En la tabla 15 y 16 se puede observar la normalización de la GC/MS de las fracciones con mayor actividad antioxidante, donde se tienen en cuenta los compuestos con mayor % de área superior a 0,91 y con un % de similitud mayor al 80%. (ver anexo 7 y 8)
Tabla 15. Normalización de los compuestos mayoritarios se la GC/MS de la fracción de DCM del extracto etanólico de Pentacalia nítida.
N.Pico t retención Área compuesto % de similitud
1 4,172 1,17 Eucaliptol 64
2 5,612 0,71 tri-(metil)-biciclo(2.2.1) Heptano 96
3 10,346 0,75 2-Amino-4-metilpiridina fenol, 3-amino- 35
4 10,637 1,06 Bencenoacetico acido, 2,5-dihydroxy- 90
5 10,68 1,84 Bencenoacetico acido, 2,5-dihydroxy- 86
6 11,130 3,13 Bencenoacetico acido, 2,5-dihydroxy- 83
7 11,908 4,16 1H-Imidazol-2-metanol 41
8 11,993 2,23 Benzaldehido 4-hidroxy-3,5-dimetoxy- 91
9 12,766 1,07 1,3,2-Dioxaborolano, 2-etilo 43
10 15,371 0,91 3,5-Dimethoxy-4-hydroxy cinamaldehido 94
11 15,446 11,92 2-Penteno, 1-(2,4,6-tri hidroxifenil) 53
12 15,657 21,3 2,6-Aminoantraquinona 55
13 18,993 3,01 acido Hexanodioico, bis 2-ethylhexyl ester 95
14 20,227 2,02
ácido 1,2-Bencenodicarboxílico , mono (2-ethylhexyl)
ester 91
Tabla 16. Normalización de los compuestos mayoritarios de la GC/MS de la fracción de Acetato de etilo del extracto etanólico de Pentacalila nitida
Picos t retención Área compuesto % de similitud
1 9,859 14,46 D-Alosa 90
2 10,632 25,84 acido Bencenoacetico , 4-hydroxy- 58
33
4 11,490 19,65 beta.-D-Glucopiranosa, metil 43
5 11, 9114 11,14 3-(2-Hidroxi Ciclopentil)-tiofeno 43 6 15,440 7,62 Tiofeno, 2-isobutil-5-isopentil- 53
A pesar de la posible presencia de quinoles, de cumarinas y de glicósidos de glicósidos y cumarinas, estos fueron compuestos muy difíciles de verificar por medio de la cromatografía de gases acoplada a la espectrometría de masas.
Sin embargo, cuando los compuestos presentan más de un grupo hidroxilo presentan una alta actividad antioxidante (Fukumoto& Mazza, 2000).
CONCLUSIONES
Se identificó la posible presencia de flavonoides y cumarinas en la fracción de DCM del extracto etanólico de Pentacalia nítida.
Se identificó la posible presencia de quinoles en la fracción de acetato de etilo del extracto etanólico de Pentacalia nítida
Los extractos totales de Pentacalia nítida y de Pentacalia corymbosa, presentaron actividad antioxidante frente al radical DPPH.
Las fracciones de diclorometano y de acetato de etilo del extracto etanólico de Pentacalia
nítida, fueron las que presentaron la mayor actividad antioxidante, en especial la fracción
de diclorometano.
Frente a el extracto total del romero, los extractos totales de Pentacalia nítida y Pentacalia corymbosa presentaron una eficiencia antiradical relativamente baja.
RECOMIENDACIONES
En lo posible, evaluar la actividad antioxidante todas las muestras el mismo día, siendo que el método DPPH es altamente dependiente de las condiciones utilizadas(Fukumoto& Mazza, 2000).
Realizar también el método ABTS sobre los extractos, siendo que generalmente los compuestos con alta actividad antioxidante demostrada por el método DPPH también lo demuestran por el método ABTS (Fukumoto& Mazza, 2000).
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38 ANEXOS
39 Anexo 2. Diagrama de flujo de la metodología.
40 Anexo 3. Resultado de cromatografías de capa fina del extracto de petrol de Pentacalila nitida posterior a su extracción sólido líquido con petrol. Y el resultado de la TLC del extracto etanólico de Pentacalia nítida, posterior a su extracción por sólido líquido con petrol, seguido con DCM y finalmente con acetato de etilo
41 Anexo 4. Resultados de la cromatografía en capa fina de la fracción de DCM y de AcOEt.
Anexo 5. Gráficas de % de DPPH remanente y de % de inhibición del radical DPPH con las fracciones de mayor actividad antioxidante y con los extractos totales de
Pentacalia nitida y P. corymbosa
A1) Gráficas de % de DPPH remanente con la fracción de DCM de pentacalia nitida y = -0,0224x + 102,93 R² = 0,9889 000 020 040 060 080 100 120 0 1000 2000 3000 % d e D PP H r e m an e n te ppm
% DPPH rem.
% DPPH rem. Lineal (% DPPH rem. )42 A2) Gráfica de % de inhibición del radical DPPH con la fracción DCM de Pentaclia nitida
B1) Gráfica de % de DPPH remanente con la fracción de acetato de etilo de Pentacalia nitida.
B2) Gráfica de % de inhibición del radical DPPH con la fracción de acetato de etilo de Pentacalia nitida y = 0,0224x - 2,926 R² = 0,9889 000 020 040 060 0 1000 2000 3000
% Inhibición
% Inhibición Lineal (% Inhibición) y = -0,0208x + 94,021 R² = 0,9307 000 020 040 060 080 100 0 1000 2000 3000% DPPH rem.
% DPPH rem. Lineal (% DPPH rem.)43 C1) Gráfica de % de DPPH remanente con el extracto total de Pentacalia nítida
C2) Gráfica del % de inhibición del extracto total de Pentacalia nítida
D1) Gráfica del % de DPPH remanente con el extracto total de Pentacalia corymbosa y = 0,0208x + 5,979 R² = 0,9307 000 020 040 060 080 0 1000 2000 3000 ppm
% de inhibición
Lineal (% de inhibición % de inhibición) y = -0,01x + 104,53 R² = 0,9826 000 050 100 150 0 1000 2000 3000 ppm% DPPH rem
% DPPH rem Lineal (% DPPH rem) y = 0,0162x - 8,9417 R² = 0,9483 -020 000 020 040 0 1000 2000 3000 ppm% Inhibición
% Inhibición Lineal (% Inhibición)44 D2) Gráfica del % de inhibición del radical DPPH con el extracto total de Pentacalia corymbosa
Anexo 6. Decoloración del radical DPPH de púrpura a amarillo pálido debido a que este se reduce. y = -0,028x + 91,376 R² = 0,9792 0 20 40 60 80 100 0 1000 2000 3000
% DPPH rem.
% DPPH rem. Lineal (% DPPH rem. ) y = 0,0363x + 1,095 R² = 0,9886 0 10 20 30 40 0 500 1000 1500% Inhibición
% Inhibición Lineal (% Inhibición)45 Anexo 7. Cromatograma de la fracción DCM del extracto etanólico de Pentacalia nítida
46 Anexo 8. Cromatograma de la fracción acetato de etilo del extracto etanólico de Pentacalia nítida