 23, 28).. Seguidamente se procedió a la fijación de los frotis, proceso que debe realizarse inmediatamente para evitar la alteración celular cualquiera que sea el origen de las células. Se ha demostrado que el grado de tinción seudoeosinofílica, así como cambios en la forma, en el citoplasma y en e] núcleo de lás células, depende de la duración del secado al aire (28). Con la fijación inmediata sólo el 12 de ellas muestran dichas alterado nes, mientras que si el frotis es secado 15, 30 o 60 segundos antes de la fijación el porcentaje de células alteradas aumenta a un 70, 75 y hasta un 94?. El fijador utilizado fue el Merckofix, pulverizable. Es esta una solución de poligi icoleno en disolventes orgánicos, la. Merck Diagnostica Colombia.

(53) 39. cual mediante una combinación adecuada con un bacterios ttico inhibe el crecimiento de bacterias sobre el mate rial celular, evitando así una citólisisycariolisis -. debida a microorganismos (22, 23, 28).. La técnica de fijación se realizó según la descripción de Meissner (17). A una distancia de apro ximadamente 15 a 20 cm se cubre el frotis uniformemente con una capa de 2 o 3 pulverizaciones. El frotis está listo para colorear en unos 10 minutos.. -. Antes de efectuar la coloración se debe eliminar el exceso de fijador mediante repetida inmersión de la lámina en agua destilada o en alcohol del 50°.. Posteriormente, se procedió a colorear las muestras. Se utilizaron dos coloraciones: Papanicolau y Sed¡ Stain; su composición y técnica de coloración se muestra en el Apéndice 2 y 3.. La coloración de Papanicolau se util iza en Medicina Humana para el diagnóstico del cáncer y el diagnóstico hormonal del ciclo ovárico..

(54) Jo. Consta de tres soluciones*:. -. HematoxHina según Harris, con la cual se obtiene una muy buena coloración die] nú-. cleo y de sus estructuras más finas.. -. Solución de Anaranjado G, a instancias de la cual se obtiene la coloración transpa-. rente del citoplasma.. -. Solución policromaEA3l, en el material ce lular produce una coloración de intensidad. diferente entre el núcleo y el citoplasma en tono azulverde. (17).. El colorante Sed¡-Stain, es utilizado básicamente para el diagnóstico in vitro del sedimento urinario, pero se comprobó que se puede utilizar con algún éxito en la coloración de células. Con este tipo de co ]orante los núcleos tiñen de rojo y los citoplasmas de azul fuerte a violeta.. Merck Diagnostica Colombia..

(55) 41. Además, de cada neoplasia analizada por citología, se obtuvo también una muestra para el estudio his topatológico, la cual fué fijada en formalina tamponada al 109 y luego procesada y coloreada según las técnicas estandarizadas en el laboratorio de histopatología de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia de la Uní vers ¡dad Nacio'nal.. Una vez coloreadas las láminas, se finalizó el proceso con la observación de las mismas en el microscopio de luz a 400X y IOOX. (con aceite de inmersión).. Los diagnósticos se efectuaron con base en la metodología dada por Papanicolaou en 1954 (22) para la interpre tación citológica del cáncer.. Clase 1. Ausencia de células atípicas o anor males.. Clase II. Figuras atípicas o anormales.. Clase 1 1 1. Figuras sugestivas, pero no conclusivas de malignidad.. Clase IV. Figuras muy sugestivas de malignidad.. Clase V. -. Figuras conclusivas de malignidad..

(56) 42. Se utilizó este reporte y no uno más moderno, por ser el que se enmarca de mejor forma en los criterios de la investigación..

(57) 4.. RESULTADOS. De los 100 pacientes ¡ncluídos en-la investigación, 62 fueron machos y 38 hembras, cuyas edades oscila ron entre los 9 meses y los 15 años. La población general presenta el mayor número de casos entre los 6 y los 9 años; para los machos el pico más alto se ubicó entre los 6 y los 7 años, mientras que para las hembras fue entre los 8 y los 9 años. Estos datos pueden observarse en las Figuras 1, 2 y 3.. La neoplasia hallada con mayor frecuencia fue el Tumor Venéreo Transmisible (TVT), comprobándose que un 30 del total de caninos muestreados estaban sufriendo esta afección, lo que equivale a un 48.38 de los.

(58) DISTRIBUCION DE FRECUENCIAS DEL TOTAL DE. FIGURA 1. rrIIÑnç. 1-Al 1 tflflR flflN NJflPI tIAZ. 22 20 18 16 a <14 12 E-10 z. <8 (-) 6 LA VA. 9 12345678 EDAD. 10 11 12131L-15. 16.

(59) FIGURA 2 16. DISTRIBUCION DE FRECUENCIAS EN CANINOS MACHOS flflN NFflPLASIAS. 14 U) LU 1z uJ ulo ouJ o. o. z4 MI. 0123456789101112131415 EDAD.

(60) DISTRIBUCION DE FRECUENCIAS DE CANINOS HEMBRAS CON NEOPLASIAS. FIGURA 3. 10. o8 06 1zL+. (-). 2. 01234567891011 EDAD. 12 13 14 15 16.

(61) 47. pacientes machos estudiados. Así mismo, un 15 se encon tró afectado por carcinomas, de diferentes clases: Broncogénico en una hembra de. 7. años que no presentaba signos. de lesión respiratoria; de células escamosas, en una hembra Pastor Alemán de 8 años; en machos mayores de 6 añós se encontraron carcinomas localizados en las extremidades y en e] pene. En tercer lugar se ubicó el tumor mixto ma mario benigno, con un 12 de presentación (Figura Ii). Al clasificar las lesiones neoplsicas en benignas y mal ignas de acuerdo con las observaciones citol6gicas, se logró una distribución de frecuencias en la cual las lesiones be nignas de mayor presentación fueron: el TVT en estado ini •cial o incipiente, encontrado en el 18°/ del total de casos, correspondiente al 59.9°' de] total de TVT encontrados yal 28.12 de los machos muestreados.. El tumor mixto mamario benigno correspondió a un 9% del total de casos, dentro de un. 552. de los tumores mix. tos mamarios hallados y un 34.37 de las hembras analizadas.. A continuación están: El fibroma, diagnosticado en el. 16.5. de las hembras; el adenoma en - hembras y.

(62) 30. o (ri. o. (-). Z0. u) D —J. -al. a) EIU) cc u)I c .8. C3. ci). E. alo. L. o L () O ci). c —J uJ. cn. cHE alo a t-Ic E o Q. o. o. >. -. o. L.. o o. o x. o E. u). LI) ci). o E o c ci L.. o o. o o E cj) -o <.0. —iL. o. U). o cc U). o. C3. E. O ci) -o. E o a -. U). o. Io. NEOPLASIAS COMPARACION PORCENTUAL DE NEOPLASIAS FIGURA 4.

(63) 19. machos con el 2% de presentación según la distribución de frecuencias. Este mismo porcentaje se encontró para el mixoma, papiloma y tumor de células basales. Menos significativa fue la presencia de] Trichoepitelioma, el cual se diagnosticó en una sola ocasión;. igualmente su-. cedió con la calcinosis circunscripta, la cual es una le sión focalizadade tipo inflamatorio. De la misma forma, se encontró que el TVT en estado avanzado fue la neoplasia maligna más frecuente, hallándose afectados el 20 del total de canFnos muestreados, lo que corresponde al 40.1? de TVT hallado y al 33.88 de los machos estudiados. En segunda instancia estuvieron los carcinomas los cuales se presentaron indistintamente en hembras y machos (Figura 5). En tercer lugar se ubicó el tumor mixto mamario maligno, con una cifra significativa del 8 en el contexto general; 25 de las hembras muestreadas y el 45 de los tumores mixtos mamarios encontrados. En orden descendente se encontraron los adenocarcinomas, de presentación en ambos sexos, en el 6 de los casos estudiados. También se encontraron: Mastocítoma, Astrocitoma, Linfosarcoma, Fibrosarcoma; cada uno en un mrnimo número de pacientes (Figura 6):.

(64) o. c. o. o. 3. C)3. rD. x. U). -D. o. ni. z. o ni. -a o. DE CASOS' w t'). Calcinosis Circunscriptax. Tri ch o e pit e liorna. T.C.Bosa [es. Papiloma. Mix ama. Adenoma. Reacción Crónica de [u piel. Fibroma. D. Mixto Mamario Benigno. T.V.T. Incipiente. °/0. ni. U). o :z >. rn z. cf). c-). U'). CD -D. z. LI). o z ni. cf). m. 01. C). 11.

(65) FIGU[.A 6 20. LESIONES NEOPLASICAS MALIGNAS Tumor Venéreo Transmisible. 16 U) o LID. Carcinomas. L). Mixto Mamario Maligno Adenocarcinomas. uJ. o. Astrocitoma Mastocitornci Li nf os ci rc orn a Fi bro sarcoma. 4. Osteosarcoma TIPO DE NEOPLASIA.

(66) 52. Además se halló en términos porcentuales que las lesiones malignas diagnosticadas fueron superiores en un 9% a las benignas (Tabla i), comprobándose así mismo que un. 5. de los casos analizados correspondían a lesio-. nes inflamatorias, reacciones crónicas de la piel o hiper plasias. En las Tablas 2 y 3, se tabularon las neoplasias por grupos de edad, discriminadas por sexos.. De los pacientes con lesiones neoplsicas el 19°/a presentó signos clínicos secundarios y el 26% mostró alteraciones en los ganglios linfáticos. Se encontró que el 29% de las neoplasias estudiadas estaban encapsuladas (Tabla 0.. En la Figura 7, se muestra la prevalencia de neoplasias, según su distribución topográfica y en la Ta bla 5, la ubicación hemisférica. Consecuentemente con los hallazgos realizados a través de todo el trabajo, se encontró que los sitios del cuerpo más afectados fueron el pene, hallndose ubicados aquí el 35 de las neoplasias estudiadas; en segundo lugar, la glándula mamaria donde se ubicaron el 27% de las neoplasias. Con preva-.

(67) TABLA 1. Patotoga Con¡ no.diQgnosti-. cadas entre febrero y septiembre de 1982 en Bogotá. LESIONES. %. NO NEOPLASICAS. 5. NEOPLASICAS BENIGNAS. 44. NEOPLASICAS MALIGNAS. 51. TOTAL. 100.

(68) TABLA RELACION GRUPOS DE EDAD-NEOPLASIAS EN CANINOS HEMBRAS 'EDÁD 1-3. 4-6. carcinoma de células m mamario maligno escamosas rn. mamario benigno carcinoma indiferen ciado. 7-9 m. mamario benigno mamario maligno. M.. carcinoma mcirncírio. 10-12 m. mamario benigno fibroma adenocarcinomo de gl sublingual. adenocarcinoma m. mamario mamario maligno mixoma. fibroma carcinoma broncogénco. m: mixto gt: ginduta. ostrocitomo. 13-15 m. mamario benigno m. mamario maligno.

(69) TABLA 3 RELACION GRUPOS DE EDAD NEOPLASIAS EN CANINOS MACHOS EDAD 1-3. 4-6. 7-9. 10-12. t.vtX t.v.t carcinoma tv.t •indiferen- incipiente avanzado avanzado ciado tumor de céu[osadenoma de tv.t inicial papiloma gLpurunates basales calcinosis circunscrip osteosarcoma ta fibrosnrcoma. mixoma. linfosarcoma. carcinoma de adenoma de CX escamosas gL parcinales carcinoma indif ere nc icido mastocit oma. X. t y t: tumor venéreo transmisible c: o lukis ql gtndu1a. 13-15 carcinoma indf.erenciado.

(70) FIGURA 7. PREVALENCIA DE NEOPLASIAS EN CANINOS SEGUN DISTRIBUCION TOPOGRAFICA. 3. CD. <2 LiJ. o. LOCAL¡ ZAC ION.

(71) TABLA 4. Porcentaje de ganglios afectados. Signos secundarios y presencia de cpsu1a. o' o. Ganglios afectados. 26. Signos secundarios. 19. Presencia de cápsula. 29. -.

(72) TABLA 5. Zona. Distribuci6n hemisférica de las neoplasias en porcentaje. 1. Izquierda. 23. Derecha. 21. Zona media. 51. Bilaterales. Total. 100.

(73) 59. lencia de menos del lO% se clasificaron las extremidades, la cara, la vagina y el cuello respectivamente. A continuación y con prevalencia del 5 estuvieron: los testícu los, los ganglios, el abdomen y el pulmón; el órgano menos afectado fue el cerebro, el cual presentó una prevalencia del 1°.. En cuanto a la ubicación hemisférica se concluyó que el 512 de las neoplasias se presentaron en la zona media del cuerpo; 23 al lado izquierdo; 21 al lado de recho y. 5. (Tabla 5).. tuvieron presentación bilateral. Se tabularon también los datos con el fin de en contrar en cierto grado la susceptibilidad de las diferen tes razas a las lesiones de tipo neoplsico. Se pudo con cluir que el. 54?. de los pacientes eran de raza criolla;. el 16° Pastor Alemán; el 9% cruce de criollo por Pastor Alemán; el 7 Pastor Collie y seguidamente otras razas -con cifras. porcentuales no significativas. (Tabla 6).. En el Apéndice 3 y 4, se presenta un resumen de los datos básicos de los cuales se derivó el desarrollo de la presente investigación.. -.

(74) TABLA 6 Distribuci6n porcentual de las neoplasias por razas estudiadas en la presente inves tigaci6n. Raza. o o. Criollo. 54. Pastor Aleman. 16. Criollo x Pastor Alemán. 9. Pastor Col 1 ie. 7. Pequines. 3. Mal tes. 3. Dalmata. 2. Otros. 6. Total. loo.

(75) 61. En lo concerniente a los hallazgos citológicos, se presenta la Tabla 7, con la relación de casos según su clasificación citológica. Se catalogaron 39 neoplasias como conclusivas de malignidad, 15 muy sugestivas de malignidad. Las 1+6 restantes se diagnosticaron como benignas, así: 21 mostraron figuras sugestivas de malignidad; 20 presentaron figuras atípicas, pero sin evidencias de malignidad y finalmente en 5 lesiones no se encontró nin guna células anormal.. Así mismo se tabularon los caracteres citológi cos de algunas neoplasias (Tabla 8) y se realizó la descripción de las diferentes lesiones, con base en los hallazgos citológicos de las 100 neoplasias coleccionadas, las cuales se transcriben a continuación.. TUMOR VENEREO TRANSMISIBLE. Esta neoplasia se presentó en dos formas: benigna, en caso de encontrarse en estado incipiente; cuan do macroscópicamente es de color muy pálido y la mucosa peneal tiene un aspecto granulado, hay congestión en la. ri.

(76) TABLA 7. Citología Canina. Diqnósticos realizados entre febrero y septiembre de 1982 en Bogotá. Clasificación Citológica. Número de casos. Clase 1 Ausencia de células atípicas o anormales. 5. Clase II Figuras atípicas pero sin evi dencias de malignidad. - 20. Clase III Figuras sugestivas, pero no conclusivas de malignidad. 21. Clase IV Figuras muy sugestivas de malignidad. 15. Clase V Figuras conclusivas de malignidad. Total. 39. 100.

(77) TABLA 8 CARACTERES CITOLOGICOS DE ALGUNAS NEOPLASIAS ^¡t0(0 -Núcleo Citoplasma NEOPLASIA __________ _____ giaNucleolcs romatina Células t .v.txavanzc )O .410, 4 (ir3. O). m nmaligno pop y mmbenigno popj cccino mas pap y. 1. adenoma papil aden000rcLpap w nomas papiloma pop iii. 4. NUCLEO aumento de tamai'o hiperorornosia • mitosis normal , mitosis anormal O anisokariosis • granular 1 suprpuestos o excentricos. A. 1. 0 .00 A. 0. 0 0 Os A. 4. $ Al. O • A O A. .4. 0$. 0. $. QS. A ¿$. $. 0 o.. e.. CE LUL AS aumento moderado aumento marcado • binuclqdas pmnatipicos o fibroblastos • macrófogos O pleomorfismo . linfoides. 1 o. CROMATINA o normal recogida. $. O D.. 0 1 S. 0. O. °' e 0 O I•t OoR, A e. _________ 0, A. ost eosarco. pap ' —. A.O 000 ma fibrosarco_pap' 0 0004 ma o0— CD i nf osar co.. pop y ma mastocito.. papv o cm A 1 me. t'UCL EOLO inaparente • múltiple p notorio. 0. 0. t.v.t inicial paplil. 1 o 1. o heterocromatino. CITOPLASMA • denso • rugoso A vacuoLado. O contorno irregular • contorno definido O liso .0 ralo — granular t.v.t:tumor venéreo transmisible m.m mixto mamario pap: papani coLaou.

(78) 614. zona que la rodea, pero no hay crecimiento en forma lobular. (Figura8).. Al observar el frotis citol6gico en 1400X,se apre cia un campo homogéneo, donde la célula predominante es epitelial y se encuentra formando un epitelio. La cobra ci6n es normal y no varía dentro del campo.. En cuanto al núcleo de estas células, es granula do; en ocasiones relativamente frecuentes pierde su membrana y su arquitectura encontrándose en su sitio solo cm co o seis gránulos basófilos. Cuando se observan los nucleolos éstos son bastante notorios; de tamañomediano y bas6filos. La cromatina se encuentra recogida en forma de grumos; a veces desaparece o deja espacios claros en el núcleo.. El citoplasma de dichas células es denso, su contorno irregular, pero bien delimitadas.. Individualmente las células son mas o-menos poliédricas y de tamaño mediano. La relación citoplasma.

(79) FIGURA 8. Tumor Venéreo Transmisible de un canino hembra, criollo de 7 años. Obsérvese su apariencia lobular y exudado sanguinolento..

(80) 66. núcleo es normal. Se pueden hallar además otras células tales como: fibroblastos y macrófagos activos.. A esta neoplasia se le clasificó en el grupo Papanicolaou. (22, 28). II o III;. según el grado de de-. formación del contorno celular y el porcentaje de núcleos anormales: La forma maligna del Tumor Venéreo Transmisible, se encontró en casos avanzados del mismo, donde el pene estaba deformado por un crecimiento polipoide de aspecto gelatinoso y :olor fétido (Figura 9). La citología presenta como célula patrón en algunos casos el histiocito (Figura lo), pero en la mayoría es indiferenciada. Los núcleos están bastante aumentados de tamaño, hipercromti cos, de forma y tamaño diferentes, frecuentemente se encuentran superpuestos, mientras que otros se ubican en la periferia de la célula y son granulados. La celularidad por campo se encuentra aumentada. Los nucleólos son ma parentes. La cromatina se presenta en grumos, bandas o formando ángulos.. El citoplasma es denso y vacuolado, se han per dido los límites celulares y no hay ningún patrón de crecimiento..

(81) ,aÇ. t•. ,' ,. •. 1.d,Ç ,;. ._•\ 1. \?. ,iw1ru '.4. •-' /.

(82) UO7A. 0 . • Ch24 q 0'. 'I'. q. 1• * •. '. •. 0. *0 *. •;$ *k4V. i. FIGURA 10. Impresión citológica Histiocitona canino. en la cual se observa pleomorfismo, granuy figuras rnitóti(i) laciones nucleares ( y ). Papanicolaou 29 2 5 X. cas (2)..

(83) 69. -. Se encuentran figuras mitóticas normales y algu nas anormales, este último hallazgo es esporádico, más co mún es encontrar células binucleadas. Otras estructuras observadas fueron fibras colégenas que formaban mallas, donde se encontraban grupos de células malignas, así * como algunos macrófagos. De la misma manera se encontraron linfocitos y pol imorfonucleares. t. •i. /. Se clasificó como Papanicolaou clase V: Malignidad concluyente.. TUMOR MIXTO MAMARIO. Tiene al igual que el Venéreo Transmisible, pre sentación benigna y rna] igna. (Figuras Ii y 12-).. En su forma benigna las observaciones citológicas fueron: células cuyo núcleo es bastante grande en unos casos y muy pequeños en otros, rechazado a la-perife ria y de contorno engrosado. El citoplasma es denso, en varios casos se muestra deteriorado, y en otros un tanto vacuo lado..

(84) 1. FIGURA 11. Tumor Mixto Mamario de un canino hembra, criollo de 9 años de edad; en el cual se observan masas nodulares de diferentes tamaños.. • ,. '. 1•..

(85) ,.,. 7.-. . -.•-. 1. -. Nu. -::. •1. FIGURA 12. Tumor Mixto Mamario del canino de la figura 11. Focos metastsicos en el pulm6n (2). (i) y en el hrgado. -r.-. '•. t1.t.

(86) 72. Es común el hallazgo de tejido conectivo y células de sostén, rodeando las células neoplsicas.. La cromatina se encuentra formando - mallas, de coloración un poco intensa.. Las células-tienen formas variables, oscilando entre ovaladas o alargadas. Otras células observadas fue ron: fibroblastos normales, células plasmáticas y osteo blastos los cuales se organizan en hilera pero sin ningu na estructura que los una.. En ocasiones por hallarse muy mineralizada la muestra, la descamación celular fue escasa.. Esta neoplasia se clasificó como Papanicolaou clase III o W.. En su presentación maligna las. células muestran formas variadas y en algunos casos se disponen en una especie de epitelio de transición. Pero en la mayoría de las veces no siguen ningún patrón de presentación y su.

(87) 73. grado de anaplasia es importante. Los núcleos son hipercromáticos; también se encuentran muchos núcleos aíslados. El citoplasma es escaso y su contorno irregular La. cromatina se. presenta:..::: en forma de ban-. das o ángulos. Además se pueden observar células binucleadas, macrófagos y algunos eritrocitos. Se clasificó esta neoplasia en el grupo IV y V de Papanicolaou, según el grado de anaplasia observado.. A DEN OMA. Neoplasia de tendencia anaplsica marcada. La célula patrón, epitelial.. Se encuentran células ovala-. das o redondeadas, de núcleo doble algunas de ellas; la mayoría poseen núcleo grande e hipercromtico. La relación citoplasma-núcleo alterada por aumento del tamaño del núcleo. La cromatina se encuentra en forma de heterocromat i na.. Los nucleólos son notorios pero únicos.. El citoplasma es denso, de contorno irregular y debridado. Se clasjficó en el grupo Papanicolaou W.. -.

(88) 7!i. CARCINOMA. En las citología de dichos casos llama la atención en primera instancia el gran número de células por campo, lo cual dificulta un poco la observación de sus partes en detalle.. Es el carcinoma una condición de las más anapl sicas encontradas. Los núcleos de las células descamadas varían notablemente en forma y tamaño; o sea que la anisokaryosis es importante. Se ubica casi fuera de la célula, es debridado, hípercromtico, de tamaño mayor que el citoplasma.. La cromatina se presenta en heterocromatina. Los nucleolos son prominentes, múltiples y de variados ta maños.. --. El escaso citoplasma se observa bastante vacuolado; unas veces con una vacuola única amplia y otras con múltiples pequeñas. Su contorno es irregular y en ocasiones la célula pierde sus límites..

(89) 75. Las células son pleomórficas, binucleadas y con cierta frecuencia se encuentran figuras mitóticas.. Se encuentra además tejido intercelular vacuolado, polimorfonucleares atípicos, y una marcada reacción inflamatoria en algunos casos.. Se clasifica en el grupo y de Papanicolaou.. FIBROSARCOMA. Se observan células de núcleo bastante grande, los cuales presentan algunos gránulos oscuros (hallazgo inconstante). Las células son pleomórficas, hay algún grado de anisokaryosis. El citoplasma es escaso, transparente de bordes sinuosos. En algunas células se alarga y contacta con el de las vecinas formando mallas; el contorno celular es difuso.. La cromatina se encuentra en forma de. bandas o grumos (Figura 13)..

(90) ,. '1..t". 4. '•44r. . 0. ). FIGURA 13. Impresión citológica. PreFibrosarcoma. (f) y célusencia de células fusiformes (rn). Palas inflamatorias mononucleares ('1) 5962 X. panicolaou.

(91) 77. Se encontraron algunos fibroblastos, además de unos grupos de células indiferenciadas, de tamaño reduci do cuyo núcleo da la apariencia de estar morulado.. Clasificación citológica: Papanicolaou clase. FI BRÓMA. Las células exfoliadas en esta lesión son escasas.. Se observan células de núcleos excéntricos, de tamaño pequeño, bastante independiente, de forma redondeada, auncuando a veces varía. Los citoplasmas abundan tes son vacuolados.. El aspecto del campo microscópico en LOOXse ho mogéneo. No se encuentran otras estructuras. Se clasificó en el grupo 11 de Papanicolaou..

(92) 78. MIXOMA. Se aprecia un tejido intercelular de aspecto ge latinoso. Las células poseen núcleos redondeados, bien delimitados y de coloración basófi la normal.. El. c'itoplasma es transparente, escaso y su con-. torno abrupto. Poseen nucleolos prominentes, y la cromatina se presenta en forma de eurocromatina, o sea, sin va r iac iones.. Se clasificó esta lesión en el grupo de Papanicolaou clase M.. ADENOCARC 1 NOMAS. La característica principal, es la agrupación de las células a manera de acinos. Las células son de tamaño mediano y grande, bien definido su contorno.. Los núcleos se encuentran con cierta frecuencia en división; son basófilos, periféricos y muestran marca.

(93) 79. do grado de anisokaryosis. Tanto los núcleos como los citoplasmas estén vacuolados. Los hallazgos, enmarcan la le si6n en el grupo V de Papanfcolaou.. ASTROC 1 TOMA. Las 'células exfoliadas en este caso mostraron núcleo hipercromático, prominente por su tamaño y cobraci6n; excéntrico y a veces periférfto; en él se observa ban espacios claros. El citoplasma escaso, claro y de contorno sinuoso. (Figura i').. La cromatina recogida formando algunos pliegues y dejando consecuentemente espacios claros en el núcleo. Predominan células de citoplasma escaso, el cual se alarga en un extremo y se une a la célula más cercana.. Se caracteriza esta neoplasia porque las células se encuentran agrupadas en forma de remolinos (Figura 15).. Se clasific6 en el grupo 111 de Papanicolaou..

(94) -. ---• s.. '•. • •r4 (4. g,.i', .T .. .,. 'k. t1. .-'. l. •: :._.. a. a-. 1. 1. a. tf. . 4. -. •,•. a. 1F2%. ,' , 'l. ti. •,. •j los. •" ir i. FIGURA 14. 1. •. S... e .. •. -. Impresión citológíca de Astrocítorna canino. una masa neoplsica hallada en el seno frontal a la izquierda del plano medio. Células fusiformes, hipercrométicas de citoplasma es caso y contorno sinuoso. Papanicolaou (tiT 3500 X..

(95) .1. FIGURA 15. Mayor detalle de la neoplasia de la figura 14. Obsérvese la disposición de las células en for Papan icolaou (Ii) 4500 X. ma de remolinos..

(96) 82. PAP 1 LOMA. El aspecto general del campo en menor aumento es bastante homogéneo, las células se del imintan nítidamente (Figura 16).. El núcleo de las células descamadas es prominente.. La relación núcleo/citoplasma es 1:2, bien de]¡-. mi tado.. El citoplasma se muestra denso, pero liso.. Se encuentran células basales pleomórficas y algunos restos de queratina.. La cromatina se observa en forma de grumos.. Se clasificó en el grupo 111 de Papanicolaou.. LESION INFLAMATORIA DE LA ENCIA. Se advierte la presencia de sustancia intercelular amorfa, queratina, linfocitos, células plasmótias.

(97) *. .2. Sa. FIGURA 16. Papiloma canino. Impresión citológica. Clulas homogéneas claramente delimitadas (1) y células inflamatorias mononucleares (2). Papa (III) nicolaou 5621 X..

(98) 84. y neutrófilos abundantes. Las células son de tamaño mediano, contorno irregular, núcleo eosinofílico de variadas formas y tamaño.. Clasificación:. Papanicolaou clase 1.. HLPERPLASIA DE LA GLANDULA SUBLINGUAL. Se observan células normales.. Fibroblastos y. células que forman conductos. También se observaron algu nos linfocitos. (Figura 17).. Clasificada en el grupo 1 de Papanicolaou.. TRICHOEPITELIOMA. Se observaron neutrófilos normales y atípicos, así mismo células epiteliales atípicas en su mayoría. Estas células eran de tamaño mediano, citoplasma amplio y liso. Núcleo hipercromtico, excéntrico y en ocasiones periférico..

(99) 11*. •. FIGURA 17. Hiperplasia de la glándula sublingual de un Impresión ci tológica en la canino joven. cual se pueden observar células normales agrupadas en forma de acinos. Papanicolaou 4500 X. (i).