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4.1 RESULTADOS
TABLA 2.
EVALUACIÓN DE LA GLUCEMIA DESPUÉS DE 7 DÍAS DE LA INDUCCIÓN
Fuente: Base de datos SPSS versión 20
En la TABLA 2 se observa que los niveles de glucemia después de 7 días de haber administrado en una sola dosis vía intraperitoneal con estreptozotocina más nicotinamida (60mg y 230mg por Kg de tejido respectivamente) para inducir Diabetes Mellitus tipo 2 a los Grupos C (control + y -) y Experimental (EA y EB) en Rattus norvegicus. Los resultados de glucemia se expresan en mg/dl (Media Desviación estándar, DE), el grupo Control (+) obtuvo una glucemia de 321.8, el grupo Control (-) presento 317.6 de glucemia, el grupo EA obtuvo 296.9 y el grupo EB 328.5.
A los valores de glucemia obtenidos antes y después se les aplicó la prueba “t” de Student para datos pareados con una exigencia del 99%, P<0,01 es decir que hay diferencia altamente significativa.
GRUPOS DE ESTUDIO
C Experimental B
Control (+) Control (-) EA EB Blanco
Inicial 71 3,1 72,2 3,4 70,3 4,01 69,2 3,5 78,3 4,0 Basal 321,8 12,8 317,6 13,1 296,9 14,6 328,5 15,1 72,5 5,1 Prueba “t” P<0,01 P<0,01 P<0,01 P<0,01 ns n 5 5 5 5 4
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TABLA 3.
EFECTO DE LA PRIMERA SEMANA DE TRATAMIENTO
GRUPOS DE ESTUDIO
C Experimental B
Control (+) Control (-) EA EB Blanco
Basal 321,8 ± 12,8 317,6 ± 13,1 296,9 ± 14,6 328,5 ± 15,1 72,5 ± 5,1 1ra semana 277,2 ± 11,7 312,3 ± 14,5 213,8 ± 11,9 241,5 ± 14,6 74,8 ± 6,1 Prueba “t” P<0,01 ns P<0,01 P<0,01 ns n 5 5 5 5 4
Fuente: Base de datos SPSS versión 20
En la TABLA 3 se presenta los niveles séricos de glucosa encontrados luego de 7 días de iniciado el tratamiento vía orogástrica o intragástrica al Grupo Control (+) y a los grupos experimentales A y B con un promedio de glucosa en mg/dl de 277.2, 213.8 y 241.5 respectivamente.
A los valores de glucemia obtenidos después del tratamiento se les aplicó la prueba “t” de Student para datos pareados con una exigencia del 99%, para el grupo control (+) y los grupos experimentales A y B, es decir que hay diferencia altamente significativa (P<0,01), en contraste con el grupo Control (-) y grupo blanco cuya diferencia es no significativa (ns).
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TABLA 4.
EFECTO DE LA SEGUNDA SEMANA DE TRATAMIENTO
GRUPOS DE ESTUDIO
C Experimental B
Control (+) Control (-) EA EB Blanco
1ra semana 277,2 ± 11,7 312,3 ± 14,5 213,8 ± 11,9 241,5 ± 14,6 74,8 ± 6,1 2da semana 221,4 ± 11,6 299,8 ± 15,5 246,7 ± 15,1 219,6 ± 17,5 77,4 ± 5,6 Prueba “t” P<0,05 ns ns ns ns n 5 5 5 5 4
Fuente: Base de datos SPSS versión 20
En la TABLA 4 se presenta los niveles séricos de glucosa encontrados luego de 14 días de iniciado el tratamiento vía orogástrica al Grupo Control (+) y a los grupos experimentales A y B con un promedio de glucosa en mg/dl de 221.4, 246.7 y 219.6 respectivamente.
A los valores de glucemia obtenidos después del tratamiento se les aplicó la prueba “t” de Student para datos pareados con una exigencia del 95%, para el grupo control (+) es decir que hay diferencia significativa (P<0,05), en contraste con el grupo Control (-), los grupos experimentales A y B; y grupo blanco cuya diferencia es no significativa (ns).
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TABLA 5.
EFECTO DE LA TERCERA SEMANA DE TRATAMIENTO
GRUPOS DE ESTUDIO
C Experimental B
Control (+) Control (-) EA EB Blanco
2da semana 221,4 ± 11,6 299,8 ± 15,5 246,7 ± 15,1 219,6 ± 17,5 77,4 ± 5,6 3ra semana 187,4 ± 10,2 311,3 ± 17,2 174,5 ± 9,7 186,6 ± 11,8 79,6± 4,6 Prueba “t” P<0,05 ns P<0,01 P<0,05 ns n 5 5 5 5 4
Fuente: Base de datos SPSS versión 20
En la TABLA 5 se presenta los niveles séricos de glucosa encontrados luego de 21 días de iniciado el tratamiento vía orogástrica al Grupo Control (+) y a los grupos experimentales A y B con un promedio de glucosa en mg/dl de 187.4, 174.5 y 186.6 respectivamente.
A los valores de glucemia obtenidos después del tratamiento se les aplicó la prueba “t” de Student para datos pareados con una exigencia del 95%, para el grupo control (+) y experimental B; es decir que hay diferencia significativa (P<0,05), en contraste el grupo experimental A que presenta una diferencia altamente significativa de P<0,01 y el grupo Control (-) y blanco no presenta diferencia significativa (ns).
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TABLA 6.
EFECTO DE LA CUARTA SEMANA DE TRATAMIENTO
GRUPOS DE ESTUDIO
C Experimental B
Control (+) Control (-) EA EB Blanco 3ra semana 187,4 ± 10,2 311,3 ± 17,2 174,5 ± 9,7 186,6 ± 11,8 79,6± 4,6 4ta semana 98,4 ± 12,8 291,3± 19,8 158,6 ± 9,5 115,4 ± 8,7 65,7 ± 7,3 Prueba “t” P<0,01 ns P<0,05 P<0,01 ns n 5 5 5 5 4
Fuente: Base de datos SPSS versión 20
En la TABLA 6 se presenta los niveles séricos de glucosa encontrados luego de 28 días de iniciado el tratamiento vía orogástrica al Grupo Control (+) y a los grupos experimentales A y B con un promedio de glucosa en mg/dl de 98.4, 158.6 y 115.4 respectivamente.
A los valores de glucemia obtenidos después del tratamiento se les aplicó la prueba “t” de Student para datos pareados con una exigencia del 99%, para el grupo control (+) y experimental B; es decir que hay diferencia altamente significativa (P<0,01), en contraste al grupo experimental A que presenta una diferencia significativa de P<0,05; el Grupo Control (-) y Blanco no presenta diferencia significativa (ns).
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GRÁFICO 2
RESUMEN DEL EFECTO DE LAS CUATRO SEMANAS DE TRATAMIENTO
Fuente: Matriz de datos.
En el GRÁFICO N° 2 se muestra el resumen de las cuatro semanas de tratamiento para cada grupo de estudio, el Grupo Blanco mantuvo los niveles de glucosa dentro de los valores normales, el Grupo Control (+) disminuyó sus niveles de glucosa debido a que este recibió tratamiento con metformina, el Grupo Control (-) se mantuvo en hiperglucemia ya que no recibió tratamiento alguno, el grupo experimental A fue disminuyendo gradualmente los niveles de glucosa pero sin llegar a valores normales, finalmente el grupo experimental B disminuyó gradualmente sus niveles de glucosa llegando a valores normales.
0 50 100 150 200 250 300 350
Blanco Control + Control - EA EB
Gl u cem ia m g/ d l Basal Semana 1 Semana 2 Semana 3 Semana 4
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TABLA 7.
COMPARACIÓN DE LA DOSIS A DIFERENTES CONCENTRACIONES Determinación de la mejor concentración de la dosis (0.21g versus 0.35g) de extracto seco de pericardio de naranja (Citrus sinensis), una vez finalizado el tratamiento (cuatro semanas) frente al grupo blanco empleado como patrón sobre la glucemia en Rattus norvegicus. Con Diabetes Mellitus tipo 2.
GRUPOS DE ESTUDIO
Metformina EA (0.21g) EB (0.35g) Blanco
4ta semana 85.50% 58.80% 78.00% 100%
Fuente: Elaboración propia – Matriz de datos
La comparación se realizó mediante la determinación del porcentaje de efectividad en base al grupo blanco, dado que este grupo no fue inducido por lo tanto su glucemia no varía. Se determinó que el grupo experimental B tiene un porcentaje de efectividad de 78%, siendo ésta la mejor concentración de la dosis para disminuir los niveles de glucemia, a diferencia del grupo experimental A que tuvo una menor efectividad de 58.8%, sin superar el porcentaje de efectividad de la Metformina que fue 85.5%.
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4.2 DISCUSIÓN
En el presente estudio se evaluó el efecto del extracto seco del pericarpio de la naranja (Citrus sinensis) sobre la hiperglucemia en Rattus norvegicus con Diabetes Mellitus tipo 2 inducida experimentalmente.
Primero se indujo a Diabetes Mellitus tipo 2 a los siguientes grupos: Grupo Control (+) y (-), Grupos Experimentales A y B , a excepción del Grupo Blanco, por medio de Streptozotocina y Nicotinamida; 7 días después de la inducción y con la finalidad de detectar la presencia de Diabetes Mellitus tipo 2, se midieron los niveles de glucosa en sangre y se tomaron en cuenta para el estudio a los que presentaron los síntomas típicos de la diabetes, tales como, la polifagia, polidipsia, poliuria y pérdida de peso; lo anterior se confirmó mediante el aumento de la cantidad en el consumo de alimento, agua y aumento de la frecuencia de la orina. El Grupo Control (+) y (-), Grupos Experimentales A y B presentaron glucemias entre 296.9 y 328.5; considerándolos hiperglucémicos, ya que sus valores de glucemia fueron ≥ 200mg/dl, valor considerado como criterio de diagnóstico para Diabetes Mellitus tipo 2, según la Asociación Americana de Diabetes 2016. Nuestros resultados de la inducción son parecidos al estudio del efecto del EPA y DHA sobre la recuperación de la relajación vascular observada en aortas de ratas con Diabetes Mellitus experimental tipo 2 en Arequipa 2013.
Con respecto a la disminución de la glucosa postprandial mostramos el efecto del extracto seco obtenido del pericarpio de la naranja variedad huando, con una dosis en diferentes concentraciones 0.21 y 0.35 g/ml/kg/día; dichas concentraciones han ido disminuyendo la glucemia desde la primera semana hasta la cuarta semana de tratamiento, en la cual el efecto en la primera semana según la prueba “t” de Student para datos pareados hay diferencia altamente significativa (P<0,01), es decir que ha disminuido considerablemente los valores basales de glucemia.
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Desde la segunda hasta la cuarta semana los valores de glucemia fueron disminuyendo gradualmente con diferencias significativas y altamente significativas (P<0,05 y P<0,01); al finalizar el tratamiento la concentración de la dosis de 0.35 g/ml/kg/día fue la que disminuyó la glucemia a 115.4 8.7, cuyo valor se encuentra dentro de los parámetros normales (70-115 mg/dl). Hernadez y Huete 2008 investigaron la actividad inhibitoria de Morinda citrifolia, Passiflora edulis y extracto seco del pericarpio de Citrus sinensis sobre la enzima α-glucosidasa, siendo el pericarpio de la naranja la que tuvo mejor efecto con un porcentaje 28.68 % de inhibición de dicha enzima. Estas enzimas tienen por función hidrolizar disacáridos y polisacáridos, para facilitar la absorción de los monosacáridos resultantes. Al inhibir la acción de dicha enzima, disminuye la absorción de glucosa, por lo tanto, evita la hiperglucemia postprandial. Los resultados obtenidos en nuestra investigación confirmarían la actividad inhibitoria del extracto seco del pericarpio de naranja sobre la enzima α-glucosidasa.
Así también Jung, Lee y col. investigaron el efecto de los flavonoides (hesperidina y naringina) de los cítricos sobre el metabolismo de los lípidos y glucosa, afectando la expresión genética de las enzimas reguladoras de la glucosa, tales como el fosfoenolpiruvato carboxianinasa, glucosa-6-fosfatasa; estas enzimas intervienen en la gluconeogénesis en consecuencia evita la síntesis de glucosa o de glucógeno a partir de los tejidos adiposo y muscular principalmente. La glucosa-6-fosfatasa interviene también en la glucogenólisis hepática impidiendo que la glucosa formada pueda salir de este tejido a la circulación sanguínea. Además, estos flavonoides reducen significativamente la expresión de la proteína transportadora 2 de la glucosa que se expresan en el hígado reduciendo así el almacenamiento de glucosa proveniente de los alimentos inmediatamente después de haberlos ingerido, a partir de los resultados alcanzados durante nuestra investigación, posiblemente también existen estos flavonoides que se encuentran presentes en el extracto seco del
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pericarpio de naranja, por lo tanto corroboramos el efecto de los flavonoides sobre el metabolismo hepático alterado de la glucosa. Estos mecanismos de acción se le atribuye también a la Metformina que fue administrada al grupo control (+).
En otro estudio realizado in vitro e in vivo, Hernadez G. evaluó el efecto antihiperglucémico del Bagazo de Naranja (Citrus sinensis var. Valencia), para tal estudio utilizó tres diferentes dosis de harina de bagazo de naranja (0.35, 0.21 y 0.07 g), la dosis con mayor efecto fue de 0.21 g/kg. En nuestra investigación se utilizó el pericarpio de naranja; además se tomó como referencia las dos dosis con mayor efecto (0.35g y 0.21g), siendo la concentración de 0.35g la que mejor efecto mostró, por lo tanto, nuestra investigación confirma el efecto antihiperglucémico pero con diferente concentración.
Es importante señalar, que la dosis a una concentración de 0.35 g/ml/kg/día mostró diferencias altamente significativas con un porcentaje de efectividad de 78% al final del tratamiento disminuyendo la glucemia hasta parámetros normales, por lo tanto es posible que este efecto se debe a la presencia de flavonoides ubicados en los pigmentos de la naranja que principalmente se concentran en el pericarpio, lo cual está comprobado en estudios anteriores realizados por Jung, Lee y col., que sugirieron la posibilidad de que estos compuestos son los responsables de disminuir la glucosa postprandial. A diferencia de la dosis a una concentración de 0.21 g/ml/kg/día que también disminuyó la glucemia postprandial solamente con significancia estadística y con un porcentaje de efectividad (58.8%) sin llegar a valores normales de glucemia.
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