Juniperus ashei
Se realizó una prueba de provocación nasal con extracto comercial de Juniperus ashei (Stallergenes, SA, París, Francia) a un subgrupo de pacientes alérgicos a polen de Cupressaceae y a un subgrupo de pacientes con sensibilización silente que aceptaron y firmaron la hoja de consentimiento informado (Anexo 3).
Se utilizó como pacientes controles a pacientes alérgicos a los ácaros del polvo, monosensibilizados, que aceptaron y firmaron la hoja de consentimiento informado (Anexo 3).
Las pruebas de provocación nasal específica con extracto de polen de Juniperus ashei se evaluaron mediante un rinómetro acústico (Rhinometrics SRE2000), siguiendo las recomendaciones del Comité de Rinoconjuntivitis de la Sociedad Española de Alergia e Inmunología Clínica79 (Figura 11).
Tras informar a los pacientes del estudio y explicarles la metodología de la prueba se les indicó evitar antihistamínicos desde los 4 días antes de la prueba, corticoides nasales 48- 72 h antes y fumar y beber alcohol las 24 h previas a la prueba.
En ningún caso los pacientes presentaban asma bronquial inestable, perforación septal, obstrucción nasal total o muy intensa que desaconsejaran la realización de la prueba. La habitación donde se realizaba la prueba se mantuvo a una temperatura media de 22ºC, una humedad relativa del 60% y un ruido exterior inferior a los 60 decibelios. El paciente se aclimataba a dicha habitación durante 20 minutos en reposo antes de la realización de la prueba.
El extracto utilizado para la provocación nasal fue suministrado en forma de extracto liofilizado de polen de Juniperus ashei por los laboratorios Stallergenes, SA. El extracto en frascos era reconstituido con 3 ml de diluyente fisiológico no fenolado (extracto madre) para obtener un producto de 100 IR/ml con una cuantificación de alérgeno Jun a 1 de 100 µgr/ml. Una vez reconstituido, la caducidad era de 6 meses, conservado en
86 nevera entre 2 y 8 ºC. Las diluciones se realizaban el mismo día de la prueba para asegurar la reproducibilidad y se desechaban cada semana. Todas las provocaciones nasales fueron realizadas con el mismo lote de frascos de liofilizado de polen de Juniperus ashei. Las pruebas de provocación nasal se realizaron seguidamente de la realización de las pruebas cutáneas y las pruebas in vitro por lo que se realizaron de forma consecutiva a medida que los pacientes aceptaban realizarla a lo largo de todo el año.
Las concentraciones utilizadas en la PNE fueron: 0.01 IR, 0.1 IR , 1 IR, 10 IR y 100 IR. De igual manera en los pacientes controles.
En cada paciente se realizó un primera valoración clínica, una rinoscopia anterior de las fosas nasales, una espirometría forzada y una rinometria basal con diluyente (suero fisiológico con fenol al 0.4%). Si existía una reducción del volumen nasal mayor o igual al 10% después de la administración del diluyente se suspendía la prueba por hiperreactividad nasal inespecífica (pacientes con prueba de provocación nasal positiva a suero fisiológico). Partiendo de la provocación con diluyente como el estado basal, se procedía a la repetición de la prueba tras la aplicación del extracto alergénico a concentraciones crecientes a intervalos de 15 minutos.
El extracto de Juniperus ashei se administraba mediante una nebulización con spray nasal de 80 microlitros por nebulización en cada una de las narinas.
La respuesta nasal fue monitorizada mediante: (1) puntuación clínica con una escala visual analógica (EVA) y (2) mediante rinometría acústica (Figura 11). La EVA mide de forma subjetiva características que no pueden ser medidas directamente o de forma objetiva como la intensidad de la rinorrea, los estornudos, la obstrucción nasal o el prurito nasal. Es útil en estudios que miden síntomas de baja intensidad (floor effect) o alta intensidad (ceiling effect)268. La escala utilizada en este estudio consiste en una línea por síntoma a evaluar numerado de 0 a 10 cm (intensidad leve de 1 a 3 cm, moderada de 4 a 7 cm y grave de 8 a 10 cm)269 .
La rinometría acústica se realizó con un rinómetro acústico (Rhinometrics SRE2000). Durante la realización del registro, el paciente debía estar tranquilo, con la boca
87 entreabierta y en apnea respiratoria en el momento de la medición. El examinador se colocaba delante del paciente aplicando el adaptador nasal a la narina. El ángulo entre adaptador y narina debía ser constante alrededor de 45º. Se realizaban varios registros (curvas) primero en la narina derecha y luego en la narina izquierda. Los valores que se obtienen son el resultado del promedio de las curvas de cada lado.
La prueba se daba por finalizada cuando se alcanzaba la dosis máxima o cuando se producía una respuesta positiva: reducción del volumen nasal entre 2 y 6 cm desde el orificio nasal igual o superior al 25% (AT2 + AT3 =/> - 25%)79 y/o si la puntuación de la EVA aumentaba igual o más de 5 puntos (cm), comparada con la basal.
Al finalizar la prueba se realizaba de nuevo una rinoscopia anterior de las fosas nasales y una espirometría forzada final.
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Figura 11. Prueba de Provocación Nasal Específica con la Escala Visual Analógica y la Espirometría.
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14. CALENDARIO DE SÍNTOMAS
A todos los pacientes con sintomatología de alergia respiratoria y prueba cutánea positiva a polen de Cupressaceae (122 pacientes), se les entregó y entrenó para la cumplimentación de un calendario de sintomatología durante la época de polinización del polen de Cupresáceas, los meses de enero-febrero-marzo de 2011 (Figura 12).
El calendario (Figura 12) permitia seguir la evolución diaria de los síntomas (estornudos, picor de nariz, mucosidad, nariz tapada, picor de ojos, ojos rojos, tos, ahogo, asma) presentados por los pacientes durante un período determinado. Lo cumplimentaban por la noche y valoraban la intensidad de 0 a 3270:
0=sin síntomas 1=pocos síntomas 2=bastantes síntomas 3=muchos síntomas
Año___________ Mes___________Nombre_____________Historia Clínica________
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 31 31 ESTORNUDOS PICOR DE NARIZ MUCOSIDAD NARIZ TAPADA PICOR DE OJOS OJOS ROJOS TOS AHOGO ASMA
Figura 12: Calendario de síntomas.
Se consideró clínica alérgica como la presencia de síntomas 10 días o más, cada mes de polinización de Cupressaceae.
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15. RECUENTOS POLÍNICOS DE CUPRESSACEAE
La Red Aerobiológica de Catalunya (Xarxa Aerobiològica de Catalunya, XAC) http://lap.uab.cat/aerogiologia/es suministra recuentos polínicos desde 1983. En dichos recuentos, el polen de Cupressaceae-Taxodiaceae, por ser indistinguibles morfológicamente, se expresan como Cipreses (Xiprers). El período analizado en este estudio comprende los meses de enero a mayo, ambos incluidos, de 2011.
Según la Red Española de Aerobiología (REA), el polen de Cupressaceae pertenece a la categoría polínica Grupo 4. En esta categoría polínica se consideran recuentos de polen bajos entre 1 y 50 granos/m³; moderados entre 51 y 200 granos/m³ y altos los recuentos superiores a 200 granos/m³107.
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