CAPÍTULO 7: ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN
3. De la recepción
2.1.10.1 Ausgangsvektoren
Vektor Eigenschaften Referenz
pBS II SK+ ColE1 ori, Ampr, LacZ, f1(+)IG, Stratagene SK-MCS
pRK5 Expressionsvektor, Ampr, f1 ori, Genentech, CMV Promotor, SV40 poly A, San Franzisco
hohe Kopienzahl
pcDNA3 Expressionsvektor, Ampr, Neor, f1 ori Invitrogen,
CMV Promotor, BGH poly A, USA
hohe Kopienzahl
pUHD10-3 Tetrazyklin-sensitiver Expressionsvektor, Gossen und
colEl-Replikationsstart, CMV Promotor Bujard, 1992
mit sieben Tet-Operatorsequenzen,
SV40 poly A, pUC ori
pUHD15-1 Expressionsvektor für tTA, Ampr, Neor Gossen und CMV Promotor, SV40 poly A, pUC ori Bujard, 1992
pLXSN Retroviraler Expressionsvektor, Miller und
Ampr, Neor, ori aus pBR322, Rosman,1989 5’-LTR und 3’-LTR aus MoMuLV,
SV40 Promotor
SFG-t7EC3 Retroviraler, Teteazyklin-sensitiver Lindemann et al., Expressionsvektor, Ampr, modifizierter 1997
3´-LTR mit sieben Tet-Operatorsequenzen
SFG-tcITE1 Retroviraler, Teteazyklin-sensitiver Lindemann et al., Expressionsvektor, Ampr , interner CMV- 1997
Minimalpromotor mit sieben Tet-Operator- Sequenzen und IRES-Sequenz
pTK-Hyg Selektionsvektor, Ampr, Hygr, HSV TK- Clontech, USA
Promotor ohne Enhancer-Element,
HSV TK poly A, pUC ori
pGEX-3 bakterieller Expressionsvektor für Pharmacia,
GST-Fusionsprotein, Ampr Freiburg
2.1.10.2 Im Rahmen dieser Arbeit verwendete Vektoren
Vektoren Eigenschaften Referenz
pRK5-HER1 in pRK5 klonierte cDNA von HER1 A. Chantrey, d. AG. pRK5-EGFR- in pRK5 klonierte cDNA des humanen, diese Arbeit
VSV/VSV-NT am N-Terminus mit zwei VSV-Epitopen markierten EGFRs
pRK5-EGFR- in pRK5 klonierte cDNA des humanen, diese Arbeit VSV/VSV-CT am C-Terminus mit zwei VSV-Epitopen
markierten EGFRs
pRK5-EGFR- in pRK5 klonierte cDNA des humanen diese Arbeit EXTRA-TM-VSV/VSV EGFRs, dessen intrazelluläre Domäne
durch zwei VSV-Epitope ersetzt wurde
pRK5-EGFR- in pRK5 klonierte cDNA des humanen diese Arbeit VSV/VSV-TM-INTRA EGFRs, dessen extrazelluläre Domäne
durch zwei VSV-Epitope ersetzt wurde
pRK5-LAR in pRK5 klonierte cDNA der humanen B. Aicher,
PTP-LAR d. AG.
pRK5-LARwt-VSV in pRK5 klonierte cDNA humaner, am diese Arbeit C-Terminus mit zwei VSV-Epitopen
markierter PTP-LAR
pRK5-LAR-C1522S-VSV pRK5-LARwt-VSV-Derivat mit dem diese Arbeit AS-Austausch Cys1522->Ser
pRK5-LAR-C1813S-VSV pRK5-LARwt-VSV-Derivat mit dem diese Arbeit AS-Austausch Cys1813->Ser
pRK5-LAR- pRK5-LARwt-VSV-Derivat mit dem diese Arbeit CC1522/1813SS-VSV AS-Austausch Cys1522->Ser sowie
Cys1813->Ser
pRK5-LAR-PD-VSV pRK5-LARwt-VSV-Derivat mit dem diese Arbeit
AS-Austausch 1221VVQVTPAQQQ
pcDNA3-ETNR in pcDNA3 klonierte cDNA des humanen M. Leserer,
Endothelin-Rezeptors d. AG.
pcDNA3-M1R in pcDNA3 klonierte cDNA des humanen M.Leserer,
M1Rs d. AG.
pcDNA3-TACE-HA in pcDNA3 klonierte cDNA humaner, am S. Hart, C-Terminus mit einem HA-Epitop mar- d. AG. kierter TACE
pcDNA3-ESK pcDNA3-Derivat, modifizierte MCS aus diese Arbeit pBS II SK+
pcDNA3-EKS pcDNA3-Derivat, modifizierte MCS aus diese Arbeit pBS II KS+
pcDNA3-EKS -HER2 in pcDNA3-EKS klonierte cDNA von diese Arbeit HER2
pcDNA3-tTA-Puro pcDNA3-Derivat, Puror anstelle Neor, diese Arbeit CMV-Minimalpromotor mit sieben
Tet-Operator-Sequenzen anstelle CMV- Promotor, autoregulatorische tTA- Expression
pLXSN-HER2 in pLXSN klonierte cDNA von HER2 U. Weiß, d. AG. pLXSN-ESK pLXSN-Derivat, modifizierte MCS aus diese Arbeit
pBS II SK+
pLXSN-EKS pLXSN-Derivat, modifizierte MCS aus diese Arbeit pBS II KS+
pLXSN-ESK- in pLXSN-ESK klonierte cDNA humaner, diese Arbeit LARwt-VSV am C-Terminus mit zwei VSV-Epitopen
markierter PTP-LAR
pLXSN-ESK- pLXSN-ESK-LARwt-VSV-Derivat mit diese Arbei LAR-C1522S-VSV dem AS-Austausch Cys1522->Ser
pLXSN-ESK- pLXSN-ESK-LARwt-VSV-Derivat mit diese Arbei LAR-C1813S-VSV dem AS-Austausch Cys1813->Ser
pLXSN-ESK- pLXSN-ESK-LARwt-VSV-Derivat mit diese Arbei LAR-CC1522/1813SS- dem AS-Austausch Cys1522->Ser sowie
VSV Cys1813->Ser
pLXSN-ESK- pLXSN-ESK-LARwt-VSV-Derivat mit diese Arbeit LAR-PD-VSV dem AS-Austausch 1221VVQVTPAQQQ
SFG-tcITE1-Neo SFG-tcITE1-Derivat, Neor, diese Arbeit autoregulatorische tTA-Expression
SFG-t7EC3M-PHS SFG-t7EC3-Derivat, erweiterte MCS, diese Arbeit HygBr unter der Kontrolle eines HSV-TK-
Promotors in Transkriptionsrichtung des
Zielgens
SFG-t7EC3M-SHP SFG-t7EC3-Derivat, erweiterte MCS, diese Arbeit HygBr unter der Kontrolle eines HSV-TK-
Promotors entgegen der Transkriptions-
richtung des Zielgens
SFG-t7EC3M-PHS- SFG-t7EC3M-PHS mit humaner diese Arbeit
PTP-H1 PTP-H1 cDNA
SFG-t7EC3M-PHS- in SFG-t7EC3M-PHS klonierte cDNA diese Arbeit LARwt-VSV humaner, am C-Terminus mit zwei VSV-
Epitopen markierter PTP-LAR cDNA
SFG-t7EC3M-PHS- SFG-t7EC3M-PHS-LARwt-VSV-Derivat diese Arbei LAR-C1522S-VSV mit dem AS-Austausch Cys1522->Ser
SFG-t7EC3M-PHS- SFG-t7EC3M-PHS-LARwt-VSV-Derivat diese Arbei LAR-C1813S-VSV mit dem AS-Austausch Cys1813->Ser
SFG-t7EC3M-PHS- SFG-t7EC3M-PHS-LARwt-VSV-Derivat diese Arbei LAR-CC1522/1813SS- mit dem AS-Austausch Cys1522->Ser
VSV sowie Cys1813->Ser
SFG-t7EC3M-PHS- SFG-t7EC3M-PHS-LARwt-VSV-Derivat diese Arbeit LAR-PD-VSV mit dem AS-Austausch 1221VVQVTPAQ
QQEEP1233->1221GTYPYDVPDYAGT1233
SFG-t7EC3M-SHP- SFG-t7EC3M-SHP mit humaner diese Arbeit
PTP-H1 PTP-H1 cDNA
pGEX-TACEi-wt in pGEX klonierte cDNA der intrazellu- A. Gschwind,
lären Domäne humaner TACE d. AG.
PGEX-TACEi-YE pGEX-TACEi-wt-Derivat mit dem A. Gschwind,.
2.1.10.3 Wichtige Oligonukleotide
Sequenz Name
GGGACCCGTCACCCACAGCATCTCCGTCCCCGCGTAGTCCGGG IVM-LAR-PD ACATCATACGGGTAGGTACCGATCTCATCCGAGTAGGGGCTGG
"primer" für die Mutagenese zur Herstellung der prozessierungsdefi- zienten Form von PTP-LAR
CGGAATTCGGGAACAAAAGCTGGAGC pBS-ESK+-MCSse "forward primer" für die PCR der pBS-SK+-MCS zur Generierung von
pcDNA3-ESK, pLXSN-ESK und pUHD-ESK
CACTATAGGGCGAATTGG pBS-ESK+-MCSas
"reverse primer" für die PCR der pBS-SK+-MCS zur Generierung von pcDNA3-ESK, pLXSN-ESK und pUHD-ESK
CGGAATTCTACGACTCACTATAGGGC pBS-EKS+-MCSse "forward primer" für die PCR der pBS-SK+-MCS zur Generierung von
pcDNA3-EKS, pLXSN-EKS und pUHD-EKS
GGGAACAAAAGCTGGAGC pBS-EKS+-MCSas
"reverse primer" für die PCR der pBS-SK+-MCS zur Generierung von pcDNA3-EKS, pLXSN-EKS und pUHD-EKS
CCAGACATGTCATGATTGAACAAGATGGATTG Neose
"forward primer" für die PCR zur Umklonierung des Neomycin-Phos- photransferase-Gens aus pLXSN in SFG-tcITE1-Neo
CGCGGATCCTCAGAAGAACTCGTCAAGAAG Neoas "reverse primer" für die PCR zur Umklonierung des Neomycin-Phos-
photransferase-Gens aus pLXSN in SFG-tcITE1-Neo
CGGGGATCCGCTGCTTCATCCCCGTGG HSVHyg-PHSse "forward primer" für die PCR zur Umklonierung des HSV TK-Promo
tors und des Hygromycin-Resistenz-Gens aus pTK-Hyg in SFG-t7ECEM-PHS
GGAGATCTTCAGTTAGCCTCCCCCATC HSVHyg-PHSas "reverse primer" für die PCR zur Umklonierung des HSV TK-Promo
tors und des Hygromycin-Resistenz-Gens aus pTK-Hyg in SFG-t7ECEM-PHS
GAAGATCTGCTGCTTCATCCCCGTGG HSVHyg-SHPse
"forward primer" für die PCR zur Umklonierung des HSV TK-Promo tors und des Hygromycin-Resistenz-Gens aus pTK-Hyg in
SFG-t7ECEM-SHP
CGCGGATCCTCAGTTAGCCTCCCCCATC HSVHyg-SHPas
"reverse primer" für die PCR zur Umklonierung des HSV TK-Promo tors und des Hygromycin-Resistenz-Gens aus pTK-Hyg in
CATGGCGAATTCGGGCGCGCCATCGCGAAGGCCGGCCAC SFG-MCSse CGCGGAACGCGTTCCTGCAGGAGCGGCCGCAG
"sense Oligonukleotid" für die Klonierung der erweiterten MCS in SFG-t7EC3
GATCCTGCGGCCGCTCCTGCAGGAACGCGTTCCGCGGTG SFG-MCSas GCCGGCCTTCGCGATGGCGCGCCCGAATTCGC
"antisense Oligonukleotid" für die Klonierung der erweiterten MCS in SFG-t7EC3
CGCGTCCTGCAGGATACACCGACATCGAGATGAACCGGCTG VSV/VSVse GGCAAGTACACCGACATCGAGATGAACCGGCTGGGCAAGTA
AGC
"sense Oligonukleotid" für die Klonierung deVSV/VSV-Dimers
GGCCGCTTACTTGCCCAGCCGGTTCATCTCGATGTCGGTGTA VSV/VSVas CTTGCCCAGCCGGTTCATCTCGATGTCGGTGTATCCTGCAGGA
"antisense Oligonukleotid" für die Klonierung deVSV/VSV-Dimers