Jorge Cancino, Pablo Montoya, Patricia López y Flor de María Moreno
Programa Moscafrut SAGARPA-IICA. Camino Cacahotales s/n CP. 30860, Metapa de Domínguez, Chiapas, México
Introducción
La exposición larvaria en la cría masiva de D. longicaudata involucra una serie de factores propios de la interacción parasitoide-hospedero (comportamiento de oviposición, discriminación del hospedero, superparasitismo, etc.). La respuesta de estos factores puede ser una manifestación de las reacciones ante la competitividad intraespecífica generada por las condiciones de confinamiento en el proceso de cría (Lawrence, 1981). En otros casos los resultados de parasitismo están muy relacionados con el proceso de optimización de la colonia (Bautista y Harris, 2003). Esto último implica la adaptación de la colonia a las condiciones de cría, que en otros términos puede ser el resultado de una mayor homogeneidad genética (Bartlett, 1984; Greiner y De Clercq, 2003). El último punto es muy discutido por las ventajas y desventajas que acarrea (Wajnberg, 2004).
Como resultado del mantenimiento de una misma colonia base en la cría masiva de D. longicaudata de la Planta Moscafrut se han observado diferencias en la emergencia de la progenie, lo que puede indicar que ha habido cambios en la respuesta de la colonia durante el tiempo de mantenimiento. Un indicativo importante es la variación de los porcentajes de emergencia entre las tres sesiones de exposición larvaria realizadas como parte de la producción masiva diaria. Referencias iniciales reportan resultados de emergencia hasta de un 60% en la primera exposición, los cuales reducían en la segunda y tercera exposición, llegando a promedios del 30%. En un período de aproximadamente quince años, los resultados parecen ser inversos, esto implica que la emergencia ha aumentado conforme el número de exposiciones. En la primera exposición el porcentaje de emergencia es de alrededor del 40%, presentando resultados mayores al 60% en la tercera exposición.
Los principales problemas que acarrea esta situación son: desprogramación en envíos y en el mantenimiento de la colonia, desgaste en los recursos de oviposición de las hembras parasitoides, efectos negativos en la calidad de la colonia en general, desperdicio en el uso del hospedero, carencia de una programación adecuada en los tiempos de exposición y resultados no acorde con la programación en la exposición larvaria.
Una solución puede ser la introducción de material silvestre, lo cual es poco práctico y se desconoce cuál sería la tendencia que tomaría este nuevo material biológico. La otra sería conocer con base en indicadores la respuesta de las hembras y aplicar cambios en el proceso de cría con el objetivo de mejorar la calidad de la colonia en general.
En este trabajo se llevaron a cabo una serie de evaluaciones para conocer desde el estado que guarda la colonia con respecto a los parámetros de producción y calidad, así como cual es la respuesta ante diferentes variaciones en las partes técnicas más manejables como la densidad y el tiempo de exposición. En una primera instancia se realizó una serie de evaluaciones para obtener información acerca del estado de la colonia ante la exposición de hospederos. Después se llevaron a cabo cambios en los tiempos de exposición combinados con diferentes densidades de hembras. En un último término se planteó aplicar una secuencia diferente de tiempos de exposición en tres densidades distintas, con el fin de poder definir estrategias para optimizar la producción incluyendo tres exposiciones de larva en la cría masiva.
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Materiales y Métodos
Las evaluaciones se realizaron en el laboratorio de producción masiva de D. longicaudata, empleando las técnicas de producción aplicadas en la Planta Moscafrut.
La unidad experimental fue una jaula Metapa de 30 x 40 cm. La cantidad de adultos por jaula se estimó considerando la emergencia de un número aproximado de pupas calculados en base al peso de pupa y la viabilidad. Los adultos fueron alimentados con miel de abeja cristalizada untada en las paredes externas. Desde que se cargaron las jaulas con pupas hasta antes de las exposiciones las jaulas permanecieron en una sala con 26 ± 1 ºC y 70-80% H.R. Durante las evaluaciones las jaulas se colocaron en una sala a 22 ± 1ºC y 70-80% de H.R., en ambas salas se mantuvo un fotoperiodo de 12 h luz: 12 h obscuridad.
Las evaluaciones comprendieron cuatro etapas consecutivas desarrolladas de la siguiente manera:
Determinación del estado de la colonia en las exposiciones larvarias.
Para evaluar el estado de la colonia se llevó a cabo un muestreo por cada sesión de exposición y para cada edad de hembra, incluyendo una muestra representativa de la producción correspondiente a la mezcla de larvas procedentes de edades de hembras de 5 a 9 días. El muestreo fue dirigido a larvas recién expuestas. La exposición se realizó en jaulas con una carga inicial de 4000 adultos/jaula y con las condiciones referidas en el Cuadro 1.Se hizo un muestreo de 1 litro de larvas a partir de las cual se evaluaron los parámetros correspondientes. Los resultados fueron comparados por medio de Anova de una vía y la prueba de rango múltiple de medias de Tukey (α=0.05), En algunos casos se corrigió la normalidad o la homocedasticidad, transformando los datos por medio de una prueba de Box-Cox. En el caso particular de número de cicatrices y porcentaje de pupación se aplicó una prueba no paramétrica, por no poder corregirse la normalidad.
Cuadro 1. Densidad de larvas, tiempos de exposición y período de edad de hembras empleadas en cada exposición en la cría masiva de D. longicaudata.
Exposición No. Larvas expuestas/jaula
Edad de las larvas (días)
Tiempo de exposición
Rango de edad de hembras (días)
1 6000 8 1 h 5 a 10
2 5400 7 1 h 5 a 9
3 5400 7 1 h 45 min 5 a 9
Evaluación de densidades
Como primer parámetro se evaluó la densidad de adultos por jaula, incluyendo las cantidades de 1000, 2000, 3000 y 4000 adultos/jaula. Se expusieron 6000 larvas por jaula, durante 1 hora con hembras de 5 a 10 días de edad. Se realizaron 12 repeticiones para cada tratamiento y los resultados fueron analizados por medio de un Anova de una vía y la prueba de rango múltiple de medias de Tukey (α=0.05). En algunos casos se corrigió la normalidad o la homocedasticidad, transformando los datos por medio de una prueba de Box-Cox. Los análisis se realizaron por separado para cada edad de hembras.
Evaluación de densidades y tiempos de exposición
Posteriormente se llevó a cabo evaluaciones con la combinación de las densidades de 2000, 3000 y 4000 adultos/jaula, con los tiempos de exposición de 1 h, 1 h 30 min y 2 h. En cada una de las combinaciones se expuso 6000 larvas por jaula, empleando hembras de 5 a 10 días de edad. Los tratamientos fueron arreglados en un diseño bifactorial, se realizaron 8 repeticiones y los resultados se analizaron por separado para cada edad de hembras con un Anova de dos vías y prueba de rango múltiple de Tukey (α=0.05).
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Evaluación de densidades y la secuencia de tiempos de exposición en las tres exposiciones Se evaluaron las densidades de 2000 y 3000 comparándolas con la densidad testigo de 4000 adultos/jaula. Se incluyeron dos secuencias de tiempo de las tres exposiciones, una comprendió tiempos de: 1 h, 1 h 30 min y 1 h 30 min y la otra serie fue de 1 h, 1 h y 1 h 45 min de exposición para primera, segunda y tercera exposición, respectivamente. Se expuso 6000 larvas por jaula a hembras de 5 a 10 días de edad y en las tres exposiciones. Se realizaron 8 repeticiones para cada tratamiento y los resultados fueron analizados aplicando un diseño factorial incluyendo como factores la exposición, la densidad de adultos por jaula, el tiempo y la edad de las hembras.
Medición de variables.
Del litro de larva más dieta muestreado después de la exposición se tomaron de manera azarosa tres muestras de 100 larvas para contabilizar la mortalidad larvaria, emergencia y proporción sexual. Una cuarta muestra de aproximadamente 100 larvas fue tomada para el conteo de cicatrices.
Número de cicatrices por pupa. El número de cicatrices por pupa se determinó con una muestra de diez pupas por tratamiento y por repetición, Las observaciones se realizaron en un estereoscopio a 2.5x.
Mortalidad larvaria y porcentaje de pupación a las 72 h. Las muestras de larvas recién expuestas fueron colocadas en recipientes de plástico (4 cm de alto x 7 cm de diámetro) con una delgada capa de vermiculita. Se mantuvieron a 26 °C durante 72 h, cubierto este período se contabilizó el número de larvas vivas, larvas muertas y pupas formadas.
Emergencia de adultos y proporción sexual. Las mismas muestras empleadas en la evaluación anterior fueron mantenidas en recipientes cerrados por un período de 15 días, hasta obtener la emergencia de adultos. Se contabilizaron el número de adultos por sexo para calcular el porcentaje de emergencia y la proporción sexual.
Resultados
Determinación del estado de la colonia en las exposiciones larvarias
Los resultados promedio de los diferentes parámetros se concentran en el Cuadro 2. Se presentó superparasitismo en todas las exposiciones, en mayor grado en la primera, sin diferencia estadística entre las diferentes edades. La emergencia obtenida con hembras de 5 a 8 días de edad tuvo poca variación pero disminuyó en hembras mayores, de manera significativa solo en la tercera exposición. Por su parte la proporción sexual disminuyó de la primera a la tercera exposición y también conforme avanzó la edad de las hembras de manera significativa en la primera exposición, en donde adultos de 5 a 8 días de edad produjeron más hembras que adultos de 9 y 10 días; sin embargo la reducción del porcentaje de hembras en edades mayores fue significativa tanto en la primera como en la tercera exposición. La pupación no fue afectada, pero sí se observó efecto sobre la mortalidad de larvas, la cual fue alta en la primera exposición, en donde disminuyó significativamente con la edad de las hembras.
Evaluación de densidades
Los resultados promedio de los diferentes parámetros se concentran en el Cuadro 3. El superparasitismo la mortalidad larvaria se incrementaron de manera significativa con el incremento de la densidad en prácticamente todas las edades; mientras que la emergencia presentó pocas variaciones, el promedio significativamente más bajo se obtuvo en hembras jóvenes a la densidad de 1000 adultos/jaula. El porcentaje de hembras disminuyó conforme disminuyó la densidad de hembras, observándose los promedios más bajos con1000 adultos/jaula con hembras de 7 y 8 días.
Evaluación de diferentes densidades y tiempos de exposición
Los resultados promedios se observan en la Figura 1 y los resultados estadísticos se pueden observar en el Cuadro 4. La densidad de adultos por jaula tuvo mayor efecto que el tiempo de exposición sobre los parámetros evaluados, resultando el número de cicatrices, como indicador de