TGFβ Factor de crecimiento tumoral Beta TGFβ1 Factor de crecimiento tumoral Beta 1 TIMP Inhibidores tisulares de metaloproteinasas TMB Tetrametilbencidina. VCAM Proteína de adhesión de células vasculares VEGF Factor de crecimiento endotelial vascular VEGI Inhibidor del crecimiento endotelial vascular Virus de la hepatitis B VHB.
MARCO TEÓRICO
Enfermedad renal crónica
- Definición y clasificación
- Etiología y Epidemiología
- Intervención farmacológica
La Organización Panamericana de la Salud/Organización Mundial de la Salud (OPS/OMS) en colaboración con la Sociedad Latinoamericana de Nefrología e Hipertensión (SLANH) indican que la ERC afecta al 10% de la población mundial, con un promedio de 613 pacientes que reciben atención médica por millón. . residentes (PHAO 2018). Previene la disminución de la TFG Darbepoetina-alfa Diabetes y anemia tipo 2 No se encontró protección renal.
Fisiopatología de la ERC
- Inflamación
- Fibrosis renal
Esta activación estimula el sistema renina-angiotensina-aldosterona, que inicia la producción de proteínas de la matriz extracelular (MEC) y, en última instancia, la formación de tejido fibrótico (Joyce et al. 2017). 32 hay un aumento en la expresión de algunos factores de crecimiento como TGF-β y PDGF, que estimulan la producción de proteínas de la ECM mediante la activación de células en miofibroblastos y por tanto la acumulación de proteínas de la ECM en el tejido renal, lo que aumenta la contractilidad. de células renales disminuye (Gewin 2018).
Modelo de inducción de daño renal por adenina
37 Por otro lado, los niveles de sCr y BUN aumentan a partir de la segunda semana, siendo este aumento más marcado en la cuarta semana. Asimismo, los niveles de componentes sanguíneos disminuyen a partir de la cuarta semana, lo que sugiere que la ERC inducida por adenina se establece hacia la cuarta semana (Rahman et al. 2018).
TNF-α
- Estructura
- Vía de Señalización
- Apoptosis y Autofagia
- TNF-α en la fibrosis renal
Esto se inicia mediante la activación de la proteína serina/treonina quinasa 1 (ULK1), que actúa como sensor metabólico en ausencia de ATP (trifosfato de adenosina). La activación de ULK1 está regulada por la presencia de la proteína adenosina monofosfato quinasa (AMPK), que a su vez regulará el tráfico de Atg (Atg1, Atg2, Atg9), esencial para la formación del autofagosoma.
Antagonistas de TNF-α
- Definición, generalidades y clasificación
- Antagonistas de TNF-α en enfermedades crónicas
- Estudios clínicos
- Estudios preclínicos
- Antagonistas de TNF-α en enfermedad renal
- Estudios clínicos
- Estudios preclínicos
En el trabajo realizado en un modelo de Alzheimer se evaluó el efecto de ETA en ratones con el objetivo de evaluar la capacidad de ETA para atravesar la barrera hematoencefálica y su efecto neuroprotector, la administración fue intraperitoneal a 3 mg/kg 3 veces. una semana durante 12 semanas, se encontró una disminución de la placa amiloide y de la inflamación neuronal (Chang et al. 2017). Se encontró una disminución de la albuminuria y la proteinuria, MCP-1 y endotelina, así como una reducción de la actividad de NFκ (Elmarakby et al. 2008).
Etanercept (ETA)
- Descripción
- Mecanismo de acción
- Vía de administración, indicaciones terapéuticas y posología
- Farmacocinética
- Contraindicaciones y efectos adversos
- Inmunogenicidad
- Toxicidad
Se debe evaluar la presencia de tuberculosis activa o latente antes de iniciar el tratamiento, si está activa no se debe iniciar el tratamiento, y si está latente se debe iniciar el tratamiento antituberculoso antes de la administración de ETA (Ficha Técnica) Enbrel® (EMA). La mayoría de las ratas, ratones y conejos desarrollaron anticuerpos neutralizantes antes de la cuarta semana (Hoja de datos del producto Enbrel® EMA). 59 ocurrieron en todos los niveles de dosis, incluida ataxia, disminución de la actividad motora y disnea; estos signos desaparecieron 1 hora (i.v.) o 4 horas (s.c.) después de la administración (Hoja de datos del producto Enbrel® EMA).
No se detectaron anticuerpos neutralizantes en la mayoría de los monos después de 26 semanas de tratamiento con Enbrel, y no hubo efectos adversos limitantes de la dosis ni toxicidad en órganos diana después de la administración subcutánea dos veces por semana durante 4 o 26 semanas. . En el estudio de 26 semanas, los únicos efectos relacionados con el tratamiento fueron un aumento en la incidencia y/o gravedad de los infiltrados de eosinófilos y linfocitos en el lugar de la inyección (Hoja de datos del producto Enbrel® EMA).
Planteamiento del problema
Justificación
Hipótesis
Objetivos
Objetivo General
Objetivos Específicos
Metodología
- Diseño experimental
- Tipo de estudio
- Universo de estudio
- Grupos de estudio
- Análisis estadístico
- Tamaño de muestra
- Herramientas estadísticas
- Sede, consideraciones éticas y manejo de residuos
- Material y Métodos
- Diagrama de flujo (métodos)
- Ensayo de afinidad y cinética de etanercept a TNF-α de rata
- Modelo experimental
- Inducción de daño renal
- Administración de ETA
- Recolección de muestras
- Análisis bioquímicos y hematológicos
- Formula para cuantificación de la TFG
- Análisis histopatológico
- Determinación de la inhibición de TNF-α en suero
Para los resultados de las pruebas de afinidad y cinética se utilizó la prueba t de Student para datos pareados, considerando diferencias estadísticamente significativas en los resultados con un valor de p ≤0,05. Se utilizó el KIT ELISA para la cuantificación del TNF-α sérico de rata número de catálogo RAB0479 de la marca Sigma Aldrich® (Apéndice 3). Los anticuerpos de captura se anclan a cada uno de los pocillos de la microplaca, se agregan muestras biológicas (suero) a cada uno de los pocillos para generar la unión entre el anticuerpo de captura y el TNF-α presente en el suero, para detectar esta unión. se utiliza un anticuerpo biotinilado, tras lo cual se añade estreptavidina conjugada con peroxidasa de rábano picante (HRP); Para formar el complejo biotina-avidina, la detección del color se da al agregar el sustrato HRP, llamado Tetrametilbencidina (TMB), esta reacción genera un color azul el cual se mide en un lector de microplacas Bio-Rad® modelo xMARK a una longitud de onda de 450 nm. (Figura 18).
El análisis de los resultados se realizó mediante ajuste de regresión lineal utilizando la fórmula de línea recta (y=mx+b), mediante la generación de una curva de concentración utilizando las concentraciones conocidas de TNF-α y sus respectivas absorbancias a.75 450 nm; La determinación de la concentración de las muestras de los grupos de estudio (control, CKD y CKD+ETA) se dio interpolando las absorbancias en la curva generada.
RESULTADOS
- El etanercept se une con alta afinidad al TNF- de rata
- El tratamiento con ETA reduce los niveles séricos de TNF- en ratas con ERC
- El tratamiento con ETA pero no mitiga la pérdida de peso corporal pero disminuye el
- El tratamiento con ETA no tiene un impacto en la anemia renal
- El tratamiento con ETA no mejora los parámetros bioquímicos de función renal
- El tratamiento con ETA retrasa la pérdida de la TFG
- El tratamiento con ETA disminuye ligeramente el infiltrado inflamatorio y el daño
Se muestran diferencias entre ERC y ERC+ETA respecto a los grupos control a partir del día 14, pero al día 28 se observan diferencias significativas entre el grupo ERC vs. Se muestran diferencias significativas en la cantidad de componentes sanguíneos el día 28 entre el grupo de control y los grupos. Por otro lado, no se encontraron diferencias significativas en el grupo ETA respecto al grupo ERC; sin embargo, se observó un aumento de 1,4 veces en el grupo con ERC en comparación con el grupo con ERC el día 28.
Aunque no se encontraron diferencias significativas en el grupo tratado con ETA respecto al grupo con ERC, se observó una disminución de 1,9 veces el día 14 y de 1,7 veces el día 28 en el grupo con ERC (Gráfico 7 C y D). La TFG disminuyó significativamente en el grupo con ERC el día 14 con una disminución del 55%.
DISCUSIÓN
2020 donde se encontró una disminución en el tamaño y peso de los riñones en los grupos a los que se les administró adenina. Aunque no se encontraron diferencias significativas en el grupo tratado con ETA respecto al grupo de ERC, se observó una disminución de 1,9 veces más el día 14 y de 1,7 veces más el día 28. Si bien en nuestro estudio no se observaron diferencias con el tratamiento con ETA, en el modelo de daño renal por isquemia-reperfusión utilizado por Choi et al.
2009, si se encontró una disminución en los niveles de creatinina sérica después del tratamiento con ETA, esto puede deberse a diferencias en el grado de daño renal en los dos modelos. La fibrosis renal es una condición histopatológica que promueve la progresión de la ERC en el modelo de adenina (Tamura et al. 2009).
CONCLUSIONES
PERSPECTIVAS
La enfermedad renal crónica (ERC) es una de las patologías de mayor incidencia a nivel mundial, afectando al 10% de la población, convirtiendo a Jalisco en el país número uno en padecer esta enfermedad en el mundo. KLB es una patología multifactorial, los factores principales son enfermedades generalizadas en la sociedad, como la diabetes mellitus y la hipertensión arterial. El tratamiento farmacológico de la enfermedad renal crónica se basa en el manejo de factores etiológicos y fisiopatológicos, requiriendo terapias invasivas como diálisis y hemodiálisis hasta el trasplante de órganos, pero no existe ningún fármaco aprobado para reducir la progresión de la insuficiencia renal.
El objetivo de este proyecto fue investigar una nueva indicación terapéutica a nivel preclínico, un fármaco biotecnológico ya conocido, y evaluar si este tratamiento también podría ser eficaz para reducir el daño renal independientemente de los factores etiológicos, teniendo en cuenta la premisa del Evento inflamatorio debido a quien transmite la enfermedad en todas sus variables. Asimismo, este proyecto ha permitido identificar, en el tiempo, el inicio de la enfermedad a través del proceso inflamatorio y fibrogénico, con el fin de identificar el estadio ideal para iniciar tratamientos que frenen la progresión y reduzcan el daño renal.
BBA - Molecular Basis of Disease Chronic kidney disease induced by an adenine-rich diet upregulates integrin-linked kinase (ILK) and its. Molecular Mechanisms of the Acute Kidney Injury to Chronic Kidney Disease Transition: An Updated View”. Effect of anti-tumor necrosis factor alpha treatment of rheumatoid arthritis and chronic kidney disease”.
Soluble tumor necrosis factor receptors are associated with the severity of renal dysfunction in pediatric chronic kidney disease”. Biomedicine and Pharmacotherapy Ameliorative effect of ursolic acid on renal fibrosis in adenine-induced chronic kidney disease in rats”.
ANEXOS
Añadir 400 l de tampón de dilución 1x A a cada vial de TNFα de rata liofilizado para preparar una solución madre de 100 ng/ml. En un microtubo de 600 l, agregue 400 l de tampón de dilución 1x A y 100 l de la solución madre previamente preparada para obtener una concentración de 20.000 pg/ml*. Realice diluciones en serie: agregue 400 µl de tampón diluyente A a todos los tubos de la curva, incluido el blanco.
Agregar 100 ul de estreptoavidina conjugada previamente preparada, incubar por 45 min a temperatura ambiente con agitación suave constante. Añadir 100 l de sustrato TMB e incubar durante 30 min en la oscuridad a temperatura ambiente, con agitación suave y constante.
PRODUCTOS ACADÉMICOS
123 2do Simposio: Temas Seleccionados sobre Actualización e Interpretación de Patrones de Inmunofluorescencia, Instituto de Investigaciones Biomédicas, Universidad de Guadalajara. 127 Participación en el concurso laboral gratuito en el XXII Congreso Internacional de Avances en Medicina. 129 Participación en actividades de divulgación en el marco del Día Internacional de la Mujer y la Niña en la Ciencia.
137 Constancia de participación en el XLI Encuentro Nacional de la Academia Mexicana para la Investigación y Educación en Tecnología Química.
