COMISION NACIONAL DE INVESTIGACION CIENCIA Y TECNOLOGIA VERSION OFICIAL

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T" GONIGYT

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COMISIÓN NACIONAL DE INVESTIGACIÓN

CIENTiFICA Y TECNOLÓGICA

GOBIERNODECHILE

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-COMISION NACIONAL DE INVESTIGACION CIENCIA Y TECNOLOGIA

VERSION OFICIAL

FECHA: 13/3/2009

PROYECTO REGULAR N°1060339

INVESTIGADOR RESPONSABLE: LOYOLA MORALES LUIS ALBERTO

FONDO NACIONAL [)E DESARROLLO C1ENTIFICO Y TECNOLOGICO (FONDECYl')

Bernarda Morin 551. _{Providencia - casilla 297-', Santiago 21} Telefono: 435 43 50 FAX 365 4435

(2)

INFORME FINAL

PROYECTO FONDECYT RECULAR

N° PROYECTO: 1060339 DURACIÓN: 3 años AÑO ETAPA: 2008

TÍTULO PROYECTO: QUIMICA Y BIOACTIVIDAD DETERPENOII)ES AISLADOS DE ESPECIES DE APLA('EAE DL CHILE

DISCIPLINA PRINCIPAL: QUIMICA DE RECURSOS NATURALES

GRUPO DE ESTUDIO: QLJ!MICA

INVESTIGADOR(A) RESPONSABLE: LOYOLA MORALES LUIS ALBERTO DIRECCIÓN : avenida angamos 601

COMUNA : antofagasta CIUDAD: antofagasta REGIÓN: IIREGION FONO : 55-637229 EMAIL: aloyola@uantofcl INFORME OBJETIVOS

Cumplimiento de los Objetivos planteados en el Proyecto. Recuerde que los objetivos del proyecto no se refieren a listar actividades desarrolladas sino a los objetivos desarrollados

N° OBJETIVOS CUMPLIMIENTO FUNDAMENTO

1 Reaislar diterpenoides en cantidades suficientes TOTAL

para transformaciones y mediciones de actividad biológica desde especies del género Azorella. Mulinum y Laretia ya estudiadas.

2 Examinar químicamente nuevas especies del TOTAL.

género Azorella. Mulinum y Laretia en la búsqueda de diterpenoides

3 Realizar transformaciones químicas de TOTA!,

diterpenoides del tipo mulinano y azorellano

4 Realizar mediciones de actividad biológica de los TOTAL

diterpenoides

Otro(s) aspecto(s) que Ud. considere importante(s) en la evaluación del cumplimiento de objetivos planteados en la propuesta original o en las modificaciones autorizadas por los Consejos.

(3)

oH cooH

RESULTADOS OBTENIDOS:

Para cada uno de los objetivos específicos, describa o resuma los resultados. Relacione las publicaciones y ¡o manuscritos enviados a publicación con los objetivos específicos. En la sección Anexos incluya información adicional que considere pertinente para efectos de la evaluación. La extensión máxima de esta sección es de 5 páginas (letra tamaño 10, Anal o Verdana).

El presente informe se presenta directamente con los objetivos del proyecto:

1.- En relación al reaislamiento de terpenoides de especies ya estudiadas, el trabajo contempló el estudio de los extractos de éter de petróleo de las siguientes especies colectadas en los años 2005-08 y se aisló:

Mulinum crassifolium: ácidos mulinólico, mulinénico, 17-acetoximulínico, 17-acetoximulin-11,13-dien-20-oico, y el éter metílico del ácido 17-acetoximulínico cuya estructura fue confirmada por difracción de rayos X: Acta Crystallographica Section E (2008), E64, o1209 (publicación N° 4) y dos sesquiterpenos conocidos como oplopanona y buchariol.

Azore/la compacta: ácido 11,13-dienmulin-20-oico, azorellanol y 7-desacetilazorellanol. Adicionalmente se aisló el ácido 14a-hidroximulinólico, cuya estructura fue confirmada mediante difracción de rayos X, y los resultados fueron publicados en Acta Crystallographica Section E (2008), E64, o1348-1349 (publicación N° 5).

OH

MM

Azore//a madreporica: 9,11 -di hidroxi-8,13-epoxiya reta no, azorellanol, un nuevo diterpenoide del tipo azorellano, 17-acetoxy- 13-a-hydroxy-azorellane, resultados enviados recientemente a publicación al Journal of the Brazilian Chemical Society (Publicación N° 7) y cinco nuevos diterpenos con el esqueleto del tipo mulinano, cuyas estructuras fueron determinadas mediante técnicas espectroscó picas mono y bidimensionales ( 1 H-, 13 C-RMN, COSY, ROESY y HMBC).

coo

Laretia acau/is: azorellanol, 7-deacetylazorellanol, 13a-Hidroxiazorellano (Y-3), ácido 13-epimulinálico y un nuevo diterpenoide del tipo azorellano el 13-epiazorellanol. Estos resultados fueron publicados Phytotherapy Research (2007), 21, 1082-1086 (publicación NO 1). Los resultados incluyen la actividad antiinflamatoria de estos diterpenoides. El estudio de otras fracciones permitió identificar ácido mulin 11,13- dien-20- oico. Este compuesto se logró cristalizar en forma adecuada para un análisis cristalográfico y se pudo confirmar la estructura mediante difracción de rayos X. Adicionalmente se aisló un cromeno cuya estructura fue publicada en Acta Crystallographica Section E (2008), E64, 0285 (publicación 2). También se identificó el sesquiterpeno spatulenol en cuya estructura existe un anillo ciclopropano. Es de destacar que en este género existen sesqui, di y triterpenos que tienen este rasgo estructural.

(4)

OH

OH 0 OAc

2.- _{En relación al estudio de nuevas especies del género Azorella en la búsqueda de}

terpenoides se logró el estudio de las siguientes especies:

Azore/la trifurcata recolectada a orillas del lago Panguipulli: produjo del aislamiento de diterpenos

del tipo mulinano (ácido mulinólico, ácido mulin-11,13-dien-20-oico, ácido 17-acetoximulínico) Junto a 5 triterpenos del tipo lanostano. Este es el primer reporte de la presencia de estos triterpenos en el género Azore//a. Estos resultados fueron presentados en el VI Simposio Internacional de Química de Productos Naturales y sus Aplicaciones, realizado en Chillán, (2007) (Congreso NO 1) y enviados para su publicación en Química Nova "Triterpenoids from Azorella

trifurcata (Gaertn.) Pers as acetylcholinesterase inhibitors". Se adjunta carta de recepción

(publicación N° 6).

2 clI R

:1:- (>11

Azore/la fuegueana su extracto de tallos produjo ácido mulin-11,13-dien-20-ojco y ácido

mulinólico y un nuevo compuesto que ha sido denominado como AF-1, que se encuentra en etapa de elucidación estructural.

Azore//a monantha: Una muestra recolectada en las Torres del Paine posee diterpenos del tipo

mulinano (ácido mulínico, ácido mulinólico, ácido mulin 11,13- dien-20- oico).

Azore//a lycopodioides: recolectada en laguna Avutardas (Parque Nacional Villarrica): posee

diterpenos conocidos del tipo mulinano y azorellano.

3.- Transformaciones químicas de diterpenoides del tipo mulinano y azorellano.

A.- MULINANOS: Se realizaron reacciones de hidroxilación, metilación, epoxidación, oxidación alílica, esterificación, acetilación e hidrogenación en los productos naturales siguientes: Y-5, Y-1, Mc-F, Mc-E, Mc-D y en algunos derivados de estos

Metilación. Se metilaron (con CH 2 N 2 ) los siguientes ácidos: Acido mulinólico (Y-1) (1) para

obtener Y-1-Me (2). Acido mulinénico (Mc-D) (3) para obtener Mc-D-Me (4). Acido mulin 11, 13-dien-20-oico (Y-5) (5) para obtener Y-5-Me (6). Acido 17-acetoximulínico (Mc-E) (7) para obtener Mc-E-Me (8). Y-5-11 (9) para obtener Y-5-H-Me (10).

Epoxidación. Se epoxidaron (con MCPBA) los siguientes ácidos: Acido mulinólico (Y-1) (1) para

obtener Y-1-EP (11). Acido mulinénico (Mc-D) (3) para obtener Mc-DO (12). Acido

17-acetoximulínico (Mc-E) (7) para obtener Mc-EO (13). Y-5 (5) se obtuvo mezclas de epóxidos.

Hidrogenación. Se hidrogenaron los siguientes productos y derivados: Acido mulin 11,

13-dien-20-oico (Y-5) (5) para obtener Y-5-1-1 (9). Y-5-Me (6) para obtener Y-5-Me-H (10). Acido 17-acetoximulínico (Mc-E) (7) para obtener Mc-E-H (14). Y-101-1-red (15) para obtener Y-10H-red-H (16).

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Reducción. Se redujo (con L1AIH 4 ) el metiléster de los siguientes derivados: Y-5-Me (6) para obtener Y-501-1 (17). Y-1-Me (2) para obtener Y-10H-red (15) (mulinol).

Apertura de epóxidos. Se realizaron en medio ácido y básico: Y-1-EP (11) en medio básico sin resultado. Y-1-EP (11) en medio ácido se obtuvo el trialcohol Y-1EP-OH (18).

Hidroxilación. Para realizar este tipo de reacción se utilizó la técnica de Sharpless y Os0 4 : Acido mulin 11, 13-dien-20-oico (Y-5) (5) con Sharpless no hubo resultados. Acido mulinólico (Y-1) (1) con Os04 se obtuvo '(-1-OH (18).

Acetilación. Se realizaron con anhídrido acético y piridina: Y-501-1 (17) para obtener Y-50Ac (19), Y-1EPOH (18) para obtener Y-lOAc (20)

Oxidación alílica. Se realizaron con SeO 2 , NBS y Cr0 3 : Acido mulin 11, 13-dien-20-oico ('(-5) (5) con SeO2 para obtener Y-5-01-1-C-16 (21) (Producto en estudio espectroscópico). Acido 17-acetoxymulin 11, 13-dien-20-oico (Mc-F) (22) para obtener Mc-F-Ox (23) (Producto en estudio espectroscópico).

B.- AZORELLANOS: Se realizaron reacciones de hidroxilacián, acetilación, reordenamientos, hidrólisis alcalina, oxidaciones en azorellanol Y-2 (1) y 7-desacetilazorellanol Y-6 (3) y en algunos derivados de estos.

Modificaciones en Y-2 (1): 1) Apertura oxidativa para obtener Y-2Br (2). 2) Hidrólisis alcalina para obtener 7-desacetilazorellanol ('(-6) (3) con MeOH/CaCO 3 . 3) Reordenamiento en medio ácido para obtener Y-2RM (4). 4) Reordenamiento con iones para obtener Y-2RM (4). 5) Deshidratación para obtener Y-2Ex (5).

Modificaciones en Y-2RM (4): 1) Hidroxilación con Os04 para obtener Y-2 RMOH (6). 2) Acetilación para obtener Y-2 RMOAc (7). 3) Hidrólisis alcalina para obtener Y-2 RMH (8). 4) Oxidación de Y-2 RMH (8) con PCC para obtener '(-2 RMCO (9).

Modificaciones en Y-6 (3): 1) Oxidación con PCC para obtener La-6 (10). Oxidación con iones para obtener 60x-1 (9) y 60x-2 (10). Lactonización de 60x-2 (10) para obtener

Y-7 (11).

Estos resultados forman parte de un artículo enviado recientemente a publicación en Planta

Medica (Publicación NO _{8) que incluye la actividad anti-}_{Mycobacterium tuberculosis.}

Adicionalmente se llevaron a cabo algunas biotransformaciones. Una vía alternativa para la funcionalización de diterpenos en sitios poco accesibles químicamente es la hidroxilación con microorganismos. Con este fin se trató el ácido mulinh1,13-dien-20-oico ('(-5) a la acción

oxidativa del hongo Mucus plumbeus. Después de 15 días de incubación y posterior extracción y

purificación se logró identificar dos diterpenos modificados en las posiciones 7 y 7-16. Estos resultados han sido publicados Magnetic Resonance in Chemistry, 2008, 46 (8), 765-768 (publicación N° 3). Previamente los resultados fueron presentados en el VI Simposio Internacional de Química de Productos Naturales y sus Aplicaciones, realizado en Chillán (2007) (Congreso NO 2).

4.- Mediciones de actividad biológica de diterpenoides naturales y productos de transformación.

- Actividad antiinflamatoria. Se evaluó la actividad antiinflamatoria de los diterpenoides

aislados desde el extracto de éter de petróleo de Laretia acaulis: azorellanol,

7-desacetilazoretianol, 13a-Hidroxiazorellano y el 13-epi azore¡ lanol. La actividad de los productos fue medida utilizando el ensayo del gen reportero luciferasa dependiente de NF-KB.

El factor de transcripción NF-KB es uno de los reguladores claves involucrados en la respuesta inmunoinflamatoria. La fosforilación de IKBO es un paso clave en la activación de los complejos NF-kB, el cual esta implicado en la regulación de varias citoquinas que participan en enfermedades inflamatorias tales como artritis reumatoides, asma e inflamación del intestino. Los resultados indican que diterpenoides ensayados, con excepción del 13-epiazorellanol, inhiben tanto la fosforilación como la degradación de IKB, lo que soporta la hipótesis que estos diterpenoides median la actividad anti- NF-kB. Los resultados han sido publicados en Phytotherapy

Research (2007), 21, 1082-1086 (publicación N° 1). "Azorellane diterpenoids from Laretia

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- Actividad antiparasitaria.

15 productos, naturales y sintéticos, fueron utilizados para ensayos antiparasitarios de screening

frente a epimastigotes de Trypanosoma cruz¡ (Cepas CL y G), (ver anexo Act. Antiparasitaria)

Azorellanos Mulinanos Y-2RMCO (9) MCM (24) Y-2RMAC (7) Y-1EP (11) Y-2RMOH (6) Y-40ZR (29) Y-2RM (4) Y-5 (5) Y-2EX (5) Y-5H (9) Y-2 (1) Y-5M (6) Y-6C0 (10) Y-50H (17) Y-50AC (19)

-Epimastigotes cultivados en medio LIT se ajustan a una concentración de 4 x 10 parásitos _/mL.

Según González y col. (1990), 100 mi- de cada cepa fueron colocadas en placas de microtitulación de 96 pocillos. En los pocillos se adicionaron los compuestos disueltos en DM50 al l% en concentraciones 1, 0,5 y 0,25 mM. El control es DM50 al l%. Las placas fueron incubadas por 18 hrs. a 28°C. Cada ensayo fue realizado en triplicado.

Con los compuestos de mejor actividad antiparasitaria se realizaron ensayos de invasión frente a células HeLa para evaluar el efecto de las drogas sobre el mecanismo fundamental de

reproducción del T.cruzi, utilizando tripomastigotes metacíclicos de las cepas CL y G.

Se evalúo la citotoxicidad (C1-50 ) de los compuestos en células HeLa, utilizando para su cálculo el método de análisis probito, descrito por Finney.

Los resultados obtenidos señalan que Y-2 RM (azorellano) frente a la cepa CL y Y-5 OH (mulinano) frente a la cepa G mostraron un efecto tripanosomicida superior al 80 %• (Y-2 RMCO; Y-2 RMAc; Y-2RMOH) y 3 derivados mulinanos (Y-4 OZR; Y-5 Me; Y-5 OAc), mostraron efecto igual o superior a 20% sobre la cepa CL. Y-2 Ex (azorellano) mostró un 60 % de actividad y los compuestos Y-2 RMOH y Y-2 RM un efecto igual o superior a 40 % frente a la cepa G. (Gráficos 1 y 2)

El test de invasión frente a la cepa G muestra que no se observó células invadidas, al usar una concentración 80 mM del compuesto Y-2EX, con una LC 50 calculada según el método probito de Finney en 20,3 mM.(Tabla 1)

Con el Y-2111, los ensayos de invasión de la cepa CL muestran un alto número de células invadidas por los tripomastigotes previamente tratados con el compuesto, calculándose una LC 50 de 33,7 mM. (Tabla 2)

Los resultados de los ensayos de citotoxicidad frente a células HeLa de los dos compuestos con mejor actividad antiparasitaria, muestran para el compuesto V-2EX una LC 50 de 1,89 mM. (Tabla 3).

De la serie de compuestos de síntesis evaluados como anti-T-cruzi, son promisorios los resultados

obtenidos con Y-2EX, por su interesante actividad inhibitoria de la capacidad de invasión de los tripomastigotes metacíclicos con una muy baja LC50.

Actividad espermicida:

En relación a los estudios de actividad espermicida de los diterpenoides del tipo mulinano y azorellano, y considerando que el ácido 11,13-dien-mulin-20-oico (Y-1 o AM) inhibe la actividad

espermática sin afectar la motilidad se iniciaron los estudios para determinar su efecto _{in vivo}

sobre la espermatogénesis de ratón. Los resultados fueron presentados en el "VII Congreso Internacional de la Sociedad de Andrología y Gametología de Chile", realizado en Santiago (enero-2008. Se adjunta el resumen de la ponencia). Este estudio preliminar indica que la administración de Y-1 por vía oral en un tratamiento crónico no ejerce efecto tóxico de tipo sistémico, no causa efectos deletéreos sobre la línea geminal masculina durante las etapas de espermatogénesis estudiadas y que hay efectos de disminución del recuento espermático dependiente de la dosis-dependiente.

Adicionalmente, se evaluó la actividad anti-Mycobacterium tuberculosis de 5 extractos

hexánicos especies de Azore/la y de 22 diterpenoides naturales y sintéticos del tipo mulinano y

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Los resultados han sido enviados a publicación en Planta Medica "Antituberculosis Activity of Natural and Semisynthetic Azorellane and Mulinane Diterpenoids" (publicación N° 8 ). Los compuestos más activos correspondieron a dos diterpenoides naturales del tipo azorellano, azorellanol (1) y el 7-3—acetoxi-13-a—hidroxiazorellano (12), junto a los productos semisintéticos M tipo mulinano ácido 13-a—hidroxi-mulin-11,13-dien-20-oico (2) y el metil éster del ácido mulinénico (4) En la tabla siguiente se muestran algunos resultados:

No. Metabolitos naturales sem ¡sintéticos MXC (tg/mL)

M. tuberculosis

H37Rv

M. tuberculosis

CIBIN 99 Azorellanos AY4 (12) 12.5 25 Y-2 (1) 12.5 12.5 Y-2-RM (4) 100 100 Y-2-RMOH (16) 25 25 AZM-9 (13) 12.5 12.5 Y-6 (3) 25 25 AY-2 (10) 100 50 AY-2-RM (9) 12.5 12.5 EPI Y-2 (14) - 100 - 50 - Yaretano 1 AZM-5 (28) 100 - 25 - Mulinanos Y-1 (1) 100 50 Y-1-Me (2) 12.5 12.5 Y-5 (5) 25 12.5 Y-5H (9) 100 50 Y-5-Me (6) - 50 25 AZC-1(25) 100 50 Y-4(26) 50 25 Mc-E (7) 100 50 Mc-E-Me (8) 100 50 Y-lO (27) 1 25 1 12.5 Mc-D (3) 100 100 Mc-D-Me (4) 12.5 12.5

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DESTAQUE OTROS LOGROS DEL PROYECTO TALES COMO: - Estadías de investigación.

- Formación de recursos humanos exceptuando tesistas ya informados. - Actividades de difusión y/o extensión en la temática del proyecto.

- Cualquier otro logro no contemplado en los ítem anteriores y que Ud. quiera destacar. La extensión máxima de esta sección es de 1 página (letra tamaño 10, Anal o Verdana)

Uno de los logros importantes de este proyecto corresponde a la participación del investigador responsable en el proyecto Alfa de la comunidad económica europea, EULADIV, que se centra en intercambio de investigadores jóvenes. Participaron equipos de investigación de Suecia, Italia, España, Francia, Mexico, Chile, etc . bajo el alero de este proyecto en el año 2007 se completo la estadía de investigación de Alejandro Ardiles Rivera en la U. de Cadiz , en el laboratorio del Dr. Isidro Collado.

En este mismo proyecto se recibió, en una estadía postdoctoral, a la Dra. Gloria María Molina-Salinas del Grupo de Química Orgánica, Unidad de Biotecnología del Centro de Investigación Científica de Yucatán, Mérida, Yucatán, México. Esta interacción es resultado del proyecto Alfa en el cual participa el jefe del grupo Dr. Luis Manuel Peña-Rodriguez.

- . Por otra parte la estadía de investigación del licenciado Ardiles contribuyo a su aceptación en el programa de doctorado en química en la Universidad de la Laguna y el financiamiento a través de una beca CONICYT año 2007.

- Es relevante destacar que las dos tesis correspondientes a Susana Reyes y Patricia Cejas han formado parte de los resultados de dos presentaciones en el VI Simposio Internacional de Química de Productos Naturales y sus A p licaciones, Chillan, Chile.

El desarrollo del proyecto ha permitido establecer una relación efectiva con otros investigadores como son los resultados obtenidos en la medición de la actividad anti acetilcolinesterasa de los triterpenoides del tipo lanostano y cicloartanos aislados desde

Azore/la trifurcata. En este contexto los compuestos mostraron moderada actividad ( ver

artículo enviado a publicación "Triterpenoids from Azore/la trifurcata (Gaertn.) Pers as

acetylcholinesterase inhibitors"

Dada la importancia biológica que tienen los diterpenoides de la familia Apiaceae se ha hecho conveniente preparar diversos derivados por métodos sintéticos químicos, sin embargo, existe posiciones en los respectivos esqueletos que no están activados. Con la finalidad de ampliar la gama de derivados se ha realizado exitosamente la funcionalizacion de un diterpeno con un microorganismo. Estos resultados abren una excelente vía de preparar nuevos derivados, es destacable que es la primera biotransformación de terpenos de esta familia de plantas. Los esfuerzos futuros estarán orientado a optimizar los rendimientos y probar la biotransformación de otros diterpenos.

(9)

RESUMEN

QUIMICA Y BIOACTIVIDAD DE TERPENOIDES AISLADOS DE ESPECIES DE APIACEAE DE CHILE

Un grupo de especies botánicas que crecen en la región altoandina de Chile y que representan a

los géneros Mulinum, Laretia y Azore/la pertenecientes a la familia de las Apiaceae (Tribu Mulinae)

han sido motivo de nuestro interés, por la homogeneidad y especificidad desde el punto de vista químico de sus extractos de éter de petróleo, la potencialidad de las actividades biológicas detectadas y por sus usos en la medicina folclórica. Los resultados obtenidos en estudios de

especies de los géneros Mulinum, Laretia y Azore//a, principalmente chilenas, han demostrado

que son una fuente exclusiva de diterpenoides del tipo mulinano, azorellano, yaretano y madreporano.

Mulir,ano Azorellano Varetono Madreporano

Las especies botánicas que han sido objeto de estudio corresponden a: M. crassifolium, Azore/la

compacta, A. madrepórica y Laretia acau/is. Como fruto de nuestras investigaciones en especies

de la familia Apiaceae se han caracterizado 30 diterpenoides nuevos, de los géneros Azore//a,

Mu/inum y Laretia. Igualmente ha quedado demostrado que estos compuestos poseen rasgos estructurales sin precedentes en fuentes naturales o sintéticas. Estas características únicas nos ha incentivaron realizar una prospección de las actividades biológicas que estas estructuras pudieran presentar, tales como actividad antiparasitaria, espermicida, antihiperglicémica, antiinflamatoria y analgésica. En este proyecto' QUIMICA Y BIOACTIVIDAD DE TERPENOIDES AISLADOS DE ESPECIES DE APIACEAE DE CHILE", desarrollado en tres años se aislaron varios diterpenos

ya conocidos y ocho nuevos del tipo mulinano y azorellano. Las nuevas especies de _Azore//as

estudiadas fueron: A. cryptantha, A. /ycopdioides, A. spinosa, A. trifolio/ata, A. trifurcata, A,

monantha. Destacable es el caso de Azore//a trifurcada, cuyo extracto de éter de petróleo

produjo el aislamiento de diterpenos del tipo mulinano junto a 5 triterpenos del tipo lanostano.

Este es el primer reporte de la presencia de estos triterpenos en el género Azore//a.

También logro realsiar cantidades significativas de algunos diterpenos como el ácido mulinólico, ácido mulin-11,13-dien-20-oico, ácido mulinénico azorellanol, y 7-desacetilazorellanol que fueron productos de partida para la obtención de 14 azorellanos y 20 mulinanos, mediante reacciones de metilación, acetilación, epoxidación, reducción, hidroxilación y oxidación, que significaron junto a los nuevos productos aislados disponer de una bateria de diterpenoides para medir su actividad

biológica. En este sentido se realizaron mediciones de la actividad anti-Mycobacterfum

tuberculosis, anti-Trypanosoma cruz¡, antiiinflamatoria y espermicida.

Se evaluó la actividad antiinflamatoria de algunos diterpenoides del tipo azorellano utilizando el ensayo del gen reportero luciferasa dependiente de NF-KB. Los resultados indican que azorellanol, 7-desacetilazorellanol, 13a-hidroxiazorellano inhiben tanto la fosforilación como la degradación de IKB, lo que soporta la hipótesis que estos diterpenoides median la actividad anti- NF-kB.

De la serie de 15 compuestos de síntesis evaluados como anti-T-cruzi, son promisorios los

resultados obtenidos con el 7-acetoxi-13,17-dien-azorellano, por su interesante actividad inhibitoria de la capacidad de invasión de los trípomastigotes metacíclicos con una muy baja LC50. En relación a los estudios de actividad espermicida de los diterpenoides del tipo mulinano y azorellano, y considerando que el ácido 11,13-dien-mulin-20-oico (Y-1 o AM) inhibe la actividad

espermática sin afectar la motilidad. Se iniciaron los estudios para determinar su efecto in vivo

sobre la espermatogénesis de ratón. Este estudio preliminar indica que la administración por vía oral en un tratamiento crónico no ejerce efecto tóxico de tipo sistémico, no causa efectos deletéreos sobre la línea geminal masculina durante las etapas de esperma togénesis estudiadas y que hay efectos de disminución del recuento espermático dependiente de la dosis-dependiente.

Se evaluó la actividad anti-Mycobacterium tuberculosis _{de 5 extractos hexánicos de especies}

de Azore/la _{y de 22 diterpenoides naturales y sintéticos del tipo mulinano y azorellano. Se utilizó}

las cepas H37Rv y CIBIN 99 de Mycobacterium tuberculosis. Los compuestos más activos

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7-l3—acetoxi-13-a—hídroxiazorellano, junto a los productos semisintéticos del tipo mulinano ácido 13-a---hidroxi-mulin-11,13-dien-20-oico y el metil éster del ácido mulinénico.

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PRODUCTOS ARTÍCULOS

Para trabajos en Prensa! Aceptados/Enviados adjunte copia de carta de aceptación o de recepción.

Autor (a)(eslas) : Borquez, J.; Loyola, LA.; Morales G.;San-Martín A.; Roldan R.; Marquez N.: Muñoz E.

Nombre Completo de la Revista : Phytotherapy Researcli

Título (Idioma original) : Azorellane diterpenoids froni Laretia acaulis inhihit nuclear factor-kappa activity

Indexación : ISI ISSN: 0951-418X Año: 2007 Vol.: 21 II Páginas: 1082-1086

Estado (le la publicación a la fecha : Publicada Otras Fuentes de financiamiento, si las hay

UF alfa Project EULADIV GRANT NUMBER am17b7-3 11/97/0666/11-0375-FA

Envía documento en papel: no

Archivo Asociado al articulo: NFKB_activity.pdf

itip Vesahl coni y i ci/ililitrine zicdemio iIid\ php/invcsigador/f4 anicul s/d ctirga/4n25'89/I00Y39f67

Autor (a)(es/as): Brito, 1.: Bórquez, J.; Loyola, L.A.; López-Rodríguez M.

Nombre Completo de la Revista : Acta Crystallographica Section E

Título (Idioma original) : 5-Hydroxi-7-methoxv-41 l-chromen-4-one

Indexación : ¡SI

ISSN : 1600-5368

Año: 2008

Vol.: E64

Páginas : o285

Estado de la publicación a la fecha : Publicada Otras Fuentes de financiamiento, si las hay

Envía documento en papel : no

Archivo Asociado al articulo : cromona_L.acaulis.pdf

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3

Autor (»)(es/as) : Areche, C.; Loyola, LA.; Borquez, J.; Rovirosa. J.: San-Martin, A.

Nombre Completo de la Revista : Magnetic Resonance in Chemistry

Título (Idioma original) : Microbial transformation of the diterpene mulin-li. 13-dien-20-oic acid h Mucor

(12)

Indexación : [SI ISSN : 0749-1581 Año: 2008 Vol.: 46 8 Páginas: 765-768

Estado de la publicación a la fecha : Publicada Otras Fuentes de financiamiento, si las hay Proyecto Anillo ACT-38

Archivo Asociado al articulo: biotransformaciortes.pdf

hit !\IIL\ 1 çur1Ic\l dYiIunne acaderinicoíjndc\ php'inesligadorI4 articuI s/deuIai12S'?119/! 0339193

4

Autor (a)(es/as) : Brito; 1.; Borquez, J.; Loyola, L—A.; Cardenas, A.: Lopez-Rodriguez, M.

Título (Idioma original) : Methyl

5a-acetoxymethyl-3-isopropvl-8-rnethyl- 1 .2,3,3a.4,5,5a.6.7, 10. lOa, 1 Obdodecahydro-7. lO-endo-epidioxycy Iohepta[eJi ndene-3a-carhox y late

Indexación : ISI ISSN : 1600-5368 Año: 2008 Vol.: E64 N°: - Páginas:

o]209-Estado de la publicación a la fecha : Publicada Otras Fuentes de financiamiento, si las hay

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hit p e' l 1 cuii i d iilor he iei nhlci h1(Ie\ plipilil\ eti guiwl4 irtIehhl sdc iiil12 SX')/1001 7u

5

Autor (a)(es/as) : Brito; 1.; Borquez, J.; Loyola, LA.: Cardenas, A.; Lopez-Rodriguez, M.

Título (Idioma original): _{(3S,3aS,5aS,7S,8S, lOaS, lObR)-7.8-Dihydroxy-3-isopropyl-5a,8-dirnethyl2,3,4,5,5a,6,7.8}

lOa, l Ob-decahydrocyclohepta[e) indene-3a( ! H )-carhoxy lic

Indexación : lSl

ISSN: 1600-5368

Año: 2008

Vol.: E64

Páginas: o1348-o1349

Estado de la publicación a la fecha : Publicada Otras Fuentes de financiamiento, si las hay

(13)

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lit Ip a cvi orn c 1 C]/] ti trrnc a iden c nidc\ php/invcsl gadtirli4 - lrlIc II /'car g í4.S?hhW 1 O(l) )P 1

N°: 6

Autor (a)(eslas) : _{Areche, C.; Astudillo, L.; Gutiérrez, M. Cejas, P.} _{Thomas, P.} _{Loyola, E.. A.}

Borquez. J. and San-Martín A. Nombre Completo de la Revista : Química Nova

Título (Idioma original) : Triterpenoids from Azorella trifurcata (Gaertn.) Pers as acetylcholinesterase inhihitors.

Indexación : ISI ISSIN : 0100-4042 Año: 2008 Vol.: N°: Páginas: 17

Estado (le la publicación a la fecha : Enviada Otras Fuentes de financiamiento, si las hay

Envía documento en papel : si

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IlIIp iIc 1 1 vi uilornic lvadcnlk oíuid phihlJiil\ tlna(IUr/14 ar1itiIin./vk, t1S 1 III J I1 7

7

Autor (a)(es/as) : _{Bórquea, J.: Molina-Salinas, (i.: Loyola. L.A: San-Martin .A.: Peña-Rodríguez. L.M.:}

Said-Fernandez. S.

Nombre Completo de la Revista : Journal ofthe Brazilian Chemical Society

Título (Idioma original) : A new a.zorellane diterpenoid from a.zorella madreporica

Indexación : ISI

ISSN: Año: Vol.: Páginas:

Estado de la publicación a la fecha : Enviada Otras Fuentes de financiamiento, si las hay

EtJLADIV Alfa Project and FOMIX-Yucatán Project No. 66262

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(14)

8

Autor (a)(eslas) : _{Molina-Salinas, G.M.; Bórquez, J.; Ardiles, A.; Said-Fernández. S.;} _{loyola. LA.:}

San-Martín, A.; González-Collado, 1.; Peña-Rodríguez, L.M.

Nombre Completo de la Revista : Planta Medica

Título (Idioma original) : Antituberculosis Activity of Natural and Semisynthetic Azorellane and Mulinane

Indexación : lSl

ISSN : 00320943

Año: Vol: Páginas

Estado de la publicación a la fecha : Enviada Otras Fuentes de financiamiento, si las hay

EULADIV Alfa Project and FOMIX-Yucatán Project No. 66262

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OTRAS PUBLICACIONES

Vm in/orm ación ingresada.

CONGRESOS

Autor (aXes/as) Título (Idioma original) Nombre del Congreso: País

Ciudad: Fecha Inicio Fecha Término: Nombre Publicación

Thomas, P., Areche, C., _{San-Martín, A., Cejas, P., Astudillo, L., Gutierrez, M. y Lo y ola. 1..} Triterpenoids from Azorella trifurcata (gaertn.) pers as acetylcholinesterase inhihitors. VI Simposio Internacional de Química de Productos Naturales y sus Aplicaciones, Chile. CHILE Chillan 24/10/2007 26/10/2007 Año: Vol.: Páginas

Archivo Asociado: TRITERPENOS_A San _Martín..pdf

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Autor (a)(es/as) Areche, C., Navarrete, A., San-Martín, A., Llanos, O.. Loyola. L. y Reyes. S.

(15)

Nombre del Congreso : _{VI Simposio Internacional de Química de Productos Naturales y sus Aplicaciones. ('hile} País: CHILE Ciudad : Chillan Fecha Inicio : 24/10/2007 Fecha Término: 26/10/2007 Nombre Publicación Año: Vol.: Páginas

Archivo Asociado : bioyareta.pdf

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N°: 3

Autor (a)(es/as) : Ponce. C Loyola, L Bustos-Obregón. E.

Título (Idioma original): Efecto in vivo del ácido mulin-ll,13-dien-20-oico sobre la espermatogénesis de ratón: un

estudio preliminar

Nombre del Congreso: VII Congreso Internacional De La Sociedad de Andrologia y Gametología de ('hile

País: CHILE

Ciudad: Santiago

Fecha Inicio : 17/01/2008

Fecha Término: 18/01/2008

Nombre Publicación : International Journal of Morphology

Año : 2008

Vol.: 26

Páginas : 227

Archivo Asociado : Pres_espermatogenesis.pdf

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4

Autor (a)(es/as) : Aurelio San Martin, Jorge Bórquez y Alberto Loyola

Título (Idioma original) : Mesa Redonda sobre Química, actividad biológica y propagación de la llareta.

Nombre del Congreso : Primer simposio internacional sobre materias primas para la industria de las plantas

medicinales: puntos críticos y rol de las universidades

País : CHILE

Ciudad: Los Angeles

Fecha Inicio : 14/11/2006

Fecha Término : 15111/2006

Nombre Publicación Año:

(16)

Páginas

Archivo Asociado: losangeles.pdf

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5

Autor (a)(es/as) : Aurelio San Martin

Título (Idioma original) : _{Química, actividad biológica y propagación de la llareta. Panel}

Nombre del Congreso : Plantas aromáticas y medicinales de Arica-parinacota: asociatividad y encadenamiento

productivo para hacer una industria sustentable

País : CHILE Ciudad : Anca 1/ Fecha Inicio : 15/01/2007 Fecha Término : 19/01/2007 Nombre Publicación Año Vol.: Páginas

Archivo Asociado : arica.pdf

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6

Autor (a)(es/as) : _{Neira, 1.; Bórquez, J.: Gonzalez, J.; Araya, J.: Loyola, L.A. Sagua. FI.}

Título (Idioma original) : Actividad Anti-Tiypanosoma cruz¡ de compuestos de síntesis

Nombre del Congreso : 1 Congreso chileno de Parasitología. XI Jornadas Anuales de Parasitología

País: CHILE

Ciudad Antofagasta

Fecha Inicio: 10/0 1/2008

Nombre Publicación : Libro de Resúmenes

Año: Vol.: Páginas

Archivo Asociado: ('ong_ly2.pdf

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TESIS/MEMORIAS N'

(17)

Título de Tesis : TERPENOIDES DE LA FAMILIA APIACEAE Nombre y Apellidos del(de la) Alumno(a): PATRICIA CEJAS RLJF3ILAR

Nombre y Apellidos del(de la) Tutor(a): AURELIO SAN-MARTIN B.

Título Grado : Pregrado

Institución : Universidad de Chile

País: CHILE

Ciudad: SANTIAGO

Estado (le Tesis: En Ejecución

Fecha Inicio: 16/07/2007

Fecha Término : 31/07/2009

Archivo Asociado: Resurnenpaty.pdf

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2

Título de Tesis : QUIMICA Y BLOACTIVIDAD DE TERPENOIDES AISLADOS DF; ESPECIES

DE APIACEAE DE CHILE

Nombre y Apellidos del(de la) Alumno(a) : SUSANA RAQUEL REYES OSSES

Nombre y Apellidos del(de la) Tutor(a): AURELIO SAN MARTIN

Título Grado: Pregrado

Institución : UNIVERSIDAD DE CHILE

País: CHILE

Ciudad: SANTIAGO

Estado de Tesis : En Ejecución

Fecha Inicio: 29/09/2006

Fecha Término : 20/07/2009

Archivo Asociado: ResumenSusana.pdf

httpI/e aIc 1.conle 1 cl/InIormc acadcnlnco/Inde\ php/invesligadon/t4 tesis nlemorIasdescarga/4tn2595 ti/ 11)611

3

Título (le Tesis : Evaluación de la Actividad Antiparasitaria (le Derivados de Síntesis

Nombre y Apellidos del(de la) Alumno(a) : Eduardo Avila Araya: Oscar Iluanca Marnani Nombre y Apellidos del(de la) Tutor(a) : Hernan Sagua F. Ivan Neira C.

Título Grado: Pregrado

Institución : Universidad de Antofagasta

País: CHILE

Ciudad : Antofagasta

Estado de Tesis: En Ejecución

Fecha Inicio : 01/04/2008

Archivo Asociado: Tesis PA RASITOLOG 1 A.pdf

111111 en ji,', ciniji,', 1. /IiIlnI me icidcniiinnn ITIdL\ _{pinp'isesigaJnn'l4_Lesi_iuernnrnasidescargal(2')snl l( '3Y/I 4')}

(18)

Título de Tesis : _{Transformaciones químicas y microbiologicasdel acido mulin- 11.1 3-dien-20-oico:} Estudio de sus actividades biológicas.

Nombre y Apellidos del(de la) Alumno(a) : José Valenzuela

Nombre y Apellidos del(de la) Tutor(a) : Aurelio San Martín

Título Grado : Pregrado

Institución : Universidad Andres Bello

País: CHILE

Ciudad: Santiago

Estado de Tesis : En Ejecución

Fecha Inicio 01/09/2008

Archivo Asociado: Carta l.pdf

¡ci ¡fk\ 1 coiircvt ci III rrrrr.icrtdcrirrco/indc php/rnicsflgador/14 tesis_rncInorladcargu;425isci 11(,1133u);i ₁

ANEXOS

Archivo Asociado: _{Mol naSal mas etal cover _letter_ Pmedica.pdf}

Irltp ¡L'\ rI it coIucvt ciririlrrrrirc IiiJciIo'Irrdc\ php/investigador/ii rrre\ris/dcscirrc.Lt1tr/I (ir)( F3(ri

2

Archivo Asociado: _{ESTRUCTURAS DE PRODUCTOS NATURALES Y DERIVADOS ..pdf}

lit([)cvaici crrrrr: 1 iir(rrurnc lcdcrnrco!lnde\ php/investigador/fS ane\osIdescargaJ46298)l l)(O3)/242 1

N°: 3

Archivo Asociado : 1 nforme_act._anti parasitaria. pdf

http/revalci cori ii ci rrr lurrue rc,tdcmico/uldc\ php/invesl igador/15 111rc\ s/descarga/(i2 usui 1 )(i( 3i)!244

4

Archivo Asociado: ACEPT._NOVA.pdf

ir)) l i c) lI(:)) C(rilo it Cl/IrlIrrIul' acrdcmrcolnJe\ php/triicsiriurdu:lS ;ll1c\us/csc/lr)r 42 u5) )(1( ))/27ou

5

Archivo Asociado: ACEPT. JBCS.pdf