Figura 2. Promedio de longitud de plántula en los nueve tratamientos a los 45 días del establecimiento in vitro de P. americana Var. zutano.
Figura 3. P. americana Var. zutano a los 45 días, expuestas al T3, la longitud de plántula promedio
fue 2.2cm LEYENDA (ppm) T1 = 0.0 IBA; 0.0 BAP T2 = 0.0 IBA; 1.0 BAP T3 = 0.0 IBA; 0.5 BAP T4 = 0.5 IBA; 0.0 BAP T5 = 0.5 IBA; 0.5 BAP T6 = 0.5 IBA; 1.0 BAP T7 = 1.0 IBA; 0.0 BAP T8 = 1.0 IBA; 0.5 BAP T9 = 1.0 IBA; 1.0 BAP 0.7 1.1 2.2 0.8 0.4 0.7 0.8 0.9 0.9 0 0.5 1 1.5 2 2.5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 Lo nji tud de pl an tul a (c m ) Tratamientos
BIBLIOTECA
DE CIENCIAS
BIOLOGICAS
16
Tabla 3 Análisis de Varianza longitud de plántula en el establecimiento in vitro de P. americana
Var. zutano entre tratamientosa los 45 días. Programa HSD.
En el parámetro longitud de plantula evaluado a los 45 días a partir del establecimiento, el Análisis de la Varianza detecta diferencias altamente significativas entre tratamientos, con una significancia de 0.000 para un α igual a 0.05 (Tabla 3), esto indica que dentro del trabajo experimental existen tratamientos con diferentes respuestas y una de ellas es la más indicada, en este caso la mejor respuesta lo obtuvo el T3.
Pruebas de efectos inter-sujetos
Variable dependiente: Datos Origen
Tipo III de suma
de cuadrados gl Cuadrático promedio F Sig. Entre tratamientos 6.356a 8 0.795 8.126 0.000 IBA 2.467 2 1.234 12.617 0.000 BAP 0.712 2 0.356 3.640 0.047 IBA * BAP 3.177 4 0.794 8.123 0.001 Error 1.760 18 0.098 Total corregido 8.116 26
a. R al cuadrado = .783 (R al cuadrado ajustada = .687)
α = 0.05
BIBLIOTECA
DE CIENCIAS
Tabla 4. Prueba Tukey longitud de plántula en el establecimiento in vitro de P. americana Var. zutano entre tratamientosa los 45 días.
La prueba TUKEY (Tabla 4) arroja como mejor tratamiento el T3, se produce una diferencia significativa al resto de tratamientos porque el promedio de longitud de plantula para el T3 (Fig. 2) fue de 2.2 cm, frente al resto de tratamientos que fue
considerablemente menor, con valores menores a 1 cm, por lo cual este resultado se considera excelente para este tipo de investigación.
Con respecto a los demás tratamientos, la prueba Tukey evalúa todos los tratamientos en conjuntos, en este caso detecto dos subconjuntos porque las medidas de los subconjuntos 1 y 2 no se asemejan (Tabla 4). El subconjunto 1 que incluye los tratamiento T5 a T2 en
orden creciente de sus resultados, son estadísticamente iguales, en el subconjunto 2 que lo conforma el T3 se produce una diferencia al resto de tratamientos porque en este
tratamiento se genera un plántula de 2.2cm significativamente diferente a las plántulas obtenidas en los demás tratamientos, a los 45 días del establecimiento.
Datos
HSD Tukeya
Tratamientos N
Subconjunto para alfa = 0.05
1 2 T5 3 0.4000 T6 3 0.7000 T1 3 0.7333 T4 3 0.8000 T7 3 0.8667 T9 3 0.9333 T8 3 0.9333 T2 3 1.1333 T3 3 2.2333 Sig. 0.161 1.000
Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.
BIBLIOTECA
DE CIENCIAS
18
El T3 (Fig. 3) solo contuvo el regulador de crecimiento BAP a una concentración de
0.5ppm, esto nos lleva a afirmar que el BAP produce el mayor crecimiento en longitud del explanto, esto atribuible a una alta división celular de novo (Serrano y Piñol, 2000). Al respecto, (Jordan, M. y Casaretto, J. (2006), manifiestan que el BAP provoca la iniciación de brotes puesto que estimula la división celular, activa la brotacion de yemas laterales en dormancia, es una hormona clave para inducir la formación de novo de brotes en diversos explantes in vitro. Por su parte Pliego et al., (1999) utilizaron BA (Benciladenina), otra citoquinina para inducir proliferación de material juvenil de aguacate; así, descubrieron que explantos juveniles de aguacate proliferan adecuadamente in vitro en presencia de 4.4 ppm de BA. Resultados similares fueron informados por Dolsaso y Guevara (1988), quienes lograron una bena regeneración de brotes cuando emplearon 2ppm de BAP y 0.5 ppm de IBA en un medio N45K, aunque ellos al usar 0.5 ppm de IBA lograron buenos resultados, las diferencias detectadas pueden deberse a que sus explantes fueron establecidos en un medio diferente al MS, sin embargo los resultados favorables que se obtienen siempre con la presencia de BAP sugieren que esta citoquinina cumple un rol importante en el establecimiento in vitro de P. americana porque logra romper el reposo de las yemas de este frutal.
El T2 ocupa el segundo lugar en cuanto a los resultados obtenidos, con un promedio de
1.1cm (Fig. 2, Tabla 4); teniendo en cuenta que este tratamiento al igual que el T3 contuvo
unicamente el regulador de crecimiento BAP, pero a diferencia del anterior su concentración fue el doble, fue de 1.0ppm, entonces asumimos que el motivo por lo que no obtuvieron el mismo crecimiento fue por las diferentes concentraciones de BAP a los que fueron expuestos, las hormonas en concentraciones mayores que las necesarias, ocasionan inhibición de los procesos fisiológicos (Melgarejo, 2010).
BIBLIOTECA
DE CIENCIAS
En el T6, el cual fue expuesto a 0.5 ppm IBA y 1.0 ppm BAP se obtuvo los mismo
resultados que en el T1 (Tratamiento blanco), posiblemente el antagonismo de la auxina
IBA unida a la citoquinina BAP produjo una respuesta diferente en el crecimiento de los explantos, lo mismo habría ocurrido en los Tratamientos T8 y T9, nos ayuda a entender
esto el hecho de que las fitohormonas se caracterizan por participar en variadas respuestas morfogenéticas y de crecimiento de manera pleotrópica, esto quiere decir, que una misma hormona participa en diferentes procesos y además, que dependiendo de su concentración, la misma hormona puede ser estimulatoria o inhibitoria de una misma respuesta. Por otra parte, varias hormonas pueden afectar una misma respuesta, lo cual indica que hay una aparente redundancia en el control de un mismo efecto, (Srivastava en Melgarejo, 2010)
Los tratamientos que contienen únicamente IBA (T4 y T7) no fueron concluyente en
cuanto a la respuesta obtenida; estos tratamientos presentan un promedio de longitud de plantula de 0.8cm, el regulador IBA causo un minimo efecto en el crecimiento de los explantos. El comportamiento de esta hormona resultó un tanto extraña puesto que la mayoría de los estudios in vitro indican que un mayor crecimiento como efecto de la dominancia apical que presenta, la razón que sustenta este punto de vista es que todo los tratamientos que contienen IBA presentan valores bajos en comparación a los tratamientos que presentan únicamente BAP, fundamenta esto resultados el hecho de vque las citoquininas son hormonas que estimulan la división celular y activan el crecimiento de yemas laterales (Azcon y Talon, 2001), un comportamiento inesperado ocurrió cuando la relación auxina/citoquinina fue de 0.5 (T5) , un posible antagonismo
mutuo ocasiono tamaños de plántula incluso menores al tratamiento que no contuvo hormonas (T1)
BIBLIOTECA
DE CIENCIAS
20
CONCLUSIONES
De los resultados obtenidos se concluye:
Las combinaciones de los reguladores de crecimiento Acido indol 3- butírico (IBA) y del 6 – bencilaminopurina (BAP) no favorecen el establecimiento in vitro de Persea americana Var zutano.
El regulador de crecimiento BAP a 0.5ppm (T3) tuvo el mejor resultado en
el parámetro longitud de plántula de Persea americana Var. zutano establecida in vitro
BIBLIOTECA
DE CIENCIAS
RECOMENDACIONES
Seguir con la investigación ya que el proceso aún es lento y laborioso, motivo por el cual resulta interesante buscar opciones para acelerar la obtención de patrones de palto.
Utilizar más tratamientos probando diferentes concentraciones de hormonas y así lograr identificar cual es la concentración adecuada para la rápida proliferación de la planta..
BIBLIOTECA
DE CIENCIAS
22