4. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN 24
8.3. FASE DE LABORATORIO 35
8.3.2. Ensayos de control químico 35
A continuación se describen los ensayos realizados enfocados en el control químico
de las especies de mejillón M. trautwineana y P. viridis (Figura 7). En cada caso se
especifica el número total de acuarios, animales (mejillones o camarones),
tratamientos, recambios de agua y método de dosificación del compuesto.
Para el llenado de los acuarios y los recambios diarios de agua, se utilizó un tanque
de fibra de vidrio de 2 000 L previamente adecuado con agua del reservorio,
fertilizado NKP y provisto de un sistema de aireación para obtener una proliferación
de algas.
BARRIDO GENERAL DE LOS DIFERENTES COMPUESTOS
ENSAYO 1. BIOBALAS DE CuSO4 AL 20 %, AMINA CUATERNARIA AL 20 % Y CuSO4 LIBRE
ENSAYO 2. CuSO4 LIBRE
ENSAYOS CON SULFATO DE COBRE
ENSAYO 3. BIOBALAS DE CuSO4 AL 30 %
ENSAYO 5. EVALUACIÓN MÉTODOS DE DOSIFICACIÓN
ENSAYO 4. CuSO4 Y ÁCIDO CÍTRICO
POR PULSO CONSECUTIVO POR TRES DÍAS
COMPUESTOS ALTERNATIVOS
ENSAYO 6. HIPOCLORITO DE CALCIO
ENSAYO EN CAMARONES
ENSAYO 7. CuSO4 EN CAMARONES
BARRIDO GENERAL DE LOS DIFERENTES COMPUESTOS
ENSAYO 1. BIOBALAS DE CuSO4 AL 20 %, AMINA CUATERNARIA AL 20 % Y CuSO4 LIBRE
ENSAYO 2. CuSO4 LIBRE
ENSAYOS CON SULFATO DE COBRE
ENSAYO 3. BIOBALAS DE CuSO4 AL 30 %
ENSAYO 5. EVALUACIÓN MÉTODOS DE DOSIFICACIÓN
ENSAYO 4. CuSO4 Y ÁCIDO CÍTRICO
POR PULSO CONSECUTIVO POR TRES DÍAS
COMPUESTOS ALTERNATIVOS
ENSAYO 6. HIPOCLORITO DE CALCIO
ENSAYO EN CAMARONES
ENSAYO 7. CuSO4 EN CAMARONES
Figura 7. Diagrama de ensayos realizados en acuarios para el control químico de las especies
de mejillón M. trautwineana y P. viridis.
Ensayo 1. Tratamiento con biobalas de sulfato de cobre al 20 %, amina cuaternaria
al 20 % y sulfato de cobre libre.
Acuarios experimentales.
Se utilizaron un total de 43 acuarios, ubicados aleatoriamente en la sala de
bioensayos de la finca, asignados de la siguiente manera; 18 para tratamiento con
biobalas de sulfato de cobre (CuSO4) al 20 %; 15 para tratamiento con biobalas de amina cuaternaria al 20 % (DB45); 15 para tratamiento de CuSO4 libre y 3 controles. Estos se marcaron a una altura equivalente a 20 L, se llenaron con agua del tanque
mejillones M. trautwineana de 37,11 ± 3,311 mm y 21,65 ± 1,205 mm de longitud
antero‐posterior respectivamente. Los animales permanecieron en periodo de
aclimatación durante tres días. El total de mejillones se estableció con la idea de
tener una cifra estadísticamente significativa. El número de individuos de la especie
M. trautwineana es menor, tratando de simular las condiciones de la finca donde P.
viridis es más prevalente.
Recambios de agua.
Durante todo el bioensayo no se hicieron recambios de agua en los acuarios, lo
anterior simulando las condiciones normales de una piscina.
Tratamientos.
• Biobalas de CuSO4 al 20 %.
Se evaluaron seis concentraciones del compuesto; 0,05; 0,5; 2,5; 5; 50 y 500 ppm
con tres réplicas cada uno.
• Biobalas de amina cuaternaria (DB45) al 20 %.
Fueron valoradas cinco concentraciones del compuesto; 0,5; 5; 50; 500 y 5000 ppm
con tres réplicas cada uno.
• Sulfato de cobre libre.
Para este tratamiento se realizaron cinco concentraciones del compuesto 0,1; 0,5; 1;
10 y 100 ppm, con tres réplicas cada uno.
La dosificación en los tres tratamientos se realizó en dos pulsos, es decir, la cantidad
final a adicionar por acuario se dividió en dos y fue suministrada en intervalos de 15
minutos, lo anterior con el fin de que las biobalas liberaran gradualmente su
componente activo, acabando así con el mayor número de mejillones.
Ensayo 2. Tratamiento con sulfato de cobre libre.
Acuarios experimentales.
Fueron necesarios un total de quince acuarios, tres para cada una de las
concentraciones evaluadas y tres controles. Estos se marcaron a las alturas
equivalentes a 20 y 12 L con el fin de facilitar los recambios diarios de agua. Se
utilizaron 20 mejillones P. viridis y 9 M. trautwineana. La talla promedio fue de 32,53
± 2,294 mm y 19,33 ± 1,952 mm respectivamente.
Recambio de agua.
Se realizaron recambios diarios de agua del 40 % del volumen total.
Tratamiento.
Fueron evaluadas cuatro concentraciones (0,5; 1; 1,5 y 2 ppm) del compuesto
sulfato de cobre libre, con tres réplicas cada una.
La aplicación del químico se realizó de manera consecutiva por tres días. El segundo
y tercer día se tuvo en cuenta los recambios diarios de agua del 40 %, para así
mantener una concentración constante del producto evaluado.
Día 1: concentración a evaluar (mg/L) * 20 L = X mg de CuSO4/1000 = X gr de CuSO4 Día 2 y 3: X gr de CuSO4 día 1 * 0,4 = X gr de CuSO4
Ensayo 3. Tratamiento con biobalas de sulfato de cobre al 30 %.
Acuarios experimentales.
Para este experimento se utilizaron 12 acuarios, tres para cada una de las
concentraciones evaluadas y tres controles. Se utilizaron 20 mejillones P. viridis y 10
M. trautwineana. La talla promedio fue de 32,57 ± 2,128 mm en P. viridis y 21,3 ±
Se realizaron recambios diarios de agua del 40 % del volumen total.
Tratamiento.
Se trabajó con tres concentraciones de biobalas 1; 1,5; y 2 ppm, con tres réplicas
cada una. La dosificación se realizó por tres días consecutivos.
Ensayo 4. Tratamiento con sulfato de cobre libre y ácido cítrico.
Acuarios experimentales.
Para la realización del experimento fueron requeridos un total de 12 acuarios, éstos
fueron distribuidos de la siguiente manera; 3 para CuSO4 libre, 6 para las relaciones ácido cítrico: sulfato de cobre evaluadas y tres controles. La cantidad de CuSO4 utilizada corresponde al 1 % de la alcalinidad total del agua del reservorio, en este
caso 1,08 ppm, esto debido a que dicha variable y el pH son las que regulan
principalmente el curso del cobre una vez es aplicado en la superficie (Van
Hullebusch et al., 2002). Se utilizaron 20 mejillones P. viridis y 10 M. trautwineana.
La talla promedio de M. trautwineana fue de 20,19 ± 1,914 mm y la de P. viridis fue
de 31,86 ± 3,413 mm.
Recambios de agua.
Recambios diarios del 40 % del volumen total de agua.
Tratamientos.
• Sulfato de cobre libre.
La concentración de CuSO4 libre se determinó calculando 1 % de la alcalinidad total del agua del reservorio (110 mg/L).
Día 1: 1,10 mg/L *20 L = 22 mg = 0,022 g
Día 2 y 3: 0,022 g * 0,4 = 0,0088 g
Las relaciones valoradas fueron 10:1 y 10:4, partiendo de las concentraciones de
sulfato de cobre obtenidas.
Se realizó una aplicación de tres días teniendo en cuenta los recambios del 40 % del
volumen total de agua.
Ensayo 5. Comparación de los métodos de dosificación por pulso y consecutiva por
tres días en mejillones M. trautwineana.
Acuarios experimentales.
Se utilizaron un total de 16 acuarios, cinco para cada una de las metodologías a
evaluar (dosificación por pulso y consecutiva por tres días) con sulfato de cobre libre
al 1 % de la alcalinidad y seis controles, tres por cada uno de los anteriores. Se
emplearon por acuario 20 mejillones de la especie M. trautwineana de 18,57 ± 1,989
mm, solo se utilizó esta especie ya que se ha comprobado que ésta es más
resistente a los diferentes tratamientos.
Recambios de agua.
Para el primer tratamiento, dosificación por pulso, no se realizaron recambios de
agua durante todo el ensayo, incluyendo los acuarios control. En el segundo
tratamiento, dosificación consecutiva por tres días, se hicieron recambios del 40 %
del volumen total, así como a sus respectivos controles.
Tratamientos.
• Sulfato de cobre al 1 % de la alcalinidad dosificado por pulsos.
La concentración de CuSO4 utilizada corresponde al 1 % de la alcalinidad total del agua del reservorio (145 ppm), esta cantidad se dividió en dos y se agregó a los
• Sulfato de cobre al 1 % de la alcalinidad dosificado de manera consecutiva
por tres días.
Día 1: 1,45 mg/L * 20 L = 0,029 g
Día 2 y 3: 0,029 g * 0,4 = 0,012 g
Ensayo 6. Tratamiento con hipoclorito de calcio (HTH).
Acuarios experimentales.
Se utilizaron un total de 15 acuarios, tres por cada una de las cuatro concentraciones
experimentadas y tres controles. En cada uno de los acuarios se instalaron 20
mejillones P. viridis de 33,71 ± 2,283 mm y 10 M. trautwineana de 20,71 ± 2,053 mm.
Recambios de agua.
Se realizaron recambios diarios del 40 %.
Tratamiento.
En el experimento fueron evaluadas cuatro concentraciones diferentes del
compuesto (3, 5, 10 y 50 ppm), con tres réplicas cada una. La aplicación del químico
se realizó de manera periódica durante cinco días.
Ensayo 7. Sulfato de cobre libre en camarón blanco, Litopenaeus vannamei.
Acuarios experimentales.
Fueron necesarios un total de 12 acuarios asignados de la siguiente manera; 3 para
cada una de las cuatro concentraciones más tres controles. En cada uno de los
acuarios se instalaron cinco camarones L. vannamei de 5 g de peso promedio. El
número de animales se determinó mediante una relación entre la densidad de
siembra en una piscina intensiva (50 camarones por m2) y el área de un acuario de
20 L (0,11 m2). Estos se aclimataron por un periodo de cinco días.
Los camarones se alimentaron diariamente con 1 g de alimento balanceado Nicovita
35 % proteína desde el inicio de la aclimatación. La cantidad de alimento se
determinó multiplicando el número de camarones por acuario por la tasa de
alimentación dada en gramos de alimento por camarón por día (GCD), según las
tablas de alimentación teóricas desarrolladas por Nicovita.
X g de alimento = 5 camarones x 0.2 (GCD) = 1 g
Recambios de agua.
Durante todo el bioensayo se realizaron recambios diarios equivalentes al 40 % del
volumen total.
Tratamiento.
Se evaluaron tres concentraciones de sulfato de cobre libre (1; 1,5 y 2 ppm), con tres
réplicas cada una. La aplicación del químico se realizó durante tres días consecutivos,
teniendo en cuenta los recambios de agua, como se describió anteriormente.