EFICACIA IN VITRO DE LA PASTA MINERAL TRIÓXIDO AGREGADO (MTA) Y DEL CEMENTO PORTLAND PUZOLANICO (CPP) EN EL CRECIMIENTO DE CANDIDA ALBICANS, UNIVERSIDAD CATÓLICA SANTA MARÍA 2014

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(1)UNIVERSIDAD CATÓLICA DE SANTA MARÍA FACULTAD DE ODONTOLOGÍA. “EFICACIA IN VITRO DE LA PASTA MINERAL TRIÓXIDO AGREGADO (MTA) Y DEL CEMENTO PORTLAND PUZOLANICO (CPP) EN EL CRECIMIENTO DE CANDIDA ALBICANS, UNIVERSIDAD CATÓLICA SANTA MARÍA 2014”. Tesis presentada por la Bachiller: IRMA DEL CARMEN ANDIA PAREDES para obtener el Título Profesional de: CIRUJANO DENTISTA. AREQUIPA – PERÚ 2014.

(2) Agradecer a Dios, a la Virgen del Carmen por demostrarme cada día su infinito amor.. A mi familia porque siempre están siguiendo cada pasó que doy, en especial A mis padres Vito y Delmi por apoyarme y siempre impulsarme a ser una mejor persona.. A cada uno de mis docentes grandes doctores que por casualidades de la vida estuvieron dentro de este proyecto brindándome consejos para poder realizarlo.. Y por último pero no menos importante a mis amigos grandes personas que están siempre conmigo, a mi gran compañera Lucero gracias por el apoyo incondicional..

(3) "Incluso un camino sinuoso, difícil, nos puede conducir a la meta, si no lo abandonamos hasta el final.". Paulo Coelho.

(4) ÍNDICE RESUMEN ................................................................................................. 9 ABSTRACT ............................................................................................. 11 INTRODUCCION ..................................................................................... 13. CAPÍTULO I: PLANTEAMIENTO TEÓRICO 1. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN..................................................... 16 1.1. Determinación del problema ........................................................ 16 1.2. Enunciado .................................................................................... 16 1.3. Descripción .................................................................................. 17 1.3.1. Área del conocimiento ........................................................ 17 1.3.2. Análisis u operacionalización de variables.......................... 17 1.3.3. Interrogantes básicas.......................................................... 18 1.3.4. Tipo de investigación .......................................................... 18 1.3.5. Nivel de investigación ......................................................... 18 1.4. Justificación.................................................................................. 18. 2. OBJETIVOS ....................................................................................... 19. 3. MARCO TEÓRICO ............................................................................ 20 3.1. Conceptos básicos ....................................................................... 20 3.1.1. Concepto de cemento ........................................................ 20 3.1.1.1. Cemento portland puzolanico................................. 20 3.1.1.2. Composicion .......................................................... 21 3.1.1.3. Tipos y sus aplicaciones ........................................ 22 3.1.1.4. Propiedades biológicas .......................................... 23 3.1.1.5. Almacenamiento .................................................... 23 3.1.2. Mineral trióxido agregado ................................................... 24 3.1.2.1. Introducción............................................................ 24 3.1.2.2. Concepto ................................................................ 25 3.1.2.3. Indicaciones ........................................................... 25.

(5) 3.1.2.4. Composición .......................................................... 26 3.1.2.5. Comportamiento físico químico .............................. 28 3.1.2.6. Ventajas ................................................................. 28 3.1.2.7. Desventajas ........................................................... 28 3.1.2.8. Contraindicaciones ................................................ 29 3.1.2.9. Precauciones ........................................................ 29 3.1.2.10. Instrucciones de uso ............................................ 30 3.1.2.11. Requisitos ............................................................ 31 3.1.3. Cándida Albicans ................................................................ 32 3.1.3.1. Morfología .............................................................. 32 3.1.3.2. Epidemiologia......................................................... 32 3.1.3.3. Factores que favorecen la candidiasis ................... 34 3.1.3.4. Pruebas diagnósticas de laboratorio ...................... 34 3.1.3.5. Manifestaciones clínicas ........................................ 35 3.1.3.6. Tipos de candidiasis ............................................... 36 3.1.4. pH. ................................................................................... 36. 3.1.4.1. Concepto ............................................................... 36 3.1.4.2. Valores ................................................................... 37 3.1.4.3. pH de los microorganismos .................................... 37 3.1.5. Medida de crecimiento ....................................................... 37 3.1.5.1. Concepto ................................................................ 37 3.2. Antecedentes investigativos ......................................................... 38 4. HIPÓTESIS ....................................................................................... 42. CAPÍTULO II: PLANTEAMIENTO OPERACIONAL 1. TÉCNICAS, INSTRUMENTOS Y MATERIALES DE VERIFICACIÓN 44 1.1. Técnica ........................................................................................ 44 1.2. Instrumentos ................................................................................ 48 1.3. Materiales..................................................................................... 49 2. CAMPO DE VERIFICACIÓN .............................................................. 50 2.1. Ubicación Espacial ....................................................................... 50 2.2. Ubicación Temporal ..................................................................... 50.

(6) 2.3. Unidades de Estudio .................................................................... 50 3. ESTRATEGIA DE RECOLECCIÓN .................................................... 51 3.1. Organización ................................................................................ 51 3.2. Recursos ...................................................................................... 51 3.2.1. Recursos Humanos ............................................................ 51 3.2.2. Recursos Físicos ................................................................ 52 3.2.3. Recursos Económicos ........................................................ 52 3.3. Validación del instrumento ........................................................... 52. CAPÍTULO III: RESULTADOS PROCESAMIENTO, ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS................................................................................... 54 DISCUSIÓN ............................................................................................. 72 CONCLUSIONES .................................................................................... 75 RECOMENDACIONES ............................................................................ 76. BIBLIOGRAFÍA ....................................................................................... 77 HEMEROGRAFÍA ................................................................................... 79 INFORMATOGRAFÍA ............................................................................. 80. ANEXOS ANEXO Nº 1: Modelo del Instrumento .................................................. 82 ANEXO Nº 2: Matriz de Datos ............................................................... 84 ANEXO Nº 3: Secuencia Fotográfica .................................................... 87.

(7) ÍNDICE DE TABLAS. TABLA Nº 1: Medición de pH en tubos de ensayo con cándida albicans y cemento portland a las 24, 48 y 72 horas. ........................ 54 TABLA Nº 2: Medición de pH en tubos de ensayo con cándida albicans y pasta de mineral trioxido agregado a las 24, 48 y 72 horas................................................................................. 56 TABLA Nº 3: Comparación del pH en los tubos de ensayo de cándida albicans con pasta de trioxido mineral agregado y cándida alibicans con cemento portland puzolánico a las 24 horas................................................................................. 58 TABLA Nº 4: Comparación del pH en los tubos de ensayo de cándida albicans con trióxido mineral agregado y cándida albicans con cemento portland puzolánico a las 48 horas. ............. 60 TABLA Nº 5: Comparación del pH en los tubos de ensayo de cándida albicans con pasta de trioxido mineral agregado y cándida albicans con cemento portland puzolánico a las 72 horas.62 TABLA Nº 6: Crecimiento de colonias según diluciones en cemento portland y MTA ................................................................. 64 TABLA Nº 7: Crecimiento unidades formadoras de colonias del primer grupo de diluciones de los cementos MTA y CPP ............ 66 TABLA Nº 8: Crecimiento de unidades formadoras de colonias del segundo grupo de diluciones de los cementos MTA y CPP ..................................................................... 68 TABLA Nº 9: Crecimiento de unidades formadoras de colonias del tercer grupo de diluciones de los cementos MTA y CPP ............ 70.

(8) ÍNDICE DE GRÁFICAS. GRÁFICO Nº 1: Medición de pH en tubos de ensayo con cándida albicans y cemento portland a las 24, 48 y 72 horas. ................. 55 GRÁFICO Nº 2: Medición de pH en tubos de ensayo con cándida albicans y pasta de mineral trioxido agregado a las 24, 48 y 72 horas. ........................................................................... 57 GRÁFICO Nº 3: Comparación del pH en los tubos de ensayo de cándida albicans con pasta de trioxido mineral agregado y cándida albicans con cemento portland puzolánico a las 24 horas. ..................................................................................... 59 GRÁFICO Nº 4: Comparación del pH en los tubos de ensayo de cándida albicans con trioxido mineral agregado y cándida albicans con cemento portland puzolánico a las 48 horas. ........ 61 GRÁFICO Nº 5: Comparación del pH en los tubos de ensayo de cándida albicans con pasta de trioxido mineral agregado y cándida albicans con cemento portland puzolánico a las 72 horas. ..................................................................................... 63 GRÁFICO Nº 6: Crecimiento de colonias según diluciones en cemento portland y MTA ............................................................. 65 GRÁFICO Nº 7: Crecimiento unidades formadoras de colonias del primer grupo de diluciones de los cementos MTA y CPP ........ 67 GRÁFICO Nº 8: Crecimiento de unidades formadoras de colonias del segundo grupo de diluciones de los cementos MTA y CPP ................................................................. 69 GRÁFICO Nº 9: Crecimiento de unidades formadoras de colonias del tercer grupo de diluciones de los cementos MTA y CPP ................................................................... 71.

(9) RESUMEN. El presente trabajo de investigación tiene por objeto comprobar la eficacia de dos cementos Mineral Trióxido Agregado y cemento Portland Puzolanico sobre determinado microorganismo (Candida Albicans ) estos cementos son biocompatibles y utilizados para diferentes tratamientos en la cavidad oral. La cepa utilizada en esta investigación es de Candida Albicans. Se preparó un inoculo de Cándida Albicans según escala 0.5 Mac Farland. Se preparó 100mg de MTA en un tubo de ensayo y 100mg de CPP en otro tubo de ensayo a los que se le colocaron 1ml de agua destilada a cada uno. Se utilizó una micro pipeta y se llenó una batería de seis tubos de ensayo con 1 ml de caldo Brain Heart Infusion (BHI). Mediante la técnica de dilución en tubos se obtuvo concentraciones de 100mg/ml, 50 mg/ml, 25 mg/ml, 12.5 mg/ml, 6.25 mg/ml y 3.125 mg/ml, este procedimiento se realizó tanto para el CPP como para el cemento MTA. A cada tubo se le pasó una tira de papel para medir el pH esto se hizo a las 24, 48 y 72 horas. Se verifico el crecimiento o inhibición de la cepa en placas Petri con Agar Saboraud. Este procedimiento se realizó con cada grupo de cementos en sus respectivas concentraciones. Se llevó a la estufa durante 24 horas para posteriormente analizar los resultados.. Después de todo el procedimiento laboratorial se logró encontrar una gran similitud en la eficacia del cemento MTA y CPP, se encontró que no hay diferencia significativa respecto a su acción pudiendo afirmar que ambos.

(10) cementos tienen efecto inhibiendo el crecimiento de Cándida Albicans a concentraciones de 100,50 y 25 mg/ml.. Palabras claves: Mineral trióxido agregado, cemento portland puzonalico, cándida albicans..

(11) ABSTRACT. This research work aims to verify the effectiveness of two cements, mineral trioxide aggregate (MTA) and Portland cement (CPP) on a particular microorganism (Candida albicans) these cements are biocompatible and used for different treatments in the oral cavity. The strainused in this investigation Is Candida Albicans. An Inoculum of Candida Albicans was prepared according to scale 0.5 Mac Farland 100mg of MTA was prepared in a test tube, and 100mg of CPPY in another test tube to which 1ml of distilled wáter was placed to each one. A micro pipette was used and a battery of six test tubes was filled with 1 ml of BHI broth. Using the technique of dilution tubes, concentrations of 100mg/ml, 50 mg/ml, 25 mg/ml, 12.5 mg/ml, 6.25 mg/ml and 3,125 mg/ml were obtained This procedure was performed for both the CPPY as for the MTA cement. The PH of each tube was measured and using a strip. This was done at 24, 48 and 72 hours. The growth inhibition of ECA in Petri dishes with Agar Saboraud was verified. This procedure was performed with each group of cement in their respective concentrations.The concentrations were kept to the oven for 24 hours and then analyze the results. After all the laboratory results, a great similarity in the effectiveness of the cement and MTA CPP was found..

(12) There is no significant difference regarding to their action and that both cements have effecting inhibiting the growth of Candida Albicans inappropriate concentrations.. Key Words: Mineral trioxide aggregate, portland cement, candida albicans..

(13) INTRODUCCIÓN. Los materiales dentales han sido parte importante en el diario evolucionar de la odontología y gracias a los grandes adelantos tecnológicos y bioquímicos, se ha logrado una generación de nuevos elementos con mejores propiedades físicas, químicas y biológicas. Recientemente un material llamado Mineral Trióxido Agregado (MTA) ha hecho su aparición como un producto innovador principalmente utilizado en el campo de la Endodoncia y Periodoncia. El MTA, es utilizado principalmente en obturaciones retrogradas al realizar apicectomías y como una barrera que aísla y permite la restauración de un diente, cuando se ha hecho una comunicación con el periodonto ante diversos tratamientos odontológicos Es necesario mencionar que el MTA es un derivado del cemento Pórtland y que comparten los mismos componentes principales como el calcio, fosfato y sílice, Así mismo, en cuanto a su manipulación ambos son mezclados con agua, que al evaporarse quedan dentro de la fase sólida. Es por esta razón que observando las similitudes de ambos cementos se decide realizar esta investigación para que quizás en un futuro y con estudios más profundos se pueda utilizar ambos cementos. El presente estudio tiene por objeto comprobar la eficacia in vitro de ambos cementos mineral trióxido agregado (MTA) y cemento Portland Puzolanico (CPP) sobre Cándida Albicans que es considerado un microorganismo frecuente en los tratamientos dentales, ya que el Cándida Albicans es un hongo esta investigación propone comprobar si el MTA y el CPP tienen algún efecto sobre este hongo..

(14) Dicha tesis se ha desarrollado en tres capítulos el primer Capítulo planteamiento. teórico. el. cual. contiene. el. problema. de. la. investigación,objetivos, marco teórico. El segundo capítulo consta del planteamiento operacional que contiene técnica, instrumentos y materiales de verificación, campos, estrategia de recolección. Y por último el tercer capítulo resultados..

(15) CAPÍTULO I PLANTEAMIENTO TEÓRICO.

(16) I. PLANTEAMIENTO TEÓRICO. 1. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN 1.1. Determinación del problema Distintos estudios han comprobado que los cementos Mineral trióxido agregado (MTA) Y Cemento Portland Puzolánico (CPP) tienen. efectos. inhibiendo. el. crecimiento. de. diferentes. microorganismos en tratamientos odontológicos. La eliminación total de diferentes microorganismos en los tratamientos dentales es difícil, por esto es obligación del odontólogo asegurarse de que los diversos materiales que utilizamos para dichos tratamientos tenga un buen efecto sobre los diversos microorganismos que se ubican en la cavidad bucal. Es por eso que esta investigación pretende comprobar la eficacia in vitro de ambos cementos Mineral Trióxido Agregado (MTA) y Cemento Portland Puzolanico (CPP) sobre Candida Albicans que es considerado un microorganismo frecuente en los tratamientos odontológicos, ya que el Candida Albicans es un hongo esta investigación propone comprobar si el MTA y el CPP tienen algún efecto sobre este hongo. 1.2. Enunciado Eficacia in vitro de la pasta Mineral Trióxido Agregado (MTA) y del Cemento Portland Puzolánico (CPP) en el crecimiento de Cándida Albicans, Universidad Católica Santa María 2014..

(17) 1.3. Descripción 1.3.1. Área del conocimiento a. Área General. : Ciencias de la Salud. b. Área Específica. : Odontología. c. Especialidad. : Microbiología. d. Línea o Tópico. : Cándida Albicans.. 1.3.2. Análisis u operacionalización de variables. VARIABLE Variable estimulo I. INDICADORES. SUBINDICADORES. Propiedades. Biocompatibilidad. Propiedades. Actividad. MTA (mineral trióxido agregado) Variable estimulo II. antimicrobiana. CPP (cemento portland puzolanico) pH. Valor de pH: Acido. Variable respuesta :. Básico. Crecimiento de Cándida. Neutro. Albicans Crecimiento de. Conteo de unidades. colonias. formadoras de colonias.

(18) 1.3.3. Interrogantes básicas . ¿Cuál será la eficacia in vitro de la pasta Mineral trióxido Agregado sobre el crecimiento del Cándida Albicans?. . ¿Cuál será la eficacia in vitro del Cemento Portland Puzolanico sobre el crecimiento Cándida Albicans?. . ¿Cuál de los dos cementos presentará mejor efecto inhibiendo el crecimiento in vitro de Cándida Albicans?. 1.3.4. Tipo de investigación De laboratorio 1.3.5. Nivel de investigación Experimental 1.4. Justificación a. Originalidad El tema escogido posee originalidad ya que a pesar de que se reconocen investigaciones previas no se ha desarrollado ningún tipo de investigación con un enfoque igual, que proponga comparar la eficacia de los cementos Mineral Trióxido Agregado y cemento Puzolánico sobre el hongo Cándida Albicans. b. Relevancia.

(19) Esta investigación tiene una relevancia científica y social ya que es importante dar a conocer las características y efectos de la pasta trióxido mineral y del cemento portland sobre la Candida Albicans para que así estos cementos sean utilizados adecuadamente conociendo las ventajas y desventajas que conlleva su uso sobre algunos tratamientos odontológicos. c. Viabilidad Se trata de una investigación viable, puesto que las condiciones de dicho estudio son realizables y a la vez nos dará resultados, conclusiones y recomendaciones.. 2. OBJETIVOS 2.1. Determinar el efecto in vitro del cemento Mineral Trióxido Agregado sobre el crecimiento Candida Albicans. 2.2. Determinar el efecto in vitro de Cemento Portland Puzolanico sobre el crecimiento Candida Albicans. 2.3. Determinar cuál de los dos cementos presentara mejor efecto inhibiendo el crecimiento del Candida Albicans.

(20) 3. MARCO TEÓRICO 3.1. Conceptos Básicos 3.1.1. Concepto de cemento El cemento es un conglomerante formado a partir de una mezcla de caliza y arcilla calcinadas y posteriormente molidas, que tiene la propiedad de endurecerse al contacto con el agua. Hasta este punto la molienda entre estas rocas es llamada clinker, esta se convierte en cemento cuando se le agrega yeso, este le da la propiedad a esta mezcla para que pueda fraguar y endurecerse. Mezclado con agregados pétreos (grava y arena) y agua, crea una mezcla uniforme, maleable y plástica que fragua y se endurece, adquiriendo consistencia pétrea, denominada hormigón (en España, parte de Suramérica y el Caribe hispano) o concreto (en México y parte de Suramérica).1 Se da el nombre de Portland a un cemento obtenido por la mezcla de materiales calcáreos y arcillosos u otros materiales asociados con sílice, alúmina y óxido de hierro, que son Calentados a temperaturas que provocan que se formen escorias.2 3.1.1.1. Cemento Portland Puzolanico El cemento portland Puzolánico es el producto resultante de la adición al cemento portland normal de material puzolánico, en un porcentaje de 15 a 50% Dicha unión puede efectuarse en el estado de clinker, para. 1. http://es.wikipedia.org/wiki/Cemento LEONARDO,M.R. Endodoncia, tratamientos de conductos radiculares, principios técnicos y biológicos Pág. 360 2.

(21) ser molidos conjuntamente, a la fineza adecuada o también directamente con el cemento, antes de sacarlo de la mezcladora.3. 3.1.1.2. Composición Luego del proceso de formación del clinker y la molienda final, se obtienen los siguientes compuestos, establecidos por primera vez por le Chatelier en 1852 y que son los que definen el comportamiento del cemento hidratado y que detallaremos con su fórmula química, abreviatura y nombre corriente. a) Silicato tricálsico: define la resistencia inicial (en la primera semana) y tiene mucha importancia en el calor de hidratación. b) Silicato dicálcico: define la resistencia largo plazo y tiene incidencia en el calor de hidratación. c) Aluminio tricálsico: aisladamente no tiene trascendencia en la resistencia, pero con los silicatos condiciona el fraguado violento actuando como catalizador, por lo que es necesario añadir yeso en el proceso (3%-6%) para controlarlo. Es responsable de la resistencia del cemento los sulfatos ya que al reaccionar con estos produce sulfoaluminatos con propiedades expansivas, por lo que hay que limitar su contenido. d) Aluminio –ferricotetracálcico: tiene trascendencia en la velocidad de hidratación y secundariamente en el calor de la hidratación. e) Oxido de magnesio: pese a ser un componente menor, tiene importancia pues para sus contenidos mayores del 5% trae problemas de expansión en la pasta hidratada y endurecida.. 3. http://www.asocem.org.pe/scmroot/bva/f_doc/cemento/adicionado/cementos_portland_MGC07.P DF.

(22) f) Óxidos de potasio y sodio: tienen importancia para casos especiales de reacciones químicas con ciertos agregados y los solubles en agua contribuyen a producir eflorescencias con agregados calcáreos. g) Óxidos de manganeso y titanio.4 3.1.1.3. Tipos y sus aplicaciones Los tipos de cemento portland que podemos calificar de standard ya que su fabricación esta normada por requisitos específicos. a) Tipo I: de uso general, donde no se requieren propiedades especiales. b) Tipo II: de moderada resistencia a los sulfatos y moderado calor de hidratación. para emplearse en estructuras con ambientes agresivos y/o en vaciados masivos. c) Tipo III: desarrollo rápido de resistencia con elevado calor de hidratación. para uso en clima frio o en los casos en que se necesitan adelantar un servicio de las estructuras. d) Tipo IV: debajo calor de hidratación. Para concreto masivo. e) Tipo V: alta resistencia a los sulfatos para ambientes muy agresivos Cuando a los tres primeros tipos de cemento se les adiciona el sufijo A (p. etipo IA) significa que son cementos a los que se le ha añadido incorporadores de aire en su composición, manteniendo las propiedades originales. Es interesante destacar los cementos denominados ¨mezclado o adicionados¨ dado que alguno de ellos se usan en nuestro medio.. 4. MANLOUK, M.S. & ZANEWSKI, J.P. Materiales para ingeniería civil Pág. 211.

(23) f) Tipo IS: cemento al que se ha añadido entre un 25% a 70% de escoria de altos hornos referido al peso total. g) Tipo ISM: cemento al que se ha añadido menos de 25% de escoria de altos hornos referido al peso total. h) Tipo IP: cemento al que se le ha añadido puzolana en un porcentaje hasta 15% del peso total. i) Tipo IPM: cemento al que se le ha añadido puzolana en un porcentaje hasta 15 % del peso total. Todos estos cementos tiene variantes en que se les añade aire incorporado (sufijo A), se induce resistencia moderada a los sulfatos (sufijo M), o se modera el calor de hidratación (sufijo H). Las. puzolanas. son. materiales. siliceos. y/o. aluminosos,. que. individualmente tienen propiedades aglomerantes caso nulas, pero que finamente molidas y al reaccionar químicamente con hidróxidos de calcio y agua adquieren propiedades cementantes. Las puzolanas se obtienen por lo general de arcillas calcinadas, tierras diatomáceas, tufos y cenizas volcánicas y de residuos industriales como cenizas volátiles, ladrillos pulverizados etc. 3.1.1.4. Propiedades Biológicas . Actividad antimicrobiana. . Mutagenicidad. . Toxicidad. 3.1.1.5. Almacenamiento Esta sustancia es sensible a la acción del agua y a la humedad, para conservar sus propiedades deberá almacenarse en depósitos secos,.

(24) diseñados a prueba de agua adecuadamente ventilados y con instalaciones apropiadas para evitar a la absorción de la humedad.5. 3.1.2. Mineral trióxido agregado 3.1.2.1. Introducción En el inicio de los años 90, Mohamoud Torabinejad desarrolló experimentalmente en la universidad de Loma Linda, california, EE.UU. Un material para endodoncia, denominado mineral trióxido agregado. En 1993 Lee, Monsef, Torabinejad relataron por primera vez, el uso del MTA. en. perforaciones. publicaciones. del. autor. radiculares. realizadas. Después. de. individualmente. numerosas o. con. la. participación de colaboradores, en 1998 la FDA analizó y aprobó el MTA un material de color gris, lanzado comercialmente en 1999 con el nombre pro root MTA por la dentsply/tulsa dental. En 2004 también la dentsply/tulsa dental lanzó el MTA blanco. En Brasil, la industria Angelus soluciones odontológicas (Londrina, PR), comenzó a fabricar en 2001 el MTA brasileño denominado MTA ángelus primero en color gris y posteriormente en 2004 el MTA ángelus blanco. Actualmente el MTA disponible puede ser gris o blanco, siendo que la principal diferencia consiste en que el gris tiene oxido de fierro.. 5. MANLOUK, M.S. & ZANEWSKI, J.P. Materiales para ingeniería civil Pág. 211.

(25) El MTA tuvo muy buena evaluación y demostró ser óptimo sellador endodóntico, capaz de proporcionar excelente sellado de las comunicaciones entre la actividad pulpar y la superficie externa del diente tanto en la corona como en la raíz. Según Torabinejad, el pH inicial del MTA ES DE 10.2, después de 3 horas aumenta a 12.5 y permanece constante. Este elevado PH, próximo al del hidróxido de calcio, estimula la mineralización cuando se utiliza como material de reparación. Los iones de calcio y fosfato constituyentes de los tejidos dentales mineralizados son los principales componentes del MTA factor que influye en el proceso de reparación. El material también tiene excelente biocompatibilidad, siendo bien tolerado por las células y tejidos orgánicos cuando entra en contacto con ellos. El MTA contiene oxido de calcio cuando se mezcla con agua forma el hidróxido de calcio que se disocia en iones de Ca y OH. Los iones de Ca al entrar en contacto con el tejido conjuntivo determinan un área de necrosis y forman dióxido de carbono que al unirse al hidróxido de calcio forma cristales de calcita (carbonato de calcio) que sirven de núcleo de calcificación. La alcalinidad del medio estimula al tejido conjuntivo a segregar una glicoproteína denominada fibronectina, que juntamente con los cristales de calcita,inducen la formación de colágeno tipo I que junto con el calcio promueve la mineralización.6 3.1.2.2. Concepto El MTA es un polvo constituido por finas partículas hidrófilas compuesto principalmente por silicato tricálsico, silicato dicálcico, aluminotricalcico,. 6. Walton R Torabinejad,Endodoncia, Principios y práctica clínica. pag 355.

(26) fierro, aluminio, tetracálcico, oxidotricalcico,sulfato de calcio dihidratado y también oxido de bismuto para dar al material más radiopacidad . 3.1.2.3. Indicaciones . Perforaciones de furca. . Reabsorciones internas, externas y comunicantes. . Cirugía paraendodónditca. . Retrobturación. . Obturación retrograda. . Protección pulpar directa. . Protección pulpar indirecta. . Pulpotomía en dientes con rizogénesis incompleta. . Apicoformaciones. . Material de restauraciones en cavidades de caries7. 3.1.2.4. Composición El MTA es un polvo que consta de partículas finas hidrofílicas que fraguan en presencia de humedad. La hidratación del polvo genera un gel coloidal que forma una estructura dura.. El material MTA está compuesto principalmente por partículas de: . Silicato tricálcico. . Silicato dicálcico. . Aluminato férrico tetracálcico. . Sulfato de calcio dihidratado. . Óxido tricálcico y. . Óxido de silicato. Además de una pequeña cantidad de óxidos minerales, responsables de las propiedades físicas y químicas de este agregado. Se le ha Schartz S. Richard), “Mineral trioxide Aggregate: a new material for endodontics”. P.67-75. 7.

(27) adicionado también óxido de bismuto que le proporciona la radioopacidad.8 3.1.2.5. Comportamiento Físico Químico En contacto con la solución fisiológica forma un gel que solidifica una estructura rígida en 15 minutos.. - pH: El valor del pH inmediatamente después del espatulado es de 12.5, luego empieza a endurecer y por la adición en la composición del polvo de carbonato de Ca. Desciende y se estabiliza en valores alrededor de 10, lo que limita la necrosis superficial del tejido adyacente y permite la actividad de la fosfatasa alcalina. - Radiopacidad: La Radiopacidad del mineral trióxido agregado es superior a la dentina y al tejido óseo, facilitando su visualización en los controles radiográficos. - Tiempo de endurecimiento: El tiempo de endurecimiento inicial es de 10 minutos y el tiempo de endurecimiento final es de 30 minutos, aproximadamente. - Resistencia comprensiva: La resistencia comprensiva luego de 28 días de fraguado es de 70 Mpa .su resistencia es alta y aceptable comparado con otros trióxidos minerales. - Sobreobturación: 8. Miñaga Gomez, M. El Agregado de Trióxido Mineral (MTA) en Endodoncia. p.283-289...

(28) La presencia del material fuera de la cavidad operatoria durante los procedimientos de obturación de perforaciones radiculares, no reviste ninguna importancia clínica debido a su excelente biocompatibilidad .por su rápido endurecimiento evita la toxicidad por dispersión. El pH adecuado y la presencia de carbonato de Ca, que aportaran iones bicarbonato y carbonato ocasionaran ventajosamente el mayor depósito de iones de calcita indispensable en procesos reparativos.9 3.1.2.6. Ventajas . Excelente sellador marginal impidiendo la migración bacteriana y de los fluidos titulares hacia el interior del canal radicular.. . Promoción de cierre biológico de perforaciones radiculares y de furca por la inducción de formación de cemento periradicular.. . Inducción de formación de barrera dentinaria cuando es utilizado sobre la pulpa dental en forma de aplicación directa o indirecta.. . Posibilidad de utilización en zonas con humedad relativa,sin que se modifiquen sus propiedades. A diferencia de otros materiales que exigen un campo operatorio absolutamente seco.. . Estimulación de la fosfatasa alcalina por adecuación de pH, siendo esta la responsable de la reparación ósea y dentinaria.. . Tamaño de partículas adecuado, lo que le confiere especiales propiedades de adherencia.10. 3.1.2.7. Desventajas. 9. Torabinejad M, Hong C, McDonald F, Pitt Ford T. PHysical and chemical properties of a new rootend filling material. P.53. 10 FIGUEROA BANDA,R,A. Tratamientos pulpares en odontopediatría Pág. 132.

(29) . Costo a comparación con otros materiales. . Tiempo de fraguado inicial como final. . Experiencia en la manipulación y aplicación del material. . Tendencia a la deshidratación en un medio seco. . Conservación a la intemperie ya que pierde sus propiedades. 3.1.2.8. Contraindicaciones No se conocen 3.1.2.9. Precauciones . Los. envases. conteniendo. MTA. deben. de. permanecer. correctamente cerrados para evitar su degradación por presencia de humedad. . El material debe ser almacenado en lugares secos.. . El mineral trióxido agregado debe ser colocado en un sitio de aplicación inmediata después de preparado para evitar la deshidratación.. . Evitar la contaminación del material con la saliva durante su aplicación.. . Evitar la exposición al medio bucal, para evitar su contaminación.. . Cerrar el envase inmediatamente después del uso, el material es extremadamente sensible a la humedad.. . El pH ácido de las lesiones endodónticas impide el endurecimiento del mineral trióxido agregado..

(30) . Por lo tanto utilice el producto solamente después de haber controlado la fase aguda de la lesión.. . No utilizar el material sellador endodóntico, ya que en caso de necesitarlo no va a poder ser posible retirarlo de la luz del conducto radicular luego de su endurecimiento.. 3.1.2.10. Instrucciones De Uso . Utilizar el polvo del mineral trióxido agregado en relación 3/1 con la solución fisiológica.. . Haga una desinfección química de la espátula dosificadora en alcohol 70° antes de su uso.. . Espatular el polvo incorporando lentamente al líquido, en una loseta descartable o loseta de vidrio. permitiendo así la hidratación total del polvo y buscando una perfecta homogenización, hasta obtener un cemento de consistencia masillosa.. . Colocar el mineral trióxido agregado en el lugar deseado, utilizando cualquier aplicador de preferencia profesional.. . Se puede añadir líquido para obtener una consistencia más cremosa.. . Anadir demasiado y también poco liquido afectará la consistencia final del MTA.. . El tiempo de fraguado es de 5 minutos.. . Condensar el material con la torunda de algodón estéril en la cavidad..

(31) . Durante procedimientos prolongados proteger el material de la deshidratación con una gasa humedecida en solución fisiológica.11. 3.1.2.11. Requisitos Cuando se utiliza el MTA hay que considerar algunos requisitos: a) La. proporción. polvo-liquido. puede. modificarse. según. la. consistencia que se desea para el cemento y según el lugar donde se colocará. b) Consistencia muy espesa o muy fluida produce un material muy difícil de trabajar. c) Evitar extrusión acentuado del material hacia el periodonto, pues se fraguara antes de la reabsorción. d) Cuando hay riesgo de extrusión, se usa matriz de hidróxido de calcio, sulfato de calcio o colágeno. e) No es necesario colocar sobre el material, en la cámara pulpar o en el conducto, bolitas de algodón humedecidas, pues en el exceso de humedad no permite el fraguado completo del material. Si fuese necesario se coloca sobre el MTA una pasta acuosa de hidróxido de calcio, pero con la cantidad mínima de liquido. f) Evitar dejar material en la cámara pulpar pues puede alterar el color de la corona del diente.. 11. MTA Angelus. “Solucoes en odontología” pag 80-110.

(32) g) Residuo de MTA se remueve de inmediato del interior del conducto donde continuara el tratamiento pues al fraguar resultara muy difícil o imposible de retirar posteriormente. h) Cuando se usa en Retrobturación, el excedente se remueve por medio de cureta o gasa humedecida en suero fisiológico . cuando se realiza la irrigación se puede retirar todo el material, incluso el de la actividad. i) El MTA blanco tiene más plasticidad y facilidad de uso que el MTA gris.12 3.1.3. Cándida Albicans El Cándida Albicans pertenece al reino de los hongos imperfectos, clase: blastomices orden: criptococales, Familia: criptococacea. Es una levadura oval gemante que produce un seudomicelio en cultivo y en los tejidos y exudados. Es miembro de la flora normal de las mucosas, en los sistemas respiratorios, en tales lugares puede ganar dominio y hallarse asociado con otras enfermedades. Algunas veces produce enfermedad general progresiva en enfermos debilitados o con inmunosupresión. Puede producir infección en la sangre, tromboflebitis, endocarditis, o infección en los ojos y otros órganos cuando es introducido por vía intravenosa.13 3.1.3.1. Morfología Levaduras son células redondas u ovales reproduciéndose por gemación, existen más de 200 especies de cándida, algunas forman parte de la flora normal de la cavidad bucal, del tracto digestivo y genitourinario .Muchas de las infecciones son causadas por candida 12. BOTTINO,Marco Antonio .Novas tendencias:Endodontia.pag 90 JAWETZ, Ernest, MELNICK, JosepH. ADELBEG, Edgar A. “microbiologia médica”.pag 319415... 13.

(33) albicans, siendo reconocido como de serotipo A y de actividad de tipo endotoxina.14 Candida Albicans es una levadura gram positiva alargada semejante a hifas (pseudohifas). Son organismos aerobios, levaduriformes, capaces de desarrollar seudofilamentos y producir clamidosporas (tipo espora asexual). Las seudohifas son formadas con brotes que se elongen y continúan conectadas, siendo estas más anchas que las hifas verdaderas, teniendo contriciones en los sitios de unión. Su diámetro varía entre 3.6 micras de diámetro, de forma oval y paredes delgadas. Las hifas tan solo se producen en el momento de invasión a los tejidos, existiendo números estímulos ambientales que desencadenan o bloquean la conversión invitro de la levadura a hifas, desconociéndose la regulación de la morfogénesis de Candida Albicans, en la actualidad no se ha resuelto la relación entre la producción de hifas y virulencia. Es importante la bioenergética de este género ya que en ese proceso se fermenta glucosa y maltosa produciendo ácido y gas, en especial de la sacarosa y no ataca a la lactosa. Estas fermentaciones de los carbohidratos junto a las características morfológicas distinguen a la cándida albicans de las otras especies de candida.15 3.1.3.2. Epidemiología La cavidad bucal constituye un ambiente favorable para la colonización de microorganismos oportunistas como los hongos del género Candida, sin embargo, no resultan ser patógenos debido a que la flora normal. 14. GARCIA RODRIGUEZ, Jose Ange l;PICAZO Juan, Microbiologia Medica General.pag 200 PRADEU DOMINIQUE Uthea, Analisis químicos farmacéuticos de Medicamentos. pag127-131. 15.

(34) bacteriana y el sistema inmunitario limitan su crecimiento y frenan su excesiva proliferación, manteniendo así un equilibrio.16 La candidiasis afecta normalmente las zonas húmedas y cálidas de la piel y las mucosas como las axilas, la boca, uñas, el glande y la vagina; las erupciones cutáneas asociadas con el uso de pañales suelen ser de este tipo. 3.1.3.3. Factores que favorecen la candidiasis . Exceso de azúcar o carbohidratos. . Uso de antibióticos, cortisona y hormonas. . Disminución de secreciones digestivas. . Falta de nutrientes. . Estrés continuo. . Embarazo por el aumento de la progesterona. . Aguas muy doradas 17. 3.1.3.4. Pruebas diagnósticas de laboratorio . Muestras: raspados o hisopados de las lesiones superficiales, exudados. o. materiales. de. catéteres. intravenosos,. líquido. cefalorraquídeo, según la localización del proceso. . Cultivo: en agar sangre se observara un crecimiento de colonias blancas de una levadura con extensiones en forma de seudópodos a partir de los bordes de las colonias. En agar saboraud, se cultivan a temperatura ambiente a 37°c, se desarrollan colonias blandas color cremoso con olor característico, son irregulares, cremosas, opacas.. . 16. Examen al microscopio: se emplea :. Pardi G, Cardozo EI. Algunas consideraciones sobre Candidaalbicans. Acta Odontol Venez. 2002; 40(1):9‐17 17 ABARCA Katia,GARCIA Patricia,VIAL Pablo A. Microbiologia clínica.pag 100-115.

(35) Examen directo: que se hace con KOH al 10% para observar levaduras y seudohifas. Tinción de gram: se observa la presencia de levaduras gran positivas. Prueba del tubo germinativo: se observara la presencia de tubo germinal, un apéndice elongado que crece hacia afuera y que tiene aproximadamente la mitad del ancho y el doble de largo de la célula de la levadura. Auxonograma: la utilización de hidratos de carbono como glucosa, maltosa, sacarosa, galactosa, lactosa y rafinosa; va a permitir la diferenciación entre las distintas especies de candida. Teniendo así para Candida Albicans la degradación de glucosa, maltosa, sacarosa, y galactosa. 3.1.3.5. Manifestaciones Clínicas La candidiasis constituye un grupo de infecciones causada por un hongo oportunista que puede tener expresión cutánea, gastrointestinal, sistema respiratorio y genital, de los cuales Cándida Albicans es la más frecuente. Se puede transmitir por ropa, objetos y también por contacto sexual. Estos hongos están siempre presentes en la piel y en la mucosa del tracto digestivo, genitourinario, y respiratorio de la mayoría de las personas, pero se encuentran controlados por otros microorganismos no patógenos. Cuando se produce un desequilibrio debido a diversos factores como fármacos, trastornos o infecciones por virus como el VIH, de esta manera asume el papel de patógeno y causa manifestaciones clínicas notorios.18 18. KONEMAN,ElmerW;y colaboradores .Diagnostico microbiológico,Quintaedición. Pag 780-799..

(36) 3.1.3.6. Tipos de candidiasis La candidiasis puede producir enfermedades en el nivel superficial y otras profundas. Las primeras afectan la capa cornea de la piel, pelos y uñas; las mucosas (oral, digestiva y vaginal) y semi-mucosas(zonas de contacto entre la piel y la mucosa, por ejemplo en las comisuras de la boca, en la vagina y la región balano prepucial). Las enfermedades que comprometen los órganos nobles se denominan candidiasis profundas o sistémicas.19 . Candidiasis superficiales: La candidiasis oral representa la patología candidiasica más común de las mucosas. La forma clínica más típica es el muguet bucal, que se manifiesta por la aparición de seudomembranas blanquecinas, de color crema y confluentes que puede aparecer en diversos puntos de la cavidad oral. 20. . Candidiasis profundas: Son todas aquellas en las que la enfermedad se manifiesta por debajo de las capas superficiales de la piel (la córnea y la epidermis). En algunos casos, las consecuencias son graves y pueden llevar a la muerte. 21. 3.1.4. pH. 19. JAWETS,E.Microbiologia Medica,pag.560-570 ABARCA Katia,GARCIA Patricia,VIAL Pablo A. Microbiologia clínica .pag100-115 21 GARCIA RODRIGUEZ, JoseAngel;PICAZO Juan, Microbiologia Medica General .pag 199 20.

(37) 3.1.4.1. Concepto El pH es una medida de acidez o alcalinidad de una disolución. El pH indica la concentración de iones hidronio[H3O]+ presentes en determinadas disoluciones. 3.1.4.2. Valores La escala del pH mide qué tan ácida o básica es una sustancia. Varía de 0 a 14. Un pH de 7 es neutro. Si el pH es inferior a 7 es ácido y si es superior a 7 es básico. Cada valor entero de pH por debajo de 7 es diez veces más ácido que el valor siguiente más alto. 22 3.1.4.3. pH de los microorganismos Los diferentes microorganismos a menudo requieren de ambientes distintos, con variadas temperaturas, niveles de oxígeno, luz y acidez o nivel de pH. Algunos microbios crecen más rápidamente en ambientes con valores de pH extremadamente bajos. Estos se llaman acidófilos, debido a su preferencia por ambientes ácidos. Aunque la mayoría de los microorganismos requieren valores de pH neutro para tener un crecimiento óptimo, los microorganismos alcalófilos prefieren baja acidez o un ambiente con pH alto.23 3.1.5. Medida de crecimiento 3.1.5.1. Concepto El crecimiento de una población bacteriana puede ser entendido desde diferentes perspectivas y de acuerdo a éstas se puede llegar a determinar la medida del crecimiento mediante diversas metodologías. Para algunos, el crecimiento es la capacidad para multiplicarse que tienen las células individuales, esto es iniciar y completar una división 22. http://www.epa.gov/acidrain/spanish/measure/pH.html http://www.ehowenespanol.com/tipos-microorganismos-pH-optimo-info_198015/.. 23.

(38) celular, de esta forma, se considera a los microorganismos como partículas discretas y el crecimiento es entendido como un aumento en el número total de partículas bacterianas.24 3.2. Antecedentes investigativos a. Título: Evaluation of antifungal activity of white-colored mineral trioxide aggregate on different strains of Candida albicans in vitro.”J.conserv Dent 2014 may. Autores: Bhardwaj A, Bhardwaj A, Rao N Resumen: El propósito de este estudio fue el de evaluar la acción antimicotica de varias concentraciones del minera blanco trióxido agregado (MTA) ante 7 diferentes bacterias de Candida Albicans usando el tubo de dilución de prueba. Una fresca mezcla del MTA fue preparada en concentraciones de 100, 50, 25, y 12.5 mg/ml y añadida un tubo de ensayo que contenia el medio de Sabouraud’s. Un total de 1287 tubos de ensayo fueron preparados y divididos en grupos de control y experimentales. El producto obtenido de 7 bacterias de C. albicans fueron obtenidos. El inoculo del organismo fue preparado y concentraciones de C albicans fueron tomados y añadidos a los tubos. Todos los tubos fueron incubados a 37° por 1-, 24-, 72-, y 168-h en periodos de tiempo. En cada periodo de tiempo, las presencias de las colonias de C albicans fueron evaluadas. Las diferencias entre los grupos fueron estadísticamente analizados usando las pruebas de Kruskal-Wallis y Mann-Whitney U. Una de las bacterias mostró resistencia aun después de 3 días de bajas concentraciones de MTA de 12.5 y 25 mg/ml. Un crecimiento reapareció con 3 bacterias en concentraciones de MTA de 12.5 mg/ml después d 7 días. Se encontró una significante diferencia entre la bacteria 3 y otras bacterias en concentraciones 24. http://www.microbiologia.com.ar/bacteriologia/fisiologia.pHp?Mostrar=medida.

(39) de MTA 12.5 y 25 mg/ml en un lapso de 3 días y entre los tubos que contenían 12.5 mg/ml y tubos que contenían altas concentraciones de MTA en un periodo de 7 días. El mineral trióxido agregado (MTA) en concentraciones de 100 y 50 mg/ml es efectivo para inhibir el crecimiento de las 7 bacterias probadas de C albicans por periodo mas prolongados que una semana. b. Título: “ Efecto de los Cementos Portland Puzolámico Yura y MTA en la respuesta histológica del tejido conectivo subepitelial en ratas albinas, Arequipa 2005” Autores: Rufo Alberto Figueroa Banda Resumen: El presente trabajo tiene por objetivo comparar las reacciones inflamatorias evaluando la respuesta histológica producida. por. el. MTA,. material. biocompatible. usado. en. perforaciones de canal radicular, reabsorciones internas dentales, cirugías paraendodonticas, como material retro obturador, en pulpotomias, en protecciones pulpares directas, etc., y el cemento de construcción Portland Puzolamico Yura que se utiliza como un material para edificaciones. La idea surgió porque ya se encontraron antecedentes de otros trabajos en otras partes del mundo y que incluso en los antecedentes de la investigación se explica. Se usaron 32 ratas albinas hembras y machos entre 3 a 5 meses con un peso de 150 a 300 gr se dividió cada espécimen en dos partes en la parte ventral derecha se inoculo CPP y en la parte ventral izquierda en un proporción de 0.07gr por cada material diluidos en un cm3 de agua destilada, se conformó 8 grupos cada grupo con 4 especímenes de 1,2,3,37,14,21,30 días posteriormente cada grupo se sacrificó en los tiempos señalados y se procedió a realizar la biopsia.

(40) correspondiente que contenía los cementos, luego se fijó en formol al 10% seguidamente las muestras fueron procesadas mediante la técnica de parafina y coloreadas con hematoxilina y eosina. Luego se hizo la lectura histológica correspondiente encontrándose que hay biocompatibilidad para ambos materiales. Se logró encontrar gran similitud entre el CP y el MTA también se logró identificar q el CPPY provocaba menor reacción inflamatoria que el MTA. c. Título: Análisis comparativo in vitro de la actividad antibacteriana del cemento endodontico mineral trióxido agregado (MTA) ángelus con agua destilada y el mineral trióxido agregado (MTA) ángelus con clorhexidina al 2% sobre el enterococcus faecalis. Arequipa – 2008. Autor: Porras de los Ríos, Samir. Resumen: El presente trabajo de investigación tiene por objeto comparar el efecto antibacteriano del cemento mineral trióxido agregado (MTA) en asociación al gluconato de clorhexidina al 2% y del mineral de trióxido agregado (MTA) asociado al agua destilada sobre la bacteria enterococcus faecalis.Para el estudio se utilizaron 5 placas petri con agar triptosa en las cuales fueron sembradas con e. faecalis (atcc29212), en las cuales se colocó la asociación mineral trióxido agregado (MTA) más gluconato de clorhexidina al 2% y mineral trióxido agregado (MTA) más agua destilada. El cemento fue mezclado según las especificaciones del fabricante y depositados en discos de sensibilidad dentro de nichos preparados, las cuales fueron colocados en las placas petri y almacenados en campanas en ambiente de anaerobiosis, para simular el ambiente en el cual e. faecalis produce la reinfección una vez obturado el conducto. Las medidas de los halos de inhibición fueron analizadas a las 24 horas. Se encontró que la asociación de gluconato de clorhexidina al 2% y del mineral de trióxido agregado (MTA) tuvo el mayor halo de inhibición (promedio 21.4 mm) que el de la asociación.

(41) de mineral trióxido agregado (MTA) asociado al agua destilada (promedio 8.8mm). d. Título: Análisis de la composición química, capacidad desellado apical y propiedades antimicrobianas del MTA y del cemento Portland. Autores: G.A. Obando-Pereda, K.E. Torres-Chávez, H. SalasBeltrán3, J.F. Hofling. Resumen: El MTA es un material cuya materia prima es el cemento portland y es usado para inúmeros procedimientos endodónticos. El objetivo de este trabajo fue de comprobar la semejanza entre el MTA-Angelus y el cemento portland Yura S.A. Para determinar la composición química y la estructura, se analizaron ambos cementos por medio de difracción de rayos-X y microestructura; para el análisis de la capacidad de sellado apical de ambos cementos se empleó la técnica de microfiltración usando como colorante el azul de metileno. Para el análisis de la capacidad antimicrobiana de ambos cementos se utilizaron cepas bacterianas y levaduras orales, observándose la inhibición del crecimiento de los microorganismos y su capacidad microbicida por la observación de agregados microbianos y por turbidez, respectivamente. Todos procedimientos fueron realizados en triplicado. El análisis estadístico empleado para evaluar la microfiltración fue la prueba One-way ANOVA y la prueba T (p< 0,05) y para evaluar la capacidad antimicrobiana se empleó la prueba de Kruskal-Wallis (p< 0,05). Los resultados obtenidos mostraron que el MTA-Angelus y cemento portland Yura S.A. poseen los mismos elementos químicos a excepción del bismuto en el cemento portland; no hubo diferencia en la microfiltración entre el MTA-Angelus y cemento portland Yura S.A.; y, se observó también que ambos cementos tuvieron una gran.

(42) capacidad antimicrobiana. El Cemento Portland Yura S.A. posee características físicas, químicas y antimicrobianas semejantes al MTA-Angelus. 4. HIPÓTESIS Dado que, el cemento Mineral Trióxido Agregado y el cemento Portland Puzolánico poseen un pH alcalino impidiendo a este nivel el crecimiento de microorganismos. Es probable que, ambos cementos impidan el crecimiento invitro de Candida Albicans..

(43) CAPÍTULO II PLANTEAMIENTO OPERACIONAL.

(44) II. PLANTEAMIENTO OPERACIONAL. 1. TÉCNICAS, INSTRUMENTOS Y MATERIALES DE VERIFICACIÓN 1.1. Técnica 1.1.1. Precisión de la técnica TABLA DE TÉCNICAS E INSTRUMENTOS Variables. Técnica. Instrumento. MTA. Observación y medición microbiológica. Ficha laboratorial de recolección de datos. Observación y medición microbiológica. Ficha laboratorial de recolección de datos. (estimulo). CPPY (estimulo). 1.1.2. Procedimiento Esterilización Se esterilizó todo el material placas petri, espátulas, platinas de vidrio, tubos de ensayo, mecheros, probetas, pipetas, matraces, micropipetas, asas de holle, hisopos, gradillas..

(45) Preparación de medios Se pesó 18.5 gramos de caldo BHI en una balanza digital, se midió 500ml de agua destilada en una probeta, el BHI se diluyó en el agua destilada, se agitó y con ayuda de un mechero se calentó hasta obtener una mezcla homogénea en el matraz que se acondicionó con papel platino y se llevó al autoclave a 121°C por un periodo de 15 minutos y 1.5 ATM, pasado este tiempo se guardó la preparación en el refrigerador. Preparación del Agar saboraud Se pesó 16.25 gramos de Agar Saboraund en una balanza digital, se midió 250 ml de agua destilada en una probeta, el Agar Saboraund se diluyó en el agua destilada, se agitó y con ayuda de un mechero se calentó hasta obtener una mezcla homogénea en el matraz que se acondicionó con papel platino y fue llevado al autoclave a 121°C por un periodo de 15 minutos Y 1.5 ATM, pasado este tiempo se procedió a plaquear el Agar en 20 placas petri una vez que las placas estuvieron frías se acondicionaron con papel craf y se guardaron las placas en el refrigerador. Reactivación de la cepa La cepa de Cándida Albicans que será utilizada es ATCC: 90028 La cepa fue inoculada y resuspendida en un tubo de ensayo con 3 ml de caldo BHI, el tubo se selló con papel aluminio y se incubó a 37°C en una estufa de aerobiosis durante 24 horas..

(46) Sembrado de cándida albicans Se traslapó Cándida Albicans, con un hisopo estéril del caldo BHI a la placa con agar saboraud la técnica de siembra fue estría simple. Después se procedió a llevar las dos placas a la estufa de aerobiosis a 37°C durante 24 horas. Preparación del inoculo con cándida albicans según escala 0.5 Mac Farland y lectura a 525 mm lo. Se retiró una colonia de Cándida Albicans de una placa petri. Esta colonia fue llevada a un tubo de ensayo que contenga 3ml de caldo BHI. El tubo fue llevado al espectofotometro y fue comparado con la escala de Mac Farland hasta mostrar resultados iguales. Preparación de cementos Se pesó 100mg de MTA y se agregó a un tubo de ensayo que contenía 1ml de agua destilada. Se pesó 100 mg de CPP y se agregó a un tubo de ensayo que contenía 1ml de agua destilada. Técnica de dilución en tubo Se utilizó una micropipeta y se llenó una batería de seis tubos de ensayo con 1 ml de caldo BHI. Con una micropipeta se llevó 1 ml de Cándida Albicans al primer tubo que va a contener una concentración de 100mg/ml de CPPY y MTA respectivamente..

(47) Técnica de dilución en tubo Se procedió a realizar la técnica de dilución de tubos obteniendo. concentraciones. de. 100mg/ml,. 50mg/ml,. 25mg/ml, 12.5 mg/ml, 6.25mg/ml y 3.125mg/ml, Este procedimiento se realizó tanto para el cemento portland como para el cemento MTA. A cada tubo se le pasó una tira de papel para medir el pH esto se realizó a las 24, 48 y 72 horas. Verificación de crecimiento o inhibición de la cepa en placas petri con agar saboraud En las Placas con Agar Saboraund se trazó una línea dividiéndola en dos mitades cada mitad estuvo destinada a un tubo de MTA y otro tubo de CCP en mismas concentraciones. Este procedimiento se realizó con una asa de holle llevándola al tubo para hacer el sembrado en cada placa. Este procedimiento se realizó con cada grupo de cementos en sus respectivas concentraciones. Es así que se obtuvo un número de 18 placas, que corresponderán a los 3 grupos de muestra. Se llevó a la estufa durante 24 horas para posteriormente analizar los resultados. Los resultados obtenidos fueron analizados estadísticamente.. 1.2. Instrumentos a. Instrumento documental.

(48) Fichas recolección de datos.  pH de cementos. PH 24 horas Tubos. Portland. MTA. PH 48 horas portland. MTA.  Crecimiento de colonias. PLACA DILUSION 1. 100MG/ML. 2. 50MG/ML. 3. 25MG/ML. 4. 12.5/ML. 5. 6.25/ML. 6. 3.12MG/ML. b. Instrumento mecánico. PORTLAND. MTA. PH 72 horas portland. MTA.

(49) . Placas Petri. . Congeladora. . Espátula. . Platina de Vidrio. . Tubos de ensayo. . Mecheros. . Probetas. . Pipetas. . Matraz. . Refrigeradora. . Incubadora. . Autoclave. . Micropipetas. . Cámara fotográfica. . Estándar 0.5 de Mc.farland. . Espectofotometro. . Gradilla tubos de ensayo. . Instrumentos para el procesamiento de datos. . Computadora. . Útiles de escritorio. 1.3. Materiales . Agar Saboraud. . Caldo de BHI. . Cemento Portland. . MTA. 2. CAMPO DE VERIFICACIÓN.

(50) 2.1. Ubicación espacial La investigación se realizó en la ciudad de Arequipa en el laboratorio de la Universidad Católica de Santa María. 2.2. Ubicación temporal La investigación corresponderá al año 2014 con una visión temporal prospectiva, explicable porque recoge información a medida que van ocurriendo los hechos. De otro lado la investigación es de corte longitudinal de los hechos, por cuanto requiere de varias etapas para la observación y de un seguimiento controlado. 2.3. Unidades de estudio Se optó por la alternativa de grupos porque corresponde por derecho a una investigación experimental. Identificación de los grupos: Se precisó por lo tanto de dos grupos experimentales el primero será sometido a mineral trióxido agregado (MTA), y el segundo será sometido a cemento portland puzolanico. Leyenda: zα:constante 1.96 zβ:constante 0.84 p1:eficacia esperada MTA 0.85 p2:eficacia esperada portland 0.45.

(51) 𝑛=. [(𝑧𝛼√2𝑃(1 − 𝑃)) + 𝑍𝛽√𝑃1(1 − 𝑃1) + 𝑃2(1 − 𝑃2)] (𝑃1 − 𝑃2). 2. 2. [(1.96√2(0.65)(1 − 𝑂. 65) + 𝑂. 842√0.85(1 − 0.85) + 0.45(1 − 0.45)] (0.40) 2. 2. n=16 por grupo. 3. ESTRATEGIA DE RECOLECCIÓN DE DATOS 3.1. Organización Antes de realizar el estudio necesitamos lo siguiente: . Autorización del coordinador del laboratorio de la Universidad Católica de Santa María.. . Coordinación con el encargado del laboratorio a utilizar.. . Preparación de las unidades de estudio para la experimentación. . Prueba piloto. 3.2. Recursos 3.2.1. Recursos humanos El grupo de investigación estará constituido por: . Investigadora : Irma del Carmen Andía Paredes. . Asesora. 3.2.2. Recursos físicos. : Dra Ruth Álvarez Monge.

(52) Laboratorio de la universidad Católica de Santa María 3.2.3. Recursos económicos Propios del investigador 3.3. Validación del instrumento Se realizara una investigación preliminar en escala pequeña, dicha investigación se realizara en un grupo de 6 tubos, con las características determinadas anteriormente para juzgar la técnica y la eficacia..

(53) CAPÍTULO III RESULTADOS.

(54) TABLA N° 1 MEDICIÓN DE pH EN TUBOS DE ENSAYO CON CÁNDIDA ALBICANS Y CEMENTO PORTLAND A LAS 24, 48 Y 72 HORAS. 24 horas. 48 horas. 72 horas. pH No. %. No. %. No. %. Total:. 18. 100.0. 18. 100.0. 18. 100.0. Acido. 0. 0. Neutro. 0. 2. 11.1. 5. 27.8. Alcalino. 18. 16. 88.9. 13. 72.2. pH promedio. 9.2. 100.0. 0. 8.9. 8.4. Ji-cuadrado: 6,2>5,99 (p <0,05) Fuente: Propia del investigador. Observamos que el pH promedio con la aplicación de portland disminuye a las 48 y 72 horas. Se encontraron diferencias del pH del cemento a las 24, 48 y 72 horas..

(55) GRAFICO N° 1 MEDICIÓN DEL pH EN TUBOS DE ENSAYO CON CANDIDA ALBICANS YCEMENTO PORTLAND A LAS 24, 48 Y 72 HORAS. 110% 100% 90% 80% 70%. 72,2. 60% 50%. Alcalino. 88,9. Neutro. 100. 40% 30% 20%. 27,8. 10%. 11,1. 0%. 24 horas. 48 horas. Fuente: Propia del investigador. 72 horas.

(56) TABLA N° 2 MEDICIÓN DEL pH EN TUBOS DE ENSAYO CON CANDIDA ALBICANS Y PASTA DE MINERAL TRIÓXIDO AGREGADO A LAS 24, 48 Y 72 HORAS.. 24 horas. 48 horas. 72 horas. pH No. %. No. %. No. %. 18. 100.0. 18. 100.0. 18. 100.0. 1. 5.6. Acido. 0. 0. Neutro. 0. 2. 11.1. 3. 16.7. Alcalino. 18. 16. 88.9. 14. 77.7. pH promedio. 10.2. 100.0. 9.4. 8.9. Ji-cuadrado: 5,3 < 9,49 ( p > 0,05) Fuente: Propia del investigador. Apreciamos, que el pH promedio con la aplicación de MTA, presenta disminución a las 48 y 72 horas..

(57) GRAFICO N° 2 MEDICIÓN DE pH EN TUBOS DE ENSAYO CON CÁNDIDA ALBICANS Y PASTA DE MINERAL TRIÓXIDO AGREGADO A LAS 24, 48 Y 72 HORAS.. 110% 100% 90%. 80% 70%. 77,7 60% 50%. 88,9. Neutro. 100. Acido. 40% 30% 20%. 16,7. 10%. 11,1. 5,6. 0%. 24 horas. Alcalino. 48 horas. Fuente: Propia del investigador. 72 horas.

(58) TABLA N° 3 COMPARACIÓN DEL pH EN LOS TUBOS DE ENSAYO DEL CANDIDA ALBICAS CON PASTA DE TRIÓXIDO MINERAL AGREGADO Y CANDIDA ALBICANS CON CEMENTO PORTLAND PUZOLÁNICO A LAS 24 HORAS.. PORTLAND. MTA. pH No. %. No. %. Total:. 18. 100.0. 18. 100.0. Acido. 0. 0. Neutro. 0. 0. Alcalino. 18. pH promedio. 9.2. 10.2. D. estándar. 0.9. 1.3. 100.0. T Student = 2,68 > 2,03 (. 18. 100.0. p>0,05 ). Fuente: propia del investigador.. Observamos que el PH con la aplicación de Portland a las 24 horas es de 9,2 y con la aplicación de MTA 10,2. No se encontraron diferencias significativas entre los valores promedio de pH con la aplicación de Portland y MTA a las 24 horas..

(59) GRAFICO N° 3 COMPARACIÓN DEL pH EN LOS TUBOS DE ENSAYO DEL CANDIDA ALBICAS CON PASTA DE TRIÓXIDO MINERAL AGREGADO Y CANDIDA ALBICANS CON CEMENTO PORTLAND PUZOLÁNICO A LAS 24 HORAS.. 10,0. 8,0. 6,0. 9,2. 10,2. 4,0. 2,0. 0,0. Portland. Fuente: Propia del investigador. MTA.

(60) TABLA N° 4 COMPARACIÓN DEL pH EN LOS TUBOS DE ENSAYO DEL CANDIDA ALBICAS CON PASTA DE TRIÓXIDO MINERAL AGREGADO Y CANDIDA ALBICANS CON CEMENTO PORTLAND PUZOLÁNICO A LAS 48 HORAS.. PORTLAND. MTA. pH No. %. No. %. Total:. 18. 100.0. 18. 100.0. Acido. 0. Neutro. 2. 11.1. 2. 11.1. Alcalino. 16. 88.9. 16. 88.9. pH promedio. 8.9. 9.4. D. estándar. 1.0. 1.4. 0. t student = 1.23 < 2,03 ( p > 0,05 ) Fuente: Propia del investigador. Podemos ver que el PH a las 48 horas con la aplicacion de Portland fue de 8,9 con MTA 9,4. No se encontraron diferencias significativas entre los valores promedio de PH con la aplicación de Portland y MTA a las 48 horas..


(62) TABLA N° 5 COMPARACIÓN DEL pH EN LOS TUBOS DE ENSAYO DEL CANDIDA ALBICANS CON PASTA DE TRIÓXIDO MINERAL AGREGADO Y CANDIDA ALBICANS CON CEMENTO PORTLAND PUZOLÁNICO A LAS 72 HORAS.. PORTLAND. MTA. pH No. %. No. %. Total:. 18. 100.0. 18. 100.0. Acido. 0. 1. 5.6. Neutro. 5. 27.8. 3. 16.7. Alcalino. 13. 72.2. 14. 77.8. pH promedio. 8.4. D. estándar. 1.1. 8.9 1.4. T Student = 1.19 < 2,03 ( p > 0,05) Fuente: Propia del investigador. Apreciamos que el PH a las 72 horas con la aplicación de Portland fue de 8,4 con MTA 8,9 No se encontraron diferencias significativas entre los valores promedio de pH con la aplicación de Portland y MTA a las 72 horas..


(64) TABLA N° 6 CRECIMIENTO DE COLONIAS SEGÚN DILUCIONES EN CEMENTO PORTLAND Y MTA. Dilución. Portland. MTA. 100 mg/ml. 0. 0. 50 mg/ml. 0. 0. 25 mg/ml. 1. 0. 12.5 mg/ml. 62. 12. 6.25 mg/ml. 264. 178. 3.12 mg/ml. 347. 225. Ji-cuadrado: 16,9 > 7,82 ( p > 0,05) Fuente: propia del investigador. Se puede observar que el crecimiento de colonias es mayor a concentraciones bajas con la aplicación de Portland que Con la aplicación de MTA. No se encontraron diferencias significativas en el crecimiento de colonias a concentraciones altas con la aplicación de Portland y MTA..

(65) GRAFICO N° 6 CRECIMIENTO DE COLONIAS SEGÚN DILUCIONES EN CEMENTO PORTLAND Y MTA. 600. 500 225 400 178 MTA. 300. Portland. 200. 347 12. 264. 100 62 0. 1. 25 mg/ml. 12.5 mg/ml. Fuente: propia del investigador. 6.25 mg/ml. 3.12 mg/ml.

(66) TABLA N° 7 CRECIMIENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS DEL PRIMER GRUPO DE DILUSIONES DE LOS CEMENTOS MTA Y CPP. PORTLAND PLACA. MTA. DILUSION. Total mg/ml. Nº. %. Nº. %. 258. 100.0. 149. 100.0. 1. 100mg/ml. 0. 0. 2. 50mg/ml. 0. 0. 3. 25mg/ml. 0. 0. 4. 12.5/ml. 28. 10.9. 7. 4.7. 5. 6.25/ml. 80. 31.0. 56. 37.6. 6. 3.12mg/ml. 150. 58.1. 86. 57.7. Ji-cuadrado: 5.24 < 5.9 (p> 0,05) Fuente: propia del investigador. Observamos que el 58,1% de colonias con Portland presentaron 150 UFC a una dilución de 3,12mg/ml. El 57,70% de colonias con MTA presentaron 86 UFC a una dilucion de 3,12mg/ml. Las diferencias no son significativas..

(67) GRÁFICO N° 7 CRECIMIENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS DEL PRIMER GRUPO DE DILUCIONES DE LOS CEMENTOS MTA Y CPP. 100%. 80%. 58,1. 57,7 3,12mg/ml. 60%. 6.25mg/ml 12.5mg/ml. 40%. 31,0. 37,6. 20%. 10,9. 4,7. 0%. Portland. Fuente: Propia del investigador. MTA.

(68) TABLA N° 8 CRECIMIENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS DEL SEGUNDO GRUPO DE DILUCIONES DE LOS CEMENTOS MTA Y CPP. PORTLAND PLACA. MTA. DILUCIÓN. Total mg/ml. Nº. %. Nº. %. 221. 100.0. 120. 100.0. 1. 100mg/ml. 0. 0. 2. 50mg/ml. 0. 0. 3. 25mg/ml. 1. 0.5. 0. 4. 12.5/ml. 24. 10.9. 0. 5. 6.25/ml. 96. 43.4. 62. 51.7. 6. 3.12mg/ml. 100. 45.2. 58. 48.3. Ji-cuadrado: 14.9> 7.82 ( p > 0,05) Fuente: Propia del investigador. Observamos que el 45,2% de colonias con Portland presentaron 100 UFC a una dilución de 3,12mg/ml. El 51,7% de colonias con MTA presentaron 62 UFC a una dilución de 6,25 mg/ml. Las diferencias no son significativas..

(69) GRÁFICA N° 8 CRECIMIENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS DEL SEGUNDO GRUPO DE DILUCIONES DE LOS CEMENTOS MTA Y CPP. 100%. 80%. 45,2. 48,3. 3,12mg/ml 6.25mg/ml. 60%. 12.5mg/ml 25mg/ml 40%. 43,4 51,7. 20%. 10,9. 0,5. 0%. Portland. Fuente: Propia del investigador. MTA.

(70) TABLA N° 9 CRECIMIENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS DEL TERCER GRUPO DE DILUCIONES DE LOS CEMENTOS MTA Y CPP. PORTLAND PLACA. MTA. DILUSION. Total mg/ml. Nº. %. Nº. %. 195. 100.0. 146. 100.0. 1. 100mg/ml. 0. 0. 2. 50mg/ml. 0. 0. 3. 25mg/ml. 0. 0. 4. 12.5/ml. 10. 5.1. 5. 3.4. 5. 6.25/ml. 88. 45.1. 60. 41.1. 6. 3.12mg/ml. 97. 49.7. 81. 55.5. Ji-cuadrado: 1.4< 5.9 ( p > 0,05) Fuente: Propia del investigador. Vemos que el 49,7% de colonias con Portland presentaron 97 UFC a una dilución de 3,12mg/ml. El 55,5% de colonias con MTA presentaron 81 UFC a una dilución de 3,12mg/ml..

(71) GRÁFICO N° 9 CRECIMIENTO DE UNIDADES FORMADORAS DE COLONIAS DEL TERCER GRUPO DE DILUCIONES DE LOS CEMENTOS MTA Y CPP. 100%. 80%. 49,7. 55,5 3,12mg/ml. 60%. 6.25mg/ml 12.5mg/ml. 40%. 45,1. 41,1. 20%. 3,4. 5,1 0%. Portland. Fuente: propia del investigador. MTA.

(72) DISCUSIÓN. G.A. Obando-Pereda, K.E. Torres-Chávez, H. Salas-Beltrán, J.F. Hofling. ”Análisis de la composición química, capacidad de sellado apical y propiedades antimicrobianas del MTA y del cemento Portland, 2009”. Analizaron la capacidad antimicrobiana del MTA y del Cemento Portland, utilizaron cepas bacterianas y levaduras orales. Encontraron que ambos cementos tuvieron una gran capacidad antimicrobiana y que el Cemento Portland posee características físicas, químicas y antimicrobianas semejantes al MTA-Ángelus. Observaron la inhibición del crecimiento de los microorganismos y su capacidad microbicida por la observación de agregados microbianos y por turbidez. El efecto del cemento mineral trióxido agregado (MTA) sobre la Candida Albicans demostró, que a las 24 horas mantiene un pH alcalino y que disminuye a las 48 y 72 horas, se mantiene en un pH con valores de 9 y 7. En el crecimiento de unidades formadoras de colonias se demostró que a una mayor concentración de MTA no hay crecimiento de Candida y a medida que la concentración de MTA disminuye aumenta el crecimiento de unidades formadoras de colonias entre siete y ochenta y uno UFC. El efecto del cemento portland sobre Candida Albicans demostró, que el pH a las 24 horas se mantiene un pH alcalino y que disminuye a las 48 y 72 horas,y se mantiene en un pH con valores de 8 y 6 . En el crecimiento de unidades formadoras colonias se demostró que a una mayor concentración de portland no hay crecimiento de Candida Albicans y a medida que la concentración de portland disminuye aumenta el crecimiento de unidades formadoras de colonias entre veinte y cuatro y ciento cincuenta UFC. Rufo Alberto (2005) informa que en el trabajo tiene por objetivo comparar las reacciones inflamatorias evaluando la respuesta histológica producida.