Descripción de las especies de hongos formadores de micorriza arbuscular

Glomus manihotis y Acaulospora mellea

3.3.4.1. Glomus manihotis (Referencia INVAM (2009): FL879)

Esporas

- Color: Gama de colores de amarillo a marrón, predominando el amarillo pálido. - Forma: Globosa, subglobosa, algunas veces elíptica, oblonga o irregular

(particularmente aquellas extraídas del interior de raíces micorrizadas) - Distribución de tamaños: 100 – 260 µm, media = 182 µm (n= 120)

19  - Forma: Cilindra a ligeramente aplanada, en ocasiones levemente constreñida. - Ancho: 18 – 24 µm, media = 22.1 µm

- Grosor de la pared: 3.2 – 6.4 µm

- Estructura de la pared: Formada por tres capas (L1, L2 y L3). La capa L1 se adelgaza hasta hacerse invisible a los 5 µm de la superficie de la espora; el grosor total es de 6.4 a 10.6 µm cerca de la espora (media de 8.7 µm) la pared se adelgaza a menos de 3 µm de tal manera que solo L3 es visible. La capa L1 es mucilaginosa y es la única capa presente en la hifa de suspensión joven, cuando la hifa de suspensión presenta menos de 1 µm de grosor. L2 es laminada y es continua con la capa L2 de la pared de la espora, durante la madurez presenta un grosor de 4.8 a 11.2 µm cerca de la pared de la espora. L3 es visible como una capa muy delgada (generalmente menor a 0.8 µm de grosor y ocasionalmente hasta 1.6 µm) y de color amarillo pálido. En algunas esporas blancas esta capa no puede ser observada.

- Oclusión: Formada por las subcapas más internas de L3, con frecuencia es tan delgada que el poro parece abierto. En algunas esporas, la pared de la espora se engrosa hasta casi ocluir el poro; ocasionalmente, un tapón separa la espora del contenido de la hifa.

Morfología de la micorriza: La morfología de la micorriza formada por Glomus manihotis es idéntica a la formada por Glomus clarum, incluyendo la esporulación

abundante dentro de las raíces.

La micorriza de G. clarum se caracteriza por la formación de vesículas elípticas a oblongas cerca del punto de entrada a la raíz, las cuales desarrollan un engrosamiento de la pared externa y después se diferencian en esporas de mayor tamaño. La formación de arbúsculos comienza muy temprano durante la colonización, estos se forman en células aisladas de tal forma que la distribución se observa dispersa y en parches. Las hifas intraradicales presentan diámetros de 2 a 5 µm, el cual se incrementa por la formación de una vesícula (espora) terminal. Las hifas crecen por alguna distancia en paralelo una a la otra, conectadas por distintos patrones de ramificación en “H” y “h”. Las esporas intraradicales con frecuencia se organizan en racimos y protruyen a través de la epidermis de la raíz debido a su gran tamaño.

Schenck et al. (1984) basaron la distinción de G. manihotis de G. clarum principalmente en el color, siendo G. manihotis amarillo y G. clarum blanco a amarillo muy pálido. Posteriormente, ellos justificaron la distinción por una mayor

tendencia de la hifa de suspensión de G. manihotis a romperse cerca de la espora. Este aislamiento se derivó del cultivo tipo CIAT C – 1 – 1 y ha sido mantenido a través de generaciones de cultivo en el INVAM, lo cual ha permitido comparar cultivos vivos de G. manihotis y G. clarum. En esta comparación, la diferencia entre las dos especies se convierte de incierta a inexistente. El cultivo tipo produce una mayor proporción de esporas de color amarillo oscuro, aunque también se producen esporas blancas y de color amarillo pálido. Algunos aislamientos en el INVAM producen esporas que son consistentemente blancas, pero que tienden a encontrarse en el extremo menor de la distribución de tamaño, y otras esporas que son muy variables en color (cambian con la generación de cultivo) y otras que son en su mayoría amarillas a amarillas – marrón. Este continuum elimina cualquier distinción morfológica entre Glomus

manihotis y G. clarum.

Los estudios de desarrollo demuestran que las diferencias de color son totalmente atribuibles al grosor de la capa L3 de la pared de la espora, la cual varía considerablemente entre todos los aislamientos examinados. El mismo rango de variación fue evidente en especímenes tipo tanto de G. clarum como de G.

manihotis. Esta variación es un producto de la heterocronia, por la cual la

sincronización en la terminación de la síntesis de las subcapas en L3 difiere de una espora a otra. Entre más subcapas se forman, más oscura es la capa L3 y más amarilla es la espora.

Probablemente la única evidencia convincente de la divergencia entre G. clarum y G. manihotis se encuentra en el loci que codifica para la malato deshidrogenasa (Rosendahl et al., 1994). Sin embargo, estas diferencias fueron interpretadas como variaciones alélicas que miden diferencias entre “individuos” que forman micorriza más que una divergencia al nivel de especie. Este patrón puede encontrarse entre poblaciones aisladas geográficamente, sin importar si su reproducción es sexual o asexual.

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Figura 7. Micorriza formada por especies de Glomus. Tomado de Brundett (2008)

3.3.4.2. Acaulospora mellea (Referencia INVAM (2009): BR983A)

Esporas

- Color: Anaranjado – marrón pálido a naranja marrón oscuro, siendo la mayoría naranja - marrón.

- Forma: Globosa a subglobosa, ocasionalmente irregular.

- Distribución de tamaños: 90 – 140 µm, media = 120 µm (n = 142)

- Cicatriz: Indica la región de contacto entre la espora y el cuello del sáculo durante la formación de la espora; un labio muy angosto circunscribe la cicatriz, con forma circular a ovalada, diámetro de 6.2 a 9.8 µm en su parte más amplia. Es muy poco frecuente encontrar esporas con el sáculo unido a ellas, aún en el aislamiento a partir de cultivos en maceta.

Morfología de la micorriza: Los arbúsculos e hifas intraradicales presentan paredes

delgadas, se tiñen débilmente con Azul de Trypan, aunque la intensidad puede ser muy variable con la edad de la micorriza y la planta hospedera y pueden visualizarse debido a filas de gotas de lípidos. Las unidades de infección se distribuyen irregularmente (en parches) con la formación de pequeños racimos de vesículas irregulares.

Las hifas en el punto de entrada presentan patrones de ramificación característicos. Las hifas en la corteza externa generalmente presentan ramificación más irregular, mayor enrollamiento y formación de horquillas que en el

caso de Glomus. Las colonias en las raíces son relativamente pequeñas. Las hifas internas también son difíciles de visualizar.

Las vesículas intracelulares llenas de lípidos, que inicialmente son rectangulares, y que con frecuencia se vuelven lobuladas irregularmente debido a su expansión dentro de células adyacentes, son una propiedad característica de la micorriza de A. mellea. Estas vesículas presentan paredes delgadas y no persisten en las raíces.

Figura 8. Micorriza formada por especies de Acaulospora.Tomado de Brundett (2008).