Concentración de bacterias ácido lácticas

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Cuantificación de aminas biógenas en quesos “Paria” procedentes de los mercados de Arequipa y la correlación de su contenido con los parámetros fisicoquímicos y la concentración de Bacterias Ácido Lácticas

Cuantificación de aminas biógenas en quesos “Paria” procedentes de los mercados de Arequipa y la correlación de su contenido con los parámetros fisicoquímicos y la concentración de Bacterias Ácido Lácticas

7 Como se mencionó, el queso es muy importante para el consumo por su contenido de nutrientes de alto valor biológico, pero también es necesario considerar el aspecto toxicológico de este producto, ya que en el queso se pueden producir sustancias que podrían afectar negativamente la salud del consumidor. Precisamente algunas de estas sustancias nocivas son las aminas biógenas (AB), se producen como consecuencia de la descarboxilación de los aminoácidos de las proteínas del queso por acción de las enzimas descarboxilasas de las Bacterias Ácido Lácticas (BAL) principalmente. Las aminas biógenas se sintetizan durante el proceso de fermentación de los quesos, por lo que su presencia está relacionada con los quesos madurados, en los que se utilizan como parte del proceso de producción las BAL nativas propias provenientes de la leche o cultivos iniciadores que se inoculan intencionalmente. La producción de las aminas biógenas depende de la disponibilidad de los aminoácidos libres, pH del medio, presencia de carbohidratos fermentables como la glucosa, concentración de NaCl, actividad de agua y temperatura de fermentación (4) .
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Medios de Cultivos Complejos para la Cuantificación de Bacterias Ácido Lácticas

Medios de Cultivos Complejos para la Cuantificación de Bacterias Ácido Lácticas

En la matriz semisólida se evaluaron los medios con mayor recuperación: agar naranja, guayaba, noni y leche. En esta determinación, no se encontró diferencia significativa en la concentración de bacterias ácido lácticas recuperadas. El yogur contiene proteínas, grasas y carbohidratos que son propios de la leche, y debe contenerlos en las cantidades correspondientes al tipo de leche con que se elabora. Los azúcares son la base de los productos lácteos fermentados porque proporcionan energía a los microorganismos encargados de producir el sabor y el aroma de productos como el yogur (Zapata et al., 2015). Se encontró que las sustancias que conforman el yogur no interfirieron en la cuantificación de los microorganismos.
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Medios de Cultivos Complejos para la Cuantificación de Bacterias Ácido Lácticas

Medios de Cultivos Complejos para la Cuantificación de Bacterias Ácido Lácticas

El contenido de bacterias vivas es uno de los parámetros de calidad importante en alimentos funcionales probióticos, ya que el efecto en el equilibrio de la microflora intestinal está relacionado con la concentración de bacterias ácido lácticas. Existen medios de cultivo comerciales orientados al aislamiento y cuantificación de lactobacilos como MRS (Man et al., 1990), Rogosa (Tamime et al., 1995) y LAMVAB (Hartemink et al., 1997). También se han propuesto otros medios de cultivo selectivos empleados en investigación, como el evaluado por Di Lena et al. (2015) para detectar cuantitativamente y aislar cepas del grupo casei en leche y quesos probióticos, así como diversas variantes del medio MRS, con diferentes fuentes de carbono y proteínas (Lima et al., 2009).
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Secado por atomización de bacterias ácido lácticas

Secado por atomización de bacterias ácido lácticas

En esta revisión sistemática se trataron cuatro temas relacionados con el proceso de secado por atomización de BAL. El primer tema se relacionó con los microorganismos y sus condiciones de crecimiento en donde se encontró que el género Lactobacillus es el más estudiado y el medio MRS el más uti- lizado a escala de laboratorio; el segundo tema se relacionó con los agentes protectores utilizados en donde se evidenció que se han estudiado solos o en mezcla y que una concentración entre el 20 − 30 % de sólidos totales fue la que mayor supervivencia se reportó en los artículos; el tercer tema abarcó el secado por atomización donde se concluye que las temperaturas de entrada y salida han sido las más estudiadas, sin embargo, otras condi- ciones de operación se pueden establecer para mejorar la viabilidad durante el proceso de secado; finalmente el cuarto tema abarcó las características de los productos en polvo obtenidos, donde se recopiló la información sobre los resultados físico-químicos y microbiológicos, entre los cuales se encuen- tra la humedad final, la a w , la temperatura de transición vítrea y el % de
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EVALUACIÓN DE LA PRESENCIA DE BACTERIOCINAS EN CULTIVOS DE BACTERIAS ÁCIDO LÁCTICAS

EVALUACIÓN DE LA PRESENCIA DE BACTERIOCINAS EN CULTIVOS DE BACTERIAS ÁCIDO LÁCTICAS

• Realizar la curva de crecimiento. • Calcular tasas de crecimiento y tiempos de generación para las fases analizadas. 2.3.3 Técnicas turbidimétricas Las técnicas turbidimétricas son métodos indirectos que se utilizan para determinar la concentración de microorganismos por unidad de volumen o densidad, en los cuales los cultivos de microorganismos actúan como suspensiones coloidales, absorbiendo y reflejando la luz que incide sobre ellos. La turbidometría mide la cantidad de luz transmitida por la suspensión. La nefelometría mide la luz difractada. Por medio de éstos procedimientos se puede estimar el número de microorganismos en el cultivo, ya que, dentro de un rango, la luz absorbida o difractada por una suspensión microbiana es directamente proporcional a la concentración de células en el cultivo. La relación entre luz transmitida y difractada depende de la concentración, tamaño, forma e índice de difracción de partículas de la longitud de onda y recorrido de la luz. Las partículas interiores también influyen en ésta medida. Dependiendo del tamaño y características ópticas de los microorganismos existe una concentración mínima. El espectrofotómetro, es el aparato que se utiliza para medir la luz transmitida. Este aparato proporciona luz monocromática por medio de un filtro que permite sólo el paso de la longitud de onda elegida. La cantidad de luz transmitida por una suspensión microbiana es medida por una celda fotoeléctrica e inversamente proporcional a la cantidad de microbios. Normalmente el crecimiento microbiano no se expresa como disminución de la luz transmitida (transmitancia), sino como aumento de la luz absorbida (densidad óptica), ya que ésta última es directamente proporcional al número de microorganismos presentes en la suspensión. La relación entre la transmitancia y la densidad óptica se expresa matemáticamente de la siguiente manera:
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Evaluación de melaza como medio de cultivo para la producción de bacterias ácido-lácticas

Evaluación de melaza como medio de cultivo para la producción de bacterias ácido-lácticas

Conclusión Se puede concluir que la concentración de la fuente de carbono; la cual es la melaza en la concentración del 20% es apto para la producción de las bacterias ácido lácticas; además, las condiciones a las cuales fueron sometidos los biorreactores permitieron que el microorganismo se adaptara, de esta forma tuviera una producción de biomasa y fermentación.

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Inhibición de Listeria monocytogenes con Bacterias Ácido Lácticas productoras de Bacteriocinas

Inhibición de Listeria monocytogenes con Bacterias Ácido Lácticas productoras de Bacteriocinas

Tanto las 3 cepas control productoras de bacteriocinas como las 3 cepas referencia de Listeria, se incubaron overnight en caldo BHI a 37°C., hasta alcanzar una concentración de 30 x 10 8 UFC/ml. Los caldos crecidos de Listeria spp, se inocularon en agar sangre al 5%, agar SPC Standard Plate Count, agar nutritivo, agar BHI, agar MRS y agar TSA, realizando siembras masivas con escobillones estériles. A los caldos crecidos con BAL se les midió el pH y fueron centrifugados (10000 rev, 10 minutos).

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Caracterización in vitro de bacterias ácido lácticas con potencial probiótico

Caracterización in vitro de bacterias ácido lácticas con potencial probiótico

Los cultivos de 18 h de incubación a 37°C en MRS se centrifugaron y se lavaron tres veces con agua des- tilada, se resuspendieron en el volumen inicial con una solución de PBS y se llevaron a una DO de 0,7. Los sobrenadantes de cada una de las cepas se filtraron y se agregaron a la suspensión a una concentración fi- nal del 10% (v/v); posteriormente, se incubaron a tem- peratura ambiente. La agregación se consideró positi- va cuando las partículas visibles, similares a la arena y formadas por las células agregadas, se depositaron en el fondo del tubo dejando el sobrenadante limpio por un período máximo de 2 h a temperatura ambiente. Los resultados obtenidos en cada uno de los expe- rimentos se basaron en la media de tres experimentos. En la Tabla 1 se pudo observar que la mayoría de las cepas evaluadas son homofermentativas obligadas, al no producir gas y crecer bajo diferentes condicio- nes, por lo que se describen como facultativas anaerobias. Dentro de los facultativos se distinguen aquellas que tienen la capacidad de alternar un meta- bolismo oxidativo aerobio con otro fermentativo, de aquellos otros que nunca pueden utilizar el O 2 cómo
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Evaluación de la actividad antimicrobiana de bacterias ácido lácticas. Parte I

Evaluación de la actividad antimicrobiana de bacterias ácido lácticas. Parte I

La concentración mínima bactericida (CMB) se definió como la menor concentración de BAL capaz de reducir el recuento de microorganismos en un 99.9%. A partir de los resultados de la concentración mínima inhibitoria se deter- minó la CMB. Para ello, se extrajo 1 mL de los tubos en los cuales no se observó crecimiento visible del inóculo (in- hibición de crecimiento); esta suspensión fue sembrada en placas Petri, debidamente rotuladas con la concentración correspondiente, añadiéndose luego agar Müeller-Hinton (MH) a 45º C aproximadamente.
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Susceptibilidad de bacterias ácido lácticas (BAL) frente a diversos antibióticos

Susceptibilidad de bacterias ácido lácticas (BAL) frente a diversos antibióticos

2. 1. 4. 4. Pediococcus Son cocos Gram positivos, catalasa negativos, anaerobios facultativos. Son homofermentativos, fermentan azúcares para producir una concentración de ácido, comprendida entre el 0.5 y el 0.9%, crecen en salmueras con una concentración salina de hasta 5.5%, mientras que su crecimiento es escaso en salmueras con concentraciones de hasta el 10%. Sus temperaturas de crecimiento oscilan desde los 7 hasta los 45°C, aunque su temperatura óptima está entre 25 y 32°C. Se presentan en parejas o en tetradas como consecuencia de la división celular en dos planos, el tamaño celular varía de 0.6-2.0 µm dependiendo de la especie. Raramente se observan células aisladas. En medios sólidos las colonias son de 1-2.5 mm de diámetro, lisas redondas y de color blanco grisáceo. Necesitan medios complejos para desarrollarse.
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Actividad inhibitoria de cepas de bacterias ácido lácticas frente a bacterias patógenas y deterioradas de alimentos

Actividad inhibitoria de cepas de bacterias ácido lácticas frente a bacterias patógenas y deterioradas de alimentos

Existen ensayos en los que intervienen más de dos especies de BAL para inhibir a los microorganismos patógenos y/o deterioradores. Bredholt y col., (1999) probaron el efecto sinérgico de cinco cepas de BAL actuando conjuntamente frente a diferentes microorganismos patógenos en productos cárnicos cortados y envasados al vacío a 10°C, donde Escherichia coli O157:H7 presente a una concentración de 10 3 UFC/g cuando crecía en presencia de cepas de 5 cepas de BAL a una concentración de 10 4 - 10 5 ufc/g, se vió inhibida totalmente. Estos investigadores no llegaron a determinar si el efecto inhibitorio tuvo que ver con una BAL determinada o con las 5 cepas actuando de manera sinérgica. Por ello es necesario verificar la pureza de las cepas de BAL para evitar un efecto sinérgico o bien antagónico que pueda ejercer influencia en la detección de la actividad antimicrobiana.
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Elaboración de jugos de fruta con adición de bacterias ácido lácticas con potencial probiótico

Elaboración de jugos de fruta con adición de bacterias ácido lácticas con potencial probiótico

64 5.2.2. Sensibilidad a antibióticos Para evaluar la sensibilidad de las cepas a los antibióticos, se utilizó la técnica de difusión en placa sobre agar MRS, previamente inoculado de manera independiente y controlada con los cultivos activos (10 8 UFC/mL) de las cuatro cepas BAL seleccionadas y la cepa referencia. Cuando el medio se solidificó, se colocaron los discos que contenían los antibióticos a evaluar, que para este caso fueron 23: amoxicilina/ácido clavulónico, ampicilina/sulbactam, ampicilina, cafazolina, ceftriaxona, clindamicina, cloramfenicol, daptomicina, eritromicina, gentamicina, imipenem, levofloxacina, linezolid, meropenem, moxifloxacina, oxacilina, penicilina, rifampicina, synercid, tetraciclina, trimetropin/ sulfa y vancomicina. Luego de incubar las placas a 37,0ºC por 24 horas se midieron los halos de inhibición generados. Por este método de antibiograma se midió la sensibilidad y la concentración mínima inhibitoria para las cinco bacterias de interés y finalmente se obtuvieron los porcentajes de sensibilidad antibiótica de las cepas en estudio.
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Efecto de recubrimientos comestibles con bacterias ácido-lácticas sobre Botrytis cinerea en uva

Efecto de recubrimientos comestibles con bacterias ácido-lácticas sobre Botrytis cinerea en uva

Los RCs pueden estar constituidos por diferentes biopolímeros tales como proteínas, polisacáridos, lípidos o mezclas de los mismos. Otros componentes, tales como plastificantes o tensoactivos, pueden incorporarse con diversos fines (Han, 2009). El tipo y concentración de sólidos formadores de recubrimiento con respecto a LAB puede cambiar las condiciones en las que éstas son aplicadas, y consecuentemente, afectar a su actividad. Además, estos aspectos pueden afectar a otros factores, como la adherencia del microorganismo y el espesor del RC formado sobre la superficie del fruto.
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Caracterización preliminar de compuestos antilisteriales producidos por bacterias ácido lácticas nativas

Caracterización preliminar de compuestos antilisteriales producidos por bacterias ácido lácticas nativas

Electroforesis de proteínas SDS - PAGE. El peso molecular de la bacteriocina en el extracto crudo de las cepas BAL, fue estimado por medio de una electroforesis de proteínas en poliacrilamida dodecil sulfato de sodio (Sodium Dodecyl Sulfate- Polyacrylamide Gel Electrophoresis, SDS - PAGE) (16) y la técnica de la doble capa descrita previamente. Para la separación de proteínas se utilizó un sistema de gel que estaba constituido por un gel de concentración del 4% y un gel de separación en gradiente del 16 – 20%. El marcador de peso molecular polipéptido SDS - PAGE (Ref. 161- 0326. Bio-Rad) fue cargado con Loading buffer 5X (1M Tris HClpH 6.8. 2-mercaptoetanol, glicerol 100%, azul de bromofenol 0.01%, y SDS al 20%) y corrido en el gel a 100 v/15 min y luego a 150 v/ 1h. El gel se fijó durante 30 min con solución de fijado de péptidos, se tiño con azul de Coomassie G-250 (Sigma) por 1 h y por último se destiñó con solución decolorante.
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AISLAMIENTO, SELECCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE BACTERIAS ÁCIDO LÁCTICAS EN ENSILAJES DE SOYA 1

AISLAMIENTO, SELECCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE BACTERIAS ÁCIDO LÁCTICAS EN ENSILAJES DE SOYA 1

tantemente con el incremento en la concentración de melaza. Del mismo modo, los contenidos de materia seca (MS) se incrementaron al aumentar la concentración de melaza en los ensilajes. La DP concentró en 10 unidades porcentuales el conteni- do de MS. No se observó interacciones entre la DP y la concentración de melaza. Los aislamientos bacterianos fueron realizados en los microsilos con 4 y 8% de melaza y sin DP, debido a que és- tos presentaron las mejores características senso- riales, los menores valores de pH y la menor diver- sidad de morfotipos bacterianos. Los cultivos se hicieron en agar Rogosa y a las colonias seleccio- nadas se les efectuó las pruebas de Gram y catala- sa; las que correspondieron a bacilos Gram positi- vos y catalasa negativos, fueron inoculadas en ga- lerias Api 50 CHL ® , para su identificación como bacterias ácido lácticas (BAL). Las cepas aisladas correspondieron a Lactobacillus brevis 3.
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Cinética ruminal y crecimiento de cabritos suplementados con un probiótico de bacterias ácido-lácticas

Cinética ruminal y crecimiento de cabritos suplementados con un probiótico de bacterias ácido-lácticas

3 Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad de Colima, México. 4 Instituto Nacional de Ciencias Médicas y Nutrición “Salvador Zubirán”, México Resumen Con el objetivo de evaluar la cinética ruminal y el crecimiento de cabritos suplementados con un probiótico de bacterias ácido-lácticas, se asignaron 86 animales Alpinos en un experimento durante 120 días. En el tratamiento uno (T1) 43 cabritos recibieron una dieta constituida por 50% de heno de alfalfa, 40% de concentrado comercial y 10% de alimento nitrogenado de lento consumo (DI). Los animales del tratamiento dos (T2) recibieron DI rociada diariamente con 50 mL de probiótico (BAL) por kilogramo de MS. Se determinó la desaparición de MS in situ, el consumo voluntario de MS, la degradación de la fibra, la concentración de NH 3 y AGV, la digestibilidad in vivo, el pH ruminal, los derivados de purinas y la ganancia de peso. La ganancia de peso diaria fue de 129 y 169 g para T1 y T2, respectivamente (P<0,05). El NH 3 y la digestibilidad del N y de la fibra fueron mayores para T2 (P<0,05). El tiempo medio de desaparición de la hemicelulosa fue mayor (P<0,05) en T2. Los conteos totales BAL fueron 1,6 y 2,5 millones de ufc/mL en T1 los días 1 y 7. Los cabritos del T2 presentaron 2,4 y 12,5 millones de ufc/mL. Se concluye que la adición de BAL a la dieta para cabritos en crecimiento puede incrementar la ganancia de peso vivo, así como se producen cambios favorables en la digestibilidad, la proteína microbiana y la cinética ruminal.
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CARACTERIZACIÓN PRELIMINAR DE COMPUESTOS ANTILISTERIALES PRODUCIDOS POR BACTERIAS ÁCIDO LÁCTICAS NATIVAS

CARACTERIZACIÓN PRELIMINAR DE COMPUESTOS ANTILISTERIALES PRODUCIDOS POR BACTERIAS ÁCIDO LÁCTICAS NATIVAS

Por otra parte, es necesario considerar que las condiciones del medio de cultivo en el cual se desarrollan las cepas BAL, como pH y temperatura, no siempre son las óptimas para la producción y acción de las bacteriocinas. Por lo tanto, la baja concentración de las mismas hace que no se presente un efecto antagónico sobre una bacteria (3,22).

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Aislamiento e identificación de bacterias ácido lácticas con actividad inhibitoria de bacterias implicadas en enfermedades transmitidas por alimentos

Aislamiento e identificación de bacterias ácido lácticas con actividad inhibitoria de bacterias implicadas en enfermedades transmitidas por alimentos

actividad anti-clostridios in vitro de Lactobacillus spp. en carne de cerdo molida. Esto señala que los cultivos bioprotectores pueden ser una alternativa factible para la reducción del contenido de nitritos en productos cárnicos fermentados. La mayoría de los brotes de ETA son producidos por la presencia de STEC, S. Tiphymurium y S. aureus y se asocian con el consumo de productos cárnicos. La naturaleza proteica, la actividad de agua, el contenido de sal y las temperaturas de refrigeración contribuyen a la selección de estos patógenos. Desde un punto de vista protector, las BAL pueden mejorar la seguridad, prolongar la vida útil y preservar la calidad microbiana y/o sensorial de estos productos. La adición de BAL como cultivo bioprotector no tiene efectos secundarios en las características sensoriales debido al bajo contenido de carbohidratos y la fuerte capacidad de amortiguación de la carne. El antagonismo microbiano de BAL frente a microorganismos indeseables será atribuido a productos metabólicos como ácidos orgánicos o péptidos antimicrobianos; a cambios en el entorno fisicoquímico como el pH o producción de CO 2 ; o bien, una combinación de estos factores. Tanto la utilización de bacteriocinas como de cultivos protectores presentan ventajas y desventajas respecto a sus mecanismos de biopreservación. Las bacteriocinas, al no ser cultivos vivos, pueden adicionarse a los alimentos sin necesidad de realizar una modificación significativa en los métodos de elaboración. Y, además, se manipulan y almacenan fácilmente. La principal desventaja es que de igual modo que cualquier conservante químico, deben utilizarse en la concentración inhibitoria mínima (CIM) efectiva independientemente de las condiciones de almacenamiento futuras de un producto. Además, solo las bacteriocinas consideradas como GRAS pueden ser aplicadas a los productos alimenticios. De esta forma, su uso está restringido a pocos aditivos comercializados en todo el mundo. Por otro lado, la aplicación de cultivos protectores vivos no requiere de equipamientos especiales. La forma que generalmente se utiliza es por medio de un proceso de liofilización. Este mecanismo no afecta el desarrollo bacteriano y la producción de sus metabolitos (Rodgers, 2003). Cuando los cultivos protectores se utilizan para la conservación, el inóculo correcto y su viabilidad son parámetros que deben considerarse en la producción y deben estar monitoreados por un buen sistema de HACCP, siendo considerados como puntos críticos de control. Dos son las limitaciones de la aplicación de los cultivos vivos. En primer lugar, la no supervivencia en los alimentos que serán cocinados.
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Identificación molecular y caracterización cinética de bacterias ácido lácticas aisladas de una bebida fermentada

Identificación molecular y caracterización cinética de bacterias ácido lácticas aisladas de una bebida fermentada

El comportamiento cinético de las cepas fue muy particular a pesar de provenir del mismo medio y tener las mismas condiciones de incubación. En la figura 8 se puede observar el comportamiento de Lactobacilluspentosus(BAL-03), su densidad óptica es la más baja en comparación a las otras cepas, sin embargo, con esta se obtiene una de las mejores cantidades de UFC/mL. Garrido en 2006 reportó que Lactobacilluspentosusse adapta al medio durante los primeros días por el efecto de pH en este, puesto que eleva su crecimiento en condiciones ácidas. Este efecto también ha sido identificado en la fermentación de la bebida puesto que esta cepa se logró identificar con mayor concentración en el tercer día en presencia de las otras especies.
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Evaluación bioquímica y molecular de la capacidad hipocolesterolémica de bacterias ácido lácticas con potencial probiótico

Evaluación bioquímica y molecular de la capacidad hipocolesterolémica de bacterias ácido lácticas con potencial probiótico

60 variable, lo cual mostró diferencias estadísticamente significativas al realizar un análisis de variancia ( =0.05 ). La Figura No. 11 muestra la interacción entre la expresión de la enzima, la presencia de oxígeno y la concentración de sales biliares. Se observa que existe una relación directamente proporcional entre ellas, al estar el microorganismo en presencia de sales y oxígeno se genera mayor síntesis de RNAm del gen bsh. Cuando hay presencia de sales y ausencia de oxígeno o cuando hay ausencia de los dos factores, disminuye la expresión de RNAm. Sin embargo, en condiciones de aerobiosis y en ausencia de sales biliares aumenta la expresión aunque en una proporción menor que en presencia de las dos condiciones, concluyendo que probablemente el factor más influyente para la expresión de la enzima es la presencia de oxígeno.
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