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CAPÍTULO 7: ANÁLISIS E INTERPRETACIÓN

3. De la recepción

2.1.10.1 Ausgangsvektoren

Vektor Eigenschaften Referenz

pBS II SK+ ColE1 ori, Ampr, LacZ, f1(+)IG, Stratagene SK-MCS

pRK5 Expressionsvektor, Ampr, f1 ori, Genentech, CMV Promotor, SV40 poly A, San Franzisco

hohe Kopienzahl

pcDNA3 Expressionsvektor, Ampr, Neor, f1 ori Invitrogen,

CMV Promotor, BGH poly A, USA

hohe Kopienzahl

pUHD10-3 Tetrazyklin-sensitiver Expressionsvektor, Gossen und

colEl-Replikationsstart, CMV Promotor Bujard, 1992

mit sieben Tet-Operatorsequenzen,

SV40 poly A, pUC ori

pUHD15-1 Expressionsvektor für tTA, Ampr, Neor Gossen und CMV Promotor, SV40 poly A, pUC ori Bujard, 1992

pLXSN Retroviraler Expressionsvektor, Miller und

Ampr, Neor, ori aus pBR322, Rosman,1989 5’-LTR und 3’-LTR aus MoMuLV,

SV40 Promotor

SFG-t7EC3 Retroviraler, Teteazyklin-sensitiver Lindemann et al., Expressionsvektor, Ampr, modifizierter 1997

3´-LTR mit sieben Tet-Operatorsequenzen

SFG-tcITE1 Retroviraler, Teteazyklin-sensitiver Lindemann et al., Expressionsvektor, Ampr , interner CMV- 1997

Minimalpromotor mit sieben Tet-Operator- Sequenzen und IRES-Sequenz

pTK-Hyg Selektionsvektor, Ampr, Hygr, HSV TK- Clontech, USA

Promotor ohne Enhancer-Element,

HSV TK poly A, pUC ori

pGEX-3 bakterieller Expressionsvektor für Pharmacia,

GST-Fusionsprotein, Ampr Freiburg

2.1.10.2 Im Rahmen dieser Arbeit verwendete Vektoren

Vektoren Eigenschaften Referenz

pRK5-HER1 in pRK5 klonierte cDNA von HER1 A. Chantrey, d. AG. pRK5-EGFR- in pRK5 klonierte cDNA des humanen, diese Arbeit

VSV/VSV-NT am N-Terminus mit zwei VSV-Epitopen markierten EGFRs

pRK5-EGFR- in pRK5 klonierte cDNA des humanen, diese Arbeit VSV/VSV-CT am C-Terminus mit zwei VSV-Epitopen

markierten EGFRs

pRK5-EGFR- in pRK5 klonierte cDNA des humanen diese Arbeit EXTRA-TM-VSV/VSV EGFRs, dessen intrazelluläre Domäne

durch zwei VSV-Epitope ersetzt wurde

pRK5-EGFR- in pRK5 klonierte cDNA des humanen diese Arbeit VSV/VSV-TM-INTRA EGFRs, dessen extrazelluläre Domäne

durch zwei VSV-Epitope ersetzt wurde

pRK5-LAR in pRK5 klonierte cDNA der humanen B. Aicher,

PTP-LAR d. AG.

pRK5-LARwt-VSV in pRK5 klonierte cDNA humaner, am diese Arbeit C-Terminus mit zwei VSV-Epitopen

markierter PTP-LAR

pRK5-LAR-C1522S-VSV pRK5-LARwt-VSV-Derivat mit dem diese Arbeit AS-Austausch Cys1522->Ser

pRK5-LAR-C1813S-VSV pRK5-LARwt-VSV-Derivat mit dem diese Arbeit AS-Austausch Cys1813->Ser

pRK5-LAR- pRK5-LARwt-VSV-Derivat mit dem diese Arbeit CC1522/1813SS-VSV AS-Austausch Cys1522->Ser sowie

Cys1813->Ser

pRK5-LAR-PD-VSV pRK5-LARwt-VSV-Derivat mit dem diese Arbeit

AS-Austausch 1221VVQVTPAQQQ

pcDNA3-ETNR in pcDNA3 klonierte cDNA des humanen M. Leserer,

Endothelin-Rezeptors d. AG.

pcDNA3-M1R in pcDNA3 klonierte cDNA des humanen M.Leserer,

M1Rs d. AG.

pcDNA3-TACE-HA in pcDNA3 klonierte cDNA humaner, am S. Hart, C-Terminus mit einem HA-Epitop mar- d. AG. kierter TACE

pcDNA3-ESK pcDNA3-Derivat, modifizierte MCS aus diese Arbeit pBS II SK+

pcDNA3-EKS pcDNA3-Derivat, modifizierte MCS aus diese Arbeit pBS II KS+

pcDNA3-EKS -HER2 in pcDNA3-EKS klonierte cDNA von diese Arbeit HER2

pcDNA3-tTA-Puro pcDNA3-Derivat, Puror anstelle Neor, diese Arbeit CMV-Minimalpromotor mit sieben

Tet-Operator-Sequenzen anstelle CMV- Promotor, autoregulatorische tTA- Expression

pLXSN-HER2 in pLXSN klonierte cDNA von HER2 U. Weiß, d. AG. pLXSN-ESK pLXSN-Derivat, modifizierte MCS aus diese Arbeit

pBS II SK+

pLXSN-EKS pLXSN-Derivat, modifizierte MCS aus diese Arbeit pBS II KS+

pLXSN-ESK- in pLXSN-ESK klonierte cDNA humaner, diese Arbeit LARwt-VSV am C-Terminus mit zwei VSV-Epitopen

markierter PTP-LAR

pLXSN-ESK- pLXSN-ESK-LARwt-VSV-Derivat mit diese Arbei LAR-C1522S-VSV dem AS-Austausch Cys1522->Ser

pLXSN-ESK- pLXSN-ESK-LARwt-VSV-Derivat mit diese Arbei LAR-C1813S-VSV dem AS-Austausch Cys1813->Ser

pLXSN-ESK- pLXSN-ESK-LARwt-VSV-Derivat mit diese Arbei LAR-CC1522/1813SS- dem AS-Austausch Cys1522->Ser sowie

VSV Cys1813->Ser

pLXSN-ESK- pLXSN-ESK-LARwt-VSV-Derivat mit diese Arbeit LAR-PD-VSV dem AS-Austausch 1221VVQVTPAQQQ

SFG-tcITE1-Neo SFG-tcITE1-Derivat, Neor, diese Arbeit autoregulatorische tTA-Expression

SFG-t7EC3M-PHS SFG-t7EC3-Derivat, erweiterte MCS, diese Arbeit HygBr unter der Kontrolle eines HSV-TK-

Promotors in Transkriptionsrichtung des

Zielgens

SFG-t7EC3M-SHP SFG-t7EC3-Derivat, erweiterte MCS, diese Arbeit HygBr unter der Kontrolle eines HSV-TK-

Promotors entgegen der Transkriptions-

richtung des Zielgens

SFG-t7EC3M-PHS- SFG-t7EC3M-PHS mit humaner diese Arbeit

PTP-H1 PTP-H1 cDNA

SFG-t7EC3M-PHS- in SFG-t7EC3M-PHS klonierte cDNA diese Arbeit LARwt-VSV humaner, am C-Terminus mit zwei VSV-

Epitopen markierter PTP-LAR cDNA

SFG-t7EC3M-PHS- SFG-t7EC3M-PHS-LARwt-VSV-Derivat diese Arbei LAR-C1522S-VSV mit dem AS-Austausch Cys1522->Ser

SFG-t7EC3M-PHS- SFG-t7EC3M-PHS-LARwt-VSV-Derivat diese Arbei LAR-C1813S-VSV mit dem AS-Austausch Cys1813->Ser

SFG-t7EC3M-PHS- SFG-t7EC3M-PHS-LARwt-VSV-Derivat diese Arbei LAR-CC1522/1813SS- mit dem AS-Austausch Cys1522->Ser

VSV sowie Cys1813->Ser

SFG-t7EC3M-PHS- SFG-t7EC3M-PHS-LARwt-VSV-Derivat diese Arbeit LAR-PD-VSV mit dem AS-Austausch 1221VVQVTPAQ

QQEEP1233->1221GTYPYDVPDYAGT1233

SFG-t7EC3M-SHP- SFG-t7EC3M-SHP mit humaner diese Arbeit

PTP-H1 PTP-H1 cDNA

pGEX-TACEi-wt in pGEX klonierte cDNA der intrazellu- A. Gschwind,

lären Domäne humaner TACE d. AG.

PGEX-TACEi-YE pGEX-TACEi-wt-Derivat mit dem A. Gschwind,.

2.1.10.3 Wichtige Oligonukleotide

Sequenz Name

GGGACCCGTCACCCACAGCATCTCCGTCCCCGCGTAGTCCGGG IVM-LAR-PD ACATCATACGGGTAGGTACCGATCTCATCCGAGTAGGGGCTGG

"primer" für die Mutagenese zur Herstellung der prozessierungsdefi- zienten Form von PTP-LAR

CGGAATTCGGGAACAAAAGCTGGAGC pBS-ESK+-MCSse "forward primer" für die PCR der pBS-SK+-MCS zur Generierung von

pcDNA3-ESK, pLXSN-ESK und pUHD-ESK

CACTATAGGGCGAATTGG pBS-ESK+-MCSas

"reverse primer" für die PCR der pBS-SK+-MCS zur Generierung von pcDNA3-ESK, pLXSN-ESK und pUHD-ESK

CGGAATTCTACGACTCACTATAGGGC pBS-EKS+-MCSse "forward primer" für die PCR der pBS-SK+-MCS zur Generierung von

pcDNA3-EKS, pLXSN-EKS und pUHD-EKS

GGGAACAAAAGCTGGAGC pBS-EKS+-MCSas

"reverse primer" für die PCR der pBS-SK+-MCS zur Generierung von pcDNA3-EKS, pLXSN-EKS und pUHD-EKS

CCAGACATGTCATGATTGAACAAGATGGATTG Neose

"forward primer" für die PCR zur Umklonierung des Neomycin-Phos- photransferase-Gens aus pLXSN in SFG-tcITE1-Neo

CGCGGATCCTCAGAAGAACTCGTCAAGAAG Neoas "reverse primer" für die PCR zur Umklonierung des Neomycin-Phos-

photransferase-Gens aus pLXSN in SFG-tcITE1-Neo

CGGGGATCCGCTGCTTCATCCCCGTGG HSVHyg-PHSse "forward primer" für die PCR zur Umklonierung des HSV TK-Promo

tors und des Hygromycin-Resistenz-Gens aus pTK-Hyg in SFG-t7ECEM-PHS

GGAGATCTTCAGTTAGCCTCCCCCATC HSVHyg-PHSas "reverse primer" für die PCR zur Umklonierung des HSV TK-Promo

tors und des Hygromycin-Resistenz-Gens aus pTK-Hyg in SFG-t7ECEM-PHS

GAAGATCTGCTGCTTCATCCCCGTGG HSVHyg-SHPse

"forward primer" für die PCR zur Umklonierung des HSV TK-Promo tors und des Hygromycin-Resistenz-Gens aus pTK-Hyg in

SFG-t7ECEM-SHP

CGCGGATCCTCAGTTAGCCTCCCCCATC HSVHyg-SHPas

"reverse primer" für die PCR zur Umklonierung des HSV TK-Promo tors und des Hygromycin-Resistenz-Gens aus pTK-Hyg in

CATGGCGAATTCGGGCGCGCCATCGCGAAGGCCGGCCAC SFG-MCSse CGCGGAACGCGTTCCTGCAGGAGCGGCCGCAG

"sense Oligonukleotid" für die Klonierung der erweiterten MCS in SFG-t7EC3

GATCCTGCGGCCGCTCCTGCAGGAACGCGTTCCGCGGTG SFG-MCSas GCCGGCCTTCGCGATGGCGCGCCCGAATTCGC

"antisense Oligonukleotid" für die Klonierung der erweiterten MCS in SFG-t7EC3

CGCGTCCTGCAGGATACACCGACATCGAGATGAACCGGCTG VSV/VSVse GGCAAGTACACCGACATCGAGATGAACCGGCTGGGCAAGTA

AGC

"sense Oligonukleotid" für die Klonierung deVSV/VSV-Dimers

GGCCGCTTACTTGCCCAGCCGGTTCATCTCGATGTCGGTGTA VSV/VSVas CTTGCCCAGCCGGTTCATCTCGATGTCGGTGTATCCTGCAGGA

"antisense Oligonukleotid" für die Klonierung deVSV/VSV-Dimers

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