3. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. MATERIALES
3.1.2. Materiales biológicos
Palomas silvestres del distrito de Cotahuasi. Muestras de sangre para el análisis de laboratorio. 3.1.3. Materiales de laboratorio
Centrifuga. Placas de vidrio.
Baguetas de madera. Timer
Micropipetas de 100 ul. Tips de 100 ul.
Antígeno SAP S. pullorum. Mandil
Barbijo
Guantes látex Cinta masking tape Lapicero
Muestra de suero sanguíneo 3.1.4. Materiales de campo Mameluco. Guantes. Algodón. Alcohol. Jeringas Vacutainer. Libreta de campo. 3.1.5. Equipo y maquinaria: Cámara fotográfica Papelería Material de oficina Computadora Impresora Programa estadístico
3.2. MÉTODOS 3.2.1. Muestreo
a. Universo
El universo está constituido por el conjunto poblacional de 5538 palomas, obtenido por observación y conteo en la zona a ser estudiada.
La edad y sexo en las palomas será determinado de la siguiente manera: el sexo se determinará por observación y necropsia; la edad estará dividida en jóvenes y adultos.
b. Tamaño de la muestra.
Para calcular la densidad poblacional se usó la siguiente formula (Thomas et al., 2010): ∗ / ∗ / . . Donde: D = densidad
n = número de individuos observados A = área de muestreo (km2)
L = longitud de transecto (km)
F (0) = probabilidad de detección calculada a partir de las distancias perpendiculares de observación.
Para calcular el tamaño de la muestra: 1 Donde: N . N 98 c. Procedimiento de muestreo.
Las muestras de sangre de las paloma domésticas (Columbia livia), fueron colectadas en vacutainer.
- Se seleccionó muestras de sangre de palomas domésticas al azar. representativas.
- Se extrajo de entre 2 a 3 ml. de sangre.
- Las muestras fueron obtenidas con una jeringa directamente del corazón de la paloma.
- Se procuró no dañar las muestras al introducir la sangre al vacutainer. Haciendo que la sangre corriera por las paredes del vacutainer.
- Seguidamente se procedió a centrifugar la muestra por um lapso de tiempo de 4 minutos para obtener el suero y enviar al laboratorio..
3.2.2. Métodos de evaluación
a. Metodología de la experimentación Método de aglutinación simple
El procedimiento que se realizó fue el siguiente: 1. Se colocó en una placa 50 ul de suero.
2. A continuación se adicionó 50 ul de antígeno para Salmonella pullorum.
3. Luego se procedió a mezclar de forma homogénea el contenido.
4. Seguidamente se incuba durante 2 minutos
5. Se observa la placa para ver donde se produce la aglutinación 6. Consignar resultados.
b. Recopilación de la información En el campo
- Muestras de sangre provenientes de las palomas.
- Observaciones realizadas de los distintos lugares de recolección.
En el laboratorio
Se usó este espacio para determinar la presencia de anticuerpos contra Salmonella pullorum en palomas domésticas (Columbia livia) mediante el método de: AGLUTINACIÓN SIMPLE
En la biblioteca
Se realizó la revisión de textos de investigación sobre temas tratados acerca de las enfermedades más frecuentes en palomas, la relación existente entre estas aves y el ser humano y otros relacionados a salmonellosis en aves domésticas (Columbia livia).
En otros ambientes generadores de información científica - Consulta e indagación a profesionales involucrados en el
área y con temas relacionados en palomas. - Internet.
3.2.3. Variables de Respuesta
a. Variables independientes
Edad de los animales.- En cuanto a la variable de la edad, se ha considerado dos rangos:
Jóvenes. Adultos.
Sexo de los animales.- Para esta variable se consideró dos atributos;
- Hembras. - Machos.
Procedencia de los animales.- En el caso del lugar de donde proviene cada muestra se ha considerado 7 zonas de recolección: o Cancha o Chacaylla o Colcan o Cotahuasi o Piro o Tacaupo o Tanapaca b. Variables dependientes
4. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 4.1. Cuadro de resultados
CUADRO N° 1: Cantidad de sueros positivos a Aglutinación simple para Salmonella pullorum
Salmonella pullorum
CONTROL N° de casos Porcentaje (%) Positivos (+) 15 15.31
Negativos (‐) 83 84.69 Total 98 100
GRÁFICO N° 1: Casos positivos a Salmonella Pullorum
De las 98 muestras procesadas: se obtuvo 15 muestras positivas a Salmonella pullorum. representando por el 15.31%. Mediante la Técnica de Aglutinación simple. 15 15.31 14.8 14.85 14.9 14.95 15 15.05 15.1 15.15 15.2 15.25 15.3 15.35 N° de casos Porcentaje (%)
Se puede entiende que el porcentaje de Salmonella pullorum se encuentra en 15.31%, pero representa que las palomas del distrito de Cotahuasi presentan anticuerpos contra Salmonella pullorum.
Beltrán (2002) realizó pruebas microbiológicas en 20 palomas de la Plaza de Armas en Arequipa de una población estimada de 400 columbáceas; donde obtuvo un 38% de muestras positivas a Salmonella spp., 75%
positivas E. coli. Entre otras. Suponemos que el hacinamiento de las
palomas es un factor importante para ser consideradas como portadoras. En el presente trabajo no existe hacinamiento, es por ello que el porcentaje de pullorosis es mucho menor con un 15.31% comparado con un 38% de Beltrán.
González-Acuña (2003). En un estudio similar en la ciudad de Chillán Chile donde se procesaron 100 ejemplares de paloma doméstica mediante la técnica de Elisa y se obtuvo un 4% positivo a Salmonelosis, 8% positivo a Estafilococcosis entre otras.
Comparando con el presente trabajo de investigación se obtuvo un 15.31% positivo para Salmonella pullorum con una muestra de 98 ejemplares, probablemente el porcentaje se debe al medio geográfico, la disponibilidad de alimento de las palomas en el distrito de Cotahuasi. Melgar (2014) En su trabajo de Salmonelosis y Mycoplasmosis en
palomas Columbia livia de la Asociación el Azufral mediante la técnica de Sero-aglutinación Arequipa-2014. De 75 muestras procesadas: 11 palomas resultaron positivas a Salmonella spp. con prevalencia de 14.6%. según este trabajo realizado en el distrito de Cotahuasi, los factores son comunes en ambos casos, es por ello que la prevalencia es similar en ambos casos; uno con 14.6% y el presente trabajo con 15.31%.
CUADRO N° 2: Salmonella pullorum en palomas domésticas, según la edad de las palomas en el distrito de Cotahuasi, provincia de La Unión,
departamento de Arequipa 2018.
EDAD
Positivos Negativos TOTAL N° de casos % N° de casos % N° DE CASOS Total % Joven 6 6.12% 49 50.00% 55 56.12% Adulto 9 9.18% 34 34.69% 43 43.88% 15 15.31% 83 84.69% 98 100% X2=1.89 (X2 0.05=3.84. GL=1)
Al aplicar la prueba estadística de “Chi cuadrado”, se demuestra que no existe diferencia significativa (p>0.05), por lo tanto entendemos que las frecuencias de casos positivos a Salmonelosis en el distrito de Cotahuasi es similar entre Jóvenes y Adultos.
GRÁFICO N° 2: Casos de Salmonella pullorum según edad
En el cuadro y gráfico N° 2 se muestra los casos de Salmonella pullorum en el distrito de Cotahuasi provincia de La Unión, departamento de
6.12% 9.18% 50% 34.69% 0 10 20 30 40 50 60 Joven Adulto N° DE MU ES TRAS CASOS Positivos Negativos
Arequipa 2018, según la edad de las palomas muestreadas, observándose que la mayor prevalencia se encuentra en palomas adultas con 9.18%, seguido de las palomas jovenes con 6.12%, sin embargo no existe diferencia estadística lo que representa igual el comportamiento de jóvenes y adultas ante la salmonelosis.
• Comparando con Melgar Torres, Luis Rodrigo. Prevalencia de Salmonelosis y Mycoplasmosis en palomas Columbia livia de la Asociación el Azufral mediante la técnica de Sero-aglutinacion Arequipa-2014.
De 75 muestras procesadas: 11 palomas resultaron positivas a Salmonella spp. con prevalencia de 14.6%. Siendo la prevalencia de Salmonella spp. de 6.7% en palomas Adultas y 8% en palomas Juveniles. Encontrando que en nuestro trabajo hay mayor porcentaje en adultos y menor porcentaje en el caso de jóvenes; esto probablemente debido al tiempo de vida que tienen estas aves.
CUADRO N° 3: Salmonella pullorum según el sexo en palomas, en el distrito de Cotahuasi, provincia de la Unión, departamento de Arequipa 2018.
SEXO
Positivos Negativos N° de
casos %
N° de
casos % Total Total %
Hembras 9 9.18% 44 44.90% 53 54.08%
Machos 6 6.12% 39 39.80% 45 45.92%
15 15.31% 83 84.69% 98 100%
X2=2.47 (X2 0.05=3.84. GL=1)
Al aplicar la prueba estadística de “Chi cuadrado” al cuadro N° 2 se demuestra que no existe diferencia significativa (p>0.05), por lo tanto se
entiende que el porcentaje y número de casos positivos a Salmonelosis en el distrito de Cotahuasies similar entre Hembras y machos.
GRÁFICO N° 3: Casos de Salmonella pullorum según sexo
En el cuadro y gráfico N°3, se muestra la Salmonella pullorum del distrito de Cotahuasi, provincia de La Unión, departamento de Arequipa 2018, según el sexo, en la cual se puede observar que la presencia de casos positivos en hembras es mayor con 9.18% con un total de 9 muestras y de 6.12% con un total de 6 muestras para machos.
Según Melgar Torres, Luis Rodrigo. Prevalencia de Salmonelosis y Mycoplasmosis en palomas Columbia livia de la Asociación el Azufral mediante la técnica de Sero-aglutinacion Arequipa-2014. De 75 muestras procesada, la presencia de Salmonella pullorum fue de 9.3% en palomas Hembras y 5.3% en palomas Machos, para dicho caso el porcentajes con nuestro trabajo son casi similares, por la única diferencia es en el número de casos positivos que hay en ambos trabajos. Además de que la causa de esta puede ser el mayor número de palomas hembras atrapadas durante la captura de las aves.
9.18% 6.12% 44.90% 39.80% 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Hembras Machos N° DE MUES TR AS CASOS Positivos Negativos
CUADRO N° 4: Salmonella pullorum según la procedencia en el distrito de Cotahuasi, provincia de la Unión, departamento de Arequipa 2018.
RESULTADO
SECTOR Positvo % Negativo % Total Total %
Cancha 5 5.10 13 13.27 18 18.37 Chacaylla 5 5.10 13 13.27 18 18.37 Colcan 1 1.02 8 8.16 9 9.18 Cotahuasi 3 3.06 24 24.49 27 27.55 Piro 1 1.02 8 8.16 9 9.18 Tacaupo 0 0.00 8 8.16 8 8.16 Tanapaca 0 0.00 9 9.18 9 9.18 TOTAL 15 15.31 83 84.69 98 100 X2=7.98 (X2 0.05=12.59 GL=6)
Según la prueba estadística de “Chi cuadrado” al cuadro N° 4 se demuestra que no existe diferencia significativa (p>0.05), lo que nos indica que la pesencia de Samonella pullorum es independiente del lugar de donde proceden las palomas.
Nos cabe afirmar que la procedencia no es un factor para adquirir o no la Samonella pullorum.
Cabe mencionar que el total de palomas recolectadas fue de distintos sitios, donde se vio más casos positivos en los sectores de, cancha y chacaylla.
GRÁFICO N° 4: Casos de Salmonella pullorum según la procedencia.
En el cuadro y gráfico N° 4 se muestra la Salmonella pullorum en el distrito de Cotahuasi provincia de La Unión departamento de Arequipa 2018, en los distintos lugares de donde se recolectó las muestras; se observa que la presencia encontrada en cada sector fue la siguiente: en el sector de Cancha se halló un porcentaje 5,10% con una cantidad de 5 muestras positivas, 13,27% con 13 muestras negativas; en el sector de Chacaylla fué de 5.10% con una cantidad de 5 muestras positivas, 13,27% con 13 muestras negativas; para el sector de Cotahuasi encontramos 3,06% con una cantidad de 3 muestras positivas, 24.19% con 24 muestras negativas; en el sector de Colcan con 1,02% con 1 muestra positiva, 8.16% con 8 muestras negativas; s; para el sector de Piro con 1,02% con 1 muestra positiva, 8.16% con 8 muestras negativas; para Tacaupo con ninguna muestra positiva, 8.16% con 8 muestras negativas; y finalmente para Tanapaca ninguna muestra positiva, 9.18% con 9 muestras negativas de un total de 98 muestras,
Se considera en forma general que, la presencia de Salmonella pullorum es baja.
5 5 1 3 1 0 0 13 13 8 24 8 8 9 0 5 10 15 20 25 30
Cancha Chacaylla Colcan Cotahuasi Piro Tacaupo Tanapaca
N° DE CASOS PROCEDENCIA Positvo Negativo
5. CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados que se obtuvieron del presente trabajo de investigación, se ha llegado a las siguientes conclusiones:
1. De las 98 muestras de aves procesadas en el distrito de Cotahuasi, 15 palomas reaccionaron positivas a Salmonella pullorum, con un porcentaje de 15.31%. mediante el método de Aglutinación Simple.
2. Al aplicar la prueba estadística de “chi cuadrado” se demuestra que no existe diferencia significativa (p>0.05), por lo tanto entendemos que las frecuencias de casos positivos a Salmonelosis en el distrito de Cotahuasies similar entre Jóvenes y Adultos.
.
3. Al finalizar el presente trabajo de investigación se determinó que de 53 palomas hembras; 9 palomas hembras reaccionaron positivas a Salmonella
pullorum con un porcentaje de 9.18%. En el caso de 45 palomas, Macho; 6
palomas Machos reaccionaron positivos a Salmonella pullorum. con porcentaje de 5.3%.
4. De igual manera se concluye que de 43 palomas adultas; 9 palomas Adultas reaccionaron positivos a Salmonella pullorum. con un porcentaje de 9.18%. Para palomas juveniles de un total 55, 6 palomas jóvenes reaccionaron a Salmonella pullorum, con un 9.18%.
5. Para determinar la presencia de Salmonella pullorum según la procedencia se encontró que: en el sector de Cancha de un total de 18 muestras, se halló un 5,10% con una cantidad de 5 muestras positivas; en el sector de Chacaylla de 18 muestras que se analizaron, se encontró el 5.10% con una cantidad de 5 muestras positivas; para el sector de Cotahuasi encontramos 3,06% con una cantidad de 3 muestras positivas de un total de 27 muestras recolectadas; en el sector de Colcan de 9 muestras en total se halló un 1,02%
con 1 muestra positiva; para el sector de Piro con 1,02% con 1 muestra positiva de un total de 9 muestras; para Tacaupo con ninguna muestra positiva, de las 8 muestras; y finalmente para Tanapaca ninguna muestra positiva, de las 9 muestras. Todo esto de un total de 98 muestras recolectadas en el trabajo de investigación.
6. RECOMENDACIONES
1. En base a los Resultados donde 15 palomas reaccionaron positivas a Salmonella pullorum. con un porcentaje de 15.31%, se recomienda vigilancia, prevención y control sanitario de agentes zoonóticos y zoonosis relacionados a la paloma doméstica” en el distrito de Cotahuasi
2. Se recomienda a los pobladores del distrito de Cotahuasi seguir con capacitaciones de control poblacional de las palomas reduciendo o manteniendo la población de estas.
3. Se encontró mayor porcentaje de casos positivos en los sectores de; cancha y chacaylla, se recomienda a la población mayor vigilancia y realizar estudios anuales para verificar el aumento de casos positivos.
4. Investigar y realizar nuevos estudios de otras enfermedades en palomas domésticas.
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