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UTILIZACIÓN DE RESINA CHELEX ® 100 PARA LA EXTRACCIÓN DE ADN EN ESPECIES ZOOTÉCNICAS

Autores

Institución

Contacto

Lorena Núñez 1*, María Inés Rodríguez Acosta 2, Guillermo Giménez 1, Vincenzo Landi 3, Danilo Fernández 4, Roberto Martínez 5

1 Universidad Nacional de Asunción - Facultad de Ciencias Veterinarias - Laboratorio de diagnóstico de Enfermedades de los Animales Domésticos - San Lorenzo - Paraguay. 2 Universidad Nacional de Asunción - Facultad de Ciencias Veterinarias - Departamento de Ciencias Morfológicas - San Lorenzo - Paraguay. 3 University of Bari "Aldo Moro" - Department of Veterinary Medicine - Animal Breeding and Genetics - Valenzano - Italia. 4 Universidad Nacional de Asunción - Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - Departamento de Biotecnología Vegetal - San Lorenzo - Paraguay.

5 Universidad Nacional de Asunción - Dirección General de Investigación Científica y Tecnológica - San Lorenzo - Paraguay

* [email protected]

Resumen

Introducción: El ADN íntegro y puro es fundamental para el buen desempeño de las técnicas utilizadas en biología

molecular, de ahí la importancia de contar con muestras que permitan aislarlo en gran cantidad y calidad, siendo la sangre, el tejido por excelencia para esta labor. En este contexto, la resina Chelex ®100, además del bajo costo, tiene la ventaja de no generar residuos tóxicos ni efectos adversos para el operario. Objetivo: Evaluar la eficacia del método de extracción de ADN con Chelex® 100 en diferentes especies zootécnicas. Metodología: Fueron seleccio-nados cinco animales de las especies ovina, equina y aviar pertenecientes a una granja de cría para autoconsumo, localizada en Asunción, Dpto. Central. Se recolectaron muestras de sangre, extraídas mediante venopunción y depositadas en tubos con EDTA. El análisis laboratorial fue realizado mediante la técnica adaptada para muestras de sangre descrita por Cevallos (2010) colocando 50 µl de sangre junto a 1000 µl de agua bidestilada, en reposo durante 30 minutos a temperatura ambiente; posteriormente, fue centrifugado a 13.000 rpm durante 10 segundos, descartando el sobrenadante. Se agregó 200 µl de Chelex® 100 al 5%. Finalmente se incubó a 56°C durante 50 minu-tos y 95°C durante 10 minuminu-tos. Cada muestra fue cuantificada por triplicado y se determinó el valor promedio de la concentración y pureza de ADN por medio de espectrofotometría. La integridad del ADN fue verificada mediante amplificación por PCR, utilizando geles de geles de agarosa al 1,5%. Para la visualización de los datos se utilizó el software R (R Core Team 2018) y con el programa estadístico Infostat, versión 2018e (Di Rienzo et al., 2018) se obtuvieron las medidas de resumen y los resultados del análisis inferencial. Resultados: Los valores mínimos y máximos registrados fueron de 43,36 a 244,94 ng/µl, respectivamente. La especie equina obtuvo la media más baja de concentración (84,44 ng/µl); mientras que, el promedio más elevado correspondió a la especie aviar (157,43 µl/ng). En cuanto a la pureza, la especie aviar exhibió muestras aceptables y contaminadas, mientras que el resto, presentó muestras contaminadas en su totalidad, debido posiblemente a restos de esferas magnéticas en las mues-tras. La prueba de Kruskal Wallis para la concentración de ADN reveló diferencias significativas entre las muestras procedentes de caballos y aves; la pureza fue diferente en aves frente a las demás especies (p<0,05). En todos los casos, se obtuvieron bandas correspondientes al tamaño (pb) cuando se analizaron los productos amplificados por electroforesis horizontal. Conclusión: Si bien se obtuvieron muestras con exceso de concentraciones de ADN y la mayoría con pureza contaminada, se verificó que el método de extracción con Chelex® 100 resulta apto para la extracción de ADN en muestras de sangre entera en caballos, ovejas y aves.

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PÓSTER

CIENCIAS AGRARIAS Y AMBIENTALES VIVIENDA VERNACULA PARAGUAYA: CARACTERISTICAS SOSTENIBLES Y

BIOCLIMATICAS

Autor

Institución

Contacto

Francisca Mburucuyá Benítez Martínez 1, 2

1 Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologia (CONACYT). 2 Universidad Americana - Escuela de postgrado - Maestria en investigación del habitat y vivienda sustentable - Departamento Central - Asunción - Paraguay

[email protected]

Resumen

Introducción: El caso de estudio corresponde a una vivienda vernácula ubicada en Yataity del Guaira que

conserva gran parte de sus materiales constructivos y diseño originales que aplicados en su contexto his-tórico fueron en conjunto respuesta a necesidades y disponibilidad de recursos, podría afirmarse que los materiales y técnicas ancestrales o de escasa elaboración y locales podría ser una respuesta aceptable a la búsqueda de modos de construcción para viviendas de bajo impacto ambiental y con eficiencia energética al emplearse criterios bioclimáticos en su diseño. La misma se estima fue construida entre los años 1850 y 1860, siendo reconocida como una de las construcciones más antiguas de la localidad que aún mantiene gran parte de sus materiales originales en buen estado. Objetivo: Identificar los materiales y técnicas de construc-ción tradicionales, aplicables a la construcconstruc-ción actual para propiciar cualidades bioclimáticas o sostenibles que no necesariamente demanden alta tecnología ni complejas técnicas constructivas. Metodología: Cua-litativa descriptiva de estudio de caso, empleando como referencia las normas paraguayas de construcción sostenibles y software de diseño bioclimatico de edificios según clima local. Se visitó la vivienda y observó cuales características coinciden con las referencias, llegando a la identificación y descripción de los puntos que caracterizan al caso de estudio como vivienda sostenible y bioclimática. Para la descripción de partes de la vivienda que fueron alteradas con el paso del tiempo, se realizaron entrevistas a anteriores usuarios de la misma. Resultados: Se tomaron como referencia las normas paraguayas de construcción sostenible en sus títulos de “Sitio y arquitectura”, “Recursos materiales”, observando que la edificación cumple con varios de los criterios, sin definir una puntuación específica, se presentan a continuación algunos de los principales aspectos en los que la construcción objeto de estudio cumple con características que podrían denominarla como sostenible. (...). Estrategias bioclimaticas identificadas según Climate consultant: Forma y orientación, Distribución interior, Enfriamiento vegetativo, Ventilación cruzada, Aleros y voladizos Conclusión: El caso estudiado responde a múltiples criterios de sostenibilidad y bioclimatización, denotando que los sistemas constructivos en el contexto histórico del caso contaban con estos criterios de forma intrínseca al diseño ante las necesidades de confort y las restricciones en cuanto a materiales e incorporación de climatización forzada. Este trabajo contribuye a identificar materiales y técnicas constructivas tradicionales rescatables para su aplicación a la construcción actual destacando que las características bioclimáticas o sostenibles no necesariamente implican alta tecnología ni complejas técnicas constructivas.

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