CENTRO DE INVESTIGACION EN ALIMENTACION Y DESARROLLO A. C.
E X P R E S I Ó N D E L O S G E N E S H D L - B G B P , α - G L U C O S I D A S A y α - A M I L A S A E N E L H E P A T O P A N C R E A S D E C A M A R O N
B L A N C O P e n a e u s ( L i t o p e n a e u s v a n n a m e i ) E N R E S P U E S T A A L A I N O C U L A C I Ó N D E G L U C A N O S
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M I R E Y A M O R A L E S C O R R A L
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Hcrmosillo, Sonora Junio 1.kl 2003
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RESUMEN
Los camarones utilizan enzimas digestivas para la hidrólisis de proteínas, lipidos y polímeros de carbohidratos, presentes tanto en alimentos naturales o dietas preparadas. Entre las glicohidrolasas encontradas en camarones se encuentran las
α-amilasas, α-glucosidasas y quitinasas. La acción de las glicohidrolasas involucra el reconocimiento del polímero del carbohidrato, seguida de la catálisis para la digestión. También se han descrito proteínas reconocedoras de glucanos, sin acción hidrolítica conocida como la llamada BGBP (β-Glucan Binding Protein, por sus siglas en ingles), La BGBP es una proteína de hemolinfa que reconoce β-glucanos presentes en rnicroorganismos invasores formando un complejo BGBP-β glucano que es reconocido por los hemocitos circulantes y los mecanismos de defensa. La BGBP es también una lipoproteína que transporta lípidos por lo que se le considera una proteína bifuncional.
Debido al interés en el cultivo de camarón, ya no basta con entender los factores ambienntales para optimizar la producción, sino también es necesario estudiar los procesos metabólicos moleculares. Por lo anterior, en el presente trabajo se propuso estudiar la expresión de tres genes que reconocen carbohidratos, la HD-BGBP, α- glucosidasa y α-amilasa en respuesta a la inoculación de partículas de Sephadex DEAE (β-glucanos) a camarones por medio de la evaluación de los niveles respectivos de mRNA utilizando transcripción reversa y amplificación por PCR para contribuir al conocimiento de inducción de genes de hepatopáncreas por glucanos.
Se incluyó la evaluación del mRNA de la proteína ribosomal L8 para normalizar la respuesta de los genes estudiados y descartar el efecto sobre cambios generales en los niveles estables de los mRNAs ( transcripción y degradación). En los camarones inoculados se encontraron diferencias estadisticamente significativas en los niveles del mRNA de la HDL-BGBP, a diferencia de la α-amilasa y α-glucosidasa que no presentaron diferencias significativas.
Los niveles d d ml(NA , k llDL/rlGIJI' aun,1cntaron 13,0 veces por el IJ:H:1mi1:nlo, proh:1blc1ncntc n,laeionado con la función de
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rcconncimicntn de fl--glucanos por esta protelna. P<lr otro l(ldo, la evaluación del gen constitutivo LS como contml de expresión indicó que no hubo dil,:n nciils cstadlsticamcnte signilkativns entre los c:rn1.1H'oncs tratados y los ('.f1111aro11cs contml, 1n11HJUC parece haber una ligcm 1c1Hk11d:i (k acumulación en el 1nRNA de L8, de la mi.snrn frmn:1 que de rx .. amilasa y 0 , .. glucosi,lasa. Los rcs11itados indican que el trat:nnkint<i con 11 gluc:mos ocasionan ncunrnladón especifica del 1nRNA de !;1 lll)L ..
BGBI', una prnldn:l que reconoce la H>l'J'JHI jl y no o. de los carbohidrmos, sugiriendo rcspu(:stas (kpcndicntc,; al tipo rk enlace en los carbohidrntos.