Estimación de sensibilidad y especificidad de la prueba diagnóstica "SAT" de brucelosis bovina en animales vacunados con S19. Estimación de sensibilidad y especificidad de la prueba diagnóstica "SAT-2Me" para brucelosis bovina en animales vacunados con S19. Se validaron dos pruebas serológicas, el tamiz de Rosa de Bengala (RB) y la Aglutinación Lenta en Tubo (“SAT”) y su variante Aglutinación Lenta en Tubo en presencia de 2 mercaptoetanol (“SAT 2-Me”) para el diagnóstico de Brucelosis bovina ( Brucella abortus ) en animales vacunados con S19 en la provincia del Carchi", se analizaron 117 sueros bovinos de estado sanitario y de vacunación conocido. Los valores estimados de sensibilidad y especificidad para cada prueba fueron: 100% y 59,4% (RB). 100 % y 67,6% ("SAT"), 88,9% y 68,5% ("SAT-2Me") respectivamente.
PROBLEMA
- PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
- FORMULACIÓN DEL PROBLEMA
- JUSTIFICACIÓN
- OBJETIVOS Y PREGUNTAS DE INVESTIGACIÓN
- Objetivo General
- Objetivos Específicos
- Preguntas de Investigación
Prueba de Aglutinación Lenta en Tubo (“SAT”): (pantalla) detecta IgM y en menor medida anticuerpos IgG (detecta infección aguda); muestra resultados falsos positivos con presencia de anticuerpos posvacunas, pueden ocurrir reacciones cruzadas con otras bacterias, en etapas crónicas de la infección hay resultados falsos negativos, se puede observar el fenómeno prozona (resultados negativos en las primeras diluciones y positivos en las siguiente) (Ron, 2003). Prueba de Aglutinación Lenta en Tubo en presencia de 2 Mercaptoetanol ("SAT-2Me"): es una modificación de la prueba "SAT"; Se pueden observar resultados falsos negativos con. Por esta razón, muchos de los estudios sobre la prevalencia de la enfermedad en el país no deben considerarse reales debido al problema de especificidad de las pruebas diagnósticas y la falta de información sobre el estado de vacunación en el Ecuador (Ibarra, 2013).
Se realiza una comparación entre las pruebas serológicas de Rosa de Bengala (RB), la prueba de aglutinación lenta en tubo ("SAT") y su variante de aglutinación lenta en tubo en presencia de 2 mercaptoetanol ("SAT-2Me") en animales vacunados. con S19. en la provincia del Carchi. Una de las opciones más comunes para controlar la brucelosis bovina es inmunizar al ganado con la vacuna S19. SAT' y 'SAT-2Me': requisitos de laboratorio medios, dificultad media, coste medio, riesgo de contaminación medio (Ron, 2003).
Validar mediante comparación de sensibilidad y especificidad dos pruebas serológicas de tamizaje (RB, “SAT”) y su variante (“SAT-2Me”) para el diagnóstico de brucelosis bovina (B. abortus) en animales vacunados con S19 en la provincia del Carchi. . ¿Cuáles son los valores estimados de sensibilidad y especificidad para las pruebas diagnósticas RB, "SAT" y "SAT-2Me"?
FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA
ANTECEDENTES INVESTIGATIVOS
Epítopos del núcleo lipídico A (LPS crudo), un polisacárido derivado del S-LPS de B. Corbel (2006) “Brucelosis en humanos y animales” afirma que la brucelosis es una enfermedad subaguda o crónica que puede afectar a muchas especies animales. Angulo (2006) “Un estudio de brucelosis bovina en Ecuador: implementación de cinco pruebas diagnósticas” mediante una prueba cutánea; rosa de bengala; fijación del complemento; ELISA;.
SAT-EDTA”; utilizar el enfoque bayesiano; Esto demostró que el porcentaje de animales positivos varió del 1,19% (RB e iELISA) al 10% (“ST”) en ambos cantones. Ibarra (2013) “Evaluación comparativa de pruebas diagnósticas en leche para brucelosis en el norte de Ecuador” afirma que la sensibilidad del miELISA (99,25%) fue mayor que la PAL (46,11%), pero la especificidad para ambas pruebas (98,5% y 94,92 %, respectivamente) no mostraron diferencias estadísticas. La seroprevalencia de brucelosis en la leche (40,24) no puede considerarse realista debido a la falta de información sobre vacunación.
La miELISA parece ser la prueba de leche más eficaz para diagnosticar la brucelosis en Ecuador, donde se desconoce el estado de vacunación.
MARCO TEÓRICO
- Síntomas
- Etiología
- Patogenia
- Estructura
- Respuesta Inmunológica
- Diagnóstico
- Prueba Rosa de Bengala (RB)
- Reacciones cruzadas
- Prevención
- Control
La aparición de la enfermedad depende de la capacidad del huésped para limitar esta reproducción (Ministerio de Salud Presidencia de la Nación, 2013). Tras la invasión inicial, la localización se produce en los ganglios linfáticos que drenan la zona. Existe la presencia de resultados falsos negativos, relacionados con casos iniciales o tardíos de infección, los resultados falsos positivos son causados por anticuerpos causados por: S19, reacciones cruzadas y falta de realización de la prueba (Blood, 1987).
La prueba es una variación de la prueba "SAT" con una cantidad constante de antígeno de una suspensión de B. Las bacterias gramnegativas que poseen derivados de moléculas de perosamina en LPS son responsables de la actividad antigénica cruzada observada con Escherichia hermanni y E. que la erradicación de la enfermedad va acompañada de reacciones cruzadas.
Corbel (2006) menciona que el medio más eficaz y confiable para controlar la brucelosis en bovinos, ovinos y caprinos es la vacunación; Sin embargo, aún no existe la vacuna ideal. La vacuna S19 tiene la desventaja de producir anticuerpos aglutinantes que interfieren tanto con las pruebas de aglutinación como con las pruebas de unión primaria, lo que dificulta la erradicación de la brucelosis.
METODOLOGÍA
- ENFOQUE METODOLÓGICO
- Enfoque
- Tipo de Investigación
- HIPÓTESIS
- DEFINICIÓN Y OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES
- MÉTODOS UTILIZADOS
- Procedimental
- Laboratorio
- ANÁLISIS ESTADÍSTICO
Las pruebas de diagnóstico (RB, "SAT" y su variante "SAT-2Me") detectan anticuerpos posvacunación debidos a la vacuna S19. Indica la probabilidad de obtener una prueba positiva en una persona portadora de la enfermedad. La extracción de sangre de la vena coccígea se realizó semanalmente durante diez meses utilizando vacutainers de tapa roja de 5 ml y la aguja respectiva.
Repita el procedimiento descrito para colocar las mismas cantidades de suero en la segunda fila. Para la interpretación de resultados se considera lo siguiente: el grado de aglutinación en cada una de las diferentes diluciones se puede clasificar como completo. Aglutinación completa: es aquella en la que el líquido de la mezcla suero-antígeno aparece claro, translúcido y una suave agitación no rompe los coágulos.
La lectura e interpretación de los resultados de la prueba de aglutinación lenta en tubo en presencia de 2-mercaptoetanol (“SAT-2Me”) deben realizarse bajo los mismos estándares que la prueba de aglutinación lenta en tubo (“SAT”). Para determinar las características de sensibilidad y especificidad de las pruebas diagnósticas se realizó el análisis descrito por Cañadas de la Fuente (2010).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
RESULTADOS
- Resultado comparativo de las pruebas diagnósticas RB, “SAT” y “SAT-2Me” 25
- Resultado comparativo de las pruebas diagnósticas “SAT-2Me” con las
- Estimación de sensibilidad y especificidad para la prueba diagnóstica RB para
- Estimación de sensibilidad y especificidad para la prueba diagnóstica “SAT”
- Estimación de sensibilidad y especificidad para la prueba diagnóstica “SAT-
- Comparación de las curvas ROC para RB, “SAT” y “SAT-2Me”. Se muestra
26 muestras fueron positivas para RB y "SAT-2Me" pero negativas para "SAT"; 47 resultaron negativos tanto para la prueba como para la variante. Estimación de sensibilidad y especificidad de la prueba diagnóstica RB para brucelosis bovina en animales vacunados con S19, Brucelosis bovina en animales vacunados con S19. Estimación de sensibilidad y especificidad de la prueba diagnóstica RB para brucelosis bovina en animales vacunados con S19.
En la Tabla 7 vemos que la prueba diagnóstica "SAT" tiene una sensibilidad del 100%, una especificidad del 67,6%. Evaluación de sensibilidad y especificidad para la prueba diagnóstica “SAT-2Me para brucelosis bovina en animales vacunados con S19 2Me para brucelosis bovina en animales vacunados con S19. En la tabla 8 se muestra la prueba diagnóstica "SAT-2Me", la cual tiene una sensibilidad del 88,9% y una especificidad del 68,5%.
Se comparó la capacidad discriminatoria de las pruebas diagnósticas de RB, "SAT" y "SAT-2Me", siendo el Área Bajo la Curva (AUC) de la prueba de diagnóstico de RB del 74,5%. El área bajo la curva de los gráficos generados para cada prueba se muestra en animales inoculados con S19.
DISCUSIÓN
Se obtuvieron muestras positivas para RB y "SAT" y negativas para la prueba "SAT-2Me", debido a que RB y "SAT" son capaces de detectar IgM e IgG como lo menciona Allan, 1976; Beh, 1974; Levieux, 1974, citado por Bercovich, (2000) donde escribe que la prueba "SAT" revela IgM, y en menor medida IgG; y Castro et al. 2005) afirman que la prueba RB detecta IgM, pero en mayor medida IgG1. Se presentaron muestras positivas a RB y negativas a las pruebas "SAT" y "SAT-2Me", debido a que la prueba RB tiene una alta sensibilidad como lo confirman Aparicio et al. 2003) donde describen que la prueba RB es una buena prueba de detección, que tiene alta sensibilidad; Sin embargo, cuando se trata de distinguir animales vacunados de infectados, su capacidad es escasa. Tres muestras resultaron positivas para “SAT” y “SAT-2Me” y negativas para la prueba RB debido a que las dos muestras tienen el mismo protocolo de ejecución como lo menciona Ariza (2002) donde indica que la prueba “SAT-2Me” es una variación. Es del test SAT, el mismo que utiliza 2-mercaptoetanol como agente reductor.
Nueve muestras resultaron positivas en la prueba "SAT" y negativas en las pruebas RB y "SAT-2Me", debido a que esta prueba tiene la capacidad de detectar principalmente IgM, mientras que la prueba RB y "SAT-2Me" detecta más IgG, como se mencionó. . por Ron (2003). SAT”, esto se atribuye a que es una prueba no estandarizada por lo que obtenemos resultados poco confiables. Resultados similares son descritos por Ariza (2002) donde menciona que la baja confiabilidad de los resultados obtenidos del “SAT-2Me” Estaría relacionado con la calidad de los reactivos, pero principalmente con la estandarización del procedimiento. Análisis de las características de sensibilidad de las pruebas (RB, "SAT" y "SAT-2Me"), todas tienen un alto porcentaje de sensibilidad atribuido al hecho de que las pruebas se basan en el mismo principio de aglutinación en portaobjetos, similar. los resultados fueron descritos por Ron (2003) donde afirma que las dos pruebas diagnósticas y variantes utilizan el principio de aglutinación utilizando un antígeno compuesto por una suspensión de B.
32 Los resultados de las pruebas comparativas de especificidad (RB, “SAT” y “SAT-2Me”) representan un bajo porcentaje de especificidad, lo que se debe a que las pruebas dan resultados falsos positivos debido a reacciones cruzadas con otras bacterias que comparten la Cadena O, tienen resultados similares descritos por Moriyón y López-Goñi (2000), donde las bacterias causantes fueron Escherichia hermanni y E. En la Tabla 9, podemos observar que la prueba diagnóstica “SAT” proporciona una información muy sensible y por ende discriminatoria. El poder es alto debido a que el área bajo la curva de prueba es de 83.8%, resultados similares fueron descritos por Cerda y Cifuentes (2011), donde mencionan que la curva ROC acepta valores entre 0% y 100%.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
CONCLUSIONES
RECOMENDACIONES
Se recomienda el uso obligatorio de pruebas confirmatorias altamente específicas para el diagnóstico de brucelosis bovina. Se recomienda realizar más estudios sobre reacciones cruzadas en pruebas diagnósticas para el control de la brucelosis bovina en la provincia del Carchi, con el fin de mejorar las características de especificidad de las pruebas. Prevalencia – Prevalencia y plan de control de la brucelosis bovina en hatos lecheros de la Sierra Norte ecuatoriana.
En: Zoonosis en sistemas de producción animal en áreas urbanas y periurbanas de América Latina. Obtenido de http://www.med.mcgill.ca/epidemiology/hanley/software/Hanley_McNeil_Radiology_82.pdf. Eficacia de diversas pruebas serológicas y antígenos para el diagnóstico de brucelosis bovina ante resultados serológicos falsos positivos por Yersinia enterocolitica O:9.
Aplicación al diagnóstico de Brucelossin Bovina.Ed. Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura y Organización Mundial de la Salud. Validación de técnicas diagnósticas para la detección de Brucelosis y estudio epidemiológico en una región andina del Ecuador.
