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Determinacin de Malassezia en nios menores de cinco aos de edad con dermatitis atpica Estudio comparativo con nios sanos

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Artículo original

Determinación de Malassezia en niños menores de cinco años de edad

con dermatitis atópica. Estudio comparativo con niños sanos

Verónica Aguilera Martínez,* Francisca Hernández Hernández,** María del Camen Padilla Desgarennes***

* Dermatóloga, práctica privada.

** Profesora titular de tiempo completo. Departamento de Micro-biología y Parasitología, Facultad de Medicina, UNAM. ** Jefa del Laboratorio de Micología, Centro Dermatológico Dr.

Ladislao de la Pascua, SSDF, México, DF.

Correspondencia: Dra. María del Carmen Padilla Desgarennes. Centro Dermatológico Pascua. Dr. Vértiz 464, colonia Buenos Aires, CP 06780, México, DF.

Correo electrónico: [email protected] Recibido: marzo, 2010. Aceptado: abril, 2010.

Este artículo debe citarse como: Aguilera-Martínez V, Hernán-dez-Hernández F, Padilla-Desgarennes MC. Determinación de

Malassezia en niños menores de cinco años de edad con dermatitis

atópica. Estudio comparativo con niños sanos. Dermatol Rev Mex 2010;54(3):120-124.

www.nietoeditores.com.mx

RESUMEN

Antecedentes: la dermatitis atópica es una dermatosis inflamatoria, reaccional, de origen multifactorial y frecuente en la práctica diaria

del dermatólogo. Varios estudios han demostrado la asociación entre la dermatitis atópica y la colonización por diversas especies de

Malassezia, quepuede agravar la dermatitis atópica por una reacción de hipersensibilidad.

Objetivo: determinar la colonización por Malassezia en la piel de niños menores de cinco años de edad con dermatitis atópica

compa-rados con niños sanos.

Pacientes y método: en este estudio realizado en el Centro Dermatológico Pascua se comparó la colonización por Malassezia en la piel

de niños con dermatitis atópica vs niños sanos.

Resultados: se encontró una frecuencia de colonización de 7.7% en niños atópicos y de 3.3% en niños sanos. Las especies identificadas

con más frecuencia fueron: M. furfur, sympodialis y slooffiae.

Conclusiones: la frecuencia de la colonización por Malassezia fue mayor en el grupo de pacientes con dermatitis atópica que en el grupo

control; además, en la mayoría de los enfermos hubo relación entre la colonización y la severidad de la dermatosis.

Palabras clave: dermatitis atópica, Malassezia, identificación de especies, colonización, hipersensibilidad.

ABSTRACT

Background: Atopic dermatitis is an inflammatory and reactional disease, with multifactorial origin, frequent in daily practice of

dermatolo-gist. Several studies have demonstrated association between atopic dermatitis and colonization by different species of Malassezia, which

may worse atopic dermatitis due to a hypersensitivity reaction.

Objective: To compare colonization by Malassezia in skin of younger than 5-year-old children with atopic dermatitis with that of healthy

children.

Patients and methods: At Centro Dermatologico Pascua, Mexico City, it was performed a study comparing colonization by Malassezia in

skin of children with atopic dermatitis vs healthy children.

Results: Colonization-frequency found was of 7.7% in atopic children and of 3.3% in healthy children. The most frequently identified

spe-cies were: M. furfur, sympodialis and slooffiae.

Conclusions: Frequency of Malassezia-colonization was higher in the group of patients with atopic dermatitis than in control group;

more-over, in most patients there was a relation between colonization and dermatosis severity.

Key words: atopic dermatitis, Malassezia, species identification, colonization, hypersensitivity.

L

a dermatitis atópica es una dermatosis infla -matoria, reaccional, de origen multifactorial y frecuente en la práctica diaria del dermatólogo; su incidencia ha aumentado en los últimos tiempos.1 La prevalencia de la dermatitis atópica varía en cada país, área socioeconómica y grupo de estudio; se han comunicado cifras que van de 0.7 a 31%.2 Según la Asociación Internacional de Asma y Alergia en Niños (ISAAC), es de 2 a 20% a la edad de 6 a 14 años.2-4

(2)

recidivante, con remisiones y periodos frecuentes de exacerbación.

La variedad del adulto, cuando afecta la cabeza y el cuello, se ha asociado con Malassezia, cuya participación en la génesis del padecimiento ha sido motivo de contro-versia; en niños con dermatitis atópica es de particular interés buscar la colonización por Malassezia, ya que en ellos la piel enferma y la aparentemente sana muestra características que podrían facilitar la colonización por esta levadura.5,6 Asimismo, la colonización por especies de

Malassezia y Candida puede agravar la dermatitis atópica por una reacción de hipersensibilidad.

OBJETIVO

Determinar la colonización por Malassezia en la piel de niños menores de cinco años de edad con dermatitis atópica comparados con niños sanos.

MATERIAL Y MÉTODO

Durante siete meses se realizó un estudio prospectivo, transversal y comparativo de casos y controles.

Casos: niños y niñas menores de cinco años de edad

con diagnóstico clínico de dermatitis atópica, de acuerdo

con los criterios mayores y menores de Hanifin y Rajka,

de cualquier grado de severidad, enviados de la consulta general del Centro Dermatológico Pascua.

Controles: niños y niñas sanos, menores de cinco años

de edad.

Se excluyeron los pacientes que recibieron tratamiento con antibióticos o antimicóticos (o ambos) cuatro semanas previas a la toma de la muestra.

En ambos grupos se proporcionó hoja de consentimien-to informado.

El grado de severidad de la dermatitis atópica se va-loró, antes de tomar las muestras, mediante la escala de Evaluación Global del Investigador (IGA, por sus siglas en inglés).

Grado 0: sin signos inflamatorios de dermatitis ató -pica.

Grado 1: sólo con eritema apenas perceptible, pápulas e infiltración.

Grado 2: eritema leve, pápulas e infiltración. Grado 3: eritema moderado, pápulas e infiltración. Grado 4: eritema severo, pápulas e infiltración.

Grado 5: eritema muy severo, pápulas e infiltración con

exudado y costras.

Se tomaron muestras de piel en tres ocasiones –de la mejilla derecha, la región esternal y el pliegue antecubital derecho– con cinta adhesiva transparente y por raspado con hoja de bisturí, con intervalo de una semana.

Las muestras tomadas con cinta adhesiva se tiñeron con solución de Albert (ácido acético glacial, agua

desti-Figura 2. Levaduras redondas en el examen directo del pliegue

antecubital.

Figura 1. Lactante menor con dermatitis atópica grado 2 de la

(3)

Figura 3. Colonias rugosas blanco-amarillentas de aspecto

cre-moso. lada, etanol, verde de malaquita) y tinta Parker azul, para

examen directo, con el fin de determinar la presencia de

Malassezia y su morfología. Las muestras tomadas con bisturí se sembraron en cajas de Petri en medio Mycosel agar con aceite de oliva al 10% y se incubaron durante ocho días.

Los cultivos positivos se procesaron en el Laboratorio de Micología del Departamento de Microbiología y Parasi-tología, de la Facultad de Medicina de la UNAM, en donde

se resembraron en agar Dixon modificado y se incubaron a

32ºC durante 10 días. Se evaluó el aspecto macroscópico y microscópico de las colonias, se realizó tinción de Gram y se observaron el tamaño, la morfología, el tipo de gema-ción y el ancho del cuello de las mismas. Posteriormente, se resembraron en agar dextrosa Sabouraud, se realizaron

pruebas fisiológicas, como la reacción de la catalasa y

la asimilación de Tween (20, 40, 60 y 80) y se valoró la

capacidad de crecimiento a 32 y 37ºC para identificación

de las especies.

RESULTADOS

Se incluyeron 180 niños, 90 con diagnóstico de derma-titis atópica y 90 sanos; 39 (43.3%) niños con dermaderma-titis atópica y 44 (48.9%) del grupo control correspondieron al sexo masculino.

Los límites de edad en el grupo de estudio fueron dos meses y cinco años, con distribución semejante entre am-bos grupos; se agruparon en lactantes menores, mayores y preescolares (Cuadro 1).

observaron abundantes levaduras redondas y algunas gemantes, y sólo en 1 caso (10%), levaduras ovaladas,

grandes y con filamentos anchos, gruesos y cortos en

forma de “s” cursiva (Cuadro 3).

Cuadro 1. Grupos de edad

Edad en años Atopia n (%) Sanos n (%) Total

Lactante menor 19 (21) 17 (19) 36

Lactante mayor 38 (42) 28 (31) 66

Preescolar 33 (37) 45 (50) 78

Examen directo

De las 180 muestras tomadas para examen directo, 10 (6%) fueron positivas para Malassezia; 7 (7.70%) de ellas correspondieron a niños con dermatitis atópica y 3 (2.2%) al grupo control (Cuadro 2).

Predominaron las levaduras redondas en 7 casos (70%), 5 de niños atópicos y 2 de sanos. En 2 casos (20%) se

Cuadro 2. Examen directo

Casos Dermatitis atópica Sanos Total Porcentaje

Negativo 83 87 170 94

Positivo 7 3 10 6

Total 90 90 180

Cuadro 3. Estructuras de Malassezia observadas en el examen

directo

Estructuras de Malassezia Atópicos Sanos Total

Escasas levaduras redondas 5 2 7

Abundantes levaduras redondas,

ovaladas y algunas gemantes 1 1 2

Escasas levaduras redondas con filamentos anchos, gruesos y cortos en forma de “s" cursiva

1 0 1

(4)

Figura 5. Abundantes levaduras redondas y algunas gemantes. Figura 4. Lactante menor con dermatitis atópica grado 2 de la

Evaluación Global del Investigador.

En el grupo de niños atópicos se obtuvieron 5 mues-tras positivas (5.6%) de lactantes menores (2 mujeres y 3 hombres); en preescolares 2 (1 niña y 1 varón, 2.2%), en lactantes mayores, ninguna.

En el grupo de niños sanos se obtuvieron 3 (3.3%) exá-menes directos positivos, 2 de lactantes menores menores y 1 de preescolar.

Se encontró Malassezia spp en la frente en 7 casos (70%), 5 con dermatitis atópica (50%) y 2 sanos (20%). En 3 (30%) casos se encontró en el pliegue antecubital derecho y no hubo ningún examen directo positivo de la región esternal (Cuadro 4).

Cuadro 4. Colonización por Malassezia en diferentes topografías

Topografía Niños con der-matitis atópica

Niños sanos Total

Frente 5 (50%) 2 (20%) 7 (70%)

Región esternal 0 0 0

Pliegue antecubital

derecho 2 (20%) 1 (10%) 3 (30%)

Dos lactantes menores con dermatitis atópica y examen directo positivo para Malassezia tenían dermatitis sebo-rreica de la piel cabelluda; el porcentaje de asociación de dermatitis atópica con dermatitis seborreica correspondió a 28.5%.

Se obtuvieron cultivos positivos en d o s niñas (20%),

una de cada grupo de estudio. Las especies identificadas

fueron M. furfur y M. slooffiae en la paciente atópica, en tanto que en la sana correspondieron a M. furfur, M. sympodialis y M. slooffiae.

Al correlacionar el grado de severidad de la dermatitis atópica y la colonización por Malassezia se encontró, en nuestro grupo de estudio, que de los 7 pacientes con der-matitis atópica con exámenes directos positivos 3 (37.7%) estaban en grado 2 de la Evaluación Global del Investi-gador y 4 se ubicaban en los grados 3 a 5 (de moderado a muy severo).

DISCUSIÓN

(5)

publi-caciones y que se atribuye a las peculiaridades de la piel en este grupo de pacientes y a la aplicación de ungüentos

oleosos con fines terapéuticos.7

Hasta el momento se han descrito por métodos morfológicos, fisiológicos y moleculares 13 especies de Malassezia (furfur, pachydermatis, sympodialis, globosa, slooffiae, restricta, obtusa, dermatis, japoni-ca, nana, yamatoensis, equi y caprae);las que se han relacionado con más frecuencia con dermatitis atópica son M. dermatis y obtusa.8-12 En México, Hernández-Hernández informó que M.sympodialis y slooffiae se relacionaban con más frecuencia con dermatitis atópi-ca.13 En el presente estudio se identificaron M. furfur y slooffiae.

De los 180 pacientes estudiados, en 10 se obtuvieron exámenes directos positivos, de los cuales únicamente en dos se cultivó Malassezia, lo que demuestra la importancia

del examen directo para la identificación de esta levadura, el cual es suficiente para demostrar la colonización por

Malassezia.

Aunque el grupo de pacientes con dermatitis atópica –en quienes se encontró examen directo positivo para

Malassezia– fue muy reducido, pudo comprobarse que en la mayoría de estos enfermos hubo relación entre la colonización y la severidad de la dermatosis.

CONCLUSIONES

El grupo de pacientes en quienes se encontró Malassezia

estuvo conformado en su mayoría por lactantes menores en ambos grupos. La topografía de donde se aisló la levadura con mayor frecuencia fue la región frontal y no se obtuvo ningún aislamiento de la región esternal en ningún grupo. Las especies de Malassezia identificadas fueron furfur,

sympodialis y slooffiae.

REFERENCIAS

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Figura  1 .  Lactante  menor  con  dermatitis  atópica  grado  2  de  la
Cuadro 1 . Grupos de edad
Figura 5 . Abundantes levaduras redondas y algunas gemantes.Figura  4 .  Lactante  menor  con  dermatitis  atópica  grado  2  de  la

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