Crecimiento poblacional y nivel proteico de Arthrospira jenneri “espirulina” en base a residuos de pescado, con el cual estoy cumpliendo con uno de los requisitos para optar el título de Biólogo Pesquero

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(1)DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(2) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AC I. Ó. N. DEDICATORIA. A Dios:. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. Por haberme permitido a través de su ejemplo de vida a desarrollarme como persona, como hija y como estudiante.. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. A mis padres: Ramiro y Julia, que me inculcaron amor, constancia y fe, por su invalorable e infatigable esfuerzo, estímulo hacia el camino de la superación. Hoy puedo ver alcanzada mi meta, ya que siempre estuvieron impulsándome en los momentos más difíciles de mi carrera, y porque el orgullo que sienten por mí, fue lo que me hizo ir hasta el final. Va por ustedes, por lo que valen, porque admiro su fortaleza y por lo que han hecho de mí, una buena hija profesional.. CC. A mi hermano: Richard,. DI. RE. Por su apoyo incondicional, comprensión y paciencia.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(3) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. AGRADECIMIENTO. N. Expreso mi más sincero agradecimiento a todos los profesores de la. AC I. Ó. Escuela Académico Profesional de Pesquería que con sus enseñanzas y. IC. orientaciones contribuyeron a mi formación profesional.. M UN. Un especial agradecimiento a la Dra. Alina Zafra Trelles por su paciencia, dedicación, sus consejos y valiosas instrucciones brindadas para la realización. CO. de la tesis.. A. Y. Agradezco al Dr. Fernando Merino Moya, docente de la Escuela de. ÁT. IC. Biología en Acuicultura de la Universidad Nacional del Santa por su apoyo. RM. brindado en la realización de la tesis.. FO. A mis amigos Roger Sebastián, Raúl Fernández, Gisela Reyes y Paolo. IN. Amaya que han sido participes de mi formación profesional por brindarme. DE. momentos alegres y tristes, por demostrarme que podemos ser grandes amigos. EM AS. y seguir manteniendo una amistad sincera. A Melina Rosas y Jhoanna Briceño por su apoyo moral y desinteresado. ST. durante el desarrollo de mi tesis por compartir momentos de bromas y alegrías. SI. durante el desarrollo de nuestros proyectos.. DE. A Ángel Mendoza, por su apoyo incondicional y por ser un constante. IO. N. estimulo de superación en mi vida.. CC. Y gracias a todos mis amigos, familia y profesores que ayudaron directa. DI. RE. o indirectamente en la realización de este trabajo.. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(4) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M UN. CO. Dr. ORLANDO VELASQUEZ BENITES. IC. RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. AC I. Ó. N. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. A. Y. VICE-RECTORA ACADÉMICA. FO. RM. ÁT. IC. Dra. VILMA JULIA MÉNDEZ GIL. IN. DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS. EM AS. DE. Dr. HERMES ESCALANTE AÑORGA. ST. DIRECTOR DE LA ESCUELA. JEFE DE DEPARTAMENTO Dra. BILMIA VENEROS URBINA. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. Dr. ANDRÉS RODRÍGUEZ CASTILLO. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(5) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. N. DEL ASESOR. IC. AC I. Ó. El que suscribe, asesor de la presente tesis,. CO. M UN. CERTIFICA. A IC. y con las orientaciones pertinentes al tesista.. Y. Que esta ha sido desarrollada de conformidad con su correspondiente proyecto. ÁT. En cuanto al informe, éste ha sido revisado y acogiendo las observaciones y. FO. RM. sugerencias alcanzadas, por lo que autorizo al Bachiller ERIKA JULISSA. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. ALAYO RODRÍGUEZ, para continuar con los trámites correspondientes.. CC. Dra. Alina Zafra Trelles. DI. RE. ASESORA. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(6) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M UN. IC. SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR. AC I. Ó. N. PRESENTACIÓN. CO. En cumplimiento con las disposiciones vigentes en la Facultad de Ciencias. Y. Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, me es grato someter a vuestra. IC. A. disposición la presente tesis titulada: Crecimiento poblacional y nivel proteico de. ÁT. Arthrospira jenneri “espirulina” en base a residuos de pescado, con el cual estoy. IN. FO. RM. cumpliendo con uno de los requisitos para optar el título de Biólogo Pesquero.. Br. ERIKA JULISSA ALAYO RODRÍGUEZ. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. Trujillo, Noviembre 2012. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(7) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. M UN. IC. AC I. Ó. N. JURADO DICTAMINADOR. CO. Dr. FEDERICO GONZALES VEINTIMILLA. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. PRESIDENTE. SECRETARIO. Dra. ALINA ZAFRA TRELLES VOCAL. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. Blgo. Pesq. GEINER BOPP VIDAL. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(8) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INDICE Pág. ii. AC I. Ó. N. DEDICATORIA. iii. M UN. AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO. IC. AGRADECIMIENTO. CO. DEL ASESOR. v vi. Y. PRESENTACIÓN. iv. IC. A. JURADO DICTAMINADOR. RM. ÁT. INDICE. FO. RESUMEN. IN. ABSTRACT. DE. INTRODUCCIÓN. vii viii ix x 1 10. RESULTADOS. 21. ST. EM AS. MATERIAL Y MÉTODOS. 32. SI. DISCUSIÓN. 37. N. DE. CONCLUSIONES. 38. ANEXOS. 47. RE. CC. IO. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 48. ANEXO 2. COMPOSICION NUTRICIONAL DE ESPIRULINA. 49. DI. ANEXO 1. MEDIO NUTRITIVO USADO EN EL CULTIVO DE ESPIRULINA. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(9) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESUMEN. Ó. N. La investigación tuvo como objetivo determinar el crecimiento poblacional y. AC I. nivel proteico de Arthrospira jenneri “espirulina” en base a residuos de pescado.. IC. Se usaron tres tratamientos con tres replicas a diferentes concentraciones de 6. M UN. (T1), 8 (T2) y 10 (T3) ml/L como medio nutritivo y para el tratamiento control (Tc). CO. se usó el medio Guillard f/2. El inóculo de A. jenneri fue de 250ml/L, el cual fue. Y. cultivado en un volumen total de 1L, a temperatura ambiente, con un rango de. IC. A. pH entre 8 y 10 e iluminación de 5000 lux, y agitación constante en un. ÁT. invernadero. El crecimiento de A. jenneri fue de 1,48×104 tricomas/ml en Tc y. FO. RM. de 0,86×104; 1,08×104 y 1,30×104 tricomas/ml en T1, T2 y T3 respectivamente en. IN. base a residuos de pescado. Asimismo el nivel proteico fue de 11,16% (Tc),. DE. 12,61%(T3), 13,28%(T1) y 14,42%(T2). Se concluye que el mayor crecimiento de. EM AS. espirulina se obtuvo en el tratamiento control y en el T3 en base a residuos de. DE. SI. ST. pescado además el mayor nivel proteico se presentó en el tratamiento 2 (T2).. proteico, cultivo.. DI. RE. CC. IO. N. Palabras claves: Arthrospira jenneri, espirulina, residuos de pescado, nivel. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(10) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. ABSTRACT. Ó. N. The research aimed to determine population growth and protein level of Arthrospira. AC I. jenneri "spirulina" based on fish waste. Three treatments were used with three. M UN. IC. different concentrations of replicas 6 (T1), 8 (T2) and 10 (T3) m/l as a growth. medium for the treatment and control (Tc) medium was used Guillard f / 2. The. CO. inoculum of A. jenneri was 250 ml/L, which was cultivated in a total volume of 1L, at. A. Y. room temperature, with a pH range between 8 and 10 and 5000 lux illumination, and. ÁT. IC. constant agitation in a greenhouse. A. Growth jenneri was 1.48 × 104 trichomes / mL. RM. in Tc and 0.86 × 104, 1.08 × 104 and 1.30 × 104 trichomes / mL at T1, T2 and T3. FO. respectively based on fish waste. Also the protein level was 11.16% (Tc), 12.61%. DE. IN. (T3), 13.28% (T1) and 14.42% (T2). It conclude that the fastest growing spirulina in. EM AS. the treatment was obtained in control and T3 based on fish waste and the highest. SI. ST. protein level was presented in treatment 2 (T2).. DI. RE. CC. IO. N. DE. Key words: Arthrospira jenneri, spirulina, fish waste, level protein, culture.. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(11) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. INTRODUCCIÓN. Ó. N. Los cultivos algales han sido utilizados durante mucho tiempo para la alimentación. AC I. humana y animal; así como varias investigaciones genéticas, morfológicas,. IC. fisiológicas y bioquímicas (Blanco, 1991).. ecofisiológicas. estructural, de. debido. adaptación. a. a. que. diferentes. han. desarrollado. CO. y. condiciones. Y. morfológica. M UN. Las microalgas son organismos fotosintéticos con una gran variabilidad estrategias. ambientales. de. IC. A. temperatura, humedad, salinidad, irradiación solar y pH (Whitton y Potts, 2000).. RM. ÁT. Se ubican en el primer eslabón en la cadena trófica de los sistemas acuáticos por. FO. ser organismos fotoautótrofos obligados, es decir, requieren de la energía. IN. proveniente de la luz para realizar sus procesos biológicos (Rosas, 2004).. DE. La luz es la fuente de energía que libera las reacciones fotosintéticas, por lo que la. EM AS. calidad, cantidad y fotoperiodo deben ser consideradas al trabajar con microalgas ya que estas características varían de acuerdo al tipo de microalga a ser cultivada. ST. afectando al crecimiento y a la síntesis de compuesto orgánico como lípidos,. DE. SI. carbohidratos, proteínas, entre otros (Barsanti and Gualtieri, 2006).. N. Las microalgas tienen gran importancia en la acuicultura y la biotecnología por la. CC. alimentos,. cosméticos. e. industrias. farmacéuticas. previos. procesos. RE. de. IO. producción de sustancias alimenticias, las cuales son usadas para la elaboración. DI. biotecnológicos. Es así como la biotecnología de las microalgas ha ganado considerable importancia en las recientes décadas y sus aplicaciones varían desde una simple producción de biomasa como alimento, hasta productos para. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(12) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. aplicaciones ecológicas (Pulz, 2001). Por las capacidades de incorporación de. N. nutrientes pueden emplearse como una alternativa en la depuración de aguas. AC I. Ó. residuales.. IC. La cianobacteria Spirulina sp. es un organismo que anteriormente se le incluía en. M UN. las microalgas azul-verdes de la división Cyanophyceae. Se trata de una. CO. formación multicelular microscópica filamentosa colonial de aspecto helicoidal de tamaño entre 200 y 250 micras de largo (De Lara et al., 2005).. A. Y. El término "Spirulina" ha sido ampliamente utilizado para referirse indistintamente. ÁT. IC. a dos géneros, Arthrospira Stizenberger 1852 y Spirulina Turpin 1829, así como a. RM. dos especies de cianobacterias, S. platensis Geitler 1932 y S. maxima Geitler. FO. 1925, las que tienen importancia económica, ya que son cultivadas y vendidas. IN. para elaborar una gran cantidad de productos a los que se les atribuyen. DE. propiedades nutritivas y de prevención de la salud. Sin embargo, desde 1989 se. EM AS. ha reconocido que estos dos géneros son distintos y que en realidad estas. ST. especies pertenecen al género Arthrospira (Ramírez y Olvera, 2006).. SI. Según la clasificación en el Manual de Bergey de Bacteriología Determinativa,. DE. Spirulina (Arthrospira), pertenece a las bacterias oxigénicas fotosintéticos que. IO. N. cubren los grupos de cianobacterias y Prochlorales (Whitton, 1992), que son, por. CC. filogenia, relacionados con la secuencia de los rARN (ácido ribonucleico. RE. ribosomal) de subunidades 16S. En función de los datos de secuencia de este. DI. sub-unidad y el rRNA 5S sub-unidad, estos procariotas se clasifican en el grupo de las eubacterias.. 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(13) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Las morfologías de Spirulina y Arthrospira se diferencian fundamentalmente el tipo. N. de hélice, la distribución de poros en la pared celular, la visibilidad de los septos, el. AC I. Ó. diámetro y el tipo de fragmentación de tricomas (filamentos) ( Vonshak and. IC. Tomaselli, 2000).. M UN. Como se ha mencionado, S. maxima y S. platensis son las especies más. CO. importantes de este género y entre ellos existen diferencias taxonómicas de los filamentos, las vacuolas y la cubierta externa o regularidad cápsula de cada. A. Y. filamento (Tomaselli, 1997).. ÁT. IC. Spirulina y Arthrospira deben ser admitidas como géneros diferentes. La. RM. investigación a nivel mundial sobre las microalgas se ha llevado a cabo bajo el. FO. nombre de espirulina, esta denominación común entre los científicos y los. IN. consumidores ha resultado difícil de cambiar. Las microalgas explotados como. DE. alimentos con propiedades excelentes de salud pertenece al género Arthrospira, probablemente. llamará. Spirulina. durante. algún. tiempo. ST. (Sánchez et al., 2003).. se. EM AS. pero. SI. Desde que se incrementó el conocimiento del potencial nutritivo de “espirulina” en. DE. 1960, muchos países han aislado y mantenido cepas en sus laboratorios,. IO. N. existiendo actualmente 51 razas del género Arthrospira “espirulina”. Estudios. CC. realizados por Scheldeman et. (1999), sobre Arthrospira confirman la existencia de. RE. dos grupos genotípicos del género.. DI. En el Perú, se han registrado razas que pueden ser incluidas en ambos grupos: Arthrospira “Titicaca”, del lago Titicaca, Perú (D09992), R.Fox; Arthrospira. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(14) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. “platensis”, de la laguna Huacachina, Ica, Perú (D0881) Hegewald, 1997 y. N. Arthrospira “Orovilca”, Ica, Perú (D0921) R. Fox.. AC I. Ó. El principal pigmento que contiene Spirulina sp es la clorofila a y varias. IC. ficobiliproteinas como pigmentos accesorios entre ellos β-caroteno, ficocianina,. M UN. ficoeritrina y aloficocianina. También concentra gránulos de carbohidratos y de. CO. cianoficina, que son compuestos de arginina y ácido aspártico. (De Lara et al., 2005).. A. Y. La microalga Spirulina, es considerada como una fuente de alto valor nutritivo. ÁT. IC. porque conforma un alimento concentrado natural aportando un 63 a 68% de. RM. proteínas, que incluye a todos los aminoácidos esenciales, siendo actualmente. FO. vendido como un alto suplemento en la alimentación en 70 países del mundo. IN. (Henrikson, 1997). Por tal motivo las cianobacterias tienen grandes ventajas como. DE. recursos potenciales de proteína y solamente requieren un medio acuático con. EM AS. nutrientes inorgánicos y luz solar para su producción.. ST. En países desarrollados como México, EEUU y Japón, “espirulina” se utiliza en la. para tratamiento de aguas residuales (SeshadrI et al., 1992).. DE. cosmética y. SI. alimentación de humanos y animales, como fuente de pigmentos en la industria. IO. N. Actualmente constituye una de las mejores soluciones para la producción sencilla unicelular para la nutrición humana y animal. Las proyecciones. CC. de proteína. RE. realizadas por Exebio (2003) para el periodo 2001-2006, muestran que existe una. DI. demanda creciente de proteína unicelular a base de microalgas para consumo humano y animal tanto en Estados Unidos y La Unión Europea como en Asia.. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(15) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Las principales campañas productoras de Arthrospira sp. se localizan en el. N. continente asiático donde el cultivo de esta microalga se lleva a cabo de manera. AC I. Ó. intensiva dentro de estanques artificiales y la producción oscila entre 30 y 450. IC. toneladas de biomasa al año. En general la biomasa se deshidrata y pulveriza. M UN. para fabricar comprimidos o encapsulados que se venden como suplemento. CO. alimenticio (Merchan, 2007).. Actualmente las investigaciones que se han realizado en el Perú, sobre “spirulina”. A. Y. son referentes a su taxonomía y distribución según Fernández (1994), no. ÁT. IC. habiendo estudios respecto a su aislamiento y cultivo.. RM. Un aspecto fundamental de la biología de Spirulina es su ciclo de vida debido a la. FO. taxonomía, las implicaciones fisiológicas y cultivo (Ciferri, 1983). Este período se. IN. resume en tres etapas fundamentales: los procesos de fragmentación tricomas,. DE. células hormogonios ampliación y maduración, y una elongación de tricomas. Los. EM AS. tricomas maduros se dividen en varios filamentos pequeños o hormogonios a. ST. través de la formación anterior de células especializadas, las células necridium, en. SI. la que se reabsorbe el material celular permitiendo la fragmentación. El número de. DE. células en el hormogonias se incrementa por fisión binaria. Para este proceso, los. IO. N. tricomas crecen longitudinalmente y toma su forma helicoidal (Ciferri, 1983).. CC. Arthrospira jenneri “espirulina” es una microalga no heterocistica de estructura. RE. filamentosa de la familia Oscillatoriaceae (división Cyanofita). Se considera como. DI. un tricoma helicoidal de forma cilíndrica, cuya reproducción se realiza por ruptura intracelular (hormogonios) (Pedraza, 1989). Los tricomas presentan activo movimiento, el movimiento se origina en uno de los extremos, en forma lenta y se 5. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(16) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. orienta hacia todo el talo del alga, originando un desplazamiento de rotación a lo. N. largo de todo el tricoma. El movimiento es más activo en los hormogónios.. AC I. Ó. Esta microalga se propaga por la formación de hormogónios con 2 a 3 células, o. IC. por fragmentación del tricoma con 2 a 3 espiras. El tiempo de generación es de 6. M UN. a 24 horas (Luján, 2000).. CO. Lo que diferencia el género Arthrospira del resto de microalgas es su particular nicho ecológico debido a que proliferan en aguas mineralizadas, extremadamente. A. Y. cálidas (25-35°C) y alcalinas con un pH que oscila entre 7,5 y 12,5 estas. ÁT. IC. condiciones excluyen a la mayoría de los seres vivos. Algunas especies tienen. RM. una velocidad de crecimiento óptima a un pH 10 (Rodríguez y Triana, 2006).. FO. Como en los países en desarrollo, la desnutrición representa un grave problema,. IN. la producción de fuentes alternativas de alimentos es de suma importancia y la. DE. Spirulina representa una de esas alternativas, ya que además de sus propiedades. EM AS. nutritivas, su cultivo presenta pocas dificultades, puesto que su crecimiento se da. ST. en aguas altamente alcalinas y por ello, la posibilidad de contaminación con otros. SI. microorganismos es muy limitada, y por consiguiente se le encuentra creciendo. DE. naturalmente en muchas lagunas de zonas situadas en todo el continente, de. IO. N. 35°N hasta 35°S (Lujan, 2000).. CC. Ramírez y Olvera (2006) reportan que la espirulina tiene su pared celular delgada. RE. y no posee celulosa, lo que facilita su digestión, diferenciándose así de las algas. DI. verdes, además las cosechas no requieren grandes esfuerzos y finalmente, los estudios de toxicidad revelan que es inocua. También se emplea en la acuicultura, como alimento para crustáceos, moluscos y peces, siendo también utilizada para 6. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(17) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. animales de granja y para mascotas, principalmente cuando los animales están en. N. su época de reproducción, por ser fuente de pigmentos naturales, vitaminas y. AC I. Ó. ácidos grasos de gran valor.. IC. El uso de este organismo como alimento en la acuicultura ha sido limitado debido. M UN. a su alto costo en el mercado, sin embargo por experiencias de acuicultores. CO. japoneses, quienes señalan los beneficios que se obtienen utilizando Spirulina sp. en las dietas para peces de ornato principalmente, se ve la conveniencia de. A. Y. aplicarla. Henson (1990) señala que el consumo de espirulina incrementa la tasa. ÁT. IC. de crecimiento, mejora la calidad y coloración de la carne, aumenta la. RM. sobrevivencia, reduce los requerimientos de medicamentos y disminuye los. FO. desechos en los drenajes de los estanques en el cultivo de peces.. IN. Entre otros beneficios Iwata (1990) reporta que Spirulina sp. mejora la conversión. DE. del alimento; al mejorar la flora intestinal, la cual desintegra compuestos no. EM AS. digeribles de los alimentos; la misma flora bacteriana produce vitaminas y. ST. desplaza las bacterias nocivas dentro del intestino del organismo. Igualmente. SI. estimula la producción de enzimas que transportan a las grasas por el cuerpo, así. DE. el animal puede utilizar la grasa como energía para el crecimiento, evitando que. IO. N. esta se acumule.. CC. Cuzon et al. (1981) indica que para el caso de los crustáceos, Spirulina sp. se. RE. utiliza como insumo en la formulación de dietas para Marsupenaeus japonicus. DI. contribuyendo a promover el crecimiento e induce a una buena coloración del producto debido al contenido de carotenoides. Asimismo se ha utilizado para intensificar el color rojo de la carpa de ornato, principalmente por la acción de la 7. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(18) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. zeaxantina la cual permite intensificar el color hasta ocho veces cuando se. N. incorpora en el alimento a esta cianofícea.. AC I. Ó. Otro crustáceo que ha mostrado beneficios al ingerir Spirulina sp. es Artemia sp.. IC. tanto a nivel de nauplios como en las demás fases de su ciclo de vida, así. M UN. Person (1976) reporta que alimentando a los nauplios de Artemia con Spirulina sp.. CO. deshidratada permitió acelerar el crecimiento, con lo cual se disminuyó el tiempo. A. el cultivo de peces para que éstos sean más rentable.. Y. de permanencia del cultivo de Artemia sp lo que puede incluirse como alimento en. ÁT. IC. El nematodo Panagrellus redivivus cultivado en avena con Spirulina sp., presentó. RM. un porcentaje mayor en cuanto a aminoácidos y ácidos grasos que cuando fue. FO. cultivado solo en avena. Este organismo también es utilizado como alimento para. IN. peces y crustáceos en cautiverio, por lo que su calidad nutritiva puede. DE. incrementarse al ser enriquecido con Spirulina sp. y puede ser una opción más. EM AS. económica que los nauplios de Artemia sp. para la alimentación de algunos. ST. organismos acuáticos en cultivo que requieren de alimento vivo.. SI. Las microalgas del género Spirulina son fuentes de alto nivel proteico, ricas en. DE. vitaminas, aminoácidos esenciales, minerales, ácidos grasos esenciales (acido. IO. N. gamma – linnolénico), y pigmentos antioxidantes como los carotenoides. Además. CC. de poseer un alto valor nutricional presentan función inmunomoduladora y. RE. efectividad probada en la protección de la radiación. DI. (Ceballos et al., 2004). 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(19) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El polvo que se obtiene de la Spirulina sp. es una fuente proteica de 80%, que al. N. compararlo con la proteína del huevo, bastaría 124 g de Spirulina platensis para. AC I. Ó. 100 g de la proteína del huevo (Navas, 2005).. IC. Una alternativa a los medios de cultivo tradicionales ya estandarizados (puros y. M UN. químicamente definidos, como medio F/2 Guillard) son los sustratos orgánicos,. CO. mayormente subproductos de otras industrias, y en cuya composición se encuentra fuente de carbono, nitrógeno, fosforo, micronutrientes y otros nutrientes. A. Y. (Sánchez et al., 2008).. ÁT. IC. Una de las industrias con mayor auge en el Perú, es la pesquera, además de ser. RM. una de las que elimina residuos en mayores cantidades, producto de su actividad. FO. extractiva de recursos renovables. Dentro de las actividades pesqueras tenemos. IN. la conservera de la cual, los residuos como vísceras, cabezas, piel, huesos, etc.;. DE. constituyen alrededor del 50 % de la materia prima, también hay cantidades de. EM AS. especies deterioradas o de bajo valor comercial que son descartados, residuos. ST. que poseen un contenido proteico como los filetes (Berenz, 1996); contando. SI. también con los residuos de cubicherías y mercados donde se eliminan restos de resultando. DE. pescado. finalmente. en. contaminantes. al. ser. vertidos. IO. N. indiscriminadamente al medio ambiente, provocando problemas de contaminación. CC. y enfermedades.. RE. La investigación tuvo como objetivo determinar el crecimiento poblacional y nivel. DI. proteico de Arthrospira jenneri “espirulina” en base a residuos de pescado.. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(20) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. MATERIAL Y MÉTODOS. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. de Chou –Chou del distrito de Salaverry – La Libertad (Perú) (Figura 1).. Ó. N. La muestra biológica de A. jenneri “espirulina”, fue recolectada de los humedales. DE. Figura 1. Humedales de Chou –Chou del distrito de Salaverry – La Libertad. CC. IO. N. (Perú).. RE. Dicha muestra se recolectó en botellas de 4L, previamente se midió el pH,. DI. temperatura y salinidad (Figura 2), y se trasladó al invernadero del laboratorio de Maricultura de la Universidad Nacional de Trujillo donde se revisó al microscopio Olympus a un aumento de 10x para ser identificada. 10. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(21) ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. SI. Figura 2. Registro de parámetros pH (9), temperatura (24 °C) y salinidad (10ppt). N. DE. en los humedales Chou-Chou del distrito de Salaverry.. IO. El aislamiento de espirulina se realizó mediante la técnica de filtración usando dos. RE. CC. mallas una de 100µ para la separación de restos orgánicos (Figura 3) y la otra de. DI. 40µ en donde retuvo a la cepa de A. jenneri (Figura 4).. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(22) A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. IC. Figura 3. Primera filtración para separar residuos orgánicos y larvas de insectos. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. usando una malla de 100µ.. CC. IO. N. Figura 4. Segunda filtración para retener la cepa de A. jenneri.. RE. Una vez obtenida la cepa se colocó en el medio nutritivo Guillard f/2 (Tabla 1) a. DI. una concentración de 1ml/L. Se acondicionó en frascos de vidrio de 2,5 L con agitación continua e iluminación con luz blanca de fluorescente (5000 lux), con un fotoperiodo de 24 horas, a temperatura ambiente (Figura 5).. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(23) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 75 mg. PO4H2Na.H2O. 5 mg. CO. M UN. NaNO3. IC. SOLUCIÓN BASICA DE NUTRIENTES. AC I. Ó. N. TABLA 1. Composición química del Medio Guillard f/2.. Y. SOLUCIÓN DE METALES TRAZA. 4,36 mg. IC. A. Na2EDTA. RM. ÁT. Cl3Fe.6H2O. FO. SO4Cu.5H2O. IN. SO4Zn.7H2O. DE. Cl2Co.6H2O. 0,022 mg 0,01 mg. 0,006 mg. 0,5 mg. Tiamina, HCl (B1). 0,1 mg. Biotina (Vit. H). 0,5 mg Fuente: Guillard (1973).. DI. CC. IO. DE. Cianocobalamina (B12). N. SOLUCIÓN DE VITAMINAS. RE. SI. ST. MoO4Na2.2H2O. 0,01 mg. 0,18 mg. EM AS. Cl2Mn.4H2O. 3,15 mg. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(24) IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. B. C. D. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. A. DI. RE. CC. Figura 5. Aislamiento de microalga: A. Medio nutritivo Guillard f/2. B. Mezcla de agua de agua de mar a 10ppt y medio nutritivo. C. Acondicionamiento de la mezcla en botellas. D. Crecimiento de la cepa de A. jenneri.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(25) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El agua de mar se obtuvo de la playa de Las Delicias, se dejó sedimentar por un. N. periodo de 24 horas y luego se filtró con papel filtro. Se esterilizó con hipoclorito de. AC I. Ó. sodio al 5% en una proporción de 1 ml de hipoclorito de sodio por litro de agua y. IC. se mantuvo con aireación por un periodo de 48 horas. Al término del mismo, para. M UN. neutralizar el efecto del hipoclorito de sodio, se le agregó tiosulfato de sodio 1N a. CO. una concentración de 1ml de tiosulfato de sodio por litro de agua de mar. La preparación del medio de cultivo se realizó en base a restos de pescado. A. Y. colectados de las pescaderías, las cuales fueron preservadas en bolsas con hielo.. ÁT. IC. Se procedió a pesar 100 g de residuos de pescado y se colocaron en un vaso de. RM. precipitación luego se aforó con agua potable a 1000 ml. La mezcla fue sometida a. FO. cocción por un tiempo de 20 minutos. Posteriormente se filtró y se dejo enfriar por. IN. tiempo de 1 hora. El caldo nutritivo obtenido de la filtración se colocó en un vaso. DE. de precipitación 1000 ml y fue aforado a dicho volumen con agua esterilizada para. EM AS. luego ser usada en los cultivos algales y el sobrante almacenado en refrigeración. ST. a 4°C. La concentración de dicho medio fue de 0.1 g/L (Figura 6).. SI. Se probó con diferentes concentraciones de medio nutritivo para el cultivo de. DE. espirulina, siendo la primera prueba a una concentración de 40, 60 y 80 ml/L; la. IO. N. segunda prueba se realizó a concentraciones de 10, 20 y 30 ml/L y la tercera a. CC. concentraciones del 1 al 10 ml/L. Del último ensayo se seleccionaron las. RE. concentraciones de 6, 8 y 10 ml/L para el cultivo de A. jenneri que correspondieron. DI. a los tratamientos T1, T2 y T3, respectivamente.. En el tratamiento control se utilizó medio Guillar f/2, el cual está íntegramente compuesto por sustancias inorgánicas (Guillard, 1973). 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(26) a. c. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. b. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. d. f. ST. e. DE. SI. Figura 6. Proceso de elaboración de medio nutritivo a base de residuos de. N. pescado: a. Recepción de los residuos de pescado en bolsa. IO. herméticamente sellada. b. Peso de residuos de pescado. c. Cocción de. medio nutritivo a 1000ml. f. Medio nutritivo para ser usado en el cultivo.. DI. RE. CC. residuos de pescado. d. Filtrado del medio nutritivo. e. Aforado del. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(27) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. El diseño experimental fue de estimulo creciente, donde se evaluaron tres. N. tratamientos experimentales y un control. Para los cuales se utilizaron cuatro. AC I. Ó. botellas de vidrio de 2500 ml de capacidad, cada botella se colocó tapones de. IC. caucho adaptados con tubo de vidrio para permitir el paso del aire. En cada botella. M UN. se colocó 1000 ml de agua con una salinidad de 10ppt con 250 ml de inóculo de A. jenneri. En el tratamiento control se utilizó medio Guillard f/2 a una. CO. concentración de 1ml l-1 y en los otros tres tratamientos el medio nutritivo de. A. Y. residuos de pescado a concentraciones de 6, 8 y 10ml l-1 (Figura 7). Por cada litro. ÁT. IC. se agregó 5g de Bicarbonato de sodio.. RM. El crecimiento de la población de A. jenneri “espirulina” se evaluó diariamente. FO. durante 10 días, en concentraciones de 6, 8 y 10ml/l a través del recuento del. IN. número de tricomas/ml, mediante la técnica de conteo directo en lámina (Planchon. DE. y Fuentes, 1993), para lo cual se utilizó un microscopio óptico marca OLYMPUS y. EM AS. una micropipeta, de un volumen de 0,05 µl. Asimismo para la determinación del. ST. peso seco, a los 10 días de cultivo, se filtró 100 ml, utilizando una malla de 40µ. SI. para filtrar, posteriormente se colocó en una estufa durante 24 horas a 60°C para. DI. RE. CC. IO. N. DE. ser pesadas en balanza electrónica (Figura 8).. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(28) DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. EM AS. TC. T2. T1. T3. ST. Figura 7. En el tratamiento control (TC) se utilizó medio Guillard f/2 a una. DE. SI. concentración de 1ml L-1 y en los otros tratamientos (T1, T2 y T3) el medio nutritivo a base de residuos de pescado a concentraciones de 6,. DI. RE. CC. IO. N. 8 y 10 ml L-1.. 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(29) M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. b. c. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. a. e. f. g. h. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. d. CC. IO. Figura 8. Proceso de obtención de biomasa seca de A. jenneri: a. Filtración del. DI. RE. cultivo. b. Retención de la biomasa. c. Raspado de la microalga del filtro. d. Biomasa húmeda. e. Secado. f. Biomasa seca. g. Pesado. h. Embolsado.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(30) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. La tasa de crecimiento poblacional por día se calculó con la fórmula dada por. M UN. IC. AC I. Ó. N. Guillard (1973):. CO. Donde:. A. Y. = tasa de crecimiento (día-1). ÁT. IN. = Tiempo final e inicial. DE. y. FO. RM. = Concentración celular inicial. IC. = Concentración celular final. EM AS. La determinación de proteínas se realizó según el método de Kjendahl en laboratorios COLECBI S.A.C., Nuevo Chimbote.. ST. Se registraron diariamente datos de temperatura, con un termómetro y pH con un. SI. phmetro digital marca phtestr 1 Waterproof.. DE. Los ensayos se realizaron por triplicado y fueron verificados aplicando la prueba. DI. RE. CC. Excel.. IO. N. estadística de análisis de varianza ANAVA con ayuda del programa computacional. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(31) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. RESULTADOS. Ó. N. Aislamiento de A. jenneri. AC I. La muestra recolectada del medio natural en un volumen de 4L en una densidad. IC. de 2,87×10-4 tricomas/ml. fue filtrada en una malla de 40µ en donde retuvo una. M UN. densidad de 5,29×10-4 tricomas/ml, observándose en su mayoría, tricomas de 6 a7. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. ondulaciones (Figura 9).. Figura 9. Tricomas de Arthrospira jenneri “espirulina” observados a un aumento de 10x.. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(32) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En el aislamiento espirulina presentó una fase de adaptación a las nuevas. N. condiciones de cultivo en un periodo de tres días, para luego ingresar a la fase. AC I. Ó. exponencial donde se inició el incremento de tricomas observándose una etapa. IC. reproductiva, en la cual se da a conocer las tres etapas fundamentales que son la. M UN. fragmentación de tricomas, maduración y ampliación de hormogonios, y una. CO. elongación de tricomas. (Figuras 10, 11,12 y 13).. Y. Crecimiento Poblacional de Arthrospira jenneri en los tratamientos.. IC. A. En el proceso de crecimiento poblacional de A. jenneri durante el cultivo se. ÁT. registro la fase de adaptación de la microalga al medio nutritivo en un periodo de. RM. tres días, fase logarítmica o exponencial indicándose del cuarto hasta el noveno. IN. FO. día, fase estacionaria y fase de mortalidad a partir del décimo día mostrándose. DE. una coloración amarillenta; Esto se observó en los tratamientos con medio a base. EM AS. de residuos de pescado como en el control con Guillard f/2. La curva de crecimiento de A. jenneri en todos los tratamientos mantuvo una. ST. tendencia similar, las densidades celulares alcanzadas no tuvieron diferencia. SI. significativa (p>0.05), superando el número de tricomas en el tratamiento control. DE. (Tc) que alcanzó una densidad de cultivo de 1,48 × 10 4 tricomas/ml, seguido del 1,30 × 104. tricomas/ml,. IO. N. tratamiento 3 (T3), cuya densidad máxima fue. CC. tratamiento 2 (T2) presentó 1,08 × 104 tricomas/ml y tratamiento 1 (T1) con una. DI. RE. densidad máxima de 0.86 × 104 (Figura 14).. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(33) ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. Figura 10. Elongación y maduración del tricoma de A. jenneri a aumento de 10x. DI. RE. Figura 11. Formación de espiral del tricoma de A. jenneri a aumento de 10x.. 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(34) RM. ÁT. IC. A. Y. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Figura 12.Fragmentacion del tricoma de espirulina y observación de células. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. necridium a aumento de 10x.. DI. Figura 13. Formación de hormogonios de A. jenneri para reproducción a un aumento de 10x.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(35) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. 16000. Ó. N. 14000. AC I IC M UN. 10000. CO. 8000. Y. 6000. A. N Tricomas/ml. 12000. ÁT. IC. 4000. 0 2. 3. 4. IN. 1. FO. RM. 2000. 5. 6. 7. 8. 9. 10. DE. Tiempo (dias). EM AS. Figura 14. Crecimiento poblacional de Arthrospira jenneri. Tc con medio Guillard. ST. f/2; T1, T2 y T3 con medio nutritivo a base de residuos de pescado a de. 6,. 8. y. 10. ml/l. respectivamente.. N. DE. SI. concentraciones. CC. IO. Tasa de crecimiento Poblacional de A. jenneri.. RE. La mayor tasa de crecimiento se presentó en Tc, con 0,18 día-1; seguido de T3 con. DI. 0,17 día-1. Los menores valores se mostraron en T2 y T1 con 0,15 y 0,10 día-1 respectivamente. Al analizar estadísticamente con la prueba ANAVA no se encontró diferencias significativas entre los tratamientos (p>0.05) (Tabla 2).. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(36) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. TABLA 2. Tasa de crecimiento poblacional (µ) en el cultivo de A. jenneri.. TRATAMIENTOS. µ(día-1). R1. R2. TC (Medio Guillard f/2). 0,18. 0,19. 0,23. T1(Medio nutritivo a 6ml/l. 0,10. 0,12. T2(Medio nutritivo a 8ml/l). 0,15. T3(Medio nutritivo a 10ml/l). 0,17. 0,12. 0,07. 0,19. 0,12. 0,15. 0,22. 0,17. 0,13. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. A. Y. 0,11. IC. CO. M UN. IC. AC I. Ó. N. R3. TABLA 3. Análisis de Variancia para el crecimiento poblacional y tasa de. SI. ST. crecimiento en el cultivo de A. jenneri. ANAVA DE UNA VIA. DIFERENCIA. (0,05 de significancia). SIGNIFICATIVA. p = 0,07. No significativa. p = 0,27. No significativa. N. DE. VARIABLES. CC. IO. CRECIMIENTO POBLACIONAL. POBLACIONAL. DI. RE. TASA DE CRECIMIENTO. 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(37) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Rendimiento de biomasa seca de Arthrospira jenneri.. N. El rendimiento de biomasa seca de A. jenneri medido al noveno día cuando los. tratamiento con mayor rendimiento de biomasa fue Tc con. IC. Por lo que el. AC I. Ó. cuatro tratamientos (Tc, T1, T2, T3) se encontraron en fase de máximo crecimiento.. M UN. 120,66mg/100ml; mientras que el tratamiento con menor rendimiento fue T 1 con. CO. 82.66mg/100ml (Tabla 4).. Y. Tabla 4. Rendimiento de la biomasa seca (mg de alga seca/100ml de medio de. ÁT. IC. A. cultivo) de A. jenneri con los diferentes tratamientos (TC, T1, T2 y T3).. Biomasa seca (mg de alga seca/100ml de medio de cultivo). FO. RM. MEDIO. DE. IN. TC (Medio Guillard f/2). 120,66. 82,66. T2(Medio nutritivo a 8ml/l). 84,66. SI. ST. EM AS. T1(Medio nutritivo a 6ml/l. T3(Medio nutritivo a 10ml/l. CC. IO. N. DE. 94,67. RE. Contenido proteico de A. jenneri.. DI. En el ensayo realizado el tratamiento que presentó un mayor nivel proteico fue en T2 con 14,42 %, seguido de T1 con 13,28%; T3 con 12,61% y Tc con 11,16% (Tabla 5).. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(38) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Tabla 5. Contenido de proteína (%) de A. jenneri con diferentes tratamientos en. T2(Medio nutritivo a 8ml/l. N. 13,28. Ó. T1(Medio nutritivo a 6ml/l. M UN. IC. MUESTRA. AC I. TC (Medio Guillard f/2). ENSAYOS Proteínas (%) Factor 6.25 11,16. CO. base a un medio de cultivo de residuos de pescado.. Y. 14,42 12,61. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. T3(Medio nutritivo a 10ml/l. DE. 16. EM AS. 12 10. ST. 8. SI. 6 4. DE. Contenido proteico (%). 14. TC. T1. T2. T3. Tratamientos. DI. RE. CC. IO. 0. N. 2. Figura 15. Contenido de proteínas en Tc, T1, T2 y T3.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(39) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Evaluación del pH en el cultivo de A. jenneri.. N. En el tratamiento control (TC) se determinó que el pH presentó una relación directa. AC I. Ó. con la densidad, debido a que esta empezó a aumentar partir del sexto día y el. pH de 8,2 aumento a 8,5 para luego incrementarse hasta 9,7 en donde alcanzó su. M UN. IC. máxima densidad de 1,48×104 tricomas/ml (Figura 16).. CO. 16000. IC. A. 12000. 9.5. RM. 8000. pH. ÁT. 10000. 6000. 9. FO. N° Tricomas/ml. 10. Y. 14000. 10.5. 8.5. IN. 4000. DE. 2000 0 2. 8. 4. EM AS. 0. 6. 8. 10. 12. Tiempo(días) pH. ST. Densidad. SI. Figura 16. Variación del pH en el tratamiento control durante el tiempo de cultivo. DE. de A. jenneri.. IO. N. En el tratamiento 1 (T1) se determinó que el pH, al igual que el tratamiento control. CC. guardó relación directa con la densidad, su máxima densidad fue 0,8×10-4. DI. RE. tricomas/ml con un pH de 9,4 (Figura 17).. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(40) 10000 9000 8000 7000 6000 5000 4000 3000 2000 1000 0. 10.5. ACpH IÓ. 9.5. N. 10. IC. 9. M UN. 8.5 8. 0. 2. 4. 6. 8. 10. CO. N° Tricomas/ ml. Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. pH. IC. A. Densidad. Y. Tiempo(días). 12. RM. ÁT. Figura 17. Variación del pH en T1 durante el tiempo de cultivo de A. jenneri.. FO. En T2 el pH aumentó hasta 10 donde alcanzó la máxima densidad de 1,08×10 -4. DE. IN. tricomas/ml, asimismo empezó la etapa de declive o mortalidad (Figura 18).. 9.5. SI. 6000. pH. ST. 8000. 10. 9. DE. 4000. 8.5. IO. N. N° Tricomas/ml. 10000. 2000. 10.5. EM AS. 12000. DI. RE. CC. 0. 0. 8 2. 4. 6. 8. 10. 12. Tiempo (días) Densidad. pH. Figura 18. Variación del pH en T2 durante el tiempo de cultivo de A. jenneri.. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(41) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. En T2 el pH aumentó hasta 10 donde alcanzó la máxima densidad de 1,08×10 -4. Ó. N. tricomas/ml, asimismo empezó la etapa de declive o mortalidad (Figura 19). 10.5. AC I. 14000. IC M UN. 10000. 9.5 9. CO. 6000 4000. 8.5. A. 2000 2. 4. 6. 8. 8 10. 12. ÁT. 0. IC. 0. 10. pH. 8000. Y. N° Tricomas/ml. 12000. RM. Tiempo(días). pH. FO. Densidad. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. Figura 19. Variación del pH en T3 durante el tiempo de cultivo de A. jenneri.. 31 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(42) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. DISCUSIÓN. Ó. N. En el aislamiento de Arthrospira jenneri se usó la técnica por filtración, que fue la. AC I. más eficiente para separar espirulina de otros organismos como Chlorella. IC. vulgaris y braquionus. Luján (2000) reporta que la técnica por estilete extrafino. M UN. es la técnica más segura y eficaz, ya que la forma espiralada de espirulina, le. CO. permite adherirse a esta, quedando casi libre de todos los contaminantes de la. Y. muestra recolectada como algas (Oscillatoria sp., Chlorella vulgaris) y protozoos.. IC. A. Sin embargo Merino (1975) indica que la técnica más utilizada para el. RM. ÁT. aislamiento de microalgas es por repiques sucesivos en medio sólido,. FO. reportando la obtención de cultivos unialgales de Cinofitas y Clorofitas mediante. IN. esta técnica, por lo contrario Lujan (2000) indica que en medio solido espirulina. DE. crece lentamente, lo que permite el desarrollo de organismos oportunistas como. EM AS. Oscillatoria sp., que llega crecer cubriendo toda la placa petri, imposibilitando el aislamiento.. ST. En el cultivo de A. jenneri se logró la máxima densidad en el tratamiento con. DE. SI. medio Guillard f/2 y en el medio a base de residuos de pescado a una. N. concentración de 10ml/l; sin embargo la densidad celular obtenida no representa. IO. el potencial del organismo, ya que se reporta concentraciones mayores en el. CC. medio Zarrouk de 4,44×104 (Luján, 2000), así también concentraciones de hasta. DI. RE. 1×106 tricomas/ml (Pedraza 1989). Salgado (2005) reporta una biomasa de 8,06×104 tricomas/ml en medio a base. de vinaza a una concentración de 2%. Rodríguez et al. (2011) indican que con. 32 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(43) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Bayfoland Forte como medio nutritivo a una concentración de 1ml/L se obtuvo 9×104 filamentos/L. Por otro lado Hernández (2010) reporta una biomasa algal. AC I. Ó. N. de 1,9×1011 filamentos/L en un cultivo a partir de agua residual municipal. IC. evaluando la capacidad para remover amonio y ortofosfato. Asimismo. M UN. Coral (2010) registra una mayor producción de biomasa en la dilución 0,015:0,985 de agua de cola - agua de mar con un máximo crecimiento. CO. poblacional alcanzado a los 10 días de 4,32×104 triomas/ml.. A. Y. Las altas densidades de A. jenneri se deben a que el medio Zarrouk contiene. ÁT. IC. macro y micronutrientes necesarios para un mejor crecimiento de espirulina en. RM. condiciones de laboratorio. Además de carbono, la espirulina necesita ciertos. FO. oligoelementos (Ciferri, 1983), por ello se necesitaría enriquecer el medio. IN. nutritivo a base de residuos de pescado del tratamiento T3 de 10ml/l para un. DE. mejor crecimiento.. EM AS. La tasa de crecimiento poblacional obtenida fue menor a lo reportado por Coral. ST. (2010), quien indica para el cultivo de Spirulina platensis con un sustrato de. SI. dilución 0,020:0,980 (agua de cola: agua de mar bicarbonatada) un valor máximo. DE. de 0,45977 días-1. Esto se debe a que, la velocidad de crecimiento µ (días-1),. IO. N. depende principalmente de la composición y concentración del medio de cultivo,. CC. presencia de inhibidores, temperatura y pH.. RE. En la investigación se observó que la tasa de crecimiento de A. jenneri se. DI. incrementó a mayor concentración del medio a base de residuos de pescado a. un pH entre 8,2 y 10, rango en el cual esta especie tiene mayor crecimiento, debido a que este medio nutritivo presentó un pH 6 se agregó Bicarbonato de 33 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(44) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Sodio en 5g/L para incrementar el pH en tres unidades y este adecuado para el. N. cultivo. El medio Zarrouk contiene 18g/l de Bicarbonato de Sodio para. AC I. Ó. incrementar el pH. Igualmente Jourdan (1999) manifiesta que se puede usar. M UN. microalgas en laboratorio, y o 5g/l en los estanques cultivados.. IC. 14g/l de este compuesto para elevar el pH entre 9 a 10 para el cultivo de. CO. El medio de cultivo ajustado a un pH óptimo, cambió según el crecimiento poblacional del organismo. Según Lacaz (1996), el pH aumenta cuando el. A. Y. carbono esta siendo asimilado por los tricomas de “spirulina” en forma de. ÁT. IC. bicarbonato (HCO3-), así dos moléculas de bicarbonato son metabolizadas por. RM. los tricomas, siendo una asimilada en forma de CO2, y otra retorna al medio de. FO. cultivo como carbonato, elevando así el pH del medio.. IN. Cuando el pH alcanza los 10,5 es posible que el suministro de CO2 sea. DE. inadecuado por lo tanto el crecimiento se limita. Según Fox (1996) si no se. EM AS. adiciona CO2, el crecimiento será menor y el pH se estabilizará en. ST. aproximadamente 10,5 donde el CO2 atmosférico es tomado en el agua en la. SI. misma cantidad en que el menor crecimiento de la Spirulina (4g de peso. DE. seco/m2/día) lo remueva. Cuando el alga remueve el CO2 por fotosíntesis, el pH. IO. N. aumenta. Adicionando CO2 el cultivo forma ácido carbónico, el cual disminuye el. CC. pH, siendo 9,5 el óptimo para el crecimiento de la Spirulina.. RE. Pandey (2010) indica que el peso específico seco de Spirulina máxima fue de. DI. 0,78g/500ml. (150mg/100ml). en. medio. Zarrouk.. Coral. (2010). reporta. 146,07 mg/100ml en peso seco, mientras que Lacaz (1996) reporta una biomasa de 153mg/100ml. Sin embargo en la investigación la biomasa en peso seco se 34 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(45) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. reportó mayor en el tratamiento control T c y asimismo en la concentración de. N. 10ml/l de T3 que todavía no representa el potencial del organismo.. AC I. Ó. El porcentaje de proteínas que se obtuvo difiere con lo indicado por Volkmann. IC. et al. (2008) que reporta que A. platensis cultivada en agua salinizada presenta. M UN. un contenido de proteína total de 48,59% en peso seco, mientras que en aguas. CO. residuales desalinizadas el contenido fue de 56,17%.. Valores similares de proteína total reporta Richmond (2004), quien encuentra. A. Y. entre 46 y 50% de proteína en peso seco en A platensis; Pelizer et al. (2003). ÁT. IC. informan de un contenido de proteínas de 55 a 61%, valores similares fueron. RM. encontrados por Rafiquel et al. (2005) quienes encuentran 56,8% de contenido. FO. de proteína total cuando se utiliza medio Zarrouk. Igualmente Coral (2010) en. IN. Spirulina platensis obtiene 62,43% de proteína en base seca en el medio de la. DE. dilución agua de cola-agua de mar. Zeng and Vonshak (1998) informan que las. EM AS. células bajo condiciones de estrés por salinidad, tienen una capacidad de. ST. síntesis de proteínas inferior.. SI. En la investigación el cultivo se mantuvo con agitación constante manteniendo. DE. de esta forma el cultivo homogéneo. Eliach et al. (2004) manifiestan que la. IO. N. agitación es un factor que afecta directamente al crecimiento de un cultivo de. CC. espirulina, permitiendo que la mayor parte de los individuos puedan exponerse a. RE. la luz artificial, para favorecer la liberación del oxigeno generado durante la. DI. fotosíntesis e introduciendo el dióxido de carbono de la atmósfera , disminuir la estratificación y formación de coágulos o grumos y para disminuir la precipitación de sales del medio de cultivo manteniendo un mezcla de sales mas homogénea. 35. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(46) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Por el contrario una vez sesada la agitación se observó que los tricomas se. N. suspendían en la superficie de la botella, esto debido a que espirulina presenta. AC I. Ó. vacuolas gaseosas que provocan, en pequeña escala, un movimiento de. IC. ascenso en relación a la lámina de agua de la superficie. Lujan (2000) indica que. M UN. estas vacuolas son vesículas que confieren a la espirulina la capacidad de. CO. fluctuación adaptativa, de este modo se da la migración de los microrganismos en dirección a la fuente de radiación. Los tricomas que se suspenden a la vez. A. Y. forman cadenas verdes de tamaño irregular que para Jourdan (2000) se debe a. ÁT. IC. que la espirulina secreta un sulfato de exopolisacarido que es una especie de. RM. alginato que forma una cápsula en la superficie externa del alga y le permite. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. desplazarse en el medio de cultivo, donde termina formando grumos.. 36 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(47) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. CONCLUSIONES. Ó. N. Se concluye que el crecimiento de la microalga Arthrospira jenneri “espirulina”. AC I. fue mayor en el tratamiento control con Guillard f/2 con 1,48×104 tricomas/ml y. IC. en T1, T2 y T3 en base a residuos de pescado se obtuvieron 0,86×104; 1,08×104 y. M UN. 1,30×104 tricomas/ml respectivamente. Asimismo el nivel proteico fue de 11,16%. DI. RE. CC. IO. N. DE. SI. ST. EM AS. DE. IN. FO. RM. ÁT. IC. A. Y. CO. (Tc), 12,61%(T3), 13,28%(T1) y 14,42%(T2).. 37 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(48) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. AC I. Ó. N. Blanco, J. 1991. El Fitoplancton: Su cultivo. Tema 2. Sección de Formación de. IC. SAG DE GALICIA S.S. Xunta de Galicia. España. 32pp.. M UN. Barsanti, L. and P. Gualtieri. 2006. [on line]. Algae, Anatomy, Biochemistry, and. CO. Biotechnology. Boca Raton, Florida: Taylor & Francis Group.. Y. Access [08/09/12]. In:. IC. A. www.crcnetbase.com/doi/pdfplus/10.1201/9780203492598.fmatt. RM. ÁT. Berenz, Z. 1996. XII Curso Internacional Tecnología de Procesamiento de. FO. Productos Pesqueros, del 15 de Enero al 01 de Marzo de 1996. Instituto. IN. Tecnológico Pesquero del Perú. Callao-Perú.. DE. Ceballos, B., H. Villareal, T. Garcia, R. Civera y G. Gaxiola. 2004. [en linea].. EM AS. Empleo de Polvo de Spirulina platensis en la Alimentación de Zoeas y. ST. Mysis de Litopenaeus schmitti. Centro de Investigaciones Pesqueras, Cuba;. SI. Centro de Investigaciones Marinas, Cuba; Centro de Investigaciones. DE. Biológicas del Noroeste, B. C. S., México; Universidad Autónoma de Ciudad. Habana.. Cuba.. [Acceso10/08/12].. Disponible. en:. IO. N. México.. CC. http://www.uanl.mx/utilerias/nutricion_acuicola/VII/archivos/31BarbaritoJ.Ce. DI. RE. ballos.pdf. 38 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

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(50) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Disponible. en:. http://es.scribd.com/doc/98111605/Biorreactores-de-. N. Spirulina-Para-Cultivo. AC I. Ó. Exebio, J. 2003. “Diagnostico de la Oferta y la Demanda del mercado de la Unión. IC. Europea, Asiático y EEUU de proteína unicelular”. Tesis para optar el titulo. M UN. profesional de Ingeniero Agroindustrial. Universidad Nacional de Trujillo.. (Oscillatoriaceae. Cyanophyceae).. –. Y. “Spirulina”. Segunda. A. Stizenberg. CO. Fernández, A. 1994. Taxonomia e Importancia de Arthrospira jenneri (Hassall). ÁT. IC. Jornada de Investigación en Ciencias Biológicas. Fac. CCBB. Perú.. RM. pp. 112 – 117.. IN. DE. Provence. France. 246pp.. FO. Fox, R. 1996. "Spirulina, Technique pratique et promesse", Edisud, Aix-en-. EM AS. Guillard, R. 1973. Division rates. In: J. R. Stein (ed.), Handbook of Phycological Methods. Culture methods and Growth Measurements. Cambrige Univ.. SI. ST. Press. pp. 289-311.. DE. Henson, H. 1990. Spirulina algae improves japanese fish feeds. Aquaculture. IO. N. Magazine. 16(6):38-43.. CC. Henrikson, R. 1997. Earth Food Spirulina. 4th ed. Ronore Enterprises. New. DI. RE. Edit. USA. 435pp.. 40 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..

(51) Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo. Hernández, B. 2010. Remoción de ortofosfato y amonio de agua residual. N. municipal por tres cultivos libres e inmovilizados de microalgas. Tesis para. AC I. Ó. obtener el grado de especialidad en Biotecnología. Universidad Autónoma. IC. Metropolitana. México D.F. 57pp.. M UN. Hoagland, D. 1944. Lectures on the Inorganic Nutrition of plants, Waltham, Hass.,. CO. The Chronic Botanic.. A. Y. Iwata, K.1990. Efects of Spirulina platensis on plasma lipoprotein lipase activity in. ÁT. IC. fructuose-induced hyperlipidemic rats. Laboratory of Nutrition, Kagawa. RM. Nutrition College, Toshima-ku, Japan. Tokyo Journal of nutrional science. FO. and vitaminology 170: 165-171.. IN. Jourdan, J. 1999. [en línea]. Cultivo de Spirulina, Manual de Cultivo Artesanal.12p. 26/07/12].. Disponible. DE. [Acceso. en:. EM AS. http:www.spirulinasourse.com/microjourdan.html.. ST. Lacaz, R. 1996. Spirulina sp: Un potencial Inexplorado. VII Jornada de Bioquímica.. DE. SI. Universidad Estatal de Londrina. Editora-UEL. Londrina. Brasil. 84pp.. N. Luján, M. 2000. Cultivo en condiciones de laboratorio de Arthrospira jenneri Stizenberg. “espirulina”. procedente. de. Puerto. Chicama. CC. IO. (Hassall). DI. RE. (La Libertad – Perú). Tesis para optar el título de Biólogo. Facultad de Ciencias Biológicas. Universidad Nacional de Trujillo.35p.. Merchan, L. 2007. [En línea]. Industrialización de la espirulina. Universidad del. 41 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis..