Alteraciones inmunologicas en endometriosis : inmunidad celular en el microambiente peritoneal

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(1);;~~f '\ .:<_O Lf. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA. DE. ME. O. rn~AZOMORAL~S. DR. Ofj?fCTtR. IJ$. E~SEN~N7A. Que presenbi para obtener' el arado de subespeci1lidad en. BIOLOGIA DE LA, REPRODUCCION 1 1. ~-. A•a.O.. :. D. PRO~K•O ... .. INPer. ~. DR.. . OJARRA. ~ELI-. EL. ESTRADA. VADILLO C:HITaGA. TITUl..AIW. DSL CUR-:. A~TONIO ••PINO-~LO•. M O N T a - MENA. México, D. F.. n,1s CON . f ALLA i>E ORIGEN. OH. RNJOHIU ESPIHOSH ELOS MUllllHO~ M. PRGff S O Tl TUl AH. 1997. 3. .Z/..

(2) UNAM – Dirección General de Bibliotecas Tesis Digitales Restricciones de uso DERECHOS RESERVADOS © PROHIBIDA SU REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL Todo el material contenido en esta tesis esta protegido por la Ley Federal del Derecho de Autor (LFDA) de los Estados Unidos Mexicanos (México). El uso de imágenes, fragmentos de videos, y demás material que sea objeto de protección de los derechos de autor, será exclusivamente para fines educativos e informativos y deberá citar la fuente donde la obtuvo mencionando el autor o autores. Cualquier uso distinto como el lucro, reproducción, edición o modificación, será perseguido y sancionado por el respectivo titular de los Derechos de Autor..

(3) AGllADECIMU:NTOS. A mi padre. a quien debo mi Connación y mi carrera. Ensellandome la honestidad y rectitud. Brindandome sus consejos y enseftanzas.. A mi madre y a mis hennanas por su comprensión. aCecto y carillo..

(4) A Mónica. quien dúa a día me ha esperado y escuchado. dandome palabras de alienro y apoyo para seguir supenmdome. Quien ha esrado conmigo en todo momenro. Siempre ~ su amor. carillo y comprensión..

(5) Al Instituto Nacional de Perinatologla. A todos mis prof"esores. Al Dr. Felipe Vadillo Ortega. al Q.F.B. César Hemández Guerrero y al Dr. Antonio Espinosa de Jos Monteros Mena. por su asesorfa en Ja realización de esta tesis. A mis compaileros.

(6) INDICE. J. .INTllODVCCION - •••••••••••••••• - • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • J. D. ANTEC.:DENTES CU:NTIFJCOS • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • 2 .111. PLANTEAMU:NTO DIEL -OBLIEMA •••••••••••••••••••••••••• '7. IV• .RJSTIFJCACION •••••••••••••••••••••••••••••••• ; • • • • • • • • • • • •. a. V. lllPOTESIS ••••••••••••••••••••••••••••••••••••••.• ; ••••••••••• 9 VL 011.JETJVOS • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • 10. VIL MATEJllAL V MIETODOS •••••••••••••••• ;. •••••••••••••. JI. VDL lllESVLTADOS •••••••••••••••••••••••••••• ·.; ••••••••••••••• 15. IX. DJSCtJSION •••••••••••••••••••••••••••••• X. T-IAS V GRAFICAS••. • •••••••••• 19. XI. CONCLVSION.:S••••••. XD. BmLIOGRAFIA • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • 49.

(7) L INTRODUCC•ON. En los ú.Jrimos allos han suraido múltiples teorfaa que tratan de explicar la fisiopa109enia de. la endometriosis. El porque en al¡¡unaa mujeres ae implanta el endometrio en la. ~. peritoneal y en olras no. parece tcoer relación con la actividad del u.tema üvnunolóaico que juega un papel detenninante en este. proce90.. por lo que éste ha sido tópko de nwaerou.a. investigaciones a nivel mundial. sin embarao los resultados aiauen aiendo diversentea y en muchas ocasiones no concluyentes.. En este estudio se estudiaron pacientes con esterilidad y endometrioU.. en comparación con un grupo control de pacientes con esterilidad. ain endometriosi•.. Se cuantificaron y. compararon subpoblaciones celulares de linfocitos T totales. B totales. cooperadores. supresores. T activodos y natural killer en liquido peritoneal y en ssnsre perif"éri.,.. Ademú lle. llevó • cabo un catu.dio para valorar la actividad inmunompresora de la. el liquido periloneal. unare perif&ica y. de pacientes con y sin endometriosis. en un ensayo de inducción de. m.itosénesis inespe<:ifica in vitro con concanavalina A..

(8) U. ANTIECIEDIENTES CO:NTIFICOS. La endometriosis es una enf'ermedad con etiolo,gfa e enfermedad se caracteri7.a por. ~o. fuera de la cavidad endometrial. la hipóteois má9. La. histoaénnis deKonocida.. 8'6ndulaa -.,metriales y -.-oma _...... - la por 5-oon. la. ectópico de. pro.,.._.. cual seftala como mecanismo causal el reflujo de unare y endometrio dc9ca.mado a través de las trompas de falopio a la cavidad perito--' (1).. De - d o a áta hipótnia -. células deben ser capaces de invadir e imp...,._ en la ..,perflcie peritoneal y responder a los cambios honnonales cfclicos como lo hace el endometrio eutópico.. Se han propuesto. otras teorías como Ja diseminación linlitica y hernatogála de loa implantes endometriales. la diseminación iatrogéna del endometrio durante afsuna cinaat• que invada la cavidad endometrial y. la metaplaaia cel6mica como. los casos RpC>ttados del deurroUo de. endometriosis en hombres que estuvieron: t>.jo tratamiento con COll'lpUfttos e.trogftücoa.. Sin embargo en loa ídtimos afto8 ha aurgido una oleada importante de i:nvestisaciones acerca de la relación entre Ja endometrioais y el siscmna inmunológico. En cuanto a la. respuesta inmune celular. Hill utilizando anticuerpos monoclonales inició la caracterizllición de subpoblaciones de leucocitos en el liquido peritoneal de pacientes con endometriosis.. en donde encontró aumento de leucocitos totales,. nimcrofasos,. cooperadores y natural ki.Uer en pacientes con endometrioais. encontrando el microambiente peritoneal inclinado hacia la inmunosupresi6n como lo indicó la relación alterada entre loo linCocitoa T .,_-.doreo y los supresores (2). Oosterlynck y cola. encontraron clismim.Jción en la citotóxicidad de los leucocitos natural kiUer (NK) a el endometrio auto16110 de pacient.,. con endometriosis (3). Vigano y cols. han relacionado el def'ecto en la citotoxicidad de los leucocitos de pacientes con endometriosis con la expresión de moléculuna seflal negativa para la lisis mediada por células. de superficie tn..A J.las cuales mandan ~. sugiriendo que el crecimiento de. células endometriales ect6picas puede estar bajo control ~co (4). También se ha encontrado relación entre la citotoxicidad de los macrof"agos peritoneales y el estadio de la. endometriosis~. encomrándose aumentada en los estadios mfnima y leve y. disminuida en Jos estadios moderada y aevera. Se observó que la indometacina in vitro 2.

(9) aumenta la citotoxicidad de los macrofaao• peritoneales y adc:mia la citotoxicidad también se incrementa con el tratamiento sistémico con Danazol y anA&oao• de. ~. resultado•. publicados por Braun y cols. (S). Oosterlynck reponó que la citotoxicidad de tu célulu NK se encuentra disnlinuida en mujeres con eodomctriomia durante la f'a.e foliculu del ciclo menstrual sugiriendo que Jos esteroides 9CX1.181es podrian estar relacionados con la f\anción de las células NK(6). En otro reporte Kanzaki y cols. obtuvieron supreüón de célulu NK. al ser expuestas a suero de pacientes con endornetriollia. concluyendo que este pudiera ser un mecanismo para la implantación del endomctrio ectópico (7).. También existen otros. repones que apuntan a la relación del sistema inmune y loa niveles de csteroidea .exuales como el de Garzetti (8) el cual observó que la disminución de la citotoxicidad de las células "NK en mujeres con endometriosis correlaciona con la concentración de cstróaenos. en ese. estudio a. mayor cantidad de estrógeno• mayor filé la supresión de la citotmócidad de tu. céluluNK.. Oosterlynck (9) realizó un ensayo de inmunosupresión utilizando un inductor de nútosénesis inespecifica observando que Ja actividad de las células NK es dimninuicla aJ ser expuestas a liquido peritoneal de mujeres con endometriosis.. Ho ( 1O) tambi*t reportó. citotoxicidad disminuida de células NK en endometriollis el aagiere un defecto filncional de estas células de defensa.. Sin embargo recientemente a pesar de los reportes previos. que. indican una función deficiente de Ja actividad citotóxica de las c:élulas NK... n·noog11e y. cols.. en un estudio experimental utilizando primates no observaron diferencia de la citotmdcidad de las células NK en primates con y sin endometriosia ( 11 ). Existen otros reportes involucrando a Ja respuesta inmune celular en el desarrollo de la. endometriosis como el de Visano ( 12) el cual propone que alteraciones en el reconocimiento inmunológico puede ser uno de los mecanismos fisiopatolósico• en la endornetriosis. También se ha reportado la aecreción de proteina quimiotá.ctica de monocitos durante la. incubación de células endometriales de pacientes con endometrioais con interleucina l B o Factor de Necrosis Tumoral alfa (13). deficiente de interleucina 6. Rier y cols. (14) encontraron una producción. en respuesta a endotoxina en ¡>.aentes con endometriosis.. Otros autores (IS) han propuesto que 1a localización de complemento (c3) en el epitelio 3.

(10) . .- . . - puede. 9llaerir e l _ . .... ha._....,_ m w,..... del..............,. ataque de compl-•o in vivo. de. Tr....C~ión. - - - - ....,._.,..... iatrtwo• -. Se. de CrecimMato (TGF-B). e. -. ........ del. nhl9la....,....,. ele F -. liquido peri.-1 de _.__ con. -ometriollia. lo que podrfa del -..oDo · - ' d(l6). Khorram y cola. (17) reponanm _ . _ . _ eiev-. de la citoc:iaa RANTES en pacieales con endometrioaia modenlda y - - . , ~ -. -. citoc:ina puotisa , _ .. una función impo,._,e en el reclutamieato de -o&a- _ . , _ -. ~ala.. Como oe puede obl«V1U" - - -..U..- report- • la e....... de loa •e ..... eavuelloa mecanismos que involucnn a l a _ _ . ~celulary -pooibl en el dnarroUo de la end-.iollia. El brazo humoral de l a - - · ümaaw ~ lla aido ~o.~ y cola. (111) no - . r o n un -o~ de ..ci.,._a _ . _ _ e n el liquido perilonal de ,,_;-ea con endonwtrioaia. coaduyendo el de la fltaocitoai• de e_...,..ozoides en . , - e a con endometrioai• no el - . d o del - o de ~ ~ en el liquido perit..- de pacientes. La ""8queda de anticuerpos en paci-ea con endomdrioais ha a reporte. como el de Kennedy y cola. (19) ~ al enudiar a m q j - coe _ . , . . _ . ,...... -. elevado• de anti.,._• amicardiolipinu en una porte ele - · Confino y cola. (20) d i - de rsa total - el liquido peritDMal ele pecientea con endometrioaia.. reportaron. ain embargo encontraron. .....,_,,º. de -oanticuerpo ._¡ftco. -•encia de - - -. laG en -. liquido.. el - - e imp-ea de endometrioais que producen una .....,._. - a d a de l&O. los .,.,.._ pueden ..,. Mathur y cols. (21) oboervaron la. relevantes en la relación de autoinmuniclmd y - · · Odultoya y cola. (22) encom...-on una correlación positiva en la fijación de lgG - _.....,. con endometrioai•.. "°". y concluyen que • pueden encontrar anti~• laO 50".4 de las ~endonwtrioais. pero existe la eluda que ai estu paei-n _ . _ , a un -'>pupo d e - . enfermedad.. Badaway y cols. (23) reportaron -. la - . u : i ó n de -cuerpos. antiendometriales fue sianificativamente mU alta en pacientes con endometriosis que en tos 4.

(11) ....-om.. ..,. encoatl'Won. nive1n mayores de anticuerpos en suero que en el liquido E.to9 ....,..,..,. aqsieren que el ensayo de anticuerpos antiendometrio es _ . . , . , y vd...., para el ~co y evaluación del progre"° de la enf"ennedad. ~-. O. ·. :a' amn. y colal. (24) reportaron aumento en la. co~ación. de anticuerpos. 1 - r i o . . loa -...:lioa iniciales de la endomctriosi• y niveles disminuidos de estos en. loe --.tioo avanzado•. Keanedy y cols. (25) observaron una <COpucota de los a el tratamiento m6dico de la endometriosis. encontrando que el danazol y los ..UOSO• de GnllH dismimayen la c:onccnuación de anticuerpos antiendometrio. ocurriendo • o a aivelea llipif"<:ávoo ..,1o con la -elina. Sin ......._., S-cbeako y c:olo. (26) cueotionando la existencia de anticuerpos ~·. ~ en el ...-o ele mujeres con endometriosis. reporta que la asociación entre la 9Ulainnwmidad endometrial con la eadometrioai9 falta aún ser establecida. Tal parece que la cliveraencia de loa reportea acerca de estos puntos. pudiera deberse a diflerencias. -ocloló¡pcaa ea loa -.dioa. tal como ou¡¡ie.e W"tld y cola. (27) eUoa <ealizaron un estudio. cloade. encontraron que todas las mujeres con endometriosis mometidas a inmuaotluornc:encia iDclU"ec:u tuvieron tinci6n de citoplasma positiva.. concluyendo que las variac::ione9 utilizada en la metodologfa reportadas por otros autores son las razones pooib- para no encontra< anticuerpos aatiendometriales. Otras U - de. ~6n. han IAJlllido con el fin de explicar el deaarroUo de la. endomctrioaia tal ea el papel de factores anaioaénicos en el liquido peritoneaJ de pacientes con endometrioaia. Ooatedyllck y cols. (211) reponaron que el liquido peritonw de muje<es con mldometrioai.s contiene m6s. &ctores angiosénicos que el núsmo de mujeres sin. endolnetriosis. concluyen que esta actividad angiogénica pudiera ser imponante para el crecimiento y proareai:ón de las lesiones endometriósicas.. Evers (29). hace una reflexión. acerca de las pier.aa que confi>nnan d rompecabezas de la endometriosis.. Las primeras. piezas .muestran que todo empiez.a con la separación de dos tejidos funcionales. el endomctrio fimcional del cndometrio basal. Fragmentos del endometrio funcional refluyen a través de las trompas de Falopio y alcanzan el esencialmente hostil. medio ambiente de la. cavidad peri.tone.al. Actividad proteolitica., macrof"agos activados y células natural lciller. s.

(12) todos ae combinan para degTadu" y diprir los 6 - t o • ele tejido ~·· C aisladas que escapan este sistema de defimaa pierden. 8Ua prop · cd..SC. ..u.e.ivu y no • implantan. Ocuionalmente ~toa mayores de tejido endometrial -. nito en evadir. las lineas de defensa perito--i,. p o a i - e por., número mayor de c11u1u,. por un def"ecto deaarroUar6.. int~. por. 1"icrotrauma a el. que. en el sistema de cleftmu.. una. _.-tlcie. peritoneo~. pcritonNI. po~e. Aun uf.. la endomcuiosia no me. in-. previene. la. impiam..,ión.. la matriz extracelular. entonces la implantación exitosa. podr6 ocurrir, y la angiogénesia clclica en el trKto reproductor f"emenino. la cual ea critica para la reproducción humana normal. permitiR la IObrevivencia y crecimiento del endometrio ectópico y el deurroUo y rem.odelamiento tiadar clclico sublleCUClll:e. intricada relación entre el tejido ectópico y. Esta. el lwñped resultará en el desairoUo de. endometriosis si el sistema inmunológico fillla en su fimción.. 6.

(13) La endometriosia como la clellnió ~ - 1928 <:Ollliat• - l a . , . - de ....,...ra. endometriales y estroma fbera de la cavidad - - . u i a l (1). El po9IUló la~ del n6Vo _ . , , . , a fl'avés de laa. ~de. fWopio como la.,.... de la ................ la~ la. existen otras teoriu para explicar el -.VDo de. y_....._. CODM>..,... T--. -splui•. celómica. la dioeminación linflUica la~-.,.-. pmo la ha llamado ~e la - ó a en lo• último• allo• e. la i.n!NJlótlica e.a.te aociacióa entre eado.-Ooaill y .._,esta - - . ; . , . alterada, llÍll - . . . . . , loa ,,_...;.....,. por lo• cuala la inmumded celular y/o llumonl ~ o pwm;ten el crecimiento ecrópico del encf.,_¡jo requiere mayor~. _ól.,.., -. 7.

(14) IV• .IUSl'U'ICACION La. ~. En la época • . , . _ • el 2 81 5% de la poblmción 11ener81. • c:alcula que el 25% de las mujeres manifiesta datos c:linicos de esta J1d. Ea ....._ •erilidad. la incidencia puede Uqar hasta el 20-40"/o. sin. ~. _... ........., a -. . _.._.. de . . 6 - - - a y de . , . _.,.monea tanto reproductivas como las de. dolor p6lvico Cláaico. no ee ba jdcntificedo con attteza la ctiolos;ia y fiaiopatoaenia de esta. -. ,.,. lo cual ain duda Mee mM difldl el manejo, el pronostico y consejo a este 8f'Upo. 8.

(15) V. llUOTESIS J. Ex:iaten difCr'enciu en la composición de las subpoblacione• de leucocitos contenidas en el microambiente peritoneal de pacientes con endometriosis. las cuales condicionan un 8lllbieale ea el que la a1preaión del aistema inmune es la característica principal. 2. Existen snoduladorea 90Jubles contenidos en eJ liquido peritoneal de las pacientes con endometrio.U que llCtú.n como inmunosupresores.. 9.

(16) 1. Cumlli8car' y comparar las llUbpoblaciones de leucocitos en sangre perif"érica y liquido. peritoneal de. na.diera con cndometriosia y sin endometriosis.. 2. Evaluar la preaencia de actividad inmunosupresora en sangre perif'érica y. líquido. peritoneal de flllÜCl'ea con cndometriosia y sin endometriosis.. 10.

(17) VIL MATEIUAL Y METODOS. CIUTEIUOS DI: INCLUSION 1. P-=ientes a Ju cuales .e les nalice Japaroscopía como parte del estudio de esterilidad. 2. En lu que ae establezca la p.resencia o ausencia de endometrios.is. 3. Pacientn a fu cuales se upire liquido peritoneal sin contaminación hemática. 4. Pacientes en las que se obtenga una muestra de sangre periférica.. CIUTl:RIOS .DE l:XCLUSION J. Pacientes con datos de enfermedad pélvica inflamatoria aguda. 2. Pacientes en las que no sea posible la aspir.ción de liquido peritoneaJ o que este liquido se encuentre teftido de. sansre o francamente hemático.. 3. Pacientes en las que no se cuente con una muestra de sangre perif"érica. -4. Pacientes que no estén de acuerdo con el estudio.. 11.

(18) TOMA DE PllODVCTOS . .ouxacos.. Se -..diaroa 26 ~ea que awdieroa a el JNP« _ . eo&udio de ~ y -. fueron sometida a 1_.,1COpfa.. Con ~o.U •. eaud.iaron 12 . . - . . y c:olllO. controlea filecoa 14 paci-ea con esterilidad aia enc1o--.. La ........acopla - ~ de mmoera convencional,. , _ wa incUi6n Yeftical ~ CX'loceado una 113Uja de Veras e iauun8ando C02 hasta obtener una preaión de 12nPnba con Jite. de C02.. Se procedió a Wroducir trocar prindpool de IOmm • a tnlVft del cual -. -...Uce el U - ....iia para. vicleo'8paroacopio, •procede a realiar _....,.punción ....,.._trica colocar trocar aecunduio de !lnun. Se procede a teviaióa de la cavidad perit..-1 y. aat- de realizar la cromotubación. o .._.... -. a aspirar liquido libre de fi>Ddo de ....., ~o. _.rorio.. Una vez. obtenido el liquido ea colocado en un tubo ele enaayo cónico de 15 cm. y pu-o -. refiiaetación.. .. Toda._~- recibieron - - _ . . . pva el procedimiento. Laa cinq¡fa9 fileron. pro..-. laparoacopla -. durante la ,._. pro~. del ciclo memtrual.. Antea de iniciar la. obtuvieron IOcc de aan¡¡re periftrica en tu-~. la cual -. ~ó. a temperatura ambi-e por 20 minuto• y p o s t - e - colocó - reftiawación para evitar la liaia celular en caao de cmnblos btuaco• de t _ . . . . . . . . Una vez temñnada la. cirusfa la sanare perif"érica y el liquido perit..-1 fueron trulad8do• al Bioqulmica para su procesamiento.. ~o. ele. PIU:PARACION DE SU.PD•UCION.l:S C.l:LUl.Alt.l:S DEL LIQVIDO PEIUTONl:AL V SANGll.I: PIEJUP.l:IUCA. Los liquidos p e r i t - obtenido• conforme a la sección previa fueron .,...,.,-Os de - a inmecliMa mezclando el volumen total del liquido con un 'Y1'.'lumen ~alente de medio de cultivo RPMJ 1640, adicionando con 10"/o de suero fiotaJ de ternerm, JOOU/ml de penicilina. 10 mcg/ml de -reptomicina. 20 mM de glutamina. 2.0 glL de bicarbonato de sodio y !loomM de mercaptoetsnol.. Las muestras de sangre perif"érica 11e incubaron a temperatura ambiente para lledimentar los 12.

(19) eri1roc:i1os y se analiz.aron deopuéa de puri&ar loa leucocitos.. Las , , , _. . deo llquido. peritone&I y las de sangre periférica fueron analizmdaa para viabilidad con azul tripan, !Ueron desechadas si la viabilidad era menor del~. ANALJSJS DE su•PO•LACJONES Cl:LULAJU:S CON CITOMETRIA DE PLUM>. Las células preparadas _.;n la lleCCión anterior fileron tellidu con -cuerpos monoclonales. de. ratón. con. el. liotema. Simult-. IMK-Lymphocyte. (Beckton. Dicldnson.USA). Este ea un m.tema de inmunofluore.ceacia di.recia coa do• icromogeaoa lipdoa a IUlticuerpoa diriaidos contra loa aipientea cletenninant:ea antiaenicoa: CDl9+. CD3-+CD4+. CD3-tCDa+. CD3-CDl6+. CDS6+. calcular. la. cantidad. de. (CD3+CD4+) • linfocitos. linfocitos. T. (CD3+ ).. C03+.. Elltos detetminantea permiten. li.nfOcitos. coopcradoreaf"Ulductores. .._res1cicoto><icos (CD3+CDB+) y células natural lciller. (CD3-CDl6+). Cuando los anticuerpoa lluorescentes aon _ . . t o s a las células. ai~. estos reconocen a los dt...1erminantes antijlellicoa enclavado• en la membrana y permiten. cfillti.,.wr entre las ditec-entes poblaciones mencionadas.. Una vez realizada esta tinción • ae. lisaron loa leucocitos con una M>lución de cloruro de amonio. se lavaron para etinlinm" todos los reactivos utilizados y se fijaron para su anilisis en una solución de Connaldellido. Las mueotras se analizaron en un citómetro de ftujo modelo Fac11Ca11 (Beckton Dickin-. USA). PRUEBA. DE. SVPRll:SION. DI!:. RESPUESTA. CLONAL. ll:N. LINJl1DCJTOS. Preparación de linf'ocitos perifericos. Se obtuvieron mueatras de 20 mi de. sanare periftrica. Pll:Rll'ERJCOS. Lu rnuntras fbecon anticoaguladu con citratos y 80 dejaron reposar a temperatura ambiente 30 minutos con objeto de eliminar la mayor cantidad posible de eritrocitos. El sobrenadante total de esta Mdimemación ae diluyó 1: 1 con 90fución saJina amortiguada y se agregó en la p..ie superior de tubos que contenlan Lymphoprep (Ficollde cinco donadoras sanas.. metriz.oato de sodio,. Nycomed.. USA).. de acuerdo con la1I instrucciones del fabricante. Cada mueotra se centrifugó a 400 xg durante 1 S minutos y al final se separó cuidadosamente la intetf'ase entre la muestra y el Lymphoprcp. Las células de esta interf'ase se fa\l'aron por 13.

(20) centrifiJSll<'ión a 100 "8 por dos - . . . . . . <:c>n 20 mi de medio de cultivo RPMI 1640 pwa eliminar el Lymphoprep.. Loa linfocito• lavados ae contaron en un hemcx:it6-o ele. acuerdo con la técnica estándar. ESTIMULACION CON MITCIGENOS Los linf'cx:itos purificados se suspendieron en medio R.P.MJ 1640 suplementado con 1 OYe de: suero ,.etal de ternera deac:omplementado y. 11e. sembraron en .,.;u de 96 pozos (2 ". 100,000. cau1aa. se dqaron eatabiliz.u- d u r - dos boru en atmóüera de 5% C0219S% aire y entonces se agregó en secuencia co...,_valina A (ConA. Si¡pna Chemical Co, USA) 1.0 µa/mL. 1.0 mCl/ml de limidina 3-H (New EnsJand Nuclear, USA) y liquido cela./pozo).. Las. peritoneal o suero de cada una de laa pacientes en estudio.. Cada caja utilizada incluyó al. menos 5 pozos de control negativos en los que no se agrqó el mitógeno ConA y otro• 5 po70s en los que no se agregó liquido peritoneal o suero pero af ConA.. Los linCocitos se. mantuvieron en incubación durante J 8 horas y aJ final de éste periodo.. se recolectaron y lavaron con ayuda de un cosechador automático. que en breve. toma las célulu de cada pozo.. las rompe con choque osmótico y hace pasar el material liado por un filtro en el que se queda unido el DNA.;, después de lavar extensivamente este fihro.. para eliminar toda la marca radioac:bva no incorporada al material. g~ico... se colectó cada uno de los filtros y se. distribuyeron en placas de pozos ntúltiples en las que se. -sresó. 200 µ L de liquido de. centelleo Microscint (Packard. USA) y la radiollCtividad de cada pozo se <:uantifl<:ó en un contador de centelleo modelo Top Count (Packanl. USA). Este método mide mitogénesis por incorporación de timidina. marCll~. de manera que entre más radioactividad se acumule. por pozo significa que las célulu experimentaron mayor indice de duplicación.. 14.

(21) VID. IU:SVLTADOS En este estudio observacional. proapec:tivo. tranavcnal con pupo de comparación.. 11e. incluyeron 26 pacientes estériles: 12 pacientes con cndomeuio9ia (endometriosia núnima 4 pacientes. leve 5 pacientes y moderada 3 pacientes) y 14 pacientes sin c:adomelriosb. Loa. intentos de incluir pacientes f"értiles DOltlllllea (omnetidaa a . . . . .oeluia por. ~). resultaron inftuctuosos pues el número de células aialadu del liquido peritonul file insuficiente para su anAlisis. La edad promedio del JPUPD de paciemea con cadometriolia por -adioo fue la lliguiente: endometriollis núnima 30.0 (r 24-35). -ometrioais leve 31.6 alloa (r 29-34). endometriosia - - 32.6 aftas (r 31-35). Para el ¡pupo de pacientes estériles sin endometriosis la edad p r . . - o fue 27.14 afio• (16-33). La. menare&. file de los. 9 a los 14 anos en todas las pacientes. no exillliendo dif"enmcia llipificativa entre el grupo de pacientes con endometriollis y sin endometrioais.. Con respecto al cuadro cllnico dos de las pacientes con endometriollia leve presentaron dismenorrea y niflauna dispareunia. refirieron dismenorrea y. En el. s:rupo. dos diopareunia.. de pacientes sin endOlllC!trioais euatro. Todas las. ~. con diap>óstico de. """°. de Douslas y en loa ligamentos uterosacros. De las pacientes con esterilidad sin endometrioaia en una de ellu ae. endometrioaia praentaron lesiones en el fOndo de. encontraron nüomaa subaeroaos. en dos de ellas ochlsión tubaria distal. dos pacientes con oclusión tubaria medial. 3 pacientes con procesos adherenc:iales y una paciente con un tabique uterino completo diasnóatic..to por hiateromcopia. En cuanto al anA.lisis de subpoblaciones celulares por grupo encontramos los siguientes datos basados en loa valores de. ..-a. nomuoJes en. ~. perifi!rica (tabla 1).. Endometrioaia mlnima (gTtiica 1). liof"ocitoa T aumentados en Hquido perit-1. linf'ocitos B disminuidos en liquido peritoneaJ. Endometriosia leve y moderada (8ráfica 2 y 3). linf'ocito1. e. disminuidos en el liquido peritoneal. disminución de linf"ocitos cooperadores y aumento de. supresores en el liquido peritoneal. ea decir relación cooperadores/supresores alterada. (umlisis estacHstico con prueba t-student,. desviación estándar y media (tablas 2,. 3, 4).. IS.

(22) Las pacientes estériles ain cndometrioü moatraron lo•. ~. daloa: ........ao dcr. linfocitos Ten el liquido peritonnl. diemin"Cióa de llnCocitoa Ben el liquido peritwal, disminución de cooperadores y aumeato de . .,,.....,,... aumento de linfocitos T .aivado• en. el liquido peritoneal y . . . - o de lu células natural IWler en tabla 5).. periflirica. (Jp"6fica 4 y. Al realizar las comparacio- del 111141illi• -.dútico <:<>n la p....- t - - -. todo• loa. srupos encontramos lo U&uieftte. al eatudiar la9 .ubpoblacio- de llnCocitoa ea perif"érica: no e>d.aió ditereacia en lu adlpoblaci.,_ de linf"ocito• T totala (tal>la 6). linfocitos B (tabla 7). ni en la cantidad de linf"ocito• T -1ivado• (tabla 11).. Se encoatró. alterada la relación entre JinfOcitos coopendorn y supresores en tu paciente• con endometriosis. siendo esta máa notoria en lu de endomctrioais moderada (t.ablu •. 9 y 10).. Lu células natural lciller se encontraron llianificativamente elevada en el grupo de pacientes con endometriosis leve y moderada. al compararlas con el rato de la9 pacientes (tabla 12). Con referencia al liquido peritoneal. no eximó difiorencia entre las subpoblaciones de linfocitos T. totale. (tabla 13). linf"ocilos D (tabla 14). coopendores (tabla IS)• .upraores. (tabla 16) y natural ltiller (tabla 19) entre los dif'erentn. arupo•. de pacientes.. La única. dif"erencia significativa fue la cantidad de linfOcitos T activados disminuida en lu pacientes. con endornetriosis leve al compararlas con las pacientes sin endometriosia (tabla 18). En cuanto al ensayo de supresión de la . _ a t a mit.,.mica inducida por. ~valina. A. mostró la presencia de f"actores aolubles preaentes exclusivamente en el liquido perit:oneal de. pacientes con di-snóstico de endornetriosis y que suprimen de manera constante Ja respuesta mitogénica en finf"O(:itos periféricos humanos y que se aprecia en la estimulación dosis. respue-.. Aunque la -resión de la mltogéneaia irwspeclftca oscila en un .._., de 30 a. 123%. se presentó en todos los caso• con endomeniosis y en ninguno de los liquidos. peritoneales de las paciente. estériles sin endometriosia.(obaérveoe sr*flca 17 y 18).. Cabe. .-eftalar que la actividad supresora solo se encontró en el liquido peritoneal. la respuesta no se encontró en unsre perif'érica.. 16.

(23) IX. DISCVSION el d..-roDo de fa cndometrioaia ha t-..lo de _.. El papel que la inmunidad jueaa -. e:llplicado por los divenoa halJ&raos en loa eJqJef'ÍlllmtOS realiradoa en la última dócada,. sin. embarso, es posible que fa divenidad de loa. repones -. debida a que la. ~oia. es. ww enfennedad dinámica y entermedsd.. Sin duda. cada ballaq¡o mslado rdh!;e ._lemente un momemo de la las düerentea metodol<>jJlaa utilizada por loa ~ autores.. adem*8 de la imposibilidad de sincronizar todas laa varimbl- en la flsiopatoserua de la. -~osis.. de alsuna manera iaftuyen. hacen el llllálioia de la infbrmación mú complicado. Y .:onfUso.. En el presente estudio. se h8n encontrado ballaqos i m - e s . al realizar las comparaciones .e obllef'Va que en todos los grupos existe una inclinación hacia la. inmunosupreaión en el microunbiente perifonea!.. siendo esta mu pronunciada en las. paciente• con endometriollis moderada. Tunbién ea de notar la disminución de linfi>citos T. activados en el liquido peritoneal de lu pilcientea con endometriosis leve. Los linfOcitos B se encontraron disminuidos en todos los srupos de pacicmrea en el liquido perito.neal.. Al analizar • - aubpoblaciones de linf"ocitos -. .._.., perffi!rica oe encontró la .,_¡dad de. cooperadores disminuido• y la csmidad de oupresorn/citotó><icoa sumentada. relación con la severidad de la endometrioais.. siendo endometriosia moderada.. ~. t~o. -o. alterada en 1.. pacientes con. La subpoblación de natural ll:iller se encomró elevada en. aansre. periterica en las pacientes con endometriosis leve y moderada_ no uf en los casos de endomet:riosis núnima. Analizando estos patrones podemos pensar que exista ulU: alteración en la respuesta inmunológi~. posiblemente fa respuesta sisthnica es adecuada en estas p8Cientes al. encomr.r niveles elevados de. ~hdss. natural killer en respuesta al tejido - . ; a 1. ectópico. y que la alteración en la relación de linf"ocitoa T cooperadores (CD4+) y lintOcitos T t1Upresores!citotóxicos (CDS+). aea debida a que el brazo ae encuentre inclinado hacia la. producción de linf"oc:itos citotóxicos. en respuesta a Ja endometr:iosis.. El encomnu et. microambiente peritoneal inclinado hacia la inmunosupresión. como lo demuestra una 17.

(24) telación más alterada entre loa linfoci&oa c::oopaadorc:a y .,,,,...,.-ea. y niveles mU hlüoa de. linfücitos T .ctivados. Invita a la pollibilidad de -. la ._.aa inmunolóSica a nivel local. no sea eficiente y _...;ta la -revivencia e impl-.ción del tejido -metrial ec:tópico.. ah-. También es factible que la respuesta -. - e fimo:ionaado normai-e 111 la disminución. de linfocitos B es debida a que me - . , Uev....to a cabo la llÚllellis de illmunoalobulinu. y que de esta misma manera la relación hacia linf"ocitos T citotóx.icos.. entre CD4+/CDa+ aea debida a la diCerenciaclón. Pero evidentemente existen factores inmunosupreaores en liquido peritoneal de pacientes. con endometrioais como lo han descrito otros autores (9) y como ae confirmó en este en.ayo con concanavalina. sin embarao la c.-.cterización de estos compuestos en. el fbturo es. necesaria para un mejor entendi.ntiemo de la cndometriosis. Posiblemente el papel de fa respuesta inmune no aea el único responsable del desarrollo de la endometriosis. sino p.nicipe en una serie de eventos que juntos tal como lo menciona. Evers (29). permitan que loa fi"agmentoa de endometrio ectópico que pasan a través de lu trompas de Falopio. sobrevivan al no aer destruidos por las lineas de def"ensa del organismo. se implanten en una superficie peritoneal microtraumatiz.ada y. por la acción de f"actorea. endocrinos y f"actores anaioaénicos. estos únplantes ectópicos reciban vascuJarización y puedan -ablecerse y proliCerar. GnM:ias a. los esfuerzos en la investiaación nwndial. cada día estamos mas cerca de. comprender con certeza los niecanismos implicados en el -..OUo de la eadometrions. y sin duda esto nos permitirá. llevar a cabo un tratamiento mis preciso y acertado. obteniendo mejores resultados en el manejo de las pacientes con esterilidad y endometriosis. sin olvidar al gran. número de mujeres af"ercJ.su por el dolor pélvico crónico que produce esta. enigmática enf"ennedad.. 18.

(25) X.. TABLAS V. GRAFICAS. 19.

(26) SUBPOBLACIONES DE LINFOCITOS VALORES NORMALES DE REFERENCIA EN SANGRE PERIFERICA. C03. C019. u.•-••. 7.1 -23.3. :11 . . . . . .. coa. CD4/CD8. HLADR. CD1656. 18.9-47. 0.7-Z.3. Z.8-17.3. 4.8-Ze. 20.

(27) e.. .. .... ... ~-..._... T-2 p.a..a.,. -••••en-._...._ (•-4). --1611 - --r. error eaú•d•r. p. CIUSP CIULP. -·'°. 2.97 2.•'7. 0.038. '74.20. 5.9.!I 5.'75. CDIHP CD19LP. 15.:15 1.00. 4.1'7. 2.08 o.•'7. 0.005. 0.94. CINSP. 35..!IO. 19.'2. 3.42 13.... l.'71 6.'7•. NS. ~LP. CIMSP CD8LP. 31.90 34.•2. 6..69 23.U. 3~. NS. BIADRSP HIADRLP. 20.0'7 1'7.32. 13.92 25.20. 6.96 12.60. NS. CD 1656 SP CD 16 !!16 LP. 6..!!1'7 '7.35. LOO 3.63. •.oo 1.81. NS. --~. ~. 11.62. 21.

(28) e_...,_............,.... ...,.._.,_ - -r T-3. Pmciemtm e-. ••11••....._'8 In-e (•-5). -iacl6e. error ntá•tlar. p. CD3SP CD3LP. 67.!IO 71.38. 3.06 6.!11. 1.37 2.91. NS. CDl9SP CDl9LP. 11.14 0.6!1. l .... 0.30. 0.003. CD4SP CD4LP. ...... 3.31 O.A 2.;J;J 2.N. 1.04 2.16. 0.001. 23..32. CDeSP CIMLP. Z9. . . 4!1.66. 4.73 !1.11. 2.11 2.211. 0.016. lllADRSP lllADRLP. 10..31 L67. 4.6!1 6.115. 2.oa 3.06. NS. CD 16!16SP CD 16!16LP. 19.67 14.11. 3.89 7.2!1. 1.74 3.24. NS. 22. ·----~------------ -··--~----·---.

(29) e_,...__._..__ T•-4. - ----. ---C..-11•-~ -....(.~). ......... CD.HIP CD3LP CDJ!llSP CDJ!llLP. CINSP. CD4LP. '7.Z.U. ,_.,..,.. o.as. ··IS~. CIMSP. ~. CDeLP. 56.23. BIADRSP BIADRLP. .,s.-__. CDJ'55'5SP CDl'55'5LP. S.M. 1...-. ......... ....--. 7.IS 10.45. •••. ... o.u %.SI ~. 2.73 10.19. .... ..... .... 131. _. _........ 4.13. ... ........ ~03. o.a. .,_... 1.45. •. NS. .-_ NS. l.!111 2.!113. NS. 1.73. NS. 2.n.

(30) e. 1 1El1•111iati . . . . . . T .... S. - --- --. . _ _ ... - · · • • l l - ( • - 1 4 ). ............. ~. •. 'l'..25 12.16. 1.93 31.25. 0.1132. CDILP. -.10 '731.eo. CDl911P CDl9LP. IG.88 1.95. ...O'l' 31.'7'l'. 1.oe 1.00. CIMllP CD4LP. llllA4 231.61. 5.4'7. 1.46 l.'l''l'. º·º·-. CDllLP. ~·. ...,...... lllADKllP lllADKLP. 11..92 aG.95. ·5.99. 15.&'7. 4.24. CDl696SP CDl696LP. 18.2'7 9.'76. 8.6'7. 2.31 l.'76. 315.05. 6.64. L'72. "'·'°. ..... 2..33 2.11. 0.002. 1.49. 0.1146 0.009. 24.

(31) C•••. .............. .._......... T-•. -. CIU. '-• M_,,... MNS. Leve. Med-. NS. NS NS. NS. NS. ....... _....... T•-7. COI' M-. Mlmlaa. Leve. M-. 8111•••·-....-.-. ....... _._.. NS. NS NS. NS. NS. ....... -. ._. sa. ............... NS. 0.007. T. . . . 8. C'IM Al'--. M-. ...... Made....... NS. '-•. NS. ... Modend•. NS. o.ooz 0.013.

(32) ............... ------e:....... 1. T..._,. cae. ...... M-. ... -•••eeriesla. M•-. Leve. NS. M-racla 0.043. NS. NS. NS NS. ._._.._ T-10. -. CINICi.. M•lma. Leve. M -...da. NS. NS NS. NS. NS. Lft-e. _......_.. M ......... NS. --..--. T-11. HLADa. M..-. ...... .._ Sim • • · -. Mmlma. ........ NS. Leve. MDd-.. NS. NS NS. NS. NS. 26. --------·-------------.

(33) c.....--............ ..._.,....._ T-U. CDl6!!16 M..._.. .............._.. M ....... Leve O.o.18. NS. NS. Mederada O.IM:Z. NS. Leve M ........ NS. e _ _.._ ... _.. Ta-13. U.•llle.-0-. s-.-CD3 MÚllma Leve M-.. Mi.lma. NS. Leve. Moderada. NS. NS NS. NS. NS. Talllat•. u.-peril•CDl!t M ...... Leve MSÚI e11•1•drio8ia. Mialma. NS. Leve. Moderada. NS. NS NS. NS. NS. 27.

(34) ...,....po. --. c___ T-15. ..... ....... CD4. Mmima. M-. Leve. M-raclla. NS. NS NS. NS. NS. i-.. M-.. Sim•••-•trioáa. . . .-perit·-. NS. Ta-16. ene. Mmima. M-. LeYe. M ...eraclla. NS. NS NS. NS. NS. LeYe M-.i Sia . . . . . . . . . . . . .. NS. Ta-17. Lfll.-perlt-eal. Silo_. CJMICIM. Mmüaa. Mmüaa. r.e.... LeYe. M ..._. NS. NS NS. NS. NS. M-.. NS. 28.

(35) u.--...-- _,__ -M---M---c.....--..._.. Ta. . . 18. HLADa. ._.. .NS .NS. o.m2. .NS. ._... M-. Leve. .NS. T.-1,. Lfca•ld•perit-. CDl65'. Mfollma. M-. a.-e. ... NS. M-. .NS. .NS NS. NS NS. NS. 29.

(36) ..-orraacON-•w-. i. 11 .... 1 'º. 1i. 8. 30.

(37) G""91'1CA 2. .,~----------------·---·---·. "'. ,'. I~. ,~. 1. 1. 1. 1. 31.

(38) O""'ICA 3. .. ..------------------------------·------.. ..... "'. .... i:. f9DS1. ~. 32.

(39) Q91lN'lCA •. .... .... .a..... r-csi. 1:... o. ~. ft i. 1. e. i. 33.

(40) ..__TTOT_ _ _ _. fº. ·-. 1.. ... E.-. ---. E.LEVE. E:.MOD. alNENOO.

(41) ~·. ..------........ E.LEVE. E.MOD. 81NENPO. ~.. 35.

(42) -ICA7. .._OCIT_T _ _ _ _. ... (iiii&l ~. 10. ---. E.LEVE.. E.MOO. 8tNENDO. 311.

(43) GlllAP'ICA. a. ~--T------. " o. 37.

(44) -·. l. i. t. ~ocnoaT.ACTIV_ _ _ _ _. 'º s. ---. E.t.EW. E..MOP. arNEJICJO.

(45) G~ICA. '10. I"' ..... 1 o E.LEVE. E.MOD. &INENOO. ~-~·. 39.

(46) -··. i. •. -. '>D. e.<.EVE. E.MOD. BINENDO.

(47) i. r IMWacrto9•-~--. o E ...N. ---. E.LEVE. E..MC>D. .,NENOO. ....

(48) QlllAPJCA 13. . . . .OCl'l'Oll T COGPEltAOOllEa EN LJQUIDO PEIUTONEAL. "". "". i 1 •. 3>. 1. ·s. 'º s o. ·-. E.LEVE E.MOO .......,. . . PAGIENTW&. SINENDO. 42.

(49) G~ICA. 14. ----------------------1. "'. .,. ... ic. • '. 3D ao. 'º E ...N. E.LEVE ......,_ m. E.MOD. SINENDO. P.CIDITea. 43. --.---~-----~-----.

(50) -·· ~-T. " o. ___..___ ----. E.LEVE. E.MOD.

(51) G9'AACA 19. 45.

(52) _..,.,7. I. 1 '·. .. J·. 1... ¡:. ....

(53) GRAFICA 18. 1. 1. i:. 47.

(54) 1. 1. ¡. l. ¡. '. XL CONCLlJSIONSS l.. Las. 2.. Las. p-. s-:-.,.... - - - ...,. y~...-- nivela ........... de.celulu coa. .-.....nom. leve. cooperadores/-. altcnda. en. y - - . , . _ _ una de linfbcitos el liquido pm¡r......i. iacliamda 1-:ia la. imnunoau~. 3.. Los linfocitos T - · oe -. pecientes con endometriolia.. 1'. -6a. NKenoanare--.. di-delo• m. el liquido p e r i t - m. las. 4. Existen fllc:tores solubles m el liquido perito...a de las pedentes con - o s i s con actividad inmunoaapre80l'L. s.. un..-....-. La~. j-. en. el~ ~toaul. delas pac:ientn c:on en la..._....cle la-ometriosi•.. ~. 411.

(55) EST ;i, TESIS S:.::.ua flt LA. NO DEBE. BltlLIOTECA. XU. alaLIOGRAFIA: l. Samp90n JA. Peritoneal endOll9trioa. duc to diurmi 0 •tioo of" cndomclrial tiwe into peritoneal cavity. Am J O b - ay._.,¡ 1928; 14:422.. 2. Hill JA. Faria HM,. SchifF l. ~ DJ. ClulractcrizMion of leukocyte oubpopulaliona in the peritoneal Ouid ofwomen with - o l l i s . Fertil Steril 1988; 50 (2):216-22. 3. Oosterlynck DJ. Comillic FJ. w_. FJ. V - - . U e M. Konickx Pll. Women with enclometriosis ahow a defect in aatunl killcr 8Ctivity reou1tina in a cSec.- cytotoxicity to autologous endometriwn. Fertil Steril 1991; 56 (1):45-51.. 4 .. Semino c. Semino A. Pi-a O. Mi-1 MC. Baroc:cci S. Venturini PL. ~ N. Melioli O. Role of major hi..ocompatibility compl- clau 1 ~ natunll lállcr like T c:elJa in the genctic control ofendo-.,.¡.. Fertil Steril 1995; 64 (5):909-16. 5. Braun DP. Gcbel H. Rotman c. Rana N. Dmowolty WP. Tbe development of cytotoxicity in pcritoneal macrophascs from women with endometriosia. Fertil Steril t 992; 57(6):1203-10. 6. Oosterlynck DJ, Meuleman C. Wacr M. Vandeputte M. Konickx PR. The natural ldller activity of peritoneal Ouid lympbocytea is decreued in women with enclometriollis. Fertil Steril 1992; 58 (2):290-5. 7. Kanzald H. W - HS, Kariya M. Mori T. Suppreuion ofaatunl ldller cell actlvity by aera from patients with endometriollis. AmJObstet Oynecol 1992; 167(1):257-261. 8. Garzetti GG. Ciavattlni A. Proviniciali M. Fabris N. Ciptitti M. lllomanini C. Natural killer ceU activity in endometrio.U: Correlation between 8el'Ulll estradiol levels and cytotoxicity. Obstet Oynecol 1993; 85 (5) (pt 1):665-B. 9. Oosterlync:k DJ. Meuleman c. Wacr M. Konickx PR. V-eputte M. lmmunosuppreuive activity of peritoneal ftuid in women with endometriosis. Obstet OynKol 1993; 82 (2):206-12. 10. Ho HN. Chao KH. Chen HF. Wu MY. Yans vs. Lee TY. Peritoneal ......... kiUer <:ytotoxicity and CD25+ CD3+ lympbocyte .,bpopulations are decreased in women with llla&elD-IVendometriosis. HumReprod 1995; 10(10):2671-5. 11. D"Hooghe TM. Scheerlinck JP, Konickx PR. Hill JA. Bambra CS. Antiendometrial lyrnphocytotoxicity and natural ldller cell activity in baboons (papio anubis and papio cynocepi..Jus) witb endometriosis. Hum Reprod 1995; 10 (3):558-62. 49.

(56) 12. Vigano P. Vcn;cllini P. Di Blaaio AM. Colombo A. C - . n i GB. v..,.a¡ M: Defk:ienl anticndomctrium lympbocytc-mecliated cytotoxicity iD patienla witb ~- Fertil Stcril 1991; 56 (5):894-9.. w-. 13. Akoum A. Lcmay A. e...- c. Herbcñ J. - n ofnlOllOC)'le ~ proteia-1 by cytokine-stimulatcd - - . ; . ¡ ccUa of witb ~. Le poupe dinvellligation en gynecoloaic. Fertil Stcril 1995; 63 (2):322-8. 14. Rier SE. Parsons AK. Beckcr JL. AJtcrcd intcdeukin 6 production by pcrit.,_.i leukocytes from patients with endomctriollia. Fcrtil Stcril 1994; 61 (2):294-9. 15. c·cruz OJ. Wild - · Evaluation o f - . - r i a l tiuue ~e...._-- activation in women with endomctriollia. Fcrtil Stcril 1992; 57 (4):787-95. 16. Oostcrlynck DJ. Meulcman C. Wacr M. Konickx PR. TranafOrmina growth filctor - - · activity ia increaaed in pcritoneal fluid ftom women witrh endometrio8ia. Obstct Oynecol 1994; 83 (2):287-92. 17. Khorram O. Taylor RN. 11.y- IP. Schall TJ. Landen DV. Pcritoneal fluid concentrations of the cytokinc RANTES correlate with the M:Verity of endometrioais. Am J Obstet Gynecol 1993; 169(6):1545-9. 18. Ocntry WL. Buster JE. Scbriock ED. Carson SA. Failure to d - a t e signifi~ antispenn antibodies in peritoncal fluid ofpatients with endometriosia. Fertil Steril 1989; 52 (6):949-52. 19. Kenncdy SH. Nunn B. Ccderholm-Williarns SA. Darlow DH. Cardiolipin antibodies lcvels in endometriosis systcmic lupus Fertil Stcril 19119; 52 (6):1061-2.. ery1-....,...•.. 20. Confino E._ Harlow L. Gleicher N. Pcritoneal fluid and aerum antibody levets in patients with endometriosis. Fertil Stcril 1990; 53 (2):242-5.. 21. Mathur s. Garza DE. Smith LF: Endometrial autoantigens eliciting immunoglobulins (Jg)G. lgA. and lgM responses in endometriosis. Fcrtil Stcril 1990; 54 (1):56-63. 22. Odukoya O.A. Wheatcroft N. Weetman AP. Cookc ID. The prcvalencc ofendometrial inununosJ.obulin G antibodies in paticnts with endometriosis. Hum R.eprod 1995; 10 (5): 1214-9. 23. Badaway sz. Cuenca V .. Freliech H, Stefanu C. Endometrial antibodies in aerum and peritoneal fluid of inCenile patients with and without cndometriosis. Fertil Steril 1990; 53 (5):930-2. 50.

(57) 24.. c ..--;..,,,- os. u..... -. (1):114-9.. 25.. KA. Ca''º a•08. to lclC ~in -. ~. ce. c._.... _,.......,.. ....,_..__. in T mil .........,. F.nil -. oe. 1992; 5a. SH. 5-'<ey PM. S8ls-t U... ltic:b Bll. _........._._.._ ~ OH. A__.._.... _ _. ~m.---..sby11n. -. -. witb -. -. natiinlln. Obolet O,-:Ol.o 1990; 75 (60):914-•.. -M.. 26. S-ehenko AO. Kadllnan 11.S. Are tbcre - W i b o d i e s in..,... ofwo_. witb - o o i a ' I Fertil Steril 1991;56 (2):235-41. 27. W"ald llA, Shiven CA. Medden D. Deteetion.., _ -"bodiea in with endometrioús: ~ i - . Fertil Steril 1992; 5a (3):518-21. 2a. Ooaterlynck DJ, MMJleman activity ofperit-1 fluid ftom a2.. c.. Pldient•. Sobia H. V-..Uc M. Konidc< PR.. An¡popnic wftb - · · Fertil Stcril 1993; 59 (4):77S-. 29. Evcrs JLH: Tbe dcr-..,uruit end-.iosia. Fcrtil Stcril 1996; 66 (3):351-3.. 51.

(58) Parte de esta tesis fue presentada en el VI CoDjp'eso Mexicano de Ginecología y Obstetricia.

(59) LA FEDERACION MEXICANA DE GINECOLOGIA. y o•sTET•ICIA, A.C.. Otorga. AL .DR. JOSE M"A.. M"OJA.R.R.A ESTRADA.. DIPLOMA por haber obtenido PRIMER LUGAR en el área de INVESTIGACJON BASICA. con su trabajo - RESPUESTA INMUNE PERITONEAL EN ENDOMETRIOSISMáico~. D. F., noviembre 2 de 1993.. ~ DR.~6'i.LA SECRETARIO. L. Cº. 11.0DRJOUEZ. ERO.

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