M. roreri
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
4.3. Caracterización cultural y molecular de Trichoderma spp procedentes de plantaciones
Se obtuvieron tres aislados del género Trichoderma procedentes de la rizosfera de tres plantaciones de cacao, que de acuerdo con las características culturales en medio de cultivo PDA (Figura 29) y moleculares, se correspondieron a T. harzianum y T. viride, procedentes de la provincia del Napo (Anexo 11).
Figura 29. Características culturales en medio de cultivo PDA de los aislados de
Trichoderma spp. a) UEA-Th1; b) UEA-Th2; c) UEA-Tv3.
Para los aislados UEA-Th1 y UEA-Th2, el análisis de secuencia de los nucleótidos mediante Blastn mostró una homología de 98 y 99% respectivamente, para T. harzianum
con número de accesión KP133166 según GenBank (Pozzo et al., 2015). El análisis Blastn indicó que la secuencia parcial del gen 18S ADNr amplificada a partir del ADN del aislado UEA-Th3, correspondió con un 99% de similitud a T. viride (Li et al., 2002), con respecto a la secuencia AF525230 depositada en la base de datos de GenBank de la NCBI (Tabla 10).
Resultados y Discusión
83 Tabla 10. Identificación molecular de aislados de Trichoderma spp.
Código de
aislado FASTA más cercana N° Accesión
% de
identidad Referencia
UEA-Th1 Trichoderma harzianum
aislado BLT4A KP133166.1 98 Pozzo et al. (2015)
UEA-Th2 Trichoderma harzianum
aislado BLT4A KP133166.1 99 Pozzo et al. (2015)
UEA-Tv3 Trichoderma viride AF525230.1 99 Li et al. (2002)
Los tres aislados obtenidos difirieron en cuanto a sus características morfológicas y culturales. Trichoderma presentó diversas formas de crecimiento en relación con el micelio, el color de sus colonias y la esporulación (Figura 30). Se observó que de acuerdo con sus características macroscópicas, UEA-Th1 y UEA-Th2 demostraron similitud con lo descrito por Rifai (1969), Fernández y Suárez (2009) y Romero et al. (2015) quienes describieron los caracteres de T. harzianum. UEA-Tv3 presentó similitud a lo descrito por Leickfeldt et al. (1999) para los caracteres morfológicos y moleculares de T. viride.
Figura 30. Microfotografía de las características morfológicas de los aislados de
Trichoderma, a) UEA-Th1; b) UEA-Th2; c) UEA-Tv3 con un aumento de 400X.
Entre las características relevantes que se observaron en los tres aislados de
Trichoderma spp. se pudo determinar que el color del micelio fue blanco, y que este era retorcido y plano, las fiálides estuvieron presentes y la esporulación fue de color verde (Tabla 11). Este resultado es coincidente con lo descrito por Rifai (1969) y Olivera Costa y Rodríguez (2014), quienes al referirse a las colonias de Trichoderma mencionan esta coloración como la típica para este género.
Resultados y Discusión
84
El aroma a coco que emanó fue claramente perceptible en el aislado UEA-Tv3 debido a su efecto antagónico, similar a lo observado por Dennis y Wester (1971) y Lieckfeld et al. (1999). Este resultado se corrobora con lo descrito por Samuels et al. (2006b) quien al estudiar aislados de Trichoderma de Perú y Ecuador determinó el fuerte olor a coco que emanan estos biocontroladores, hecho distintivo del clado "viride" debido a la presencia del ácido nonanoico conocido por inhibir el crecimiento y la germinación de las esporas (Garrett y Robinson, 1969).
Tabla 11. Características culturales y morfológicas de los tres aislados de Trichoderma
spp. procedentes de la rizosfera de plantaciones de cacao
Aislados Forma del micelio Color del micelio Tipo de micelio Color de esporas Olor Presencia de Fiálides
UEA-Th1 Retorcido Blanco Plano Verde Ninguno Si
UEA-Th2 Retorcido Blanco Plano Verde Ninguno Si
UEA-Tv3 Retorcido Blanco Aéreo Verde Aroma a coco Si
En relación con la presencia de Trichoderma asociada a cacao en la Amazonía del
Ecuador, Evans et al. (2003), describieron la presencia de Trichoderma hamatum Rifai,
T. harzianum, T. virens (J.H. Mill., Giddens & A.A. Foster) y T. viride asociados a
Theobroma gileri árbol amazónico, en Esmeraldas y Pichincha, provincias de la Costa y Sierra ecuatoriana, respectivamente.
De la misma forma Evans (1999), descrito por Samuels et al. (2006a), aisló Trichoderma ovalisporum Samuels & Schroers aislado (DIS 70a) de una liana (Banisteropsis caapi
Mar.) procedente de la provincia de Sucumbíos, región Amazónica del Ecuador en la ribera de los ríos Panacocha y Yanayacu.
En la literatura científica consultada no se encontró hallazgo previo de informe, de
T. harzianum y T. viride en la Amazonía ecuatoriana, asociada a cacao, por lo que este trabajo constituye el primer reporte de estas especies antagonistas en plantaciones orgánicas amazónicas de cacao.
Resultados y Discusión
85 Velocidad de crecimiento micelial de aislados de Trichoderma spp.
Se pudo evidenciar que los promedios de crecimiento micelial de Trichoderma spp. fueron similares en los tres aislados, cubriendo la placa de Petri (90 mm Ø) a las 72 h de inoculación, por lo tanto no presentaron diferencias significativas en cada una de las evaluaciones (Tabla 12).
Tabla 12. Crecimiento micelial (mm) de tres aislados de Trichoderma spp. a las 24, 48 y 72 h
Aislados Crecimiento micelial (mm)
24 h 48 h 72 h
UEA-Th1 21,26 71,58 90,05
UEA-Th2 19,89 68,76 90,05
UEA-Tv3 17,22 71,90 90,05
Datos por la prueba de Duncan P<0,05 (n=10)
Dennis y Webster (1971), y Cook y Baker (1983) afirmaron que la velocidad de crecimiento de Trichoderma sirve como guía para su utilización como antagonistas en el control de fitopatógenos, demostrando así la variabilidad de la actividad antagónica de las especies de Trichoderma; lo cual constituye una ventaja en el momento de colonizar el área de crecimiento del hongo fitopatógeno.
Los resultados obtenidos coinciden con lo descrito por Párraga y Zambrano (2012), quienes al estudiar la tasa de crecimiento de cepas de Trichoderma spp. in vitro
determinaron que las cepas C1, C10, C4 y C9 cubrieron la totalidad de las placas de Petri (90 mm Ø) a los tres días, después de incubadas.
Estos resultados difieren de lo descrito por Arcos (2011), quien al evaluar cepas nativas de
Trichoderma spp. en el biocontrol de Botrytis cinerea Pers. en rosas, determinó que el crecimiento del diámetro de la colonia de Trichoderma spp. fue de 89,3 mm a los cuatro días.
Resultados y Discusión
86
Entre los tres aislados de Trichoderma spp. no se encontraron diferencias estadísticas en cuanto a la tasa de crecimiento micelial, a pesar de que el aislado UEA-Tv3, mostró un valor relativo ligeramente superior (Tabla 13).
Estos resultados difieren de los de Solís (1999), quien al evaluar organismos antagónicos asociados a M. roreri determinó que la velocidad de crecimiento de Trichoderma spp. a las 96 h fue de 22,50 mm día.
Tabla 13. Tasa de crecimiento micelial de aislados de Trichoderma a los tres días de incubación y al cuarto día para los biopreparados
Aislados Tasa de crecimiento micelial (mm día)
UEA-Tv3 36,42
UEA-Th2 35,08
UEA-Th1 34,40
Datos por la prueba de Duncan P<0,05 (n=10)
4.4. Evaluación de la actividad antagónica in vitro de Trichoderma spp. frente a
M. roreri
Competencia por espacio
Al evaluar el enfrentamiento en cultivo dual de Trichoderma harzianum y T. viride, frente a
M. roreri, se determinó que al primer día los aislados UEA-Th1, UEA-Th2 y UEA-Tv3, presentaron crecimientos promedios de 18,17; 17,75 y 16,45 mm respectivamente.
M. roreri tuvo un crecimiento promedio de 29,58 mm. En el segundo día de evaluación
Trichoderma UEA-Tv3 presentó mayor crecimiento con un promedio de 48,00 mm, UEA-Th2 y UEA-Th1 alcanzaron promedios de 44,72 y 43,36 mm respectivamente. Los aislados de M. roreri presentaron crecimiento promedio de 36,38 mm. Al tercer día de evaluación, el aislado UEA-Tv3 obtuvo el mayor crecimiento con un promedio de 61,79 mm, seguido de UEA-Th1 y UEA-Th2 con promedios de 56,37 y 56,13 mm
Resultados y Discusión
87
respectivamente. El hongo patógeno M. roreri mostró un crecimiento lento en relación con el antagonista con un promedio de 41,38 mm.
A los cuatro días de enfrentamiento el aislado antagonista UEA-Tv3 presentó un crecimiento de 67,18 mm, sin mostrar diferencias significativas entre sí con UEA-Th2 que presentó 66,07 mm, seguido de UEA-Th1 quien obtuvo un crecimiento de 63,13 mm. Los tres aislados de Trichoderma cubrieron la totalidad del medio de cultivo, y sobrecrecieron la colonia de M. roreri, disminuyendo notablemente el crecimiento del hongo fitopatógeno (Figura 31). a a b 0 10 20 30 40 50 60 70 80
UEA-Tv3 UEA-Th2 UEA-Th1
Cr e c im ie n to d e l m ic e lio (m m ) Trichoderma M. roreri
Figura 31. Crecimiento al cuarto día de antagonistas frente a M. roreri. Cultivo dual en medio V8 modificado. Barras con letras desiguales difieren, por la prueba de Duncan P<0,05 (n=10)
Estos resultados son similares a lo descrito por Solís (1999), donde Trichoderma spp. obtuvo un valor de 64,9 mm al quinto día de evaluación. Ello evidenció una mayor velocidad de crecimiento, competencia por espacio y por los nutrientes del medio de cultivo. Trichoderma spp. tiene un gran potencial para producir enzimas hidrolíticas en presencia de un hongo patógeno (Romero-Arenas et al., 2009).
Resultados y Discusión
88
El comportamiento del enfrentamiento dual de los microorganismos antagonistas frente
M. roreri en medio V8 modificado, en relación con la reducción del hongo patógeno, evidenció que al quinto día de evaluación, los aislados UEA-Tv3, UEA-Th2 y UEA-Th1 mostraron el mayor porcentaje de inhibición, sin diferencias significativas entre sí con PICR de 47,66; 47,64 y 46,45 respectivamente.
Este planteamiento es confirmado por Samuels et al. (2006b), quienes obtuvieron 44,93% de PICR al evaluar M. roreri en caldo extracto de malta con filtrados de T. theobromicola
Samuels & H.C. Evans procedentes de Perú.
La capacidad antagónica según la escala de Bell et al. (1982), de los aislados de
Trichoderma spp. sobre M. roreri fue de clase 2 (Tabla 14), donde a través de observaciones macroscópicas, se evidenció que los antagonistas colonizaron las dos terceras partes de la superficie de la placa de Petri (90 mm Ø) en la que inhibieron el crecimiento de M. roreri.
Tabla 14. Clase y zonas de antagonismo de aislados de Trichoderma spp. en medio V8 modificado Antagonista Clase de antagonismo Zonas de antagonismo UEA-Th1 2 3 UEA-Th2 2 3 UEA-Tv3 2 3
Estos resultados son semejantes a los obtenidos por Solís (1999), quien al evaluar a
Trichoderma spp. sobre M. roreri, determinó que se ubicó en clase 1.
Otros autores tales como Harman (2003), Bernal et al. (2004), Hernández et al. (2006), Martinez et al. (2008), Infante et al. (2009) y Martínez et al. (2013), afirmaron que
Trichoderma spp. tiene una alta capacidad de competencia por nutrientes y espacio, dado fundamentalmente porque su velocidad de crecimiento es superior a la del hongo patógeno.
Resultados y Discusión
89
De conformidad a la escala de Punja y Grogan (1983), la zona de antagonismo de los tres aislados de Trichoderma spp. se situó en la zona 3, presentando aversión fuerte (Tabla 14).
Micoparasitismo
Los resultados de las observaciones microscópicas de las interacciones entre antagonista y fitopatógeno dependieron del aislado. UEA-Tv3 mostró un efecto marcado sobre el micelio y las esporas de M. roreri, en los que se evidenciaron mecanismos de control como degradación parcial o total (lisis), ruptura y fragmentación. Se observó penetración y formación de haustorios dentro de las hifas de M. roreri (Figura 32). Los resultados encontrados en el presente trabajo coinciden con los mecanismos de penetración informados por Howell (2003) en otras interacciones antagonistas-hongos fitopatógenos.
Figura 32. Micoparasitismo de Trichoderma viride aislado UEA-Tv3, en M. roreri, con aumento de 400X.
Estos resultados se relacionan con lo encontrado por Gonzales (2001), quien al evaluar
T. viride y Trichoderma sp. cepa C-66 detectó micoparasitismo sobre aislados de
Rhizoctonia solani Kühn, en frijol (Phaseolus vulgaris L.) con reducción del crecimiento micelial del hongo patógeno. Otros autores como Guédez et al. (2009) comprobaron el fenómeno de micoparasitismo por enrollamiento, penetración y lisis en interacción con hongos que afectan el cultivo de la fresa (Fragaria x ananassa Duch.), mientras que Pérez
Resultados y Discusión
90 oryzae Breda de Haan, observaron enrollamiento, penetración hifal, lisis, y vacuolización en hifas.
Además, los tres aislados del género de Trichoderma mostraron la propiedad de agrupar esporas sobre el micelio M. roreri (Figura 33). UEA-Th1 y UEA-Th2 fueron capaces de desarrollar estructuras de reproducción.
Figura 33. Agrupamiento de esporas de Trichoderma harzianum aislado UEA-Th2, sobre micelio de M. roreri, con aumento de 400X
No se observó enrollamiento, lo que coincide con lo descrito por Acosta-Suárez et al. (2013), quienes determinaron que T. harzianum no causó enrollamiento sobre
Mycosphaerella fijiensis Morelet en condiciones in vitro.
Antibiosis
En la prueba de metabolitos volátiles, el aislado UEA-Tv3 fue el que mostró la mayor actividad en la reducción del crecimiento relativo de M. roreri a las 168 h con un promedio de inhibición de 21,12%, pero sin diferencias significativas con UEA-Th2, UEA-Th1 que presentaron una actividad de 15,89 y 13,65% respectivamente, así como reducción del crecimiento sobre el fitopatógeno (Tabla 15).
Resultados y Discusión
91 Tabla 15. Crecimiento de M. roreri en presencia de metabolitos volátiles de antagonistas, a los siete días de evaluación
Crecimiento radial (mm h-1) de M. roreri PICR
(%) Antagonista 24 h 48 h 72 h 96 h 120 h 144 h 168 h UEA-Th1 27,39 ab 36,62 45,68 ab 57,16 a 61,09 66,97 71,39 13.65 UEA-Th2 28,41 a 38,72 48,55 a 57,17 a 59,24 66,69 69,54 15.89 UEA-Tv3 25,46 b 35,03 43,67 b 51,61 b 56,39 63,42 65,22 21.12 EE (±) 0,70 1,15 1,21 1,59 2,71 2,27 2,45
Medias con letras diferentes, en el sentido de las columnas difieren por la prueba de Duncan P ≤0,05 (n=10)
Los aislados UEA-Tv3 y UEA-Th2 tuvieron influencia en la reducción de la esporulación de M. roreri. Las afectaciones de este antagonista se observaron en las características culturales del fitopatógeno, y provocaron variaciones en los bordes y textura del micelio, mientras el aislado UEA-Th1 inhibió la esporulación con menor eficacia (Tabla 16).
Tabla 16. Porcentaje de Inhibición de Esporulación (% I.E) de M. roreri en presencia de antagonistas
Samuels et al. (2006b), al evaluar la actividad micoparasítica de Trichoderma theobromicola obtenida a partir de árboles sanos de cacao de la Amazonía peruana y T. paucisporum Samuels, C. Suarez & Solís aislada a partir de mazorcas de cacao parcialmente infectadas con M. roreri en la provincia de Los Ríos, Ecuador, demostraron que los dos antagonistas fueron capaces de producir antibióticos difusibles volátiles que inhibieron el desarrollo de M. roreri in vitro y en campo.
Los resultados de esta investigación se corresponden además con lo informado por otros autores respecto a la capacidad antagónica de Trichoderma. León et al. (2012)
Antagonista Esporulación (conidias mL-¹) % IE UEA-Th1 8,87 x 104 47,82 UEA-Th2 4,75 x 104 72,06 UEA-Tv3 3,70 x 104 78,24 Control 1,70 x 105
Resultados y Discusión
92
determinaron micoparasitismo sobre Sclerotium rolfsii Sacc., Rhizoctonia sp. y
Fusarium sp. que provoca estrangulamiento o lisis de las paredes de las hifas, y con ello la desintegración y degradación de las paredes celulares y el debilitamiento o muerte de los patógenos. Inhibe por competencia e hiperparasitismo el crecimiento de Macrophomina phaseolina Tassi (Goid) (Hernández et al., 2011). Alvindia (2012) determinó inhibición del crecimiento de M. fijensis en la cepa de T. harzianum DGA01, aislada de frutos de banano después de 10 días de incubación.
Estos resultados corroboraron el alto potencial antagonista de Trichoderma sobre M. roreri
lo que permite seleccionar aislados que se destacan por su amplia variabilidad de mecanismos frente a este fitopatógeno.
Es de gran importancia contar con aislados nativos que controlen M. roreri por ser considerada la principal enfermedad del cacao en la Amazonía ecuatoriana, ocasionando grandes pérdidas a los productores.
Los resultados obtenidos al utilizarse los aislados de T. harzianum y T. viride como agentes de control biológico de M. roreri, constituyen los primeros informados para la Amazonía del Ecuador.
4.5. Evaluación de la eficacia de aislados nativos de Trichoderma spp. y biopreparados comerciales en el control de la Moniliasis del cacao en condiciones de campo
Los aislados de Trichoderma spp. (UEA-Th2 y UEA-Tv3), seleccionados por su comportamiento in vitro frente a M. roreri,presentaron resultados muy alentadores para los ensayos en campo. El efecto que presentaron los biocontroladores (UEA-Tv3 y UEA-Th2 +
UEA-Tv3), en la reducción del porcentaje de mazorcas infectadas con hongos fitopatógenos y otras enfermedades mostraron diferencias significativas con los biopreparados comerciales Trichotic y Rhapsody, siendo estadísticamente diferentes del control. Se determinó que los aislados UEA-Tv3 y UEA-Th2 tuvieron un efecto
Resultados y Discusión
93
significativo sobre las enfermedades de cacao, sin embargo UEA-Tv3 tuvo niveles muy cercanos a Óxido cuproso (Tabla 17).
Tabla 17. Porcentaje de mazorcas enfermas (M. roreri, M. perniciosa, y otras enfermedades) registradas cada quince días de evaluación en parcelas aplicadas con fungicidas químicos y biológicos
Medias con letras diferentes, en el sentido de las columnas difieren por la prueba de Duncan P ≤0,05
Los biocontroladores ejercieron el mejor control del porcentaje de mazorcas enfermas con respecto al control, pero fueron inferiores al tratamiento químico, sin embargo el tratamiento con UEA-Tv3 no difirió estadísticamente del Óxido cuproso en las evaluaciones 5, 6 y 7, lo cual no ocurrió para los demás biocontroladores.
El tratamiento con UEA-Tv3 superó al resto de los tratamientos biológicos al final de las evaluaciones, mientras que el tratamiento UEA-Th2 + UEA-Tv3 fue superior al tratamiento con Trichotic y Rhapsody en la última evaluación.
Esto concuerda con Solís y Suárez-Capello (2006), quienes determinaron que la reducción de enfermedades en parcelas de cacao, tratadas con T. koningiopsis (Samuel, Súarez y H.C. Evans) y T. stromaticum fueron similares a las obtenidas con fungicidas.
Evaluaciones (días) Tratamientos Mazorcas Infectadas (%) 15 30 45 60 75 90 105 1. UEA-Tv3 47,20 b 42,9 b 35,25 b 31,5 c 29,44 cd 19,89 c 18,14 de 2. UEA-Th2 + UEA-Tv3 52,05 b 41,35 b 38,66 b 38,21 bc 35,16 bc 29,43 b 23,41 cd 3. Trichotic 52,40 b 43,90 b 40,63 b 38,9 bc 37,90 b 34,05 b 30,22 b 4. Rhapsody 50,96 b 42,58 b 42,03 b 43,10 ab 36,05 bc 30,49 b 28,16 bc 5. Óxido cuproso 50,59 b 38,74 b 34,84 b 29,86 c 25,60 d 18,9 c 15,56 e 6. Control 67,55 a 57,69 a 52,83 a 53,19 a 55,14 a 57,41 a 59,08 a EE (±) 3,21 2,72 2,53 3,63 2,73 2,70 2,05
Resultados y Discusión
94
Resultados similares fueron descritos por Holmes et al. (2004); Benito et al. (2007); Bailey
et al. (2008); Osorio (2010) y Villamil et al. (2015), quienes al evaluar T. viride,
T. harzianum y T. hamatum, encontraron antagonismo sobre M. roreri in vitro e in situ.
Todos los tratamientos biológicos y el químico fueron mejores que el control en relación con mazorcas infectadas con M. roreri (%) en las evaluaciones quincenales realizadas en el ensayo de campo. Los tratamientos UEA-Tv3 y UEA-Th2 + UEA-Tv3 no difirieron del tratamiento químico a los 45, 90 y 105 días. El tratamiento con el aislado del antagonista UEA-Tv3 fue mejor que los productos comerciales Trichotic y Rhapsody en las evaluaciones realizadas a los 75, 90 y 105 días (Tabla 18).
Tabla 18. Porcentaje de mazorcas enfermas con M. roreri a los cuatro meses de evaluación en condiciones de campo
Evaluaciones (días) Tratamientos
Mazorcas infectadas con M. roreri (%)
15 30 45 60 75 90 105 1. UEA Tv3 40,30 b 38,38 b 31,52 bc 30,52 b 25,05 bc 13,04 d 10,75 c 2. UEA Th2 + UEA Tv3 44,19 ab 40,19 b 34,27 bc 33,27 b 29,75 b 16,80 cd 15,85 bc 3. Trichotic 45,94 ab 45,94 ab 39,94 b 35,94 b 31,54 b 25,85 b 23,13 b 4. Rhapsody 45,34 ab 43,34 ab 39,25 b 37,08 b 29,14 b 24,46 bc 21,78 b 5. Óxido cuproso 40,15 b 34,65 b 30,02 c 29,02 b 15,30 c 12,99 d 9,39 c 6. Control 56,63 a 53,47 a 56,51 a 56,51 a 54,18 a 51,51 a 53,18 a EE (±) 4,16 4,17 2,87 2,84 3,80 3,03 2,49
Medias con letras diferentes, en el sentido de las columnas, difieren por la prueba de Duncan P ≤0,05
Estos resultados coinciden con lo descrito por Osorio (2010), quien determinó la eficiencia de T. harzianum como biocontrolador sobre M. roreri en la Costa ecuatoriana a partir de los 62 días de la primera aspersión. De la misma forma Guerrero y Arias (2006), determinaron que T. koningiopsis resultó efectivo en el control de Moniliasis en la misma magnitud que los fungicidas químicos. No así Robles (2008), quien al usar productos biológicos basados en bacterias, determinó su producción por encima de los productos químicos.
Resultados y Discusión
95
Los resultados evidenciaron que de los tratamientos evaluados, el aislado UEA-Tv3 obtuvo una eficacia técnica de 80,39% sobre el hongo fitopatógeno M. roreri. Los aislados UEA-Th2 + UEA-Tv3 ejercieron un control aceptable por encima del 60% (CNSV, 2011), lo que implica una disminución del fondo infectivo de M. roreri en condiciones de campo, no así los biopreparados comerciales que no alcanzaron ese valor. UEA-Tv3 fue la mejor alternativa biológica ya que nunca tuvo diferencia estadística con el control químico en cuanto a la eficacia, mientras que en segundo lugar se ubica UEA-Th2 + UEA-Tv3, tratamiento que fue superior a Trichotic y Rhapsody en la última evaluación (Tabla 19).
Tabla 19. Eficacia técnica de los tratamientos en el control de M. roreri evaluados después de cada aplicación
Aplicaciones Tratamientos
Eficacia Técnica
1 2 3 4
x Orig. x Transf. x Orig x Transf x Orig x Transf x Orig x Transf 1. UEA-Tv3 37,57 0,65 43,47 0,72 56,26 0,85 ab 80,39 1,20 a 2. UEA-Th2 + UEA-Tv3 31,58 0,57 38,72 0,67 44,19 0,72 b 69,94 0,99 bc 3. Trichotic 25,91 0,51 35,29 0,63 45,72 0,73 b 55,63 0,85 c 4. Rhapsody 29,32 0,54 34,00 0,59 45,73 0,73 b 59,10 0,89 c 5. Óxido cuproso 29,70 0,55 45,74 0,74 70,95 1,01 a 82,61 1,15 ab EE (±) 0.07 0,05 0,06 0,06
Medias con letras diferentes, en el sentido de las columnas difieren por la prueba de Duncan P ≤0,05
Resultados similares han sido obtenidos por diversos autores respecto a la eficacia de
T. harzianum y T. viride sobre M. roreri, entre ellos Bastos (1998), quien determinó la efectividad de T. viride sobre el hongo fitopatógeno en Colombia en un 98%. Resultados similares presentó Osorio (2010), al comprobar la eficiencia de T. harzianum en campo, como biocontrolador sobre M. roreri, al reducir la enfermedad hasta en 17%.
Estos resultados concuerdan con los de Seng et al. (2014), quienes informaron que
Trichoderma es capaz de reducir la incidencia de infección de M. roreri en 11% a los 35 días, al aplicar spray de Trichoderma spp. con tierra, ceniza y otras fuentes de carbón en plantaciones de cacao.
Resultados y Discusión
96
De esta manera se confirmó que la selección y especificidad de los aislados de
Trichoderma constituyen un elemento importante a tomar en cuenta para ser utilizados como agentes de control biológico (Acevedo y Arcia, 2006).
Ayala (2008), al determinar la efectividad técnica de fungicidas químicos en plantaciones de cacao obtuvo valores que no sobrepasaron el 55,70% luego de seis meses de investigación.
Algunos autores señalan la potencialidad de T. harzianum en el control de hongos