Al Departamento de Liceo Agropecuario, Área de Química y Laboratorio de Productos Naturales de la Universidad Autónoma Chapingo por brindarme la infraestructura, materiales y apoyo del equipo que colaboró con la investigación. Benito Reyes Trejo, por su apoyo en la dirección, revisión, observaciones y recomendaciones, así como sus conocimientos aportados en este proyecto de investigación. Al núcleo de profesores de la Maestría en Ciencias Forestales y del Departamento de Ingeniería Agroindustrial, por todos sus conocimientos.
El laurel aromático (Litsea glaucescens) es una especie forestal no maderable (PFNM) ampliamente utilizada en México.
INTRODUCCIÓN
Antecedentes
México es considerado un país con una larga tradición en el uso de la medicina tradicional y sus prácticas curativas, un poco de esta historia está plasmada en el “Libro de Hierbas Medicinales de los Indios”, el primer libro de medicina tradicional. basado en plantas de origen azteca y considerada una de las fuentes bibliográficas más importantes de América Latina, cuatro siglos después conocida como Códice Badiano (Códice De la Cruz- Badiano), en esta obra se analizan más de 150 plantas endémicas de México y sus usos medicinales. uso (Valverde, 1984). Se estima que la flora medicinal mexicana contiene alrededor de 4000 (15% del total de la flora mundial) plantas que tienen potencial terapéutico. La población mexicana utiliza entre 3,500 y 4,000; 3.600 se recolectan en estado silvestre; 1.500 se utilizan habitualmente sin procesar; 370 se cultivan en el huerto familiar o en comercios; y 35 especies se encuentran en estado de amenaza debido a diversos factores.
Aproximadamente sólo el 1% de las plantas medicinales han sido investigadas exhaustivamente por sus propiedades medicinales.
Justificación
Planteamiento del problema
6. Debido a esta situación, los ejidatarios de Nopalillo buscan alternativas que les permitan canalizar el laurel mexicano hacia un mercado que reconozca la calidad del producto. También planean incorporarse al mercado de plantas medicinales, ya que el laurel tiene reconocidas propiedades terapéuticas. tanto por la medicina popular como por evaluaciones académicas, donde se destacan sus efectos carminativos, ansiolíticos, antimicrobianos, antioxidantes y antiinflamatorios. Este estudio tiene como objetivo realizar evaluaciones fitoquímicas que permitan caracterizar las propiedades citotóxicas y antioxidantes del laurel aromático mediante pruebas con el modelo de Artemia salina, siguiendo el procedimiento descrito (Meyer et al. 1982) y aplicando las pruebas de Folín-Ciocalteu, adaptadas a microplacas. . y radicales libres estables en el caso de la evaluación de antioxidantes, estos estudios provienen de este ejido específico, ya que se han realizado investigaciones en otras partes del país, generando variabilidad en algunos componentes químicos de los metabolitos secundarios contenidos en esta planta. Cabe señalar que la presencia de metabolitos secundarios está asociada al crecimiento natural de la planta y forma parte de las estrategias de defensa contra patógenos y depredadores (Yan et al., 2000).
Estas mismas variaciones pueden ocasionar que los resultados de los estudios sean diferentes a los ya reportados, por lo que este estudio es de gran importancia para brindar soluciones a los problemas reales de un proyecto productivo ejidal y generar información científica que respalde los componentes químicos en los laureles. aromático.
OBJETIVOS
Objetivo general
Objetivo particular
REVISION DE LITERATURA
- Antecedentes Nacionales e internacionales
- Ámbito legal del uso de plantas medicinales
- Principios teóricos
- Bases teóricas del Laurel (Litsea glaucescens)
- Descripción
- Información taxonómica
- Nombre común
- Distribución
- Usos de Litsea glaucescens
- Metodologías presentes en el trabajo de investigación
- Las plantas medicinales
- Métodos de extracción de componentes activos
- Aceites esenciales
- Resonancia magnética nuclear
- Cromatografía de gases acoplado a espectrometría de masas
- Actividad antioxidante
- Ensayo ABTS
- Ensayo FRAP
- Actividad Citotóxica
- Pruebas de Artemia salina
9 Así, se puede decir que la medicina alternativa o el uso de plantas para tratar problemas de salud es un método aceptado por la sociedad y que actualmente está en auge. Fitoquímica: Uno de los principios teóricos para el estudio del siguiente proyecto se centra en el concepto de fitoquímica. Los extractos etanólicos de la corteza muestran la presencia de flavanonas (pinostrobina, pinocembrina y dihidrocalconas) (López et al., 1995).
Las plantas medicinales pueden tener un uso muy diverso, ya que se utilizan diferentes partes de la planta, semillas, raíces, hojas, frutos, cáscaras, corteza y flores (Jamshidi-Kia et al., 2018).
MATERIALES Y MÈTODOS
- Descripción del área de estudio
- Recolecta de la planta
- Aceite esencial de laurel aromático
- Determinación de espectros de RMN
- Métodos para la determinación de actividad antioxidante
- Método para la evaluación citotóxica
- Cromatografía de Gases Acoplada a Espectrometría de Masas
El aceite esencial se obtuvo por hidrodestilación, utilizando un equipo tipo Clevenger, en un matraz de fondo plano de 1 L se colocó la cantidad de 100g de hojas secas o frescas de laurel aromático perfectamente trituradas, se agregaron unos 500 ml de agua para macerar. . Para realizar la prueba ABTS+, se preparó la solución de radicales ABTS mezclando volúmenes iguales de las soluciones A y B. Una vez pasado el tiempo de reposo de 16 horas se tomaron 1800 µL de la mezcla y volumétricamente 25 ml con metanol puro para obtener la solución ABTS+, esta solución se debe verificar en el equipo de microplacas en un rango de absorbancia de 0.7 a 1.2.
En tubos Ependorf, la cantidad requerida de muestra se mezcló con propanol para obtener valores de absorbancia que estuvieran dentro de la curva de calibración (Tabla 6). Luego, se colocaron 20 μL de muestra en cada pocillo de una microplaca y se agregaron 180 μL. de solución ABTS·+, utilizando 200 µL de solución ABTS·+ como blanco, se dejó reposar durante 10 min a temperatura ambiente y en oscuridad, y luego se midieron los valores de absorbancia a 734 nm. Finalmente, con los resultados obtenidos de la curva de calibración de Trolox se realizó una tabla de concentración y absorbancia, así como una gráfica que permitió calcular los micromoles equivalentes de Trolox por microlitro de muestra (μmol ET/μL). Para realizar la prueba con las muestras, se colocaron 20 µL de muestra de aceite esencial en cada pocillo de la microplaca y se agregaron 180 µL de solución FRAP, utilizando 200 µL de solución FRAP como blanco y se dejó reposar por 10 minutos a temperatura ambiente. y en la oscuridad para luego medir los valores de absorbancia a 595 nm.
Finalmente, con los resultados obtenidos de la curva de calibración de Trolox se realizó una tabla de concentración y absorbancia así como una gráfica que permitió calcular los micromoles equivalentes de Trolox por mililitros de muestra (μmol ET/mL). 35 Como primer paso para realizar la prueba, fue necesario incubar las larvas de Artemia salina, las cuales se obtuvieron mediante compra en un acuario local en Texcoco de Mora. Se prepararon cinco concentraciones de µg·ml-1 a partir de la solución madre, se tomaron 0,5 ml de cada concentración y se colocaron en un vial. Estos viales se dejaron reposar durante 24 horas a temperatura ambiente para lograr la evaporación de cada concentración. Se realizaron tres réplicas.
Para el análisis estadístico de la prueba se tomaron los valores de las larvas muertas para realizar una estimación de la concentración de Lethal 50 (CL50), utilizando la función Probit. Para la preparación de la muestra se utilizaron 5 µL de aceite esencial en 995 µL de hexano grado HPLC; Se utilizaron hexano y acetona de calidad HPLC para lavar la columna.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
- Rendimiento de extracto
- Análisis por Resonancia Magnética Nuclear
- Capacidad Antioxidante de laurel aromático
- Determinación de la citotoxicidad del aceite esencial
Camacho et al., 2011, de igual manera afirma que el rendimiento del aceite esencial es de 0,1% a 1% del peso seco de la planta y Andreatta et al., 2012 indica que con el método de hidrodestilación se obtiene un rendimiento de 0,4%. obtenido. . Uno de los factores que también afecta el rendimiento del aceite esencial es el manejo durante el corte de las hojas y su secado, ya que durante el corte se rompen los tejidos celulares que contienen los aceites esenciales y durante el secado se pierden como consecuencia de la alta volatilidad (Vásquez et al., 2001). 48 La literatura menciona que entre los principales componentes del laurel aromático se encuentra el 1,8-cineol con un 22% (López et al., 1995), Lee, S.
Algunos autores asocian esta actividad biológica con el contenido de fenoles en los aceites esenciales (Arango et al., 2012), Sánchez et al., (2020) mencionan que los componentes de tipo terpénico también pueden influir en esta actividad. El potencial citotóxico de los aceites extraídos también se observa en otras especies de la familia del laurel (Cuadro 12), y se han realizado estudios sobre los posibles beneficios de este grupo de plantas (De et al. 2009). estudios de aceites esenciales por L. Uddin et al. 2020) menciona que además de efectos antioxidantes y ligeros trombolíticos, también tienen importantes efectos antidiarreicos.
En los estudios realizados por (Agius et al., 2007) evaluaron la citotoxicidad in vitro contra células MCF-7; e inhibición de la cisteína proteasa cruzina, donde se encuentran los aceites C. Algunos estudios realizados sobre el compuesto eucaliptol han demostrado eficacia para aliviar problemas estomacales, efectos antiespasmódicos y como relajante muscular intestinal (Magalhaes et al. 1998). Algunos estudios sobre aceites esenciales de origen vegetal muestran que el contenido de monoterpenos favorece su uso como agentes antimicrobianos y antifúngicos (García et al., 2008; Marchese et al., 2017; Tardugno et al. 2017).
Asimismo, los autores mencionan que la presencia de compuestos de α- y β-pineno en la familia de las lauráceas muestra una mayor mortalidad en Artemia salina (Schmidt et al. 2007). En cuanto al uso de especias, Jiménez Pérez et al.2011 mencionan que las especies Litsea con presencia de 1,8-cineol (eucaliptol) son las más utilizadas, y este compuesto se asocia con el olor agradable y el sabor astringente. Finalmente en este análisis se puede observar que existe diferencia en los compuestos de los aceites esenciales, Ghasemi et al., 2013 indica que algunos factores como la altitud, el manejo agronómico y las condiciones ambientales afectan la composición del aceite esencial.
Acevedo et al., 2013, también afirman que el hábitat afecta y modifica el contenido de aceites esenciales.
CONCLUCIONES
La capacidad antioxidante, actividad citotóxica y presencia de compuestos en las muestras recolectadas en diferentes localidades muestran diferencias significativas, por lo que se deben realizar estudios comparativos entre factores geobotánicos, técnicas de cultivo y tratamientos poscosecha.
LITERATURA CITADA
34;Práctica de autocuidado a través de la fitoterapia en un grupo de familias mexicanas”, en Archivos en Medicina Familiar, vol. Evaluación de la toxicidad de extractos de plantas cubanas con posible actividad antiparasitaria utilizando larvas de Artemia salina L. Principios de Fitoterapia”, en “Plantas medicinales y Fitoterapia”, Consejo General de Colegios Oficiales de Farmacéuticos, Madrid, Vol 1, pp.
Perfil aromático del aceite esencial de Litsea glaucescens y evaluación de su capacidad antimicrobiana para la conservación de alimentos. Taxones del bosque nublado de montaña de la Sierra Madre Oriental incluidos en la norma oficial mexicana. Protección ambiental - Especies nativas mexicanas de flora y fauna silvestre - Categorías de riesgo y especificaciones para su inclusión, exclusión o modificación - Listado de especies en riesgo.
Disponible en: https://www.gob.mx/profepa/prensa/asegura-profepa- 477-kilos-de-laurel-silvestre-en-aguascalientes-epecie-en-peligro-de-extincion PROFEPA, Procuraduría Federal de Protección Para el medio ambiente. NORMA Oficial Mexicana NOM-059- SEMARNAT-2010, Protección Ambiental-Especies nativas mexicanas de flora y fauna silvestre-Categorías de riesgo y especificaciones para su inclusión, exclusión o modificación-Lista de especies en riesgo. Desarrollo de un método para el seguimiento de la degradación oxidativa en lípidos y evaluación de la actividad antioxidante de productos naturales”, Arte y Ciencia Cosmética 12: 20-27.
Atlas of the Plantarum Institutio Mexicana Medicina, Mexico: Digital Library of Medicine. Martin de la Cruz' "Bog om indiske medicinske urter"; kontekst de fontibus in nahualt materia medica.
APÈNDICES