manel Juan

Edificio M de la Universitat Autònoma de Barcelona, Campus UAB 08193 Bellaterra, Barcelona [email protected]. Corresponde ahora a los lectores de esta monografía evaluar si los datos presentados en ella son útiles más allá de la reunión.

Inmunoterapias biológicas: realidades, ideas de futuro y controversias

Juan

El aspecto económico en general es una de las principales limitaciones actuales de la inmunoterapia. Sólo el conocimiento y la racionalización que pueda aportar permitirán un desarrollo progresivo y eficiente de la inmunoterapia.

Generación de nuevas estrategias con anticuerpos monoclonales

Álvarez-Vallina
R ibAs : La investigación con ratones inmu- nodeficientes con xenoinjertos que nos has
Á LvARez -v ALLinA : En la actualidad estamos realizando estudios de biodistribución y lo-
R ibAs : ¿Se dispone de datos farmacociné- ticos de estos compuestos en ratón y sobre
Á LvARez -v ALLinA : Sólo tenemos datos muy preliminares, pero un trimerbody N-terminal
Y Agüe : Desde el punto de vista terapéutico,
Á LvARez -v ALLinA : No tenemos datos tan ex- haustivos porque se salen del ámbito acadé-
M uñoz : A partir de la charla ha quedado muy clara la aplicación diagnóstica de los
Á LvARez -v ALLinA : Una de las aplicaciones te- rapéuticas obvias es la generación de bies-
deL v AL : ¿Los trimerbodies son capaces de detectar las metástasis?
Á LvARez -v ALLinA : Por ahora sólo hemos tra- bajado con trimerbodies marcados con fluo-
J uÁRez : Volviendo a la relación de los tri- merbodies con el sistema inmunitario, creo
Á LvARez -v ALLinA : Este tipo de moléculas per- mite añadir, en cualquiera de los extremos,
R uiz -C AbeLLo : Enfocado al diseño de estruc- turas biespecíficas, ¿en qué medida el dise-
Á LvARez -v ALLinA : Estos trimerbodies tienen mayor plasticidad que los anticuerpos nor-
Á LvARez -v ALLinA : Estamos desarrollando un modelo con el que podamos compa-
g RAçA : Si el funcionamiento de los trimer- bodies depende de su proximidad a los lin-
Á LvARez -v ALLinA : Las masas tumorales tienen una vasculatura muy irregular, con zonas
Á LvARez -v ALLinA : Es difícil que se produzca dicha respuesta porque el colágeno es una
R ibAs : ¿Habéis considerado marcar radiac- tivamente los trimerbodies para poder hacer
Á LvARez -v ALLinA : Es uno de los proyectos en los que actualmente estamos trabajan-

El uso de enlazadores más cortos evita el emparejamiento intramolecular entre los dos dominios de la misma cadena, por lo que se produce un emparejamiento de los dominios VH y VL de dos. PRATs: ¿Habéis realizado estudios comparativos de regresión tumoral frente a otro anticuerpo?

Nanotecnología y sistema inmunitario

R ibAs : ¿Qué tipo de nanopartículas usáis en vuestra empresa?
g onzÁLez : Nuestra empresa, la spin off Nano- Immunotech, tiene dos secciones: productos
P uJoL : Para crear nanopartículas se habla mucho del uso de oro, hierro, carbono, etc
g onzÁLez : Sí pueden crearse nanopartí- culas completamente proteicas, como el
Á LvARez -v ALLinA : En primer lugar, ¿qué ca- racterísticas crees que deberían tener las
g onzÁLez : En relación con la primera pre- gunta, para uso terapéutico recomendaría
C eLAdA : Hay una gran variedad de partícu- las de oro y no todas son fagocitadas por los
g onzÁLez : Estoy totalmente de acuerdo, no se puede simplificar y hablar simplemente
A RAMbuRu : En un futuro las nanopartículas serán fruto de aplicaciones biológicas o bien
R ibAs : Para intentar responder a una de las preguntas anteriores me gustaría comentar

El recubrimiento con polietilenglicol (PEG) permite que la nanopartícula de sílice reduzca su toxicidad (Díaz et al., 2008). Nanopartículas de oro antes (A) y después de ser esterilizadas por radiación ultravioleta (B), gas plasma (C), óxido de etileno (D), formaldehído (E) y autoclave (F) (Franca et al., 2010).

Inmunoterapia celular para modular la respuesta inflamatoria

Benítez-Ribas
v iLeLLA : El objetivo de la inmunoterapia on- cológica es obtener un efecto específico, por
deL v AL : En pacientes tratados con este tipo de terapias, las células tolerogénicas y las cé-
g RAçA : Mi pregunta va encaminada a la dis- tinción entre células tolerogénicas y células

Asimismo, durante el proceso de maduración, las células dendríticas expresan en su membrana moléculas implicadas en la interacción y activación de los linfocitos T (moléculas presentadoras de antígenos y moléculas coestimuladoras), así como en la secreción de citocinas proinflamatorias (interleucina [IL] 12, factor de necrosis tumoral ). alfa [TNF-α]). El silenciamiento de las respuestas inmunitarias contra antígenos propios o no patógenos está mediado principalmente por células dendríticas. No se ha descrito ningún marcador específico de células dendríticas tolerogénicas que permita su rápida identificación in vivo e in vitro.

Las células dendríticas son las células del sistema inmunológico involucradas en la generación de inmunidad o tolerancia. Lo que estamos desarrollando son modelos animales para estudiar la biodistribución de las células dendríticas cuando se inyectan. Si las células tolerogénicas no tienen un antígeno específico, ¿la infusión de células dendríticas tolerogénicas podría afectar la respuesta inmune contra otros agentes o infecciones?

Inmunoterapia contra el cáncer en melanoma

Ribas
v iLeLLA : A excepción de que el número de respuestas es muy alto, en el estudio que
R ibAs : Estamos iniciando un estudio con un nuevo retrovirus que expresa el antígeno car-
R uiz -C AbeLLo : Has explicado que la pérdida de respuesta se debe exclusivamente a un
R ibAs : La idea de reinfundir los linfocitos está limitada por todos los procesos a que
R ibAs : El objetivo del estudio no es conseguir un tratamiento para pacientes sino entender
R ibAs : Es interesante que en los ratones sólo observamos vitíligo en la zona del tu-
Á LvARez -v ALLinA : En primer lugar, ¿crees que el apareamiento que puede ocurrir entre los
R ibAs : En relación con la primera pregunta, el apareamiento es un problema muy impor-

Además, el desarrollo del sistema inmunitario favorece la formación en el timo de linfocitos específicos frente a antígenos extraños, eliminando aquellos con alta capacidad de reconocimiento de antígenos autóctonos. Un avance importante en el tratamiento del melanoma metastásico ha sido el desarrollo clínico de anticuerpos que bloquean CTLA4, un co-inhibidor del receptor que tiene un efecto dominante en la inhibición de las respuestas frente a antígenos autóctonos. Si en el laboratorio se generan grandes cantidades de linfocitos con un receptor de células T específico para un antígeno presentado por la célula tumoral, se pueden devolver a los pacientes como terapia celular adoptiva.3 Estos linfocitos se pueden obtener procesando lesiones tumorales y expandiendo linfocitos intratumorales a la interleucina-2, o introduciendo los dos genes receptores de células T específicos (receptor de cadena alfa y beta) en linfocitos utilizando vectores retrovirales o lentivirales.

Aunque el tratamiento se realizó con pocos pacientes, estamos seguros de que la pérdida de expresión de los antígenos en las células cancerosas no es tan importante como la pérdida de funcionalidad de los linfocitos, en base a los datos biológicos, al desarrollo cronológico y a los resultados que estamos tratando. con para construir. JARAQUEMADA: En caso de que este tratamiento sea estable y seguro, ha considerado alguna estrategia para poder tratar poblaciones reales, en las que la mayoría de personas no son idénticas en HLA. En tercer lugar, con base en los estudios de Davis Baltimore, los TCR se sitúan en células madre hematopoyéticas, en las que hay una formación endógena de linfocitos transgénicos y dominantes, que se seleccionan en el timo.

Inducción de tolerancia para la alergia

Graça
M uñoz : ¿Se utilizan anticuerpos anti-CD4 en humanos para trasplante, o lo que nos has
g RAçA : Los anticuerpos anti-CD4 fueron unos de los primeros anticuerpos monoclo-
R ibAs : ¿Nos puedes explicar un poco más cómo actúa el anticuerpo anti-CD4? ¿Inte-
g RAçA : La señalización intracelular no se conoce, pero sabemos que los anticuerpos
R ibAs : Debido a que es un correceptor del receptor de células T, ¿modifica la especifi-
g RAçA : Es difícil de estudiar, pero sabemos que los linfocitos T reciben una señal deriva-
Á LvARez -v ALLinA : ¿Disponéis de datos res- pecto a si los anticuerpos monovalentes
Á LvARez -v ALLinA : ¿Has probado el anti-CD4 que vosotros usáis como Fab en vuestro mo-
g RAçA : No, no lo hemos estudiado
g RAçA : Precisamente estamos llevando a cabo estos experimentos ahora, aunque sólo
deL v AL : Cuando se realiza el tratamiento junto con la exposición al alérgeno se pro-
J uAn : La inmunoglobulina específica de todos los modelos que has comentado, ¿se
g RAçA : En los animales sensibilizados sin tratamiento, la inmunoglobulina específica

Usaremos este ejemplo como un caso ilustrativo de la pérdida de tolerancia inmune y su posible inducción terapéutica. Entre los diversos componentes de la inmunidad adaptativa, las células T CD4+ desempeñan un papel clave en la regulación de la respuesta inmunitaria. El timo, donde se desarrollan las células T, es también un órgano esencial para imponer la tolerancia inmunitaria.

Se ha demostrado que este estado de tolerancia inducido por anticuerpos depende de la inducción de células Treg13. También se ha observado que la tolerancia es dominante y se transmite: a los animales tolerantes se les pueden inyectar linfocitos T capaces de rechazar. Cabe señalar que los anticuerpos utilizados para inducir tolerancia son isotipos anti-CD4 que no provocan directamente la muerte de las células que reconocen. Vimos que el mantenimiento de la tolerancia natural se basa en varios mecanismos que trabajarán juntos para prevenir la autoinmunidad.

Inmunoterapias experimentales * para la enfermedad celíaca, un modelo

L eón : En relación a la primera pregunta, la composición de la flora intestinal de los ce-
Á LvARez -v ALLinA : Cuando has presentado los resultados del larazótido, no se ha visto una
L eón : No conseguimos ver un efecto dosis- respuesta, pero es algo muy habitual en los
g onzÁLez : Dada la alta prevalencia de la enfermedad celíaca y que se asocia exclusi-
J uAn : Pero el problema del test es que, por sí misma, el 20% de la población posee
J uAn : El desarrollo de la respuesta inmu- nitaria dependiente de células T durante
L eón : Estoy totalmente de acuerdo. La única manera de averiguar si una enfermedad se
J uAn : Respecto a lo que has comentado acerca de los biomarcadores, hace unos 4
L eón : No es reproducible porque el propio grupo no es capaz de manufacturarlos. Pero

En el futuro, este hecho puede permitir el tratamiento de la enfermedad celíaca con una combinación de dos o más fármacos, acompañados de una dieta sin gluten. CCX282B: inhibidor de los receptores CCR9 de los linfocitos T, impediría su migración a la lámina propia y consecuentemente la activación de la cascada inmune patológica. Las regulaciones que rigen el etiquetado de productos alimenticios en la mayoría de los países son deficientes.

Actualmente no se contempla su uso como sustituto de la dieta sin gluten y no existen en el mercado. Por tanto, bloquea el paso paracelular del gluten a la lámina propia, lo que puede ayudar a prevenir el desarrollo de la cascada inmunitaria patológica característica de los pacientes celíacos. El próximo objetivo de la empresa Alvine es evaluar la eficacia de las proteasas, no como un pretratamiento de los alimentos, sino como un complemento real de la dieta.

Inmunoterapias en esclerosis múltiple

Sospedra
g RAçA : Me ha sorprendido que en los en- sayos con células madre hematopoyéticas los
s osPedRA : Después del tratamiento con alemtuzumab no se recuperan los valores pre-
g RAçA : Pero hay un porcentaje significativo de mortalidad en las personas que han recibi-
s osPedRA : El principal problema del alem- tuzumab es que se asocia a casos de leucoen-
Á LvARez -v ALLinA : ¿Por qué vía realizáis la infusión de células mesenquimales y a qué
s osPedRA : Nosotros realizamos la infusión por vía intravenosa, pero algunos grupos de
Á LvARez -v ALLinA : Pero por vía intravenosa la mayoría de las células permanecen en el pul-
s osPedRA : Sí, pero cada grupo de investiga- ción usa células mesenquimales diferentes, e
J uAn : Por otro lado, el papel de las células mesenquimales en los procesos de regulación

El interferón beta (IFN-b) es un fármaco de primera línea en el tratamiento de la EM. El acetato de glatiramer (Copaxone ® ) consta de polímeros de aminoácidos sintéticos compuestos por secuencias aleatorias de cuatro aminoácidos (tirosina, glutamato, alanina y lisina) en cantidades molares fijas y se utiliza como fármaco de primera línea en el tratamiento de la EM. No tiene efectos secundarios graves y, por lo tanto, es un fármaco prometedor en el tratamiento de la EM.

Los anticuerpos monoclonales se encuentran entre los agentes más prometedores para el tratamiento de la EM. Daclizumab es otro anticuerpo monoclonal humanizado en desarrollo para el tratamiento de la EM. La eficacia de daclizumab cuestiona el papel real de las Treg en la patogenia de la EM.

Vacunas contra el VIH

Plana
g onzÁLez : ¿Habéis estudiado los anticuer- pos en los pacientes tratados? ¿Se producen
P LAnA : Sí, hemos analizado los anticuer- pos, pero no detectamos cambios porque
R uiz -C AbeLLo : Los resultados que has pre- sentado con células dendríticas son pareci-
P LAnA : Estoy de acuerdo, es un problema común en muchas enfermedades, como el
R ibAs : Debemos ser conscientes de que los modelos experimentales son sólo eso, mode-
R uiz -C AbeLLo : Estoy de acuerdo con lo que comentas, pero creo que hay que reorientar

Correlatos de protección: factores para evaluar la inmunoterapia en la infección por VIH-1. Hasta ahora, se han intentado varias estrategias de inmunoterapia en la infección por VIH-1 para abordar la disfunción de las células del sistema inmunitario y lograr el control de la replicación viral. Se han descrito y probado varios enfoques a lo largo de los años para lograr el control de la infección por VIH-1 mediante la mejora de la respuesta inmunitaria del huésped.

El uso de células dendríticas para la inmunoterapia de la infección por VIH-1 aprovecha las vías naturales de reconocimiento y procesamiento de antígenos en el control inmunitario del huésped. Vía de administración Intravenosa, subcutánea, intradérmica, intraganglionar Supresión de la respuesta de linfocitos Treg (TGF, IL-10), PD-1, CTLA-4. Puntos finales inmunológicos Incremento en el número de células T polifuncionales Incremento en el tamaño y amplitud de la respuesta CTL.

Vacunas contra la malaria

Alonso
C eLAdA : Me ha sorprendido que los anti- cuerpos sean protectores; es decir, se obtie-
A Lonso : Los estudios a que te refieres se llevaron a cabo en dos periodos diferentes
C eLAdA : Pero se han obtenido 400 o 500 anticuerpos CD contra constituyentes de los
A Lonso : La vacuna sólo se ensaya en niños porque, en primer lugar, el objetivo es preve-
L eón : Puede reemplazarse la serie blanca de un ratón con serie blanca humana, es de-
A Lonso : Los investigadores de Glaxo Smith- Kline disponen de modelos de ratón huma-
J uAn : En primer lugar, cuando mencionas la inmunidad natural, ¿te refieres a la inmu-
A Lonso : Sí, cuando hablo de la inmunidad natural me refiero a la inmunidad adquirida
Á LvARez -v ALLinA : Teniendo en cuenta la difi- cultad de obtención y el desconocimiento de
A Lonso : Primero, es clave tratar de enten- der la adquisición de la inmunidad natural
d eL v AL : ¿Qué condiciones sanitarias tie- nen los niños que se han seleccionado
A Lonso : Hay que buscar un equilibrio entre la seguridad, la eficacia y la inmunogenici-

Transmisión y tratamiento de la malaria La malaria es una enfermedad parasitaria causada por la infección con Plasmodium spp. La combinación de RTS,S y AS01 permite que la vacuna produzca una fuerte respuesta inmune.3,8. Los buenos resultados de estos estudios permitieron avanzar en fases clínicas posteriores para demostrar la eficacia de la vacuna.

Al mismo tiempo, también se realizaron estudios para determinar la efectividad de la vacuna en niños menores de 1 año. Luego se tomaron muestras de sangre y se analizaron durante los siguientes 6 meses para evaluar la efectividad de la vacuna. ¿Por qué no se ha obtenido un modelo de ratón humanizado para estudiar la malaria?

Utilización de marcadores

Sánchez-Fueyo
g onzÁLez : Los progenitores hematopoyé- ticos, que se ha descrito que también se
s ÁnChez -F ueYo : Se ha especulado mucho sobre si los leucocitos pasajeros presentes
g RAçA : Una de las poblaciones celulares que parece asociada a este fenómeno son
C eLAdA : ¿En vuestro estudio se incluyeron pacientes con hemocromatosis? Estos pa-
R uiz -C AbeLLo : ¿Habéis estudiado el papel de los linfocitos NK en los grupos de pacientes
P uJoL : ¿Es cierto que los estudios que se realizaron hace algunos años en el Massa-
g RAçA : Parece muy difícil identificar un úni- co biomarcador, y además los mejores bio-
s ÁnChez -F ueYo : Creo que es probable que acabemos usando una combinación que

Tolerancia operativa en trasplante hepático: experiencia con protocolos de retirada selectiva de inmunosupresores. En 2007, Martínez-Llordella et al.17 publicaron el primer estudio que evaluó la utilidad de los marcadores de expresión génica en receptores de trasplante hepático. Posteriormente, Kawasaki et al.18 realizaron un estudio similar comparando perfiles de expresión génica en muestras obtenidas de células mononucleares extraídas de sangre periférica (Agilent cDNA microarray) de 11 pacientes tolerantes que recibieron un trasplante hepático de donante vivo con 11 grupos control sanos.

Pons et al.13 evaluaron la expresión de foxp3 (forkhead box P3; considerado el gen maestro de los linfocitos T reguladores) durante el proceso de retirada de la inmunosupresión en 12 receptores de trasplante hepático estables en tratamiento inmunosupresor con ciclosporina. En un estudio realizado por Li et al.20 se determinó la expresión de foxp3 en tejido hepático y se encontró que estaba aumentada en pacientes tolerantes en comparación con pacientes estables o con rechazo crónico. Más recientemente, Bohne et al.21 compararon el perfil de expresión génica (usando Illumina, Affymetrix y TaqMan PCR) en la Tabla II.

Debate general

C eLAdA : Uno de los mayores avances den- tro de la inmunoterapia será conseguir un
J uAn : El tratamiento personalizado es el objetivo central de la investigación en inmu-
P uJoL : Un buen ejemplo de cómo deben realizarse los tratamientos personalizados
R ibAs : Pero tampoco podemos simplificar las cosas. No es justo considerar que una
L eón : El problema de intentar un nuevo tratamiento sin pensar en los biomarcado-
R ibAs : Otro aspecto que nos preocupa es el coste, pero hay que tener en cuenta que
P iuLAts : Como una de las áreas relaciona- das con la inmunología, se ha discutido el
J uÁRez : Históricamente la alergia ha sido una de las últimas enfermedades en incor-
L eón : Enlazando con la alergia, me gusta- ría añadir que es muy difícil realizar ensa-
J uAn : Estoy de acuerdo con lo que habéis dicho, pero también creo que hay factores
J uAn : Aprovecho para introducir otro ele- mento en el debate, que tiene que ver con
Á LvARez -v ALLinA : En este país hay fondos públicos suficientes, tanto en el ámbito es-
L eón : Existe una vía intermedia que tam- poco se explota en España, pero sí en otros
C eLAdA : El objetivo de nuestro centro de investigación en el Parc Científic de Barce-
Á LvARez -v ALLinA : La verdad es que felicito a los que habéis conseguido tantos recursos
F RAnCo de s ARAbiA : El desconocimiento de las fuentes de inversión no es un proble-
v iLeLLA : Uno de los principales obstáculos que nos encontramos los grupos pequeños
P uJoL : Desde un punto de vista general, creo que ha sido muy difícil poner en marcha em-
R ibAs : Mi experiencia con la Food and Drug Administration ha sido enriquecedora. Cada
g onzÁLez : Me gustaría saber vuestra opinión sobre el eco que tuvo la noticia publicada
J uAn : Entiendo que se trata de un ejem- plo más de lo que ocurre en general con la
P iuLAts : Precisamente este aspecto se plan- teó desde la Real Academia de Farmacia de
A Lonso : Hay muchos ejemplos del problema de la divulgación científica a través de los
C eLAdA : Indudablemente, los medios de co- municación tienen parte de culpa en los pro-

Mi impresión es que la alergia es el patito feo de la inmunología y que su conocimiento no es suficientemente profundo. En los últimos 10 años se ha producido una explosión de conocimientos en el campo de la alergia, en la que se han desarrollado el descubrimiento de los mecanismos básicos de regulación que conducen a la producción de inmunoglobulinas, la identificación molecular de epítopos alergénicos, etc., y otros elementos de la alergia. . , iban en aumento. Y es por eso que la alergia se ha convertido ahora en un área prioritaria en inmunología.

PRATs: Desde mi punto de vista, viniendo de la industria farmacéutica, comparto las opiniones anteriores. Desafortunadamente, existen relativamente pocas empresas biotecnológicas en España, por lo que el posible desarrollo en campos como la inmunología es limitado. ALonso: Hay muchos ejemplos del problema de la divulgación de la ciencia por el de la divulgación de la ciencia por los medios.

Monografías Dr. Antonio Esteve publicadas