PDF superior Papel de la vía endocítica en la infección del virus de la peste porcina africana

Papel de la vía endocítica en la infección del virus de la peste porcina africana

Papel de la vía endocítica en la infección del virus de la peste porcina africana

37 Mayor and Pagano, 2007). La endocitosis mediada por clatrina es el mecanismo más conocido a nivel molecular. Además de su relevancia en los procesos fisiológicos de la célula (internalización de receptores, etc.), es utilizado por diversos virus envueltos como vía de entrada en las células mamíferas, por ejemplo el VSV (Sun et al., 2005), el virus del bosque de Semliki (Helenius et al., 1980) y el virus del Nilo Occidental (Chu and Ng, 2004). Influenza y HIV-1 también pueden usar esta vía como alternativa (Daecke et al., 2005; Sieczkarski and Whittaker, 2002). Las vesículas recubiertas de clatrina son constituidas tras un proceso en cinco etapas a juzgar por los estudios de ultraestructura y biología celular. Estos son, iniciación, selección de carga, ensamblaje del recubrimiento, escisión de la MP y desensamblaje del revestimiento. Tras la selección de carga e iniciación de la invaginación, los trieskeliones de clatrina (unidad de ensamblaje), polimerizan en hexágonos y pentágonos recubriendo la vesícula en formación a través de adaptadores, por ejemplo Proteína adaptadora 2 (AP2), proteínas de dominio BAR (Doherty and McMahon, 2009; Merrifield, 2012; Merrifield et al., 2002; Taylor et al., 2011; Traub, 2009) y otras proteínas accesorias, como AP180 y Epsinas (Epsina15, Ede1 en levaduras). Una vez la vesícula recubierta de clatrina se escinde al citosol gracias a la colaboración de la GTPasa dinamina, proceso en el cuál puede cooperar la actina en caso necesario (Cureton et al., 2009; Cureton et al., 2010; Moreno-Ruiz et al., 2009; Pizarro-Cerda et al., 2010; Veiga and Cossart, 2005), la vesícula pierde su revestimiento y las moléculas implicadas se reciclan de nuevo hacia la MP (McMahon and Boucrot, 2011; Merrifield, 2012; Merrifield et al., 2002; Merrifield et al., 2005). Ejemplos característicos de proteínas internalizadas mediante endocitosis mediada por clatrina son, el factor de crecimiento epidérmico (EGF, del inglés “epidermal growth factor”) o la transferrina. Este mecanismo de endocitosis es altamente eficiente y rápido, ya que desde el reclutamiento de las moléculas necesarias hasta la escisión de las vesículas recubiertas de clatrina transcurren 30-100 segundos (Taylor et al., 2012; Taylor et al., 2011). Una vez que la vesícula revestida de clatrina es internalizada y pierde su revestimiento, fusiona con los endosomas tempranos (EE, del inglés “early endosomes”). Estas vesículas son actualmente reconocidas como la principal estación de clasificación de la vía endosomal (Huotari and Helenius, 2011).
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Estudio de la macropinocitosis como mecanismo endocítico de entrada del Virus de la Peste Porcina Africana

Estudio de la macropinocitosis como mecanismo endocítico de entrada del Virus de la Peste Porcina Africana

A pesar de las posibles explicaciones funcionales y metodológicas expuestas hasta ahora para concitar los datos publicados (Hernaez y Alonso, 2010; Sánchez y col., 2012), hay que considerar que tanto la macropinocitosis como la CME pueden ser una opción empleada por el VPPA para internalizar en la célula, ya sea utilizando uno de los mecanismos de forma prioritaria, o valiéndose conjuntamente de ambos para la eficiente internalización y producción viral, como ocurre con otros sistemas virales. Por ejemplo, en el caso de la infección de Ad2, aunque la internalización en células epiteliales es estrictamente dependiente de la CME, la unión del virus a integrinas de la membrana plasmática activa la macropinocitosis mediante la señalización de PI3K, Rac1 y Cdc42, teniendo un papel fundamental en la liberación de las partículas virales desde los endosomas al citosol para la eficiente producción viral (Meier y col., 2002). También se ha publicado que durante la infección del virus Ébola en células Vero y Hela, la macropinocitosis es la vía endocítica prioritaria pues la internalización de partículas infecciosas similares a la partícula viral completa (VLPs) depende de los canales Na + /H + , Pak1, el citoesqueleto de actina y CtBP, aunque la CME tiene un papel minoritario al colocalizar las VLPs con clatrina y depender al infección de la función de la dinamina (Aleksandrowicz y col., 2011; Nanbo y col., 2010; Saeed y col., 2010). No sólo esto, sino que en el caso de FLUAV, tanto la forma esférica como filamentosa del virus activan la macropinocitosis y sin embargo, tras esta señalización común, las partículas virales filamentosas internalizan por ruffles y macropinosomas, mientras que las esféricas lo hacen mayoritariamente por vesículas recubiertas de clatrina (Rossman y col., 2012). Por último, cabe destacar que algunos factores celulares comprometidos con un tipo específico de endocitosis excepcionalmente pueden intervenir en otros procesos. Tal es el caso de la internalización de Mimivirus en macrófagos donde a pesar de que la vía endocítica utilizada es la fagocitosis, durante la internalización viral se observa una clara colocalización de las partículas virales con la clatrina, mientras que sorprendentemente, ni el tratamiento con CPZ ni el mutante Eps 15 inhiben la entrada viral.
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La peste porcina africana en el este de Europa: evolución de los aislados circulantes y evaluación de las herramientas diagnósticas para su control

La peste porcina africana en el este de Europa: evolución de los aislados circulantes y evaluación de las herramientas diagnósticas para su control

La PPA es una enfermedad que presenta una gran complejidad, tanto por las características del virus causante de la enfermedad, como por su epidemiología. Tras la aparición de la PPA en la región del Cáucaso en 2007, la enfermedad ha continuado su imparable expansión a los países vecinos de Armenia y Azerbaiyán, regiones del sur-oeste y central de la Federación Rusa Bielorrusia y Ucrania. En enero de 2014 la enfermedad se extendió a distintos países del este de la UE, donde hasta la fecha se han notificado más de 1000 focos en jabalí y en cerdo doméstico. Para poder lograr un control efectivo es fundamental conocer las características de los aislados circulantes y de la infección en el hospedador. Este conocimiento debería sustentarse en estudios moleculares, con fines de trazabilidad y estudios del comportamiento del patógeno en los distintos hospedadores, para identificar las formas clínicas que pudieran estar produciéndose, y adecuar los sistemas de detección y control. Esta información es posible obtenerla a través de la caracterización molecular de los aislados circulantes, de la experimentación “in vivo” con dichos aislados, y mediante estudios de investigación epidemiológica y diagnóstico. Las herramientas de detección diagnóstica juegan un papel esencial para el control de la PPA. Es fundamental contar con técnicas rápidas, sensibles, específicas y fiables, que permitan una detección temprana, a través de la identificación de la presencia del virus y de los anticuerpos específicos.
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Papel de la lectina C del virus de la peste porcina africana en la evasión de la respuesta celular: inhibición de apoptosis y modulación del complejo mayor de histocompatibilidad

Papel de la lectina C del virus de la peste porcina africana en la evasión de la respuesta celular: inhibición de apoptosis y modulación del complejo mayor de histocompatibilidad

En el caso de la lectina del VPPA, hemos observado que la presencia del gen EP153R provoca un retraso en la expresión de los antígenos SLA-I porcinos, en el contexto de la infección viral. El efecto no es cuantitativamente muy dramático, quizá debido a que los reactivos específicos para moléculas porcinas no están tan desarrollados como para otras especies animales, lo que conlleva la no disponibilidad de anticuerpos que permitan discernir entre los distintos subtipos de SLA clase I, para determinar más fina- mente el efecto sobre moléculas concretas. Por otro lado, sería esperable que el efecto del gen EP153R fuera más evidente si se analizara la expresión de SLA-I en la membrana plasmática, más que la cantidad total en la célula. Este tipo de estudio se analizaría por citometría de flujo, técnica para la que ninguno de los anticuerpos disponibles ha resultado eficaz. Por lo tanto, ante la ausencia de reactivos específicos porcinos procedimos a analizar el posible efecto del gen EP153R en otro sistema animal, pero mante- niendo el uso de células homólogas a las células diana de la infección de VPPA: así, utilizamos una línea celular (Raw) de macrófagos de ratón, transfectados o no con el gen EP153R, y analizamos la expresión en la membrana plasmática de moléculas murinas MHC-I, para las que existen reactivos comerciales que permiten marcajes razonables para análisis en citometría de flujo.
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Erradicación de la peste porcina en el Meta : exito del trabajo interinstitucional y gremial

Erradicación de la peste porcina en el Meta : exito del trabajo interinstitucional y gremial

DE INVESTIGACIÓN ACTIVIDADES de seroprevalencla Sellevarona cabolosestudtos y respiratorio para el síndrome reproductivo Porcino de Aujezkyen y parael virusde la enfermedad PRRS cerdosde[r]

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Efecto de un candidato vacunal (E2) contra la peste porcina clásica sobre los indicadores bioproductivos de una granja porcina

Efecto de un candidato vacunal (E2) contra la peste porcina clásica sobre los indicadores bioproductivos de una granja porcina

World Organization for Animal Health (OIE). Prophylactic and systematic vaccination with modified live virus has been the main strategy for controlling CSF in large endemic areas, although, to meet their limitations, the so-called «marker vaccines» have been developed. In Cuba, a new vaccine candidate against CSF virus has been developed based on the E2 glycoprotein of its viral envelope (CVE2). After passing successfully through a series of laboratory tests, its evaluation under field conditions was required; as part of the various experiments carried out, it was decided to evaluate the behavior of the bioproductive indicators at a farm before and after the application of CVE2. The studies were conducted at a pig farm with a history of CSF endemism for several years where the animals were regularly vaccinated with the lapinized Chinese strain vaccine (LABIOFAM S.A.) as part of the control of the disease and the CVE2 began to be applied. After the CVE2 application, improvement of the bioproductive indicators was observed in the population studied.
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Deteccin mediante RT PCR en tiempo real del virus vacunal en cerdos inmunizados con la vacuna cubana contra la peste porcina clsica

Deteccin mediante RT PCR en tiempo real del virus vacunal en cerdos inmunizados con la vacuna cubana contra la peste porcina clsica

Utilizamos además la técnica de RT-PCR en tiempo real recomendada por la OIE, para poder establecer una comparación con la técnica desarrollada para la detección del ARN del virus vacunal, teniendo en cuenta que en su estandarización se incluyeron cebadores y sonda TaqMan y que se demostró en 78 cepas del VPPC diferentes, que los oligonucleótidos, en la mayoría de los casos, tenían una homología perfecta en su secuencia y sólo un pequeño grupo de aislamientos presentaban diferencias (5, 6). En nuestra investigación se procesaron por RT-PCR en tiempo real las muestras de tonsilas de los cerdos
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Papel de las células dendríticas en la infección por el virus dengue: blancos de replicación y respuesta inmune

Papel de las células dendríticas en la infección por el virus dengue: blancos de replicación y respuesta inmune

Dengue fever, caused by dengue virus (DENV) infection, is one of the most important diseases in the world, not only due to the high morbidity/mortality rates it causes, but also because of its great economic and social impact in tropical/subtropical countries. DENV infection has a wide range of clinical manifestations ranging from asymptomatic infection or infection with mild symptoms to severe dengue that can lead to death. At present, no etiological treatment or effective globally distributed vaccine against the four DENV serotypes exists. Despite great efforts made to understand the mechanism associated with DENV disease pathogenesis the causes leading to severe dengue presentation have not been clarified. Some hypotheses seek to give a biological and physiological explanation to the clinical manifestations that appear during the infection. Based on the evidence that after contact with dendritic cells DENV alters the functionality of these cells, this review aims to describe the most relevant findings regarding the importance of dendritic cells in the context of DENV infection and progression of the illness.
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Efectividad de la prueba de ELISA de captura para la detección de anticuerpos contra el virus de la peste porcina clásica en el Pecarí de collar (Tayassu tajacu)

Efectividad de la prueba de ELISA de captura para la detección de anticuerpos contra el virus de la peste porcina clásica en el Pecarí de collar (Tayassu tajacu)

El virus de la PPC es estable en un rango de pH entre 8 y 9 a temperaturas de -20ºC y -70ºC y liofilizado, donde puede mantenerse durante años. El virus puede sobrevivir a algunos procesamientos de la carne (curado y ahumado). Puede durar semanas a temperatura de refrigeración en recipientes de cristal herméticos, sin una disminución marcada de la infectividad. Conservantes como glicerina al 1% o bien fenol al 0.5%, aumentan la efectividad del proceso de conservación. Debido a la presencia de lipoproteínas en su envoltura, el virus se inactiva rápidamente con productos químicos como cloroformo, éter, y β-propiolactona (0.4%), además por desinfectantes como cresol, hidroxido de sodio (2%), formalina (1%), carbonato de sodio, detergentes iónicos y no iónicos, yodóforos fuertes (1%) en ácido fosfórico. También es sensible a la acción de radiaciones ultravioleta y a pH menor de 3 y mayor de 11. La infectividad se destruye fácilmente sometiendo al virus a temperaturas de 60 ºC durante un mínimo de 10 minutos. Las enzimas proteolíticas, como la tripsina, ejercen una inactivación moderada (10,14,20).
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Papel de la fosfatasa celular DUSP-1 en la infección por el virus vaccinia

Papel de la fosfatasa celular DUSP-1 en la infección por el virus vaccinia

The inability of VVDE3L to cause significant disease in WT mice is presumably due, at least in part, to induction of type I IFN that, in turn, leads to up-regulation of antiviral proteins, such as PKR and 2–5 OAS/RNaseL system. The mutant virus that lacks the C terminus of E3L gene involved in the dsRNA sequestration (VVE3LD26C) is completely attenuated in WT mice; however deletion of the N terminus (VVE3LD83N) reduces pathogenesis 500- to 5,000-fold [33,48]. We extended these in vivo studies using the i.n route and compared WR and E3L mutant viruses in WT and ISG15 KO mice. We observed that only after VVDE3L or VVE3LD26C inoculation (i.n), the mortality of mice was increased by the absence of ISG15 (Fig. 6). In the case of WR or VVE3LD83N, there were no differences in mortality of both viruses in ISG15 KO in comparison to WT mice although viral replication was enhanced in the lungs of ISG152/2 in comparison to ISG15+/+ mice. One explanation is that ISG15 is made non functional after infection with these viruses, because the carboxy-terminal domain of E3 binds to ISG15 and blocks its activity. These observations are in correlation with the reduced presence of conjugates in lungs of WT mice infected with WR or VVE3LD83N, compared with infection by VVDE3L or VVE3LD26C. Although lung homogenates presented similar amounts of ISG15 protein, the conjugation of ISG15 to its targets proteins, was greatly enhanced after infection with VVDE3L or VVE3LD26C (Fig. 7). This evidence suggests that inhibition of conjugation of ISG15 is mediated by E3 and this inhibition requires the presence of the dsRNA binding domain. Similar result was also observed in MEFs infected in vitro with VVDE3L where high levels of ISG15 conjugates were clearly observed (Fig. 1A).
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Análisis genético-molecular del papel de la vía endocítica en la ruta de transducción de la señal de pH ambiental en Aspergillus nidulans

Análisis genético-molecular del papel de la vía endocítica en la ruta de transducción de la señal de pH ambiental en Aspergillus nidulans

ability of its yeast homolog Vps23 to bind both an SDP motif in Rim8 and PSDP motifs in Vps27. It is noteworthy that a recent study showed that the first Pro resi- due in the feline immunodeficiency virus (FIV) Gag PSAP motif is not required for its function in retrovirus budding (10). We present genetic and biochemical evidence that a monou- biquitinated Lys residue located 12 residues upstream of the SXP motif contributes to Vps23 binding in vivo. Ub overex- pression partially restores the two-hybrid interaction between Vps23 and the Rim8-P536L mutant protein, and this effect is dependent on the integrity of the ubiquitinated residue. In addition, pulldown and coimmunoprecipitation assays indicate that Vps23 preferentially binds to the ubiquitinated form of Rim8. In agreement with these results, partial inactivation of the SXP motif upon replacement of the Pro536 residue with Leu is not sufficient to block Rim signal transduction unless the ubiquitination site is mutated. The contribution of these two elements to Vps23 UEV binding is consistent with evidence that the UEV domain of Tsg101 can bind both Ub and the related PTAP motif simultaneously (52). Structural studies indicate that the P(S/T)XP and Ub binding sites in Tsg101 and Vps23 UEV could create a continuous binding surface upon
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Manual para la atención y erradicación de focos de Peste Porcina Clásica

Manual para la atención y erradicación de focos de Peste Porcina Clásica

elementos utensilios parala tomade muestras, para lavadoy desinfección, papeleríaespecial parala tomade información y otroselementos indispensables parala atencióndel foco.. 3.4 VISITAAL[r]

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Guía para la atención y erradicación de focos de peste porcina clásica

Guía para la atención y erradicación de focos de peste porcina clásica

Serán invitaclos a las reuniones de concertac¡ón y cogestión cuancio se traten clel programa dos tasesasí: FaseI realizar la temas de su competencia entÍe otros, el vacunac¡ónmasiva de p[r]

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Evaluación de la condición sanitaria del departamento del Tolima con respecto a Peste Porcina Clásica

Evaluación de la condición sanitaria del departamento del Tolima con respecto a Peste Porcina Clásica

El virus de la PPC es moderadamente frágil al medio ambiente, se reporta que el virus sobrevive por 3 días a 50°C (122°F) y de 7 a 15 días a 37°C (98.6°F). Se calcula que su supervivencia en corrales y fómites bajo condiciones de campo puede variar. Algunos estudios sugieren que la inactivación del virus ocurre dentro de pocos días, mientras que otros describen que sobrevive bajo condiciones de invierno hasta por 4 semanas. El Virus puede permanecer infeccioso cerca de 3 meses en carne refrigerada y por más de 4 años en carne congelada. En un ambiente proteínico, el virus parece no ser inactivado por humo, curado o salado. Reportes de sobrevivencia del virus en carnes curadas y ahumadas varían con la técnica, y tienen un rango de 17 a más de 180 días. (24)
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Erradicar la peste porcina clásica en Colombia    :un esfuerzo de productores y autoridades sanitarias

Erradicar la peste porcina clásica en Colombia :un esfuerzo de productores y autoridades sanitarias

La Peste Porcina Clásica se disemina especialmente mediante el contacto entre los cerdos enfermos y los sanos no vacunados.. También se puede dispersar indirectamente, cuando animales sa[r]

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Modelización matemática de enfermedades infecciosas: un modelo SEICR para la peste porcina clásica

Modelización matemática de enfermedades infecciosas: un modelo SEICR para la peste porcina clásica

La primera aparici´ on de la PPC, no confundir con la peste porcina africana, fue en los Estados Unidos en el siglo XIX. La PPC se encuentra pr´ actica- mente erradicada en la actualidad, excepto ciertos focos aislados, al contrario que la peste porcina africana cuya situaci´ on es cr´ıtica debido a la falta de una vacuna efectiva y su r´ apida propagaci´ on. Las consecuencias de una epi- demia de PPC resultar´ıan catastr´ oficas, hecho por el cual continua siendo interesante analizar el comportamiento de la enfermedad.

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Papel del receptor CD209 en la activación de células dentríticas durante la infección por virus dengue serotipo 2

Papel del receptor CD209 en la activación de células dentríticas durante la infección por virus dengue serotipo 2

74 Algunos agentes patógenos tienden a regular el proceso de activación en las DC´s, por ejemplo el virus Vaccinia, Virus del Herpes, etc. inhibe la maduración de DC´s por lo tanto inhibe la correcta activación de los linfocitos T, en cuanto a la infección con DENV-2 se ha observado que incrementa la expresión de moléculas de co-estimulación CD80/CD86 [48, 148]. Como se mencionó las células dendríticas son los principales blancos de la infección lo cual se ve reflejado en la respuesta inmune de los pacientes, debido a que estas células son las responsables de orquestar la respuesta inmune innata al producir citocinas que logran activar otras células que participan en la respuesta inmune y generan un microambiente que favorece la eliminación del virus, además es capaz de inducir la respuesta adaptiva de linfocitos T, al activar adecuadamente a estas células a través de sus moléculas de presentación (que se unen al receptor TCR en linfocitos) y sus moléculas de co estimulación, que en conjunto estas dos señalas logran una activación capaz de eliminar al virus. Estas señales también necesitan de una tercera señal provista por las DC´s que son nuevamente las citocinas. Esta activación de linfocitos depende del estado de activación de las células dendríticas, la cual es inducida por el virus y la señalización estimulada por la unión Virus-Receptor. Por lo anterior, es importante evaluar el efecto del virus en la activación del virus y si la activación de las DC´s mediante el receptor CD209 puede cambiar este estado de activación viral y la producción de citocinas.
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Virus Chikungunya, una infección emergente

Virus Chikungunya, una infección emergente

El pico de viremia se presenta entre los días 1 y 3 desde el inicio de los síntomas y se puede detectar ARN de los virus no viables en presencia de anticuerpos hasta el día 12.
 Es posible detectar específicamente CHIKV con técnicas de PCR (reacción en cadena de polimerasa). Tanto la PCR convencional, como la PCR en tiempo real (real-time PCR, RT-PCR) permiten amplificar el gen que codifica la proteína de envoltura E-2 (5). Además, RT-PCR tiene mayor sensibilidad que PCR convencional y permite cuantificar la carga viral. La carga viral es un dato relevante en el pronóstico del paciente, sin embargo aún no se conoce la relación que podría tener con el desarrollo de artralgia persistente (19). También se han desarrollado técnicas de este tipo encaminadas a la amplificación de los genes sP1 y E-1 (6).
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Diagnóstico de la infección por el virus zika

Diagnóstico de la infección por el virus zika

Si bien el diagnóstico del zika está li- gado a los laboratorios de salud pública, cada vez se hace necesario especialmen- te en mujeres gestantes que asisten a los servicios de salud, en quienes es una prioridad tener el diagnóstico por las im- plicancias que tiene la infección sobre el feto, en el que se puede producir un sín- drome congénito como consecuencia de la infección intraútero.

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Respuesta humoral a dos inmunógenos contra la Peste Porcina Clásica en condiciones de campo

Respuesta humoral a dos inmunógenos contra la Peste Porcina Clásica en condiciones de campo

Con la aplicación de VCC (LABIOFAM, S.A) como parte de un programa de control de la PPC, en Cuba dejaron de presentarse focos de la enfermedad duran- te más de 25 años, hasta que en 1993 reemergió en el occidente del país debido, al crecimiento de la pobla- ción porcina de traspatio y la no disponibilidad de sufi- ciente vacuna, coincidentemente con una epidemia de la enfermedad hemorrágica viral del conejo que tam- bién incidió en la falta de estos animales para su pro- ducción, entre otros muchos factores (5) También se reportó que el brote pudo estar ocasionado por i) el es- cape de la cepa de confrontación Margarita, ii) la reemergencia de virus circulantes, previamente inadver- tidas (6). En Cuba se mantiene el uso de la VCC desde 1962 y actualmente está establecida la vacunación de las reproductoras y sus crías al momento del destete y los sementales cada 6 meses, y en granjas con ante- cedentes de la enfermedad, se revacuna la descenden- cia a los 35 días, en la categoría preceba (7).
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