3. MARCO DE RESULTADOS, DISCUSIÓN Y ANÁLISIS DE RESULTADOS
3.2 Fermentación de Residuos de Cacao y Guineo
3.3.4 Comparación de parejas de tratamientos para los resultados HPLC de las
3.3.4.1. Planteamiento de Hipótesis
Ho: μi= μj Ha: μi ≠ μj
Donde i y j =1, 2,3
Tabla 16-3: Tabla de Tukey para Fermentaciones de residuos Cacao, cacao-guineo y guineo.
Fermentación N Diferencia de medias Agrupación
Cacao 5 -0.9819 A
Guineo 5 -1.1743 B
Cacao-Guineo 5 -1.3240 B
Realizado por: Moreira Diana, 2019.
Mediante la prueba de Tukey, se identifica que la media de concentración de riboflavina para la fermentación de cacao es significativamente diferente y se puede observar en el Gráfico 6-3.
Gráfico 7-3: Prueba de diferencia de los resultados HPLC de las concentraciones de riboflavina de las fermentaciones de residuos de cacao, guineo-cacao y guineo.
Realizado por: Moreira Diana, 2019.
A un nivel de significancia del 0.05 se rechaza Ho, dado que el valor p es de 0.001, se concluye que existe diferencia significativa entre la concentración de riboflavina en la fermentación de los 3 productos. Se indica que la concentración de riboflavina en la muestra de cacao es significativamente superior a las otras muestras.
Como resultado de las fermentaciones se obtuvo un líquido espero color marrón, con partículas sólidas en su interior y al analizar este líquido con las cromatografías de capa fina pudimos determinar la presencia de riboflavina en todas las fermentaciones, pero no su cantidad.
La cantidad de vitamina B2 se pudo analizar gracias al estudio HPLC, es decir; Existe una concentración de riboflavina (mg/100g) promedio de 0.092, 0.048, 0.068 de acuerdo a la fermentación de cacao, cacao-guineo y guineo respectivamente, que es mucho menor a los valores obtenidos en experimentos relacionados con la producción de riboflavina empleando Saccharomyces cerevisiae y como sustrato agua de cocción de maíz enriquecido con peptona, sacarosa, glicina, aceite de canola y D-Glucosa, que dieron como resultado 13.313 mg/L durante 6 días de fermentación (Muñoz Gutiérrez D., 2016, p. 202). En tanto que, Lara, (2001), menciona que en la fermentación empleando Ashbya gossypii en un caldo específico preparado, obtiene 0.125µg/mL en un período de fermentación de 7 días.
Guineo Cacao y Guineo Cacao 0,11 0,10 0,09 0,08 0,07 0,06 0,05 0,04 0,03 Fermetacion Ri vo fla vi na
CONCLUSIONES
La fermentación con Saccharomyces cerevisiae, de residuos agroindustriales es un proceso biotecnológico que permite el aprovechamiento de residuos de cacao y guineo para la obtención de vitamina B2
Los residuos agroindustriales de cacao presentaron una humedad de 79.8%, un promedio de cenizas de 2.15% y 18*10-6 UFC de levaduras, mientras que los residuos de guineo presentaron 1.44% de cenizas, 78.2% de humedad y 362*10-3 UFC, valores que permitieron el correcto desarrollo de la fermentación.
Se adaptaron los fermentadores para la producción de riboflavina a nivel prototipo, éstos resultaron herramientas de fácil adquisición que se pueden emplear a nivel artesanal.
El producto obtenido de la fermentación de los residuos agroindustriales, presentó un Rf de 0,91 igual al estándar, lo que indica la obtención de riboflavina, mientras que la concentración promedio de riboflavina obtenida por medio de HPLC fue de 0.092, 0.048, 0.068 (mg/100g) en las fermentaciones de cacao, cacao-guineo y guineo respectivamente,
RECOMENDACIONES
A nivel industrial se puede usar una cepa con mayor producción de riboflavina como Ashbya gossypii.
Para aprovechar mejor los residuos agroindustriales de cacao y guineo y lograr mayor producción de riboflavina se podría enriquecer los caldos de fermentación.
Para asegurar la presencia de la riboflavina en los fermentados, se los debe proteger de la luz solar, debido a su alta foto sensibilidad.
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ANEXOS
ANEXO A: Caracterización de los residuos agroindustriales de Cacao y Guineo.
Determinación de cenizas y humedad Determinación de proteínas
Determinación de UFC en PCA Determinación de hongos y levaduras en medio Saboraud
ANEXO B: Fermentación de los Residuos Agroindustriales de cacao y guineo.
Fermentación de los residuos agroindustriales de cacao.
Fermentación de los residuos agroindustriales de cacao- guineo.
Fermentación de los residuos
ANEXO C: Análisis de los Resultados de la Fermentación de cacao, cacao- guineo y guineo.
Recolección de muestras de fermentación. Placas de conteo de levaduras de las fermentaciones, en agar Saboraud.
Realización de cromatografía en capa fina de las fermentaciones.
Placas de cromatografía en capa fina en una cuba, sumergidos en el eluyente.
ANEXO D: Resultados HPLC de las Fermentaciones.
Análisis de laboratorio, HPLC de riboflavina de la fermentación de cacao.
Cromatograma del HPLC de riboflavina de la fermentación de cacao.
Análisis de laboratorio, HPLC de riboflavina de la fermentación de cacao y guineo.
Cromatograma del HPLC de riboflavina de la fermentación de cacao y guineo.
Análisis de Laboratorio, HPLC de riboflavina de la fermentación de guineo
Cromatograma del HPLC de riboflavina de la fermentación de guineo.
ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO
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