Fuente: Statgraphics 1000 2000 2500 3000 3500 Medias y 95,0% de Fisher LSD Dosis -0,1 0,1 0,3 0,5 0,7 0,9 1,1 Po rc e n M u e rta s
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4.2. TIEMPOS LETALES TL 50 Y TL 90 DEL EXTRACTO ETEREO DE Allium Sativum
Tabla 4. Tiempos letales 50 y 90
CONCENTRACIÓN TL 50 TL 90 1000 ppm 581,8 horas 1046,9 horas 2000 ppm 85,4 horas 150,7 horas 2500 ppm 72 horas 101,1 horas 3000 ppm 68,6 horas 97,8 horas 3500 ppm 45,9 horas 66,5 horas Fuente: Autores
El tiempo letal es el tiempo desde la ingestión o exposición de la larva hasta el momento en el que fallece, su importancia radica en el hecho en el que es esto lo que permite determinar entonces cuál es el tiempo apropiado de exposición y es por ello que se hayan el TL 50 y TL 90 porque estos permiten identificar en qué tiempo se alcanza la mortalidad del 50% y 90% dependiendo de la concentración que se use.
Con base en lo anterior, en la Tabla 4 se encuentran las concentraciones vs el tiempo en el cual se produce o se produciría el 50% y 90% de la mortalidad, ya que en algunas concentraciones no se llega a esos porcentajes dentro de las 72 horas de monitoreo. De acuerdo a esta tabla se puede decir que tan solo en la concentración de 3500 ppm es posible alcanzar los dos porcentajes de mortalidad (50 y 90) en el lapso de las 72 horas, mientras que para las concentraciones de 1000 y 2000 ppm se requiere un tiempo mayor al de la duración del ciclo evolutivo total para llegar a esa cantidad muertes, por otro lado las concentraciones de 2500 y 3000 ppm si alcanzan el 50% de mortalidad en las 72 horas, pero el 90% no; lo cual permite analizar que a medida que la concentración aumenta el tiempo de exposición es menor.
4.3. ANALISIS DE VARIANZA DE UN FACTOR (ANOVA)
El análisis estadístico ANOVA permite que se acepte o se rechace la hipótesis nula y la hipótesis alterna, esto mediante el análisis de los datos obtenidos en el laboratorio (Tabla 2).
En el anexo 2.4, se observan los resultados del análisis de varianza (ANOVA) que arroja un p-valor inferior a 0,05 lo que permite aceptar la hipótesis alterna (Ha), lo que indica que el extracto Etéreo de Allium sativum si tiene un efecto larvicida sobre las larvas estadio IV de
Culex quinquefasciatus ya que al aumentar la concentración se ve una diferencia significativa de mortandad.
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Esto es válido decirlo debido a que al observar los datos obtenidos del análisis ANOVA (Anexo 2.4) el valor P es decir el valor de probabilidad es 0 siendo esto menor a 0.05 se permite rechazar la hipótesis nula.
Otro dato importante del análisis estadístico desarrollado es la información que aparece en la última tabla de los anexos (anexo 2.9) es la diferencia de medianas, esto se puede evaluar gracias al P que resulta de realizar la prueba del Chi- cuadrado, que en este caso da un valor de 0.04 y al ser esta menor a 0.05 demuestra que hay una diferencia significativa entre cada bioensayo, lo que indica que efectivamente si existe una diferencia entre la incidencia que tiene cada concentración en larvas que son expuestas.
5. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Analizando los resultados obtenidos se evidenció que el comportamiento del extracto etéreo de Allium sativum a lo largo de las 72 horas de tratamiento y en las diferentes concentraciones fue irregular, la causa de esto es que es un extracto de tipo biológico por lo que está sujeto a variaciones; presentando mejor rendimiento en el lapso de tiempo de las 0 horas a las 48 horas del monitoreo en concentraciones bajas que en las concentraciones más altas, esto en algunos tratamientos de la investigación. Por otra parte se presentó una diferencia porcentual bastante significativa entre los diferentes tratamientos una vez terminadas las 72 horas de exposición, lo que lleva a pensar que el trabajar con una especie de mosquito que por sus condiciones de habitad lo obligan a desarrollar resistencia para su supervivencia, y el hecho de que el origen del larvicida sea orgánico, en especial porque el componente que genera el efecto larvicida es la alicina que es inestable y volátil (Bender, 2013) , influyen directamente en la acción larvicida del extracto, comparando esto con los resultados obtenidos donde se usó como disolvente cloroformo metanol en el extracto de Allium sativum del estudio de Someshwar & Goutam(2011) se pueden identificar diferencias porcentuales en las concentraciones evaluadas en ese estudio bastante similares a las obtenidas en la presente investigación; pero cabe aclarar que la alicina es más estable en soluciones acuosas y etanólicas tal cual como lo comprobaron Fujisawa et al. (2008) en su estudio al comparar estas soluciones con una de aceite vegetal.
Al observar estudios realizados con otras especies de mosquitos como Aedes se puede ver que las concentraciones que usan para este son menores a las que se presentan aquí para
Culex, y tienen un buen efecto larvicida, esto puede estar dado por el hecho de que la especie Culex quinquefasciatus es una especie que en general tiene su ciclo de vida en aguas estancadas al contario de Aedes, lo que le puede proporcionar de alguna manera mayor resistencia (Torres & Ardila, 2015). Teniendo en cuenta lo anterior se puede hacer una comparación con el estudio Ortega (2014), donde también usan la especie
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C.quinquefasciatus probar la efectividad de algunos larvicidas biológicos, ya que sus concentraciones son algo similares a las usadas en la presente investigación.
Por otra parte si se desea hacer mayor referencia como tal al extracto, tomando de nuevo como referencia el estudio de Ortega (2014), en esa investigación se usaron dos concentraciones por debajo de los 1000 ppm que le dieron resultados positivos pero esto tiene que ver con los extractos que allí se usaron, lo cual nos permite decir que si se desea usar Allium sativum para elaborar larvicidas con bajas concentraciones no será tan afectivo como en concentraciones mayores a los 1000 ppm.
CONCLUSIONES
- El extracto de Allium sativum es promisorio como larvicida puesto que demuestra que al ser aplicado en larvas de IV estadio de Culex quinquefasciatus puede causarles la muerte.
- Es posible hacer un control biológico con larvicidas elaborados con especies vegetales para Culex quinquefasciatus en condiciones de laboratorio con el extracto etéreo de Allium sativum.
- No es factible obtener altos porcentajes de mortalidad en concentraciones bajas del larvicida debido a que la especie Culex quinquefasciatus es bastante resistente a todo tipo de larvicidas debido a las condiciones ambientales en las que
normalmente se desarrolla.
- El pico del efecto larvicida del extracto se presenta entre las 36 y 48 horas, presentando tasas de mortalidad bajas antes de este tiempo, y cambios poco significativos después de esas horas de exposición.
- Las concentraciones con mayor efectividad son aquellas que alcanzaron el 50% o más de mortalidad dentro de las 72 horas, estas son las concentraciones de 2500,3000 y 3500 ppm que alcanzaron el 50%, 57% y 96% respectivamente; mientras que con la concentración de 2000 ppm solo se llega al 41% y con la de 1000 ppm tan solo el 6% de mortalidad.
- Las concentraciones a las cuales se alcanzan el 50% y 90% de mortalidad son, 2500 ppm y 3423,076923 ppm respectivamente.
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- Probar la efectividad del larvicida con otras especies de mosquito para poder observar si es mayor o menor a la que se obtuvo con Culex quinquefasciatus. - Preparar el extracto para el larvicida con un disolvente diferente al éter de
petróleo, para saber que cual de ellos es mejor para su realización.
- Tener una mayor ventilación en el espacio donde se realicen los bioensayos por el olor que expide el extracto utilizado
- Ser cuidadoso al momento de tomar las larvas que serán expuestas al larvicida, ya que si se toman de una mala manera se les puede generar un trauma y matarlas antes de la exposición.
- Es necesario tener toda la instrumentación y documentación adecuada para los procedimientos.
- Es preferible tener cerca el criadero cerca del espacio donde se desarrolla la fase de laboratorio.
- Saber que es importante hacer la revisión el tiempo establecido y tener conocimiento de que datos son lo que se están tomando.
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48 ANEXOS
ANEXO 1. MATRIZ MONITOREO DEL EFECTO DE Allium sativum SOBRE LARVAS ESTADIO IV DE Culex quinquefascitus EN UN PERIODO DE 72 HORAS CON CONTEO CADA 12
HORAS
UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSE DE CALDAS FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES