Concentración de vitamina C en el hígado de la agachadiza experimental en función de las dietas.422 Tabla 8. La concentración de LA2PP en el hígado de los peces aumentó proporcionalmente con el aumento de la concentración de LA2PP en las dietas.
ANTECEDENTES
- Acuacultura
- Género Lutjanus
- Requerimiento de Vitaminas en Distintas Especies de Peces
- Vitamina C (Ácido Ascórbico)
- Requerimiento de Vitamina C (Ácido Ascórbico) en Peces
Después de dos semanas de alimentación, descubrieron que la concentración de AA en el músculo y el hígado aumentaba al aumentar los niveles en la dieta. Con base en sus resultados, determinaron que la concentración máxima de almacenamiento de AA en el músculo y el hígado era de 207,2 y 93,4 mg/kg de dieta, respectivamente.
HIPÓTESIS
OBJETIVOS
Objetivo General
Objetivos particulares
METODOLOGÍA
Periodo Experimental
Dieta Experimental
Para preparar cada una de las dietas, los ingredientes secos como harina de pescado, soya y camarón se molieron finamente con un molino de martillos marca Micron y se mezclaron junto con dextrina y alginato en una licuadora Kitchen Aid con capacidad de 5L para obtener una mezcla homogénea; Posteriormente se agregaron los micronutrientes, primero se agregaron todas las vitaminas; Este procedimiento se realizó obteniendo una pequeña cantidad de la mezcla homogénea para preparar una premezcla de estos ingredientes; De igual forma se incluyó por separado la vitamina C y la colina y finalmente los minerales. Después de secar los alimentos, se trituraron y tamizaron hasta un tamaño de 3,5 mm para formar un gránulo adecuado al tamaño de la boca de la progenie de L. Se utilizó un cromatógrafo líquido para detectar y cuantificar el ácido ascórbico en las dietas experimentales. Modelo HP Hewlett Packard 1050 con detector ultravioleta visible (UV-Vis); Se utilizó una columna Lichrosorb RP18 (5 µm, 250 x 4 mm) a temperatura ambiente.
Para la extracción de ácido ascórbico en las dietas experimentales se tomó aproximadamente de 3 a 5 g de muestra homogeneizada, a la que se le agregaron 25 ml de cloroformo y 100 ml de agua destilada, se mezcló por 25 minutos y se dejó por otros 25 minutos. Del sobrenadante resultante de la mezcla reposada se tomaron 30 ml y luego se centrifugó a 2739 x g durante 5 minutos (modelo Beckman Gs-15R); Se tomó 1 ml del sobrenadante obtenido por centrifugación y se añadió una solución tampón. El agua de mar fue bombeada desde la playa de Las Brujas y pasada por filtros de arena y cartuchos de 16 micrómetros.
Peces Experimentales
Para determinar el nivel de almacenamiento de vitamina C en el hígado de los peces, se recolectaron 12 muestras de cada tratamiento al final del experimento. Para detectar y cuantificar el ácido ascórbico en el hígado de los peces experimentales se utilizó el mismo sistema de cromatografía utilizado en el análisis de los alimentos. Se tomaron aproximadamente 2 g de hígado y se realizó una colección de este tejido, al que se le añadió ácido metafosfórico al 5% en presencia de DTT y luego se homogeneizó mediante un baño de hielo.
Finalmente se centrifugó durante 6 minutos a 2739 g (modelo Beckman Gs-15R), se filtró el sobrenadante a través de una membrana con un tamaño de poro de 0,22 µm y se tomaron 20 µl para inyectar al cromatógrafo.
Régimen de Alimentación
Variables de Respuesta
Análisis Histológico
- Técnicas Especiales de Tinción
- Criterios Utilizados para Determinar el Grado de Severidad de los Signos
- Proporción de Órganos Afectados
Se realizaron cortes de 5 micras en un microtomo rotatorio (Jung Histocut Leica #820), los cortes obtenidos se tiñeron con la técnica de hematoxilina y eosina y se montaron con bálsamo de Canadá para estudio histopatológico bajo microscopio compuesto (Olympus mod. CH - 30 RF100, USA ), (Lee y Luna, 1968; Drury y Wallington, 1980). Cuando se observaron granulomas en las secciones del hígado, se utilizaron los métodos de tinción de Gram Humbertone para detectar bacterias grampositivas y gramnegativas y el método de tinción de Ziehl Neelsen para detectar bacterias acidorresistentes (Lee y Luna, 1968). Criterios utilizados para determinar el grado de severidad de los signos clínicos reportados en este trabajo.
Para determinar el grado de gravedad de los signos clínicos causados por la deficiencia de vitamina C, consideramos la escala de valores que se muestra en la Tabla 2. La escala de valores para determinar el grado de gravedad de los signos clínicos debido a la deficiencia de vitamina C. POA: Proporción de órganos afectados NOG: Número de órganos afectados TOR: Número total de órganos examinados.
Diseño Experimental y Análisis Estadístico
La relación entre la concentración de LA2PP y el contenido de lípidos en el cuerpo de ratas experimentales. La relación entre la concentración de LA2PP y el contenido de proteína en el cuerpo de corderos experimentales. La concentración de vitamina C en el hígado de ratas experimentales en función de la dieta.
Según los resultados obtenidos, la cantidad de vitamina C almacenada en el hígado de las ratas experimentales aumentó significativamente (P<0,05) con el aumento de la concentración de vitamina C en la dieta. La relación entre la concentración de vitamina C (mg/kg de dieta) en las dietas experimentales y el nivel de almacenamiento de vitamina C en el hígado de las primerizas experimentales. Cambios patológicos observados en diferentes órganos de peces experimentales alimentados con diferentes niveles de vitamina C.
En la Tabla 8 se describen las patologías observadas en el hígado de peces experimentales de los diferentes tratamientos. Por tanto, es posible que las concentraciones de vitamina C presentes en el cerebro de juveniles de L.
Determinación de la Composición Proximal y de la Concentración de Vitamina
Análisis Proximal de la Composición Corporal de los Peces
A continuación, en la tabla 4, se presentan los promedios obtenidos del análisis del cuerpo proximal de pargos (L. guttatus), al inicio y al final del experimento. De acuerdo con los resultados mostrados en la Tabla 4, el aumento de la concentración de L-ascorbil-2 polifosfato (LA2PP) en la dieta de los pargos juveniles L. De acuerdo con los resultados mostrados en las Figuras 5 y 6, existe una correlación positiva significativa ajustada con la modelo lineal (P<0,05) entre la concentración de LA2PP y el contenido de lípidos y proteínas en el cuerpo de pargos experimentales.
Descubrieron que al aumentar la concentración de ácido L-ascórbico, L-ascorbilo-2-sulfato y L-ascorbilo-2-polifosfato en la dieta, el contenido de proteínas en su cuerpo aumentaba de 67 a 71. A su vez, Bendich et al. . 2009), afirma que la función antioxidante de la vitamina C previene la degradación oxidativa de los lípidos. El hecho de que en el presente estudio la cantidad de proteínas y lípidos fuera mayor en los pargos que recibieron una mayor concentración de LA2PP concuerda con los resultados de los trabajos antes mencionados y se concluye que debido a un mejor metabolismo puede ser. de proteínas y la inhibición o disminución de la oxidación de lípidos en el organismo del pez por el efecto de la vitamina en cuestión, que favoreció su depósito en el organismo.
Variables de respuesta
- Crecimiento en peso
- Tasa de Conversión Alimenticia
- Requerimiento Óptimo de Vitamina C
Con base en lo anterior se puede concluir que la deficiencia y excesiva inclusión de vitamina C en la dieta de especies marinas como el Pargo L en las dietas y el peso ganado por los pargos juveniles (Fig. 8). Correlación del punto de interrupción entre la concentración de LA2PP de dietas experimentales y el aumento de peso de los pargos experimentales.
Con base en este método gráfico, la concentración de vitamina C para el crecimiento óptimo de hongos juveniles se puede determinar en 137 mg de L-ascorbilo-2 polifosfato/kg de dieta, equivalente a 47,95 mg de ácido ascórbico/kg de dieta. En cuanto a la concentración óptima de vitamina C para el crecimiento, diferentes autores han encontrado resultados variables en diferentes especies de peces carnívoros marinos juveniles (Tabla 6). Según los resultados presentados en el Cuadro 6, hubo diferencias en la concentración óptima de vitamina C entre las especies evaluadas.
Signos Clínicos Externos
Proporción de pargos juveniles que mostraron signos clínicos en función de la concentración de vitamina C. Al respecto, Yi et al. 2009), realizaron una evaluación del efecto de los ésteres de vitamina C como inhibidores de la tirosinasa en hongos. Sus resultados mostraron que una mayor concentración de vitamina C en los hongos tendía a disminuir la producción de melanina debido a la inhibición de la tirosinasa.
La Tabla 7 a continuación muestra los niveles de almacenamiento de vitamina C en el hígado de L pargo. Esto se puede confirmar observando la Figura 13, que muestra que existe una correlación positiva significativa (P<0,05), ajustada al modelo lineal, entre la concentración de vitamina C en las dietas experimentales y el nivel de almacenamiento de la misma vitamina en las dietas experimentales. hígado de los peces experimentales. Por su parte, Ai et al. 2004 y 2006) encontraron una correlación positiva entre la concentración de vitamina C en la dieta del pez sierra japonés (Lateolabrax japonicus g) y calamares japoneses (Pseudosciaena crocea g) con respecto al grado de almacenamiento en sus hígado.
Análisis Histológico
- Análisis Histológico de los Peces Iniciales
- Análisis Histológico de los Peces Experimentales
- Alteraciones Histológicas Observadas en el Hígado
- Alteraciones Histológicas Observadas en el Riñón
- Alteraciones Histológicas Observadas en el Cerebro
- Alteraciones Histológicas Observadas en las Branquias
Las dietas alimentadas con peces VC0, VC20 y VC47 fueron las que presentaron mayores problemas en este órgano, y a medida que aumentó la concentración de vitamina C en la dieta, algunos de los signos clínicos observados en la misma disminuyeron. Mencionan que la vitamina C afectó la composición de los lípidos, ya que el ácido ascórbico disminuyó el contenido de ácidos grasos insaturados y aumentó el contenido de ácidos grasos saturados en el hígado al aumentar la concentración de vitamina C en la dieta. Existen estudios sobre los factores que inciden en la acumulación de ácidos grasos en el hígado, entre los que se encuentra la composición de la dieta.
En el presente estudio no se midió la concentración de ácidos grasos en el hígado de los peces experimentales, pero es necesario que en investigaciones posteriores se identifique la causa de la acumulación de grasa en este órgano. La vacuolación del epitelio de los túbulos renales (acumulación de grandes vacuolas en el citoplasma de las células debido al hinchamiento de las mitocondrias) (Ferguson, 2006), sólo se observó en las dietas con menor concentración de ácido ascórbico (VC0), VC20 y VC47), mientras que en todos los tratamientos se produjo atrofia glomerular y dilatación de los vasos sanguíneos del glomérulo; Sin embargo, el número de organismos afectados y el grado de severidad fueron menores en las dietas que tenían un mayor nivel de inclusión de ácido ascórbico (Tabla 8), (Fig. Sección del riñón posterior de los peces experimentales alimentados con la dieta VC0). muestra atrofia glomerular con dilatación obvia de los vasos sanguíneos (flechas delgadas), atrofia de los túbulos proximales (flecha doble) y vacuolación de los túbulos renales distales (flecha gruesa), barra (20 µ) H&E.
Según sus resultados, concluyeron que la mayoría de los cambios ocurrieron en las células ganglionares de los animales alimentados con una dieta carente de vitamina C. En la Tabla 8 se describen las patologías observadas en las branquias de los peces de los diferentes tratamientos.
CONCLUSIONES
RECOMENDACIONES
LITERATURA CITADA
Effect of ascorbic acid on the immune response of catfish, Mystus gulio (Hamilton), to different Aeromonas hydrophila bacteria. Effect of dietary ascorbic acid on growth and nonspecific immune responses of tiger pufferfish, Takifugu rubripes. A critical review of the ascorbic acid requirements of cold-water and cold-water fishes (salmonids, percids, plecoglossids and flounder).
The effect of transport stress on tissue ascorbic acid levels of Mexican silverside (Chirostoma estor estor Jordan, 1979). Effects of the different levels of dietary vitamin C on growth and tissue ascorbic acid changes in parrotfish (Oplegnathus fasciatus). Comparison of L-ascorbyl-2-monophosphate-Ca with L-ascorbyl-2-monophosphate-Na/Ca on growth and tissue ascorbic acid concentrations in Korean rockfish (Sebastes schlegeli).
