FASE DE CAMPO

4.4.1 Área de Muestreo

En cada una de las fincas se dispuso como área de ensayo los invernaderos que tenían establecido la variedad “Freedom”, injertado en patrón Natal Brier, dichos invernaderos, se dividen en naves, cada nave consta a su vez de diez camas con dimensiones de 30 m de largo por 0,80 m de ancho para un total de 24 m2 y una densidad promedio de 280 plantas por cama, a su vez cada cama a lo largo se subdivide en siete cuadros, tal como aparece en la Figura 4. En los dos cultivos se realizaron mediciones de temperatura y humedad relativa, por lo tanto se tomaron cuatro naves de las cuales se eliminaron las dos laterales para evitar “el efecto de borde”, quedando así designada una nave y media como el área de evaluación.

Figura 4. Ubicación áreas de estudio. A. Área de muestreo del cultivo Fillco Flowers. B. Área de muestreo Teucali Flowers. (Foto: Perilla y Sanabria (2007)).

4.4.2 Muestreo con Láminas Atrapa-Esporas

La prueba para determinar la mayor cantidad de inoculo de acuerdo con los estratos de la planta, se realizo utilizando laminas atrapa-esporas, que consistían en laminas portaobjetos desinfestadas con alcohol cubiertas con 5 ml de agar-agar al 8%. Una vez solidificado el agar agar y con el fin de evitar su contaminación, las láminas se colocaron en una caja Petri. Posteriormente cada caja, se marco con su lugar de ubicación en campo y se transportaron

B

A

en una nevera de icopor a los cultivos objeto de estudio; una vez dentro del invernadero, las laminas se colocaron en un soporte metálico suspendido en los soportes de las naves, y de acuerdo con los estratos de la planta que se monitorearon (Figura 5).

Figura 5. Soporte láminas atrapa esporas. (Foto: Perilla y Sanabria (2007)

Esta metodología de captura de conidias fue empleada por Sierra (2005) y Zambrano (2005) para atrapar las conidias de Peronospora sparsa Berkeley, en cultivos de rosa.

Las láminas atrapa-esporas permanecieron por 24 horas en los invernaderos y en el centro de cada m2 de cama evaluada se colocaron tres de la siguiente forma: la primera se ubico aproximadamente a 5 cm de la parte alta del tallo, es decir a 1.80 m del suelo, la segunda en la parte media del tallo a 1.30 m y la tercera en el tercio inferior, a 80 cm de altura.

Después de dicho periodo de tiempo, las láminas se recolectaron cuidadosamente en sus respectivas cajas Petri y se trasladaron al laboratorio donde fueron observadas a través del microscopio (40X).

La observación se realizo a través del microscopio con el fin de identificar y contar las conidias de S. pannosa var. rosae recolectadas por lámina, determinando la cantidad de conidias por lamina y por área o lugar de muestreo.

anotan en el anexo 1, donde se mencionan los fungicidas registrados para el control de mildeo polvoso en rosas de la Sabana deBogotá.

Figura 6. Esquema del área de evaluación con los lugares de muestreó y monitoreo (*). Ubicación del termohigrómetro . El área del ensayo se observa color verde claro y los sitios de monitoreo en color verde oscuro.

Para las aplicaciones de los productos químicos se utilizo una bomba Maruyama marca Robin (Figura 7), adaptada con un tanque para capacidad de 500 L, que cuenta con dos salidas para lanzas con doble boquilla y discos de fumigación tipo C-35 con una descarga de 1,5 L por minuto y una presión de 140 PSI. Los fumigadores inician las aplicaciones por las camas laterales hasta llegar a las camas centrales.

7 6 5 4 3 2 1 1 2 3 4 5 6 7 1 1 N A 2 2 V E 3 3 1 4 4 5 5 7 6 5 4 3 2 1 1 2 3 4 5 6 7 1 C 1 N A A * * 2 M 2 * * V I E * 3 N 3 * O 2 * * 4 4 * * C 5 E 5 7 6 5 4 3 2 1 T 1 2 3 4 5 6 7 1 R 1 N A A * * 2 L 2 V E * 3 3 3 * * 4 4 5 5 7 6 5 4 3 2 1 1 2 3 4 5 6 7 N 1 1 A V 2 2 E 3 3 4 4 4 5 5 SECCION A N SECCION B

4.4.3 Registro de Condiciones Ambientales

Para determinar el desarrollo del patógeno S. pannosa var. rosae (mildeo polvoso) en relación con el microclima del invernadero, las variaciones de temperatura y humedad relativa registradas durante la investigación se consignaron en un formato diseñado para tal fin (Anexo 2), los registros se anotaron durante cinco días de la semana, a las 6:00, 11:00 y 14:00 horas. Para estas mediciones se utilizó un termohigrómetro (Figura 8), que se ubicó en la parte media de la cama central de la nave del invernadero, y con el fin de obtener resultados más reales de las condiciones ambientales bajo las cuales se encuentran las plantas, se ubicaron a la misma altura de las plantas en estudio.

Figura 7. La figura de izquierda muestra el equipo empleado en las fumigaciones (Bomba Maruyama), a la derecha se observa el método de aspersión. (Foto: A. Sanabria (2007)).

4.4.4 Monitoreo Foliar

En cada una de las plantas del área de estudio (m2) se contó el numero de hojas verdaderas por estrato (tercio bajo, medio y alto) de las plantas, para realizar el seguimiento de la severidad propuesta de acuerdo con el porcentaje de área foliar afectada (%AFA) e incidencia (numero de hojas verdaderas afectadas por estrato de acuerdo al numero total de hojas verdaderas por estrato x 100).

Los monitoreos se realizaron una vez por semana durante 17 semanas; tanto la incidencia como la severidad se midieron en los estratos bajos, medio y alto de la planta. Estos se registraron en planos fitosanitarios (Anexo 3).

La escala (Tabla 3) propuesta por Sanabria (2005) para calificar la severidad de la enfermedad se modifico debido a la baja incidencia del microorganismo durante el desarrollo de la investigación, por lo tanto se expreso simplemente como el porcentaje de área foliar afectada (AFA%).

Tabla 3. Escala de calificación de la severidad del mildeo polvoso.

Fuente: Sanabria (2005).