1.3.2.1.1.2 RELACIÓN CON LA PROGESTERONA
2.1. METODOLOGIA 1 TIPO DE ESTUDIO
Iinvestigación de Laboratorio, no experimental, descriptiva, transversal, comparativo, en las pacientes gestantes que presentan amenaza de aborto o aborto espontáneo durante el primer trimestre de embarazo.
2.1.2. POBLACION
La población estuvo conformada por mujeres gestantes que presentan amenaza de aborto o aborto espontáneo durante el primer trimestre de embarazo, en la Fundación Pablo Jaramillo y el Hospital Regional Vicente Corral Moscoso. Todas las pacientes conocieron previamente el estudio a realizarse, y firmaron un consentimiento informado, se les tomó los datos referentes a edad, semanas de embarazo, presencia o no de hemorragia vaginal, antecedentes de abortos.
2.1.3. SELECCIÓN DE PACIENTES
Para el estudio se tomó en cuenta los siguientes criterios de inclusión y exclusión para la selección de pacientes:
2.1.3.1. CRITERIOS DE INCLUSIÓN
- Pacientes gestantes entre 14 y 39 años de edad.
- Pacientes con embarazo entre 3 y 14 semanas de gestación. - Hemorragia vaginal acompañada o no de dolor.
- Pacientes con historia de abortos recurrentes o espontáneos.
2.1.3.2. CRITERIOS DE EXCLUSIÓN
- Pacientes con embarazo menor a 3 semanas de gestación. - Pacientes con embarazo mayor a 14 semanas de gestación.
- Pacientes con factores de riesgos como: diabetes, hipertiroidismo o hipotiroidismo.
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AUTORES: ERIKA TELLO SALAZAR MARICELA VÁSQUEZ ORTIZ2.1.4. TAMAÑO DE LA MUESTRA Y MUESTREO
Se trabajó con 51 pacientes de los cuales 11 pertenecieron a mujeres que cursaban un embarazo normal, 25 presentaron amenaza de aborto y 15 aborto espontáneo, durante el primer trimestre de embarazo.
Las muestras de sangre de las 51 pacientes, se recolectaron en cantidad suficiente para obtener 1ml de suero de cada muestra, según las indicaciones de la técnica.
2.1.5. TOMA DE MUESTRA
Para la toma de la muestra existen distintos aspectos a considerar, como el lugar en donde se realizó la recolección y obtención de la muestra; que detallaremos a continuación:
2.1.5.1. Lugar de la toma de muestra
Las muestras de suero sanguíneo de las pacientes a participar en el estudio fueron tomadas en la Fundación Pablo Jaramillo y en el Hospital Vicente Corral Moscoso, según el cuadro que presentaban las pacientes se recolectaba en el laboratorio, en emergencia o en hospitalización.
2.1.5.2. Obtención de la muestra
Para la obtención de la muestra de las pacientes se procedió de la siguiente manera:
- Toma de datos de la paciente (Anexo 1) - Firma del consentimiento informado (Anexo 2) - Etiquetado del tubo empleado
- Toma de la muestra de sangre por punción venosa.
2.1.6. TRANSPORTE Y MANEJO DE LAS MUESTRAS
Las muestras fueron transportadas en tubos de vidrio a temperatura ambiente dentro de cajas (Anexo 3) de manera inmediata al Laboratorio de Atención al
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AUTORES: ERIKA TELLO SALAZAR MARICELA VÁSQUEZ ORTIZPúblico de la Universidad de Cuenca, para ser procesadas y analizadas por la técnica de quimioluminiscencia.
En los laboratorios donde se recolectaron las muestras se procedió de la siguiente manera:
- Se realizó la extracción de la muestra por punción venosa, para obtener el suero sanguíneo.
- Una vez formado el coagulo se debe centrifugar las muestras a 2500 rpm durante 5 minutos.
- Luego separamos el suero con una pipeta automática (Anexo 3).
El suero obtenido de cada paciente se colocó en dos tubos eppendorf, de 1000µl de capacidad, con un volumen de 500µl aproximadamente en cada uno; el primer tubo fue utilizado para el análisis correspondiente, mientras que el segundo tubo se conservó como respaldo.
2.1.7. CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO DE LAS MUESTRAS
Las muestras se conservaron a -20ºC hasta su procesamiento, durante el tiempo necesario para la realización del análisis; debido a que según la técnica empleada se sugiere que el suero sanguíneo se puede conservar por un período de 5 días a una temperatura de 2 a 8ªC o 3 meses a -20ºC; siendo el tiempo máximo de conservación a dicha temperatura.
2.2. TÉCNICA
La técnica empleada para el análisis de las muestras fue un inmunoensayo quimioluminiscente, en el equipo INMULITE.
El equipo INMULITE empleado en este estudio fue un modelo EC REP DPC certifícate NO UGA 0113403 (Anexo 4. Fig. 14), de procedencia Alemana, el cual es un analizador automatizado destinado a la ejecución de inmunoensayos quimioluminiscentes.
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AUTORES: ERIKA TELLO SALAZAR MARICELA VÁSQUEZ ORTIZEl sistema INMULITE utiliza ensayos específicos por medio de una parte de poliestireno recubierta de anticuerpo o ligando como fase sólida, que se encuentra dentro de la unidad de reacción diseñada para el analizador.
El sistema se fundamenta en las características de la unidad de reacción, que se sirve como recipiente para la reacción, la incubación, el lavado por centrifugación vertical, logrando una eficiente separación entre la fracción libre, la fracción unida y el desarrollo de la reacción quimioluminiscente.
La emisión de luz del substrato quimioluminiscente es directamente proporcional a la cantidad de analito en la muestra del paciente al ser el ensayo (medición de PRG) inmunométrico. La emisión de luz es detectada por un tubo fotomultiplicador y el reporte es impreso y generado en el computador externo para cada muestra. El sustrato luminógeno, es adicionado a la unidad de prueba, la cual se incuba por 10 minutos y luego pasa por el tubo fotomultiplicador donde se detecta la señal quimioluminiscente, que en presencia de la fosfatasa alcalina conjugada, produce un compuesto intermedio de descomposición dando como resultado una emisión de luz directamente proporcional a la cantidad de enzima.(32)