Vieira A1, Chaves M2, García D2, De La Hoz R3
RESUMEN
Objetivo: El triclosán es un agente antibacterial de amplio espectro. En odontología se usa para aumentar la eficacia en la eliminación de la biopelícula y actúa como antiinflamatorio al reducir la producción de prostaglandina E2 (PGE2) por el fibroblasto gingival humano (FGH). Sin embargo, no se cuenta con evidencia de su efecto sobre el FGH al usarlo en concentraciones disponibles para odontología, situación similar a la del cloruro de sodio el cual se emplea como irrigante durante procedimientos quirúrgicos. El objetivo de este estudio fue establecer la presencia de alteraciones en la viabilidad y proliferación de cultivos de FGH al exponerse In vitro al cloruro de sodio al 0.9% (suero fisiológico SF) y al triclosán al 0.1%, durante las primeras 24 horas posteriores a su aplicación. Materiales y métodos: Cultivos de FGH sanos se estimularon con medicamentos en el octavo pasaje. Se usaron como control células en Medio Esencial Modificado de Dulbecco (D-MEM) completo. Los niveles de absorbancia se obtuvieron con un espectrofotómetro mediante la prueba «CellTiter 96 AQueous» (Promega®). Resultados: Se utilizó la prueba U Mann-Whitney para calcular las diferencias en las medidas de absorbancia de los grupos evaluados, encontrándose diferencias estadísticamente significativas entre los grupos. El grupo Triclosán/D-MEM obtuvo a las 2, 4, 8, y 24 horas valores T=0.0809, 0.3768, 0.0809, 0.0809, consecutivamente. El grupo triclosán/SF obtuvo valores T=0.0809 en todos los momentos de observación. El grupo D-MEM/SF arrojó la mayor penetrancia con valores T=1.000, 0.5959, 0.6625, 0.1904 (p<0.05) consecutivos al mismo orden de observación. Conclusiones: Al analizar los valores promedio de absorbancia se estableció que sin excepción, el triclosán con un 46.97%, seguido por el SF con el 75%, mostraron la generación de alteraciones en la proliferación y viabilidad celular del FGH In vitro.
PALABRAS CLAVE: Fibroblasto gingival; Triclosán; Cloruro de sodio; Proliferación ABSTRACT
Objective: Triclosan is a broad spectrum antibacterial agent used as a preventative measure in dentistry to potentiate the effectiveness of the elimination of biofilm and it behaves as an anti-inflammatory by reducing the production of Prostaglandin E2 (PGE2) by the Human Gingival Fibroblast (HGF). However, there is not sufficient evidence of Triclosan effect on the HGF when is used in measures available for dentistry, such as the evidence found on sodium chloride used in surgical procedures. The aim ot this study was to establish the presence of alterations in the viability and proliferation of HGF when exposed to sodium chloride 0.9% and triclosan 0.1% during the first 24 hours after application In Vitro. Materials and methods: HGF of healthy patients were cultivated in eighth pass and stimulated with medicaments. It was used as control cells in a complete Dulbecco-Modified Essential Medium (D-MEM). Absorbance levels were obtained with spectrophotometer under Cell-Titer 96 Aqueous test (Promega®). Results: Data were analyzed by the Mann-Whitney test in order to calculate absorbance levels between the evaluate groups, finding statistically significant differences. The Triclosan/D-MEM group obtained at 2,4,8 and 24 hours values of T=0.0809, 0.3768, 0.0809, 0.0809 respectively at all time of the observation, and the Sodium Chloride/D-MEM group obtained values of T=1.000, 0.5959, 0.6625, 0.1904 respectively at the same conditions. Conclusions: analyzing the absorbance values was established, without exception, Triclosan with 46.97%, followed by Sodium Chloride 75% and to a lesser extent the complete D-MEM showed generate alterations in proliferation and cell viability of HGF In vitro.
KEY WORDS: Fibroblast; Gingival; Triclosan; Sodium; Chloride; Proliferation
[44] ACTA PERIODONTOLÓGICA 2010
INTRODUCCIÓN
La importancia de la alteración del fibroblasto gingival humano (FGH) por la acción del triclosán se debe a que esta célula juega un papel importante en el desarrollo, mantenimiento y reparación de los tejidos,1 al sintetizar y mantener
los componentes del tejido conectivo.2-5
El triclosán (2,4, 4´-trichloro- 2´- hydroxydiphenyl ether) es un agente antibacterial de amplio espectro, usado por más de doscientos años como un producto de higiene antibacteriano.6-7
También se emplea en la producción de condiciones de asepsia en procedimientos quirúrgicos8 y en odontología se utiliza de manera
preventiva como un ingrediente de dentífricos y colutorios para aumentar la eficacia en la eliminación de la biopelícua y reducción de la gingivitis.9 Su actividad depende de su
concentración y formulación, siendo su principal sitio de acción la membrana citoplasmática. Su paso a través de la pared celular se cree que es por difusión.10 Regos y Hitz,11 describieron como la
acción antimicrobiana del Triclosán es dirigida hacia el ARN y la síntesis proteica bacteriana y no contra el ADN. Como antiinflamatorio12-15 actúa
reduciendo los efectos estimuladores del factor de necrosis tumoral-á (FNT-á) ó sobre la interleuquina (IL) 1â. Al actuar sobre el FNT-á se logra disminuir al RNA mensajero y la expresión de la prostaglandina E-1m (PGE-1m), que afectará los niveles de ciclooxigenasa-2 (COX-2) y la subsecuente producción de PGE2 por el fibroblasto
gingival.8,16-17
Mustafa y colaboradores18, describieron
como el (14)C-triclosán fue absorbido por los fibroblastos gingivales durante el primer minuto de su contacto y su consecutiva distribución en el citoplasma y el núcleo celular. Su incremento gradual hasta alcanzar niveles constantes después de una hora en el núcleo y de tres a veinticuatro horas en el citoplasma, sugirien que este agente podría afectar las señales celulares involucradas con la producción de mediadores inflamatorios. Lobene y colaboradores19 realizaron un estudio
clínico doble ciego donde compararon los efectos
sobre la formación de cálculos supragingivales de un dentífrico compuesto por 0.3% de triclosán, 2.0% de copolímeros (methoxyetileno y ácido maleico) y 0.24% de fluoruro de sodio. Los sujetos que lo utilizaron tuvieron 36.27% menos formación de cálculos supragingivales que los sujetos que utilizaron el placebo. Rustogi y colaboradores20 condujeron un estudio durante 6
días donde determinaron el efecto sobre la formación de biopelícula de un enjuague con 0.3% de triclosán/0.25% copolímero (methoxietileno y ácido maleico). Se observó una reducción significativa en la formación de biopelícula supragingival al ser comparado con el placebo. El triclosán también se aplica para controlar el progreso de la enfermedad periodontal en adultos fumadores, evitando la realización de procedimientos quirúrgicos debido al beneficio de sus efectos antiinflamatorios y antibacterianos.21
Hay mucha información disponible sobre la toxicología In vivo y farmacología del triclosán, que a su vez contrasta con la falta de información sobre los efectos a nivel celular de las concentraciones que se encuentran actualmente disponibles en el comercio nacional (0.1%), especialmente ahora que se está ampliando la gama de productos con contenido de este medicamento para el cuidado de la salud oral. Al comparar los niveles de citotoxicidad de varios productos disponibles en el comercio, con relación a su concentración y peso molecular, los resultados ubicaron entre los más citotóxicos al nitrato de plata, cloruro de benzalconio, cloruro de cetilpiridinium y la clorhexidina; por el contrario, los más tolerables fueron los compuestos con contenido de yodopovidona, mientras que el triclosán puede considerarse un agente de citotoxicidad media junto a la bisguadina.22
Un producto ampliamente utilizado en el área de la salud es el cloruro de sodio al 0.9% (suero fisiológico), una solución isotónica que controla la distribución de agua en el organismo y mantiene el equilibrio de líquidos o sirve de vehículo para el suministro de electrolitos. Además, es empleado diariamente como irrigante en procedimientos de tipo quirúrgico.23-25
INVESTIGACIONES ORIGINALES [45] El objetivo de esta investigación fue observar
la presencia de alteraciones en la proliferación del fibroblasto gingival humano, al ser expuesto de manera In vitro a la acción del cloruro de sodio 0.9%, y al triclosán en concentración de 0.1%.