Efecto comparativo de aceite esencial y extracto acuoso de hojas de Schinus molle L “molle” sobre el crecimiento de Botrytis cinerea

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(1)Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. BI O. LO G. IC. AS. ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Efecto comparativo de aceite esencial y extracto acuoso de hojas de. CI A. S. Schinus molle L. “molle” sobre el crecimiento de Botrytis cinerea.. EN. TESIS. CI. PARA OBTENER EL TÍTULO PROFESIONAL DE. IO TE. CA. DE. BIÓLOGO. :. Br. IVONNE KELLY ESPINOZA PANTIGOZO. ASESORA. :. Dr. MARLENE RENE RODRÍGUEZ ESPEJO. BI. BL. AUTORA. TRUJILLO – PERÚ 2016. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE. LO G. Dr. Orlando Gonzáles Nieves. IC. AS. TRUJILLO. S. BI O. RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. CI A. Dr. Rubén Vera Véliz. DE. CI. EN. VICERRECTOR ACADÉMICO. CA. Dr. Weyder Portocarrero Cárdenas. Dr. Esteban Ilich Zerpa. BI. BL. IO TE. VICERRECTOR DE INVESTIGACIÓN. SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. LO G. IC. AS. DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. Dr. Marco Leoncio Salazar Castillo (e). EN. CI A. S. BI O. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. Dr. Manuel Rodríguez Lacherre (e). CI. DIRECTOR DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE CIENCIAS. Dr. Enrique Padilla Sagástegui (e). BL. IO TE. CA. DE. BIOLÓGICAS. BI. SECRETARIO DE LA ESCUELA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DE LA ASESORA. AS. El que suscribe, en calidad de profesor asesor de la presente Tesis.. LO G. IC. CERTIFICA:. Que la investigación ha sido desarrollada en conformidad con su. BI O. correspondiente proyecto y a las orientaciones pertinentes; por tal razón el informe ha sido redactado bajo mi asesoramiento, acogiendo las observaciones. CI A. S. y sugerencias alcanzadas.. Por lo tanto autorizo a la Bch. Ivonne Kelly Espinoza Pantigozo, continuar con. IO TE. CA. DE. CI. EN. los procedimientos según sus fines.. ASESOR. BI. BL. Dr. MARLENE RODRÍGUEZ ESPEJO. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. PRESENTACIÓN. AS. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR. IC. En cumplimiento a las disposiciones del reglamento para la obtención de grados. LO G. y títulos de la facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, es honroso someter a vuestra consideración y elevado criterio la. BI O. presente tesis titulada “Efecto comparativo de aceite esencial y extracto acuoso de hojas de Schinus molle L. “molle” sobre el crecimiento de. S. Botrytis cinerea”, con lo cual estoy cumpliendo con uno de los requisitos. CI A. indispensables para optar el título profesional de Biólogo.. Trujillo, Julio del 2016.. Bch. IVONNE KELLY ESPINOZA PANTIGOZO. BI. BL. IO TE. CA. DE. CI. EN. Dejo a su consideración la respectiva aprobación.. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Dr. JULIO CHICO RUIZ. EN. CI A. S. BI O. PRESIDENTE. LO G. IC. AS. MIEMBROS DEL JURADO. CI. Dr. ROGER VENEROS TERRONES. BI. BL. IO TE. CA. DE. SECRETARIO. Dr. MARLENE RODRÍGUEZ ESPEJO VOCAL. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. APROBACIÓN. Los profesores que suscriben, miembros del Jurado Examinador, declaran que. AS. el presente informe de Tesis ha cumplido con los requisitos formales y. S. BI O. LO G. IC. fundamentales, siendo aprobado por UNANIMIDAD.. CI A. Dr. JULIO CHICO RUIZ. DE. CI. EN. PRESIDENTE. SECRETARIO. BI. BL. IO TE. CA. Dr. ROGER VENEROS TERRONES. Dr. MARLENE RODRÍGUEZ ESPEJO VOCAL. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DEDICATORIA. A Dios Todopoderoso por permitirme llegar. AS. hasta éste punto, por protegerme durante todo mi camino y darme fuerzas para dificultades, por. IC. superar obstáculos y. LO G. haberme dado salud para lograr mis. BI O. objetivos, además de su infinita bondad.. A mis padres Walter y Mercedes con. S. inmenso amor y una eterna gratitud, a mis. CI A. hermanos Jan y Angie; por ser lo más sublime que Dios ha podido darme; por su. EN. cariño, nobleza, comprensión, paciencia, apoyo invalorable, esfuerzo, sacrificio y fe. DE. CI. que hicieron posible mi carrera profesional.. CA. A mi abuela Cira, con mucho amor, por sus consejos y enseñanzas, por mostrarme. IO TE. que lo más importante es la unión y la. BI. BL. familia.. A mis abuelos Roberto y Dora, por su eterno amor, por ser luz y guía en mi vida, que aun estando ausentes los llevo siempre en mi corazón y pensamientos.. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. A mis primas, primos, tías y tíos, con mucho. amor,. por. ser. los. mejores. compañeros de vida, por estar siempre. IC. AS. presentes a pesar de la distancia.. LO G. A mi mejor amiga, Luisa Carlos, por ser cómplice de muchas alegrías y soporte en momentos de tristeza, por su apoyo y. BI O. cariño incondicional, y por brindarme la motivación, consejos y ayuda oportuna. CI A. S. para seguir adelante con mis metas.. EN. A mi gran amiga y excelente profesional, Gabriela Cacho, por inyectarme ésas. CI. ganas y ánimos de seguir adelante. mi travesía universitaria.. CA. DE. siempre, y por acompañarme a lo largo de. IO TE. A mis estimados amigos Alexis, Victoria, Gissela, Marchyori, Flor, Xiomara, Nataly, Ana Paula, Jeison, Renzo, Miguel, Daniel,. BL. Aliss, Angélica, Cynthia, Jorge, Elky,. BI. Katherine, Arnaldo, Alexa, Yanet, Jandy, Karelly, por enseñarme lo valioso y bello de la amistad, por sus consejos, y por compartir conmigo momentos alegres y difíciles.. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTOS. Mi más profundo y sincero agradecimiento a la Dra. Marlene Rene Rodríguez. AS. Espejo, Profesora del Departamento Académico de Ciencias Biológicas de la. IC. Universidad Nacional de Trujillo, por haber brindado su amistad desinteresada y. LO G. orientación con mucho profesionalismo, amabilidad y paciencia, por invertir. BI O. tiempo y conocimiento en la ejecución de presente trabajo.. Al Jurado dictaminador por sus observaciones y sugerencias, las que orientaron. CI A. S. el mejoramiento de esta investigación.. EN. A la Universidad Nacional de Trujillo, a través de los docentes de la Facultad de Ciencias Biológicas, por las enseñanzas transmitidas durante los años de. DE. CI. formación académica.. Finalmente expreso mi sincero agradecimiento al Dr. Félix Huaranga Moreno,. CA. profesor del Departamento Académico de Ciencias Biológicas de la Universidad. IO TE. Nacional de Trujillo, por su amistad invaluable, y apoyo en la realización y. BI. BL. culminación de este trabajo.. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ÍNDICE. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. ii. AS. AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS iii. IC. DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. LO G. DE LA ASESORA PRESENTACIÓN. BI O. MIEMBROS DEL JURADO APROBACIÓN. S. DEDICATORIA. CI A. AGRADECIMIENTOS ÍNDICE. EN. LISTA DE TABLAS. CI. LISTA DE FIGURAS. DE. RESUMEN ABSTRACT. iv v vi vii viii x xi xiii xiv xv xvi. INTRODUCCIÓN. 1. II.. MATERIALES Y MÉTODOS. 6. 1. Material biológico. 6. 2. Reactivación de Monocultivos. 6. BL. IO TE. CA. I.. BI. 3. Obtención del aceite de hojas de Schinus molle 4. Obtención de extracto acuoso de hojas de Schinus molle. 6 7. 5. Bioensayo por medio envenenado con Aceite esencial y 6. Extracto acuoso de Schinus molle L. “molle”. 7. 7. Análisis estadístico. 9 xi. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS. 10. IV.. DISCUSIÓN. 16. V.. CONCLUSIONES. 20. VI.. RECOMENDACIONES. 21. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. AS. III.. 22 29. BI. BL. IO TE. CA. DE. CI. EN. CI A. S. BI O. LO G. IC. ANEXOS. xii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. LISTA DE TABLAS. Tabla 1: Diseño experimental. 8. AS. Tabla 2: Promedios del diámetro (mm) de crecimiento micelial de Botrytis cinerea. IC. sometido a la acción del aceite esencial y extracto acuoso de hojas de Schinus 10. LO G. molle al 0%, 3%, 7% y 15%. Tabla 3: Análisis de Varianza (ANAVA) para evaluar el crecimiento micelial de. BI O. Botrytis cinerea sometido a los tratamientos de 0%, 3%, 7% y 15% del aceite esencial Schinus molle “molle” en los 10 días de inoculación. 13. S. Tabla 4: Pruebas de Múltiple Rangos (Duncan) para crecimiento micelial de. CI A. Botrytis cinerea sometido a los tratamientos 0%, 3%, 7% y 15% de aceite esencial de Schinus molle. 13. EN. Tabla 5: Análisis de Varianza (ANAVA) para evaluar el crecimiento micelial de. CI. Botrytis cinerea sometido a los tratamientos de 0%, 3%, 7% y 15% del extracto 14. DE. acuoso de Schinus molle “molle” los 10 días de inoculación. Tabla 6: Pruebas de Múltiple Rangos (Duncan) para crecimiento micelial de. CA. Botrytis cinerea sometido a los tratamientos 0%, 3%, 7% y 15% de extracto 15. BI. BL. IO TE. acuoso de Schinus molle. xiii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. LISTA DE FIGURAS. Fig. 1: Efecto comparativo del porcentaje de inhibición (%) del aceite esencial y. AS. el extracto acuoso de hojas de Schinus molle “molle” en los diferentes. IC. tratamientos (0%, 3%, 7% y 15%) sobre Botrytis cinerea en los diez días de 11. LO G. evaluación. Fig. 2: Velocidad de Crecimiento (mm) de Botrytis cinerea sometido a la acción. BI O. del aceite esencial y extracto acuoso de hojas de Schinus molle a 12. BI. BL. IO TE. CA. DE. CI. EN. CI A. S. concentraciones de 0%, 3%, 7% y 15% en los diez días de evaluación. xiv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN Botrytis cinerea, hongo fitopatógeno y agente causal de la podredumbre gris; se controla generalmente con agroquímicos, resultando en graves consecuencias. AS. ecológicas, por lo que se requiere de nuevas alternativas para su control, como. IC. es el uso de bioproductos vegetales con actividad antimicrobiana. El objetivo del. LO G. presente estudio fue determinar el efecto comparativo de aceite esencial y extracto acuoso de hojas de Schinus molle “molle” sobre el crecimiento de B.. BI O. cinerea. Se recolectaron hojas de S. molle del poblado de Conache, las cuales fueron secadas bajo sombra por 48 horas a temperatura ambiente en el. S. laboratorio de Fitopatología, y luego fueron trituradas a polvo. Se obtuvo el aceite. CI A. esencial por el método de destilación de arrastre por vapor de agua, y el extracto acuoso al 10%; a partir de los cuales se aplicaron tratamientos al: 0 %, 3 %, 7 %. EN. y 15 %, en medio agar papa dextrosa (APD) con cinco unidades muestrales. Los. CI. medios inoculados con B. cinerea por punción central se colocaron a (23°C ±. DE. 2°C), posteriormente se evaluó diariamente el halo de crecimiento micelial, y a los 10 días el efecto comparativo de aceite esencial y extracto acuoso de hojas. CA. de S. molle fue mayor en el tratamiento del 15%, con un porcentaje de inhibición. IO TE. mayor del 91.0% y menor del 71.0%, con promedios del diámetro de crecimiento de 7.4 mm y 24.8 mm, respectivamente para cada extracto vegetal. Se concluye. BL. que el aceite esencial de S. molle genera mayor efecto en comparación al. BI. extracto acuoso sobre el crecimiento de B. cinerea.. Palabras clave: Efecto, Schinus molle, Aceite esencial, extracto acuoso, Botrytis cinerea.. xv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT. Botrytis cinerea, phytopathogenic fungus causal agent of gray mold. It is controlled. by. agrochemicals,. resulting. in. serious. ecological. AS. generally. IC. consequences, so it requires new alternatives for its control, such as the use of. LO G. plant bioproductos with antimicrobial activity. The aim of this study was to determine the comparative effect of essential oil and aqueous extract of leaves. BI O. of Schinus molle “molle” on the growth of B. cinerea. The leaves of S. molle were collected of the town of Conache (Laredo); which were dried under shade for 48. S. hours at room temperature in the laboratory of Phytopathology, and then were. CI A. crushed to powder. The essential oil was obtained by distillation method for towing water vapor, and the 10% aqueous extract was made; from which the. EN. treatments were applied: 0%, 3%, 7%, 15%, using potato dextrose agar medium. CI. (PDA) with five sampling units. The media inoculated with B. cinerea for Core. DE. needle were placed at (23°C ± 2°C), subsequently evaluated daily the halo of mycelial growth; and at 10 days, the comparative effect of essential oil and. CA. aqueous extract of leaves of S. molle was higher in the treatment of 15%, with a. IO TE. greater percentage inhibition of 91.0% and less than 71.0%, with average diameter of growth of 7.4 mm and growth 24.8 mm, respectively for each plant. BL. extract. It is concluded that the essential oil of S. molle generates greater effect. BI. compared to aqueous extract on the growth of B. cinerea.. Keywords: Effect, Schinus molle, Essential oil, Aqueous extract, Botrytis cinerea.. xvi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. I.. INTRODUCCIÓN. Las enfermedades que se presentan en los cultivos son unos de los problemas principales que enfrenta la agricultura, ya que reducen cosechas, desmejoran la. AS. calidad del producto, limitan la disponibilidad de materias. Sin embargo, los. IC. métodos de control de patógenos se basan en el uso de agroquímicos, que. LO G. originan cepas más resistentes, contaminación, intoxicación, detención de exportaciones por residuos en productos, afectación de organismos benéficos e. BI O. incremento de los costos de producción1, 2.. enfermedades. ocasionan,. existiendo. más. CI A. más. S. Entre los microorganismos que atacan a las plantas, son los hongos el grupo que de. 10,000. especies. EN. fitopatógenas3, incluso todas las plantas superiores pueden ser infectadas por. una especie de planta4,. CI. más de una especie de hongo, y una especie de hongo puede atacar a más de 5, 6.. Destacando entre ellos Botrytis cinerea, hongo. DE. fitopatógeno y agente causal de la podredumbre gris; perteneciente al orden. CA. Moniliales y familia Moniliaceae, con hábito necrófito que ataca alrededor de 200 cultivos a nivel mundial, en regiones templadas y subtropicales 5, 7; siendo el. IO TE. responsable de inducir síntomas típicos, como pudrición suave sobre hojas y frutos, colapso del parénquima, y rápido desarrollo de masas grises de conidios.. BL. La infección comienza sobre las flores senescentes, y se dispersa afectando los. BI. frutos adyacentes7, 8. Se desarrolla con elevada humedad relativa y temperaturas de 0 a 35°C, produciendo una capa fructífera conspicua de moho gris sobre los tejidos afectados adquiriendo un color café claro5, 8. Su morfología y estructuras le permiten infectar a su hospedero.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Botrytis produce abundante micelio gris, conformado por hifas tabicadas y conidióforos ramificados, produciendo racimos de conidios hialinos, unicelulares, ovoides, incoloros o de color gris8, 9, y se desarrollan sobre tejidos infectados,. AS. siendo las principales estructuras de dispersión y resistencia del hongo, ya que mantienen su viabilidad y capacidad infectiva bajo las condiciones adversas9, 10.. IC. A partir del micelio envejecido, se forman estructuras como macroconidióforos,. LO G. microconidióforos y esclerocios, cuya función es la propagación y supervivencia. El hongo a menudo produce esclerocios irregulares, planos, duros y de color. BI O. negro9, 11, que por lo común germinan produciendo filamentos miceliales, pero en algunos casos germinan produciendo apotecios y ascosporas8. Otras de sus. CI A. S. estructuras son las clamidosporas, células de aspecto hialino, consideradas también estructuras de resistencias, y liberadas por desintegración de las hifas;. EN. estas germinan dando lugar a microconidios en estado latente para luego. 12.. Botrytis cinerea puede permanecer como saprófito hasta. DE. nuevamente11,. CI. germinar en hifas que penetren al huésped, esporulen y formen conidios. encontrar condiciones favorables comunes en nuestra latitud, y su ciclo se. CA. desarrolla en menos de 24 horas desde que ocurre la inoculación hasta el 13, 14, 15;. su establecimiento en la zona de. IO TE. desarrollo de los síntomas10,. penetración determina la muerte de las células adyacentes y da lugar a la. BL. formación de una lesión primaria como consecuencia de los mecanismos de. BI. defensa de la planta10, 12.. Es por esto que, últimamente se han buscado otras alternativas de control, como aquellas obtenidas de insumos biológicos llamados bioproductos, elaborados a partir de organismos vivos o recursos renovables16,17. Una alternativa es el uso. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. de extractos vegetales que presenten actividad antimicrobiana, la cual es el resultado de la presencia de distintos compuestos químicos naturales, producidos a partir de cualquier tipo de estrés generado 2, 5; los cuales permiten. AS. defenderse y adaptarse al medio, y son obtenidos del metabolismo primario de la planta, donde se generan las macromoléculas esenciales para la vida, y sus. con. otros. organismos,. entre. ellos. hongos,. y. su. BI O. supervivencia18,19.. los. LO G. interacciones. IC. “productos” conocidos como metabolitos secundarios son importantes en las. Muchas especies vegetales producen mezclas de alcoholes, aldehídos,. CI A. S. acetonas y terpenoides denominados aceites esenciales, así como otros bioproductos obtenidos en formas de extractos20, y se ha demostrado que estos. EN. bioproductos y sus compuestos tienen efecto y/o actividad fungicida usada. CI. contra diversos hongos fitopatógenos, además son inocuos para el medio. DE. ambiente, consumidores y para el control de enfermedades postcosecha 21,22. En nuestro medio Schinus molle “molle”, perteneciente al orden Sapindales y familia. CA. Anacardiaceae, originario de Sudamérica, puede encontrarse en los Andes. IO TE. peruanos a altitudes de hasta 3600 m.s.n.m., extendiéndose hasta Chile y Bolivia23. Existen más de 70 000 nombres para nominar a esta especie, siendo. BL. conocido como “molle”, “mulli”, “huiñan”, “cullash”, “aguaribay”, y “falsa pimienta” en Perú. En cuanto a su botánica el molle es un árbol pequeño, perennifolio, de. BI. 4 a 8 m de altura, pero puede alcanzar hasta los 15 m, y es de sexualidad monoica 24. Las plantas son una fuente invaluable de recursos para la medicina natural, “molle” posee propiedades medicinales tales como, antiinflamatoria, antifúngica,. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. antiviral, antibacterial y antimicrobiana20, 25, demostrándose en diversos ensayos realizados propiedades antibacterianas y antifúngicas del aceite esencial de molle, así como de diferentes extractos obtenidos a partir de ésta planta, que. AS. han sido empleados en Brasil y Perú26. Sus aceites esenciales poseen componentes de fácil volatilización, por lo cual se sugiere que para la evaluación. LO G. eviten la mezcla de vapores e invaliden los ensayos27, 28.. IC. de la actividad repelente de estos productos, se use métodos adecuados que. BI O. Los aceites esenciales de Schinus molle se pueden encontrar localizados en diferentes partes de la planta, por ejemplo: en las hojas27, en donde se presentan. CI A. S. hasta en un 2%, los cuales son una rica fuente de triterpenos, sesquiterpenos y monoterpenos; también contiene terpenoides, siendo el cis-menth-2-en-l-ol y el. EN. trans-piperitol los compuestos que se encuentran en mayor cantidad, y que. CI. principalmente ejercen la actividad insecticida y fungicida29, 30. Se reconoce la. DE. presencia de cafeno, mirceno, α-felandreno, β-felandreno, p-cimeno, βcariofileno y D-limoneno, como componentes mayoritarios del aceite esencial. CA. obtenido de las hojas del molle, sin embargo α-pineno, β-pineno, limoneno, p-. IO TE. cimeno y mirceno son los más comunes24. Incluso algunos de estos compuestos están presentes en el extracto acuoso de molle, generando la actividad. BL. antifúngica evaluada en especies diferentes de hongos30.. BI. Estudios anteriores, demostraron que el aceite esencial de molle frente a otros aceites ensayados, fue el más efectivo contra: Microsporum grypseum, Trichosphyton mentagrophytes y Trichophyton rubrum, y mostró actividad moderada frente a Alternaria alternata, Aspergilus flavus y Penicillium italicum.. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En otro estudio similar, las especies fúngicas Aspergillus ochraceus, Aspergillus parasiticus, Fusarium culmorum y Alternaria alternata, exhibieron también una. AS. sensibilidad significativa ante este aceite esencial26.. Además se realizó una revisión de los estudios de extractos vegetales para el. IC. control de hongos fitopatógenos, en donde, extractos crudos de guamúchil. LO G. (Pithecellobium dulce) fue la especie más sobresaliente en reducir el desarrollo de Alternaria spp., Fusarium spp., Pestalotia spp. y Rhizopus spp.; en Bortytis. BI O. cinerea la inhibición se presentó entre un 50 y 78% en función al órgano de la planta y época de cosecha en que se obtuvieron las hojas para elaborar los. CI A. S. extractos31, así mismo extractos crudos de Allium y Capsicum afectaron la germinación de esporas de B. cinerea mientras que los extractos de nogal negro. EN. (Juglans nigra L.), liquidámbar (Liquidambar styraciflua L.), Matricaria spp.,. CI. durazno (Prunus pérsica L.), peral (Pyrus communis L.) y tejo inglés (Taxus. DE. canadensis) inhibieron su germinación entre 90 y 99%5, 31. Otro estudio, realizó una rápida evaluación de diferentes extractos de especies como el chile. CA. (Capsicum annum, chinense, y frutescens), ajo (Aliium ampeloprasum, ramosun. IO TE. y sativum), y de Adenocalymma alliaceum, presentando mayor actividad antifúngica en B. cinerea, e inhibiendo la germinación de esporas en 48 horas en. BL. una dilución del 10% de extracto2, 5.. BI. Por ende, se realizó la presente investigación que tuvo como objetivo determinar el efecto comparativo de aceite esencial y extracto acuoso de hojas de Schinus molle “molle” sobre el crecimiento de Botrytis cinerea.. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. II.. MATERIAL Y MÉTODOS. 1. Material biológico Las hojas de Schinus molle L. “molle” se recolectaron del poblado de. AS. Conache, Laredo, de la provincia de Trujillo, del Departamento de La Libertad;. IC. durante los meses de Julio y Agosto del 2015. El material se depositó en. LO G. bolsas de papel para su traslado al laboratorio. La identificación taxonómica de la especie se realizó en el Herbarium Truxillense (HUT), Facultad de. BI O. Ciencias Biológicas, Universidad Nacional de Trujillo. Las hojas se lavaron con agua destilada, y luego fueron secadas bajo sombra por 48 horas a. CI A. S. temperatura ambiente en el laboratorio de Fitopatología, luego fueron trituradas a polvo usando una licuadora, el cual se almacenó en sobres de. CI. EN. papel hasta su uso (Anexo 1).. 2. Reactivación de Monocultivos. DE. A partir de los monocultivos de Botrytis cinerea obtenidos de la cátedra de. CA. Fitopatología se replicaron en frascos de penicilina en posición inclinada que contenían agar papa dextrosa, los cuales se sometieron a un período de. IO TE. incubación a temperatura de (23°C ± 2°C) por siete días (Anexo 2), así mismo se llevó a cabo la determinación respectiva de la especie haciendo uso de. BI. BL. microcultivos y claves taxonómicas.. 3. Obtención del aceite de hojas de Schinus molle L. “molle”. Para la extracción del aceite esencial se utilizó el método de destilación por arrastre de vapor24,. 27, 32,. para ello se utilizó 500 g de muestra de hojas. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. previamente trituradas. Obtenido el aceite se refrigeró en frascos de penicilina color ámbar estériles hasta su aplicación (Anexo 3).. AS. 4. Obtención de extracto acuoso de hojas de Schinus molle L. “molle” En condiciones asépticas, se realizó la preparación del extracto acuoso al. IC. 10% con agua destilada a un pH = 7.2, a temperatura ambiente, haciendo uso. LO G. de una licuadora. Posteriormente, se llevó a centrifugar a 3000 r.p.m. a fin de obtener los compuestos hidrosolubles. Al término de las extracciones se. S. BI O. filtraron a través de un papel filtro Whatman® N°1 (Anexo 4)30, 33.. CI A. 5. Bioensayo por medio envenenado con Aceite esencial y Extracto acuoso de Schinus molle L. “molle”. EN. Se preparó el medio de cultivo con agar papa dextrosa (APD), el cual se llevó. CI. al autoclave por media hora a 121°C, se dejó enfriar y cuando el agar se. DE. encontró a una temperatura de 30°C se agregó la cantidad requerida de cada uno de los extractos (aceite esencial y extracto acuoso) obtenidos de Schinus. CA. molle en el medio de cultivo APD; el cual se dispensó en cajas Petri y se dejó. IO TE. en la cámara de aislamiento para permitir que los medios se solidifiquen sin contaminarse, después se inocularon por punción central los medios de cultivo. BL. con una porción de cepas de siete días de desarrollo del microorganismo bajo estudio (B. cinerea) dentro de la cámara de aislamiento (Anexo 5). Todo el. BI. sistema fue colocado bajo un fotoperiodo de 16 horas de luz y 8 horas de oscuridad y una temperatura de (23°C ± 2°C). Bajo un diseño completamente al azar se evaluó el efecto del aceite esencial y extracto acuoso, realizando cuatro tratamientos: 0%, 3 %, 7%, y 15 %, con cinco unidades muestrales para. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. cada concentración, según diseño experimental (Tabla 1), considerándose cada caja Petri como una unidad muestral19.. AS. Para determinar la velocidad de crecimiento de Botrytis cinerea y el porcentaje de inhibición generado se realizó un registro diario de mediciones del. IC. crecimiento micelial a partir del segundo día de aplicación del bioensayo. LO G. aproximadamente durante diez días. Se consideró finalizada la evaluación. CI A. S. Tabla 1: Diseño experimental.. BI O. cuando el patógeno en placa testigo cubrió toda la caja Petri.. Concentraciones crecientes de. Unidades muestrales. EN. aceite esencial y extracto acuoso. CI. de Schinus molle “molle”. 0%. U2. U3. U4. U5. 3%. U6. U7. U8. U9. U10. 7%. U11. U12. U13. U14. U15. 15 %. U16. U17. U18. U19. U20. 0%. U21. U22. U23. U24. U25. 3%. U26. U27. U28. U29. U30. 7%. U31. U32. U33. U34. U35. 15 %. U36. U37. U38. U39. U40. DE. Aceite esencial. U1. CA. de Schinus. IO TE. molle. Extracto. BL. acuoso de. BI. Schinus molle. 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 6. Análisis estadístico Se determinó el porcentaje de inhibición usando la fórmula propuesta por Vincet: %I = [(C - T)/C] x 100; donde I es la inhibición (%), C es el diámetro. AS. del micelio en la caja Petri del control, T es el diámetro del micelio en la caja Petri de los tratamientos. Así como se realizó el cálculo de promedios de los. IC. diferentes tratamientos, el análisis estadístico de ANAVA para determinar. LO G. diferencias significativas, y la prueba de Duncan 95% mediante el uso del. BI. BL. IO TE. CA. DE. CI. EN. CI A. S. BI O. programa El StatGraphics Centurion.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. III.. RESULTADOS Tabla 2. Promedios del diámetro (mm) de crecimiento micelial de Botrytis cinerea sometido a la acción del aceite esencial y extracto acuoso de. AS. hojas de Schinus molle al 0%, 3%, 7% y 15%. 3%. 7%. 15%. 2. 2.5. 2. 2.2. 1.5. 3. 14.8. 6.3. 4.9. 4. 21. 12.2. 6.1. 5. 34.3. 23. 7.2. 6. 43. 35.6. 7. 58.6. 45. 8. 68.5. 9. 78.6. 10. 82.1. 3%. 8.5. 2.6. 15%. 6.9. 5.6. 4.6. 17.6. 10.4. 7.7. 6. 3.3. 26.5. 16.5. 12.9. 7.2. 3.9. 38.2. 28.6. 17.3. 9.3. 8.7. 4.5. 47.9. 35.9. 22. 14.1. 9.5. 5.7. 61. 44.9. 28.6. 17. 10. 6.7. 68.7. 54.6. 34.6. 19.1. 56.6. 11.3. 7.1. 76. 63.2. 39.6. 22. 58.2. 12.1. 7.4. 85.5. 68.5. 42.7. 24.8. CI A. EN. CI. DE. 52.5. BI O. 7%. CA. IO TE. Control (0%). S. Control (0%). En la Tabla 1, se observa un rango menor de crecimiento en el tratamiento. BL. . Extracto acuoso. LO G. Aceite esencial. Tiempo (Días). IC. Tratamientos. BI. 15% en cuanto a la medida del diámetro de micelio, tanto para los promedios aplicados a aceite esencial con 7.4 mm, así como para los promedios aplicados a extracto acuoso con 24.8 mm.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Porcentaje de Inhibición (%) 100.0%. 91.0%. 3%. 85.3%. 90.0%. 7%. 80.0%. 60.0%. IC. 50.1%. AS. 71.0%. 70.0%. LO G. 50.0% 40.0% 29.1%. 19.8%. BI O. 20.0% 10.0% 0.0%. Extracto Acuoso. EN. CI A. Aceite esencial. S. 30.0%. 15%. CI. Fig. 1. Efecto comparativo del porcentaje de inhibición (%) del aceite. DE. esencial y el extracto acuoso de hojas de Schinus molle “molle” en los diferentes tratamientos (0%, 3%, 7% y 15%) sobre Botrytis cinerea en los. . IO TE. CA. diez días de evaluación.. En la Fig. 1, se obtuvo mayor porcentaje de inhibición sobre Botrytis. BL. cinerea con el tratamiento de 15% de aceite esencial de hoja de Schinus. BI. molle, y menor porcentaje de inhibición con el tratamiento de 3% de aceite esencial de S. molle. así como en la Fig. 1 encontramos que el mayor. porcentaje de inhibición es generado al 15% con respecto a los otros tratamientos.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) CI. EN. CI A. S. BI O. LO G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Fig. 2. Velocidad de Crecimiento (mm) de Botrytis cinerea sometido a la. DE. acción del aceite esencial y extracto acuoso de hojas de Schinus molle a. CA. concentraciones de 0%, 3%, 7% y 15% en los diez días de evaluación.. IO TE. * En la Fig. 2, se observa un rango menor de velocidad de crecimiento en el tratamiento de 15% y mayor en el tratamiento de 3% en cuanto a la. BL. medida del diámetro de micelio, tanto para las unidades aplicadas al. BI. efecto del aceite esencial como del extracto acuoso de hojas de Schinus. molle.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 3. Análisis de Varianza (ANAVA) para evaluar el crecimiento micelial de Botrytis cinerea sometido a los tratamientos de 0%, 3%, 7% y 15% del aceite esencial Schinus molle “molle” en los 10 días de. Razón-F. 10092.2. 3. 3364.08. 10.06. 10698.4. 32. 334.325. 20790.6. 35. IC. Cuadrado Medio. Valor-P. LO G. Gl. 0.0001. S. Entre grupos Intra grupos Total (Corr.). Suma de Cuadrados. BI O. Fuente. AS. inoculación.. CI A. Tabla 4. Pruebas de Múltiple Rangos (Duncan) para crecimiento micelial de Botrytis cinerea sometido a los tratamientos 0%, 3%, 7% y 15% de. Sig.. Diferencia. *. 40.0778. CI. Contraste. EN. aceite esencial de Schinus molle.. DE. 0% - 15% 0% - 3%. 12.4444 *. 36.8222. 15% - 3%. *. -27.6333. IO TE. CA. 0% - 7%. 3% - 7%. -3.25556 *. 24.3778. * indica una diferencia significativa.. BI. BL. 15% - 7%. . En la Tabla 3, Análisis de varianza para evaluar el efecto de las diferentes concentraciones de aceite esencial de hojas de Schinus molle sobre el crecimiento de Botryitis cinerea. Existen diferencias estadísticamente. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. significativas entre las medias de crecimiento de Botrytis cinerea, entre un tratamiento y otro, con un nivel del 95.0% de confianza.. . En la Tabla 4, la prueba de Duncan confirma que existen diferencias. AS. estadísticamente significativas entre los tratamientos control (0%) y los. IC. demás tratamientos evaluados (3%, 7% y 15%), sobre todo entre los. LO G. tratamientos 3 – 15 %, más no existen diferencias significativas entre 0 – 3% y 7 – 15% evaluados del aceite esencial de hojas de Schinus molle. lado. de. los. 4. pares. indica. que. BI O. sobre el crecimiento de Botrytis cinerea. El asterisco que se encuentra al estos. muestran. diferencias. CI A. S. estadísticamente significativas con un nivel del 95% de confianza, por lo tanto se acepta la hipótesis de que sí hay un efecto del aceite de S. molle. CI. EN. sobre B. cinerea.. Tabla 5. Análisis de Varianza (ANAVA) para evaluar el crecimiento. DE. micelial de Botrytis cinerea sometido a los tratamientos de 0%, 3%, 7% y. CA. 15% del extracto acuoso de Schinus molle “molle” en los 10 días de. IO TE. inoculación.. Fuente. BI. BL. Entre grupos Intra grupos Total (Corr.). Suma de Cuadrados. Gl. Cuadrado Medio. Razón-F. Valor-P. 5980.39. 3. 1993.46. 5.35. 0.0042. 11921.1. 32. 372.536. 17901.5. 35. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 6. Pruebas de Múltiple Rangos (Duncan) para crecimiento micelial de Botrytis cinerea sometido a los tratamientos 0%, 3%, 7% y 15% de. Sig.. Diferencia. 0% - 15%. *. 33.9778 11.1556. LO G. 0% - 3%. IC. Contraste. AS. extracto acuoso de Schinus molle.. 0% - 7%. *. 24.3222. 15% - 3%. *. -22.8222 -9.65556. BI O. 15% - 7% 3% - 7%. 13.1667. . CI A. S. * indica una diferencia significativa.. En la Tabla 5, el análisis de varianza para evaluar el efecto de las. el. crecimiento. de. Botryitis. CI. sobre. EN. diferentes concentraciones de extracto acuoso de hojas de Schinus molle cinerea.. Existen. diferencias. estadísticamente significativas entre las medias de crecimiento micelial de. DE. Botrytis cinerea, entre un tratamiento y otro, con un nivel del 95.0% de. . CA. confianza.. En la Tabla 6, la prueba de Duncan confirma que existen diferencias. IO TE. estadísticamente significativas entre los tratamientos control (0%) y los demás tratamientos evaluados (3%, 7% y 15%), sobre todo entre los tratamientos 3 – 15 %, más no existen diferencias significativas entre 0 –. BL. 3% y 7 – 15% evaluados del extracto acuoso de hojas de Schinus molle. BI. sobre el crecimiento de Botrytis cinerea. El asterisco que se encuentra al lado. de. los. 4. pares. indica. que. estos. muestran. diferencias. estadísticamente significativas con un nivel del 95% de confianza, por lo tanto se acepta la hipótesis de que sí hay un efecto del aceite de S. molle sobre B. cinerea. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IV.. DISCUSIÓN. La reducción del crecimiento micelial promedio de Botrytis cinerea (Tabla 2), y el. AS. aumento del porcentaje de inhibición por acción del aceite esencial y extracto. IC. acuoso de Schinus molle (Fig. 1 y 2), se pueden deber a la presencia de. LO G. componentes activos de diferentes clases químicas en el molle, o por mezclas de metabolitos secundarios en determinadas concentraciones y proporciones34.. BI O. La propiedad antifúngica exhibida por los extractos vegetales de Schinus molle puede estar relacionada con compuestos pertenecientes a grupos de alcaloides,. S. terpenoides y fenilpropanoides, los cuales muestran un amplio espectro de. CI A. acción contra diferentes hongos fitopatógenos, en este caso actúan inhibiendo la germinación de esporas y crecimiento micelial de Botrytis cinerea3, 35. Por ello,. EN. los resultados de este estudio concuerdan con otras investigaciones, y se. CI. confirma que a mayor concentración de aceite esencial así como de extracto. DE. acuoso de hojas de Schinus molle, menor es la velocidad de crecimiento de Botrytis cinerea, y mayor es su efecto inhibitorio, demostrándose las propiedades. IO TE. CA. antifúngicas del molle sobre Botrytis (Fig. 2)36, 37.. Según otras investigaciones se ha determinado que Botrytis cinerea presenta. BL. mayor sensibilidad al aceite esencial de hojas de Schinus molle, ya que contiene. BI. taninos y terpenoides que generan la mayor actividad antifúngica, alcanzando porcentaje de inhibición del 91% respecto al tratamiento de 15% de aceite esencial (Fig. 1)38, 39; en evaluaciones fitoquímicas se refiere que, las hojas de molle contienen hasta un 2% de aceites esenciales (Anexo 6), los cuales son fuentes de triterpenos, sesquiterpenos y monoterpenos; también contienen 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. terpenoides, siendo el cis-menth-2-en-1-ol y el trans-piperitol los encargados de provocar la actividad antimicrobiana29. Por otro lado, mediante análisis de cromatografía de gases, registraron que dicha actividad antimicrobiana se puede. AS. originar a causa de metabolitos volátiles del tipo monoterpeno cíclico: Dlimoneno, α-pineno, β-pineno y α-felandreno; y un monoterpeno acíclico: β-. IC. mirceno (Anexo 7); del mismo modo se registró la presencia de cafeno, β-. LO G. felandreno, p-cimeno, β-cariofileno (Anexo 8 y 9)24, 40. Otro de los compuestos volátiles responsables de estos efectos antifúngicos, es el carvacrol, a pesar de. BI O. sólo encontrarse vestigios en el aceite esencial de Schinus molle40. Sin embargo, el extracto acuoso de hojas de molle también presenta propiedades fungicidas. CI A. S. alcanzando porcentaje de inhibición del 71% respecto al tratamiento de 15% (Fig. 1)41, 42, y tiene efectos mutuamente sinérgicos entre los diferentes compuestos. EN. químicos que contiene, existiendo la posibilidad de que sus efectos biológicos. CI. sean el resultado del sinergismo de todos los compuestos o sólo de las. DE. principales moléculas que presentan mayor porcentaje en el vegetal 42. Inclusive están presentes algunos compuestos del aceite esencial en el extracto acuoso. CA. de molle30, además se ha aislado fitoquímicamente en él, triterpenos y un. IO TE. inhibidor de la fosfolipasa A2 43, confirmando que el extracto acuoso por sí solo tiene efecto sobre la inhibición micelial y sobre la esporulación31. Para el modo. BL. de acción de los terpenos y aceites esenciales, se postula que pueden causar. BI. rompimiento de la membrana a través de los compuestos lipofílicos 31, 44.. La acción antifúngica también puede atribuírsele a la mezcla y concentración de los compuestos volátiles del aceite esencial de molle45; de igual manera los. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. fenoles, pueden ser causantes de la inhibición enzimática por oxidación de compuestos y alteración en la permeabilidad de la membrana citoplasmática ocasionando la lisis de la misma; y los terpenos pueden afectar la actividad de. interfieren. en. la. traslocación. de. protones. sobre. la. AS. enzimas catalizadoras a nivel de ella, actuando como desacopladores, ya que membrana. y. IC. subsecuentemente interrumpen la fosforilación del adenosina difosfato46, así. lipofílicos28,. 29, 46,. LO G. mismo pueden causar rompimiento de la membrana a través de los compuestos incluso pueden provocar la modificación del pH del medio. BI O. impidiendo el normal desarrollo del micelio24. A pesar de ello, otros estudios revelaron efectos severos observados en los tratamientos con extractos acuosos. CI A. S. de hojas secas de Schinus molle, dependiendo de la especie fúngica; reportándose a los ácidos fenólicos, cumarinas, polifenoles y flavonoides como. EN. los principales aleloquímicos responsables por la inhibición; se dice que los. CI. alcaloides presentes en el extracto pueden intercalarse con el DNA; y las lectinas. DE. y polipéptidos pueden formar canales iónicos en la membrana microbiana o causar inhibición competitiva por adhesión de proteínas microbianas a los. IO TE. CA. polisacáridos receptores del hospedero (Fig. 1) 31, 35.. En algunas pruebas de laboratorio, tanto el aceite esencial como el extracto. BL. acuoso de hojas de Schinus molle han demostrado buenos resultados como fungicidas, exhibiendo que Botrytis cinerea presenta sensibilidad significativa a. BI. los aceites volátiles y extractos vegetales del molle (Fig. 2)28,. 47.. Por ello, la. importancia de la actividad de estos extractos radica en su capacidad para inhibir el crecimiento del patógeno5.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. La existencia de diferencias significativas en las pruebas estadísticas aplicadas, pueden deberse a que los extractos vegetales empleados en el presente estudio han desarrollado compuestos contra el ataque de hongos; ya sean los. AS. antifúngicos constitutivos; y las fitoalexinas19. Pese a todo ello, las deformaciones que presentan los monocultivos a lo largo de su superficie (Anexo. IC. 10 y 11), se deben a que las hifas de Botrytis cinerea son más gruesas que las. LO G. de otros hongos fitopatógenos16.. BI O. Por último, según los resultados obtenidos podemos decir que, los extractos vegetales de Schinus molle con propiedades antifúngicas y antimicrobianas. CI A. S. pueden ser alternativas naturales promisorias para el control de enfermedades fitopatógenas, ya que constituyen una alternativa promisoria, debido a su. BI. BL. IO TE. CA. DE. CI. EN. elevada efectividad, bajo costo, y no ser contaminantes del ambiente36.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. V.. CONCLUSIONES. AS. Según los resultados obtenidos se concluye que:  El efecto comparativo de aceite esencial y extracto acuoso de hojas. IC. de Schinus molle L. “molle” fue mayor en el tratamiento del 15%,. LO G. reportando un porcentaje de inhibición mayor del 91.0% y menor del 71.0% respectivamente sobre el crecimiento del diámetro micelial de. BI O. Botrytis cinerea.. CI A. S.  El efecto comparativo de aceite esencial y extracto acuoso de hojas de Schinus molle L. “molle” genera la mayor disminución de la. EN. velocidad de crecimiento de Botrytis cinerea en el tratamiento del 15%,. CI. con un promedio del diámetro micelial de 7.4 mm y 24.8 mm. DE. respectivamente para cada extracto vegetal.. CA.  El aceite esencial de hojas de Schinus molle “molle” L. genera mayor. IO TE. efecto antifúngico en comparación al extracto acuoso sobre el. BI. BL. crecimiento de Botrytis cinerea.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VI.. RECOMENDACIONES. 1. Complementar este estudio con el análisis de cromatografía de gases. AS. acoplado a un espectrómetro de masas (GC - MS), que es una técnica. IC. más completa y específica que permite la separación e identificación. LO G. de los compuestos, además de cuantificar la concentración de los. BI O. mismos.. 2. Debido a la importancia económica que presentan los aceites. S. esenciales y extractos vegetales en el mercado mundial, y al interés. CI A. que han despertado los extractos de especies nativas en la comunidad. EN. científica nacional, se sugiere continuar con estudios similares a este. CI. fin de mejorar el aprovechamiento de las especies.. DE. 3. Realizar nuevos trabajos de investigación sobre el aprovechamiento del aceite esencial y extracto acuoso de molle en el campo de control. CA. biológico, agroindustrial y alimentario, teniendo como base este. IO TE. estudio, ya que las propiedades físico - químicas del aceite y extracto y la mezcla de sus componentes químicos hacen de este un producto. BI. BL. potencialmente industrializable.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. VII.. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1. Ghorbani, R; S. Wilcockson; A. Koocheki y C. Leifert. Soil management for. AS. sustainable crop disease control: a review. Journal Environmental Chemistry. IC. Letters. 2008, 6:149-162.. LO G. 2. Terrones, G. Efecto antigúngico del extracto etanólico de frutos secos de Capsicum annuum var. annuum “pimentón” sobre crecimiento de Alternaria. BI O. sp., Fusarium sp. y Aspergullus sp. Tesis Biólogo. Fac. de Cienc. Biológicas. Univ. Nac. de Trujillo. 2014.. S. 3. Lizcano G, MC. Evaluación de la actividad antifúngica del extracto de tomillo. CI A. (Thymus vulgaris) contra Botrytis cinerea, Fusarium oxysporum y Sclerotinia sclerotiorum. Tesis Microbiólogo agrícola y veterinario. Fac. de Cienc.. EN. Biológicas. Univ. Nac. de Trujillo. 2014.. CI. 4. Sevilla, Y. Efecto del extracto etanólico de corteza de Cinnamomun. DE. zeylanicum L. “canela” y semillas de Ricinus communis L. “higuerilla” sobre el crecimiento de Fusarium oxysporum y Alternaria tenuis. Tesis Biólogo. Fac.. CA. de Cienc. Biológicas. Univ. Nac. de Trujillo. 2013.. IO TE. 5. Alvarez G, TB. Biocontrol de Botrytis cinerea a partir de extractos fenólicos de fresa. Tesis Maestría. Inst. Politécn. Nac. De Unid. De Michoacán. 2012.. BL. 6. Agrios G. Fitopatología. 2ª Edición. Noriega Editores. Pp. 648 – 726. 2000.. BI. 7. Núñez-Ríos T; SG. Leyva; JE. Rodríguez; y LA. Mariscal. Etiología y control de la necrosis de flores y pudrición de frutos de pepino en Morelos, México. Rev. Chapingo Serie horticultura. 2013; 19 (2): 255 – 266, Chapingo, México. 8. Agrios G. Fitopatología. 2ª Edición. Editorial Limusa. México. Pp.419 – 423. 2004.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 9. Holz G; S. Coertze y B. Williamson. The ecology of Botrytis on plant surfaces. In Elad Y; B. Williamson; P. Tudzynski y N. Denle. Botrytis: biology, pathology and control. Springer, USA, pp: 9 - 27. 2007.. AS. 10. Kerssies A. Epidemiology of Botrytis spotting on gerbera and rose flowers grown under glass. Aalsmeer, Netherlands. Editorial Nugi. P 1-18. 1994.. IC. 11. Espinosa M. Estudio de la variabilidad genética y organización cromosómica. LO G. en el hongo fitopatógeno Botrytis cinerea. Tesis Doctoral Univ. de Cadíz. 2006.. BI O. 12. Giraud T. RFLP Markers Show Genetics Recombination in Botriotinia. CI A. Species. INRA. Versailles. France. 1997.. S. fuckeliana (Botrytis cinerea) and trasposable Elements Reveal Two Simpatric. 13. Spadaro I. Resistencia de Botrytis cinerea a las Anilinopirimidinas. Tesis Ing.. EN. Agrónomo. Pontificia Univ. Catól. de Chile. Fac. de Agronomía e Ingeniería. CI. Forestal. Departamento de fruticultura y Enología. Pp.76. 2002.. DE. 14. Chamorro D. Caracterización de Poblaciones de Botrytis cinerea Resistentes a Fungicidas en rosas (Rosa sp.) en las provincias de Pichincha y Cotopaxi.. CA. Univ. Central del Ecuador. Quito, Pichincha. 2007.. IO TE. 15. Castaño J. Principios básicos de epidemiología. Universidad de Caldas, Centro Editorial. 1a ed. Cap. 2, 14, 15. 2002.. BL. 16. Guédez C; C. Castillo; L. Cañizales y R. Olivar. Control biológico: una herramienta para el desarrollo sustentable y sostenible. Revista Control. BI. Biológico. 2008; 7(13): 50-74.. 17. Guerrero E; S. Solís; F. Hernández; A. Flores y V. Sandoval. Actividad biológica in vitro de Extractos de Flourensia cernua D.C. en patógenos de postcosecha:. Alternaria. alternata. (Fr.:Fr.). Keissl.,. Colletotrichun. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. gloeosporioides (Penz.) y Sacc. y Penicillium digitatum (Pers.:Fr.) Sacc. Rev. Mex. De Fitopatología. 2007, 25 (1): 48 – 53, México. 18. Croteau, R; T. Kutchan, y N. Lewis. Natural Products (Secondary metabolites).. AS. En Buchanan, W; Gruissem, W. y R. Jones. Biochemistry & molecular biology of plants. Ed. American Society of plant physiologists, 1250 – 1318 pp. 2000.. IC. 19. Armas C; L. Márquez y C. Pretell. Efecto del aceite esencial de clavo de olor. LO G. (Syzygium aromaticum), canela (Cinnamomum zeylanicum) y su combinación sobre la acción antifúngica en Aspergillus flavus en agar chicha de maíz (Zea. BI O. mays L.), variedad morado. Rev. Pueblo Continente. 2011; 22 (1): 123 – 132, Trujillo, Perú.. CI A. S. 20. Montes – Belmont R. Diversidad de compuestos químicos producidos por las plantas contra hongos fitopatógenos. Rev. Mexicana de Micología. 2009; 29:. EN. 73 – 82. Centro de Desarrollo de Productos Bióticos. Inst. Polit. Nac.. CI. 21. Ávalos A; E. Pérez – Urria. Metabolismo secundario de las plantas. Rev.. DE. Reduca (Biología). Serie Fisiología Vegetal. 2009; 2(3): 119 – 145, Madrid, España.. CA. 22. Quiroga M; C. Guerrero; M. Botella; A. Barcelo; I. Amayi; M. Medina; F. Alonso;. IO TE. S. Forchetti; H. Tigier; V. Valpuesta and SM. Forchetti. A tomato peroxidase involved in the sintesis of lignin and suberin. Plant Physiology. 2000; 122: 1119. BL. - 1127.. 23. Saravia N. y G. Guillinta V. Actividad antifúngica del extracto de etanol de. BI. Schinus molle y el fluconazol sobre Candida Albicans. Revista Kiru. 2012, 9 (1), Lima, Perú.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 24. Llanos A, SK. Extracción y caracterización del aceite esencial de molle (Schinus molle L.) Tesis Ingeniero. Fac. de Cienc. Agropec. Univ. Nac. Jorge Basadre Grohmann. Tacna, Perú. 2012.. AS. 25. Zampini IK; N. Cudmani y MI. Isla. Actividad antimicrobiana de plantas. clínica Latinoamericana. 2007; 41 (3), La Plata, Argentina.. IC. medicinales argentinas sobre bacterias antibiótico – resistentes. Acta bioquím.. LO G. 26. Zeng Y. Identificación y actividad farmacológica de principios de especies antiinflamatorias. Universidad de Valencia. 2006. Recuperado el 11 de mayo 2010.. Disponible. BI O. de. en:. http://www.tesisenxarxa.net/TESIS_UV/AVAILABLE/TDX-0403108-11. CI A. S. 5541//yueqin.pdf. 27. Gonzales V, ÁA. Obtención de aceites esenciales y extractos etanólicos de. EN. plantas del Amazonas. Tesis Ingeniero Químico Univ, Nac de Colombia Sede. CI. Manizales. 2004.. DE. 28. Werdin IO; AP. Murray y AA. Ferrero. Bioactividad de aceites esenciales de Schinus molle var. Areira en Ninfas II de Nezara viridula (Hem: Pentatomidae).. CA. Bol. San. Veg. Plagas. 2008; 34: 367 – 375, Argentina.. IO TE. 29. Kramer F. The Pepper tree Schinus molle. Econ. Bot. 1997; (11): 323 – 326. 30. Iannacone J y L. Alvariño. Toxicidad de Schinus molle L. (Anacardiaceae) a. BL. cuatros controladores biológicos de plagas agrícolas en el Perú. Acta Zool. Mexicana. 2010, 26 (3):603 – 615, Lima, Perú.. BI. 31. Hernández A; S. Bautista y MG. Velázquez del Valle. Prospectiva de extractos vegetales para controlar enfermedades postcosecha hortofrutícolas. Rev. de Fitotecnia Mexicana. 2007; 30 (2): 119 – 123; Chapingo, México.. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 32. Elder H. Optimización de Procesos Extractivos Aplicados a Especies vegetales arpmáticas y medicinales; Buenas prácticas de operaciones unitarias; Normalización de productos naturales obtenidos de especies de la. AS. flora aromática latinoamericana. Proyecto CYTED IV. 20. 2010; 334 pp; Porto Alegre, Brasil.. IC. 33. Iannacone J. y G. Lamas. Efectos toxicológicos de extractos de molle (Schinus. LO G. molle) y lantana (Lantana camara) sobre Chrysoperla externa (Neuroptera: Chrysopidae), Trichogramma pintoi (Hymenoptera: Trichogrammatidae) y. Técnica. 2003, 63 (4): 347 - 360, Lima, Perú.. BI O. Copidosoma koehleri (Hymenoptera: Encyrtidae) en el Perú. Agricultura. CI A. S. 34. Espinosa – García F. La diversidad de los metabolito secundarios y la teoría de la defensa vegetal. En: Anaya AL; FJ. Espinosa – García; R. Cruz. EN. (Coordinadores). Relaciones químicas entre organismos. Aspectos básicos y. DE. México, Distrito Federal.. CI. perspectivas. Instituto de Ecología. Plaza y Valdés S.A. de C.V. 2001, 733 pp.,. 35. Montes – Belmont R; V. Cruz; G. Martínez; G. Sandoval; R. García; S. Zilch;. CA. L. Bravo; K. Bermúdez; HE. Flores y M. Carvajal. Propiedades antifúngicas en. IO TE. plantas superiores. Análisis Retrospectivo de Investigaciones. Rev. Mex. de Fitopatología. 2000; 18 (2): 125 – 131, Distrito Federal, México.. BL. 36. Vásquez M. Acción antifúngica in vitro de Clonostachys rosea sobre el crecimiento de Sthemphylium vesicarium, Fusarium oxysporum y Botrytis. BI. cinerea procedentes de Asparagus officinalis L. Tesis Biólogo. Fac. de Cienc. Biológicas. Univ. Nac. de Trujillo. 2013.. 37. Davicino R. Actividad antifúngica de extractos de plantas usadas en medicina popular en Argentina. 2007; Buenos Aires, Argentina.. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 38. Wilson C; JM. Solar; A. El Ghaouth; ME. Wisniewwski. Rapid evaluation of plant extract and essential oils for antifungal activity against Botrytis cinerea. Journal Plant disease. 1997; 81(2): 204 – 210.. AS. 39. Macció L. Búsqueda y evaluación de la capacidad inhibitoria de tripsina en extractos de Schinus molle. Tesis de Grado de Licenciatura en Cienc. Biológ.. 2012.. LO G. IC. Fac. de Cienc. Laboratorio de enzimas hidrolíticas. Canelones, Uruguay.. 40. Viturro C; A. Bandoni; E. Dellacassa; L. Serafini; H. Elder. Normalización de naturales. obtenidos. de. especies. de. la. BI O. productos. flora. aromática. latinoamericana - Problemática Schinus en Latinoamérica. Proyecto CYTED. CI A. S. IV. 20; 2010; 334 pp; Porto Alegre, Brasil. Recuperado el 09 de agosto de 2011. Disponible on - line en: http://www.pucrs.br/edipucrs. EN. 41. Gundidza M. Antimicrobial activity of essential oil from Schinus molle. Linn.. CI. Cent. Afric. J. Med. 1993; 39: 231 – 234.. DE. 42. Uscátegui Y. Bioactividad de hidrosoles, aceites esenciales y mezclas de extractos de especies vegetales para el control de Rhizoctonia solani,. CA. Phytophthora infestans y Fusarium oxysporum en el cultivo de papa (Solanum. IO TE. tuberosum). Tesis Maestría. Fac. de Ingeniería. Univ. de la Sabana. Colombia. 2013.. BL. 43. Vivot EP; CI. Sánchez; F. Cacik y C. Sequin. Tamizaje de la actividad antifúngica de extractos de especies de la flora de Entre ríos. Rev. Cubana. BI. Farm. 2009; 43(4), Oro verde, Argentina.. 44. Cowan MM. Plant products as antimicrobial agents. Rev. Clin. Microbiol. 1999; 10: 564 – 582.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 45. Borella J; E. Garbin; T. Zanatta. Atividade alelopática de extratos de folhas de Schinus molle L. sobre a germinação e o crescimento inicial do rabanete. Revista Brasileira de Biociências. 2009; 9 (3): 398 – 404, Porto Alegre, Brasil. el. 29. de. abril. de. 2011.. Disponible. on. http://www.ufrgs.br/seerbio/ojs/index.php/rbb/article/view/1766. -. line. en:. AS. Recuperado. IC. 46. Cano C; P. Bonilla; M. Roque; J. Ruiz. Actividad antimicótica in vitro y. LO G. Metabolitos del Aceite esencial de las hojas de Minthostachys mollis (muña). Instituto nacional de salud. Rev. Peruana de medicina experimental y salud. BI O. pública. 2007; 25 (1), Perú.. 47. Yelasco - Nequeruela A. Medicinal Plants from Pampallakta: Na Andean. CI A. S. Community in Cuzco (Perú). Rev. Fitoterapia. 1995; 66 (5): 447 – 462, Cuzco,. BI. BL. IO TE. CA. DE. CI. EN. Perú.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) CI A. S. BI O. LO G. IC. AS. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BI. BL. IO TE. CA. DE. CI. EN. ANEXOS. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Anexo 1. Preparación y conservación del material biológico (Schinus. BL. IO TE. CA. DE. CI. EN. CI A. S. BI O. LO G. IC. AS. molle).. (a): Hojas de molle recién recolectadas; (b): selección del material. BI. biológico; (c): hojas secadas bajo sombra a temperatura ambiente; (d): hojas secas trituradas a polvo usando una licuadora; (e): medición del peso del polvo; (f): conservación de las hojas trituradas en sobres de papel.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BI O. LO G. IC. AS. Anexo 2. Reactivación de Monocultivos de Botrytis cinerea.. (b). IO TE. CA. DE. CI. EN. CI A. S. (a). BL. (a) Replicación del hongo en frascos de penicilina con APD; (b):. BI. microcultivos de B. cinerea.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(48) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IO TE. CA. DE. CI. EN. CI A. S. BI O. LO G. IC. AS. Anexo 3. Preparación del aceite esencial de Schinus molle “molle”.. (a): Medición del peso del polvo de hojas a usar; (b): preparación del. BL. equipo destilación; (c): extracción del aceite esencial de molle usando un. BI. equipo de destilación por arrastre de vapor; (d): obtención del aceite esencial.. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(49) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. BL. IO TE. CA. DE. CI. EN. CI A. S. BI O. LO G. IC. AS. Anexo 4. Preparación del extracto acuoso de Schinus molle “molle”.. BI. (a), (b): Extracción de los compuestos hidrosolubles de molle; (c), (d): trituración y mezcla completa; (e): maceración; (f), (g), (h): filtración del extracto, (i): extracto de molle concentrado.. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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