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CIENCIAS BIOLOGICAS Y D E LA SALUD TRIMESTRE 97-P HORAS A LA SEMANA 25 HORAS EFECTO D E LA SUPLEMENTACION CON

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(1)

4 U M N O

ALONSO

ACUNA INOCENCIA

91333709

’.,

TELEFONO

69

10294

. . .

4 i C E N C i A T U R A

INGENIERIA BIOQUIMICA INDUSTRIAL

UNIDAD

IZTAPALAPA

4

I

vis

I

ON

CIENCIAS BIOLOGICAS

Y

D E LA SALUD

TRIMESTRE

97-P

HORAS

A

LA SEMANA

25

HORAS

EFECTO D E LA SUPLEMENTACION CON

A t r k l c x

canesccns

S O B R E

LA

CINETICA DE

SOLIDOS

EN

E L RUMEN DE BORREGOS

DR. SERGIO HUERTA OCHOA

PROFESOR E INVESTIGADOR TITULAR B

M.V.Z.

LEONOR SANCINES GARCIA

CED. PROF. No. 69581

1

_,

4 T U L O

A S E S O R INTERNO

ASESOR EXTERNO

LUGAR

DEPARTAMENTO DE NUTRICION ANIMAL

INSTITUTO NACIONAL D E

L A

NUTIIICION

“SALVADOR ZUBIRAN”

INICIO

16

DE DICIEMBHE D E

1996

16

DE JUNIO D E

1 5

~ - E R M I N A C ~ O N

(2)

.-,.

EFECTO DE LA SUPLEMENTACION CON

Atriplex

canescens

SOBRE LA CINETICA DE SOLIDOS EN EL

RUMEN DEBORREGOS

(3)

I N D I C E

I.- INTRODUCCION Digestibilidad

Digestibilidad in vitu Digestibilidad in uitm D'iestibiiidad in sitit

Factores que afectan la digestibilidad

Marcadores

IJtiliracion de marcadores en la alirneriracii>n aninial

Mariiidores infernos

Marcadores externe Oxido de cromo

Parariietros de culrivo conrinuo Flujo de la digesta

Deiiiiiciones

Ciri;tica de oxido de cromo

11.- JUSTIFICACION

111.-

OB]JZWOS

General

Especificof.

IV.-

MATERIALES

Y

METODOLOGIA Material biokgico

Material y equipo

Metodologia

Preparación de la solución digestora Preparaci6n de la c u m patrón Análisis de varianza

V.-

RESULTADOS

Y

DISCUSIONES Digescihilidad de A canwen3

Analisis estadistico del porcentaje de digestihilidnd Cinéticas

d~

óxido de cromo

Análisis estadkticos de Iw criterios cincticw

VI.-

CONCIAJUSIONES

VIL RECOhlENDACIONES

(4)

I

fr'

c

L,.

r

1..

\m.-

AGRADECIMIENTOS

E.-

BIBLIOGRARA

x.-

ANEXOS

Anexo 1

Anexo

z

Porcenrajes de digesribilidades de A canescm

Cinericas de la concentraciiin de marcador

30

31

34

(5)
(6)

1.-

INTRODUCCION

Los

animales herhivoros, son incapaces de generar enrimas que puedan degradar la fibra. pero pueden hacer uso de varios tipos de microorganisnios, incluyendo bacterias y hongos anaerohios para este prophito. La estrategia utilizada por

los

rumiantes involucra el desarrollo de un conipuesto estomacal en el cual el alimento consumido puede ser fermentado por

los

microbios antes de estar sujetos a un ataque por

las

enrimas propias del aninial y. finalmente, hacia una segunda fernientacion en el intestino antes los residuos sin digerir son expul.dos en las heces. h a estrategia conlleva a que en

los

runiiantes domisticm se aplicaran dietas con un contenido moderado de fibra.

El

analisis quimico proximal n w conduce al conwiiniento inicial de la roniposicibn quiniica

de un aliiiiento, a traves d e los principios iiiitirdiatm,

los

cuales son Its pririieros en

identiiicarss en los procesos de desintegracibn analitica en el laboratorio. y estos son :

Contenido de humedad Materia seca (

M S

)

l.-Porción incombustible ( cenim )

2.-Porción combustible ( proteina cruda. extracto etireo y fibra cruda) 3.-Hidratos de carbono ( extracto lihre de nitrógeno)

El analisis de la digestihilidad de un aliniento

es muy importante ya que este es

el

que va a marcar la diferencia entre la alimentacibn cuantitativa de la cualitativa En las pruebas de digestihilidad o de balance, se cuantifican los nutrinientos que se ingieren y se absorben en el tubo digestivo y las cantidades que se eliminan en la heces. Para esto es necesario tanto

conwer la cantidad de alimento ingerido conlo excretado, siendo la diferencia entre ambas cantidades la parte que se asume fue digerida y absorbida por el aniiiial, que al ser expresada corno porcentaje resulta ser el cwíiciente de digestibilidad aparente de la niateria seca o de cada uno de Ins coniponentes de los alinieiitos.

En general. los valores de la digestibilidad obtenidos son aparentes, ya que noriiialinente no

se hacen

ni

mediciones ni correcciones de Iw aportes riietablicos y endógenns (de origen

corporal). tales

coiiio

enzinias, hormonas. riietabolittx y otras celulas

,

que se producen como

consecuencia del proceso digestivo y que aparecen en las heces sin ser uii residuo aliuppirio. Cuando diclios valores son corregidos se ohtieiie la digestihili<iad verdadera, que

(7)

f"

F

L .

La forma de calcular la digestibilidad aparente de la materia seca (DMS) se hace de acuerdo con la siguiente ecuacion (Church, 1987 i Mapard, 1986 ; Shirnada. 1983).

C -

E

C

%

OMS

-

x

100

C

-

consumo de rnateriaseca

E

-

heces en hace seca

DIGESTIBILIDAD

-

Existen diferentes mitodos para determinar la digestibilidad de u n forraje o racibn, cntre

ello:

-

se encuentran : Digestibilidad

in

s i t a Digestibilidad

in

S ~ N

digestibilidad

in

vitro

Digestibiiidad

in

vivo

Los

nietodos para la medicion

de la digestibilidad que implican el empleo de animales vivos

( in vivo ), resultan costaso en cuanto al tiempo, la rnano

de

obra calificada, las cantidades de

aliniento y al numero de análisis quiniicm que se refiere, pero posee menos posibilidades de

error.

AI aninial se le suministra la dieta a prohaae en las niknias cantidades diarias durante un periodo preliniiiiar para que se liiiipie o evacue el tuho digestivo de cualquier material no

digerible existente en el nikmo y que provenga del alimento consumido antes de iniciar la

ingestidn constante del alimento en estudio y pan permitir que el aninial se adapte a la dieta

de prueba, en aniniales rnonogistriios el periodo es de 1 a 3 dias. Despub de este periodo se

inicia la recolección de heces ( las

lieces

deherin estar libres de containinacion urinaria ), posteriormente .se. hare u n anilisir <le esta*, ya que

I<s

cotiiponentes que se pierden r n lw

nii.mias corresponden a la niayor pirdida individual de Iw nutrinientos ingeridos. en virtud

(Ir que una w z que u n aliinrnto sufre lmprocesos (le degradari«n gasrointestinal se expulsa

el retiianente cn I= niistiiw.

% "i

(8)

Para este tipo de

estudio

se recomienda utilizar jaulas medicas, en

donde

el anind debe tener movimiento en particular para recostame O Ie%antarse ; el piso es una malla tambien de

metal a través del cual pasan las heces y la orina, pero

las

heces san

recolectadas

en o m malla que se encuentra debajo.

El

comedero se encuentra al frente, construido y colocado de tal mcdo que mita derramar el aliniento ( Maynard, 1986).

Tasa de digestión

Las tasas de digestion pueden ser cuantificadas por cinetics de primer orden donde la

digestihilidad es proporcional a la concentracion de sustrato (iterrenc, 1977; iterteniy

~ b ,

198:).

dddt-

.KSS

donde:

ds/clt

-

velocidad a la que disniinuye la c.onccntracibn de sustrato

s

.

-

KI

-

constante de velocidad de la desaparicion de sustrato

Las

tasa de digestion han sido dlicutids en termina de tiempo "lap" (DUN, 1979).

La

f a x

"lag" de digestion es definida conwe1 periodo de ferinentacion inicial, cuando la digestion es constante o se presentan tasas niuy reducida. El efecto "lag"

es

mostrado coni0

una caracteristica no lineal. Esta f s e es debida a la adherencia o asociacion

de

las

microorganismas con el sustrato antes de la digestion enzimática (~cnenr-. 1977;

uAertchry

~ b ,

1982).

Digestibiiidad

in

vitro

Los estudios in vino o en runien artificial se-han desarrollado en hasp a que

las

tknicas in vivo requieren de bastante tiempo y son muy castasas ademis de utilizar grandes cantidade

de alimento.

En las condiciones

de lahoratorio, se intenta simular los procesos digestivos en

el runien. donde se lleva acabo una fermentación anaerobia, utiliAndase un sustrato en una solucibn ainortiguadora similar a la conipwici6n de la salha y en el liquido mriiinal filtrado,

siendo todo el medio saturado de

COL

ya que

1-

microorganisma ruminales requieren de

condiciones anaerbhicas. Los productos finales de la fermentación son principaltnente

Cot,

CHI

,

AGV's y niasa niicrohiana ; la producción de gam o de AGV's pucden inhihir el

proceso de íernientacion, por lo tanto dek mantenerse una rernperatura cowtante

(39-40

"C)

y aeitaci¿)n de

tiv

tuucstras de vez en cuando. El rli+twio mj,: usado es el

desarrollado pur Tilley y Terry, cl cual involucra 48 Iiorac

de

ferinentacii>n con fluido

ruiiiinal seguido de una dige~tión pCptica por

48

how í l ~ i l l c y , 1061) ,

(9)

T

?,..

:

.

"1

.,.*

Digestibilidad

in

situ

La tknica de la bolsa de fibra artificial, ha

sido

utilizada durante varios años para proporcionar valores estimados de la tasa de desaparicion de

las

constituyentes alimenticias en el rumen (orrbv. 1980). Esta tknica tiene la ventaja de dar una estiniacion dpida de la tasa y el

grado

de degradaci6n de

los

alinientos en el rumen, sin necesidad de otro procediniiento complicado nias que simplemente pesar. Otra ventaja consiste en que

el

material alinienticio se encuentra suspendido en el rumen, estando este en intinio contacto

con el ambiente ruminal ( temperatura, pH, buffer, enzinias. etc. )

.

Desventajas de esta técnica

a) AI ser la muestra confinada dentro de la bolsa, no esta expuesta a ninguna niasticacion

b)

El alimento normalmente podria salir del rumen, una vez que tuviera el tamaño

adecuado.

c) Los resultados dehen ser tratados con el debido cuidado y. en general ser utilizadas como indicadores cualitativos de

las

principio generales.

Ai

inknio en la digestihilidad in situ hay que considerar la porosidad de las bolsas. el tamaño de las partículas, la cantidad de muestra, la dieta del animal, el tiempo de incubación y el numero de bolsas incubadas.

Factores

que

Afectan la Digestibilidad

Entre las factores que pueden afectar la digestibilidad de algunos forrajes o raciones en

rumiantes destacan (Shiniada, 1983):

1.

La

cantidad de alimento consumido : ya que al aumentar

,

se reduce la digestibilidad en

virtud de que el pasaje de la digesta se incrementa.

7.

Cantidad de fibra y/o lignina en el alimento. Como regla general, la digestibilidad de

los

forrajes disminuye conloriiie el porcentaje de fihra aumenta.

3. Diferencia entre las especies : Los bovinos digieren los forrajes mejor que los ovinas, que

a su vez digieren mejor los roncentrados que los primeros ; inclusive entre anitiialw de la

~ i ~ i s i i i a especie existen diferencia.

(10)

1-

I:

c

r

Deficiencias nutricionales : Numerosos experimentoc; indican que la relatka o

absoluta

deficiencia

de

proteina resulta en una reducción

de

la

energia digerible, tambibn

e

notorio que la deficiencia de algunos micro y macro nutrientes (

Mg,

P, Fe,

Co, Mn, Zn )

disminuyen la digestión ruminal.

4.

Factores que afectan el apetito : Cualquier factor que afecte

el

apetito tiene efecto en

la

digestihilidad. estos incluyen tanto

la

naturaleza fsica de la ración como

la

ausencia o presencia de algirn nutrimento o factor que influya el apetito.

5.

Frecuencia en la alimentación ya que a l aumentarse esta, se tiende a incrementar l a

d

igest ibil

id

ad.

6. Preparación del alimento : AI rolar u hojuelear

lm

granos. se aumenta la digestihilidad ; en este ruhro caben los trataiiiientuc que recitien

lo..

esquiliiiw y pajas ( íisicm, quiniicos o

hiol0gicm)

-

7.

Efecto

asociativo del alimento : Se ha observado que una ronibinación de "pellet' de

alfalfa y ensilado de niaiz tiene mayor digestihilidad que estando separados.

8.

Adaptación a cambios de ración : Los niicroorganisnim ruininales requieren como iiiininio 10 dias de adaptación, de no ser as¡ la digestihilidad dkiiiinuiri

MARCADORES

8

Utilización de Marcadores en la alimentación animal.

Un rnarcador es un conipuesto de referencia usado para deterniinacionrs quiiiiicas

(Iiidrólkis y sintesis) y aspectos fiiros de digestión (flujos). Lac inarcadores son usados frecuentemente para estiiiiar el flujo d e la digesta y la salida de heces fecales de los ruiiiiantes, cuando se recuperan las Iieces el marcador es conocido, el consunio de aliciiento total puede

ser calculado de lar Iieces totales colectadas.

El

flujo de la digesta puede medirse ron niarcadores externos adaptando al tract0 digestivo con chulas reentrantes (~ciiado. 191)1).

Auiiaclo a lo aiircrior. los inarcadores se Iian utilizado en diferentes estudi<x; nutririoiiales. roiiio cantidnd <IC aiiiiiciito o nutriiiiento especifico r0&iiii<io; gra<Io cie pwajr ; la tasa (ir

ynsajc de In iiiSc2;tn a traves de tmto o una parte del tracto tligrstivo ; l a digestiliiliJad de tcxio

<i u i i n paric <lei : i i i i i w i i t o y cii la utiliznci<>ii de aliiiirnto en estudio de halanre iiictahóiico.

(11)

En cuanto

a

la

forma tisica del marcador. los

fluidos

pasan

a

travQ

del

rumen más &pido que las particulas pequeñas, y estas

son

mts rápidas que

las

particulas grandes ; sin embargo. todas las velocidades de pasaje se modifican de acuerdo al incremento en el consumo

del

alimento ( especialniente forraje ), increnirntando protrina dietaria, y tanihikn a

las

etapas de gestac ion.

Tanihien

los

marcadores han sido definidos como sustancias inertes, sin efectm toxica que no dehen absorberse ni metabolizarse. tienen que ser ingeridos y excretadm en su totalidad.

s

i

como niexlarse intiniamente con el alimento. Por otra parte al ser utilizados no debe ser afectado, ni afectarse el tract0 digestivo, y por ultimo que sean medibles cuantirarhaniente y

de

facil

deterniinación en el lahoratorio. Sin rmhargo es mrnester mencionar que hasta la

fecha nin@n iiiarcador dkponihle satisfaces todos estos requisitos.

Los

tipos de niarcadores que han sido utilizados en rstudios nutricicinales se incluycn IM

marcadores internos, los cuales son ni;rteriales indigerihles y son consuriiidm en forma natural y marcadores extrrnac, los cuales son sustanciw que son adGionadas o adniinistradas rn la dista en lornia oral o intrarruiiiinal.

Marcadores Internos

Se consideran niarcadore internos

(tabla 1) aquellos que forman parte natural dr la dieta como por ejeiiiplo la lignina que es considerada como una sustancia indigestible y ha sido usada muy extensainente como un marcador en estudios de digestidn ; sin eiiibargo la literatura indica que hay problemas significative con este marcador porque hay una

(12)

TABLA

1.

Marcadores internos que

w n

consumidos en

la

dieta natural

y

aigtmas de

sus

características.

CW

-

pared celular ; G

-

gaiinietria ; US

-

Espurroforomerria de niasas ; i (MMcllado.1991)

detergente

ninguna ninguna

no no

I

I I

.

-

croniarqrafia de gazes

Marcadores

Externos

Un iiiarcador externo (Tabla 2) es aquel que se adiciona a la raciOn y se consuiiie por via

oral. Estos marcadores son de gran utilidad para la identilicaci6n de particulas especificas

(13)

TABLA

2.

Ejemplos de marcadores externos

qne

han

sido

utilizados

en

la

aiimentación animal como

una herramienta

para

la

evaluación de la

digestibiüdad.

Concepto Osidos de Policrilenglicoi Esferas de Compuestos Fibras Compuestos

ninguna conipleja compleja

Preparación simple ninguna simple

flujodigesm si si si si si si

mctaks plástico Quelatados mordrntados

-

.AT = .Abworción aroniica ; N.A

-

.Anal¡+ d r artivaiión de netiftoner.

(Mellado.lW91)

Oxido de Cromo

Este marcador es un polvo verde y prácticainente insoluble en agua, alcohol o acetona pero

ligeramente soluhle en $cidos y alcalis de un peso niolrcular de

151.99

(Merck,1968), cabe mencionar que este

es

uno de la iiiis utilizados coiiio iiiarcador externo en la. pruebas

de

digestibilidad.

Ewe marcador puede adininktnrse coiitinuainente a una tasa constante, o hirn en una sola

dosis. ya sea por inedio del aliinento o por infusi6n ruininal. En el muestre0 se deben toiiiar

pequeñas iiiumtw de la digesta en tieinpos sucesivos.

El

eiiipleo de 6xido de cromo iinprrgnado en papel y suiiiinistndo d w veces al dia. al

inuestrrar peridicaiiiente se obtuvieron recupcracionn del 98

.

99.3

'XI

LAxuilera. 1988). En

el estudio realizado W'ilkinwn, 1970) PC citaii reciiperncioncs ( ! e 6xiclo dc rrot1w en Iicies tiel .i;,,

85 al 91 96

.

Por otro lado, (iitwzm. 1966 1 niencionn haber obtenido Iinsra un 8: O/u de

recuperacibn. Lm bajos porcentajes pueden estar awcintlos ron el iiit't<xto <le suininistro tlrl

iiiarcador y del itiuestreo.

Sin

ciiilinrcc>. .se i i n d w n - n i i ~ i iinn vnriaciim diuriin

e11

In rxcrecii>n

I I

(14)

de 6xido

de

cronio, tenihdase una concentraci6n mis baja durante la noche, lo cual altera

los resultados de recuperacion (Ellis. 1979).

Ademis el 6xido de cromo puede suniinktrarse con otras vehiculas conlo son la pulpa de papel, aliniento peletirado, chpsulas

de gelatina

y el alimento mordantado.

Otra forma de clasificarlas es coni0 iiiarcadores ahsorhihles y no ahsorhihles o niarcadores

fecales. Las primeras son aquellas que se absorben junto con el alimento y son recuperadas

en la orina, mientras que en las no ahsorhihles son sustancias que no se absorben en el

tract0 digestivo y se recuperan en las heces.

Parámetros del Cultivo Continuo

Graris

al

uso de iiiarcadores. se p u d e calcular una serir de pathirtrm d e sunia iiiiportancia

en el skteina de cultivo continuo, conio :

1)Volumen ruminal

-

V @)

-

g de ninrrador infur-ioiiadw

antilogaririiio natural

h

?)Tiempo medio ti/: (h)

-

!EL

k

3)Flujo ruminal

F

@/

Ii )

-

U u n i e n ruiiiiiial g

7 ( t Y z )

D

( h-' 6

'K>

11''

)

-

Fluio ruminal

í

eL

/

h)

4)

Tasa de dilución

( Maynard. 1986; Menens. 1977 y Wilkinan, 1970)

Voluiiien runiinal ( /Ii)

5 )Tiempo de retención Tr (

h

)

-

Volunien ruminal en g (Diill. lY7Y)

Consunio de aliiiieiito

Flujo

de

la

Digesta

A travks del uso de iiiarcadorw indinerihles coino las niencio~iadw anterioriiiente, la

velocidad a In cual el inaterial si)lido a l n i i d o t i a el rumen puede ser ruantificacto , se h a iiii*;trad« que la veloci<lníl de rerainhio sblido del riinirn puede usar.sr para rstiiiiar l a rantidad de proteiiia iiiicrohiana que tia sido sintctizxla. x i conio taiiihicii para wtiiilar ia

cantidad de protrina y carh«lii(lratos $in t l r y r a h r .

(15)

En relaci6n

a

los rumiantes se puede decir que la eficiencia del crecimiento bacteriano

esta

directamente relacionado con la tasa de diluci6n de

las

bacterias y/o del contenido ruminal, pero

las

bacterias en el rumen estan parcialiiiente asociadas con

lac

solidos

y con la pared

ruminal LwiIcra. 1988). lo cual se explica porque solamente en cultivac continuos de estado estable, la tasa de creciniienro especifico ( 11 ) de los niicroorgankmos es igual a l a tasa de

dilucion (D) de cultivo (krgen, 1979).

Fermentación Ruminal como Cultivo Continuo

El

sktenia de cultivo continuo referido 'quiiiiiartato".

ha

sido enipleado por los nutriólcgac para hi esrudio de los aspectos 1vkIcw de la fernienraci6n ruiiiinal. Este sictenia de cultivo controla el creciiniento celular por inedio de

la

tasa de adicion de sustrato y de la tasa de dilucion en un volunien fijo.

Obviaiiirnre, el runien no es una replica exacta de este nidelo, sin embargo. su siiiiilitud en algunm puntos es suíicieiite para aplicar la teoria de alinientaci6n coiitinua. puis aiiibos

siguen cinctiras de priiiier orden (Bergen,

1979).

Un sktema de fernientacibn continuo

esta descrito por la tasa de dilucioii o d e recaiiihio (D),

el volunien (V), la tasa de flujo

(F)

y el tiempo de rerencih (Tr)

&

Definiciones

Desde el punto de vista nutricional el tiempo de tcinsito es un factor iiiiponanre que

determina la eficiencia de utilizaci¿m de una cantidad dada de aliniento. Hay diferentes thtiinos que se utilizan para describir el paso de niaterial ingerido a rravis del tract0 digestivo, como son:

I) TASA

DE DlLUCiON

: E< la cantidad de digesta (coiiio peso o proporciOii del voluinen ruminal) que sale

del

runien en un tienipo dado, In cual se expresa en li' en otras palabras

la tasa de dilución representa la tasa d e ilujo

(F)

por unidad de volunien (V)

7 )

TiEMPO

MEDIO

DE RETENCION:

EI

el tieiiipo en que se retiene la iiiitad de la

digesta en la primera porcidn del fracto gastrointestinal, o bien el tieiiipo que tarda en

salir el

50%

del

iiiarcador í Vaii Soc.ir, 1983 1.

(16)

r

t:

;

I:

1:

I:

!

c

través del fracto digestivo o por ai& scgniento dt éste.

La

forma de calcular el tiempo de tdnsito es comiderando la primera aparición

del

marcador en las heces (Kotb, 1972).

5)

TIEMPO PROMEDIO DE RETENCION: Tiempo que toma para pasar todo el marcador a travh del tracto gastrointestinal (Van h s t , 1983 1.

6)

TASA DE DIGESTION:

Sc refiere a la cantidad de alimento que se puede digerir por unidad de tiempo y es esencialmente una función de la dieta.

7)

DIGESTA : Aiimento ingerido sujeto a digestion dentro del tracto digestivo. ticnicaniente tarirbih incluye secreciones y excreciones de

ICM

órganos digestivos (&:orb, 1972).

Cinética

del

Oxido

de

Cromo

Para determinar el volumen, se asunit que las condiciones de voluiiizn de agua el rumen

permanecen constantes durante el experiiiiento, y la tasa de ílujo de agua dentro y iuera del rumen es continua y pernianece constante en el experiiiiento.

En

esta ticnica una cantidad

conocida de niarcador se administra directamente dentro del ruinen y se tornan niuestras

del

contenido ruiiiinal a dilerentes intervalos de tienipo. Asumiendo una condicioii de

equilibrio y una rápida Iiomogeneización del niarcador con el alimento. obtenidose una

relación exponencial (~ihcwis. 1979 y Van %a. 1903) entre

In

concentracibn del marcador y el

tiempo, que puede expresarse en la e x a h de logaritnio natural y graficarse coino una linea recta (Kotb. 1972 y Van Soen. 1983). Cuando esta linea se extrapola con el tiempo cero, se

puede estimar la concentración del iiiarcador a l tiempo

de

la dwiíicacion (Kotb, 1973).

,

-.

-í_.

F

(17)

1,

5-

c

c

c.

c

F"

C.",

(18)

11.-

JUSTIFICACION

Las zonas áridas y semiarid= representan en Mexico areas con diversas recursas naturales.

las

cuales han sido utilizadas fundamentalmente para el desarrollo

de

una agricultura de riego de corte moderno

ahi

donde lm condiciones topográficas e hidrolbcas lo permiten; para una agricultura de temporal de mucho riesgo dada la incertidumbre climatica que prnalecen en estas zonas; para el aprovechamiento de especies vegetales, foretales, industriales , medicinales. y sobre todo para la ganaderia extensiva, la cual representa la forma predominante de production de alimentos en tales áreas (Toledo, 1985).

Las Iial6fitas son plantas nativas de cc*t;u, estuarios. pantanos y desiertos. son tolerantes a

diferentes rangos de teiiiperatura (Hod:iri. 1980). Sus mecankmos fuiol6gicos les permite aliiiacenar o excretar las sales y sobrevivir a salinidndes mayores a las del mar de

30

a 40,000 ppni y varian

desde

pequenos pastos hasta grandes irboles (Goodin, 1979).

Se h a investigado sobre Iial6fitas de la fniiiilia

Qwnopalinseri.r,

y plantas del ginero

AtripGx

Iian sido estudiadas con el objeto de establecerlas como especies forrajeras rrsisentcs a las sequiw en zonas iridas (Forti. 1971; Forti y [.e\-¡, 1977; Glcnn, 1982 y N.a, 1975), estos arhustw del

ginero Anipkx son costrwas y con veilwidad blanquecina ; hojas alternadas y opuestas. coiiiplrtas o quebradas ; sus llores son unkrxuales v sus írutos encerrados por bricteas. Plantas representati\% de este genero son encontradas en Mtxico. como por ejemplo Atriplrx canexens.

-

En la Republica Mexicana el estudiar estas plantas tiene un inter& especial ya que mis del

40% del territorio nacional presenta caracteristicas áridas y seniiárids (kídidonado, 1976). Se

tia reportado que

AtripGI

cunrszew. tariihic'n conocida como costilla de vaca, rubre cerca de

15 millones de hectáreas en el pais (Gutiirrcz , 1982). con un rendimiento de

6.2 toneladas

de forraje disponible por hectareas en base seca (Maldonado y kguirrc, 1979).

Por otra parte evaluaciones

de

campo Iieclias en Mexico, han corroborado que durante la tpoca

de

seca dicha especie llega ha constituir hasta el 84%

de

la dieta de hovinos en pastoreo.

Atripla

canawns es una planta inuy apreciada por los ganaderos debido a que pernianece verde durante el invierno a d c i n ~

de

periodos criticas de sequia cuando otra

tipos forrajes escasean (Giitii.rrer, 1982).

Sin embargo, algunos autores Iian cuestionaclo que este íornje sea consumido de loriiin silvestre debido a los altos niveles de sal presentes en

las

Iiojz, sobre todo cuando la planta

(19)

i

r-

(20)

d[

L'

I

111.-

OBJETIVOS

General

Evaluar la cinitica de solidas en rumen de ovinos alimentados con dietas que contengan diferentes niveles de hojas de Ampla rnnwms , al inicio de la floraciSn y adenib deterniinar la digestihilidad de materia seca

Específicos

Determinar el porcentaje de digatihilidad de Inateria seca in vk~o

Deterniinar la cantidad de oxido de cromo (niarcador) en las heces fecales de horregas a

las

O. 3, 6,

9.1 2.

24,

36

y

48

hrs para obtener la cinitica de sblidw.

Con estas cineticas de sólidas determinar lw parimerras de sistema de cultivo continuo.

Con la

ayuda de la cinitica de liquidas

,

drterniinar el nivel Sptiiiio de inclusion de A.

(21)
(22)

IV.-

MATERIALES

Y METODOLOGÍA

Material Biológico

El

material vegetativo se colecto en {orina nianual de un rnatorrai natural

del

Municipio de Concepción del Oro Zacatecas y fue secado a temperatura anihiente.

Se elaboró una dieta testigo con heno de avena y alfalfa y tres experinientales en

l

a

que se incluyci

10, 20,

y

30

% de hojas isocalbricas e isoproteicas de A r'anaens

.

Se

eiiipiearon 4 borregm I'istulados ruininalniente y desparasitados tanto interna coino

externaniente. La distribución de lai diem a los animales se aplico al azar si,guiendo un

diseno seudoaleatorio ron estructura de cuadrado latino 4

X

4.

o

Material y

Equipo

hpectrofotóiiietro Cent ri fuga

Digestor de Micro Kjelalil

Matraces volunietricos de 100 iiiL

Matraz Erleniiieyer de 125 iiiL

Pipetas de 5 iiiL

Reactivos

Acido sullurico concentrado Acido perclorico al

6@

06

Molibdato s&iico

Oxido croiiiico

Metodología

A las iiiuestms de conteniclo ruininal se les deterinin6 el pH al nioniento de ser colectadas ( Bateinan. 1970 ) y se les centri¡ug¿) a 3ooO rpiii dunnte 15 iiiin para separar la fase s¿)lida de

la liquida. La fase sdicla la

iiiettdologia (Figura 1) dg Cxrniwki ( 1965 ).

El inarcador se adiiiinisrr¿) cn

toiiiaroii prqiizñas iiiuestra.< (le In diqe.qta <:ii tiriiipw sucesivo<.

se utilizci para la detrriiiinacióii de oxido de croino s&n

.,

'1'

una sola dosis, por infusiim ruiiiinal. En el iiiuestreo se

(23)

Sc deterniino la cinetica ruminal de sdidas nieddiante el marcador oxido de cromo y

se

tomaron niuestm a

las

0,

3,6,9, 17, 74,

36,

y

48

hn.

Preparación de la solución digestora

Disolver 70 g de niolihdato sidico en

300

niL de

H:0

destilada. Afiadir lentamente y con

mucho cuidado

3 0

mL de

H:

SO,

concentndo. Enfriar

la

niezcla y agregar 400 niL de

HCIO, al

60%.

Preparación de

la

curva patrón

-

Dado que el

H:SO+

dkiuinuye la densidad 6ptica de la% extractos de Cr:0, es necesario la

elahorac¡<jn de una ruma estandar p a n tener un patron de referencia y poder determinar la

cantidad de ¿)xido de cromo presente en la; niuestr;LI.

Prepancion : Se pesa 0.1 g (le Cr:O> y digerir. Dejar enfriar y posterioriiirnte aforar en un matraz volunit'trico de ioC, niL con agua dcionizada.

Hacer mrim dilucionm a 1 / 1 0 ,

7 / 1 0 ,

3/iclo.

4/1ocI,

5/1M,

6/100. 7 / 1 0 y leer en

el

espectrolotoriietro a

350 nni.

Digestibilidad

Se detemino la Iiuiiiedad

de

las Iieces fecales y con ello se conocio el porcentaje de niateria

seca y Iiacieiido uso del consutiio se logro conocer el porcentaje de digestibilidnd aparente in t w o

de

la materia sera de cada hrrego, de cada dieta.

Análisis de Varianza

En este estudio lw resultados se analizaron mediante el paquete rstadistico S.A.S.

,

para un niidkiz: de varianza con un tiisciio seudoalratorio con estrurtun de cuadrado latino 4

X

4

( t i i l l , 1978; S r d & Timic. 1080). La difrr&ia entre niedim se analizi) empleando la prueba de

(24)

1.

c:

r

-

L .I

r-

II

c

El

modelo para el diserio referido

es:

Y,,

-

P

+ &+

P,

+

6,

Donde:

Y,,

-

Son las diferentes variables de respuesta como:

Tasa de dilución. Volumen, Flujo, Tr. y Tiempo de recambio

p

-

Efecto de

la

media general

7 ,

-

Efectode la i&iina hilera (animal)

p,

-

Efecto dc la j&nia columna (periodo)

E,,

-

Error aleatorio

i..

P

4 . ”

r“

(25)

Pesar por duplicado lg de digata ruminal

de las 0.3,6.9.12,24,36 y

48

hn. Colocar en un matraz Erienmever de 125

m L

I

Agregar

15

nil. de la soluci6n digestora'

I

If.

las parrillas del digestur

la reniperacura (digestidin) microkjeldahl ), calentar hasta que ocurra iin cambio del color obscuro a verde d ~ o

Meirlnr la solución y evitar que no se

pegue en las paredes del inatrai

I

reposar 17 hrs

I

I

&far a ebuiiición hasta que el color vire de

verde a amarillo ( 15 a

30

m i n )

.1

Dejar que la digestión continue 15 min m i s

para asegurar un miximo desarrollo del color

!I

üejar entriar la so ucibn y posteriorniente transferirla a un matraz voliimétrico de

io0

InL

y aiorar con agua destilada

\L

h e r en el espmroforómetro a 350 nm

y comparar con una cum eirindar de C r 2 0 3

Figura 1

.

Diagrama de

flujo

que r e p r e s h a el procedimiento para la

(26)

._*

c

c

r-

L".

c-

I-

C

....

r-

(27)

V.-

RESULTADOS

Y DISCUSIONES

Digestibilidad de

A.

canescens

Se determino el porcentaje de Iiuniedad de las Iieces ferales de cada borrego para conwer

el

porcentaje de niateria seca de cada muestra y con estos datm v

el

conrunio del alimento se conocio la digestihilidad. De acuerdo a lo que propone (Piigp, 1981) donde menciona que la eztiniacihn de las heces son usados en conjuncion con

los

datas d d consumo del alimento para calcular la digestihilidad.

Los resultado:: de los porrcntajrs de Iiuiridad, niateria sera y cowuiiio para olxrner rl coeficiente de dipstihilidad (11 t i t o de las diferentes dietas de A. i m w w m analizada en este estudio anexo 1.

En hase a eatcw resultados se realizh un proniedio de digestihilidad para cada borrego

correspondiente a su dieta y se o b t u i e r u n los datos que aparecen en la Tabla 3.

-

TABLA 3.

Porcentaje de digestibüidad de A. canescens de las

4

dietas aquí analizadas.

2

3

4

1 7 3

4

1

2

3 4 1 3 -1 1

-

2

4

3

7

1 3

4

3

4

1 7

4

3

2

1 1 1 1 I

2

7

2 3 3 3 3

4

4

4 4 81.33 78.56 87.89

80.7 1 80.89 78.17 m.75 17.50 76.15 83.50 82.88 78.92 81 7 1

81.29

a m

(28)

Cahe mencionar que

los

valores de la digetibilidad in titso

de

A. cana-ms,ohtenidos en este

trabajo son altm en coniparacion

a

los

reportados en la literatura (

de77

a

73.5

%

) para

las

tres dieta-: (S\vingle.1996). Sin embargo hay que considerar que

el

reporte

de

dicho autor corresponde a horregos que consumieron mác del

110%

del forraje de A. c n n a a u y aden& ni&

de 50%

de agua por kg de materia seca consumidas ; mientras que en las iiiuestw aqui analizadas consitio en un consumo restringido, es decir no sobrepmaha el 100% del aliniento consumido. Por lo que pudo haher un iiiayor aprovechaniiento del aliniento y con ello una niayor dipestihilidad.

Por su pane con respecto a la dieta testigo compuesta de heno de alfalla y avena re comparo

con estudios del porcentaje de iiiatrria seca aparente de alfalfa (Teerzr,I993), en la cud

nos

indica q u e el porrrntaje (ir ctigesrihilidad de iiiateria seca e.< del

83%.

niientra que en el análisk de *te estudio se ohtuvo aprosiiiiadaiiientc un

81%

por lo que los resultados son muy seiiiejantes.

Ateni& se ohtu\-ieron altos valores

<Ir

tliqrstihilidad porque el A. innesims es u n Corraje que

no contiene dentro de su coiiipuqiri<iii quiiiiira lignina por lo tanto es iiiuclio niayor su

d igestihilidad.

Análisis estadístico del porcentaje de digestibilidad

Posteriorniente se efxtuo su andisis cstadistico tabla 4 y se verifir6 que n o hubo variaciones signilicatiwu entre iiiedia analizada con la prueba de Tukry con un nivel de significancia de (

P<

0.05).

TABLA

4 .

Análisis Estadístico del porcentaje de digestibiüdad

avarente

in

vivo de

A.

canesceni.

-

I

Digestihilidad

(1.68)

(1.44)

(3.07)

(7.045)

I

I I

' e s l a Media

(29)

Lzr

5

B

P

c

:a

__1_p__________

:

D

Cinéticas

de

Óxido

de

cromo

Todas

las

calculos que se realizaron para obtener las cineticas

del

inarcador oxido

de

cromo para cada borrego. periodo y dieta respectivamente (anexo 2) y de esta fornia se

evaluaron

los

paraiiietrm

de

cultivo continuo.

r",

1

3

L -. .

- D

En el análisk rnateiiiitico de las cunw que relacionan la concsntracion

del

marcador en

las

heces contra e1 tieriipo de postdosificación incluyen un tieiiipo de retraso antes de la primera aparicibn

&I

niarcador en Is Iieres. h t e es interpretado ronio el tieiiipo de transito de

las

particulas aliiiienriciai al pwar por todo el tract0 gaitrointestinal (Chiirch.1988). Pan un

reactor real de ilujo nietclado (quiniiostato) cuando se inyecta

un

inarcador en alta cuncentraci(>n se tiene una salida conlo lo iiiue1;tra la f i r a 2.

[=D

Tiempo posldosificacion

L

Amricidn del marcador

Dosis

Figura

2.

Curva tipica que relaciona la concentración de

un

marcador

en las heces

a

un tiempo de postdosificación.

Adeniis

(kenspicl, 1995)

Las cineticas oirteniclai iii<wtr;ir<>ii en ceneral una Ioriiin (Ir raiiipana siiiiilar al <IC la íimra

anterior en donde claraiiicnte ?e olvcrva q u e en Is priiiicrn.q liorai no Iiav una cuaiitiíiracion

de ¿'xido de rrorlio ronsidernlilc y es 1:) rn:i>ii por In c l u r pnrn olnwer estos rilculos se tonib 23 entre inis lorma de raiiipana presente nienos coniportaiiiiento ideal tendra

(30)

en cuenta hasta las primeras

17

horas, f4Fim 3 ; por lo que estas tienen un comportamiento de reactor real de flujo mezclado. Esto ocurre porque el marcador al principio de la

inyección no se encuentra totalmente homogeneo porque en los sólidas es niás lento SU mezclado, debido a la menor rapidez de transferencia de maca presentada en esta fase.

Coincidiendo con (Lan.land:, 1975). que ohsemó que hay variaciones en la excreción de óxido de cromo debido a que hay un mezclado incompleto entre la digesta y el indicador en el

tract0 gastrointestinal.

O 10 x ) 3J 40 50

TlEMW

Figura 3. Cinética general de la salida del marcador de las muestras de

A.

canescens

analizadas en este trabajo.

De estas cineticas (anexo 3) se considero el punto nxiximo de concentración que fue a las 12

h

y a partir de esta comenzó a descender Iiasta las

48

h

y se torno esta parte de la griliia

para sacarle el logaritnio natural obtener la pendiente y

la

ordenada al origen. datos que posteriormente sirvieron para calcular una serie de parjnietros de suma importancia en el sistema de cultivo continuo aplicado a el rumen de borregos.

Los

valores de los parametros cineticos (tabla 5) íueron calculados a traves de la pendiente y

la ordenada al origen del anilisk de cada grifiro del horrego, pericxlo y dieta respectivamente. Despues &tos valores fueron aplicados en las fdrniuls de volumen ruiiiiiial

(31)

-i

TABLA 5.

Parámetror cinéticos de cultivo continuo caicdado a través

4-

de

ia

pendiente

y ia

ordenada al origen de cada borrego,

periodo

y

7

, ”,.,..

dieta.

2 2 1 1736 16.8 51.7 0.03 115 1506

3 4 1 1743 17.5 49.7 0.03 132 1318

4 3 1 1744 18.0 48.4 0.03 137 1318

1 2 7 1137 27.6 75.7 0.02 118 966

2 1 2 1135 71.9 26.0 0.02 81 1399

3 3 2 1141 70.7 77.5 @.O? 86 1375

4 4 7 1140 71.7 76.7 0.07 86 1325..

1 3 3 1681 70.1 41.8 0.02 167 1040

7 4 3 1683 19.1 43.9 0.03 127 1323

3 1 3 1683 20.8 40.5 0.07 177 1373

4

Z

3 1685 70.5 41.1 0.02 148 1139

1

4

4 1484 76.6 77.9 0.02 175 1186

2

3 4 1483 25.7 28.9 0.02 98 1512

3 2 4 1480 76.4 28.1 0.02 112 1323

4 1 4 1478 76.8 27.6 0.02 117 1373

Jjo ruminal, Des la dilucion , C cs el corisunio

Análisis Estadístico

de los

criterios cinéticos

Gracia< al uso d e este niarcador se pudo calcular una serie de paritiietros de suma

iiiiponancia y adeniis con ayuda del paquete rstndistico SASS se obtuvo la coriipararii>n entre dietas que es el íundariirnto de esre trahajo y verificar 1% variaciones sigiiifirativs

(32)

TABLA 6.

Análisis

estadístico

de

los

parámetroo cinéticos para 1742.8A (5.14) 17.19' (0.7144) 50.76,' (Z.13) 0.03' O

1 2 76.5 .' (225.29) 140A 1138D (2.6) 21.73' (0.7576) 16.71 (0.964)

O.?.

'

0 1753.98.' (194.65) 92.73' 1628.87' (1.75) 20.12* (0.7) 41.85' (1.4136) 0.012 O 1306.27' (140.87) 140.99 A

1481.17 (2.74) 26.34 A

(0.489)

L8.17' ( 0.55)

0.02

- 0

1335.7' (133.91)

111.71'

.*

Media

resultados con paréntesis es la den-iacioii cztaiidar

Keiiiltador con diferentcs letras superscriptas Lon rrtadisticanicntc signifirativas

(P

5 0.05)

Si

coiiipaniiios el volumen ruiiiinal de cada dieta, claraniente ohsc~anios que todas son signiíicativariiente dilerentes debido a..., pero tornando en considitncibn la dieta testigo, el

valor ni& cercano a este es la dieta 3.

En cuanto a l ticiiipo niedio de reteiici6n es de

72.7

h en diet= conipurstas de avena. 18.54

Ii pan cronio quclado con EDTA y 25 Ii para croiiio iiiordaiitado se@n los estudios

reportados por (Nñiicíra, 993 ; I-'aichnc?., 1%: y !&nre,i<>91) reqxctivaiiiente. ron lo cual

considero que los valores ohtenidm para las dietas en wtudiw se riicurntran en este

inten.alo. Haciendo una coiiiparaciih entre Ins dirtas

2

,

3 y la testigo aunque si Iiay una

diferencia significativa, de cualquier fciriiia estw son las ni& parecidas con respecto a l a testifp.

Tciiriraiiirntc

I;LI

n trav+s de la

perdida de sustrato no fernicntado, In cual coiidiire a una redurcii>n cti In dieestihili<lnd y una coiiiprtrncia entre l a dilurii)ii y el tiempo tlr jxneracii>ii cclular ( . i w i i t , r , i , IW,Y

%ern, I 9 7 9

d e diluci¿>ii iiiuy alta..

.

piirdcn Causar tiehirnrins

(33)

Cabe mencionar que con respecto a este criterio el valor obtenido para la dieta testigo

es

bajo

en comparacion con

el

reportado en bibliografía ; puesto que en este estudio se obtuvo una dilución de 0.07

kt

y fleeter, 1983) reporta que para una dieta de alfalfa obtuvo una dilucion

de

0.06

.

&to puede ser debido a que la dieta está conipuesta solo de alfalfa y no contiene avena. En un reporte

de

(Luginbuhl, 1994) menciona que la dilución de cromo fue

de

0.0201

a

0.0247

y esta bxriacion se debió por el nivel de consumo.

Comparando la dilucion

de

las diferentes dietas aqui analizadas. la que tiene una dilución iiiayor es la dieta 1, lo que significa que tiene una menor digestibilidad que puede ser por la

perdida de sustrato no fermentado o porque es ink dificil degradarlo.

Y

en las diluciones de

las diets

2

Y

3

son nienores y no hay varianza significativa, e s o quiere decir que tienen una iiiayor digestihilidad porque es ni& íicil degradarlo ; con lo cual podeiiios obsenmios que ladiets 7 y 3 pueden ser

las

adecuadas para consumo de rumiantes.

Ahora bien, si compararnos el porcentaje de digestihilidad aparente con la dilución del marcador nos danios cuenta que las dietas tienen un coiiiportaiiiiento adecuado. es decir que a una iiienor dilución se presentó una iiiayor digestihilidad ; con lo que se conohora l a

relación de ariihm datos.

Los distinta eleiiienta< del fluido al seguir diferentes camina.. a lo largo del reactor tardaran tieiiipw diferentes en pasar a su travh. La distribución de estw tiriiipos en la corriente de

fluido que sale

del

recipiente se dcnoiiiina distribución de la

edad

a la salida, o distribución

del tiempo de residencia

RTD

del

fluido (El t6riiiino edad

de un elemento en la corriente

de

salida se refiere al tienipo que dicho elemento pernianeció en el recipiente (kvenspiei. 1995).

Los datos reportadm en bibliografia con

base

a lm valores de tieiiipo de retención son de

80

a

104

h

y IK disminuyendo el tiempo conforme

el

porcentaje de consumo va aunientando (Luginbuhl,I994) ; esto quiere decir que entre niás se consunia alimento nienos tiempo

de

retención hay y esto puede ser porque

el

alimento al ser en una cantidad mayor pa: ,a niuy

rápido por el tract0 digestivo y no se digiere bien. Con respecto a los datos obtenidos ( de

34

a 52

Ii

) no coinciden con

las

de la literaiura y esto puede ser porque se obtuvo valores altos

de la digrstibilidad y adeiiik el consuiiio estuvo restringido y e s o prriiiitió que todo lo que se consumió fuen digestible.

En cuanto a I<w valores ohtenidos en este análisis. Iias diferencia significativa entre la dieta testigo y lw diet= en estudio. Sin eiirhnrgo las diet= que nib parccidns son ron la dieta

(34)

II

P

i

I

....

I

c

I

(35)

r:

rl

F

I;

-

B

VI.-

CONCLUSIONES

Se pudo determinar saticlactorianiente el %

de

digestibilidad aparente in t w o niediantc el consunio. excrecion y

el

porcentaje de materia seca de cada uno de

los

borregos que conforniaron las

4

dietas.

Se logro llevar a cabo los ensayas para ohtener las cineticas de

la

fase súlida runiinal de lac diierentes borregos siconio tanihit'n la cuantificaciún del marcador (oxido de cromo) en el

iiitewalo de O a

4s

lirs ,

En hase a los valores encontrados coni0 el porcentaje de digestihili<ía~i aparente in w o

,

el volunien ruiiiind. rl flujo runiinal. la diluci¿h

,

tieiiipo iiicrdio y tienipo de retenciún en 1%

diferentes dietz de A. canescm aiializn<is representan un forraje con p<?tciiZal yarn l a alinientaciún de riiiiiiantes en

las

zonas irid%< y seiiiiiritlas de Xlixico. Sieiiipre y cuando se

IC

incluya a la dieta d e estos aniniales en una concentracion

del

20 30 40 d e A. cmesceris porque esta íiieron las dietas sefialnda con los datm analizados anteriorniente coino las

iiirjorc, ya que no hay ilit'erencia si,miiicativa entre lm pariiiietros cinitiros de lac dietas

7

y 3 para

la

tt'cnica aqui analizada.

Con ayuda de

la

ticnica de deterniinacion de Polierilenglicol (PEG) en la fase liquida (que es

una tknica ni& sensible por In niayor rapidez de transferencia de n i a s (lieriiindc;l~r)7)

,

la dieta que es iiiejor nsitiiilada por 10s horregos es la dieta

7 que tuvo un nivel

de inrlusiún del

70

% de A. ('nnescens.

c

Por

lo

tanto hajo esta concentraciún, esta planta puede ser utilizada para el consunio de

runiiantes en sustitucidn de otros forrajes que

no

resultm viables cultivarlos o que las condiciones geográficw no lo perinitan.

&,.

b

-8.

-1

;

i..,

! L

i

Pi,.

1 u-

NOTA : Para el desarrollo de e%te proyecto y llegar 3 una conclusidn se necesita de Ins

resuitadas de wriw tknicas anaiiticas. para fines pricticos la conc~usioii a la que se IlegÚ es

flexihle debido a la falta de otros resultados que ya no estan al alcance de este trabajo y solo

(36)

.-

* / I

L...

(37)

i

i

VIL- RECOMENDACIONES

AI hacer la cunx patron se dehe diluir con

H:

SO, y no con agua, si conio tariihicn

las

diluciones.

La curva patron se realizari junto con una niuestra

al

azar para determinar que las ahsorhancias de la muestra entraran en el intendo de la curva estándar, adeniis se liaran

varins repeticiones

hwta

que haya una ertandarizacion porque de ello depende los

resultados de

I=

iiiueztra de interis.

La

digestión de 1% inuestrw dehe efectuarse generalmente por el canihio de color y no por el tiempo, porque no es tan exacto.

..

Pan acortar el tiempo del andisis, en vez de esperar a que Ocurra una sediiiientacion se puede centrifugar y se ohtienen resultados siiiiiiares.

El

tainaño de particuia de la niuetra dehe ser honiogeneo porque de lo contrario hay

iariacion considerahie en

Ins

lecturas.

(38)

c

(39)

[E

r';

I

3

VII1.-

AGRADECIMIENTOS

i

J

Al

Dr.

Sergio Huerta Ochoa por su apoyo y por creer en mi honestidad. justo en el instante cuando todo parcia perdido.

No puedo dejar desapercibido a alguien muy e3pecial que sin conoceriiie crrvo en ni¡ y me

proporrionó su apoyo iiiconriicional al revisar este trabajo. alhwirn que riie

lia

dejado un grato recuerdo. Graciw Or. Ernesto Favela.

.-

e

A todos aquellos que intewiiiieron en la clahoraci6n de este trahajo. graciw por

ronocerloi: y enseñariiie lo que no se dehe ser y Iiarer

(40)
(41)

IX.-

BIBLIOGRAFIA

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TABLA  1.  Marcadores internos que  w n   consumidos en  la  dieta natural
TABLA 2.  Ejemplos de marcadores externos  qne  han  sido  utilizados  en
Figura  1  .  Diagrama de  flujo  que r e p r e s h a  el procedimiento  para  la  determinación de Óxido de cromo en las heces fecales
TABLA 3.  Porcentaje de digestibüidad de A. canescens de las  4
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