Relaciones de (in)compatibilidad entre cultivares

hasta ahora.

8.2.2 Relaciones de (in)compatibilidad entre cultivares   

El  uso  de  marcadores  moleculares  ha  permitido  analizar  y  determinar  el  genotipo S de 115 cultivares, 97 de ellos identificados por primera vez en este trabajo  (Capítulos 3, 4, 5, 6 y 7; Anexos 4 y 5), que incluyen la mayoría de los cultivados en la  actualidad,  algunos  cultivares  de  reciente  introducción  y  otros  antiguos  muy  utilizados  como  parentales  en  programas  de  mejora,  como  genotipos  de  P.  salicina  (‘Abundance’,  ‘Kelsey’)  y  de  P.  simonii  (‘Simon’).  Para  la  correcta  identificación  del  genotipo  S  de  los  cultivares,  se  han  establecido  los  tamaños  de  amplificación  de  14  alelos  de  incompatibilidad  distintos  (Sa­Sh,  Sk,  So­Ss),  cinco  de  los  cuales  han  sido  descritos  por  primera  vez  en  esta  tesis  (So‐Ss)  (Capítulos  3,  4,  5,  6  y  7).  Esto  se  ha  llevado  a  cabo  mediante  PCR  y  dos  metodologías  de  detección  diferentes:  electroforesis en geles de agarosa y electroforesis capilar. El desarrollo de un método  de  detección  mediante  electroforesis  capilar  ha  permitido  una  identificación  más  sensible  y  por  tanto  más  eficaz  del  genotipo  S.  Esta  metodología  ha  sido  además  ensayada con dos analizadores genéticos diferentes (Capítulo 5), lo que proporciona  información  de  gran  utilidad  para  estudios  de  identificación  del  genotipo  S  en  este  cultivo. La identificación del genotipo S de los cultivares ha permitido incluirlos en los  grupos  de  incompatibilidad  correspondientes  y  conocer  las  relaciones  de  incompatibilidad entre ellos (Anexos 4 y 5). En esta tesis se han descrito 14 nuevos  grupos  de  incompatibilidad  (VIII‐XXI)  (Capítulos  4  y  5),  que  unidos  a  los  siete  descritos  anteriormente  (I‐VII)  (Halász  et  al.,  2007)  hacen  un  total  de  21  grupos  de  incompatibilidad (Anexos 4 y 5). Esta información conforma una herramienta muy útil  en  el  cultivo  del  ciruelo  japonés,  ya  que  permite  descartar  cultivares  polinizadores  incompatibles en el diseño de plantaciones y la identificación de posibles problemas  de incompatibilidad entre cultivares en plantaciones ya establecidas.  

con los dos alelos S diferentes (Sapir et al., 2008a). En este trabajo, en algunos cruces  semicompatibles como ‘Black Star’ (SeSf) x ‘Black Diamond’ (SeSh) y ‘Fortune’ (SbSc) x  ‘Ambra’ (SbSo) se obtuvo aproximadamente la mitad de cuajado que en otros cruces  compatibles  realizados  con  los  mismos  parentales  femeninos,  ‘Black  Star’  (SeSf)  x  ‘Larry  Ann’  (SbSh)  y  ‘Fortune’  (SbSc)  x  ‘Black  Diamond’  (SeSh).  Sin  embargo,  en  el  cruce  ‘Earliqueen’  (SeSh)  x  ‘Angeleno’  (ScSh)  se  obtuvo  un  cuajado  superior  al  de  ‘Earliqueen’  (SeSh)  x  ‘Ambra’  (SbSo),  por  lo  que  no  se  puede  confirmar  la  relación  entre  semicompatibilidad  y  reducción  de  cuajado  en  todos  los  cultivares  de  ciruelo  japonés.  

  El  análisis  molecular  del  genotipo  S  también  ha  permitido  comprobar  la  identidad de diferentes accesiones del mismo cultivar pero de distinta procedencia. En  24 cultivares se analizó el genotipo S de al menos dos accesiones diferentes. En 19 de  estos cultivares, las distintas accesiones presentaron el mismo genotipo S, pero en los  otros  cuatro  (‘Golden  Globe’,  ‘Golden  Plum’,  ‘Kelsey’  y  ‘Nubiana’)  se  detectaron  genotipos diferentes en las distintas accesiones de cada cultivar (Capítulos 3, 4 y 5).  También se identificaron discrepancias entre el genotipo S detectado en esta tesis y el  descrito en otros trabajos para los cultivares Abundance (SaSk), Friar (SbSh) y Green  Sun  (SbSc)  (Capítulos  3,  4  y  5),  que  no  coincide  con  lo  descrito  por  otros  autores  Abundance  (SfSh;  Beppu  et  al.,  2003),  Friar  (ShSk;  Halász  et  al.,  2007)  y  Green  Sun  (ScSh; Halász et al., 2007)]. El hecho de que genotipos diferentes presenten la misma  denominación puede deberse a errores en la denominación del material vegetal en las  distintas  plantaciones  y  colecciones  analizadas  o  a  la  existencia  de  homonimias,  genotipos diferentes con la misma denominación. Para esclarecer esta situación, sería  necesario  caracterizar  el  genotipo  de  estos  cultivares  en  material  vegetal  de  referencia. Sin embargo, el hecho de que más del 20 % de los cultivares analizados en  condiciones  reales  de  cultivo  en  esta  tesis  no  estén  bien  identificados  o  presenten  problemas de denominación indica que puede tratarse de una situación generalizada  en el cultivo de ciruelo japonés, lo que tendría gran incidencia en la posible elección  errónea de cultivares polinizadores. 

8.3. OTROS FACTORES IMPLICADOS EN LA FALTA DE CUAJADO   

8.3.1 Esterilidad femenina    

Una  vez  identificada  la  polinización  como  factor  determinante  del  cuajado  (Capítulos  2,  3  y  4)  y  la  incompatibilidad  polen‐pistilo  como  la  causa  de  la  falta  de  cuajado  en  la  mayoría  de  cultivares  y  situaciones  analizados  (Capítulos  4,  5  y  6),  también se detectaron otras situaciones en las que se producían bajos o incluso nulos  porcentajes  de  cuajado  no  asociados  a  problemas  de  polinización.  El  análisis  al  microscopio de flores de los cultivares afectados permitió descartar la viabilidad del  polen  y  su  transferencia  como  causas  de  la  falta  de  cuajado.  Igualmente,  la  observación  del  crecimiento  de  los  tubos  polínicos,  junto  con  el  análisis  de  PCR  del  genotipo  S  de  estos  cultivares  y  sus  polinizadores,  también  permitió  descartar  la  incompatibilidad polen‐pistilo como responsable de la falta de cuajado. Sin embargo,  la observación del desarrollo de los óvulos al microscopio reveló una alta incidencia  de la degeneración prematura de los dos óvulos presentes en cada flor como la causa  de la falta de cuajado (Capítulos 6 y 7).  

Esta  circunstancia  se  observó  en  dos  situaciones  de  falta  de  cuajado  diferentes. Por un lado, en un grupo de cultivares en los que la degeneración de los  óvulos  fue  causada  por  la  emasculación  de  las  flores  llevada  a  cabo  para  realizar  cruces, ya que en los mismos cruces realizados sobre flores sin emascular el cuajado  alcanzó  porcentajes  normales,  y  mientras  que  la  mayoría  de  flores  emasculadas  presentaron  los  dos  óvulos  degenerados,  todas  las  flores  no  emasculadas  tenían  al  menos un óvulo bien desarrollado (Capítulo 7).  

Por  otro  lado,  la  degeneración  prematura  de  óvulos  también  se  observó  en  flores  sin  emascular  de  dos  nuevos  cultivares  en  una  plantación  comercial  con  un  historial  de  bajos  cuajados.  La  mayoría  de  flores  de  estos  cultivares  también  presentaron  los  dos  óvulos  degenerados  (Capítulo  6).  Aunque  no  se  pudieron