UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERÚ
FACULTAD DE ZOOTECNIA
“PREVALENCIA DE NEOSPOROSIS EN ALPACAS HEMBRAS CON PROBLEMAS REPRODUCTIVOS EN 6 COMUNIDADES
CAMPESINAS DE LA PROVINCIA DE HUANCAVELICA”
TESIS
Presentada por:
BACH. CENCIA DE LA CRUZ, RAFAEL
PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE:
INGENIERO ZOOTECNISTA
HUANCAYO – PERÚ 2007
ASESOR
M.V. M. Sc. Fernando Arauco Villar
Doy infinitas gracias a Dios y a la vida, por el camino recorrido.
El esfuerzo y la dedicación que he puesto en esta tesis, va con mucho cariño a mis padres Félix y
Andrea, cuyo afecto y comprensión ha sido mi inspiración; a mis hermanos, quienes han sido mi
aliciente; a mi compañera, cuyo apoyo ha sido fundamental y a mis mas queridos amigos, pues su
consejo ha sido parte de este esfuerzo.
AGRADECIMIENTOS
Al M.V. M.Sc. Fernando Arauco Villar por el asesoramiento de la presente tesis
Al Ing. Marco Aurelio Arizapana Almonacid, por ser un gran amigo y guía.
A la Empresa Española HIPRA a su representante en el Perú, Dr. Celso Tirado Costa, por apoyar la investigación en camélidos.
A todas las familias altoandinas criadoras de alpacas, por su comprensión.
ÍNDICE
RESUMEN
INTRODUCCIÓN 01
I REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA 03
1.1 Definición 03
1.2 Etiología 03
1.3 Situación en el mundo 04
1.4 Signos clínicos 05
1.5 Epidemiología y ciclo de vida 06
1.6 Perdidas económicas 08
1.7 Patogenia 09
1.8 Respuesta inmune 09
1.9 Diagnostico 11
1.10 Tratamiento y prevención 15
II. MATERIALES Y MÉTODOS 17
2.1 Ubicación y fecha del trabajo experimental 17
2.2 Población en estudio 18
2.3 Muestra 18
2.4 Materiales y equipo 19
2.5 Metodología 20
2.6 Variables 23
2.7 Análisis estadístico 24
III. RESULTADOS Y DISCUSIONES 25
3.1 Seroprevalencia de Neospora caninum en alpacas problema por comunidades 25 3.2 Seroprevalencia de Neospora caninum en alpacas problema por grupo etáreo 28 3.3 Seroprevalencia de N. caninum en alpacas problema por número de abortos 30 3.4 Seroprevalencia de N. caninum en alpacas problema por número de partos 31
IV. CONCLUSIONES 33
V. RECOMENDACIONES 34
VI. BIBLIOGRAFIA 35
ANEXOS
RESUMEN
El objetivo del presente trabajo fue determinar la seroprevalencia de Neospora caninum en alpacas hembra con problemas reproductivos pertenecientes a 06 Comunidades Campesinas de la provincia de Huancavelica. Para tal fin se recolectaron durante los meses de Julio del 2005 a Enero del 2006 muestras de sangre por punción en la vena yugular de 153 animales, de las Comunidades Campesinas: Incañan (n = 22), Orccobamba (n=31), Río de la Virgen (n = 21), Tansiri (n = 26), Tambopata (n = 28) y Tinyaclla (n = 25), mediante la prueba de enzimoinmunoensayo indirecto (ELISA). 1.31 ± 1.81% (2/153) presentó anticuerpos contra el parásito considerándose como un prevalencia baja. En la Comunidad Campesina de Tambopata se presentó una seroprevalencia de 7,14 ± 4,08% (2/28), mientras que en el resto de las Comunidades no existió presencia del parásito, así mismo no hubo diferencias estadísticas significativas entre comunidades (P≤0,05). No se encontraron diferencias significativas entre grupos etáreos, número de abortos y número de partos (P≤0,05). Este estudio confirma la presencia de Neospora caninum en alpacas problema en las Comunidades Campesinas, concluyendo que esta enfermedad no es la causa principal de los abortos presentados.
INTRODUCCIÓN
El aborto en la alpaca es definido como la pérdida del feto desde los 45 días hasta aproximadamente 260 días de edad fetal, constituyendo parte del problema reproductivo en gran parte del Perú. La etiología del aborto es múltiple por lo que su diagnóstico es difícil de establecer y donde los agentes infecciosos sin duda, tienen un importante rol. En el Perú, la ocurrencia del aborto ha venido incrementándose en los últimos años causando preocupación en los ganaderos y el interés de profesionales en identificar el o los agentes etiológicos. Existen agentes infecciosos con tropismo por el feto y/o membranas fetales, parásitos como: Neospora caninum, Tritrichomona fetus y Toxoplasma gondii, las bacterias Brucella sp., Leptospira sp., Campylobacter foetus, causantes de aborto, otros como la E.
coli, Bacillus sp. pueden encontrarse en los fetos abortados pero su responsabilidad en la muerte fetal debe ser interpretado cuidadosamente. Resultados de exámenes microbiológicos en 170 fetos abortados enviados a la Universidad de San Marcos desde 1990 al 2003 indican que un 38.2% de los abortos fueron de origen infeccioso y en el 61.7%
restante no fue posible identificar la causa, cifras que concuerdan con lo reportado mundialmente. De los 38.2% de los abortos con diagnóstico, Neospora caninum, Leptospira, hongos etc, Rivera, H. (2003) La identificación de estos agentes infecciosos en la mayoría de los fetos con diagnóstico sugieren que son los principales causantes de los abortos en los
bovinos lecheros de la cuenca de la Libertad, Lima, Arequipa, a la fecha existen reportes de Neosporosis en la sierra central principalmente a través de la detección y eliminación de los animales portadores del parasito y medidas tendientes disminuir la transmisión horizontal y vertical de la Neospora caninum en los hatos con alta incidencia de abortos.
En el Perú y especialmente en Huancavelica, los Camélidos Sudamericanos, como la alpaca posee una importancia significativa desde el punto de vista socio económico, ecológico, estratégico y social, ya que miles de familias se dedican a la crianza y producción, constituyendo la más importante fuente de sustento e ingreso económico. En relación a los problemas existentes en lo que respecta a los camélidos (alpacas) aparte del aspecto nutricional el reproductivo merma significativamente la producción y la productividad de las alpacas. Es por ello importante realizar la presente investigación, para ver si es que la neosporosis es responsable en cierto grado de los problemas reproductivos de las alpacas, el cual hace suponer la existencia de animales expuestos al parasito en las diferentes comunidades campesinas.
Siendo los objetivos de la presente investigación:
- Determinar la prevalencia de Neospora caninum en alpacas hembra con problemas reproductivos en las Comunidades Campesinas de: Incañan, Orccobamba, Río de la Virgen, Tansiri, Tambopata y Tinyaclla, en relación al número de abortos, número de crías, grupo etáreo y comunidades campesinas.
DEDICATORIA
Doy infinitas gracias a Dios y a la vida, por el camino recorrido.
El esfuerzo y la dedicación que he puesto en esta tesis, va con mucho cariño a mis padres Félix y Andrea, cuyo afecto y comprensión ha sido mi inspiración; a mis hermanos, quienes han sido mi aliciente; a mi compañera, cuyo apoyo ha sido fundamental y a mis mas queridos amigos, pues su
consejo ha sido parte de este esfuerzo.
AGRADECIMIENTOS.
Han colaborado ya sea directa e indirectamente a la elaboración de esta tesis en especial al Ing. Marco Aurelio Arizapana Almonacid, por ser un gran amigo y guía. A la Empresa Española HIPRA a su representante en el Perú, Dr. Celso Tirado Costa, por apoyar los más grandes ideales en la investigación de los camélidos, a todas las familias altoandinas criadoras de alpacas, por su comprensión, y a mi madre, fiel amiga, acompañante y consejera que si no fuera por su sacrificio no estaría en estos momentos.
I. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA
1.1 DEFINICIÓN
La neosporosis es una enfermedad parasitaria que afecta caninos, bovinos, ovinos, caprinos, equinos y ciervos causada por el protozoo Neospora caninum (NC). En la década del 80 fue identificada en perros como causante de encefalomielitis y miositis (Bjerkas I, Mohn SF and Presthus J. (1984). En bovinos, el primer reporte de abortos asociados a NC fue en Nueva México a fines de la misma década. Recientemente se ha descripto otra especie denominada Neospora hughesi causante de meningoencefalitis en equinos (Marsh, et al.,1996).
1.2 ETIOLOGÍA
NC es un protozoo del philum Apicomplexa, familia Sarcocystidae cuyo hospedador definitivo es el perro aunque esta especie puede comportarse también como hospedador intermediario. NC es morfológicamente similar a Toxoplasma gondii y está relacionado a otros protozoos formadores de quistes como Hammondia o Besnoitia, sin embargo fue descrito como una especie distinta en 1988 (Dubey, et al., 1988). Los estadios parasitarios reconocidos son:
encuentran en hospedadores intermediarios, los ooquistes se eliminan en las heces del perro. Los taquizoítos tienen forma de media luna o globular, miden 3 a 7 μm de largo por 1 a 5 μm de ancho. Los quistes titulares son redondos u ovales, miden hasta 107 μm, tienen una gruesa pared y contienen estadios parasitarios de lenta replicación denominados bradizoítos (Dubey, J.P. and Lindsay, D.S. (1996). Ambos, taquizoítos y quistes tisulares son intracelulares.
Los taquizoítos han sido descriptos en neuronas, macrófagos, fibroblastos, células endoteliales, miositos, células renales y hepatocitos ((Dubey, et al., 1988).
Los quistes tisulares, solamente han sido observados en el tejido nervioso sin embargo, se ha descripto el hallazgo de este estadío en el músculo ocular de un potrillo (Lindsay, et al., 1996). Mediante microscopía electrónica de los taquizoítos se reconocen organelas capaces de favorecer la invasión e interacción con el huésped. Así mismo es posible reconocer en los taquizoítos micronemas, roptrias y gránulos densos, siendo su función, el reconocimiento de las células hospedadoras e interacción metabólica, respectivamente (Dubey JP, 1993).
Por último, los ooquistes eliminados en las heces del hospedador definitivo son esféricos o subesféricos, miden 10 a 11 μm y contienen dos esporocistos con cuatro esporozoítos cada uno (Mc Allister, et al., 1998).
1.3. SITUACIÓN EN EL MUNDO
La enfermedad está ampliamente distribuida informándose su presencia en Africa, América, Eurasia y Oceanía. Aunque la neosporosis fue descripta hace dos décadas atrás, los avances en el conocimiento han sido satisfactorios quedando por investigarse numerosos aspectos relacionados a la prevención y control. También es motivo de investigación la frecuencia natural de la transmisión postnatal en el bovino o existencia de otras especies de hábitos
carnívoros que pudiesen comportarse como hospedadores definitivos de la enfermedad (McAllister, et al., 2000).
Estudios en el Perú
(Moya, et al., 2003) en Melgar, Puno determino una prevalencia 16.7 ± 4.4 % (46/275) a una dilución de 1:50, no se encontraron diferencias significativas entre grupos etáreos (p>0.05). confirmando la presencia de Neospora caninum en llamas hembras de la provincia de Melgar, Puno.
1.4. SIGNOS CLÍNICOS
En vacas adultas, NC ocasiona abortos entre el tercer mes hasta el final de la gestación, aunque más frecuentemente ocurre entre el quinto y sexto mes (Anderson, et al., 1991). Se desconoce si NC ocasiona pérdidas tempranas de preñez, sin embargo, se ha descrito que mientras vacas seronegativas a la enfermedad, reciben 1.7 dosis inseminantes para quedar preñadas, las vacas seropositivas necesitaron 2.2 dosis de semen. Así mismo, existen evidencias que vacas serorreactoras a NC son eliminadas anticipadamente por presentar una bajo desempeño reproductivo ((Thurmond y Hietala, 1996).
El aborto puede producirse en pocas vacas o involucrar hasta el 30% de los animales en un rodeo (Dubey, JP., 1999). Las vacas con anticuerpos a NC tienen mayor riesgo de abortar que aquellas seronegativas al parásito. El feto muerto en el útero puede ser reabsorbido, momificarse, o expulsarse con avanzado grado de autólisis. Más comúnmente acontece el nacimiento del ternero clínicamente normal pero crónicamente infectado. Aunque no es patognomónico, la momificación es un hallazgo frecuente habiéndose descripto en casos naturales y experimentales. Los terneros infectados en el útero pueden tener signos neurológicos y bajo peso al nacimiento (Dubey J.P, y Lindsay, 1996). El examen
clínico puede revelar ataxia, disminución del reflejo patelar o falta de sensibilidad propioceptiva, sin embargo son escasos los trabajos que describan esta presentación de la enfermedad en neonatos. Eventualmente pueden presentarse anormalidades congénitas como exoftalmia o asimetría ocular (Campero, C.M., et al.,1998).
1.5. EPIDEMIOLOGÍA Y CICLO DE VIDA
La enfermedad ha sido informada en Europa, África, Australia, Nueva Zelanda y América. En bovinos, la neosporosis afecta tanto razas para leche como para carne resultando expuestos el 100% de los rodeos (Dubey, J.P. and Lindsay, D.S. (1996). Sin embargo, son escasos los informes de abortos por NC en rodeos para carne.
La principal vía de contagio en bovinos es transplacentaria de madre a hijo (Paré, J., Thurmond, M.C. y Hietala, S. (1997). En los bovinos, un bajo porcentaje puede sufrir seroconversión debido probablemente a una exposición postnatal. En el postparto o tras el aborto, la placenta con presencia de taquizoítos (Shivaprassad et al., 1989) podría servir como fuente de infección para otra vaca que la ingiera.
Aunque los ooquistes presentes en las heces de perros infectados pueden ser infectivos a las 24 hs de ser eliminados, la infección oral en terneros sólo se ha descripto en forma experimental (De Marez, T. et al.,1999). Suponiendo que los ooquistes pueden contaminar el agua y comida de los hospedadores intermediarios, es aún desconocida la frecuencia con que ocurre este hecho en la naturaleza. Recientes trabajos han demostrado que la proporción de bovinos seropositivos aumenta cuando existen perros en los establecimientos (Wouda, W., et al.,1999). En caninos se ha encontrando un incremento de la seroprevalencia relacionada con la edad siendo ineficiente la transmisión vertical en esta especie (Barber, J.S. y Trees, A.J.1998). Así mismo, la seroprevalencia a
NC es mayor en caninos pertenecientes a zonas rurales que aquella descripta para perros de áreas urbanas probablemente debido a la estrecha relación epidemiológica existente entre esta especie y los bovinos ((Wouda, W., et al.,1999). Un reciente trabajo experimental cuestiona la frecuencia con la cual los perros pueden adquirir la infección en la naturaleza (Bergeron, N., et al., 2001).
En dicho trabajo, nueve perros de 2 a 4 años de edad fueron alimentados con fetos bovinos naturalmente infectados con NC, sin embargo los cánidos no eliminaron ooquistes en la materia fecal resultando nula la evidencia clínica, serológica, o histopatológica a NC. Evaluando la existencia de taquizoítos de NC en placentas de vacas seropositivas que parieron terneros clínicamente normales, se encontró por la técnica de reacción de la polimerasa en cadena (PCR) que 2/16 especímenes resultaron positivos. Este hecho demostraría que la infección de perros a partir de placentas procedentes de vacas infectadas es muy baja. Aunque permanece aún sin conocerse el rol epidemiológico de cánidos salvajes u otros hospedadores, incluidas las aves, existen evidencias de exposición a NC natural y experimentalmente en estas especies (McGuire, A.M., et al., (1999).
(Waldner, C.L., 1998) describe en Canadá una seroprevalencia a NC que varió del 16 a 27% en 8 rodeos para carne. (Quintanilla-Gozalo et al.,1999). en España, hallaron una seroprevalencia a NC del 18% en los 1712 sueros evaluados, resultando positivos 119/ 216 (55.1%) rodeos para carne. El cuadro 1 resume el número de rodeos para carne expuestos a NC y la técnica serológica empleada según país y autor.
Cuadro 1.1. Prevalencia de Neospora caninum en rodeos para carne
País/región Rodeos
pos total % Rodeos
positivos Categoría Autor y técnica USA
Canadá
Argentina (Corrientes) España
Argentina (Buenos Aires) Argentina (La Rioja)
55/55 8/8 86/120 119/216 9/17 2/31
100 100 71,7 55,1 52,9 16,1
Vaca Vaca Ternero Vaca Vaca Vaca
Sanderson et al. 2000, ELISAc Waldner et al. 1998. ELISA Moore et al. 2000, IFI Quintanilla et al. 1999, ELISA Moore et al., IFI (no publicado) Moore et al., IFI (no publicado) 1.6. PÉRDIDAS ECONÓMICAS
NC es reconocida como agente causal de importantes pérdidas económicas en la industria de la carne y leche (McAllister, M.M., et al., 2000). En Inglaterra se considera que se producen 6000 abortos anuales debido a NC y asignádole un a pérdida de $800 por cada aborto, se pierden aproximadamente 4.8 millones de dólares. En California, EEUU las pérdidas anuales serían de 35 millones de dólares y en Australia 85 millones de dólares en la industria lechera y 25 millones de dólares para la producción de carne (Brittain, R. 2000).
1.7. PATOGENIA
Aunque la patogenia de NC en el bovino es parcialmente conocida, se cree que posterior a la ingestión de ooquistes, los esporozoítos liberados en la luz intestinal son capaces de atravesar la barrera intestinal y acceder a los tejidos vía el sistema linfático y sanguíneo. En las células huésped infectadas, se inicia el proceso de multiplicación mediante endodiogenia pudiendo el parásito ocasionar daño celular con necrosis e inflamación, o formar quistes tisulares capaces de persistir durante toda la vida del animal. Los bradizoítos alojados en los quistes tisulares del SNC de una hembra bovina gestante pueden reactivarse bajo ciertas influencias hormonales e inmunológicas originando parasitemia. (Stenlund, S., et al., 1999).
Luego de esta difusión hematógena, los taquizoítos atraviesan la placenta ocasionando, de acuerdo a la edad de gestación, la muerte del feto o el nacimiento de un ternero congénitamente infectado. Aunque se ha estimado que transcurren 3 – 4 semanas entre la infección y el aborto, la finalización de la gestación puede concluir con el nacimiento de un ternero que en caso de ser hembra, transmitirá la enfermedad a su descendencia o tendrá riesgo de abortar (Thurmond, M.C., Hietala, S. y Blanchard P.C., 1997).
1.8. RESPUESTA INMUNE
En hembras bovinas congénitamente infectadas decrece el riesgo de aborto en preñeces subsiguientes, sugieriendo cierto grado de protección fetal debido a presencia de una inmunorespuesta materna. La inmunidad mediada por células (IMC) desempeña un papel importante en infecciones a NC por ser este un organismo endocelular. Demostraron que el tratamiento de fibroblastos con interferón (IFN γ) recombinante causa una significativa inhibición de la
Ante la estimulación con antígeno de NC lisado, las células mononucleares de sangre periférica (CMSP) de bovinos infectados proliferaron y produjeron IFN γ (Lunden, A., et al., 1998). Sin embargo, las correlaciones entre la respuesta inmune con la resistencia a la infección, la prevención de la transmisión congénita y el aborto en el bovino, no han sido determinadas. La IMC que involucra a los linfocitos T ayudantes con la producción de IFN γ, IL - 12 e IL - 2 está asociada a la resistencia a T. gondii, describiéndose así mismo, el hallazgo de una respuesta linfoproliferativa in vitro y producción de IFN γ en CMSP obtenidos de vaquillonas vacías inoculadas con taquizoítos de NC inactivados o vivos (Andrianarivo, et al.,(1999). Similarmente, tras la infección oral de terneros con ooquistes de NC obtenidos a partir de la materia fecal de perros, se observó una significativa respuesta IMC
Estudios realizados por (Andrianarivo et al. 1999) en fetos bovinos infectados experimentalmente con NC a los 159 y 169 días de gestación, evidenciaron el desarrollo de una respuesta humoral a NC detectados por IFI aunque la IMC determinada por pruebas de linfoproliferación y producción de IFN γ fue variable entre los fetos. En dicho trabajo, ambas respuestas, humoral y celular, no fueron suficientes para impedir la infección fetal en ninguno de los animales, ni tampoco existió correlación entre la respuesta celular y la severidad de las lesiones fetales.
El tipo de respuesta inmune celular generada determina la producción de Igs.
Una respuesta celular tipo1 estimula la producción de IgG2 mientras que una respuesta celular tipo 2 regula, mediante la secreción de IL4, la producción de IgG1 (118), encontraron que la producción de citoquinas e IFN γ estuvo asociada a una respuesta celular tipo 1 en 4 de los 5 fetos en estudio. Sin embargo, una respuesta predominantemente tipo 2 fue indicada por la presencia
de IgG1 específica a NC. Se sugiere que un desbalance entre las respuestas celulares 1 y 2, a favor de la tipo 2, con producción de IL4, ocurrió en los fetos abortados, lo cual pudo haber afectado su capacidad de sobreponerse y resolver la infección ((Andrianarivo et al. 1999).
1.9. DIAGNÓSTICO
a. Pruebas serológicas
La identificación de anticuerpos a NC en un animal es indicativa de exposición al protozoo (Dubey, J.P., (1999). Diversas pruebas serológicas tales como: inmunofluorescencia indirecta (IFI), el enzima inmuno ensayo (ELISA) y la microaglutinación (MA) han sido utilizadas para demostrar anticuerpos en el suero o en el fluido corporal de fetos.
- Inmunofluorescencia Indirecta
La IFI preserva la morfología del parásito y detecta antígenos de membrana no existiendo reacción cruzada con Sarcocystis spp. Para diluciones séricas de 1:25 a 1:640, la sensibilidad y especificidad de la prueba varía de 82.4 a 97 % y 85.7 a 90 % respectivamente. Sin embargo, se ha sugerido utilizar una dilución de 1:200 para maximizar la sensibilidad (Atkinson, R., et al., 2000). Un reciente trabajo realizado por (Venturini M.C. et al. (1999) describe la dificultad de encontrar sueros verdaderamente negativos mediante pruebas serológicas de IFI, MA y ELISA, proponiéndose una dilución sérica de 1:25 para demostrar la exposición a NC.
- Enzimoinmunoensayo
El ELISA ha sido ampliamente utilizado en el serodiagnóstico de la neosporosis. La facilidad para procesar un gran número de muestras,
la obtención de una sensibilidad y especificidad superiores a las obtenidas con la IFI, sumado a la falta de subjetividad cuando se debe emitir un resultado, hacen confiable a esta prueba (Paré, J., et al.,1997).
El título de corte o el valor de absorbancia asignado a una prueba es motivo de controversia ya que depende de factores tales como composición del antígeno, anticuerpos identificados y de los conjugados utilizados. Un determinado título o valor de corte debería ajustarse a cada circunstancia o situación epidemiológica (Dubey, J.P., et al., 1997). La utilización de antígenos solubles obtenidos por destrucción del parásito al sonicar o congelar y descongelar, disminuye la específicidad de la prueba, resultando seropositivos a NC terneros experimentalmente inoculados con Sarcocystis spp. (Dubey, J.P. and Lindsay, D.S. (1996). También, se ha detectado reacción cruzada entre NC y Toxoplasma gondii.
Empleando extractos de proteínas a partir de taquizoítos que fueron incluidos en complejos inmunoestimuladores, se incrementó la especificidad del ELISA, lográndose así, disminuir el número de proteínas intracelulares causantes de uniones inespecíficas o reacciones cruzadas (Björkman, C., Holmdahl, O.J.M., Uggla, A.
(1997). La especificidad de la prueba fue también incrementada por la utilización de un ELISA de competición que caracterizó anticuerpos monoclonales reaccionantes con antígenos inmunodominantes de 65kDa (Baszler, T.V., et al., 1996).
- Microaglutinación
La microaglutinación es una prueba serológica relevante en el diagnóstico de la neosporosis. No requiere conjugados de difícil adquisición y permite analizar sueros de varias especies simultáneamente. Tiene alta repetibilidad entre operarios, es barata, de fácil lectura, utiliza poco equipamiento y materiales (Romand, S., et al., 1998).
Aunque la técnica descripta por Romand destruye la Ig M por utilización del 2 – mercaptoetanol, la temprana aparición de la Ig G en la neosporosis bovina permite la utilización de esta prueba en el diagnóstico serológico. Sobre 67 sueros con títulos menores a 1:25 por IFI, 56 fueron negativos y 11 resultaron positivos a la microaglutinación utilizando una dilución de 1:40 (Venturini, M.C., 1999). Comparándose la técnica de microaglutinación e IFI, la sensibilidad y la especificidad que se obtuvo fue 100% vs. 98% y 97% vs. 99% respectivamente.
b. Microscopía óptica
La histopatología sobre tejidos bovinos fetales resulta una técnica diagnóstica relevante en las infecciones a NC. Aunque son citados en la literatura casos esporádicos de abortos en bovinos por protozoos con hallazgos histopatológicos de meningoencefalitis necrotizante multifocal (MENM), miocarditis, miositis, nefritis, hepatitis, neumonía, adrenalitis y placentitas no supurativas (Shivaprasad, H.L., Ely, R., Dubey, J.P. (1989).
Sin embargo, existen reportes de fetos experimentalmente infectados con lesiones compatibles que no abortaron, (Barr, B.C., et al., 1994) y nacieron sin signos de neosporosis. En casos naturales de aborto a NC en bovinos,
et al. 1998) describiéndose que la corteza cerebral y el cerebelo fetal resultaron las regiones más comúnmente afectadas. Este aspecto es relevante a los fines de adecuar el muestreo del encéfalo fetal para los análisis histopatológicos e inmunohistoquímicos.
c. Inmunohistoquímica
La inmunohistoquímica (IHQ) realizada sobre tejidos fetales formolados con lesiones histopatológicas compatibles, permite la identificación de NC con alta especificidad, adquiriendo valor diagnóstico relevante. Aunque su sensibilidad es baja, probablemente debido a los escasos parásitos presentes en tejidos autolizados, resulta una técnica diagnóstica vigente (Baszler, T.V., et al., 1996). Esta baja sensibilidad es avalada por la descripción de un caso donde se necesitaron 19 cortes para que uno de ellos resultara positivo por IHQ (por (Helman et al. 1998). La utilización de anticuerpos policlonales en la técnica de IHQ puede ocasionar reacción cruzada con Toxoplasma gondii (49). Sin embargo, al no estar comprobado que T. gondii es causa importante de abortos en bovinos, esta limitante no sería significativa para dichos especímenes. Se han desarrollado anticuerpos monoclonales contra taquizoítos de NC, pero su utilización para IHQ aún no ha sido evaluada.
d. Aislamiento
El primer aislamiento de NC fue logrado a partir de material del SNC obtenido de un perro infectado (Dubey, J.P., et al., 1997). 42).
Posteriormente se reporta en California por primera vez un aislamiento a partir de un feto bovino abortado. Así mismo, se ha aislado NC del SNC perteneciente a una vaca adulta infectada naturalmente que abortó por dicho protozoo. El aislamiento en cultivos celulares a partir de fetos bovinos
es dificultoso debido a la severa autólisis de las células del hospedador, el bajo número de parásitos presentes y a la alta probabilidad de contaminación (Conrad, P.A., et al.,1993).
1.10. TRATAMIENTO Y PREVENCIÓN
Existe información acerca de la sensibilidad “in vitro” de NC a ciertos antimicrobianos. Sin embargo, la administración de monensina a razón de 40-120 mg/cabeza/día no resultó efectiva en bovinos naturalmente infectados con NC.
Sin embargo, un adyuvante sintético (Polygen) ocasionó, en los animales vacunados, una adecuada respuesta IMC con producción de IFN. Estos niveles de IFN resultaron similares al observado en el grupo infectado experimentalmente y al encontrado en infecciones naturales (Thurmond, M.C., Hietala, S. And Blanchard P.C. (1997).
Finalmente, al ser utilizada sobre animales gestantes y desafiados experimentalmente por inoculación endovenosa e intramuscular de taquizoítos vivos de NC, aquella preparación resultó inadecuada para prevenir la infección fetal. Considerando el rol epidemiológico del perro como huesped definitivo de NC y a los fines de evitar la propagación de la enfermedad, se recomienda impedir el acceso de los perros a las fuentes de agua, pasturas, galpones y silos donde se almacene alimento para los bovinos. Es importante también recolectar los fetos abortados y/o placentas y eliminarlos a los fines de evitar la fuente de infección para los caninos (Thurmond, M.C.; Hietala, S. (1995).
Dada la amplia distribución de esta enfermedad en los bovinos del país, se sugieren además diferentes medidas de manejo, a saber (Moore, D.P., Odeón, A.C., Campero, C.M. (2000).
1. Reponer animales seronegativos a la enfermedad. Para esto debería sangrarse el animal recién nacido previo al calostrado. Si esto no fuese posible, la obtención de sangre podría realizarse a los 5-6 meses de edad cuando no haya interferencia de anticuerpos calostrales.
2. No dejar las hijas de vacas seropositivas para reposición dado su alto riesgo de ser congénitamente infectadas.
3. Es aconsejable realizar al menos 2 sangrados previos al primer servicio de vaquillonas debido al alto riesgo de aborto que tiene esta categoría por su
“pobre” memoria inmunológica.
4. Deberá sangrarse todo animal que entre al establecimiento a los fines de identificar animales seropositivos a NC.
5. Realizar el seguimiento del desempeño reproductivo del rodeo especialmente en establecimientos lecheros con elevada seroprevalencia a los fines de detectar perdidas de preñeces y/o fetos momificados mediante tactos rectales seriados.
6. En establecimientos donde se realice la transferencia embrionaria (TE) deberán utilizarse receptoras seronegativas a la enfermedad. Existen evidencias concretas del riesgo de aborto y transmisión congénita de NC al realizar dicha técnica en receptoras seropositivas (83, Campero et al, datos no publicados). La TE podría ser una técnica adecuada al permitir el empleo de embriones originados a partir de donantes con alto valor genético seropositivas a NC, evitándose el riesgo de difundir la enfermedad al ser transferidos dichos embriones a receptoras seronegativas (Campero et al., datos no publicados).
7. Colocar las vacas seropositivas y que posean al menos un aborto en una lista tentativa de refugo.
8. Identificar, aislar y realizar estudios serológicos de vacas abortadas.
9. Recuperar fetos y placentas abortados para enviarlos a centros de diagnóstico a los fines de establecer el agente abortigénico.
CAPÍTULO II
MATERIALES Y MÉTODOS
2.1 UBICACIÓN Y FECHA DEL TRABAJO EXPERIMENTAL
El trabajo de campo se realizó en las comunidades campesinas pertenecientes a la provincia de Huancavelica, siendo las comunidades escogidas: Incañán, Orccobamba, Río de la Virgen, Tambopata, Tansiri y Tinyacclla. Todas ellas, pertenecientes a la zona de vida páramo muy humedo-subalpino subtropical (pmh-SaS) que se caracteriza por tener clima húmedo y frío, con precipitación anual entre 600 y 800 mm y una temperatura anual promedio entre 0°C y 6°C, altitudinalmente, se encuentra entre 3900 y 4200 msnm.
La toma de datos abarcó desde el mes de Julio del 2005 a Enero del 2006.
Los análisis serológicos se realizaron en los Laboratorios HIPRA S.A.
perteneciente a la empresa del mismo nombre, ubicado en Girona - España durante el mes de enero del 2007.
2.2 POBLACIÓN EN ESTUDIO
La población en estudio la constituyeron las alpacas hembra Huacaya de las 6 Comunidades Campesinas con problemas reproductivos, es decir aquellas que tuvieron abortos así mismo alpacas que no quedaron preñadas luego del servicio.
2.3 MUESTRA
HOSPINAL. R. (1997). Menciona que 15% de las alpacas tienen problemas por infertilidad. El número de muestras se calculará haciendo uso de la fórmula de tamaño muestral para proporciones y poblaciones finitas (Daniel, 1997):
²
²( 1) ²
N Z pq n E N Z pq
2
2 2
1836 1.96 0.5 0.5 0.075 1835 1.96 0.5 0.5
n
1763.2944 10.3219 0.9604 n
1763.2944
11.2823
n156.2886 156
n alpacas
N = tamaño de la población n = tamaño mínimo de la muestra Z = Nivel de confianza al 95% = 1,96
p = Proporción animales afectados. La prevalencia, ya que no existen estudios previos es del 50%.
q = proporción de animales no afectados, 50%
E = precisión 7.5%
El total de la población es de 12 241 alpacas, de los cuales existen perdidas económicas de un 15% por infertilidad, dando 1836 alpacas hembras.
HOSPINAL. R. (1997).
Llegándose a muestrear 156 alpacas hembras. (Sé malograron 04 sueros)
Cuadro 2.1. Distribución de los animales por comunidades campesinas, numero de crías, edad, de las alpacas y número de abortos en alpacas con problemas reproductivos
Comunidad Numero de crías
Edad de las alpacas
Total
2 Dientes 04 dientes Boca llena
1 aborto 1 aborto 2 abortos 1 aborto 2 abortos 1 aborto 2 abortos
Incañan
Ninguna cría 1 cría 2 crías
2 1
3 7
1 4 2
1 1
6 12
2
1 1
Orccobamba Ninguna cría 1 cría 2 crías
4 2
9
3 2 6
2 1 2
9 11
6
2 1 2 Rio de la
virgen
Ninguna cría 1 cría 2 crías
3 1
2 9
1 5
6 10
5 Tansiri Ninguna cría
1 cría 2 crías
4 3
10
3 2 1
2 1
10 12 1
2 1 Tambopata Ninguna cría
1 cría 2 crías
5 1
1 8 1
2 4
1 5
6 11
5
1 5 Tinyacclla Ninguna cría
1 cría 2 crías
5
3
1
2 10
1 3
5 5 10
2 3
Total. Ninguna cría 1 cría 2 crías
23 3
11 46 1
1 8
12 18
4 8 8
42 61 29
5 8 8
2.4 MATERIALES Y EQUIPOS De campo:
- Libreta de apuntes - Mameluco
- Guantes quirúrgicos - Jabón carbólico - Lápiz marcador - Tubos vacutainer - Agujas vacutainer - Holder vacutainer - Crioviales
- Cooler para transporte - Cámara fotográfica
- Gradilla
Materiales de laboratorio
- Kit de diagnóstico para Neospora Hipra De gabinete
- Computadora - Impresora
- Utiles de escritorio - Papeles A4
- Registro de datos 2.5 METODOLOGÍA
En la presente investigación el tipo de estudio ha sido el exploratorio y descriptivo, con relación al tipo de investigación es transversal o transeccional, ya que la recolección de los datos se dio en un momento dado, un tiempo único, el propósito es describir las variables las cuales estamos estudiando, para luego conocer la prevalencia de Neospora caninum, sus posibles factores de riesgo y posterior control.
Para el desarrollo del presente estudio se tuvo en cuenta: información oral de los dueños de las alpacas para luego seleccionar e identificar a las alpacas problema.
2.5.1 Obtención de las muestras
Las muestras de sangre se colectaron de la vena yugular de las alpacas mediante punción directa, usando un Holder, agujas 21G x 1” y tubos vacutainers. Previamente se realizó una hemostasia al nivel de la vena yugular izquierda y/o derecha, desinfectando la región con algodón empapado de alcohol yodado. La muestra será de 7 - 10 ml, para ello se
desliza la sangre suavemente por las paredes del tubo para evitar su hemólisis, tomada la muestra se rellena la ficha de registro con el nombre del animal.
Las muestras se colocaron en gradillas con una inclinación de 45°, para lograr una coagulación óptima, para colocarlos en un cooler y llevarlo al laboratorio. Llegadas las muestras al laboratorio fueron centrifugadas (4500 rpm por 15 minutos) el suero obtenido se trasvaso a crioviales, para que las muestras se conservaran a una temperatura de -20°C hasta la realización de la prueba diagnóstica.
2.5.2 Técnica de laboratorio
Para el procedimiento de laboratorio los técnicos de HIPRA eligieron la técnica de ELISA por su versatilidad y más que nada por su especificidad.
Procedimiento de Elisa
Adherir 50 ul del antígeno del oocisto diluido en Buffer Carbonato a una concentración de 1ug de proteínas/ml a los pozos de la placa de microtitulación que serán empleadas en la prueba, excepto en los pozos del blanco.
1. Cubrir la placa y dejar en la refrigeradora (4°C) durante toda la noche.
2. Lavar los pozos de la placa con Buffer de lavado para remover el acceso del antígeno: colocar 200 ul del Buffer de lavado en cada pozo, esperar 5 minutos y luego eliminar el contenido de los pozos invirtiendo rápidamente la placa. Repetir por tres veces el lavado, después de lo cual, invertir la placa sobre papel absorbente, dando golpes suaves, hasta dejarla sin restos de Buffer de lavado.
3. Adicionar a los pozos 100 ul de solución Bloqueadora. Cubrir la placa con su tapa, parafilm u hoja plástica para evitar la evaporación y luego incubar durante 1 hora a 37 °C en la estufa.
4. Lavar los pozos al igual que en el paso N° 3.
5. Siguiendo el esquema de distribución de los sueros en la placa, añadir a los pozos 200 ul de la dilución del suero a evaluar a partir de una dilución 1/500 y los sueros controles. Luego cubrir la placa e incubar durante 1 hora a 37 °C.
6. Aspirar con la ayuda de una micropipeta el contenido de los pozos de la placa y eliminarlo en un recipiente que contenga lejía al 5 %.
7. Lavar nuevamente los pozos al igual que en el paso N°3.
8. Añadir 50 ul del conjugado Anti IgG – Peroxidasa dilución 1/5000 en PBS – Tween a cada pozo, cubrir la placa y luego incubar por 1 hora a 37 °C.
9. Lavar los pozos al igual que en paso N°3.
10. Agregar 50 ul del sustrato, a cada pozo e incubar en oscuridad (cubrir con papel carbón o aluminio) y a temperatura ambiente. Esperar de 10 a 30 minutos hasta observar coloración amarilla en los controles positivos.
11. Detener la reacción con 25 ul de Ac. Sulfúrico 2M.
INTERPRETACIÓN
REACCION POSITIVA: Punto de corte mayor a 10.
REACCION NEGATIVA: Punto de corte menor a 6.
REACCIÓN DUDOSA: Punto de corte entre 6 – 10
2.6 VARIABLES
2.6.1 Variables de análisis
Variables independientes - Número de partos - Número de abortos - Edad
- Comunidades Campesinas Variables dependientes
- Resultado a la prueba diagnostica 2.6.2 Técnicas y Procedimiento de Análisis
Las variables consideradas en el presente trabajo se sistematizan en cuadros, los cuales se presentan en los resultados y discusiones. Para el análisis estadístico se utilizó tablas de contingencia. Todos los cuadros y gráficos fueron realizados mediante el software estadístico SPSS Ver 11 en español. gráficos fueron realizados mediante el software estadístico SPSS.
2.6.3 Distribución del estudio
La unidad experimental será las muestras de sangre en alpacas con problemas reproductivos.
Siendo X: reacción a la prueba diagnóstica e Y (número de partos, número de abortos, grupo etáreo y provincias).
REACCIÓN
COMUNIDADES
TOTAL ni
Río de la
Virgen Tansiri Tambo
pata Incañan Tinyaccll
a Orccobamba
Positivo (X1) n11 n12 n13 n14 n15 n16 n1.
Negativo (X2) n21 n21 n23 n24 n25 n26 n2.
TOTAL (Xh) n.1 n.2 n.3 n.4 n.5 n.5 n..
2.7 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
Por estar trabajando en proporciones y frecuencias se utilizó la Prueba de independencia, por ser variables categóricas, se usaron tablas de contingencia, para probar la independencia entre variables, la variable independiente:
Reacción al antígeno (x) y las variables dependientes (y): número de partos, número de abortos, grupo etáreo (2 dientes, 4 dientes y boca llena) y provincias.
Contrastaremos las siguientes hipótesis:
Ho = No existe relación entre las variables
Ha = Existe relación entre las variables estudiadas La distribución para contrastar la hipótesis será:
22
1 n
i i
c
i i
o e
e
Donde:
oi = observado de especies positivas a infección en edades y Comunidades Campesinas.
ei = especies esperadas a infección en edades y comunidades campesinas.
Intervalo de confianza
El intervalo de confianza (I.C.) es el resultado de la siguiente fórmula (Daniel, 1996):
. . pq
I C p z
n
Donde:
Z = 1.96
p = Prevalencia calculada q = (1-p)
n = número de animales muestreados
CAPÍTULO III
RESULTADOS Y DISCUSION
3.1 SEROPREVALENCIA DE Neospora caninum EN ALPACAS PROBLEMA POR COMUNIDADES.
Cuadro 3.1. Seroprevalencia e intervalos de confianza de Neospora caninum en alpacas hembra con problemas reproductivos de las 06 comunidades de la provincia de Huancavelica - 2005.
Comunidades Campesinas
Número de animales muestreados (n)
Animales positivos (ELISA)
Prevalencia (%) a la prueba IC*
Incañan 22 0 0
Orccobamba 31 0 0
Río de la Virgen 21 0 0
Tansiri 26 0 0
Tambopata 28 2 7.14 4.08
Tinyacclla 25 0 0
Total 153 2 1.31 1.81
* Intervalo de confianza 95%
2 2
9.05 11.07 NS
La seroprevalencia de Neospora caninum en alpacas con problemas reproductivos fue de 7.14 4.08% (2/28) mediante la prueba de ELISA indirecto (Cuadro 3.1). Dicha prevalencia se hallo específicamente en la Comunidad Campesina de Tambopata, Este hallazgo nos indicaría que estas alpacas hembras estuvieron expuestos al parásito en algún momento del transcurso de sus vidas, en su etapa prenatal o postnatal.
Entre los posibles factores que pueden contribuir a la presencia y la transmisión de la infección entre los animales de la Comunidad de Tambopata puede ser la explotación extensiva mixta que se realiza con otros hospederos intermediarios como el ganado vacuno siendo este el principal hospedero intermediario que se ve afectado pro este parásito.
La presencia de canes en las explotaciones y en los alrededores (vecinos) constituye otro factor de riesgo por la razón que éstos animales contaminan el agua y las áreas de pastoreo con ooquistes. Un factor de alto riesgo podría ser la introducción de alpacas infectadas provenientes de otros hatos y/o zonas. Ya que estos hatos son abiertos por la comercialización existente entre pastores.
La diferencia abismal observada entre Tambopata y el resto de Comunidades podría deberse a una mayor presencia de perros en el Área de Tambopata.
Todos los hatos de las 6 Comunidades muestreadas son manejados bajo un sistemas tradicionales de crianza extensiva.
En Tambopata, los pastores poseen mayor cantidad de perros, dichos animales se encuentran en contacto permanente y directo con las alpacas teniendo un similar acceso a todos los lugares donde se encuentran, incluyendo las canchas de parición. Estudios realizados en ganado vacuno han comprobado que existe
una estrecha relación entre la presencia del parásito en hatos donde hay perros frente a hatos sin ellos (Wouda et al., 1999).
Otro factor a tomar en cuenta por el tipo de manejo, sería la presencia de zorros en la zona, ya que es posible la existencia de un ciclo de transmisión silvestre de Neospora caninum (Barling et al., 2000).
En la provincia de Huancavelica la principal característica es su sistema de crianza extensiva mixta es decir los camélidos conviven con otras especies, tales como ovinos y vacunos. En estas especies, especialmente en bovinos existe una documentación detallada de la infección por Neospora caninum. La estrecha convivencia de estas especies con el perro facilitaría que se desarrolle la transmisión horizontal, ya que estos no tiene ninguna restricción a los restos de placentas, fetos abortados y descargas uterinas, medios por los cuales se infectarían (Dijkstra et al., 2002). Los perros al tener acceso a los campos de pastoreo, los estarían contaminando con las heces.
Al comparar resultados de Comunidades no se encontraron diferencias estadísticas significativas (P<0.05), estableciéndose que no existe relación entre riesgo de exposición entre comunidades de Neospora caninum, es decir la probabilidad de infección en relación a las comunidades.
Estos valores difieren significativamente de los hallados por (Moya, et al., 2003) al evaluar 275 sueros de llamas hembras en los distritos de Santa Rosa (n = 86) y de Nuñoa (n = 189), mediante la prueba de inmunofluorescencia indirecta. El 16.7 ± 4.4 % (46/275) presentó anticuerpos contra el parásito a una dilución de 1:50, considerándose como una seroprevalencia moderada. El fundo de Santa Rosa presentó una seroprevalencia baja (4.7 ± 4.5%, 4/86), mientras que en el
estadísticas significativas entre ambos fundos (p<0.05). No se encontraron diferencias significativas entre grupos etáreos (p>0.05). Este estudio confirma la presencia de Neospora caninum en llamas hembras de la provincia de Melgar, Puno. Uno de los factores por los cuales nuestros resultados varían podría ser la prueba diagnóstica utilizada, en nuestro caso fue el ELISA indirecto ampliamente utilizado en el serodiagnóstico de la neosporosis, por la la obtención de una sensibilidad y especificidad superiores a las obtenidas con la IFI, sumado a la falta de subjetividad cuando se debe emitir un resultado, hacen confiable a esta prueba (Paré, J., Thurmond, M.C. and Hietala, 1997)
3.2 SEROPREVALENCIA DE Neospora caninum EN ALPACAS PROBLEMA POR GRUPO ETAREO.
Cuadro 3.2 Seroprevalencia de Neospora caninum en alpacas hembra problema por edad, en las provincias de Huancavelica – 2005.
Edad Animales
muestreados (n)
Animales positivos
Prevalencia (%) a la prueba IC*
2 dientes 26 0 0.00
4 dientes 59 1 1.69 2.04
Boca llena 68 1 1.47 1.91
2 2
(0.05; 2 . )
0.43 5.99
c tab g l
NS
Figura. 3.1. Número de alpacas infectadas por Neospora caninum por edad en 6 CC.CC. de la provincia de Huancavelica.
Diagnóstico
Negativo Positivo
Frecuencia
80
60
40
20
0
Edad de las alpcas
2 dientes
4 dientes Boca llena 67
58
26
En el cuadro 3.2 se observa la seroprevalencia por Neospora caninum y el intervalo de confianza (P<0,05) en alpacas por edad pertenecientes a las 6 Comunidades Campesinas de la provincia de Huancavelica, encontrándose que de los 26 animales muestreados para 2 dientes ninguno de ellos estuvo expuesto al parásito, en el caso de alpacas de 4 dientes se encontró una prevalencia de1.69 2.04% (1/59), para animales de boca llena 1.47 1.91% (1/68).
Respecto a los resultados para la variable edad, el análisis estadístico indica que no existieron diferencias estadísticamente significativas entre los diferentes grupos etáreos.
Uno de los factores para la no existencia de casos positivos en 2 dientes puede deberse a la elección de los animales por parte de los propietarios de rebaños que solamente eligen a los animales que ellos consideran enfermos, como es
lógica la elección es bastante subjetiva. En los grupos etáreos de 4 dientes y boca llena, la prevalencia tiende a ser mínima.
3.3 SEROPREVALENCIA DE Neospora caninum EN ALPACAS PROBLEMA POR NÚMERO DE ABORTOS.
Cuadro 3.3 Seroprevalencia de Neospora caninum en alpacas por número de abortos en la provincia de Huancavelica – 2005.
Número de abortos
Animales muestreados (n)
Animales positivos
Prevalencia a la prueba IC*
1 aborto 132 2 1.52 1.94
2 abortos 21 0 0
2 2
(0.05;1 . )
0.322 3.84
c tab g l
NS
F ig. 3.2 Número de alpacas inf ectadas por núm ero de abortos prov incia de Huanc av elica - 2005
Diagnóstic o
Negativo Positivo
Frecuencia
140
105
70
35
0
Número de abort os
1 aborto 2 abortos 21
130
El cuadro 3.3 muestra la seroprevalencia por Neospora caninum y el intervalo de confianza (P<0,05) en alpacas por el número de abortos pertenecientes a las 06
Comunidades Campesinas de la provincia de Huancavelica, de los 132 animales muestreados que presentaron 1 aborto se encontró una prevalencia de1.52 1.94% (2/132), en animales que tuvieron 2 abortos no existió ningún positivo a la prueba diagnóstica.
Al análisis estadístico, no existe ninguna relación entre el número de abortos e infección.
Es importante resaltar que si bien los parámetros de producción y productividad son bajos, la prevalencia de Neospora caninum no es factor determinante para confirmar que este parásito es el causante de los problemas reproductivos existentes en los diferentes hatos ganaderos, sino que éstos 2 animales han estado expuestos a él.
3.4 SEROPREVALENCIA DE Neospora caninum EN ALPACAS PROBLEMA POR NÚMERO DE CRIAS.
Cuadro 3.4 Seroprevalencia e intervalos de confianza de Neospora caninum en alpacas problema por número de crías en la provincia de Huancavelica – 2005.
Número de crías Animales muestreados (n)
Animales positivos
Prevalencia a la prueba IC*
Ninguna cría 47 0 0
01 Cría 69 2 2.90 2.66
02 Crías 37 0 0
2 2
(0.05; 2 . )
2.47 5.99
c tab g l
NS
F ig. 03. Número de alpacas inf ectadas por núm ero de c rías en la Prov incia de Huancav elica - 2005
Diagnóstic o
Negativo Positivo
Frecuencia
80
60
40
20
0
Número de crí as
Ninguna crí a 1 cria 2 crí as 37
67
47
En el cuadro 3.4 se observa la seroprevalencia por Neospora caninum y el intervalo de confianza (P<0,05) en alpacas problema por número de crías pertenecientes a las 06 Comunidades Campesinas, encontrándose que de 47 animales que no tuvieron ninguna cría y 37 animales con 2 crias ninguno de ellos estuvo expuesto al parásito, en el caso de alpacas con 1 cría se encontró una prevalencia de 2.90 2.66% (2/69).
Respecto a los resultados para la variable edad, el análisis estadístico indica que no existieron diferencias estadísticamente significativas entre los diferentes grupos etarios.
IV. CONCLUSIONES
1. El 1.31 1.81% (2/153) de las alpacas problema muestreadas pertenecientes a 06 Comunidades de la provincia de Huancavelica fueron positivas a Neospora caninum mediante la prueba de Enzimoinmunoenayo (ELISA indirecto), las prevalencias entre Comunidades fueron estadísticamente no significativas (P<0.05).
2. El 1.52 1.94% (2/132) de las alpacas que tuvieron 1 aborto fueron positivas a la prueba de ELISA, éstas no fueron significativas estadísticamente (P<0.05).
3. El 1.52 1.94% (2/132) de las alpacas de 4 dientes (1/59) y el 1.47 1.9% (1/68) de boca llena fueron positivas a la prueba de ELISA, no existió diferencia significativa entre grupos etáreos (P<0.05).
4. El 2.90 2.66% (2/69) de las alpacas que tuvieron una cría resulto estar expuesta al parásito, no hubo diferencia significativa para número de crías (P<0.05).
V. RECOMENDACIONES
1. Se recomienda realizar estudios longitudinales de prevalencia que permitan determinar la verdadera implicancia de Neospora caninum como agente causal de problemas reproductivos en camélidos sudamericanos.
2. Controlar el ingreso de alpacas provenientes de otros hatos alpaqueros, las cuales podrían estar infectadas.
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