El efecto de los reguladores de crecimiento sobre la formación de hojas en plántulas de cardamomo (Elettaria cardamomun), después de 90 días de crecimiento en condiciones in vitro; (control), T2 (BA-AIA), T3 (2iP-ANA), T4 (KIN-AIB). El efecto de los reguladores de crecimiento sobre la formación de brotes en plántulas de cardamomo (Elettaria cardamomun), después de 90 días de crecimiento en condiciones in vitro.
INTRODUCCIÓN
REVISIÓN DE LITERATURA
- Plagas principales
- Enfermedades principales
- Producción y cosecha
- Cultivo In vitro
- Factores que intervienen en el cultivo de tejidos
- Fases del medio de cultivo
- Antecedentes de trabajo In vitro
- Ruta de biosíntesis de los metabolitos secundarios
- Compuestos fenólicos y capacidad antioxidante
- Compuestos fenólicos
- Flavonoides
- Determinación de la capacidad antioxidante
- REFERENCIAS
La obtención de una planta completa a partir de tejido vegetal (yema axilar, tallo, hoja, meristemas) se debe al principio de totipotencia, que indica que cada célula vegetal contiene una copia completa del material genético de la planta a la que pertenece. independientemente de su función o posición dentro de ella, tiene por lo tanto el potencial de regenerar una planta completamente nueva (Ferl y Paul, 2000), a través de la división y diferenciación celular. En condiciones in vitro, la intensidad de la luz es muy baja (10 W/M2 en comparación con las condiciones naturales donde la luz representa hasta 900 W/M2). El número de plantas obtenidas dependerá de la especie vegetal y de las condiciones ambientales.
El ensayo ABTS se basa en la capacidad de un antioxidante para estabilizar el catión coloreado del radical ABTS•+, previamente formado por la oxidación del ABTS (ácido 2,2´-azinobis (3-etilbenzotiazolina-6-sulfónico) (6 ) con metmioglobina y peróxido de hidrógeno.
PROTOCOLO DE PROPAGACIÓN In vitro DE CARDAMOMO (Elettaria
- INTRODUCCIÓN
- MATERIALES Y MÉTODOS
- Ubicación del experimento
- Fuente de explantes
- Medio de cultivo
- Fase de multiplicación
- Análisis estadístico
- RESULTADOS Y DISCUSIÓN
- Altura de explantes
- Desarrollo de hojas
- Desarrollo de brotes
- Formación de Raíz
- CONCLUSIÓN
- REFERENCIA
La propagación in vitro de explantes de cardamomo se realizó en el Laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales del Departamento Fitotécnico de la Universidad Autónoma Chapingo. Resultados de las variables: Altura de los brotes, número de hojas, número de brotes y número de raíces. Efecto de los reguladores de crecimiento en brotes de Elettaria cardamomum, después de 90 días de crecimiento en condiciones in vitro.
Por otro lado, Urrea et al., (2011) en plántulas de Curcuma longa alcanzaron una altura de 6. Efecto de los reguladores sobre la formación de hojas en Elettaria cardamomun, después de 90 días de crecimiento en condiciones in vitro, valores con la misma letra son estadísticamente iguales según la prueba de Tukey (p ≤ 0,05) ± desviación estándar. Por otro lado, Alarcón et al., 2008 reportaron un promedio de 12.2 brotes utilizando 3 mg/L de BA como regulador de crecimiento en la especie Renealmia alpinia perteneciente a la familia del cardamomo.
Efecto de los reguladores, para la formación de brotes en plántulas de Elettaria cardamomun, después de 90 días de crecimiento en condiciones in vitro, no existen diferencias estadísticas. Efecto de los reguladores de crecimiento sobre la formación de brotes en plántulas de Elettaria cardamomun, después de 90 días de crecimiento en condiciones in vitro. La micropropagación in vitro de cardamomo requiere combinaciones precisas de reguladores del crecimiento (auxinas/citoquininas), mezclados en diferentes concentraciones.
Evaluación de plántulas de cardamomo (Elettaria cardamomun (L.) Maton) por su resistencia in vitro al filtrado de cultivo de Fusarium oxysporum Link. Evaluación de plántulas de cardamomo (Elettaria cardamomum (L.) Maton), por su resistencia in vitro al filtrado de cultivo de Fusarium Oxysporum Link.
EFECTO DEL USO DE AMINOÁCIDOS AROMÁTICOS SOBRE LAS
INTRODUCCIÓN
Todas las plantas tienen la capacidad de producir compuestos bioactivos como parte de su metabolismo secundario. Estos compuestos no son esenciales y no participan en procesos bioquímicos vitales. Sin embargo, juegan un papel decisivo en la interacción entre planta y medio ambiente, a la luz de los procesos bióticos. y factores no bióticos (Jiménez et al., 2003: Sánchez y Alvarenga, 2014). El consumo de especies vegetales ricas en antioxidantes previene y en ocasiones combate el daño oxidativo, causado por el desequilibrio entre la producción de especies reactivas de oxígeno y la capacidad del sistema biológico para generar una respuesta al daño resultante (Venereo, 2002). Los antioxidantes tienen la capacidad de retardar o prevenir la oxidación de un sustrato, incluso en bajas concentraciones (Pisoschi y Pop, 2015), evitando así cambios en la estructura y función en cualquier órgano o grupo celular (Venereo, 2002).
Las frutas y verduras, ricas en antioxidantes naturales, son beneficiosas para la salud por su capacidad para prevenir enfermedades cardíacas, cáncer, cataratas, degeneración muscular y enfermedades neurológicas (Corral-Aguayo et al., 2008). Debido a lo anterior, ha surgido el interés en la búsqueda de nuevas técnicas para promover la adquisición de metabolitos secundarios de interés comercial, en particular la técnica de cultivo de células y tejidos vegetales, como estrategia para producir sustancias de difícil o escasa obtención. asequible. productos obtenidos de forma natural (Robert et al., 1991). Según varios estudios, las semillas de cardamomo son una rica fuente de fitoquímicos con diversas propiedades farmacológicas atribuidas a su capacidad antioxidante; sin embargo, no hay informes sobre el tipo de fitoquímicos, especialmente compuestos fenólicos, presentes en toda la planta del cardamomo. estudios que han permitido obtener plántulas ricas en este tipo de compuestos. Por ello, el objetivo de este trabajo fue evaluar las propiedades antioxidantes en plántulas de cardamomo cultivadas in vitro, añadiendo diferentes proporciones de fenilalanina/tirosina, con el fin de encontrar el mejor tratamiento que proporcione a las plántulas un alto potencial nutracéutico.
MATERIALES Y MÉTODOS
- Tratamientos de micropropagación
Propiedades antioxidantes
- Reactivos e instrumentación
- Preparación de extractos
- Contenido fenólico total (CFT)
- Flavonoides totales (FT)
Los resultados se expresaron como miligramos equivalentes de catequina por gramo de muestra en base seca (mgEC gbs-1).
Capacidad antioxidante
- Ensayo ABTS
- Ensayo DPPH
- Ensayo FRAP
Finalmente, se transfirieron 200 µL de cada muestra a los pocillos de la microplaca y se midió la absorbancia a 510 nm en un lector de microplacas. El ensayo DPPH se realizó según el método de Cheng et al. En cada pocillo de una microplaca se mezclaron 200 µL de una serie de diluciones de los extractos y 50 µL de solución de DPPH (0,099 mM).
La microplaca se agitó y se mantuvo en la oscuridad durante 30 minutos, luego se midió la absorbancia a 515 nm. Los resultados se expresaron como el equivalente de micromoles de Trolox por gramo de muestra en base húmeda. Donde Am, Ab, Ac representan la absorbancia del antioxidante de referencia y de la muestra, blanco y control, respectivamente.
La capacidad antioxidante mediante el ensayo FRAP (Ferric Reduction Ability of Plasma) se evaluó según el procedimiento de Benzie y Strain (1999) adaptado para microplacas. El reactivo FRAP se preparó en el momento de su uso mezclando tampón acetato (300 mM, pH 3,6), solución de TPTZ 10 mM en HCl 40 mM y solución de cloruro férrico 20 mM en una proporción de 10:1. :1, respectivamente. Los resultados se expresaron como micromoles equivalentes de Trolox por gramos de muestra en base seca.
ANÁLISIS ESTADÍSTICO
Se mezcló una alícuota (20 µL) de la muestra (apropiadamente diluida) con 180 µL de reactivo FRAP y 60 µL de agua destilada. Los datos obtenidos en cada tratamiento fueron sometidos a un análisis de varianza, con 95% de confianza y comparaciones de medias con la prueba de Tukey (P≤0.05), analizados con el paquete estadístico SAS® (versión 9.1).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
En otras especies, pertenecientes a la misma familia del cardamomo, se realizaron estudios en frutas, reportando altas concentraciones de mg EAG gbs-1 para la especie de jengibre (Ali et al., 2018). Mientras que Alvis et al. 2012), reportaron valores más bajos en la variedad cúrcuma (1.76 mg EAG gbs−1), concentraciones más bajas que las encontradas en el control. Los componentes principales de todas las hierbas suelen ser compuestos fenólicos, flavonoides y terpenoides (Chaieb et al. 2007).
Estos compuestos en las especias son responsables de las propiedades antioxidantes, dándoles usos medicinales (Bozin et al., 2008). Los flavonoides representan el grupo más grande dentro de los compuestos fenólicos (Kim et al., 2011), con una amplia distribución. En las plantas, presentan actividades estimulantes a través de uniones comunicantes, influyendo en el crecimiento celular y la inducción de enzimas (monooxigenasas dependientes de citocromo) para la desintoxicación (Gonzales et al., 2002).
La capacidad antioxidante de las especias está estrechamente relacionada con la presencia de componentes químicos con actividad antioxidante (Coronado et al., 2015). En otra investigación, Akinola et al. (2014) informaron que se obtuvieron valores de 266.95 ET g-1bs para una especie de cúrcuma, el cual es muy superior a lo reportado en este trabajo. Se ha demostrado que el extracto acuoso de cardamomo tiene efectos anticancerígenos al promover la actividad citotóxica (Majdalawieh et al., 2010: Qiblawi et al., 2015).
CONCLUSIÓN
Phytochemicals and antioxidant activity of different fruit fractions (peel, pulp, aril and seed) of Thai gooseberry (Momordica cochinchinensis Spreng). In vitro investigation of potential immunomodulatory and anti-cancer activities of black pepper (Piper nigrum) and cardamom (Elettaria cardamomum). Chemical preventive effect of cardamom (Elettaria cardamomum L.) against benzo(α)pyrene-induced gastric forest papillomagenesis in Swiss albino rats.
Journal of Environmental Pathology, Toxicology and Oncology: Official Organ of the International Society for Environmental Toxicology and Cancer.
ANEXOS
En un vaso de precipitado disolver 5 g de hidróxido de sodio con 30 ml de agua destilada y verter en un matraz aforado de 100 ml. Realizar 2 lavados más en la copa y finalmente medir. Transfiera 250 l de la solución madre a un matraz aforado de 25 ml, hasta 80% de metanol. Si selecciona tres pocillos de la placa de microtitulación, coloque 20 µl de solución estándar 4 en el primero, 20 µl de solución estándar 5 en el segundo y 20 µl de extracto puro en el tercero, luego agregue 180 µl de solución ABTS en cada uno. de los pozos. los pocillos hasta alcanzar un volumen final de 200 µl.
La solución óptima del extracto será aquella que se encuentre en el rango de absorbancia de las soluciones 4 y 5, por lo tanto el color de la solución debe ser similar. Para preparar la solución de DPPH 1 mM, pesar 19,7 mg de DPPH y agregar a un matraz aforado de 100 ml, luego disolver con 1 ml de acetona y finalmente completar hasta 80% de metanol. Se retiran las alícuotas indicadas y se diluyen con metanol para obtener un volumen final de 1000 µL (tubo eppendorf).
Disolver el acetato de sodio con 30 ml de agua destilada en un vaso de precipitados, luego verter la solución en un matraz aforado de 100 ml. Preparar 250 ml de HCl 40 mM vertiendo 200 ml de agua destilada en un matraz aforado de 250 ml y luego añadiendo 1 ml de HCl concentrado y finalmente enrasando hasta la marca. Seleccione tres pocillos de microplaca, coloque 20 l de solución estándar 4 en el primero, 20 l de solución estándar 5 en el segundo y 20 l de extracto puro en el tercero, luego agregue 180 l de solución FRAP a cada pocillo. pocillos, finalmente 60 µL de agua destilada hasta llegar a un volumen final de 260 µL.