Efecto del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” en hiperlipidemia inducida en Mus musculus var swiss

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(1)Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. UI M. IC A. ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA. BI. O. Q. TESIS I. IA. Y. Efecto del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” en. RM. AC. hiperlipidemia inducida en Mus musculus var. swiss. FA. AUTORES:. DE. ANGULO DÍAZ, Diana Carolina. BI BL. IO. TE. CA. ARCE LUERA, Angie Anali. ASESOR:. Dr. CAMPOS FLORIÁN, Julio Víctor CO-ASESOR Dra. SOTO VÁSQUEZ, Marilú Roxana. TRUJILLO –PERÚ 2018. Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(2) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. DEDICATORIAS A Dios Por qué me amó primero (1 Jn 4:19), fijó sus ojos en mí y tengo la mayor muestra de amor en él, me dio a conocer de su verdad, me regala día a día la vida y salud,. IC A. aun en tiempos difíciles su Espíritu Santo. UI M. me guía para seguir. Porque comprendí. muestra. O. me. su. BI. siempre. Y. merecerlo. Q. que todo lo que tengo, es gracias a él, y sin. A mis padres. FA. RM. AC. IA. fidelidad.. DE. Margarita y Próspero, por ser mi mayor. TE. CA. motivación puesta por mi padre celestial,. IO. por su incondicional apoyo a través del. BI BL. tiempo. Porque en ellos tengo el ejemplo de perseverancia, son mi ejemplo de amor, me enseñaron a que juntos en el nombre de Dios, todo es posible. Me enseñaron lo que es ser una familia de verdad. Los amo. Angie. i Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(3) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A mi hermana Tania, porque a pesar de no entender nada de los temas universitarios, siempre estuvo ahí. IC A. escuchándome y animándome, por no dejar. UI M. de confiar en mí, por preocuparte y siempre. Q. compartir bellos momentos llenos de alegrías.. BI. O. Eres una bendición maravillosa en mi vida y. AC. y compromiso para mí, lo demuestras día a. IA. Y. te amo, eres un ejemplo de fuerza, disciplina. Angie. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. día.. ii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(4) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. A Dios Por la vida, por su amor y su bondad disipada en todos nosotros, por la salud que nos brinda, por guiar nuestro camino de luz y esperanza y permitir luchar cada día ante la adversidad.. y. Pastor,. por. su. gran. amor. UI M. Elena. IC A. A mis padres. Q. incondicional, por sus valores inculcados, sus. BI. O. sabios consejos para lidiar ante situaciones. Y. difíciles. Por su ejemplo de lucha y. AC. IA. superación.. FA. RM. A mis hermanos. DE. Gonzalo y María Elena, por su amor, por la. CA. unión que nos fortalece, por sus buenos. TE. consejos para seguir siempre adelante y ser el. BI BL. IO. orgullo de nuestros padres.. A mi familia Por su apoyo incondicional, por sus consejos brindados para perseguir los objetivos y nunca rendirse. Diana. iii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(5) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AGRADECIMIENTO A la Universidad Nacional de Trujillo, por habernos permitido formarme en ella intelectualmente, gracias a todos los decentes y no docentes que fueron parte de este proceso de manera directa o indirecta, gracias a todos ustedes por ser parte de cumplir una de las más anheladas metas de nuestra vida, ser profesionales. A la facultad de Farmacia y Bioquímica por habernos facilitado los materiales empleados en. IC A. esta investigación, del mismo modo a los docentes encargados del laboratorio de. BI. O. Q. UI M. farmacología, por permitir el desarrollo y ejecución de la presente investigación.. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. Nuestra gratitud y reconocimiento por siempre.. Angie y Diana. iv Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(6) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Nuestro especial agradecimiento al Dr. Julio Víctor Campos Florián. Agradecemos de manera especial a nuestro profesor Julio Campos, por la oportunidad de haber brindado su tiempo, para aclarar las diversas dudas que surgieron durante la ejecución. IC A. de la tesis, por guiarnos en cada procedimiento con paciencia y buen humor.. UI M. Su confianza, apoyo, el respaldo en nuestro trabajo y su capacidad para guiar nuestras ideas. Q. han sido un gran aporte para nosotros, no solo en la ejecución de la tesis, sino en nuestra. Y. BI. O. formación como profesionales de calidad.. IA. Le agradecemos también el habernos facilitado los diferentes medios suficientes para llevar. RM. AC. a cabo cada una de las actividades, destacamos por encima de todo, su compromiso,. FA. disciplina, responsabilidad, consejos, paciencia y buen humor que hemos podido disfrutar. DE. en todo este tiempo.. CA. Agradecemos por permitir culminar este trabajo con éxito, y anhelando que su vida siempre. BI BL. IO. TE. sea bendecida por Dios y siga siendo ejemplo para las demás generaciones.. Angie y Diana. v Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(7) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. PRESENTACIÓN Señores Miembros de Jurado Dictaminador: Dando cumplimiento establecido por el reglamento de trabajos de investigación de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, sometemos a vuestra consideración y elevado criterio profesional el presente Informe de Investigación tipo. IC A. I titulado:. UI M. Efecto del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” en. Q. hiperlipidemia inducida en Mus musculus var. swiss. BI. O. Manifestamos nuestro más sincero reconocimiento y gratitud a los diversos docentes y parte. IA. Y. administrativa por su buena voluntad y apoyo, han sido parte de nuestra formación. RM. AC. profesional.. FA. Dejamos a vuestra consideración la calificación del presente trabajo de investigación. DE. científica.. BI BL. IO. TE. CA. Trujillo, julio del 2018. Arce Luera Angie Anali. Angulo Díaz, Diana Carolina. vi Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(8) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. JURADO DICTAMINADOR. Dr. SEGUNDO GUILLERMO RUIZ REYES. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Presidente. FA. Dr. JULIO VÍCTOR CAMPOS FLORIÁN. BI BL. IO. TE. CA. DE. Miembro. Mg. FRANCISCO MOISES ABANTO ZAMORA Miembro. vii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(9) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. RESUMEN El objetivo de la presente investigación fue determinar la actividad hipolipidémica del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis “maracuyá”, en un modelo de hiperlipidemia aguda inducida con tritón. La materia vegetal fue recolectada en el distrito de Cascas, provincia Gran Chimú, región La Libertad. Se llevó al laboratorio, una vez acondicionada la muestra, se obtuvo el extracto etanólico que posteriormente fue liofilizado, un ejemplar de la planta fue llevado al Herbario Truxillense (HUT) para su identificación. IC A. taxonómica. Se utilizaron 40 ratones Mus musculus var. swiss machos como animales de. UI M. experimentación. Se trabajó con cinco grupos de ratones, el grupo blanco recibió agua. Q. destilada por vía oral y solución salina fisiológica por vía intraperitoneal, el grupo control. BI. O. recibió agua destilada por vía oral y tritón 400mg/Kg por vía intraperitoneal, el grupo. Y. problema I recibió tritón 400mg/Kg por vía intraperitoneal y 50mg/Kg del extracto. IA. liofilizado de Passiflora edulis por vía oral, el grupo problema II recibió tritón 400mg/Kg. AC. por vía intraperitoneal y 300mg/Kg del extracto liofilizado de Passiflora edulis por vía oral,. RM. y el grupo patrón recibió tritón 400mg/Kg por vía intraperitoneal y 10 mg/Kg de. FA. atorvastatina por vía oral. Luego de 24 horas de administrar los tratamientos se realizaron. DE. las mediciones en suero de las concentraciones de colesterol y triglicéridos. Los niveles. CA. promedio de colesterol (mg/dL) fueron: 79,17±12,42 (blanco), 115,17±6,62 (control),. TE. 79±19,92 (problema 1), 80,17±7.98 (problema 2) y 76,83±10,83 (patrón). Los niveles. IO. promedio de triglicéridos (mg/dL) fueron: 59,50±10,56 (blanco), 98,17±30,79 (control),. BI BL. 111,00±21,13 (problema I), 47±15,45 (problema II) y 52,50±14,68 (patrón). Se encontró reducciones significativas (p<0.000) en las concentraciones de colesterol de los grupos problema I y II, en relación al grupo tratado solo con tritón. Se evidenció también una disminución en las concentraciones de triglicéridos del grupo problema II frente al grupo tratado con tritón (p<0.000). Con atorvastatina se observó disminución en las concentraciones de colesterol y triglicéridos. Palabras claves: Passiflora edulis, maracuyá, colesterol, triglicéridos, Mus musculus var. swiss. viii Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(10) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ABSTRACT The objective of the present investigation was to determine the hypolipidemic activity of the ethanolic extract of the leaves of Passiflora edulis "maracuyá", in a model of acute hyperlipidemia induced with triton. Vegetable material was collected in the Cascas district, Gran Chimú province, La Libertad region. It was taken to the laboratory, once conditioned the sample that obtained the ethanolic extract that was later lyophilized, a ejemplary of the. IC A. plant was submitted to Herbal Truxillense for taxonomic identification. 40 Mus musculus var. swiss mice were used as experimental animals. We worked with five groups of mice,. UI M. the white group received oral distilled water and physiological saline solution. O. Q. intraperitoneally, the control group received distilled water orally and triton 400mg/Kg. BI. intraperitoneally, the problem I group received triton 400mg/Kg intraperitoneally and. IA. Y. 50mg/Kg of the lyophilized extract of Passiflora edulis orally, the problem II group received. AC. triton 400mg/Kg intraperitoneally and 300mg/Kg of the lyophilized extract of Passiflora. RM. edulis orally, and the group patron received triton 400mg/Kg intraperitoneally and 10 mg/Kg. FA. of atorvastatin orally. After 24 hours of treatment, the treatments were performed on. DE. cholesterol and triglyceride measurements. Blood cholesterol levels (mg / dL) were: 79.17. CA. ± 12.42 (white), 115.17 ± 6.62 (control), 79 ± 19.92 (problem 1), 80.17 ± 7.98 (problem 2). TE. and 76.83 ± 10.83 (pattern). The average levels of triglycerides (mg / dL) were: 59.50 ±. IO. 10.56 (white), 98.17 ± 30.79 (control), 111.00 ± 21.13 (problem I), 47 ± 15.45 (problem II). BI BL. and 52.50 ± 14.68 (pattern). Significant reductions (p <0.000) were found in cholesterol contents of the problem group of problem groups I and II, in relation to the group treated only with triton. There was also a decrease in the triglyceride levels of group II compared to the group treated with triton (p <0.000). With atorvastatin, a decrease in cholesterol and triglyceride concentrations was observed. Key words: Passiflora edulis, passion fruit, cholesterol, triglycerides, Mus musculus var. swiss. ix Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(11) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. ÍNDICE. DEDICATORIAS ................................................................................i AGRADECIMIENTO .......................................................................iv PRESENTACIÓN .............................................................................vi. IC A. JURADO DICTAMINADOR ......................................................... vii. UI M. RESUMEN ..................................................................................... viii. Q. ABSTRACT ......................................................................................ix. O. I. INTRODUCCIÓN....................................................................... 1. BI. II. MATERIAL Y MÉTODO .......................................................... 8. IA. Y. III. RESULTADOS ......................................................................... 20. AC. IV. DISCUSIÓN .............................................................................. 23. RM. V. CONCLUSIONES ..................................................................... 28. FA. VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ...................................... 29. BI BL. IO. TE. CA. DE. ANEXOS .......................................................................................... 37. x Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(12) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. I. INTRODUCCIÓN Las dislipidemias o hiperlipidemias son trastornos en los lípidos en sangre caracterizados por un aumento de los niveles de colesterol e incrementos de las concentraciones de triglicéridos (TG) o hipertrigliceridemia (HTG)1. Los primeros estudios en Perú, sobre la prevalencia de la obesidad fueron hechos por Zubiate. UI M. Arequipa por Medina y por Rosas, en trabajadores de Lima2, 3, 4.. IC A. en Lima y en el Cuzco, y luego por Seclén en costa, sierra y selva y recientemente en. Q. La frecuencia de dislipidemias en los varones con sobrepeso en nuestra ciudad es de 78.82%. BI. O. y obesos 85 % y en las mujeres con sobrepeso 86.52 %y obesas 74.11 % mayor comparados. Y. con los pacientes normales 52.5% y 67.35 % respectivamente para varones y mujeres. En. AC. IA. los varones con sobrepeso y obesidad, la dislipidemia mixta, HTG, y la asociación de HTG. RM. con HDL disminuidas fueron más frecuentes que los adultos con IMC normal; además la. FA. Hipercolesterolemia (HC) fue más frecuente en la presencia de sobrepeso. La dislipidemia. DE. mixta (26.14 %), HC (79.78 %) y HTG (28.09 %) fueron más frecuentes en mujeres con. TE. CA. sobrepeso5.. IO. Las hiperlipidemias son el factor de riesgo más importante de padecer cardiopatía isquémica. BI BL. antes de los 50 años además es independiente de otros factores de riesgo cardiovascular, como la diabetes, el tabaco o la hipertensión arterial. Según estadísticas en las personas mayores de 65 años es el segundo factor de riesgo después de la hipertensión6. Existen factores que favorecen la aparición de una hiperlipidemia. Entre ellos factores genéticos, teniendo en cuenta que la transmisión poligénica es la más importante; factores ambientales, como la dieta rica en grasas saturadas; el alcohol, que puede inducir un gran aumento de las cifras de triglicéridos en la sangre; el exceso de peso y la falta de ejercicio físico, entre otros1, 6. 1 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(13) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Las dislipidemias aumentan el riesgo de aterosclerosis porque favorecen el depósito de lípidos en las paredes arteriales, con la aparición de placas de ateromas, y en los párpados (xantelasma) y en la piel con la formación de xantomas. El aumento excesivo de los TG incrementa las probabilidades de pancreatitis aguda, caracterizada por un intenso dolor abdominal con vómitos que constituye una urgencia médica7. La clásica clasificación de Fredrickson divide a las hiperlipidemias en seis grupos según los. IC A. patrones de aumento de lípidos y de lipoproteínas. Una clasificación más práctica distribuye. UI M. las dislipidemias en dos grupos, primarias o secundarias. Las dislipidemias primarias. O. Q. responden a mutaciones genéticas (cambios en la secuencia de bases nitrogenadas del ADN). BI. y se sospechan cuando se producen signos de dislipidemia en niños, en enfermedades. AC. IA. Y. ateroscleróticas prematuras (en menores de 60 años) y con los niveles altos de colesterol8.. RM. Los lípidos son insolubles en el plasma sanguíneo, por lo que circulan en la sangre unidos a. FA. proteínas en forma de lipoproteínas. La albúmina, una proteína plasmática, transporta los. DE. ácidos grasos (AG). La superficie de las lipoproteínas contiene las proteínas denominadas. CA. apoproteínas y lípidos (con dos porciones, una polar y otra apolar) con su parte polar hacia. TE. la parte exterior de la partícula. En el núcleo de la lipoproteína se encuentran los lípidos. BI BL. IO. apolares, como el colesterol esterificado (CE) y los TG. La densidad de las lipoproteínas se debe a la proporción relativa de lípidos y proteínas. Las lipoproteínas más ricas en lípidos son los quilomicrones y las abundantes en proteínas son las lipoproteínas de alta densidad (HDL). La composición de las lipoproteínas varía por el intercambio de lípidos y lipoproteínas que sufren9.. Los lípidos de la dieta, principalmente los TG y en menor proporción el colesterol y otros, son digeridos en el tracto gastrointestinal por acción de enzimas como las lipasas, con la ayuda de las sales biliares y absorbidos por la mucosa del intestino delgado. En el duodeno, 2 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(14) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. primera porción del intestino delgado, se originan los quilomicrones que pasan a la circulación linfática y son las lipoproteínas responsables de transportar en la sangre los TG de origen exógeno o dietético10.. Otra lipoproteína, la lipoproteína de muy baja densidad o VLDL, transporta los TG sintetizados en el hígado, es decir, de origen endógeno. El aumento en sangre de estas dos lipoproteínas, los quilomicrones y las VLDL, elevan las concentraciones circulantes de TG. UI M. IC A. después de las comidas grasas (hipertrigliceridemia postprandial) o en ayunas11.. Q. Las HDL al principio no contienen colesterol; se sintetizan en el hígado e intestino delgado. BI. O. y presentan un metabolismo complejo. El flujo de colesterol libre desde las células es. IA. Y. mediado por el transportador casete ligado al ATP A1 (ABCA 1) que se combina con la. AC. apoproteína A-I para producir las HDL nacientes. El colesterol de las HDL se esterifica con. RM. los AG por la enzima lecitina colesterol acil transferasa (LCAT) y se convierte en un. FA. compuesto apolar que se sitúa hacia el núcleo de la lipoproteína, y produce las HDL. CA. DE. maduras11.. TE. Los TG y colesterol en el hígado son incorporados en la VLDL y liberados dentro del plasma. BI BL. IO. por entrega a los tejidos periféricos. LDL es formada a partir de VLDL y es principalmente catabolizada a través del receptor LDL de alta afinidad. Estudios clínicos y patológicos muestran que niveles plasmáticos elevados de colesterol (total-C), colesterol LDL (LDL-C), y apolipoproteína B (apo B) promueve la aterosclerosis humana y son factores de riesgo para desarrollar enfermedades cardiovasculares, mientras que niveles aumentados de HDLC están asociados con un riesgo cardiovascular disminuido12. Las dislipidemias se tratan con modificaciones en los estilos de vida y medicamentos. Las personas con dislipidemias, en especial con Diabetes Mellitus 2 y Síndrome Metabólico. 3 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(15) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. (DM-2 y SM), presentan un marcado riesgo de morbilidad y mortalidad cardiovascular (CV)10. El tratamiento farmacológico comprende el uso de estatinas, fibratos, secuestradores de ácidos biliares, ezetimibe, ácido nicotínico, entre otros. Las estatinas representan un conjunto de medicamentos muy efectivos en el tratamiento de las dislipidemias, que inhiben la enzima HMG-CoA reductasa (3-hidroxi-3-metil-glutaril-CoA reductasa) que interviene en la. IC A. síntesis de colesterol en las células. Al reducirse la formación de colesterol, las células. UI M. utilizan el colesterol que transportan las LDL, lo que disminuye la concentración de estas. Q. partículas en sangre, y como estas lipoproteínas son las más abundantes en este compuesto,. Y. BI. O. se produce una disminución de la colesterolemia13.. AC. IA. Las estatinas comprenden el tratamiento de elección para reducir las LDL y la mortalidad. RM. CV, producen pequeños aumentos de las HDL con disminución modesta de los TG. Los. FA. efectos adversos son poco frecuentes y se producen principalmente en ancianos y en. DE. personas con varias enfermedades, comprenden aumento de enzimas hepáticas (TGP) e. CA. inflamación del músculo o miositis14.. IO. TE. Una de las estatinas más usadas en nuestro medio es la atorvastatina, ésta es metabolizada. BI BL. por el citocromo CYP-3A4 a sus derivados orto y parahidroxilados y a distintos productos de la beta oxidación. Se absorbe rápidamente tras su administración oral; las concentraciones plasmáticas máximas se alcanzan al cabo de 1 a 2 horas, tienen una biodisponibilidad del 95 al 99% comparados con la de las soluciones. El volumen medio de distribución de la atorvastatina es de aproximadamente 381 L. La atorvastatina se une a las proteínas plasmáticas en un 98% o más. La atorvastatina se elimina principalmente por la bilis tras el metabolismo hepático y/o extrahepático15.. 4 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(16) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. La atorvastatina es en general bien tolerada. Las reacciones adversas han sido habitualmente leves y transitorias. Las reacciones adversas más frecuentes (1% o más) son: estreñimiento, flatulencia, dispepsia, dolor abdominal, dolor de cabeza, náuseas, mialgia, astenia, diarrea e insomnio. Estos cambios fueron normalmente leves, transitorios y no requirieron interrupción del tratamiento15. El género Passiflora, que comprende unas 500 especies, es el más grande de la familia. IC A. Passifloraceae. Las especies de este género se distribuyen en las regiones cálidas y tropicales. UI M. del mundo, pero son mucho más raras en Asia, Australia y África tropical. Los más. BI. O. Q. ampliamente cultivados son Passiflora edulis Sims16.. Y. Esta especie es cultivada ampliamente en países tropicales y subtropicales del mundo,. AC. IA. existen dos variedades, Passiflora edulis Sims var. flavicarpa, cuyos frutos son amarillos,. RM. crece desde el nivel del mar hasta 1000 msnm- y Passiflora edulis Sims var. púrpura con. DE. FA. frutos color púrpura y que se adapta a zonas altas por encima de 1 300 msnm17.. CA. El maracuyá es una planta leñosa perenne, de hábito trepador y de rápido desarrollo, que. TE. puede alcanzar hasta 10 m de largo; las hojas son simples, alternas, con estípulas y un zarcillo. IO. en la axila, con márgenes aserrados; las flores son solitarias y axilares, fragantes y vistosas. BI BL. ,la apariencia de la flor, similar a una corona de espinas, indujo a los colonizadores españoles a denominarla el fruto de la pasión; su estructura pentarradial recibió una interpretación teológica con los cinco pétalos y cinco sépalos simbolizando a los diez apóstoles (doce, menos Judas Iscariote y Pedro), mientras que los cinco estambres representarían los cinco estigmas, los tres pistilos corresponderían a los clavos de la cruz; el fruto es una baya esférica globosa o elipsoide que mide hasta 10 cm de diámetro y pesa hasta 190 g, de color amarillo o purpúreo, con una pulpa muy aromática16, 17.. 5 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(17) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El uso de Passiflora como una medicina fue elogiado por primera vez por un investigador español en el Perú, en 1569. La información etnofarmacológica revela que Passiflora edulis ha sido utilizado en medicina tradicional en diversas partes del mundo. En la India, las hojas frescas de esta planta son hervidas en pequeña cantidad de agua y el extracto es bebido para el tratamiento de disentería e hipertensión, y los frutos son comidos para el alivio de la constipación18, 19, 20.. IC A. En Sudamérica, se bebe la infusión de hojas y flores como sedante, la infusión de las partes. UI M. aéreas se utiliza en el tratamiento de tétanos, epilepsia, insomnio e hipertensión; además, es. O. Q. indicada como relajante muscular, diurético, para tratar dolores estomacales, tumores. BI. intestinales y fiebre, también son utilizados la pulpa y la cáscara para disminuir las. AC. IA. Y. concentraciones de colesterol, triglicéridos y como hipoglicemiante21-25.. glucósidos. flavonoides:. luteolina-6-C-chinovóside27,. glucósidos. FA. passiflorina26,. RM. El estudio fitoquímico de Passiflora edulis demuestra la presencia de glucósidos, entre ellos. 29. ; triterpenos y saponinas30; fenoles, carotenoides,. DE. cianogénicos; alcaloides: harman28,. CA. antocianinas, ácido L-ascórbico, g-lactonas, ésteres, aceites volátiles, eugenol, amino-. IO. TE. ácidos, carbohidratos y minerales31, 32.. BI BL. Por todo lo expuesto anteriormente y con el fin de contribuir en la investigación de esta especie, el presente trabajo pretende demostrar el efecto hipolipemiante del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” así como aportar con conocimientos que comprueben su efectividad como droga, realizando ensayos in vivo a fin de que en el transcurso del tiempo pueda garantizar la elaboración de productos fitoterapéuticos de uso seguro y eficaz para el tratamiento de enfermedades, de tal forma que puedan ser utilizados con aval científico.. 6 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(18) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Por lo tanto nos planteamos el siguiente problema: ¿Cuál es el efecto del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” en hiperlipidemia inducida en Mus musculus var. swiss? HIPÓTESIS: El extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” reduce significativamente la hiperlipidemia inducida en Mus musculus var. swiss.. IC A. OBJETIVOS. UI M. Objetivo general. Q.  Determinar el efecto del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis. BI. O. “maracuyá” en hiperlipidemia inducida en Mus musculus var. swiss.. Y. Objetivos específicos. AC. IA.  Determinar las concentraciones séricas de colesterol y triglicéridos de los. RM. especímenes.. FA.  Determinar el efecto de las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” a dos dosis 50 y. DE. 300 mg/kg de peso corporal.. TE. CA.  Comparar el efecto de Passiflora edulis “maracuyá” con un fármaco referencial. BI BL. IO. (Atorvastatina).. 7 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(19) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. II. MATERIAL Y MÉTODO 2.1. MATERIAL 2.1.1. Material Biológico 2.1.1.1 Animales de Experimentación Se utilizaron 40 especímenes de Mus musculus var. swiss, de 2 meses de edad, machos, procedentes del Instituto Nacional de Salud (INS), mantenidos. IC A. en jaulas de plástico, a temperatura ambiental (24.1 ±0.37)°C, en las mismas. UI M. condiciones alimenticias y agua a voluntad.. Q. 2.1.1.2 Material Biológico. BI. O. Se utilizaron 5 kg de hojas de Passiflora edulis “maracuyá” recolectadas en. IA. Y. el distrito de Cascas, provincia Gran Chimú, región La Libertad.. AC. 2.1.2. Material de Laboratorio. RM. Los de uso común en el laboratorio de Farmacología y Farmacognosia de. FA. la UNT.. DE. 2.1.2.1 Material Químicos y Fármacos. CA.  Agua destilada. IO. TE.  Alcohol etílico 70° GL. BI BL.  Cloruro de sodio 0.9 %  Tritón X-305 Sol. 30 %  Atorvastatina tab. 10 mg (Lipitor®)  Carboximetilcelulosa  Ketamina 500 mg/10mL. 2.1.2.2 Equipos de Laboratorio  Centrífuga MIKRO 220  Balanza Analítica RADWAG PS360C2 8 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(20) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación.  Estufa Eléctrica MEMMERT TY U40  Cocina Eléctrica Premier  Balanza común TRIPLE BEAM 700/800 marca OHAUS 2.1.2.3 Otros:  Algodón Hidrófilo  Papel filtro Whatman N°2. IC A.  Caja de guantes de nitrilo talla S. UI M.  Jeringa tuberculina 1 mL. O. Q.  Tubos de Eppendorf. IA. Y. 2.2.1. DISEÑO DE CONTRASTACIÓN. BI. 2.2. MÉTODO. AC. El presente trabajo está orientado a determinar el efecto hipolipemiante del. RM. extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis (maracuyá), en. FA. hiperlipidemia inducida en Mus musculus var. swiss33, 34.. BI BL. IO. TE. CA. DE. El presente trabajo de investigación se asemeja a un diseño clásico:. 9 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(21) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. LEYENDA: A = Grupo I: Blanco B = Grupo II: Control C = Grupo III: Problema I D = Grupo IV: Problema II E = Grupo V: Patrón. IC A. R = Solución salina fisiológica (SSF). UI M. S = Agua Destilada. Q. X = Administración de Tritón 400mg/kg. BI. O. T1 = Tratamiento con Passiflora edulis (50 mg/kg). IA. Y. T2 = Tratamiento con Passiflora edulis (300 mg/kg). AC. T3 = Tratamiento con Atorvastatina tab. 10 mg (10 mg/Kg). RM. A, B1, C1, D1 y E1 = Evaluación de hiperlipidemia. FA. 2.2.2. METODOLOGÍA DE TRABAJO. DE. 2.2.2.1 Recolección del material vegetal. CA. La especie de Passiflora edulis “maracuyá”, se recolecto en la ciudad de. IO. TE. Cascas, distrito Cascas, provincia Gran Chimú, región La Libertad.. BI BL. La recolección de la especie se realizó por el método clásico de herborización, seleccionando el material en el campo y verificando que esté en buenas condiciones35. 2.2.2.2 Identificación taxonómica de la especie vegetal La muestra fue identificada con el código 59472 por el Herbarium Truxillense (HUT) de la Universidad Nacional de Trujillo.. 10 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(22) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.2.3 Preparación del material vegetal36 Selección de la muestra: Se seleccionaron las hojas en mejor estado, que no presentaron ataques por hongos, insectos o que estuvieran decoloradas. Lavado y desinfección: Se procedió a lavar las hojas con agua destilada y se desinfectó con hipoclorito de sodio al 0.5%. Luego se enjuagó con suficiente agua destilada estéril, para retirar los residuos de hipoclorito.. IC A. Secado: Las hojas se colocaron en papeles Kraft, y se llevaron a secar a una. UI M. estufa (40 C) por 48 horas.. Q. Pulverización: Las hojas se molieron con la ayuda de un mortero hasta. BI. O. reducir a polvo.. IA. Y. Tamización: El polvo de las hojas se pasó por un tamiz de malla N°0.75.. RM. ámbar de boca ancha.. AC. Almacenamiento: Se guardó el polvo tamizado en un frasco de vidrio color. FA. 2.2.2.4 Preparación del extracto etanólico. DE. En un matraz de boca esmerilada de 1000 mL se colocó 100 g del polvo de. CA. las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” previamente pulverizadas,. IO. TE. tamizadas, se añadió 600mL de etanol de 70°GL agitando continuamente y. BI BL. se adaptó al matraz un refrigerante de reflujo. Una vez efectuado el montaje se procedió a calentar a reflujo durante 2 horas, dicho procedimiento se llevó a cabo 5 veces, luego se juntaron los extractos y se filtró al vacío con papel Whatman N° 2. Posteriormente el extracto etanólico se guardó en dos frascos de vidrio color ámbar, uno para realizar la marcha fitoquímica y el otro para liofilizar.. 11 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(23) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Marcha Fitoquímica36, 37, 38 Luego de la preparación del extracto etanólico, se realizó el tamizaje fitoquímico a través de reacciones químicas de identificación, mediante cambios de color o formación de precipitados, destinados a determinar la presencia de metabolitos secundarios: Flavonoides (Shinoda), compuestos fenólicos (cloruro férrico), alcaloides (Dragendorff, Mayer y Wagner),. IC A. quinonas (Borntranger), antocianinas (Rosemhein), taninos (gelatina) y. UI M. azúcares reductores (Fehling) presentes en el extracto.. Q. Ensayo de catequinas: para ello se tomó I gota de la solución etanólica, con. BI. O. la ayuda de un capilar y se aplicó sobre el papel filtro. Sobre la mancha se. IA. Y. aplicó solución de carbonato de sodio. La aparición de una mancha verde. AC. carmelita a la luz UV, indicará un ensayo positivo. RM. Ensayo de resinas: para detectar este tipo de compuesto, se añadió a 2 mL. FA. de la solución etanólica, 10 mL de agua destilada. La aparición de un. DE. precipitado indica ensayo positivo.. CA. Ensayo de la gelatina: sobre el extracto etanólico se añadió solución gelatina. IO. TE. (1%) que contiene además NaCl (10%). De esta forma precipitan todos los. BI BL. taninos e incluso los pseudotaninosa altas concentraciones. Ensayo de Fehling: permite reconocer en el extracto etanólico la presencia de azucares reductores. Para ello, si la alícuota del extracto o se encontrase en agua, deberá evaporarse el solvente en baño de agua y el residuo redisolverse en 1 a 2 mL de agua. Se adicionaron 2 mL del reactivo y se calentó en baño de agua de 5 a 10 min. El ensayo se consideró postivo si la solución se colorea de rojo o aparecerse precipitado rojo.. 12 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(24) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Ensayo de Baljet: permite reconocer en el extracto etanólico la presencia de compuestos con agrupamiento lactónico, en particular cumarinas, aunque otros compuestos lactónicos pueden dar positivo al ensayo. Para ello, si la alícuota del extracto no se encuentra en alcohol debe evaporarse el solvente en baño de agua y redisolverse en la menor cantidad de alcohol (1mL). En estas condiciones se adicionó 1 mL del reactivo,. IC A. considerándose un ensayo positivo la aparición de coloración o precipitado. UI M. rojo.. Q. Ensayo de Liebermann-Burchard: permite reconocer en el extracto. BI. O. etanólico la presencia de triterpenos y/o esteroides, por ambos tipos de. IA. Y. productos posee un núcleo del androstano, generalmente insaturado en el. AC. anillo B y la posición 5-6.. RM. Para ello, si la alícuota del extracto no se encuentra en cloroformo, el solvente. FA. debe evaporarse en baño de agua y el redisolverse en 1mL de anhídrido. DE. acético y se mezcla bien. Por la pared del tubo de ensayo se deja resbalar II. CA. a III gotas de ácido sulfúrico concentrado sin agitar.. IO. TE. Un ensayo positivo debe reconocerse por un cambio rápido de coloración.. BI BL. 1) Rosado – azul muy rápido 2) Verde intenso – visible, rápido.. 3) Verde oscuro-negro-final de la reacción. Muy pocas veces observarse el primer cambio. El tercer cambio generalmente ocurre cuando el material evaluado tiene cantidades importantes de estos compuestos.. 13 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(25) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Importante: Para realizar este ensayo no puede haber agua en el medio de reacción, pues ésta con ácido sulfúrico reacciona de forma violenta y puede ocurrir un accidente. La reacción de Liebermann-Burchard se emplea también para diferenciar las estructuras esteroidales de los triterpenoides, las primeras producen coloración azul o azul verdoso, mientras que para las segundas se observa. IC A. rojo, rosado o púrpura. Estas coloraciones pueden variar por interferencias. UI M. producidas por carotenos, xantofilas y esteroides saturados que puedan estar. Q. presentes. BI. O. Ensayo de Espuma: permite reconocer en un extracto la presencia de. IA. Y. saponinas tanto del tipo esteroidal como triterpénica. De modo que, si la. AC. alícuota se encontrase en alcohol, se ha de diluir con cinco veces su volumen. RM. y se agitará dicha mezcla fuertemente.. FA. El ensayo se considera positivo si apareciese espuma en la superficie del. DE. líquido de más de 2 mm de altura y persistente por más de 3 min.. CA. Ensayo de cloruro férrico: permite reconocer la presencia de compuestos. IO. TE. fenólicos y/o taninos en un extracto vegetal. Si el extracto de la planta se. BI BL. realiza con alcohol, el ensayo determinará tanto fenoles como taninos. A una alícuota del extracto etanólico se añadió III gotas de solución de tricloruro férrico al 5% en una solución salina fisiológica. Un ensayo positivo puede dar la siguiente información general: Desarrollo de una coloración rojo-vino: compuestos fenólicos en general. Desarrollo de una coloración verde intensa: taninos del tipo pirocatecolicos. Desarrollo de una coloración azul, taninos del tipo pirogalotanicos.. 14 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(26) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Ensayo de ninhidrina: permite reconocer en los extractos vegetales la presencia de aminoácidos libres o de aminas en general. Se toma una alícuota del extracto etanólico, o el residuo de la concentración en baño de agua, si el extracto se encontrase en otro solvente orgánico, se mezcla con 2 mL de solución al 2% de ninhidrina en agua. La mezcla se calienta de 5 a 10 min en baño de agua. Este ensayo se considera positivo cuando desarrolla un color. IC A. azul violáceo.. UI M. Ensayo de Kedde: permite reconocer en un extracto la presencia de. Q. glucosidos cardiotónicos. Una alícuota del extracto en etanol se mezcló con. BI. O. 1 mL de reactivo y se dejó reposar durante 5 a 10 min.. IA. Y. En un ensayo positivo se desarrolla una coloración violácea persistente. AC. durante 1 a 2h.. RM. Ensayo de Borntranger: permite reconocer en un extracto la presencia de. FA. quinonas. Para ello si la alícuota del extracto no se encontrase en cloroformo,. DE. el solvente debe evaporarse en baño de agua y el residuo re-disolverse en 1. CA. mL de cloroformo. Se agregó 1mL de hidróxido de potasio o amoniaco al 5%.. IO. TE. Se agita, mezclando las fases y se deja en reposo hasta su ulterior separación.. BI BL. Si la fase acuosa alcalina (superior) se colorea de rosado o rojo, el ensayo será positivo. Ensayo de Shinoda: permite reconocer la presencia de flavonoides en el extracto de un vegetal. Si la alícuota del extracto se encuentra en alcohol, se diluye con 1 mL de ácido clorhídrico concentrado y un pedacito de cinta de magnesio metálico. Después de la reacción espera 5 min, se añade 1 mL de alcohol amílico, se mezclan las fases y se deja reposar hasta que se separe.. 15 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(27) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El ensayo se considera positivo cuando el alcohol amílico se colorea amarillo, naranja, carmelita o rojo, intensos en todos los casos. Ensayo de antocianidinas: permite reconocer en los extractos vegetales la presencia de estructuras de secuencia C6-C3-C6 del grupo de los flavonoides. Se calienta 2 mL del extracto etanólico 10 min con 1 mL de HClcc, se deja enfriar y se añade a 1mL de agua y 2 mL de alcohol amílico. Se agita y se. IC A. deja separar las dos fases. La aparición de color rojo a marrón en la fase. UI M. amílica es indicativa de un ensayo positivo.. Q. Ensayo de Dragendorff: Permite reconocer en un extracto la presencia de. BI. O. alcaloides, para ello, la alícuota del extracto se encuentra en un disuelta en un. IA. Y. solvente orgánico, este se ha de evaporar en un baño de agua y el residuo se. AC. re disuelve en un 1 mL de ácido clorhídrico al 1%. Se añade III gotas del. RM. reactivo de Dragendorff, si existe: opalescencia se considera (+), turbidez. FA. definida (+++), precipitado (+++).. DE. Ensayo de Mayer: Se realiza según la forma descrita anteriormente, hasta. CA. obtener una solución ácida. Se añade luego, una pizca de cloruro de sodio en. IO. TE. polvo, se agita, se filtra. Se añade II o III gotas de la solución reactiva de. BI BL. Mayer, y si observa: opalescencia (+), turbidez definida (++), precipitado coposo (+++).. 2.2.2.5 Obtención del extracto liofilizado El extracto etanólico se liofilizó a -85°C y 0.01 Mbar de presión durante 5 horas. El proceso de liofilización se realizó en el laboratorio de Diseño de Productos Instituto de Investigación Agroindustrial – Universidad Nacional del Santa - Nuevo Chimbote.. 16 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(28) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 2.2.2.6 Dosificación Utilizando el extracto liofilizado se calculó la dosis para cada espécimen en base a su peso corporal. 2.2.2.7 Selección de especímenes Se seleccionaron al azar 40 especímenes de Mus musculus var. swiss, machos que fueron adquiridos del bioterio del Instituto Nacional de Salud. IC A. (INS) – Lima, de 30-40 g de peso y 2 meses de edad en promedio, a lo largo. UI M. del estudio recibieron dieta balanceada y fueron acondicionados a. Q. temperatura y humedad del ambiente.. BI. O. 2.2.2.8 Estudio farmacodinámico. IA. Y. A. Distribución de los grupos. AC. Se trabajó con 40 especímenes distribuidos uniformemente en cinco grupos,. RM. constituyéndose por 8 especímenes cada uno:. FA. Grupo Blanco: Se administró 1 mL/kg de solución salina fisiológica (SSF). CA. vía oral (VO).. DE. por vía intraperitoneal (VIP), luego recibieron 5 mL/kg de agua destilada por. IO. TE. Grupo Control: Se administró 400 mg/kg Tritón por VIP, luego recibieron. BI BL. 5 mL/kg de agua destilada por VO. Grupo Problema I: Se administró 400 mg/kg de Tritón al por VIP, luego recibieron 50 mg/kg de Passiflora edulis por VO. Grupo Problema II: Se administró 400 mg/kg de Tritón al por VIP, luego recibieron 300 mg/kg de Passiflora edulis por VO. Grupo Patrón: Se administró 400 mg/kg de Tritón por VIP, luego recibieron 10 mg/kg de atorvastatina.. 17 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(29) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. B. Comprobación del efecto hipolipidémico del extracto de Passiflora edulis en Mus musculus var. swiss La inducción de la hiperlipidemia se realizó mediante el método descrito por Dixit, que consiste en la administración de Tritón por VIP. La administración de las sustancias por VO se realizó mediante una cánula orogástrica. Luego de la administración del extracto o agua destilada, según grupo, se los dejó. IC A. acceso a alimento y agua libitum por un espacio de 24 horas. Pasado este. UI M. tiempo se obtuvo las muestras de sangre en todos los especímenes, previo. Q. ayuno a 3 horas. La sangre se recolectó por la técnica de extracción. BI. O. submandibular en tubos eppendorfs, se centrifugó a 3500 rpm por un espacio. Y. de 10 minutos, luego se separó el suero y se conservó a 5°C hasta su. AC. IA. respectivo procesamiento35.. RM. C. Determinación de los Parámetros Lipídicos. FA. Determinación del perfil lipídico. la. determinación. CA. Para. DE. Equipo cobas c11139. del. perfil. lipídico. se. utilizó. el. equipo. IO. TE. semiautomatizado cobas c111, que es un instrumento analizador continuo de. BI BL. acceso aleatorio previsto para la determinación in vitro de parámetros clínicos y electrolitos en suero, plasma orina y sangre total. El equipo cobas c 111 emplea la fotometría de absorción para determinar la cantidad de absorbencia de un fluido; la absorbancia se utiliza para calcular la concentración de la solución. El usuario selecciona las pruebas correspondientes (colesterol, triglicéridos y HDL). 18 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(30) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. El proceso básico es el siguiente: -Inspección de la cubeta -Pipeteo del reactivo en la cubeta después de cada acción de pipeteo, el sistema lleva a cabo un ciclo de lavado para minimizar la contaminación por arrastre. Durante dicho ciclo, la aguja y los tubos se enjuagan con agua y agente limpiador.. IC A. -Espera: el fluido tiene que alcanzar la temperatura establecida. Esta fase. UI M. puede durar varios ciclos. Durante los ciclos de espera, se realizan las. Q. actividades para las otras pruebas.. BI. O. -Pipeteo del próximo fluido. Por regla general este fluido seria la muestra, los. IA. Y. detalles están corregidos en las definiciones de la aplicación.. AC. 2.2.3. EVALUACIÓN ESTADÍSTICA. RM. Los resultados obtenidos fueron procesados automáticamente empleando el. FA. programa SPSS v. 22.0. El efecto hipolipemiante del extracto de Passiflora. DE. edulis (maracuyá) fue analizado empleando el ANOVA con un nivel de. CA. significancia p < 0.05 para comparar los grupos de estudio, posteriormente se. IO. TE. realizó la prueba de Tukey y la prueba DMS para determinar si el efecto es real. BI BL. y si existe diferencia entre los distintos grupos40, 41. 2.2.4. ÉTICA EN INVESTIGACIÓN Todas las actividades propuestas en el proyecto fueron amparadas por las normas éticas internacionales para el manejo de animales, aprobadas por la Oficina de Comité de Ética de la Investigación de la Universidad Nacional de Trujillo42.. 19 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(31) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. III. RESULTADOS Tabla 1. Tamizaje Fitoquímico del extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis ENSAYOS Cloruro férrico. RESULTADOS +. Shinoda Espuma. + +. Alcaloides Alcaloides Alcaloides Antocianinas. Wagner Dragendorff Mayer Rosemhein. +++ +++ +++ -. Lactonas Quinonas. Baljet Borntrager. + -. Triterpenos y/o esteroides Resinas. LiebermandBurchard Resina. Taninos. Gelatina. Azúcares Reductores. Leyenda: Resultado positivo: +. UI M Q O BI. Y. IA. AC. RM. FA. DE. CA IO. TE. Kedde. BI BL. Glucósidos Cardiotónicos Aminoácidos. + + -. Ninhidrina. +. Fehling. +. Intensidad:. + ++ +++. OBSERVACIONES Coloración verde petróleo. Coloración carmelita Si hay formación de espuma y perdura en el tiempo. Precipitado marrón Precipitado naranja Precipitado blanco No hay cambio de color Rojo claro a oscuro No hay cambio de color Coloración verde azulado Presencia de precipitado No hay presencia de precipitado No hay cambio de color Coloración azul violáceo Presencia de precipitado.. IC A. METABOLITO Compuestos fenólicos Flavonoides Saponinas. Baja Moderada Alta. 20 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(32) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Tabla 2. Efecto de las hojas de Passiflora edulis sobre niveles de colesterol (mg/dL) y triglicéridos (mg/dL). Blanco Colesterol (mg/dL). Control. Problema I. Problema II Patrón. 79.17±12.42 115.17±6.52# 79±19.92*. 80.17±7.98*. 52.50±14.68*. IC A. Triglicéridos 59.50±10.56 98.17±30.79# 111.00±21.13 47±15.45* (mg/dL). 76.83±10.83*. UI M. Valores expresados en medias ± desviación estándar de seis ratones por grupo. Los grupos. Q. Control, Problema I, Problema II y Patrón recibieron Sol 30% de Tritón VIP. Grupo. BI. O. Problema I: Passiflora edulis (50 mg/kg), Problema II: Passiflora edulis (300 mg/kg),. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. *p<0.00 comparando con el grupo control. AC. #p<0.00 comparando con el grupo blanco. IA. Y. Grupo Patrón: Atorvastatina (10mg/Kg).. 21 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(33) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. AC. IA. Y. BI. O. Q. UI M. IC A. Gráfico 1. Niveles medios de colesterol según grupo de estudios de experimentación. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. Gráfico 2. Niveles medios de triglicéridos según grupo de estudios de experimentación. 22 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(34) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. IV. DISCUSIÓN Las plantas medicinales han formado parte importante de la historia y de la cultura de los pueblos indígenas, se refiere a su uso y aplicación como remedio de enfermedades, pues constituye un conocimiento que, aún en nuestros días, se transmite de generación en generación. El estudio de los componentes de las plantas medicinales se centra en las sustancias que ejercen una acción farmacológica sobre el ser humano o los seres vivos. Los. IC A. principios activos de las plantas pueden ser sustancias simples o mezclas complejas43.. UI M. Los resultados del tamizaje fitoquímico del extracto etanólico de las hojas de Passiflora. O. Q. edulis en la tabla 1, mostró la presencia de compuestos fenólicos, flavonoides, saponinas,. Y. BI. alcaloides, lactonas, triterpenos y/o esteroides, resinas, aminoácidos y azúcares reductores.. AC. IA. Maradiaga et al. encontraron la presencia de flavonoides y heterósidos cianogenéticos al. RM. realizar el tamizaje fitoquímico de las hojas de Passiflora edulis Passifloraceae. Rojas J. y. FA. Tomás G. reportaron flavonoides, saponinas, taninos, cumarinas y alcaloides al realizar el. DE. tamizaje fitoquímico y actividad antioxidante in vitro de Passiflora edulis (maracuyá) 44,45.. CA. En la Tabla 2, se observan las variaciones de colesterol y triglicéridos en los cinco grupos. IO. TE. de estudio: blanco, control, problema I, problema II y patrón. Los valores más altos de. BI BL. colesterol y triglicéridos corresponden al grupo control, el grupo que sólo recibió tritón. Se aprecia diferencia significativa (p<0.000) al comparar los grupos control y blanco Tabla 2, Gráfico N°1 para los niveles de colesterol, en lo que respecta a triglicéridos también se observa diferencia significativa (p<0.002) entre los grupos control y blanco; Tabla 2, Gráfico N°2, este último solo recibió solución salina fisiológica. Con esto se corrobora la capacidad hiperlipemiante del tritón. El tritón es un tensioactivo que impide la captación del colesterol circulante por los tejidos periféricos, impide la entrada de colesterol al hepatocito, con esto último logra interferir en 23 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(35) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. los mecanismos de retroalimentación inhibitorios de la síntesis endógena de colesterol, provocando una elevación de las concentraciones de colesterol y triglicéridos34, 46. Según la Tabla 2 y gráfico N°1, las concentraciones de colesterol en el grupo problema I (50 mg/kg) y grupo problema II (300 mg/kg) fueron significativamente menores a los que obtuvimos con el grupo control (p<0.000) esto demuestra que el extracto de Passiflora edulis “maracuyá” evita la elevación del colesterol inducida por tritón.. IC A. En la tabla 2 y gráfico N°2, para los niveles de triglicéridos en el grupo problema I no hay. UI M. diferencia significativa con el grupo control (p=0.294), el problema 1 recibe dosis de. O. Q. Passiflora edulis (50mg/Kg), sin embargo el grupo problema II (300 mg/kg), si manifiesta. Y. BI. reducción frente al grupo control (p<0.00). Se observa que a mayor dosis hay una. AC. IA. disminución de los niveles de triglicéridos.. RM. Al comparar los grupos problema (problema I, problema II) frente al grupo patrón,. FA. observamos que no hay diferencia significativa (Tabla 2); lo que sugiere que el tratamiento. DE. de los especímenes con Passiflora edulis a las dosis de 50 y 300 mg/Kg, aproxima al nivel. TE IO. 10mg/kg.. CA. del colesterol a sus valores basales, al igual que el grupo patrón que recibió atorvastatina a. BI BL. La atorvastatina es un inhibidor selectivo y competitivo de la hidroximetilglutaril-coenzima A (HMG-CoA) reductasa. La HMG-CoA reductasa es la enzima responsable de la conversión de la HMG-CoA a mevalonato, el precursor de los esteroles incluyendo el colesterol. La inhibición de la HMG-CoA reductasa reduce las cantidades de mevalonato y por consiguiente los niveles hepáticos de colesterol. Esto redunda en la regulación de los receptores a las LDLs y a una captación de estas lipoproteínas de la circulación, la consecuencia final es la reducción del colesterol asociado a las LDLs15.. 24 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(36) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. Se observa un efecto paradójico con Passiflora edulis a una dosis menos (50 mg/kg), existe una tendencia al aumento en los niveles de triglicéridos (Gráfico 2), muy cercano a los valores del grupo control, esto puede indicar que a esta dosis Passiflora edulis no reduce los niveles de triglicéridos. Al aumentar la dosis de Passiflora edulis (300mg/kg) se observa una reducción significativa (p<0.005) en los niveles de triglicéridos, incluso alcanza los niveles de reducción de la atorvastatina.. IC A. Los componentes presentes en las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” como flavonoides. Q. UI M. otorgan protección frente al efecto hiperlipemiante del tensioactivo utilizado.. BI. O. Según Russo R, et al. la acción antioxidante y cardioprotectora de los flavonoides, consiste. IA. Y. en que éstos retiran oxígeno reactivo especialmente en forma de aniones superóxidos,. AC. radicales hidroxilos, peróxidos lipídicos o hidroperóxidos, de esta manera bloquean la acción. RM. letal de dichas sustancias sobre las células47; según Hirano R et al. han comprobado su. FA. capacidad de inhibir in vitro la oxidación de las lipoproteínas de baja densidad (LDL) por. DE. los macrófagos y reducir la citotoxicidad de las LDL oxidadas48,. 49. .Según Whalley et. CA. al. demostraron que ciertos flavonoides eran inhibidores de la modificación de LDL por. IO. TE. macrófagos en ratones, al parecer los flavonoides actúan protegiendo las LDL contra la. BI BL. oxidación causada por macrófagos, al inhibir la generación de lípidos hidroperóxidos. Así, los flavonoides protegen a las LDL de la oxidación, manteniendo sus niveles por períodos de tiempo más prolongados, y retardando el comienzo de la peroxidación de los lípidos50. Estos resultados sugieren que los flavonoides podrían estar involucrados en la prevención de la aterosclerosis no solo por inhibición de la oxidación del LDL, sino también por incrementar la resistencia celular a los efectos dañinos del LDL oxidado.. La droga en estudio, al contener estos metabolitos secundarios, explicaría el efecto que hemos encontrado. 25 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(37) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. En otros estudios, como el de Chau C. se estudió la fibra insoluble derivada de la semilla de Passiflora edulis sobre el plasma y los lípidos hepáticos y la producción fecal, y reportó disminución en las concentraciones de triglicéridos séricos y colesterol total, pero no mostró ningún efecto aparente sobre las concentraciones de HDL y colesterol hepático21. Según de Sousa Mda, estudió los efectos de Passiflora edulis en lípidos séricos y en el estado de estrés oxidativo de las ratas Wistar, reportó que el jugo de P. edulis mostró efectos. IC A. beneficiosos para el perfil lipídico, aumentó el nivel de HDL-c y disminuyó los niveles de. UI M. LDL-c, colesterol y ácidos grasos libres.. O. Q. Según Teixeira A, estudió el uso de Passiflora edulis f. flavicarpa en la reducción de. Y. BI. colesterol, concluyendo que la harina de la corteza de maracuyá redujo los niveles de. AC. IA. colesterol total y colesterol LDL, pero no alteró los valores de colesterol HDL23.. RM. Según Correa E, estudió la ingesta de fibra del mesocarpio de la fruta (Passiflora edulis). FA. reduce los niveles de triglicéridos y colesterol disminuyendo principalmente insulina y. DE. leptina, los resultados mostraron que la fibra mesocarpiana de la fruta (P.edulis), en. CA. concentraciones del 15% y30%, podría ser un suplemento dietético importante para el. IO. TE. tratamiento de la diabetes debido a su potencial hipo glucémico, la fibra del mesocarpio de. BI BL. la fruta de la pasión también promueve la reducción de los triglicéridos, el colesterol VLDL, la insulina y niveles de leptina24. Según Grosseli M, estudió el uso de la pulpa y de la cáscara de maracuyá (Passiflora edulis f. Flavicarpa) sobre el colesterol en conejos con hipercolesterolemia experimental, los resultados de este trabajo muestran claramente que la pulpa y la cáscara del maracuyá fueron eficientes en reducir el colesterol de los conejos con hipercolesterolemia25. Si bien es cierto, en diversos estudios se ha atribuido efectos sobre el perfil lipídico a los flavonoides que están presentes en el extracto ensayado, no se puede descartar el efecto de 26 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(38) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. los demás fitoconstituyentes presentes también en el extracto como alcaloides, compuestos fenólicos y lactonas; o incluso una acción compleja debido a una interacción entre todos los componentes51. Los estudios mencionados anteriormente corroboran el efecto hipolipemiante del fruto y la cáscara de Passiflora edulis “maracuyá”, en esta investigación se utilizaron las hojas para ver si existe el mismo efecto hipolipemiante, tras los resultados se evidenció una. IC A. disminución de colesterol y triglicéridos, pero son necesarios más estudios que permitan. UI M. concretar su acción. Por lo tanto esta investigación es la primera en demostrar los efectos. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. Q. hipolipidémicos de las hojas de Passiflora edulis.. 27 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(39) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. V. CONCLUSIONES.  El extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” a las dosis de 50 mg/Kg y 300 mg/Kg ocasiona en los animales experimentalmente hiperlipidémicos una disminución significativa de los niveles de colesterol.  El extracto etanólico de las hojas de Passiflora edulis “maracuyá” a las dosis de 300. UI M. disminución significativa de los niveles de triglicéridos.. IC A. mg/Kg ocasiona en los animales experimentalmente hiperlipidémicos una. Q.  Atorvastatina a dosis de 10mg/Kg reduce significativamente los niveles de colesterol. BI BL. IO. TE. CA. DE. FA. RM. AC. IA. Y. BI. O. y triglicéridos, similar comportamiento se observa en el extracto ensayado.. 28 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(40) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS. 1. Masson D, Jiang XC, Lagrost L, Tall AR. The role of plasma lipid transfer proteins in lipoprotein metabolism and atherogenesis. J Lipid Res [Internet]. 2009 [citado 20 Oct 2017]; 50:201-206. Disponible en: http://www.jlr.org/content/50/Supplement/S201.full.pdf+html. IC A. 2. Zubiate M. Prevención de la obesidad en dos poblaciones del Perú, Lima a 150 m y. UI M. Cuzco a 3300 msnm. Libro de resúmenes del 8th International Congresson Obesity.. Q. Paris, 1998.. BI. O. 3. Seclén S, Leevt J, Villena A, Herrera B, Menacho J, Carrasco A et al. Prevalencia de. IA. Y. obesidad, diabetes mellitus, hipertensión arterial e hipercolesterolemia como factores. AC. de riesgo coronario y cerebrovascular en población adulta de la costa, sierra y selva. RM. del Perú. Acta Médica Peruana [Internet]. 1999 [citado 20 Oct 2017]; 17(1):8-13.. FA. Disponible en:. DE. http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/acta_medica/1999_n1/bibliografia1.htm. CA. 4. Medina LJ, Morey VO, Zea DH, Bolaños SJ, Corrales MF, Cuba BC et al.. IO. TE. Prevalencia de sobrepeso y obesidad en la población adulta de Arequipa. BI BL. Metropolitana. Resultados del Estudio PREVENCIÓN. Rev Per Cardiol [Internet]. 2006 [citado 21 Oct 2017]; 33:194-206. Disponible en: http://sisbib.unmsm.edu.pe/BVRevistas/cardiologia/v32_n3/pdf/a04.pdf 5. Huamán, J; Castillo, E. Dislipidemias en adultos de Trujillo según índice de masa corporal. Rev Med Trujillo [Internet]. 2014 [citado 21 Oct 2017]; 10(2):1-23. Disponible en: http://revistas.unitru.edu.pe/index.php/RMT/article/view/688/626. 29 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.

(41) Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación. 6. López JE, Villar AL. Dislipidemias en personas mayores de 60 años. Rev Cubana Med Gen Integr [Internet]. 2005 [citado 20 Oct 2017]; 21:3-4. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-21252005000300004 7. Jenkins DJ, Wong JM, Kendall CW, Esfahani A, Ng VW, Leong TC. The effect of a plant-based low-carbohydrate ("Eco-Atkins") diet on body weight and blood lipid concentrations in hyperlipidemic subjects. Arch Intern Med [Internet]. 2009 [citado. IC A. 27 Oct 2017]; 169(11):1046-54. Disponible en:. UI M. http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-21252005000300004. Q. 8. Yusuf S, Hawken S, Ounpuu S, Dans T, Avezum A, Lanas F. Effect of potentially. BI. O. modifiable risk factors associated with myocardial infarction in 52 countries (the. IA. Y. INTERHEART study). The Lancet [Internet]. 2004 [citado 27 Oct 2017]; 364: 937-. AC. 952. Disponible en:. FA. RM. https://sci-hub.tw/https://doi.org/10.1016/S0140-6736(04)17018-9. DE. 9. Brunton LL, Lazo JS, Parker KL, editores. Goodman & Gilman. Las bases. CA. farmacológicas de la Terapéutica. 11ª ed. Colombia: McGraw Hill Companies; 2007.. TE. 10. Castillo JL, Oscanoa TJ. Dislipidemias como factor de riesgo para enfermedad. BI BL. IO. cerebrovascular: estudio de casos y controles. Horiz Med [Internet]. 2016 [citado 30 de Sept 2017]; 16(4):13-19. Disponible en: http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1727558X2016000400003&lng=es. 11. Instituto Mexicano del Seguro Social. Diagnóstico y tratamiento de dislipidemias (hipercolesterolemia). en. el. adulto.. México;. 2016.. Disponible. en:. http://www.imss.gob.mx/sites/all/statics/guiasclinicas/233GER.pdf. 30 Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/.