47
Base de datos sobre Limites Máximos de Residuos de plaguicidas Especificaciones de plaguicidas y Normas para el Control de la calidad. Online, http://www.fao.org/ag/agp/agpp/Pesticid/Default.htm (Citado 22 de julio 2008).
48
________.riesgos toxicológicos de plaguicidas Online- http://www.contraloriagen.gov.co/html/comtema/pdf/casopetrolero.pdf, (Citado el 25 de julio de 2008)
4.6. CROMATOGRAFÍA
Todos patrones de pureza de Malathion y Endosulfan son conocidos en donde Malathion presenta 57% de (IA) y endosulfan x% (ia).
Los datos obtenidos han sido procesados en un equipo para cromatografía de gases, de alta resolución con detección de ionización de llama (GC-FID).
Primero se realizaron los análisis para determinar las condiciones óptimas de operación del equipo de cromatografía (flujo de gas transportador y temperaturas para el inyector, el detector y el horno) para la separación y cuantificación de los plaguicidas basados en los parámetros cromatográficos tales como el factor de capacidad, la selectividad y la resolución. Bajo estas condiciones se realizaron 3 repeticiones del análisis de la mezcla y se determino la repetibilidad de las señales producidas por los diferentes plaguicidas en la solución y sus tiempos de retención definiendo para cada caso tiempo de inicio y final de la elución de cada pico cromatográfico.
Tomando como base un estándar certificado de la mezcla de Malathion, α-endosulfan y -endosulfan, se preparó una solución patrón y a partir de ésta se prepararon soluciones de trabajo que fueron analizadas con las réplicas necesarias para efectuar la validación estadística del método instrumental para la cuantificación de estos compuestos. Tomar 100 ml de lixiviado Introducirlos en el embudo de decantación. Agregar 30 ml de solvente agitar y esperar 10 min. Eliminar un volumen de 140 ml Agregar 30 ml solvente esperar 10 min.
Hasta completar adición de 90 ml de solvente 50ml de solución Eliminar un volumen de 55 ml 25 ml de solución Observación de 2 fases
Cálculos para ingresar muestra en el vial para lectura en cromatógrafo Cálculos de cantidad de IA en el derrame
En los casos en que no alcanza el volumen de lixiviado se complementa con agua destilada Estabilización de pH
en 7con Hidróxido de Sodio 10N
La validación de este método de análisis para a determinación de las concentraciones de Malathión y Endosulfan están marcadas por las posibilidades técnicas al alcance del laboratorio de la universidad, como disponibilidad de patrones de referencia confiables, equipos de medición con detectores de alta sensibilidad u otros que se constituyan como dificultades técnicas para la realización del análisis y la exactitud requerida, que puedan afectar la calidad y la fiabilidad de los resultados de los diferentes eventos. Por esto se busco un procedimiento comprensible, fácil de implementar y validado, en donde se consideren factores como la respuesta lineal frente a diferentes concentraciones, la exactitud, la selectividad y la precisión, con el propósito de que la dispersión y variabilidad de los resultados sea la mas baja posible y de esta manera la incertidumbre del método este bajo control frente a resultados obtenidos en análisis realizados.
La validación de datos se confirmo mediante el suministro y utilización de la ecuación de la recta tanto para el Malthion como para el Endosulfan en sus dos eventos, (Ecuación de la recta: Y = a X + b). El objetivo de la validación de este método es confirmar y documentar que los resultados producidos y análisis de de los datos son confiables. De esta manera en un proceso de validación deben considerarse los parámetros de selectividad, linealidad, precisión, exactitud, y sensibilidad.
4.6.1 Aplicación de la ecuación para el Malathión y en Endosulfan:
Calculo de la pendiente para Malathión (Y = a X + b)
a = ((Σ Xi Yi) – ((Σ Xi Σ Yi )/ n )) / (Σ Xi2 – ((Σ Xi)2 / n))
a = ((252776625) – ((5200 x 1767596) / 40)) / ((750000 – (27040000 / 40)) a = 22989145 / 74000 = 310.66
Calculo del intercepto para Malathión b = ( Σ Yi – b Σ Xi ) / n
b = ((1767596 – (310.66 x 5200)) /40 b = 3804.1
Ecuación de la recta: Y = a X + b
Y = 310.66 X + 3804.1
Cálculo de la pendiente para α-endosulfan (Y = a X + b)
a = ((Σ Xi Yi) – ((Σ Xi Σ Yi )/ n )) / (Σ Xi2 – ((Σ Xi)2 / n))
a = ((639567509) – ((2947,6 x 7332188) / 40)) / ((255779,2 – ((2947,6)2) / 40)) a = 992585575.28 / 38570.56 = 2573.43
Cálculo del intercepto para α-endosulfan b = ( Σ Yi – a Σ Xi ) / n
b = ((7332188 – (2573.43 x 2947.6)) /40 b = -6331.16
Ecuación de la recta: Y = a X + b
Y = 2573.43 X + (- 6331.16)
Sensibilidad del método cromatográfico para determinación de Malathión Para la determinación de los parámetros de sensibilidad del método se inyectó en el sistema cromatográfico diclorometano, reactivo utilizado como disolvente en la preparación de cada una de las soluciones de trabajo (blanco = línea base) y se realizó el análisis bajo las condiciones cromatográficas seleccionadas para la separación y cuantificación de la mezcla del plaguicida.
Sensibilidad del método cromatográfico para determinación de α-Endosulfan
y de - Endosulfan
Para la determinación de los parámetros de sensibilidad del método se inyectó en el sistema cromatográfico hexano, solvente utilizado en la preparación de cada una de las soluciones de trabajo (blanco = línea base) y se realizó el análisis bajo las condiciones cromatográficas seleccionadas para la separación y cuantificación de alfa y beta Endosulfan.
4.7. TABULACIÓN, Y SELECCIÓN DE DATOS
Para la selección de datos se realizo la representación del diagrama de una distribución construida para mostrar las características principales de cambios en las propiedades del suelo después del derrameque se presentaron en la tabla de datos (ver anexo D).
También se analizan las condiciones de error en los ensayos de laboratorio, para señalar los posibles datos atípicos, es decir, aquellas observaciones que parecen ser distintas de las demás.
En donde se depuro la información suministrada por P1 y P2 puesto que se pueden eliminaron los datos de mayor variación en los extremos
.
4.7.1 Evaluación del proceso de medición:
El proceso de medición tiene como propósito inicial distinguir y por ende clasificar los comportamientos seguidos por los dos plaguicidas que deben responder a una serie de principios que se analizan a continuación.
En primer lugar el proceso de medición debe ser válido, entendiéndose que cumple este requisito cuando mide de alguna manera demostrable aquello que trata de medir, libre de distorsiones sistemáticas, este principio se cumple para el desarrollo cromatografico ya que se manejaron las validaciones del método instrumental para la determinación de endosulfan y malathion mediante cromatografía de gases de alta resolución con detección por ionizacion de llama.49; el tipo de validez manejada es una validez pragmática.
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BAUDILIO ACEVEDO BUITRAGO, Desarrollo y validación de un método instrumental para la determinación de endosulfan/ malathion, mediante cromatografía de gases de alta resolución con
Cabe anotar que los procedimientos de muestreo poseen un soporte técnico pero no existen métodos para su validación, y los derrames realizados para este estudio son netamente de planteamiento empírico y de demostración.
El segundo principio deseable en la toma de datos es la fiabilidad, esta si se presenta tanto para P1 como para P2 ya que fueron realizados los datos de lectura de concentración para cada columna de suelo de diferentes alturas (3veces) repetidamente y estos proporcionaron resultados parecidos.
Finalmente se tiene el principio de la precisión. Este principio se evaluó por parte de los integrantes de P1 y P2 cuando se realizaron las pruebas piloto en donde se determinaban que las concentraciones de plaguicida se encontraran en el rango de detección, de igual forma la evaluación de la relación del propósito de la investigación y el fenómeno de movilidad en la ZN no fue analizado correctamente ya que se evidencia errores como:
-Unidades vacías también llamados elementos faltantes por la falta de cobertura en los datos, ya que algunos elementos del agregado se encuentran incompletos por la falta de sustentación con la comparación de un blanco de lixiviación y tiempos de retención.
- La presencia de Blancos que no son evaluables para el cumplimiento del objetivo de la investigación.
- La presencia de datos extraños, corresponde este problema a las situaciones en las cuales los datos contiene elementos que ya no son representativos en el estudio, generando confusión, por esta razón para el análisis de datos, se ocultaron del marco muéstreal los datos que se mantiene iguales durante el proceso como:
-Volumen de Muestra en la cantidad de solvente para la extracción -Volumen de Inyección
También se ocultaron los datos que ya no son representativos por ser la base de determinación del dato de evaluación como:
-Masa de plaguicida en Volumen de Inyección -Masa de plaguicida en Volumen de extracción
Redefiniendo así el marco muéstreal para estudio de lixiviación. (Ver anexo G); de igual forma se realizo el compilado de los datos obtenidos de los laboratorios de suelo en las condiciones iniciales y después de cada derrame; para la valoración del contenido de humedad en campo en % se realizaron las medias aritméticas de los datos proporcionados por los estudios P1 y P 2.
4.8 DECISIÓN ESTADÍSTICA
La toma de decisiones sobre la base de una información incompleta como la actual y que se encuentra contenida en algunos datos, es arriesgado y no puede realizarse con certeza absoluta sino con incertidumbre. (Ver anexo G)
detección por ionizacion de llama. Universidad de la salle. Laboratorio de ingeniería ambiental y sanitaria.2008
Sin embargo esta última no es total, pueden controlarse sus niveles, puede medirse su magnitud, lo cual se lleva a cabo con base en el calculo de probabilidades,50basadas en posibles asociaciones entre los datos de P1 y P2 y partimos de la sospecha de correlación entre variables como Volumen de lixiviado, Concentración de plaguicidas y altura de la columna de suelo principalmente.
Para lograr que los datos a analizar posean suficiente significación se propuso como mínimo manejar 11 pares de datos.
También establecimos que debíamos manejar un marco muestral menor, por esta razón determinamos las medias aritmética de cada columna y para cada asociación revisando que no tuviera valores atípicos que modificaran la media; estableciendo la moda para determinar el valor en cada intervalo que se da con mayor frecuencia. Se decidió estudiar las relaciones bajo el coeficiente de correlación de Pearson ya que este índice estadístico mide la relación lineal entre dos variables cuantitativas; Los pasos realizados en la depuración de datos fueron lo siguientes:
1. Realizar las medias aritméticas para la tabla generada para cada plaguicida. 2. Eliminar de la tabla los datos extraños.
3. Realizar las medias aritméticas para la tabla final.
4.8.1 Análisis e Interpretación de Cambios de condiciones fisicoquímicas del suelo después de cada derrame
Es indispensable tener en cuenta que el plaguicida no permanece intacto por tiempo indefinido en el medio ambiente, ya que con el tiempo sufre una degradación influenciada por microorganismos, actividad química, pH, clima, y contenido de materia orgánica del suelo, entre otros.
Obtenida, depurada y clasificada la información (ver anexo H) se evidencia que:
- La capacidad máxima de retención de agua por el suelo en los diferentes eventos. En condiciones iniciales y en los dos eventos tanto para Malathión como para Endosulfan el contenido de humedad no es uniforme, sabiendo que es el mismo tipo de suelo. Esto se debe a las características del suelo, como la temperatura en el momento del derrame. El cambio después de aplicados los plaguicidas es bastante evidente y más en el endosulfan, esto se debe a que la solubilidad varía constantemente, al tener mayor movimiento: mayor espacio para el contenido de humedad. tiene mayor humedad de campo, la granulometría y la cantidad de arcilla es menor, por ende menor adsorción del plaguicida y mayor contenido de humedad, también por ser mas persistente en el medio conserva el grado de humedad al no volatizarse. El contenido de humedad en campo del Malathión menor, esto facilita la movilidad del plaguicida ya que los poros no se encuentran saturados, en caso de estarlo, ejercerían una resistencia la cual conlleva a una adsorción, la cual es directamente proporcional con la humedad.