Utilidad del laboratorio clínico en el diagnóstico de la enfermedad Lyme

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(1)UNIVERSIDAD DE SONORA UNIDAD REGIONAL S U R. EL SABER. DE MIS. HARÁ MI. HIJOS. DIVISIÓN DE CIENCIAS E I N G E N I E R Í A. GRANDEZA. DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUÍMICO BIOLÓGICAS Y AGROPECUARIAS. UTILIDAD DEL LABORA TORIO CLINICO EN EL DIAGNOSTICO DE LA ENFERMEDAD DE. TESIS. PARA. PROFESIONAL. OBTENER. QUÍMICO. L YME. EL. TÍTULO. DE. BIÓLOGO CLÍNICO. P R E S E N T A N :. NAVARRO SOTO C É S A R R E N É Q U I R O Z C O N T R E RA S OSCAR. N A V O J O A . SONORA. JUNIO 2016.

(2) Universidad de Sonora Repositorio Institucional UNISON. Excepto si se señala otra cosa, la licencia del ítem se describe como openAccess.

(3) APROBACION. Los miembros del jurado asignado para revisar la tesis teórica de Navarro Soto. Cesar. René. y. Quiroz. Contreras. Osear,. la. han. encontrado. satisfactoria. y. recomiendan que sea aceptada como requisito parcial para obtener el título de. Químico Biólogo Clínico.. Q . B . lmay Jacobo Manuel Ignacio Presidente. Q . B . heverría Jacobo Martín Gustavo Secretario. M . C . Vázquez Curie! Rosa Amelía Vocal.

(4) DECLARACION I N S T I T U C I O N A L. Se permiten y agradecen las citas breves del material contenido en esta Tesis. Teórica,. sin. permiso. correspondiente. especial. a los. de. autores. los autores,. y a. la. siempre y cuando. Universidad. de. Sonora. se. Unidad. de. crédito. Regional. Sur.. Para la publicación. los. datos. en comunicaciones científicas o de divulgación popular de. contenidos. Universidad. de. en. Sonora,. esta. previa. Tesis. Teórica,. aprobación. se. por. deberá. escrito. dar. del. créditos. a. documento. cuestión, por el Director de tesis.. M.C Ramona lcedo García Jefa del Departamento de Ciencias Químico Biológicas y Agropecuarias. ii. la. en.

(5) AGRADECIMIENTOS. A Dios: Por sus bendiciones constantes y por permitirme llegar a este momento. y cumplir. la. meta impuesta.. A mis padres: A mi padre: José Loreto Salas Velázquez, por sus innumerables. consejos y apoyo a lo largo de mi formación académica pero sobre en la vida,. por hacerme la persona de bien que soy hoy en d í a , por todo eso papa, muchas. gracias. un. abrazo. hasta. el. cielo.. A. mi. madre:. Eleuteria. Soto. Mendoza,. a. ti. mama, nada en este mudo me alcanza para pagarte todo lo que has hecho por. mí, tu eres la vida en mi camino sin ti jamás habría lograda nada,. gracias por. todo mama.. A mi hermano mayor: José Salas lbáñez que a pesar de no ser hermanos de. sangre siempre te he visto como tal, tú me has dado apoyo y muchos consejos,. m. has. enseñado. a enfrentar. la. vida. la. vida. y a. no. dejar. mis. ideales. gracias. también por todo.. A. mis. quienes. maestros:. a. cada. me facilitaron. el. uno. de. ellos. intercambio de. mi. reconocimiento. ideas en. un. eterno,. ellos. son. ambiente de confianza y. respeto, siempre dispuestos a brindarnos su apoyo o un consejo.. A. mis. Sinodales:. Manuel. Ignacio. lmay. Jacobo,. Martín. Gustavo. Echeverría,. Jacobo, Norma Patricia Adán Bante y a la maestra Rosa Amelía Vázquez Curiel. por. habernos. apoyado. durante. todo. este. proceso. de. la. preparación. para. la. titulación de la carrera.. Navarro Soto César René. iii.

(6) AGRADECIMIENTOS. A Dios: Por sus bendiciones constantes y por permitirme llegar a este momento. y cumplir la meta impuesta.. A mis Padres:. Por todo. su. apoyo. incondicional,. su. confianza. y comprensión. para la realización de mi carrera.. A mi Esposa: Por la confianza, comprensión. todo el proceso de mi titulación. A mi hija:. y el apoyo incondicional durante. Te amo.. Por todo su amor y confianza, apoyo y comprensión Te amo hija.. A mis Maestros: Especialmente al maestro Manuel. Ignacio lmay Jacobo por. su. a. apoyo,. Gracias. ya. que. fue. uno. de. los. que. me. motivo. culminar. este. trabajo.. y muy agradecido. Y a todos aquellos maestros que me brindaron su. confianza, apoyo y comprensión.. A. mis. Sinodales:. Manuel. Ignacio. lmay. Jacobo,. Martín. Gustavo. Echeverria,. Jacobo, Norma Patricia Adán Bante y a la maestra Rosa Amelía Vázquez Curiel por. habernos. apoyado. durante. todo. este. proceso. de. la. preparación. para. la. titulación de la carrera.. Osear. iv.

(7) DEDICATORIAS. A mis. padres,. José. Loreto y Eleuteria. por todas. las. bendiciones que. me. han. dado en el transcurso de mi vida, por su apoyo su amor y sus consejos por sus. regaños y sobre todo por la confianza que depositaron en. mí,. para que yo me. realizara como profesionista.. A mis tíos por las grandes lecciones de vida que me han brindado, sus consejos. y su apoyo a todos ellos.. A mis. primos que. han. sido. mis. hermanos. más que primos,. benjamín,. Daniel,. L u i s , Francisco y H e r n á n .. A mi. novia. Maria. Carolina. Flores Valencia,. por todos los consejos y el apoyo. que me has dado en el tiempo te conozco, por darme tu cariño y comprensión. en los momentos difíciles, gracias por todo amor.. A. mis. carrera,. sinodales. por. el. por. apoyo. ser. y. los. últimos. compresión. en. evaluarme. brindada. para. durante. el. la. titulación. desarrollo. de. de. mi. este. trabajo.. A mis amigos, los q u e me apoyaron en el transcurso de la carrera.. Navarro Soto César René. V.

(8) DEDICATORIAS. La dedico. muy especialmente a mi hija y esposa que son el motor de mi vida. para salir adelante.. A. mis. padres,. comprensión,. hermanos. y. abuelos. por. todo. el. apoyo. brindado,. por. su. por sus consejos, sus regaños y sobre todo por la confianza que. depositaron en mí, para que yo me realizara como profesionista.. A mis maestros por haberme dado todos los conocimientos necesarios, para el. desarrollo en el ámbito laboral. A. mis. carrera,. sinodales. por. el. por. apoyo. ser. y. y. los. profesional.. últimos. compresión. en. evaluarme. brindada. para. durante. el. la. titulación. desarrollo. de. de. mi. este. trabajo.. A mis amigos, los que me apoyaron en el transcurso de la carrera .. ..--. Quiroz Contrer\.0. vi. car.

(9) CONTENIDO. Páginas. APROBACION. DECLARACION I N S T I T U C I O N A L. ii. AGRADECIMIENTOS. iii. DEDICATORIAS. V. CONTENIDO. vii. LISTA DE TABLAS. ix. LISTA DE F I G U R A S. X. OBJETIVOS. xi. JUSTIFICACION. xii. RESUMEN. xiii. INTRODUCCION. 1. ANTECEDENTES. 3. IXODES R I C I N U S. 5. Ciclo de vida. 12. Hábitat. 14. Criterios Ambientales. 14. Distribución Geográfica. 15. 18. BORRELIA BURGDORFERI. Agente Etiológico, Características y Ciclo de vida. 18 22. ENFERMEDAD DE LYME. 25. Etapas de la Enfermedad de Lyme. D I A G N O S T I C O POR EL LABORATORIO. CLINICO. 28. Medios de Cultivo. 29. ELISA. 30. Western. 31. Blots. vii.

(10) 33. PCR. 36. La Captura de Antígenos. 37. Las Punciones Lumbares. 39. Prueba CD57. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES. 42. 43. R E F E R E N C I A S BIBLIOGRAFICAS. viii.

(11) LISTA DE TABLAS. Páginas. 21. Tabla 1 : Especie del complejo Borrelia burgdorferi. Tabla. 2:. Métodos. de. inmunodiagnostico. y. moleculares. para. detección de Borrelia burgdorferi en nuestras clínicas de pacientes. ix. la. 41.

(12) LISTA DE F I G U RA S Páginas. Figura 1 . Garrapatas en espera de un posible huésped. 7. Figura 2.. 8. Hembra ovopositando.. F i g u r a 3. Dimorfismo entre macho y hembra. 9. Figura 4. Características de la garrapata.. 10. Figura 5. Garrapatas en cúpula.. 11. Figura 6. Ciclo de vida de lxodes ricinus. 13. Figura 7. Distribución en Europa de lxodes ricinus. 15. Figura 8. Prevalencia de infección de Borrelia burgdorferi en la ciudad de. 16. México y zona noroeste de la República Mexicana.. Figura 9. Reporte de casos en Estados Unidos de lxodes ricinus.. 16. 20. Figura 1 O. Borrelia burgdorferi. X.

(13) OBJETIVO G E N E R A L. Resaltar la importancia que tiene el Laboratorio Clínico en el Diagnóstico de la. Enfermedad de Lyme. OBJETIVOS E S P E C I F I C O S. Describir la Enfermedad de Lyme.. Mencionar los exámenes de Laboratorio Clínico,. con. los que se puede apoyar. para el diagnóstico de la Enfermedad de Lyme. Explicar la. utilidad. de. los. exámenes de. Laboratorio. buen diagnóstico de la Enfermedad de Lyme.. xi. Clínico,. que apoyan. a un.

(14) JUSTIFICACIÓN. Debido. a. que. principalmente. también. áreas. en. en. en. la. personas. personas. serranas. actualidad. y. que. boscosas. y cuyas. pruebas. de. en. con. de. actividades. áreas. donde. presencia. de. se. Lyme. al. aire. se. libre. desarrolla. animales. la. que. presenta. así. como. ganadería,. favorecen. la. por lo general en esta enfermedad se presenta en. primeras etapas siendo. gripal. enfermedad. realizan. viven. proliferación de garrapatas,. las. que. la. pacientes asintomáticos o como. laboratorio. clínico. comúnmente. un. simple cuadro. usadas. no. revelan. información útil para llegar a un buen diagnóstico.. En. el. 2011,. probables. de. Prevención. los. seres. conocida. garrapata. se. la. de. notificaron. enfermedad. como. burgdorferi.. la. por la. La. negras. bacteria. Lyme. (CDC).. La. picadura de. garrapata. patas. 28,921. de. Enfermedades. humanos. de. casi. de. de. venado. del. la. la. oeste,. casos. a. los. confirmados. Centros. enfermedad. garrapata. en. el. este. infectadas. enfermedad. de. para. de. casos. Control. negras. Estados. con. Lyme. el. 7,500. y. la. Lyme se transmite. de patas. de. y. la. (también. Unidos). bacteria. normalmente. a. y. la. Borrelia. vive. en. ratones, ardillas y otros mamíferos pequeños.. Sin embargo, existen. pocos casos en los estados. de baja california norte y sur,. parte serrana de sonora, Durango y Yucatán.. Por tanto, este. teóricos. trabajo se realiza con la finalidad de proporcionar conocimientos. sobre. enfermedad. de. la. utilidad. Lyme. y. del. los. laboratorio. estudios. clínico. más. en. el. acertados. diagnóstico. en. cuanto. problemática, ya que es posible en gran parte de nuestro estado.. xii. de. a. la. esta.

(15) RESUMEN. El. propósito. revisión. este. trabajo. bibliográfica,. laboratorio. también. lxodes. de. clínico. los. es. es. los. resultados. obtenidos. para dar a conocer información general de la. en. el. diagnóstico. estudios que en él. ricinus. presentar. una. se. garrapata. de. la. realizan. de. tres. enfermedad. para. de. llegar a un. hospedadores.. Las. una. utilidad del. Lyme,. buen. de. así. como. diagnóstico,. larvas,. ninfas. y. adultos tienden a alimentarse en animales de distintos tamaños. A menudo se. encuentran lxodes. ricinus alrededor de la boca, en las orejas y los párpados de. ovejas, perros y gatos, y alrededor de la ubre y región axilar del ganado. En los. humanos se puede encontrar en el vello púbico,. enfermedad. por. la. de. Lyme está. espiroqueta. correcta,. definida. Borrelia. pero clínicamente. como. burgdorferi.. una. en. las. piernas,. enfermedad. Técnicamente. la enfermedad. es a menudo. axilas etc.. infecciosa. esta. causada. definición. mucho. La. es. la. más que solo. eso. especialmente en sus etapas diseminada y crónica etapas 2 y 3 tres. ( 1 9 ). En. términos. resulta. más. después. generales. de. la. la. enfermedad. picadura. de. una. de. Lyme. garrapata. es. una. infectada.. enfermedad. Esto. que. incluye. la. infección causada no sólo por Borrelia burgdorferi sino también las diversas co. infecciones que además. Lyme. puesto que debilita. llamadas Natural. resultar después de adquirir la. mucho al sistema inmunológico en. Killer Cells.. otros factores pueden. inmunológica,. puedan. De hecho en. asumir un. infecciones. la barrera de las. la forma crónica de la enfermedad,. papel todavía. oportunistas,. Borreliosis de. más significativo. co-infecciones,. la disfunción. toxinas. desequilibrios metabólicos y hormonales, de condicionamiento, etc.. biológicas,. (3). Las pruebas de laboratorio clínico comúnmente usadas no revelan información. útil para el diagnóstico de la enfermedad de Lyme, puesto que los resultados de. hemoglobina,. hematocrito,. creatinina y de orina son. xiii. usualmente normales y el.

(16) conteo. de. leucocitos. puede. ser. indistintamente. normal. o. elevado.. Si. existe. afectación neurológica, en muestras de LCR puede observarse una pleocitosis. linfocítica. moderada,. concentraciones de. proteínas. elevadas y de glucosa,. de. normal a ligeramente baja.. El. diagnóstico. excepto. en. de. esta. casos. con. enfermedad. requiere. manifestaciones. de. ensayos. patognomicas. microbiológicos,. con. los. eritemas. migratorios. Entre ellos se encuentran los métodos de detección directa y los de. detección de anticuerpos.. La detección microscópica directa del Borrelia burgdorferi sensu lato en campo oscuro y los métodos de detección de antígenos, tienen una aplicación limitada debido. al. número. de. casos. de. microorganismos. clínicas. (3). xiv. presentes. en. las. muestras.

(17) INTRODUCCIÓN. La enfermedad. emergente. Lyme o Borreliosis de. causada. transmitida. Estados. de. por. la. Unidos. por. la. espiroqueta. mordedura. de. América. de. las. (EUA). Lyme es. Borre/ia. burgdorferi.. garrapatas. y. en. una enfermedad. del. Esta. género. Europa,. la. Ciudad. Lyme,. de. pero. la. Lyme,. Connecticut,. USA.. Borreliosis o enfermedad. Por. de. eso. le. bacteria. lxodes.. borreliosis. representa 90% de las infecciones transmitidas por garrapatas.. la. infecciosa. pusieron. En. de. es. los. Lyme. Se detectó en. Enfermedad. Lyme esta diseminada. de. por todo el. mundo. (28). Fue en los Estados Unidos, en el año de 1970 que se reportó la primera vez el. Eritema migrans causada por la picadura de una Garrapata y en. colaboradores detectaron. 1 9 7 8 se estableció la. garrapata. lxodes.. etiológico. de. conoce. como. la. un. brote de Artritis Juvenil en. relación entre Artritis,. En. 1982. garrapata. Borrelia. Burgdorferi. lxodes,. burgdorferi.. fue. Al. Parálisis. Connecticut,. colaboradores. una. espiroqueta. se. USA.. En. Facial y la picadura de la. y. inicio. 1977 Steer y. aislaron. que. comenzó. el. al. el. agente. momento. tratamiento. se. con. Penicilina que demostró una mejoría de la enfermedad. (29). La Borreliosis o enfermedad de Lyme, puede afectar desde su inicio al Sistema. Musculo-esquelético. huesos,. síntomas. contaminado. desde. y. Nervioso. Neurológicos. su. Central,. y. nacimiento. causando. Psiquiátricos.. o. en. Un. c u a lq u ier. síntomas de la Borreliosis o enfermedad de Lyme,. dolores. Paranoia,. Encefalopatías,. Esquizofrenia,. etc.,. Problemas. Ataques de. Pánico,. paciente. tiempo. de. musculo. puede. su. y. estar. vida,. los. al inicio pueden ser leves o. muy intensos. Puede haber problemas Neurológicos de,. Neuritis,. del. Encefalitis, Meningitis,. Psiquiátricos. Enfermedad. como,. Depresión,. Bipolar y Obsesivo. Compulsivo, Anorexia Nerviosa, etc. (30). 1.

(18) Esta. enfermedad. enfermedad. puede. progresar desde. multisistémica,. el. una. picadura. primer vector y el. de. insecto,. más conocido es. hasta. una. la garrapata. del venado, pero no se ha estudiado la gran cantidad de insectos que gustan de. la sangre del hombre y de los animales de sangre caliente.(31). El. diagnóstico. como. de. la. espiroqueta,. indirecta,. de. esta. detección. así. como. enfermedad. directa. del. también. requiere. antígeno,. estudios. de. varios estudios. cultivo. para. serológicos. de. el. de. laboratorio. aislamiento. de. la. inmunofluorescencia. enzimoinmunoanalisis, Westerns Blots, serología LCR y la valoración. de las técnicas serológicas.. Esta. enfermedad. Azitromicinas,. es. tratada. Penicilinas,. solo. con. Claritromicina,. etc.,. antibiótico. la. como. Ceftriaxona. es. Doxiciclinas,. problemática. puesto que el paciente permanece junto al médico el primer mes. ( 3 1 ). 2.

(19) ANTECEDENTES. Desde que en Octubre de 1975 dos madres le comunicaron al Departamento de. Salud de Connecticut que un número importante de los hijos de mujeres de tres. pequeñas comunidades. (Old. Lyme,. una artritis reumatoide juvenil,. Lyme. e East Haddam) estaban. sufriendo. un grupo de reumatólogos de la Universidad de. Vale, encabezados por el profesor Allen Steere, Malawista y otros, describieron. la enfermedad con el nombre de artritis de Lyme y hallaron una prevalencia de. 1 2 , 2 por 1 000, frecuencia 100 veces superior a la artritis reumatoide juvenil en. E E . U U . (36). Ya. los. primeros. estudios. sugirieron. evidencias. epidemiológicas. de. que. se. diseminaba por la picadura de una garrapata. El rash eritematoso característico. que precede a la artritis había sido descrito en 1909 por un dermatólogo sueco,. Afzelius,. con. el. nombre de eritema. migrans,. y adelantó. la. posibilidad. de que. fuera causado por picadura de garrapatas o algún otro insecto, pero la primera. descripción. de. reportó. lesión. una. esta. enfermedad. atrófica de. la. correspondió. piel,. 1 9 0 2 acrodermatitis crónica atrófica paciente. desarrolló. picada. dolor. cefalorraquídeo. por. garrapata. radicular. (LCR).24. con. llamada. En. que. a. Hellestrom,. en. 1883,. quien. por Herxheimer y Hartmann. en. 1922 Garin y Bujadoux reportaron una. presentó. parálisis. Buchwald. de. otro. un. el. eritema. brazo. y. y. posteriormente. pleocitosis. dermatólogo. sueco,. del. líquido. describió. en. 1 9 3 0 un paciente con EM y meningitis, y asoció ambas enfermedades. En 1941. y. 1944,. Bannwarth. describió. pacientes. con. meningitis. crónica. y. radículo. neuropatía con o sin parálisis de nervios craneales, síndrome que hoy lleva su. nombre y es patognomónico de la neuroborreliosis temprana.. La. enfermedad. es. endémica. en. la. mayoría. de. los. países. (21). europeos,. en tres. zonas enzoóticas de EUA y también en algunos países asiáticos. En Europa la. prevalencia de la infección evaluada con pruebas de inmunoensayo enzimático. (ELISA) o inmunofluorescencia (IFA) es de 8 a 27% y en EUA varía de 1 a 1 0 % .. 3.

(20) En. Suramérica. se. han. reportado casos clínicos sugestivos de. la enfermedad,. aunque sin confirmación por estudios de laboratorio. (22). En México se ha identificado el vector lxodes en Baja California, la Península de. Yucatán, el Golfo de México y la zona noreste de la República. Algunos casos. sugestivos de borreliosis de Lyme fueron descritos a principios de la década de. 1990. en. los. estados. confirmación. epidemiológica. muestras. y. de. etiológica.. nacional,. se. Sinaloa. En. se. Los. 1999,. en. encontró. confirmó. inmunotransferencia.. y Nuevo. ésta. sujetos. León,. un. sin. estudio. positividad. en. que. 0.3%. por. de. seropositivos. se. de. ELISA. las. fueron. haya. logrado. la. seroprevalencia. en. 1.1 %. mismas. ubicados. de. las. mediante. en. la. zona. noreste y centro de la República Mexicana. Considerando la posible existencia. de. casos. clínicos. sugestivos. de. borreliosis. de. Lyme. en. nuestro. país. y. la. presencia del vector, los reservarías y los casos seropositivos detectados en la. encuesta. nacional,. es oportuno tener una. idea. acerca de. infección. por la bacteria causante de la enfermedad de. la. prevalencia de. la. Lyme en muestras de. suero de habitantes de estas zonas. (33). En un estudio se determinó la prevalencia de la infección causada por Borrelia. burgdorferi en una. muestra de sueros de habitantes de la Ciudad de México y. de la zona noreste de la República Mexicana. (33). 4.

(21) lxodes. ricinus. La lxodes ricinus es una especie de garrapatas duras indígenas que tienen una. amplia distribución geográfica.. Las. garrapatas. continente. lxodes. europeo. ricinus. desde. cubren. Portugal. una. hasta. amplia. Rusia. región. y. de. geográfica. África. del. del. norte. a. Escandinavia.. Esta. amplia. distribución. geográfica. implica. que. esta. especie. de. garrapatas. puede sobrevivir en diversas condiciones ambientales. (4). Las. lxodes. son sensibles a las condiciones climáticas,. ricinus. requiriendo una. humedad relativa de al menos 80% y están restringidos a áreas de moderada. o. alta precipitación con buena vegetación.. La lxodes ricinus se observa, por tanto, principalmente en. caducifolio. y. bosque. mixto,. pero. se. puede. encontrar. Europa en el bosque. en. una. variedad. de. hábitats que apoyan sus anfitriones de sangre y un microclima húmedo.. Los. géneros. lxodes. esta. de. garrapatas. escapularis,. ultima. la. de. lxodes. mayor. duras. más. pascificus,. importancia. importantes. haemaphysalis. médica,. clínica. encontrados. incluyen. e lxodes ricinus,. y veterinaria,. siendo. y son. que. tienen mayor prevalencia en algunas partes del mundo. (5). Las piezas bucales se encuentran en el capitulum y consisten de un hipostomo,. dos quelí- ceros y dos pedipalpos, Los pedipalpos tienen una función táctil con. los cuales se orientas puesto que lxodes ricinus carece de ojos, es hipostomo. tiene. haber. unas. espinas. perforado. el. que. ayudan. cuerpo. de. a. las. mantenerse. garrapatas. dentro. duras. de. se. la. piel. después. caracteriza. por. de. la. presencia de un escudo dorsal endurecido (scutum dorsal). El cual abarca todo. el cuerpo del macho mientras que en la hembra solo se encuentra en la parte. de atrás lo que les ayuda a tener mayor agilidad en el momento de la toma de. 5.

(22) sangre, el orificio genital se encuentra por el medio del segundo par de patas y. el ano justo atrás de las dos patas del cuarto par también detrás de este par de. patas están los estigmas respiratorios. (28). Las patas tienen 6 componentes: coxa, trocánter, fémur, rodilla, tibia, metatarso. y tarso. El primer tarso alberga el órgano sensorial de Haller que ayuda en la detección. de. los. hospedadores,. estos. son. unas. estructuras. porosas. en. el. porosas. en. la. primer par de patas en el caso de los machos. (6). Las. hembras. tienen. órganos. sensoriales. que. son. superficies. parte superior dorsal las cuales sirven para detectar a los machos, también les. sirven para detectar a los hospedadores.. En. ambos. ayudan. existen. estas. a orientarse,. estructuras. a estas. puesto. estructuras. se. que. les. carecen. conoce. de. como. ojos. y. estos. pedipalpos. los. cuales tienen forma de pinzas.. Tienen un tracto digestivo que consiste en una faringe muscular adaptada para. absorber fluido. abren en. (sangre),. la faringe,. tienen. glándulas. el tracto digestivo. salivales. ramificadas. las. cuales. se. y genital de las hembras tienen varios. puntos donde se conectan entre sí, lo cual hace el papel de ovario y útero esto hace que transmitan patógenos del tracto digestivo a sus ovarios lo que facilita. la transmisión vertical de agentes. (39). La lxodes ricinus busca huéspedes, usando una técnica de. "emboscada" por el. que suben a la punta de la vegetación y esperan a que pase cerca un posible. huésped.. Durante esta espera,. que bajar por la vegetación. el. periodo. desespera. está. la garrapata. humedad,. por lo que tiene. en la capa de estera para rehidratarse, por lo tanto. directamente. humedad. Volviendo a la capa de estera,. contacto. pierde. afectado. por. la. temperatura. reduce la probabilidad. con un huésped y utilizando sus. de. y. la. entrar en. reservas de energía, por lo que es. perjudicial para la supervivencia de la garrapata. Figura 1 , 2, 3, 4 y 5 (39). 6.

(23) Figura. 1:. Garrapata. en. espera. de. un. posible. huésped.. Los. huevos. son. esféricos muy pequeños y de color marrón oscuro, tienen una longitud de. 0.54. mm. y. 0.39. mm. de. ancho. tamaño. de. los. recién. eclosionados,. las. larvas miden 0.5 - 1 mm.. Fuente: 24. 7.

(24) Figura. 2:. longitud,. Hembra. las. ovopositando.. hembras. pueden. Los. llegar. adultos. hasta. miden. los. 30. de. mm. 5. y. -. 10. mm. de. presentan. un. dimorfismo sexual.. Fuente: 40. 8.

(25) Figura 3: Dimorfismo entre macho y hembra. Fuente: 2. 9.

(26) Figura 4: Características de la garrapata. Fuente: 1 7. 10.

(27) Figura 5: Garrapatas en cúpula. Fuente: 1 5. 11.

(28) -�--------. - --. Ciclo de Vida. lxodes. ricinus. es. una. garrapata. de. tres. hospedadores,. las. larvas,. ninfas. y. adultos. Tienden a alimentarse en animales de distintos tamaños. A menudo se. encuentran lxodes ricinus alrededor de la boca, en las orejas y los párpados de. ovejas, perros y gatos, y alrededor de la ubre y región axilar del ganado, en los. humanos podemos encontrarlo en el vello púbico, en las piernas, axilas etc. Las. garrapatas. pueden. encontrarse en. el. hospedador por varios. días. mientras. se. alimentan, luego caen al suelo para pasar al próximo estadio, ahí pueden durar. muchísimo. más. tiempo. puesto. que. es. el. lugar. predilecto. para. desarrollarse.. (23). El ciclo de vida de lxodes ricinus por lo general tarda entre dos y cuatro años en. completarse.. verano,. con. Su. una. alimentación. generalmente. hace. segunda temporada se activa en. Cuando no está buscando un hospedador,. un. pico. temprano. ciclos. adaptación. vitales. a. de. las. las. garrapatas. condiciones. hospedadores adecuados. para. lxodes ricinus puede encontrarse en. son. el. resultado. medioambientales. cada. el. el otoño en algunas aéreas.. la zona de la vegetación donde la humedad es relativamente más alta.. Los. en. uno de. los. y. estadios. de. la. un. (28). proceso. de. disponibilidad. que. aparecen. de. en. su. ciclo biológico.. El desarrollo del. relacionado con. biológica,. así. condiciones. posibles. ciclo. la. biológico de. estrechamente. presencia efectiva de hospedadores adecuados en su. como. con. la. microclimáticas. entre. una garrapata se encuentra. Condiciones. existencia. de. favorables.. ambientales. un. El. y. micro. gran. hábitat. número. disponibilidad. en. de. de. el. que. área. se. den. combinaciones. hospedadores. determina la gran cantidad de tipos evolutivos que aparecen en los lxódidos.. De este modo, se pueden distinguir ciclos en los que intervienen tres, dos y un. único hospedador. Figura 6 ( 1 3 ). 12.

(29) En. los ciclos trifásicos. adulto. se. alimentan. o trixenos,. sobre. sin duda. hospedadores. especie, en este tipo de ciclo la búsqueda. veces,. desprendiéndose. la. los. garrapata. del. más frecuentes,. distintos. de un. de. la. larva,. misma. o. ninfa y. distinta. hospedador se produce tres. hospedador correspondiente. al final. del proceso de alimentación. (25). Figura 6: Ciclo de vida de lxodes ricinus.. Hembra. c;o10. do::;;::•••••� •. * 1. alimentada. /. ..______. /. U\. :. �acho-hembra. Segundo Segundo hospedador. hospedador Ciclo. '\. e dos. hospedadores. Un sólo hospedador. l Ninfa. Ciclo de un. Primer. hospedador. hospedador. Primer hospedador ). Eclosión � Larva. �. Fuente: 25. 13.

(30) Hábitat. Las garrapatas. lxodes ricinus prefieren. una alta humedad,. por ejemplo,. composición de acogida son. hábitats con vegetación que mantiene. bosques caducifolios y donde el. microclima y. los adecuados para desarrollar las cuatro etapas. de la vida. Un microclima favorable puede dar lugar a la proliferación de lxodes. nctnus. en. adecuadas. pastizal. un. numero. también. áspero,. de. hábitats. están. parques. proporcionadas. presentes.. urbanos,. así. Estos. especies. incluyen. como. la. hoja. hospedadoras. pastizales,. caduca. y. brezales,. bosques. de. coníferas. (33). Criterios Ambientales. Las. lxodes ricinus son. humedad. relativa. moderada. a alta. de. sensibles a las condiciones climáticas,. por. lo. menos. precipitación. con. 80%. buena. y. están. requiriendo. restringidos. vegetación. (es. decir,. a. una. áreas. capa. de. de. hoja. rasca y el suelo permanecen húmedos durante el día).. Las. garrapatas. pasan. el. invierno. en. suelo. y. la. supervivencia. puede. ser. mejorada por la cubierta de nieve que impide que la temperatura del suelo pase. por debajo de cero. Los inviernos fríos podrían afectar a la supervivencia de los. hospederos. número. de. cubierta. hibernan,. de. pequeños. huéspedes. nieve. al. año. de. también. siguiente. sangre. puede. en. lo. que. busca. ayudar. de. a. podría. significar. garrapatas.. los. pequeños. Sin. un. menor. embargo,. mamíferos. la. que. pero puede no ser tan bueno para los animales más grandes, como. los ciervos que se alimentan de las ramitas. (33). 14.

(31) Distribución Geográfica. Las. /xodes. ricínus. Escandinavia,. Balcanes,. islas. cubren. Británicas,. una. amplia. Europa. región. central,. geográfica. Francia,. España,. incluyendo;. Italia,. los. Europa del este y el norte de África e incluso en América del norte,. central y del sur. Figura 7, 8 y 9 (33). Figura 7: Distribución en Europa de lxodes ricinus.. Fuente: 40. 15.

(32) Figura 8:. Prevalencia de infección de Borrelia burgdorferi en. la ciudad de. México y Zona Noroeste de la Republica Mexicana.. Fuente: 38. Figura 9: Reporte de casos en Estados Unidos de lxodes ricinus.. •. •. •. .¡:· •. •. •. .. ... • •. 111. • •. .. • •• •. 7:. •. •. • at, •. •. ·w ,;� :· . ,.,... •••. ... ... -��. .. !lo. •. .. .:.. Fuente: 26. 16.

(33) La distribución ha cambiado en varios países en los últimos años, encontramos. lxodes ricinus. a mayor altitud en. Bosnia y Herzegovina y la. República Checa.. Estos cambios en la distribución se han sugerido que sean el resultado de una. combinación. suelo,. los. de factores como el cambio climático,. cambios. en. las. poblaciones. los cambios en el. de. ciervos. que. lxodes. y. los. uso del. cambios. en. las. poblaciones de jabalíes. (33). Modelización. de. los. datos. sugiere. distribuyéndose por toda Noruega,. que. el. bosque. caducifolio. se. ricinus. se. convertirá. Finlandia y Suecia por 2 0 7 1 - 2 1 0 0 y también. pueden. extender. hacia. el. norte. en. Finlandia. y. Noruega que contribuirá a una mayor propagación de lxodes ricinus. (33). 17.

(34) BORRELIA BURGDORFERI. Borrelia. burgdorferi sensu. lato. es. el. agente. etiológico. de. la. enfermedad. de. Lyme. (28). Esta. constituye. un. complejo de espiroquetas que. causa. la. enfermedad. antes. mencionada, la cual es una zoonosis emergente desde finales del Siglo XX por. las graves secuelas que produce a la salud humana y por las dificultades para. su diagnóstico, control y prevención. (28). Etiológico, Características y Ciclo de Vida. Agente. En. el. complejo. Borrelia. burgdorferi sensu. lato. se. reconocen. actualmente. genomaespecies, B.burgdorferi sensu stricto, B. garinii, B. afzelii, B.. 19. valaisiana,. B. /usitaniae, B. spielmani, B. bissetti, B. bavariensis, B. japonica, B. andersonii,. B.. tanukii,. B.. americana,. turdi,. B.. B.. sínica,. kurtenbachii. B.. y. califomiensis,. B.. B.. yangtze,. finlandiensis.. Las. B.. caro/ienensis,. primeras. ocho. B.. son. consideradas patógenas para el hombre. (3). Las. Borrelias. Presentan. son. una. microorganismos. pared. celular no. unicelulares. rígida. y flagelos. responsables de su activa y característica. helicoidales. y. periplasmicos,. movilidad. de. muy. flexibles.. estos. rotación en. últimos. contra de. las manecillas del reloj. (9). El. genoma. Borrelia. burgdorferi sensu. lato. es. relativamente. pequeño,. lo. que. refleja su modo de vida como parasito obligado. Ellas carecen de la maquinaria. reconocida. ácidos. convencionalmente. grasos. y. coofactores. para. la. síntesis. enzimáticos,. los. de. que. nucleótidos,. tienen. que. aminoácidos,. obtener. del. hospedero.. 18.

(35) Su. genoma,. descrito como. inusual,. está. constituido. por cromosoma. lineal de. aproximadamente 1 Mb y numerosos plásmidos circulares y lineales.. Borrelia burgdorferi sensu. lato tiene un ciclo de vida complejo por que circula. entre vectores artrópodos y hospederos vertebrados.. Las Borrelias tienen que. ser capaces de adherirse y sobrevivir en el intestino de la garrapata , pasar del. epitelio. de. salivares. este al. diseminarse. importante. Cuando. las. a. flujo. a. los. varias. la. hemolinfa. sanguíneo. órganos. proteínas. condiciones. no. y. del. diana.. de. son. transportarse hospedero,. En. todo. membrana. favorables. a. través. evitar. este. la. y. las. reacción. proceso. externa. para. la. de. inmune. tienen. proteínas. multiplicación. glándulas. un. y. papel. adhesivas.. de. Borrelia. burgdorferi sensu lato como pueden ser la presencia de antibióticos (sobre todo. betalactamicos),. morfología. quistes. atribuye. no. el. LCR. espiroqueta!. móviles. o. medios. característica. (también. la supervivencia. con. y. conocidas. por largos. déficit. pared celular.. nutrientes,. móvil. a. como. formas. esta. esferoplastos. císticas).. periodos en el sistema. periférico, y en las articulaciones, así como. dependientes de la. de. o. cambia. formas. A. ello. su. L. se. nervioso central. o. le. y. la desaparición de los anticuerpos. Una vez que las condiciones son. normales,. nuevamente ellas revierten a su forma espiroqueta l. Fig.1 O ( 1 1 ).. 19.

(36) Figura 1 0 : Borrelia burgdorferi. • •. '. •. •. .. t. •. '. • t. •. •. •. '. •. • •. •. •. ••• •. '. •. •. t. •. • •. ••. • t. •. • •. ' •. •. •. • t. • ' .. • •. •. • • t. • ••. •. •. •. •. ' •. •. Fuente 20. 20.

(37) T a b l a 1 : Especies del complejo Borrelia burgdorferi.. B. burgdorferi sensu. E E . U U . Europa Occidental. Stricto. B. garinii. Europa, partes de Asia. B. afzelii. Europa, partes de Asia. a.Japónica. Japón. B. andersonii. Norteamérica. B. tanukii. Japón. B. turdi. Japón. B. valaisiana. Europa, partes de Asia. B. /usitaniae. Europa Central y Mediterránea. B. sínica. China. B. bissettii. EE.UU.. B. califomiensis. E E . U U . (Oeste). B. carolinensis. E E . U U . (Sureste). B. spielmanii. Europa. B. yangtze. China. B. amaericana. Norteamérica. B. bavariensis. Europa. B. kurtenbachii. Norteamérica. Fuente: 30. 21.

(38) ENFERMEDAD DE LYME. La. enfermedad. de. Lyme. es. una. enfermedad. transmitida. por. la. garrapata. la espiroqueta Borrelia burgdorferi. Técnicamente esta definición. causada por. es la correcta,. pero clínicamente la enfermedad es a menudo mucho más que. solo eso, especialmente en sus etapas diseminada y crónica etapas dos y tres.. (20). En. términos. resulta. más. después. generales. de. la. la. enfermedad. picadura. de. una. de. Lyme. garrapata. es. una. infectada.. enfermedad. Esto. que. incluye. la. infección causada no sólo por Borrelia burdorgferi sino también las diversas co. infecciones que además puedan. resultar después de adquirir la. Lyme puesto que debilita mucho al sistema. llamadas Natural. Killer Cells.. infecciones. la barrera de las. De hecho en la forma crónica de la enfermedad,. otros factores pueden asumir un. inmunológica,. inmunológico en. Borreliosis de. papel todavía. oportunistas,. más significativo. co-infecciones,. la disfunción. toxinas. biológicas,. desequilibrios metabólicos y hormonales, de condicionamiento, etc.. (42). La. se. Enfermedad. prácticamente. de. Lyme. solo. en. tiene. el. una. distribución. hemisferio. norte. mundial,. y. aunque. constituye. la. describe. enfermedad. transmitida por vectores más común en Estados Unidos y regiones de Euroasia.. La. distribución. geográfica. hombre varía de. un. burgdorferi sensu. garinii,. Borrelia. de. continente al. stricto;. en. otro.. Europa,. B. garinii, B. afzelii y B.. burgdorferi. En. se. sensu. Estados. lato. patógenas. Unidos solo se. encuentra. con. burgdorferi sensu stricto,. mayor. al. reporta. B.. frecuencia. B.. mientras que en Asia. se reportan B. garinni y B. afzelii. (42). En América latina y el Caribe existen hallazgos clínicos y de laboratorio sobre la. infección por Borrelia burgdorferi sensu lato en diversos países como Argentina,. Bolivia,. Chile,. Colombia. seroprevalencia. y de. y Venezuela.. búsqueda. de. la. En. estos. infección. se. en. han. llevado. humanos. estudios. y animales,. de. con. 22.

(39) intentos. de. permitido. mayoría. Brasil,. demostrar. de. similar. o. la. regiones. del. de. la. como. una. la. vez. que. la. que. rio,. de. sospechas. específicos. donde. en. la. y. la. y. infección. históricamente. ha. diferentes. de. muestras. así. existido. las. existen. partir. en. epidemiológicas,. ha. pacientes. en. a. específicas. se. de. Cuba. Borrelia burgdorferi. contra. síndrome. en. En. Habana). los. recientemente. anterioridad. la. un. además. enfermedad.. pruebas. clínicas. han. Brasil. prácticamente. garrapatas,. sugieren. por. que. en. encontrado. con. la. que. describir. México. ha. en. Artemisa. infección. comunidad. se. en. presenta. en. los. que. relación. es. vegetación,. enfermedad. residenciales,. y. en. con. la. necesario. comienzan. las. por. lo. mujeres. que. Se. al. la. se. como. sensu. la. de. por. lato. infestación. sobre. el. las. a. la. secas. garrapatas.. Borrelias. más. la. en. por. frecuente. incremento. de. boscosas. cuidado. hospedero,. es. factor. guarda. hojas. frecuencia. de. marcado. zonas. los. las. edad.. principal. tener. remover. un. considera. para. transmisión. alimentarse. el. en. debe. con. cualquier. comprobado. profesional. albergan. para. ha. de. permanencia. ganaderos.. estas. individuos. se. especialmente. porque. tiempo. de. con. infección. agricultores. jardines. del. en. se. stricto. puesto. permitido. constatadas. específicas. (Pinar. han. Lyme,. epidemiológicas. pero. que. ( 1 ). porque. sensu. Borrelias,. infección,. excepción,. de. Lyme,. la. las. ( 1 ). anuales. predomine. El. una. hombres,. adquirir. y. anticuerpos. enfermedad. tasa. de. especificas. serológica. de. garrapatas.. los. enfermedad. clínicas. país. de. individuos. en. la. la. de. de. confirmado.. moleculares. burgdorferi. individuos. detección. han. y. molecular. serológicas. constituyen. serológicas. confirmación. sueros. de. serológicas. evidencias. se. enfermedad. sospechas. detección. serológicos. Borrelia. de. no. Cuba. imitador. evidencias. La. y. y. evidencias. países. clínicos,. reportado. con. los. México. estudios. ADN. aislamiento. o. riesgo. en. enfermedad. bosques,. también. que. se. de. para. las. de. las. que. Lyme. leñadores,. en. crean. áreas. en. los. (7). por. varía. las. garrapatas,. según. el. una. genoma. 23.

(40) especie;. B.. Borrelia. afzelii. se. sensu. burgdorferi. garrapatas. contiene. anticoagulantes. y. transmite. durante. stricto. numerosas. otras. que. requiere. de. los. vectores. pacientes. reportados. causar. la. genero. lxodes. modulan. en. las. la. el. humanos. de. 24. 48. entre. la. mayormente. que. mordedura,. capaces. de. el. saliva. se. del. que. de. la. las. encuentran. hospedero. y. porque solo 50 a. constituyen. transmitir. Entre. en. Mientras. La. inmune. garrapatas. y animales.. hrs.. hrs.. las. respuesta. Las. momento. implicadas. más. indolora. recuerdan.. hasta. enfermedad. son. las. primeras. sustancias,. actúan como anestésicos que hacen. 70%. las. las. los. únicos. Borrelias. las. garrapatas,. ciclo. zoonótico. las. de. y. del. esta. espiroqueta. (1 O). Existen. otros vectores en. burgdorferi. sensu. lato. transmisión. a humanos. los que se. en. sus. ha. demostrado. intestinos,. o animales.. pero. Entre estos. no. la. presencia de. se. ha. se encuentran. Borrelia. constatado. la. mosquitos del. género Aedes, Cu/ex y Anopheles, y las moscas del caballo y del venado. (8). 24.

(41) Etapas de la Enfermedad de Lyme. En general, se sabe que la enfermedad. tiene tres categorías: aguda, temprana,. diseminada y crónica. Cuanto antes se comience el tratamiento al principio de la. infección,. resulta. mayores. serán. contraproducente. adecuado. pero. los. las. probabilidades. porque. síntoma. tratar. la. pueden. de. éxito.. enfermedad. confundirnos. Esto. muchas. temprana. con. otra. es. veces. lo. más. enfermedad,. entonces estaríamos haciendo las cosas mal porque estaríamos atacando una. enfermedad. que. reaparecerían. no. es,. después. entonces. con. una. los. síntomas. mayor. fuerza. podrían. y. desaparecer. entonces. sería. más. pero. difícil. diagnosticarla y el tratamiento seria muchísimo más costoso. (28). La primera etapa de la enfermedad. desarrolla. alrededor de. la. se caracteriza por un salpullido rojo que se. picadura. de. la. garrapata. el. cual. tiene. por. nombre. eritema migrans, esta etapa puede ser muy confusa para su diagnóstico porque. es. muy. parecida. a. la. gripe. común. en. cuanto. a. sus. síntomas,. esto. con. frecuencia es la etapa temprana de la enfermedad. ( 1 6 ). Para. asegurarse. Borrelias. de. las. de. que. orillas. se. trata. de. principales. esta. del. enfermedad. salpullido.. Pero. se. pueden. esto. aislar. también. las. podría. causarnos confusión ya que no en todos los casos aparece salpullido o podría. aparecer. pero. salpullidos. aparición. reacción. no. que. de. tratarse. aparecen. enfermedad. alérgica. a la. de. esta. después. de. saliva. enfermedad.. de. Lyme,. de. la. la. picadura. este. También. de. salpullido. garrapata. una. que. no. garrapata. puede. y ocasionar su. ser. todos. los. significan. debido. aparición. a. una. aun. en. ausencia de las Borrelias ya que hay muchas personas muy susceptibles a las. picaduras. de. algunos. insectos,. ácaros. etc.. lo. cual. hace. que. tengan. una. reacción alérgica.. Los. síntomas. de. la. primera. etapa. pueden. ser:. Escalofríos,. Dolor de. cabeza,. insomnio y dolores musculares. (5). 25.

(42) La segunda etapa o etapa de diseminación se presenta después de semanas e. incluso. meses. después. de. la. picadura. de. la. garrapata. y. de. los. primeros. síntomas, las manifestaciones más comunes en los pacientes infectados ya en. esta etapa son las neurológicas, cardiacas o artríticas. Las cuales pueden variar. entre meningoencefalitis, neuropatía craneal, neuropatía periférica y carditis. (5). En. esta. dolores. etapa. muy. síntomas. son. las. es. común. fuertes. sus. de. manos. ver en. los. cabeza,. pacientes. desmayos,. principalmente. características artríticas de. los. pérdida. de. la. convulsiones,. dedos. empiezan. la enfermedad,. en. tercera. etapa. se. síntomas y señales. conoce. pueden. como. no. infección. crónica. los. aparecer sino. hasta. o. en. temporal,. otros. de. desfigurarse. síntomas. destacan más las taquicardias e incluso infartos al corazón.. La. razón. los. estas. cardiacos. (41). tardía. en. semanas,. la. cual. meses. los. o años. después de la picadura de una garrapata o exposición a la enfermedad.. La artritis crónica es la principal manifestación de esta etapa en donde la rodilla. es. la. más. afectada.. Pueden. presentarse. erupciones. conocidas. como. acrodermitis que se puede manifestar como una decoloración de la piel incluso. con. un. color rojo-azulosa. esta erupción es muy difícil de. curar y puede estar. presente en la piel durante años aun si se trata.. Las. manifestaciones. del. sistema. nervioso. pueden. incluir,. entumecimiento,. dolor, parálisis de los músculos faciales (generalmente en un lado), meningitis y. un dolor intenso de cabeza.. Otra de las muchas manifestaciones es la ocular,. esta se puede presentar en. cualquier parte del ojo o cualquiera de los dos y esta varía según la etapa de. avance. de. la. enfermedad,. observar conjuntivitis. En. y fotofobia. la. fase. estas. 1. son. de. la. leves. enfermedad. y duran. muy. solo. podemos. poco. algunas. veces solo horas la conjuntivitis es la más común esta se presenta en el 1 1 % de. los casos. ( 1 0 ). 26.

(43) Durante. la. fase. 2. las. más. comunes. son. las. manifestaciones. neuro. oftalmológicas, principalmente la parálisis de Bell. Algunos pacientes presentan. la triada de Lyme la cual se refiere a una parálisis del nervio craneal, meningitis. y radiculopatia.. En. la fase 3 es cuando se ve la. cuales. ya. queratitis,. son. iritis,. muy. severas. las. mayoría de las manifestaciones oculares las. cuales. incluyen:. pars planitis, uveítis, coriorretinitis,. espiescleritis,. simblefaron,. desprendimiento de retina y. oclusión de rama de la arteria central de la retina. ( 1 2 ). 27.

(44) DIAGNÓSTICO POR EL LABORATORIO CLÍNICO. Las pruebas de laboratorio clínico comúnmente usadas no revelan información. útil para el diagnóstico de la enfermedad de Lyme, puesto que los resultados de. hemoglobina,. conteo. de. hematocrito,. leucocitos. creatinina y de orina son usualmente normales y el. puede. ser. indistintamente. normal. o. elevado.. Si. existe. afectación neurológica, en muestras de LCR puede observarse una pleocitosis. linfocitica. moderada,. concentraciones de. proteínas elevadas y de glucosa,. de. normal a ligeramente baja.. El. diagnóstico. excepto. en. de. esta. casos. con. enfermedad. requiere. manifestaciones. de. ensayos. patognomicas. microbiológicos,. con. los. eritemas. migratorios. Entre ellos se encuentran los métodos de detección directa y los de. detección de anticuerpos.. La detección microscópica directa del Borrelia burgdorferi sensu lato en campo. oscuro y los métodos de detección de antígenos, tienen una aplicación limitada. debido. al. número. de. casos. de. microorganismos. presentes. en. las. muestras. clínicas. ( 1 4 ). 28.

(45) Medios de Cultivo. Para el cultivo de Borrelia burgdorferi sensu. líquidos derivados del medio original de. encuentran. los. medios. BSK. 11,. lato se utilizan. Kelly.. BSK-H. y. medios de cultivo. Entre las versiones actuales se. el. medio. de. Kelly-Pettenkofer. modificado (MKP: modified Kelly-pettenkonfer).. Los. cultivos. se. microaerofilia,. prolongado. incuban. durante. de. estas. usualmente. 12. semanas. espiroquetas. de. o. (7. 30. más,. a. 20. a. 34•C. debido. hrs).. al. en. condiciones. tiempo. También. se. de. ha. de. generación. reportado. la. propagación de líneas celulares obtenidas de garrapatas y mamíferos.. Los. aislamientos. de. Borrelias. se. han. logrado. fundamentalmente. a. partir. de. tejidos y fluidos corporales, que incluyen biopsias de las lesiones en piel, el LCR. y sangre completa (suero y plasma). También se han recuperado aunque con. menor frecuencia, de liquido sinovial, tejido cardiaco e iris. ( 1 6 ). La. sensibilidad. de. cultivo. para. muestras. clínicas. no. está. definida,. pero. se. conoce que es relativamente baja. No se recomienda para la práctica clínica de. rutina,. pues. repercute. la. de. espiroquetas.. disminuye. antibiótico.. la. A. variabilidad manera. Además,. de. la. negativa. es. sensibilidad. pesar. en. un. en. la. método. cuando. ello,. calidad. los. de. los. lotes. promoción. laborioso,. pacientes. representa. el. de. del. caro. han. método. medios. de. crecimiento. y. lento,. recibido. de. para. cultivo de. el. tratamiento. referencia. las. que. con. para. el. diagnóstico de la enfermedad de Lyme. ( 1 5 ). 29.

(46) ELISA. Los ELISA constituyen el formato más empleado para detectar los anticuerpos.. Se recomienda el empleo de,. al menos,. las que. purificados. se utilizan. antígenos. pruebas de segunda generación o en. (componentes flagelares),. o pruebas. de tercera generación con antígenos recombinantes o péptidos sintéticos para. evitar las reacciones cruzadas.. Una. opción. para el. diagnóstico. serológico de. la. neuroborreliosis. (enfermedad. de Lyme), es la detección de anticuerpos intratecales, para los que se analizan. paralelamente. muestras. de. sueros. y. LCR,. porque. se. considera. que. hay. producción de anticuerpos intratecales cuando el título de anticuerpos en LCR. excede. el. título. en. suero,. o sea,. el. índice. restante. o. relación. entre. ellos. es. mayor que 1 . (32). Entre. las. limitaciones. fundamentalmente. entre. diferentes. estuche.. Las. de. por. los. las. estuches. ELISA se. variaciones. comerciales. preparaciones. de. encuentra. la falta. antigénicas. e. incluso. antígenos. a. que. entre. partir. de. se. los. de. estandarización,. pueden. lotes. de. presentar. un. células. mismo. completas. disminuye la especificidad por la ocurrencia de reacciones cruzadas. Los ELISA. tienen ventajas sobre los otros inmunoensayos, generan. de. forma. objetiva. un. valor. numérico. porque son fáciles de realizar, que. se. correlaciona. con. la. cantidad de anticuerpo presentes en la muestra y pueden ser automatizados.. Las. muestras. analizadas. con. que. resultan. Western. positivas,. Blots.. De. esta. dudosas. forma. recomendado por el centers for disease control. se. o. equivocas. cumple. con. Blots. con. alta. especificidad,. o. el. ser. algoritmo. (CDC), que plantea el empleo. de una prueba de pesquisa ( I F I o ELISA) con alta sensibilidad,. Western. deben. la. realización. seguida de un. de. ambas. simultáneamente. (34). 30.

(47) Western Blots. El uso de Western Blots ha permitido conocer los antígenos Borrelia burgdorferi. sensu. lato. inmunodominantes. pacientes. con. respuesta. inmune. manifiestan. en. manifestaciones. restringida. enfermedad. a. cada. tempranas. unas. tardía. etapa. pocas. tienen. clínica. de. de. la. enfermedad.. neuroborreliosis. proteínas,. anticuerpos. tienen. mientras. lgG. que. contra. una. los. un. Los. que. amplio. espectro de antígenos.. De forma general, los Western Blots y los ELISA tienen sensibilidades similares,. excepto. en. la. detección. de. anti. cuerpos. en. la fase. aguda. de. la. enfermedad. temprana, donde el Western Blots es más sensible. En cambio, la especificidad. del Western. que. la. Blots es mayor. interpretación. que. se. la del. basa. ELISA (aunque menor que. en. bandas. de. proteínas. 100%). por. especificas. inmunorectivas. (34). Las. principales. interpretación. limitaciones. subjetiva. de. del. la. Western. Blots. intensidad. de. incluyen. las. la. bandas,. lectura. la. visual. variabilidad. e. de. respuestas de anticuerpos en pacientes con iguales manifestaciones clínicas y. el costo. que. la. En consecuencia,. lectura. es. se han desarrollado sistemas comerciales para los. automatizada,. lo. cual. reduce. la. subjetividad. y. el. tiempo. requerido para la prueba; sin embargo estas no se utilizan ampliamente.. En. 6%. de. los. pacientes. con. otras. enfermedades. como. artritis. reumatoidea,. mononucleosis infecciosa y lupus eritematoso sistémico, se reportan resultados. falsos positivos a la l g M .. La reactividad a esta inmunoglobulina puede persistir. por periodos prolongados después del tratamiento de la enfermedad de Lyme. temprana. (35). Dado. que. anticuerpos. los. hallazgos. pueden. serológicos. persistir. en. varían. individuos. de. manera. tratados. con. considerable. éxito,. el. y. los. seguimiento. serológico no es útil para el control de la terapia. Recientemente se recomienda. 31.

(48) por autores norteamericanos el empleo del péptido C6 (péptido sintético de 26. aminoácidos que reproduce la secuencia de la sexta región invariable dentro del. dominio central de la proteína VlsE) como antígeno para estos fines e incluso. se piensa que un futuro el ELISA-C6 pueda ser empleado como una prueba, sin. necesidad de confirmación por Western Blots. (35). 32.

(49) PCR. Dada. la. complejidad. del. diagnóstico. serológico,. objetivos adicionales es muy recomendable.. la. disponibilidad. de. datos. Las técnicas de amplificación del. genoma son de especial eficacia, pero tienen el problema de que una constante. en esta enfermedad es el bajo número de organismos infectantes. La carga de. espiroquetas transmitidas. oscilar. de. unos. cientos. por el. hasta. vector en. 5.000. y. el. el. momento. número. de. de. la. infección. genomas. en. puede. líquidos. corporales puede ser menor de 50/ mi. En estas circunstancias es necesario, en. primer. lugar,. disponer. de. técnicas. de. extracción. y. purificación. de. ADN. que. eviten al máximo la pérdida de material durante el procesamiento de la muestra.. Para este objetivo, se han descrito una gran variedad de métodos dependiendo. de la muestra a tratar. Los métodos tradicionales incluyen una disrupción de las. células, inactivación de RNasas y/o DNasas con sales caotrópicas, degradación. de. proteínas. con. precipitación. con. proteinasa. alcoholes. K,. extracción. (etanol. o. del. ADN. isopropanol).. con. Dado. fenol-cloroformo. el. bajo. número. y. de. copias de genoma en las muestras, se han ensayado métodos alternativos que. aumentan la sensibilidad.. Entre ellos,. la extracción con tiocianato de guanidina. permite la extracción y precipitación sin cambiar de tubo, evitando la pérdida de material en. los trasvases que se. realizan. en. los métodos. tradicionales.. Otros. métodos más simples aplicables a muestras líquidas realizan una centrifugación. y posterior tratamiento por ebullición del sedimento, sin extracción posterior. En. cualquier. caso. leptospiras,. se. etc.). recomienda. que. ayudan. la. a. adición. de. precipitar. "carriers". pequeñas. (glicógeno,. cantidades. ADN. de. de. ADN.. También existen en el mercado procedimientos basados en matrices de resina. que captan el ADN que será eluído a través de columnas desechables.. métodos. que. evitan. el. uso. de. disolventes. pueden. dar. lugar. Estos. a problemas. de. sensibilidad con Borrelia. (37). 33.

(50) La técnica. de. sensibilidad.. realizan. primera. amplificación también. Un. test. de. PCR. dos amplificaciones. amplificación. es vital. anidado,. diana. hora. ("nested". consecutivas. como. a la. la. obtener una. o "semi-nested"),. mediante el. para. de. uso del. segunda,. buena. donde. se. producto de. proporciona. un. la. gran. rendimiento. El procedimiento de detección de los amplificados también ayuda a. mejorar la sensibilidad. Un método de detección ampliamente utilizado, con una. gran. sensibilidad. llamado. y. especificidad. "Reverse. Une. comprobadas. Blotting",. donde. por. los. diferentes. productos. grupos,. de. es. el. amplificación,. marcados con biotina (mediante el uso de uno de los iniciadores marcados) se. hibridan. sobre. especificas. una. de. membrana. diferentes. de. nylon. en. genoespecies.. la. De. que. esta. se. han. manera,. aplicado. se. sondas. obtiene. un. resultado positivo/negativo además de la genoespecie del organismo causal. La. variabilidad en los genes elegidos para su amplificación es uno de los factores. que introducen problemas de estandarización en este tipo de tests. La elección. tiene que pasar obligatoriamente,. poco grado de variabilidad.. Se. por el. regiones. (flagelina),. intergénicos. caso,. p93. (gen. entre. ospA es,. de. las. ospA. (en. Los más utilizados son los que amplifican. su. zona. cromosómico. unidades. regiones del genoma con. han descrito casi tantos métodos como genes. específicos tiene el microorganismo.. diversas. empleo de. 5S. menos. con. poca. y 23S. del. variable),. variabilidad). ADN. regiones y. los. ribosómico.. En. de. tia. espacios. cualquier. con diferencia, el gen más empleado y el que permite obtener. resultados con una mayor sensibilidad. (34). Como. resumen,. una. PCR. que. incluya. una. extracción. con. tiocianato. de. guanidina en un único tubo con glicógeno como "carrier", amplificación de ospA. de forma anidada y una detección de los amplicones mediante hibridación debe. tener. unos. alcance. de. valores. de. cualquier. sensibilidad. laboratorio. muy. que. buenos.. disponga. de. Este. las. tipo. de. técnicas,. instalaciones. para. al. la. realización de PCR, sin ninguna dificultad de interpretación serán el futuro para. el. diagnóstico. de. esta. enfermedad. y. facilitarán,. además,. datos. sobre. las. 34.

(51) distintas. genoespecies. producción. de. especificidad. tests. causantes. serológicos. aunque. será. ya. de. enfermedad. con. mejores. difícil. humana. parámetros. disponer. de. ayudando. de. técnicas. a. sensibilidad. serológicas. la. y. que. mejores significativamente el diagnóstico.. Estas. pruebas. enfermedad burgdorferi. están. pero. su. causa. transitoriamente. en. disponibles. sensibilidad. una. infección. en. aún. la. es. del. actualidad. muy. tejido. pobre.. para. Esto. profundo. los fluidos corporales y sería. y. diagnosticar. es. porque. se. encuentra. muy difícil. esta. Borrelia. sólo. diagnosticar esta. enfermedad mediante esta técnica solamente en su etapa temprana la cual es. muy confusa y no especifica de Lyme, pero si desde la etapa temprana o etapa. uno solo con. los síntomas se supiera que se trata de la enfermedad de Lyme. seria esta la herramienta primordial. (36). Pero aún permanece pobre,. como. en. los. especímenes. cultivos. para. de. posiblemente menos de un 30%.. sangre. aumentar el. rutinarios,. margen,. un. deben. resultado. Por lo tanto, así. recogerse. negativo. múltiples. no descarta. la. infección, pero uno positivo es significativo. Puedes examinar la sangre entera,. de. la. capa. de. leucocitos,. el. suero,. la. orina,. el. fluido. espinal. y otros. fluidos. realizar PCR en. sangre. corporales y biopsias de tejidos.. Se. pueden. hacer varias. PCR en. sangre. o se. puede. entera, suero y orina simultáneamente en un momento con síntomas activos. El. paciente debe estar libre de antibióticos al menos durante 6 semanas antes del. examen para así obtener el margen más alto. (36). 35.

(52) La Captura de Antígenos. Está cada vez más ampliamente disponible, y se puede hacer en orina,. liquido. sinovial.. La. sensibilidad. especificidad es alta. todavía. más de un. 90%.. es. baja. alrededor. Es específico más. del. 30%,. LCR y. pero. su. no sensible así que. también es pobre en cuanto a los resultados. (4). El. organismo. tarda. cierto. tiempo. en. producir. los. anticuerpos. frente. a. B.. burgdorferi. Los anticuerpos frente a B. burgdorferi de tipo lgM (inmunoglobulina. M) suelen ser detectables en sangre a las dos o tres semanas de la exposición;. su. concentración. posteriormente. empieza. (inmunoglobulina. alcanzan. un. nivel. y. aumenta. G). a. alcanza. declinar.. se detectan. máximo al. un. máximo. Los. a. las. anticuerpos. varias semanas. seis. de. más tarde de. tipo. y. lgG. la exposición,. unos seis meses y pueden. cabo de. semanas. mantenerse. elevados durante muchos años.. La. presencia. conjugado. de. los. anti-JgG). complejos. que. se. (Ag. forman. Borrelia,. lgG. eventualmente. anti-Borrelia. es. revelada. burgdorferi,. mediante. la. adición de una solución enzimática de revelado en cada pocillo. (4). 36.

(53) Las Punciones Lumbares. No. se. recomiendan. descarta el. Lyme.. rutinariamente,. ya. que. una. punción. lumbar. negativa. no. Los anticuerpos frente a Borrelia burgdorferi se encuentran. principalmente en la meningitis de Lyme, y se observan rara vez en infecciones. no meningíticas del SNC, incluyendo encefalopatía avanzada. Incluso en casos. de meningitis, los anticuerpos se detectan en el LCR en menos del 1 3 % de los. pacientes. con. solamente en. Lyme tardío. pacientes. Por. con. lo tanto,. las. punciones. manifestaciones. lumbares se. neurológicas. practican. muy fuertes en. que el diagnóstico es incierto, si son seronegativos, o siguen aún. los. sintomáticos. después de completar el tratamiento. Cuando sea realizada, el objetivo es el de. descartar otras condiciones, y determinar si están presentes antígenos y ácidos. nucleicos de Borrelia burgdorferi.. Es especialmente importante observar si. proteínas y glóbulos blancos están elevados,. las. lo que daría la necesidad de una. terapia más agresiva, así como también la presión de apertura, que puede ser. más fuerte y contribuir a los dolores de cabeza, especialmente en los niños.(17). La. prueba. enfermedad. esperar. LCR. no. en relación. indicada. está. con. en. neuroborreliosis. los. de. siguientes. Lyme,. estados. porque. no. de. son. la. de. resultados patológicos:. •. Encefalopatía crónica en la borreliosis de Lyme.. •. Polineuropatía crónica en la etapa tardía.. Pleocitosis (recuento de células en 5/µL), el nivel de elevación de la proteína y. la evidencia de la síntesis intratecal de anticuerpos específicos de Borrelia (LCR. / suero ratio) son indicios de neuroborreliosis aguda.. Sin embargo, si la neuroborreliosis se produce muy poco tiempo después de la. infección por Borrelia y con manifestaciones tardías, los anticuerpos de Borrelia. especificas estarán ausentes tanto en. suero como en. LCR o aparecerán más. pronto en el LCR que en el suero, y viceversa. ( 1 8 ). 37.

(54) La detección de Borrelia formadas por vía intratecal de anticuerpos específicos. en. el. LCR es. sólo. muy. rara vez es. posible. en. los. casos. de. la. borreliosis de. Lyme, con afectación neurológica.. Seria. mejor hacer biopsias en todas aquellas lesiones o sarpullidos de. inexplicables y realizar PCR y cuidadosa histología. Para cuanto a la observación de espiroquetas.. la. piel. alertar al patólogo en. (42). 38.

(55) Prueba CD57. Medir. los. recuentos. de. CD57. representa. un. gran. avance en. el diagnóstico y. tratamiento de la Borreliosis de Lyme.. Las Infecciones crónicas de Borrelia se sabe que suprimen el sistema inmune y. pueden disminuir la cantidad del subconjunto CD57 de las células Natural Killer.. Así. como. en. la. infección. del. VIH,. se. usan. rutinariamente. los. recuentos. de. células T anormalmente bajos como marcadores para saber qué actividad tiene. la. infección,. recuento. en. del. después del. la. Borrelia. CD57. fin. del. para. podemos. indicar. tratamiento,. la. es. usar. el. actividad. grado. de. de. infección. probable que. la. la. ocurra. disminución. una. de. en. el. y. si,. Lyme. recaída.. Incluso. puede utilizarse como una prueba de cribado sencilla de bajo costo, porque en. este momento, creemos que sólo Borrelia es capaz de deprimir los CD57. Así,. un paciente enfermo con las CD57 altas, está probablemente enfermo de algo. distinto del Lyme, tal como una ca-infección. (33). El. recuento. normal. para. personas. sanas. es. encontrarse. por encima. de. 200.. Generalmente hay un grado de fluctuación en el recuento a través del tiempo, y. el. número. no. aumenta. progresivamente a medida que avanza. Sino, que permanece bajo hasta que la. luego. subirá. cuando. se. de. golpe.. concluya. Si. un. el. recuento. curso. de. el tratamiento.. Borreliosis de Lyme esté controlada, y. de. CD-57. antibióticos,. no. está. entonces. en. es. el. rango. casi. normal. seguro. que. tendrá lugar una recaída. (39). La. prueba del. recuento de. CD57. está. disponible en. la. Sanidad. Pública. pero. según los protocolos médicos dicen que no pueden realizarla. Así que una vez. más nos vemos obligados a enviar las muestras de sangre a Europa o E . E . U . U .. El. laboratorio. lnfectolab. de. Alemania. realiza. dicha. prueba. y. también. los. laboratorios IGENEX de E . E . U . U . (32). 39.

(56) Esta prueba nos sirve para medir las células CD57 y representa un gran avance. en el diagnóstico y tratamiento de la Borreliosis de Lyme.. Estudios. de. investigación. clínica. y estudios. de. casos. han. mostrado. que. las. infecciones crónicas de Lyme suelen ir acompañados de cambios en la defensa. inmune. celular.. llamadas. La. Natural. evidencia. Killer-Cells. de. esto. (NK;. absoluto disminuido y partes de. +).. Mientras. muestran. que. las. una. CD3-CD56. las. infecciones. CD57-parámetros. es. células. agudas. normales,. disminución. +),. pero. sobre. NK activadas. de. Lyme. pacientes. de. del. y. número. todo. de. las. un. número. (CD3-CD56. + CD57. otras. Lyme. enfermedades. crónica. a. menudo. tienen parámetro de 100 CD57-cells/µI en la sangre o menos. (35). Esto hace a esta prueba la prueba más veraz y más eficaz para el diagnóstico. de esta enfermedad solo con una desventaja la cual seria el alto costo, fuera de. ahí esta prueba seria la indicada para diagnosticar Borreliosis de Lyme y es una. de las más empleadas en los países primer mundistas donde existen casos de. esta. de. enfermedad.. las. células. Virginia. NK. Yáñez. activadas. (2008). número. (CD3-CD56. +. absoluto. CD57. +).. disminuido. Mientras. y partes. que. las. infecciones agudas de Lyme y otras enfermedades muestran CD57-parámetros. normales, pacientes de Lyme crónica a menudo tienen parámetro de 100 CD57-. cells/µI en la sangre o menos. (35). 40.

(57) Tabla 2:. Métodos de inmunodiagnostico y moleculares para detección de. Borrelia. burgdorferi en. muestras. clínicas. de. pacientes con. sospecha de. enfermedad de Lyme adquirida en México.. Cutáneos. 40. 6. 4/6 (67%). 5/6 (83%). EM. 3. 1. 1/1. 1/1. Linfocitoma. 3. 3. 1/3. 2/3. ACA. 3. 1. 1/1. 1/1. Mórfea. 31. 1. 1/1. 1/1. Neurológicos. 19. 11. N cranial. 7. 4. 1/1. 1/1. Poliradiculopatía. 12. 7. 3/6. 3/6. Artritis. 9. 3. 1/1. 1/1. Total. 72. 20 (28%). 8/14 (57%). 9/14 (64%). cutáneo. sn. (42%). 3n'(42%). Fuente: 27. 41.

(58) C O N C L U S I O N E S Y RECOMENDACIONES. La enfermedad de Lyme es muy agresiva y presenta. poder. llegar a su. persona,. se. diagnóstico.. puede. Por. confundir. con. los. otro. signos. ciertas dificultades para. y síntomas. padecimiento.. Si. que. se. manifiesta. lleva. a. una. cabo. un. tratamiento de fármacos inadecuados, el padecimiento continuara avanzando.. Respecto a la ayuda diagnostica que en el laboratorio clínico se pueda realizar,. en las pruebas actuales no se cuenta, de manera rutinaria con una que tenga. las. características. detección,. para. requeridas. confirmar. la. de. sensibilidad,. presencia. o. no. de. especificidad. la. bacteria. y. tiempo. causante. de. de. tal. enfermedad en el paciente en estudio.. Por. lo. tanto. se. recomiendan. se. desarrollen. estudios. donde. se. investigue. la. presencia de la garrapata, así como de las bacterias que son causantes de la. enfermedad de Lyme. Así. tomen. las. medidas. mismo,. pertinentes. que las personas expuestas a las anteriores. para. evitar. el. contagio. de. la. mencionada. enfermedad.. Por. lo. anterior,. es. necesario. protegerse. uno. mismo. de. las. picaduras. de. las. garrapatas, retirando maderas amontonadas, paredes de piedra, comederos de. pájaros, ya que estos atraen a pequeños animales portadores de garrapatas y. puede aumentar el riesgo de adquirir Lyme.. 42.

(59) REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS. 1.-. Álvarez,. Clínica.. M.. Malina. &. Elsevier.. l.. (2016).. 34. (2),. Enfermedades. Recuperado. Infecciosas. Enero,. y. Metodología. 12,. 2016. de. http://www.elsevier.es/ct-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologia. clinica-28. 2.- Aylin,. 10,. B. ( 2 0 1 3 ) .. 2016. Naturaleza sorprendente.. desde. la. web:. (Fotografía).. Recuperado marzo,. http://www.chismesmundo.com/naturaleza. sorprendente-seres-vivos/. 3.-. Barbour,. Baldi,. P.. &. A.. G.,. Jasinskas,. Felgner,. P.. L.. with. Borrelia. Retrieved. 1,. M.. A.,. Davies,. A genome-wide. natural 4.. burgdorferi.. April,. Kayala,. (2008).. limited set of immunogens in. mice. A.,. proteome. Steere,. array. A.. C.,. reveals. a. lnfections of humans and white-footed. lnfect. 2012,. D.H.,. lmmun.. from. [Abstract),. 76. University. ( 1 1 ).. of. 37-88.. California.. http://www.ncbi. n l m . nih.gov/pubmed/184 74646. 4.. - Battisti,. Policastro,. spirochetes. [Abstract],. J.. M.,. P.. F.. from. 76. Bono,. J.. L.,. Rosa,. P .A.,. (2008).. Outer. Surface. acquired. host. immunity. (11),. 87-128.. Retrieved. Schrumpf,. M.. protein. A. in. tick. April,. The. 1,. E.,. Schwan, T.. protects. Lyme. vector.. 2012,. from. G.. &. disease. lnfect. lmmun.. University. USA.. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18779341. 5. - Berrada, Z . L . ,. Telford,. S.R. (2009) Third.. Surden of. on American companion animals. [Abstract], 24 (4),. 2012,. from. Laboratory. tick-borne. 81-175.. infections. Retrieved April,. New. 1,. England.. http://www. ncbi .nlm. nih .gov/pubmed/19945085. 6.. -. Beugnet,. F.,. Kolasinski,. M.,. Michelangeli,. P.A.,. Vienne,. J.. &. Loukos,. H.. ( 2 0 1 1 ). Mathematical modelling of the impact of climatic conditions inFrance on. Rhipicephalus sanguineus tick activity and densitysince 1960.(Abstract) 5(2), 63-. 43.

(60) Retrieved. 255.. April,. 2011,. 1,. from. Health.. Geospat. http://www. ncbi. nlm. nih.gov/pubmed/21590676. 7.. - Bowen,. M.. D.. (1984).. Lyme. Disease. in. New Jersey,. 1 9 7 8 - 1 9 8 2 . T h e Vale. Journal of Biology and Medicine. [Abstract], 5 7 ( 1 7 ) , 661-668. Retrieved May, 26,. 2012. from. source.. http://www. ncbi.nlm. nih .gov/pmc/articles/PMC2590043/pdf/yjbm00100-0207 .pdf. 8. - Burrascano, Jj. (2008). Advance topics in lyme disease,(16 ed.) New York,. USA: ronald press.. 9.. - Brunner,. J.. L.,. Logiudice,. competence of Borrelia. and. specificity.. K.,. & Ostfeld,. Burgdorferi hosts:. [Abstract].. 45(1 ),. R.S.. (2011).. prevalence and. 47-139.. Retrieved. Estimating. infectivity,. Jan. 1,. reservoir. sensitivity. 2008,. from. Entomologica Medicine. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18283955. 10.-. Cameron,. D.. assessments. and. management. of. J.,. Johnson,. guideline. known. tick. &. L.B.. Maloney,. recommendations. bites,. erythema. in. E.. L.. lyme. migrans. (2014).. disease:. rashes. Evidence. the. and. clinical. persistent. disease [abstract] anti-infect 12(9), 1 1 0 3 - 1 1 3 5 . Retrieved august, 26, 2 0 1 5 from. http ://www. ncbi. nlm. nih.9ov/pmc/articles/pmc4196523/. 11.. - Contreras,. lxodida). as. [Abstract],. 2012,. from. F.,. vectors. Ticks. web:. Rodríguez,. and. vectors. J.J.. reservoirs. Borrelia,. &. Muniain,. of. 23(2),. M.A.. pathogen. (2005).. Ticks. microorganism. 1307-1613.. Retrieved. (Acarina:. in. Spain.. January,. 12,. http://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas. microbiologia-clinica-28-articulo-las-garrapatas-acarina-ixodida-como-13071613. 1 2 . - Dantas, F. (2010). Biology and ecology of the brown dog tick, Rhipicephalus. sanguineus. [Abstract],. 3(26), 1 1 8 6 - 1 7 5 6 . Retrieved May, 9, 2009, from Biomed. Central the USA. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2857863/#. 44.